KR0161747B1 - 지방세포 분화 억제 펩타이드 및 그를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제 - Google Patents

지방세포 분화 억제 펩타이드 및 그를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제

Info

Publication number
KR0161747B1
KR0161747B1 KR1019950704114A KR19950704114A KR0161747B1 KR 0161747 B1 KR0161747 B1 KR 0161747B1 KR 1019950704114 A KR1019950704114 A KR 1019950704114A KR 19950704114 A KR19950704114 A KR 19950704114A KR 0161747 B1 KR0161747 B1 KR 0161747B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
peptide
adipocyte differentiation
differentiation
inhibiting
val
Prior art date
Application number
KR1019950704114A
Other languages
English (en)
Other versions
KR960701089A (ko
Inventor
교이치 가가와
지주코 후쿠하마
히사코 마쓰타카
도루 이구치
도유 나카무라
마사히로 누마타
시케아키 와타나베
Original Assignee
도유 나카무라
이토햄주식회사
겐타로 오자키
한큐-교에이 붓산주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 도유 나카무라, 이토햄주식회사, 겐타로 오자키, 한큐-교에이 붓산주식회사 filed Critical 도유 나카무라
Publication of KR960701089A publication Critical patent/KR960701089A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR0161747B1 publication Critical patent/KR0161747B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G1/00—Cocoa; Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/30—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/32—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G1/44—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing peptides or proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/152—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations containing additives
    • A23C9/1526—Amino acids; Peptides; Protein hydrolysates; Nucleic acids; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G1/00—Cocoa; Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/30—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/32—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G1/42—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins
    • A23G1/423—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins containing microorganisms, enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/142—Amino acids; Derivatives thereof
    • A23K20/147—Polymeric derivatives, e.g. peptides or proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
    • Y02A40/818—Alternative feeds for fish, e.g. in aquacultures

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)

Abstract

본 발명은 Val-Tyr-Pro 또는 Val-Thr-Leu의 아미노산 서열을 가지고 있으며 지방세포 분화 억제기능을 지니는 펩타이드, 전기 펩타이드 또는 이를 적어도 0.1중량% 포함한 단백질가수분해물을 유효성분으로 함유하는 지방세포 분화 억제제, 특이건강식품 및 사료를 제공한다. 본 발명을 이용하면, 인간과 동물의 비만 및 그로 인한 고혈압과 동맥경화 등의 심혈관 질환을 예방하고 치료할 수 있다. 또한, 본 발명은 가축 및 양식어류의 육질을 향상시킬 수 있다.

