JPWO2020166494A1 - 血圧低下作用を有するナス由来組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
したがって、本発明の課題は、簡単な調製により、効果的な血圧低下作用を有する新たな組成物を提供することである。
[1] ナス(Solanum melongena)の果実の全水溶性成分を有効成分として含む、血圧低下用組成物。
[2] ナス(Solanum melongena)の果実の全水溶性成分からなる、血圧低下用組成物。
[3] 全水溶性成分中のアセチルコリン量が0.5μg/kg体重〜50mg/kg体重となる用量で経口摂取するための、前記[1]または[2]に記載の血圧低下用組成物。
[4] 乾燥粉末である、前記[1]〜[3]のいずれか一項に記載の血圧低下用組成物。
[5] 食品組成物である、前記[1]〜[4]のいずれか一項に記載の血圧低下用組成物。
ナス果実から全水溶性成分を抽出すること
を含む、前記製造方法。
[7] 抽出が、水抽出である、前記[6]に記載の製造方法。
[8] 水抽出が、
ナス果実に水を添加すること、および、
水を添加した果実を搾汁し、搾汁液を得ること
を含む、前記[7]に記載の製造方法。
[9] 水抽出が、
ナス果実を乾燥粉末にした後に水を添加すること、および、
水を添加した乾燥粉末から、遠心分離により上清を得るか、吸引ろ過によりろ過液を得ること
を含む、前記[7]に記載の製造方法。
[10] 抽出が、ナス果実に水を添加せずに搾汁し、搾汁液を得ることである、前記[6]に記載の製造方法。
[11] ナス果実を破砕することを含む、前記[6]〜[10]のいずれか一項に記載の製造方法。
[12] ナス果実を加熱することを含む、前記[6]〜[11]のいずれか一項に記載の製造方法。
[13] 搾汁液、上清またはろ過液を乾燥粉末にすることを含む、前記[8]〜[12]のいずれか一項に記載の製造方法。
[14] 前記[6]〜[13]のいずれか一項に記載の製造方法によって製造された、血圧低下用組成物。
本発明の血圧低下用組成物は、ヒトに用いる場合、全水溶性成分中のアセチルコリン量が0.5μg/kg体重〜50mg/kg体重となる用量、好ましくは2μg/kg体重〜20mg/kg体重となる用量、とくに好ましくは5μg/kg体重〜1mg/kg体重となる用量、さらに好ましくは8μg/kg体重〜100μg/kg体重で経口摂取するために用いられる。かかる用量で経口摂取することで、より効果的に血圧低下作用を得ることができる。
本発明の血圧低下用組成物は、一態様において、例えば、凍結乾燥粉末や熱風乾燥粉末などの乾燥粉末であってもよい。
食品の場合、適当な食品添加物と組み合わせて用いてもよい。また、このような食品用組成物に限らず、緑茶、紅茶、烏龍茶、雑穀茶、健康ドリンク、スポーツドリンクなどに配合して飲料として、あるいはビスケット、パン、飴等に配合して食品として、日常的に摂取可能な形態で提供することも可能である。また、下記医薬品の調剤に準じて適当な剤形として、所謂サプリメントとして利用することも可能である。
この場合の具体的な形態としては、本発明の組成物を有効成分として含有するカプセル剤、錠剤、粉末剤、顆粒剤等からなるサプリメント類、パン、ケーキ、クッキー等のベーカリー食品類、ソース、スープ、ドレッシング、マヨネーズ等の調味料類、牛乳、ヨーグルト、クリーム類等の乳製品類、チョコレート、キャンデー等の菓子類、あるいは緑茶、紅茶、烏龍茶、麦茶、雑穀茶、果汁、野菜飲料、乳飲料、清涼飲料および炭酸飲料等の各種飲料類等が挙げられる。
本発明の組成物は、例えば、高血圧症の対象や、健常である(高血圧症ではない)が血圧が高めである対象へ用いることができる。