Description

[발명의 명칭]
지방세포 분화 억제 펩타이드 및 그를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제
[기술분야]
본 발명은 신규한 지방세포(adipocyte)분화 억제 펩타이드, 그를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제, 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지닌 특이건강식품(생리적 기능성 식품) 및 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지닌 동물용 사료에 관한 것이다. 아울러, 본 발명은 전기 지방세포 분화 억제 펩타이드를 포함한 단백질가수분해물(proteolysate)을 함유하고 있으며, 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지닌 특이건강식품(생리적 기능성 식품)및 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지닌 동물용 사료에 관한 것이다, 본 발명을 이용하면, 인간이나 동물의 비만 및 비만으로 인한 고혈압(hypertension)과 동맥경화(arteriosclerosis)등의 심혈관 질환(cardiovascular diseases)을 예방하고 치료할 수 있다. 또한, 본 발명은 가축 및 양식어류의 육질을 향상시킬 수 있다.
[종래기술]
지방 및 탄수화물의 과다섭취는 비만과 지질과잉증(hyperlipidemia)을 유발하며, 종국에는 고혈압 및 동맥경화증을 발병시킨다. 따라서, 지방과 탄수화물의 흡수를 저해하고, 지방의 축적을 감소시키려는 욕구가 사람들의 지대한 관심을 불러일으키고 있다.
영양과잉 섭취 유아는 지방세포가 증가되어 비만이 될 수 있는 잠재성을 지니고 있게 된다. 이러한 이유때문에, 특히 유아의 지방세포 수 증가 억제는 어린이 및 성인이 되었을 때의 비만 및 그의 합병증인 심혈관 질환을 직접적으로 예방한다고 보고하고 있다.
비만과 지질과잉증을 치료하기 위하여, 식사량 조절, 다이어트 식품(예를 들면, 식이섬유(fibers))의 섭취 및 심지어는 여러 약제(medicine)의 투여가 성행하고 있다. 현제 가장 많이 사용돠고 있는 약제로는 혈액내의 지단백질(lipoprotein)리파제 활성을 증가시키는 덱스트란 설페이트, 콜레스테롤 등의 지질흡수를 억제하는 니코몰(Nicomol)및 지질대사를 증진시키는 클로피브레이트(Clofibrate)와 프라바스타틴(Pravastatin)이 있다.
그러나, 식사량의 조절은 매우 고통스러운 방법이며, 전기 약제의 투여는 부작용을 나타내고 있다.
가축과 양식어류의 성장을 촉진시키려는 목적으로 최근에는 영양이 강화된 사료(enriched feed)를 이들에게 사용하고 있는데, 그 결과 가축과 양식어류의 지방 함유량이 매우 높게 되었다. 다라서, 영양강화 사료의 대두는 가축과 양식어류에게 과다 지방을 섭취케하였고, 육질의 풍미를 하락시켜 소비자의 욕구를 만족시키지 못하게 되었다.
최근, 본 발명의 발명자 중 1인을 포함한 연구자들에 의해 개발된 올리고펩타이드 함유물질이 특허출원되었다(참조: W089/06970). 이와 유사한 기술은 JP-A-02-154,693에 기술되어 있다.
상기 특허 공개문헌에서는 올리고펩타이드가 지질대사를 증진시키는데 유효하다고 보고하고 있다.
상기 특허문헌에 개시된 올리고펩타이드 함유물질은 단백질가수분해물의 혼합물이다. 전기 물질의 유효성분인 펩타이드에 대한 아미노산 서열은 아직까지 입증되지 않고 있다.
이와 같은 사실은 펩타이드 함유물질의 순도가 너무 낮아 약제로서 사용될 수 없음을 암시하고 있다, 전기 물질이 식품에 포함되었을때, 식품에 내재하고 있는 다른 펩타이드와 분리되어 쉽게 정량할 수 없기 때문에, 전기 물질은 완전한 정성제어자(quality control)가 되지 못한다.
이에, 전기 펩타이드 함유물질의 유효성분인 펩타이드를 확인하는작업이 필요하게 되었다.
본 발명은 전기 유효성분인 펩타이드를 분리하여, 그의 아미노산 서열을 분석하며, 그를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제 및 특정 단백질로 부터 수득한 올리고펩타이드 함유물질을 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제를 제공한다.
[본 발명의 상세한 설명]
본 발명자들을 전기 과제를 해결하고자 예의노력한 결과, 하기와 같은 발명을 완성하게 되었다.
구체적으로, 본 발명은 다음과 같은 목적을 필수적으로 충적시킨다.
(1) Val-Tyr-Pro 또는 Val-Thr-Leu이 아미노산 서열을 가지면서 지방세포의 분화를 억제할 수 있는 펩타이드.
(2) 상기 (1)의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화억제제.
(3) 상기 (1)의 지방세포 분화 억제 펩타이드를 유효성분으로 포함하고, 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지닌 특이건강식품.
(4) 상기 (1)의 지방세포 분화 억제 펩타이드를 포함하고, 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지닌 사료.
(5) 상기 (1)의 지방세포 분화 억제 펩타이드를 적어도 0.1중량% 포함한 단백질가수분해물을 유효성분으로 함유하는 특이건강식품.
(6) 상기 (1)의 지방세포 분화 억제 펩타이드를 적어도 0.1중량%포함한 단백질가수분해물을 함유하는 사료.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다.
본 발명의 펩타이드 즉, Val-Tyr-Pro 및 Val-Thr-Leu을 자연계에 존재하는 단백질로 부터 정제된 형태로 분리할 수 있다. 또한 이들 펩타이드는 공지된 방법을 이용하여 화학합성할 수 있다. 본 발명의 펩타이드는 상기 아미노산 서열에 대응하는 염기서열을 포함하도록 올리고뉴클레오티드를 제조하고, 이를 적당한 발현벡터에 삽입한 다음, 적당한 숙주세포에서 전기 펩타이드의 발현을 유도함으로써 제조될 수 도 있다.
A. 자연계에 존재하는 단백질로 부터 정제된 형태의 전기 펩타이드를 분리하는 방법은 다음과 같다.
원료가 되는 단백질은 어류 단백질, 어분말(fish flour)과 글로빈등의 동물성 단백질 및 밀 글루텐과 소이빈 카세인 등의 식물성 단백질이다.
전기 단백질 중에서 헤모글로빈 및 미오그로빈등의 글로빈 단백질이 지방세포의 분화를 억제하는 효과가 큰 것으로 입증되었다.
전기 글로빈 단백질은 여러종류의 동물로 부터 얻을 수 있는데, 소, 돼지, 양, 사람, 말등의 혈액으로 부터 광범위하게 얻을 수 있다.
상기에서 언급한 단백질은 국제특허문헌 WO89/06970에 개시된 방법으로 가수분해시킨다, 이 문헌에서 효과적으로 사용된 가수분해효소는 산성 단백질분해효소, 중성 단백질분해효소 및 알카리성 단백질분해효소이며, 이들은 단독으로 혹은 혼합된 형태로 사용될 수 있다.
글로빈 단백질의 가수분해 조건은 다음과 같다.
글로빈 단백질 함유물질을 고체상태로 5 내지 30 중량%되도록 물에 현탁시키고, 산이나 알카리로 단백질 가수분해효소의 활성에 최적인 pH가 되도록 조정한 다음, 한꺼번에 혹은 점차적으로 단백질 가수분해효소를 첨가하여, 20 내지 70℃에서 3 내지 48시간 가열한다. 그런 다음, 바로 건조시키거나, 카복시메틸 셀룰로스 또는 덱스트린 등의 증량제(extender)를 적당량 첨가하고 고체화될 때까지 건조시켜서, 지방세포의 분화를 억제하는 효과가 있는 단백질가수분해물(이하, 본 발명의 가수분해물이라 함)을 수득한다.
본 발명의 가수분해물은 전술한 본 발명의 펩타이드 즉,Val-Tyr-Pro 및/또는 Val-Thr-Leu을 적어도 0.1중량% 포함한다.
상기에서 효소로 처리된 본 발명의 가수분해물은 당업계에서 공지된 방법으로 정제한다. 구체적으로, 이온교환수지, 한외여과(ultrafiltration)및 역상 크로마토그래피 등의 방법을 적절히 혼용하여 원하는 펩타이드만을 순수하게 분리한다.
상기의 분리방법은 이온교환수지 또는 한외여과를 항상 필수적으로 이용할 필요는 없으나, 분리 및 정제도의 증가측면에서 전기 이온교환수지 또는 한외여과를 이용한 방법은 유용하게 사용할 수 있다.
분리 및 정제는 산성 상태의 역상 크로마토그래피와 중성 상태의 역상 크로마토그래피를 혼용함으로써 이루어진다. 각 분획의 단백질 함량은 당업계에서 공지된 닌히드린(ninhydrin)방법 등으로 결정한다.
상기에서 분리한 펩타이드의 아미노산 서열을 공지된 방법으로 결정하여, 본 발명의 펩타이드 즉 Val-Tyr-Pro 및 Val-Thr-Leu의 존재를 확인한다.
분획에 함유되어 있는 펩타이드는 본 발명의 지방(fat)분화 억제제의 유효성분으로 사용될 수 있다. 또한, 전기 펩타이드는 본 발명의 지방세포 분화 억제제의 유효성분으로 직접 사용될 수 있다.
본 발명의 펩타이드는 공지된 펩타이드 합성법을 이용하여 화학적으로 합성된다. 예를 들면, 아자이드(azide)를 이용한 방법, 산 염화물(acidchloride)을 이용한 방법, 산 무수물(acid anhydride)을 이용한 방법, 혼합된 산 무수물(mixed acid anhydride)을 이용한 방법, DCC를 이용한 방법, 활성 에스테르(activated ester)를 이용한 방법, 카보디이미다졸(carbodiimidazole)을 이용한 방법, 산화환원 방법(redox method) 및 DCC 첨가물(HOMB, HOBt, HOSu)을 이용한 방법(참조:Schreder Luhke, The peptide, Vol. 1(1966), Academic Press, New York, USA; Izumitani et al., Synthesis of Peptides. 1975, Maruzen Co., Ltd.)등을 이용한다.
상기 펩타이드 합성법은 고체상 또는 액체상 합성법을 포함한다.
상기 펩타이드 합성시, 곁사슬(side-chain functional group)이 있는 아미노산, 예를 들면 타이로신 및 트레오닌은 기능기가 보호되는 것이 바람직하다. 이러한 보호를 위하여, 공지된 보호기 에를 들면, 벤질옥시카보닐기(Cbz-), t-부톡시카보닐기(Boc-)및 벤질기(Bz-)를 사용한다.
본 발명의 펩타이드 합성과정에서, 공지된 방법을 이용하여 보호기를 제거한다.
B. 본 발명의 펩타이드를 유효성분으로 함유하는 지방세포 분화 억제제를 제조한다.
전기 억제제의 제조시 사용되는 담체는 화학약제(chemical agent)를 실제 사용에 적당한 형태로 제조할 때 보통 사용되는 충진제(filler), 증량제(extender), 결합제(binder), 흡수제(moistening agent), 붕해제(disintegrating agent), 표면활성제(surface active agent)등의 부형제(excipient)또는 희석제(diluent)를 사용한다. 화학약제의 제형에는 본 발명의 펩타이드를 유효한 양으로 포함하기만 하면 특별한 제한이 없다. 제형의 구체적인 예로서는 정제(tablet), 분말, 입자(granule)및 환약(pill)과 같은 고체뿐만 아니라, 주사투여에 적합한 용액(solution), 현탁액(suspension)및 유탁액(emulsion)을 포함한다. 화학약제는 사용 전에 적당한 담체를 첨가함으로써 액화될 수 있는 건조형태로도 제조될 수 있다. 전기 모든 화학약제는 당업계에서 공지된 방법으로 제조한다.
지방세포 분화 억제제의 투여량은 약제의 투여방법, 투여형태, 환자의 증세 등을 고려하여 적절히 선택한다.
일반적으로, 화학약제는 본 발명의 펩타이드를 0.001 내지 80중량%의 농도로 포함하도록 제조하는 것이 바람직하며, 성인 1인이 하루에 1내지 100㎎의 전기 펩타이드를 투여받을 수 있도록 화학약제를 투여한다. 약제를 반드시 하루에 한번 투여할 필요는 없고, 하룽에 3내지 4번 나누어투여할 수 있다.
상기에서 언급한 여러 형태의 약제는 그 약제에 적합한 경로를 통하여 투여한다. 예를 들면, 주사에 적합한 형태는 정맥 주사, 근육내 주사, 피하 주사, 피부내 주사 및 복내 주사로 투여하며, 고체상의 약제는 경구로 투여한다.
C. 본 발명의 펩타이드 또는 가수분해물(이하, 본 발명의 펩타이드라함)을 유효성분으로 포함하는 특이건강시품(생리적 기능성 식품)을 제조한다. 전기 펩타이드 또는 가수분해물을 일반식품에 첨가할 수 있다.
상기 일반식품의 종류는 구체적으로 제한되지 않는다. 본 발명의 펩타이드가 첨가될 수 있는 식품의 구체적인 예로서, 우유, 푸딩, 카레요리(curry), 잘게 썬 고기요리(hash), 스튜(stew), 미트 소오스(meat sauce), 햄, 케이크 및 쵸코렛이 있다.
그중에서, 맛때문에 펩타이드를 쉽게 섭취하지 않으려는 어린이에게 우유에 첨가하여 펩타이드를 섭취케 할 수 있으므로, 우유는 특히 유용하다. 아울러, 비만을 촉진시키는 케이크 및 쵸콜렛과 같은 식품에 본 발명의 펩타이드를 첨가하면, 전기 식품의 섭취로 인한 비만을 예방할 수 있다.
상기의 일반식품에 첨가되는 펩타이드의 양은 식품의 종류, 첨가 목적, 식품의 섭취로 인하여 나타나리라 기대되는 효과 등을 고려하여 적절히 선택한다.