本発明の製造方法は、ナス果実から全水溶性成分を抽出することを含む。全水溶性成分が得られれば、抽出方法はとくに限定されないが、例えば、ナス果実に含まれている水分を利用して、ナス果実に水を添加せずに搾汁して搾汁液を得ることによって抽出してもよい。あるいは、水抽出を行ってもよい。水抽出は、ナス果実に水を添加すること、および、水を添加した果実を搾汁することや、ナス果実を乾燥粉末にした後に水を添加すること、および、水を添加した乾燥粉末から抽出することであり得る。水を添加した乾燥粉末から抽出する場合、遠心分離により上清を得るか、吸引ろ過、加圧ろ過、自然ろ過によりろ過液を得るなどによって行ってもよい。
ナス果実に添加する水は、とくに限定されるものではなく、5℃〜40℃の温度範囲の水を添加すればよい。室温の水を添加することが好ましい。水の添加量は、原料のナス果実100質量部に対して、50〜200質量部が好ましく、なかでも75〜150質量部がより好ましく、100質量部がとくに好ましい。水量が少ないと、有効成分である水溶性成分の抽出が不十分になる虞があり、水量が多いと、処理体積が大きくなり、例えば乾燥粉末に加工することが容易ではなくなる虞がある。
加熱の態様は、とくに限定されるものではなく、例えば、30〜100℃の温度範囲で2分〜60分間の加熱を行うことができる。加熱温度は、80〜100℃が好ましい。
ナス果実を加熱する方法としては、例えば、電子レンジ、ホットプレートや鍋で加熱する方法、熱湯に浸漬する方法、水蒸気を当てる方法などを挙げることができる。これらのなかでも、熱湯に浸漬する方法や、ナスに水蒸気を当てる方法が好ましい。
またナス果実の加熱は、水の添加前、添加後、水による加熱中、破砕の前、破砕の後、破砕中のいずれのタイミングで行ってもよいが、加熱したナスを破砕、破砕したナスを速やかに加熱すことがアセチルコリン分解酵素の不活性化に好ましい。
またナス果実を水抽出する場合、とくにナス果実の乾燥粉末に水を添加して水抽出物を得る場合には、遠心分離機や吸引ろ過器などを使用してもよい。
得られた搾汁液や水抽出物(例えば、遠心分離の上清、吸引ろ過器のろ過液など)は、乾燥することによって塊状または粉状の乾燥物とすることができる。乾燥方法は、とくに限定されないが、乾燥物に含まれる水分を0〜10wt%となるまで乾燥できることが好ましい。例えば、熱風乾燥などの加熱乾燥、ドラムドライ、凍結乾燥、スプレイドライなどによって乾燥することができる。
本発明の製造方法で製造された組成物は、食物繊維が少なく糖質を多く含む傾向がある。本発明の組成物の食物繊維と糖質との比は、例えば、1:2〜1:100であり、好ましくは、1:5〜1:40であり、とくに好ましくは、1:10〜1:20である。
高知県産の生鮮ナス(土佐鷹:2018年産)50kgをクラッシャーにて破砕し、これと50kgの水を鍋に加え、90℃に加熱し20分間煮ることで、スラリー状の破砕物を得た。得られた破砕物を果汁搾り器(フルーツプレス)にて圧搾することで、69kgの搾汁液および22kgの残渣を得た。
得られた搾汁液を、そのまま凍結乾燥し、これを粉砕することで、1.34kg(水分含有量5.1%)の凍結乾燥粉末(実施例1)を得た。
実施例1の破砕物10kgを搾汁せずに、そのまま凍結乾燥し、これを粉砕することで、600gの凍結乾燥粉末(比較例1)を得た。
実施例1および比較例1の各粉末中のアセチルコリン含有量を定量した。なお、アセチルコリン含有量の定量は、次の方法に準じて行った。
1.抽出法
(1)試料の調製
上記の実施例1および比較例1の凍結乾燥粉末を用いた。
(2)試薬の調製
リン酸二水素ナトリウム(59.99mg)とリン酸水素二ナトリウム(70.98mg)を量り取り、純水(100mL)に溶解し、10mMリン酸緩衝液を調製した。
EN(0.80mg)を10mMリン酸緩衝液(1mL)に溶解して800.00μg/mLに調製後、100倍希釈して8.00μg/mLに調製し、EN内部標準とした。
凍結乾燥物(10mg)を2mLチューブに量り取り、EN内部標準(10μL)を加えた。10mMリン酸緩衝液(190μL)を添加し、ボルテックス(FLX-S、FRONT LAB、アズワン(株))で3分間撹拌した後、遠心分離機(CFM-200、(株)イワキ)で遠心分離(1000×g、室温、3min)し、上清を得た。残渣に再び10mMリン酸緩衝液(200μL)を添加し撹拌、遠心分離、上清採取の操作を2回繰り返した。採取した上清をすべて合わせ(約600μL)、抽出サンプルとした。
固相抽出カートリッジは弱酸性陽イオン交換カートリッジInert Sep CBA 100mg/1mL(ジーエルサイエンス(株))を用いた。メタノール(1mL)、純水(1mL)で活性化した固相抽出カートリッジを10mMリン酸緩衝液(8mL)で平衡化した後、前記(3)で調製した抽出サンプル(約600μL)を添加した。10mMリン酸緩衝液(600μL)で安定化、純水(2.5mL)で洗浄後、塩酸(500μL)で溶出した。
固相抽出で塩酸溶出した溶出液(500μL)を1mLメスフラスコを用いてLC/MS/MS分析溶媒で精確に1mLにフィルアップし、300μLずつ3つに分けた。それぞれに、コリン化合物混合溶液を添加し、溶出液が2倍希釈になるようにLC/MS/MS分析溶媒を加え(表1)、定量サンプルを作成した。
(1)LC/MS/MS分析条件
カラムはYMC-Triart PFP(4.6mm×250mm、5μm、(株)ワイエムシィ)を用いた。分析溶媒に0.01%ギ酸−33%メタノール含有水を用い、流速は0.5mL/min(LC)、0.3mL/min(MS)、注入量は50μL、分離温度は40℃、分析時間は30min、イオン化モードはESI+・MRM、Capillary Voltageは3500V、Cone Voltageは10V、Collision Voltageは10V、N2 gas flow(desolvation)は600L/hr、N2 gas flow(cone)は50L/hr、N2 source tempは120℃、N2 desolvation tempが350℃の条件で、ACQUITY UPLC [UPLC, Waters corp.]-Quattro micro API [MS, Waters corp.]を用いて、LC/MS/MS分析を行った。各コリン化合物のMRMモード指定m/zは表3に示した。
LC/MS/MS分析によって得られたクロマトグラフのピーク面積値から検量線を作成し、標準添加法によってコリン化合物を定量した。EN内部標準の検量線から算出した回収率で各コリン化合物濃度を補正し、定量サンプル中の正確なコリン化合物濃度を算出した。得られた濃度を凍結乾燥物中の含量(mg/g D.W.)に換算後、凍結乾燥前後の収率より、新鮮重量100g当たりの各コリン化合物量(μg/100g F.W.)を算出した。
実施例1のアセチルコリン含有量は1.73(mg/g D.W)、比較例1のアセチルコリン含有量は0.62(mg/g D.W)であった。
実施例1の凍結乾燥粉末、比較例1の凍結乾燥粉末および水を高血圧自然発症ラット(SHR)に単回経口投与し、血圧低下作用を評価した。
雄性14週齢SHR(体重324〜368g、6匹、12時間絶食)に実施例1の凍結乾燥粉末、比較例1の凍結乾燥粉末および水を、胃ゾンデを用いて単回経口投与した。実施例1の凍結乾燥粉末および比較例1の凍結乾燥粉末は、アセチルコリン量が同じとなるように、アセチルコリン量が10−9mol/kg体重となる量だけ与えた。経口投与後、0、3、6時間後に、非観血式血圧測定器Softron BP-98A(ソフトロン株式会社、東京)を用いてテイルカフ法で収縮期血圧を測定した。結果を表4に示す。
収穫後1週間、冷凍保存した高知県産ナスである土佐鷹3kg(2017年産)を解凍し、そのまま鍋に入れて蓋をして30分間、卓上型ヒーターにて加熱した。1kgをそのまま凍結乾燥して比較例2とした。残りの2kgを冷却後、加熱したナスをジューサーミキサーにて10分間破砕した。2kgの水を加えてよく攪拌してから、ジューサーミキサーにて10分間、混合した。得られたスラリー状の破砕物を1L容量のだしこし袋6つに分けて入れて、12L容量の搾汁機(ワイン圧搾機)にて搾汁液と残渣を得た。搾汁液は2700g、Brix1.9%であった。残渣は530gであった。