일반적으로, 본 발명의 펩타이드는 한끼 식사당 0.1 내지 4㎎의 팹타이드를 섭취할 수 있도록, 일반식품에 첨가하는 것이 바람직하다.
D. 본 발명의 펩타이드를 일반사료에 첨가함으로써, 지방세포의 분화를 억제할 수 있는 사료를 제조한다.
일반사료에는 소, 돼지, 닭등의 가축용 사료와 바다도미(sea breams)방어새끼(young yellowtails)등의 양식어류용 사료가 포함된다.
상기 일반사료에 첨가되는 펩타이드의 양은 사료의 종류, 사료의 섭취로 인해 나타나리라 기대되는 효과 등을 고려하여 적절히 선택한다.
일반적으로, 0.1 내지 4중량%의 농도로 본 발명의 펩타이드를 포함하도록 일반사료에 첨가하는 것이 바람직하다.
[실시예]
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
[실시예 1]
(지방세포의 분화를 억제하는 단백질가수분해물의 조사)
지방세포 분화 억제 펩타이드를 함유한 단백질 원료로서 글로빈과밀 글루텐을 비교하였다. 식사로 인한 비만의 모델로서는, 고지방(high-fat)으로 인하여 비만인 마우스와 고당(high-sugar)으로 인하여 비만인 마우스를 사용하였다. 고지방 비만은 마우스에게 50w/w%의 라드(lard)를 포함한 50% 지방함유 사료를 2주 동안 자유로이 섭취케함으로써 야기시켰고, 고당 비만은 일반사료외에 30w/v%수크로스를 포함한 음용수를 자유로이 섭취케 함으로써 야기시켰다. 4%글로빈 단백질가수분해물, 8% 글로빈 단백질가수분해물, 2% 글로빈 단백질 가수분해물 +2% 글루텐 단백질가수분해물, 4% 글로빈 단백질가수분해물 +4% 글로텐 단백질가수분해물을 50%지방함유 사료에 첨가하여, 고지방 비만의 마우스에게 자유로이 섭취케하였다.이와는 달리, 고당 비만의 마우스에게는 30% 수크로스 용액 외에 2% 글로빈 단백질가수분해물, 4% 글로빈 단백질가수분해물, 1% 글로빈 단백질가수분해물 +1% 글루텐 단백질가수분해물, 2% 글로빈 단백질가수분해물 +2%글루텐 단백질가수분해물을 일반사료에 첨가하여 자유로이 섭취케하였다. 상기 결과를 표 1에 나타내었다.
고지방 비만 시험에서, 50% 지방함유 사료를 섭취한 대조군은 일반사료를 섭취한 대조군과 비교할 때, 부고환(epididymal)지방조직의 무게가 190%또는 약 2배 증가하였고, 조직세포의 수는 50%, 세포크기는 28% 증가하였다. 지방조직의 무게, 세포수 및 세포크기의 증가가 글로빈 단백질가수분햅물만을 섭취한 군에서 매우 억제되며, 또한, 섭취 단백질가수분해물 중의 1/2을 차지하는 밀 글루텐 단백질가수분해물을 섭취한 군과 비교할 때 세포 수 감소가 특히 두드러진다.
이와 유사하게, 고당 비만 시험에서, 글로빈 단백질가수분해물은 밀글루텐 단백질가수분해물보다 지방세포 수의 증가를 더욱 강하게 억제하였다.
상기 결과로 부터, 그로빈 단백질가수분해물은 지방세포의 분화를 효과적으로 억제함을 알 수 있으며, 전기 가수분해물이 지방세포 분화 억제 펩타이드를 다량 함유하고 있을 것으로 추측된다.
테이타로 부터, 글로빈 단백질은 답백질의 원료(source)에 상관없이 기본적으로 바람직한 본질을 가지고 있음을 알 수 있다.
[실시예 2]
(글로빈 단백질가수분해물의 제조)
소의 적혈구를 사용하여 글로빈 단백질가수분해물을 제조하는 방법은 하기에서 기술한다. 젤 크로마토그래피로 분자량의 분포를 측정하였다.
[참조: 제1도].
젤 크로마토그래피는 하기의 조건에서 수행하였다.
기기 : 고속액체크로마토그래피(모델 LC-6A, Shimadzu Corp.)
컬럼 : 폴리하이드로시에틸 A. (5㎛, 9.4×200㎜, Poly LC Inc.)
용출용매 : 50mM 포름산
유속 : 0.5ml/min
검출 : 자외선 흡광(221㎚)
100㎏의 신선한 소 적혈구에 250L의 증류수를 첨가하여 제조한 용혈물(hemolysate)에 인산을 가하여 pH를 2.8로 조정한 다음, 아스퍼질러스 니거(Aspergillus niger)의 산성 단백질분해효소 2.6×10 단위(unit)를 첨가하고 50℃에서 3시간 반응시켰다.
그런 다음, 반응을 종결시키기 위하여 80℃에서 30분 동안 가열하고, Ca(OH)용액으로 pH를 6.5 로 조정하여, 10㎏의 규조토(diatomaceousearth)와 혼합하고, 필터프레스로 여과하였다. 어액을 스프레이 드라이하여 23㎏의 분말을 수득하였다.
[실시예 3]
(지방세포 분화 억제 펩타이드의 정제방법)
본 발명의 펩타이드는 1. 이온교환, 2. 한회여과, 3. 산성 상태의 역상 크로마토그래피에 의한 분리, 4. 중성 상태의 역상 크로마토그래피 방법을 이용하여 수득하였다.
상기 방법을 이용하여 수득한 펩타이드의 회수율을 표2에 나타내었다. 단백질은 닌히드린 방법으로 정량하였다.
1. 이온교환
10w/v% 글로빈 단백질가수분해물 수용액과 약산성의 양이온 교환 수지(Amberlite IRC50, H form, Japan Organo Co., Ltd.)를 혼합하고, 흡착을 유도하기 위하여 1시간 동안 흔들어준 다음, 흡착되지 않는 분획을 수득하였다.
2. 한외여과
이온교환 방법으로 수득한 비흡착 분획을 한외여과 장치(stirring ultrafiltration device, UHP 90K, Advantek Co., Ltd.)와 한외여과막(한외분자량 1000, UII 1, Advantek Co., Ltd.)을 이용하여 한외여과하고, 여액을 수득하였다.
3. 역상(산성) 크로마토그래피(참조: 제2도)
기기: 고속액체크로마토그래피(Model LC1-10A, Shimadzu Corp.)
컬럼: SuperPac Pep-S(15㎛, 22.5 × 250㎜, Pharmacia Ltd.)
용출용매: 0.1% 트리플루오로아세트산을 함유한 아세토니트릴 용액: 1%/분의 속도로 주입하며, 2% 내지 35% 전기 아세토니트릴 용액의 직선 농도구배를 수행
유속: 5ml/분
온도: 50℃
검출: 220㎚
분획 A의 유지시간(retension time): 39.9 내지 40.4분.
4. 역상(중성)크로마토그래피(참조: 제3도)
기기; 고속액체크로마토그래피(Model LC-10A, Shimadzu Corp.)
컬럼:SuperPac Pep-S(15㎛, 22.5 × 250㎜, Pharmacia Ltd.)
용출용매: 20mM 암모늄 아세트산 완층용액(pH6.5)을 포함한 아세토니트릴용액.
0.5%/분의 속도로 주입하며, 0% 내지 25% 전기 아세토니트릴 용액의 직선 농도구배를 수행
유속: 5ml/분
온도: 50℃
검출: 자외선 흡광(220nm)
분획 B의 유지시간: 41.7 내지 43.2분(Val-Thr-Leu)
분획 C의 유지시간: 45.8 내지 51.0분(Val-Tyr-Pro)
[실시예 4]
(지방세포 분화억제 펩타이드의 정량)
실시예 2에서 수득한 글로빈 단백질가수분해물에 존재하는 지방세포분화 억제활성을 가진 펩타이드는 실시예 3의 펩타이드 정제 단계마다 필요한 변형을 가하여 정량하였다.
[산성가수분해]
1ml의 6N HCL과 3 내지 5㎎의 단백질을 시험관에 넣고 110℃ 에서 22시간 가열하였다. 이때, 닌히드린 방법을 이용할 경우에는 정상 압력하에서, 아미노산을 분석할 경우에는 감압하에서 가열하였다.
[닌히드린 방법]
NaOH를 이용하여 단백질가수분해물의 pH를 5.0으로 조절하고, 0.2M시트르산 완충용액(pH5.0)을 함유한 닌히드린 시약을 첨가하여, 100℃에서 15분 반응시켰다. 그런 다음, 570nm에서의 흡광도를 측정하였다. 단백질정량의 표준 검정곡선은 L-루이신 용액(0.75, 150, 225 및 300nmoles/ml)을 닌히드린 반응시키고, 측정한 흡광도를 프로팅하여 사용하였다. 검정곡선을 기초로 하여 루이신의 아미노기 양을 계산하였다.
[펩타이드 지도]
기기: 고속액체크로마토그래피(Model LC-6A, Shimadzu Corp.)
컬럼: Shim-pack ISC-07/SI504 Na(7㎛, 4.0 × 150mm, Shimadzu Corp.)
용출용매: 아미노산 이동상키트(Na form, Shimadzu Corp.)
유속: 0.3ml/분
온도: 55℃
반응용액 1: 분석키트 OPA시약(Shimadzu Corp.)
검출: 형광성 흡광(Ex 348nm, Em 450nm)
[표준용액]
H form의 18개 아미노산 혼합 표준용액(Wako Pure Chemical Industries Ltd.)을 0.2M 시트르산 완충용액(pH 2.20)으로 원부피의 25배가 될 때까지 희석하였다. 희석된 용액 10㎛당 각 아미노산 1nmole 함유)를 주입하였다.
[시료용액]
로터리 증발기(rotary evaporator)를 사용하여 산성 가수분해 후의 산물을 농축시키고, 감압하에서 적어도 12시간 동안 HCI가 완전히 제거될 때까지 건조시켰다. 그런 다음, 건조시료를 0.2M 시트르산 완충용액(pH 2.20)에 용해시켜 아미노산 함량이 약 100nmoles/ml되도록 하고, 공경이 0.45㎛인 필터를 통과시켜 얻은 여액을 10μl주입하였다. 아미노산의 정량 및 피크면적의 계산은 Chromatopack, C-R4A(Shimadzu Corp.)을 이용하여 분석하였다. 아미노산 함량은 시료용액과 표준용액의 피크면적을 비교하여 계산하였고, 아미노산 조성은 전기에서 계산된 총 아미노산 함량에 대한 아미노산 양의 비율로서 계산하였다.
그 결과를 수율로서 상기 표 2에 나타내었다.
[실시예 5]
(H-Val-Thr-Leu-OH의 화학합성)
H-Val-Thr-Leu-OH는 펩타이드 합성기(SAM2, Blosearch Corp.)를 이용하여 합성하였다. 보호기를 가진 세번째 아미노산(Boc-Leu-OH)의 수지1g당 결합된 양은 0.3mmole이고, 이 아실옥시메틸 수지 2g을 전기 합성기의 반응기내에 넣고, 45v/v% 트리플루오로아세트산(TFA), 2.5V/V% 아니솔 및 52.5V/V%메틸렌 클로라이드(DCM)를 함유한 용액을 첨가하여, 25분 동안 반응시켜 Boc 기를 탈리시켰다. 수지는 DCM으로 세척하고, 10V/V%디이소프로필에틸렌아민 함유 DCM용액으로 중화시킨 다음, DCM으로 다시 세척하였다.
이어, 디메틸 포름아마이드(dimethyl formamide: DMF)와, Boc-Thr-HO 4.0mmole 및 디이소프로필 카보디이미드(diisopropyl carbodiimide)(각 6.7 배 당량)를 포함한 DCM 20ml 과의 혼합용액으로 상온에서 2시간 반응시켰다. 그런 다음, Boc-Thr(Bz)-Leu-PAM 수지를 수득하기 위하여, DMF와 DCM으로 각각 세척하였다.
이어, 상기와 동일한 방법으로 BOC-VAL-OH를 커플링시켰다. 전기 커플링 산물인 보호된 펩타이드 수지는 10v/v% 아니솔을 포함한 무수 HF와 O℃에서 1시간 반응시키고, 증류하여 HF를 제거시킨 다음, 에틸에테르로 세척하였다. 50% 아세트산을 이용하여 수득한 펩타이드와 수지의 혼합물로부터 펩타이드를 분리하였다. 분리한 펩타이드를 냉동건조시켜 약 250mg의 조 펩타이드(crude peptide)를 얻었다.
조 펩타이드를 0.1% 증류수에 용해시켜, ODS(octadecyl silics)컬럼(cosmosil 5C, 250 × 20mm: Nakaraitesuku co.)에 주입하고, 0.1% TFA 함유 아세토니트릴 20 내지 70%의 직선농도 구배(50분 소요, 10ml/분)로 용출시킨 결과, 원하는 펩타이드는 약 50% 아세토니트릴에서 용출되었다.
[실시예 6]
본 발명의 펩타이드를 함유한 식품의 제조
(1) 1지방세포의 분화를 억제하는 활성을 지닌 분유는 유아용 분유 100g에 실시예 2에서 수득한 글로빈 단백질 함유물질 1g을 첨가하여 제조하였다.
2 지방세포의 분화를 억제하는 활성을 지닌 분유는 유아용 분유 100g에 실시예 5에서 합성한 H-Val-Thr-Leu-OH 0.1g을 첨가하여 제조하였다.
(2) 1 지방세포의 분화를 억제하는 활성을 지닌 쵸콜렛을 100g 쵸콜렛에 실시예 2에서 수득한 글로빈 단백질 함유물질 5g을 첨가하여 제조하였다.
2 지방세포의 분화을 억제하는 활성을 지닌 쵸콜렛을 100g 쵸콜렛에 실시예 5와 동일한 방법으로 합성한 H-Val-Tyr-Pro-OH 0.5g 을 첨가하여 제조하였다.
[실시예 7]
본 발명의 펩타이드를 함유한 사료의 제조
지방세포의 분화를 억제하는 활성을 지닌 양식어류용 사료는 실시예 2에서 수득한 글로빈 단백질 함유물질 10중량%와 실시예 5에서 합성한 H-Val-Thr-Leu-OH 1중량%를 비타민, 무기질 등을 포함하고 있는 프리믹스(premix) 10중량%에 첨가한 다음, 상업적으로 입수가능한 양식어류용 사료에 전기에서 제조한 프리믹스를 10%의 농도로 첨가하여 제조하였다.
[시험 1]
글로빈 단백질가수분해물(GD)및 역상 HPLC를 이용하여 GD로 부터 분리한 분획 A(제2도)가 미성숙 지방세포(preadipocyte)에 미치는 영향(실험실적 조건)
(1) 분화유도 전의 처리
스위스 마우스 3T3-L1 세포를 3×10 세포/ml 로 세포배양 디쉬에 접종하였다. 배양배지는 소태아 혈청을 10%로 포함하고 있는 DMEM(Dulbecco modified Eagle culture medium)을 사용하고, 37℃의 온도로 5% CO와 95%고　기하에서 전기 세포를 배양하였다.