搾汁液900gを凍結乾燥して、ミルにて粉砕して、ナス搾汁粉末28gを得て実施例2−1とした。搾汁液900gにデキストリン17gを加え溶解させてから凍結乾燥し、ミルにて粉砕して、50%デキストリン含有ナス搾汁粉末74gを得て実施例2−2とした。
高知県産の生鮮ナス、土佐鷹50kg(2018年産)に50kgの水を加え、90℃に加熱し20分間煮た。得られたナスと煮汁のすべてをクラッシャーにて破砕してスラリー状の破砕物を得た。その1kgをそのまま凍結乾燥して比較例3とした。残りを果汁搾り器(フルーツプレス)にて圧搾して、搾汁液68.5kg、残渣23.8kgを得た。搾汁液を2つに分け、搾汁液34kgをそのままスプレイドライ装置にて噴霧乾燥して実施例3−1の粉末675gを得た。搾汁液34kgに乳糖700gを加えよく溶解させてからスプレイドライ装置にて噴霧乾燥して1.23kgの粉末を得て実施例3−2とした。
原料ナスを熊本県産の生鮮ナス、ヒゴムラサキ(2018年産)に変更したこと以外、実施例1と同様に作業し、比較例4、実施例4を得た。
原料ナスを熊本県産の生鮮ナス、ヒゴムラサキ(2018年産)として、20kgをクラッシャーにて破砕し、90℃に加熱し1時間、煮た。得られた破砕物1kgをそのまま凍結乾燥して比較例5を得た。残りの19kgに水を加えず、そのまま圧搾して搾汁液8kgを得た。凍結乾燥、粉砕して実施例5の粉末250gを得た。
比較例1の100gに10倍量の水を加えて、1時間攪拌した。得られたスラリー状の溶液を遠心分離(3000回転、30分間)にて上清を得た。上清を凍結乾燥、粉砕して実施例6の粉末42gを得た。
高知県産の生鮮ナス(土佐鷹:2017年産)10kgを95℃にて50分間、加熱し、室温まで冷やし、クラッシャーにて破砕してから10kgの水を加え、スラリー状の破砕物を得た。得られた破砕物をドラムドライ乾燥機にて乾燥して550gの粉末を得た(比較例6とした)。この粉末300gに20倍量の水を加え、1時間、攪拌して、ろ紙を用いて吸引ろ過して得られたろ過液5000mlを凍結乾燥、粉砕して実施例7の90gを得た。
Claims (14)
- ナス(Solanum melongena)の果実の全水溶性成分を有効成分として含む、血圧低下用組成物。
- ナス(Solanum melongena)の果実の全水溶性成分からなる、血圧低下用組成物。
- 全水溶性成分中のアセチルコリン量が0.5μg/kg体重〜50mg/kg体重となる用量で経口摂取するための、請求項1または2に記載の血圧低下用組成物。
- 乾燥粉末である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の血圧低下用組成物。
- 食品組成物である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の血圧低下用組成物。
- ナス(Solanum melongena)由来成分を含む血圧低下用組成物の製造方法であって、
ナス果実から全水溶性成分を抽出すること
を含む、前記製造方法。 - 抽出が、水抽出である、請求項6に記載の製造方法。
- 水抽出が、
ナス果実に水を添加すること、および、
水を添加した果実を搾汁し、搾汁液を得ること
を含む、請求項7に記載の製造方法。 - 水抽出が、
ナス果実を乾燥粉末にした後に水を添加すること、および、
水を添加した乾燥粉末から、遠心分離により上清を得るか、吸引ろ過によりろ過液を得ること
を含む、請求項7に記載の製造方法。 - 抽出が、ナス果実に水を添加せずに搾汁し、搾汁液を得ることである、請求項6に記載の製造方法。
- ナス果実を破砕することを含む、請求項6〜10のいずれか一項に記載の製造方法。
- ナス果実を加熱することを含む、請求項6〜11のいずれか一項に記載の製造方法。
- 搾汁液、上清またはろ過液を乾燥粉末にすることを含む、請求項8〜12のいずれか一項に記載の製造方法。
- 請求項6〜13のいずれか一項に記載の製造方法によって製造された、血圧低下用組成物。
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