세포의 단층(monolayer)이 형성된 후, 세포층 표면을 PBS(phosphate buffered saline)용액으로 세척하였다. 0, 2, 4 및 8mg/ml 의 GD와 0, 20, 40 및 80㎍/ml 의 분획 A를 포함한 배지의 경우에는 세포를 배양하였다. 이어, 세포층 표면을 PBS로 세척하고, 분화유도물질(0.25μm 덱사메타손(dexamethasone), 0.5mM 1-메틸-3-이소부틸 산틴(1-methyl-3-isobutyl xanthine, 10㎍/μ/l 인슐린)을 포함하고 있는 배지의 경우에는 2일 동안 세포를 배양하였다.
그런 다음, 분화유도물질을 포함한 배지를 제거하고 남은 세포층 표면은 PBS로 세척하며, 10㎍/μ/l 인슐린을 포함한 배지의 경우는 약 1주일 동안 세포배양하였다.
지방세포 분화에 미치는 분획 A의 영향은 마커효소로서 글리세롤-3-포스페이트 탈수소효소(glycerol-3-phosphte dehydrogenase(GPDH)의 활성을 공지방법으로 측정함으로써 조사하였다.
(2) 분화유도 후의 처리
상기 (1)에서 언급한 방법으로 스위스 마우스 3T3-LI 세포를 배양하고, 분화유도물질을 포함한 배지를 제거한 다음, 10㎍/μ/l 인슐린을 포함한 배지를 GD 및 분획 A에 첨가한 다음, GPDH활성을 측정하였다.
상기에 대한 결과는 표 3에 나타내었으며, 표3으로부터 분화유도전, 후의 처리 모두에서 GD및 분획 A는 펩타이드의 농도에 비례하여 GPDH활성을 효과적으로 억제하며, 이들은 지방세포의 분화억제에도 매우 효과적임을 할 수 있었다.
[시험 2]
화학합성된 지방세포 분화 억제 폡타이드가 미성숙 지방세포의 분화억제에 미치는 효과(실험실적 조건)
실시예 5와 동일한 방법으로 수득한 H-Val-Thr-Leu-OH 및 H-Val-Tyr-Pro-OH 의 합성 펩타이드가 스위스 마우스 3T3-LI 세포에 미치는 영향을 실시에 5의 방법으로 조사하였다. 배양배지에 포함된 각 펩타이드의 농도는 0, 0.2, 0.4 및 0.8㎍/μl 이었다.
상기 시험에 대한 결과는 표 4에 나타내었으며, 표 4로부터 H-Val-Thr-Leu-OH 및 H-Val-Tyr-Pro-OH 는 분화유도 전, 후 처리 모두 에서 펩타이드의 농도에 비례하여 효과적으로 GPDH활성을 억제하며, 이들은 지방세포의 분화 억제에도 효과적임을 알 수 있었다.
[시험 3]
화학합성된 지방세포 분화 억제 펩타이드의 효과(생체내 조건)
실시예 5에서 합성된 본 발명의 2가지 지방세포 분화 억제 펩타이드 즉, Val-Thr-Leu 및 Val-Tyr-Pro가 지방세포(생체내 조건)의 증가에 미치는 영향을 조사하였다. 이때, 테스트는 글로빈 단백질가수분해물을 사용하여 시험1에서와 동일한 방법으로 수행하였다.
상기 시험에 대한 결과를 나타내는 표 5로 부터, 20ppm의 소량으로 첨가된 2가지 지방세포 분화 억제 펩타이드가 피하 지방조직, 부고환 지방 조직 및 복막후(retroperitoneal)지방조직의 세포수를 감소시킴을 알 수 있었다. 이러한 결과는 마우스 3T3-L1 세포를 이용한 실험실적 결과와 실제적으로 동일하다.
[시험 4]
지방세포의 분화에 미치는 글로빈 단백질가수분해물이 영향(생채내 조건)
본 발명의 펩타이드를 유효한 양으로 포함하고 있는 글로빈 단백질 가수분해물이 지방조직의 세포수에 미치는 영향을 생체내 조건에서 조사하였다.일반사료에 함유된 지방함량의 2배가 되도록 코코아를 첨가하여, 10%까지 증가된 지방함유 사료를 웅성 랫트(Wistar 종)가 4주동안 자유로이 섭취할 수 있도록 한 결과, 부고환 지방조직에 있는 세포수는 138×10 개 이었는데, 이는 일반사료를 섭취한 군에서 측정되는 113×10 개와 비교할때 22% 증가하였음을 나타낸다(참조: 표 6) 10% 지방함유 사료에 1w/w%농도로 글로빈 단백질가수분해물을 첨가한 경우, 지방세포의 수는 119×10 개로 줄었는데, 이는 일반사료를 섭취한 랫트에서 측정되는 세포수와 실제적으로 동일하다. 이와 유사한 결과는 복막후 지방조직의 세포에서도 나타났는데, 이는 글로빈 단백질가수분해물 및 밀 글루텐 단백질가수분해물이 지방의 과다섭취로 인한 지방세포수의 증가를 억제함을 암시한다.
50% 지방함유 사료를 전기 마우스에게 자유로이 섭취시키고, 지방조직의 무게 및 세포수를 조사하였다. 그결과를 표7에 나타내었다. 50%지방함유 사료의 섭취결과 증가된 지방조직은 일반사료의 섭취시 측정된 지방조직의 적어도 2배에 해당하는 양이었고, 그 조직의 세포수도 증가하였다. 50% 지방함유 사료에 글로빈 단백질가수분해물을 2내지 12w/w%첨가한 경우, 농도에 비례하여 무게 및 세포수의 증가를 억제하였다.
표 7의 지방조직 세포수는 지방세포, 미성숙 지방세포, 섬유아세포(fibroblast)및 혈관세포 등을 포함한 수치를 나타낸다. 피하 지방조직의 세포를 성숙 지방세포, 미성숙 지방세포 및 간질세포(interstitial cell)(스트로마)로 구분하며 세밀히 조사하였다.
이에 대한 결과를 나타내는 표 8로 부터, 스트로마로 나타낸 간질세포군 중의 섬유아세포가 미성숙 지방세포로 분화되는 것이 특히 억제됨을 알 수 있었다.
상기 결과로 부터, 글로빈 단백질가수분해물은 섬유아세포가 지방축적 세포(미성숙 지방세포 및 지방세포)로 분화되는 것을 억제함을 알 수 있으며, 이러한 효과 때문에 지방세포 분화 억제 펩타이드 뿐만 아니라, 글로빈 단백질가수분해물은 비만 및 이로 인한 실험관 질환의 예방과 치료에 유용함을 알 수 있었다.
[시험 5]
(본 발명 펩타이드의 안전성 시험)
본 발명의 두 펩타이드, Val-Tyr-Pro 과 Val-Thr-Leu를 적어도 10g/kg체중(최대 복용량)의 양으로 웅성 및 자성의 ICR 마우스에 경구투여하되, 두 펩타이드의 비율은 0:1, 1:1이 되도록 투여하였다. 치사하는 마우스는 한마리도 없었다.
[도면의 간단한 설명]
제1도는 글로빈 단백질가수분해물의 젤 크로마토그램을 나타내는 그림이다.
제2도는 실시예 3의 역상(산성) 크로마토그램을 나타내는 그림이다.
제3도는 실시예 3의 역상(중성) 크로마토그램을 나타내는 그림이다.
[산업상 이용가능성]
본 발명은 신규한 지방세포 분화 억제 펩타이드, 그를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제, 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지닌 특이건강식품(생리적 기능성 식품) 및 지방세포의 분화를 억제하는 기능을지닌 사료를 제공한다. 아울러, 본 발명은 전기 지방세포 분화 억제 팹타이드를 포함한 단백질가수분해물을 함유하는 지방세포 분화 억제기능을 지닌 특이건강식품과 사료를 제공한다. 본 발명을 이용하면, 비만 및 그로인한 고혈압과 동맥경화 등의 심혈관 질환을 예방하고 치료할 수 있으며, 또한, 가축 및 양식어류의 육질을 향상시킬 수 있다.

Claims (6)

  1. 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지니는 Val-Thr-Leu의 아미노산 서열을 가지고 있는 펩타이드.
  2. 제1항에 펩타이드를 유효성분으로 함유하는 지방세포 분화 억제제.
  3. 지방세포 분화 억제기능을 제1항의 펩타이드를 유효성분으로 함유하며, 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지니는 건강식품.
  4. 지방세포 분화 억제기능을 지니는 제1항의 펩타이드를 함유하며, 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지니는 사료.
  5. 지방세포 분화 억제기능을 지니는 제1항의 펩타이드를 적어도 0.1중량% 포함하는 단백질가수분해물을 유효성분으로 함유하며, 지방세포의 분화를 억제하는 기능을 지니는 건강식품.
  6. 지방세포 분화 억제기능을 지니는 제1항의 펩타이드를 적어도 0.1중량%포함하는 단백질가수분해물을 함유하는 사료.
KR1019950704114A 1993-03-24 1994-02-24 지방세포 분화 억제 펩타이드 및 그를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제 KR0161747B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP06564393A JP3312944B2 (ja) 1993-03-24 1993-03-24 脂肪細胞分化抑制ペプチド及び当該ペプチドを有効成分とする脂肪細胞分化抑制剤
JP65643/1993 1993-03-24
PCT/JP1994/000297 WO1994021671A1 (en) 1993-03-24 1994-02-24 Adipocyte differentiation inhibitor peptide and adipocyte differentiation inhibitor containing said peptide as active ingredient

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR960701089A KR960701089A (ko) 1996-02-24
KR0161747B1 true KR0161747B1 (ko) 1998-11-16

Family

ID=13292908

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019950704114A KR0161747B1 (ko) 1993-03-24 1994-02-24 지방세포 분화 억제 펩타이드 및 그를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제

Country Status (13)

Country Link
US (1) US5756467A (ko)
EP (1) EP0753526B1 (ko)
JP (1) JP3312944B2 (ko)
KR (1) KR0161747B1 (ko)
AT (1) ATE198157T1 (ko)
AU (1) AU676273B2 (ko)
CA (1) CA2158991C (ko)
DE (1) DE69426465T2 (ko)
DK (1) DK0753526T3 (ko)
ES (1) ES2153415T3 (ko)
GR (1) GR3035607T3 (ko)
PT (1) PT753526E (ko)
WO (1) WO1994021671A1 (ko)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6046168A (en) * 1993-03-24 2000-04-04 Hankyu-Kyoei Bussan Co., Ltd. Peptide inhibits blood triglyceride level
ES2238682T3 (es) * 1995-06-23 2005-09-01 Mg Pharma Inc. Peptido que inhibe la elevacion del nivel de trigliceridos en sangre e inhibidor de la elevacion del nivel de trigliceridos en sangre que contiene dicho peptido como ingrediente activo.
JP2805194B2 (ja) * 1996-03-22 1998-09-30 阪急共栄物産株式会社 血中トリグリセリド濃度上昇抑制ペプチド及び当該ペプチドを有効成分として含む血中トリグリセリド濃度上昇抑制剤
US5739009A (en) * 1996-12-12 1998-04-14 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Adipocyte-specific differentiation-related protein
JP2001069949A (ja) * 1999-09-06 2001-03-21 Nippon Meat Packers Inc 豚肉分解物及びそれを含有する食品
US6869766B2 (en) * 2000-12-22 2005-03-22 The Regents Of The University Of California Gene associated with regulation of adiposity and insulin response
US7048941B2 (en) 2001-03-30 2006-05-23 New World Enterprizes, Inc. Chocolate composition as delivery system for nutrients and medications
US20070254889A1 (en) * 2001-04-23 2007-11-01 Lee-Way Jin Compounds and methods useful for rescuing cells from beta-amyloid toxicity and treatment of Alzheimer's disease
GB0211849D0 (en) * 2002-05-23 2002-07-03 Mok Kenneth H Improvments to retro-inverso isomers
EP1824501B1 (en) * 2004-11-15 2009-08-19 Mg Pharma Inc. Protein hydrolysate with antidiabetic effect
JP4944412B2 (ja) * 2005-09-09 2012-05-30 有限会社 シーバイオン 前駆脂肪細胞分化抑制剤及びその製造方法
JP4395658B2 (ja) * 2005-11-17 2010-01-13 エムジーファーマ株式会社 コレステロール再上昇抑制用組成物およびその用法
US20070160542A1 (en) * 2005-12-20 2007-07-12 Verus Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for the delivery of corticosteroids having an enhanced pharmacokinetic profile
JP2006141409A (ja) * 2006-02-17 2006-06-08 Tottori Kanzume Kk 酵素処理魚粉の製造方法及び酵素処理魚粉を配合した飼料
WO2009028248A1 (ja) 2007-08-27 2009-03-05 National University Corporation Nagoya University 環状へプタペプチド及びその用途
JP5912717B2 (ja) * 2012-03-22 2016-04-27 キッコーマン株式会社 小麦グルテン酵素分解液
CN106720964A (zh) * 2016-12-26 2017-05-31 华大(镇江)水产科技产业有限公司 一种肽蛋白替代鱼粉的鲟鱼软颗粒饲料及其制备方法
KR20230046870A (ko) * 2021-09-30 2023-04-06 (주)케어젠 항비만 활성을 갖는 펩타이드 및 이의 용도

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4452888A (en) * 1980-07-10 1984-06-05 Terumo Corporation Process for producing a low-molecular weight peptide composition and nutrient agent containing the same
JPS5718623A (en) * 1980-07-10 1982-01-30 Terumo Corp Nutrition supplement containing peptide oligomer
JPS5976022A (ja) * 1983-06-20 1984-04-28 Terumo Corp 食品素材
JPS6011425A (ja) * 1983-06-30 1985-01-21 Fuji Oil Co Ltd コレステロ−ル低下性蛋白加水分解物及びその製造法
CA1335567C (en) * 1988-02-02 1995-05-16 Kyoichi Kagawa Lipid metabolism promoting agent
JPH0331298A (ja) * 1989-06-28 1991-02-12 Ajinomoto Co Inc プロリルエンドペプチターゼ阻害ペプチド
JPH03120224A (ja) * 1989-10-04 1991-05-22 Ajinomoto Co Inc 新規ペプチドおよびこれを含有する降圧剤
JP3096052B2 (ja) * 1990-09-11 2000-10-10 理化学研究所 脂質代謝調節剤
JPH04149137A (ja) * 1990-10-12 1992-05-22 Nippon Steel Corp ダイエット剤

Also Published As

Publication number Publication date
DE69426465D1 (de) 2001-01-25
ES2153415T3 (es) 2001-03-01
DE69426465T2 (de) 2001-06-07
JPH06293796A (ja) 1994-10-21
US5756467A (en) 1998-05-26
CA2158991C (en) 2001-02-20
WO1994021671A1 (en) 1994-09-29
EP0753526A1 (en) 1997-01-15
GR3035607T3 (en) 2001-06-29
EP0753526B1 (en) 2000-12-20
CA2158991A1 (en) 1994-09-29
JP3312944B2 (ja) 2002-08-12
EP0753526A4 (ko) 1997-01-29
AU676273B2 (en) 1997-03-06
KR960701089A (ko) 1996-02-24
DK0753526T3 (da) 2001-03-05
ATE198157T1 (de) 2001-01-15
PT753526E (pt) 2001-06-29
AU6115494A (en) 1994-10-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR0161747B1 (ko) 지방세포 분화 억제 펩타이드 및 그를 유효성분으로 포함하는 지방세포 분화 억제제
Meisel Overview on milk protein-derived peptides
EP2088157A1 (en) Collagen peptide composition and food or beverage containing the same
KR100264344B1 (ko) 혈액내 트리글리세라이드의 농도 증가를 저해하는 펩타이드 및 전기 펩타이드를 활성성분으로 함유하는 혈액내 트리글리세라이드 농도 증가 억제제
JP5926363B2 (ja) ジペプチジルペプチダーゼ−ｉｖ阻害剤
JP2002255847A (ja) コラーゲン産生促進剤、それを含む機能性食品および医薬品
US20150232510A1 (en) Dipeptidyl peptidase-iv inhibitor
JP4808218B2 (ja) 抗糖尿病作用を有する蛋白加水分解物
JP2800877B2 (ja) 血中トリグリセリド濃度上昇抑制ペプチド及び当該ペプチドを有効成分として含む血中トリグリセリド濃度上昇抑制剤
US6046168A (en) Peptide inhibits blood triglyceride level
JP2003210138A (ja) 機能性食品、その製造方法及び医薬
KR100262468B1 (ko) 혈중 트리글리세리드의 농도상승을 억제하는 펩티드 및 활성성분으로서 펩티드를 함유한 혈중 트리글리세리드의 농도상승 억제제
KR101491902B1 (ko) 콜라게나제의 활성 저해 효과를 갖는 신규 펩타이드 및 그의 용도
KR102253996B1 (ko) 광어 가수분해물 유래의 펩티드를 포함하는 항고혈압용 조성물
KR20230098939A (ko) 누에고치 효소 가수분해물을 포함하는 항염증용 조성물
CA2225412C (en) A peptide inhibiting elevations of triglyceride levels in blood and an agent for inhibiting elevations of triglyceride levels in blood comprising the peptide as an active component
NO318683B1 (no) Peptidblanding og middel som inhiberer okning av triglyceridniva i blod, samt matvare og fôr som omfatter peptidblandingen.
KR20130142316A (ko) 조기 비늘의 효소적 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 고혈압의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20120625

Year of fee payment: 15

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20130624

Year of fee payment: 16