JP6000521B2 - 血圧上昇抑制剤 - Google Patents
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Description
本発明は、ボイセンベリー種子の抽出物を有効成分とする血圧上昇抑制剤、およびその製造方法に関する。本発明はまた、血圧上昇抑制剤含む、飲食品組成物または医薬品組成物に関する。さらに本発明は、ボイセンベリー種子の抽出物を含んでなる飲食品組成物に関する。
食生活の欧米化、運動不足、ストレス、喫煙、および遺伝的要因などが引き金となって、いわゆる生活習慣病の代表格である高血圧症および高脂血症(例えば、高コレステロール血症、高中性脂肪血症)が引き起こされることは、広く知られている。これらのなかでも、高血圧症は、最も罹患率が高く、医療経済面からも早急な対応を要する疾患である。
a)前記搾汁滓を乾燥させて得られる乾燥搾汁滓から、果皮塊を選択的に粉砕し、種子をふるい分ける工程、
b)前記工程a)で得られた種子を細かく砕き、必要に応じて脱脂用有機溶媒を用いて抽出し有機溶媒分を除去し残部を乾燥し、ボイセンベリー種子粉末を得る工程、および
c)前記工程b)で得られた種子粉末を、水、有機溶媒または含水有機溶媒を用いて抽出して得られた抽出液を、ポリフェノール吸着剤と接触させた後、その吸着剤への吸着成分をアルコール系溶出溶媒を用いて溶出し、必要に応じて得られた溶出分画を濃縮し、目的のボイセンベリー種子抽出物を得る工程
を含んでなる方法である。
d)前記工程c)で得られたボイセンベリー種子抽出物を、オクタノール/水分配係数0〜1の溶媒で水と分配し、必要に応じて得られた溶媒相を濃縮し、濃縮分配ボイセンベリー種子抽出物を得る工程
を、さらに含んでなる。ここで、好ましくは、オクタノール/水分配係数0〜1の溶媒は、酢酸エチル、酢酸メチル、ギ酸エチル、またはブタノールからなる群から選択される1以上の溶媒である。
本発明による血圧上昇抑制剤は、前記したように、ボイセンベリー種子の抽出物を有効成分とする。本発明による血圧上昇抑制剤は、好ましくは、ボイセンベリー種子から抽出された2量体または3量体のプロアントシアニジンを有効成分とする。
ボイセンベリー(Rubus ursinus×idaeusまたはRubus loganobaccus and Rubus baileyanus Britt.)は、ブラックベリー、ラズベリー、およびローガンベリーの交配によってできた品種であるとされ、その果実は、鮮やかの紫色と豊かな芳香とほどよい甘さと酸味を備えたおいしさを特徴とする。ボイセンベリーには、カルシウム、鉄、亜鉛、またビタミンA、葉酸、ナイアシン、ビタミンCが豊富に含まれており、栄養素がバランス良く含まれている。
本発明において、「有効成分」とは、本発明の目的である血圧上昇抑制効果を奏する上で必要とされる成分のことを意味する。
本発明において、「抽出物」とは、ボイセンベリーの種子から抽出して得られ、抽出液、その希釈液、濃縮液、エキスまたはそれらの乾燥物もしくは乾燥粉末を意味する。ここで抽出を行う操作としては、圧搾抽出や、水や有機溶媒を用いた溶媒抽出などが包含され、必要に応じて、吸着、濃縮、濾過、または遠心分離などの処理をさらに施しても良い。
本発明の好ましい態様によれば、本発明の抽出物は、ボイセンベリー種子を水や有機溶媒を用いて溶媒抽出することにより得ることができる。
本発明の一つの好ましい態様によれば、抽出に用いるボイセンベリーの種子には、ボイセンベリー種子粉末を用いる。具体的には、ボイセンベリー種子粉末は、ボイセンベリー種子から、有効成分としての抽出物を抽出する前に、種子を細かく砕くことによって得ることができる。この種子粉末は、好ましくは、脱脂用有機溶媒を用いて種子粉末から油分を抽出し、有機溶媒分を除去し、残部を乾燥させた種子脱脂粉末である。
本発明のより好ましい態様によれば、抽出物は、熱水処理をした種子の抽出物である。具体的には、熱水処理をした種子の抽出物は、種子を細かく砕く前に、種子を熱水処理することにより得ることができる。
本発明の別の好ましい態様によれば、抽出に用いるボイセンベリー種子としては、ボイセンベリー搾汁滓より得られたものを使用する。具体的には、ボイセンベリー搾汁滓は、ボイセンベリー種子と果皮を含むボイセンベリー搾汁滓を乾燥させて得られる乾燥搾汁滓から、果皮塊を選択的に粉砕し、種子をふるい分けることにより得られる。
さらに本発明の一つの好ましい態様によれば、抽出物は、分配濃縮ボイセンベリー種子抽出物である。具体的には、濃縮ボイセンベリー種子抽出物は、得られたボイセンベリー種子抽出物を、オクタノール/水分配係数(LogPow)0〜1の溶媒で水と分配し、溶媒相として得ることができる。ここで、この抽出物は、好ましくは、得られた溶媒相を濃縮したものである。濃縮方法は上記した濃縮方法を用いることができる。
本発明の好ましい実施形態において、本発明の血圧上昇抑制剤を製造する方法は、
a)ボイセンベリー種子と果皮を含むボイセンベリー搾汁滓を乾燥させて得られる乾燥搾汁滓から、果皮塊を選択的に粉砕し、種子をふるい分ける工程、
b)前記工程a)で得られた種子を細かく砕き、必要に応じて脱脂用有機溶媒を用いて抽出し有機溶媒分を除去し残部を乾燥し、ボイセンベリー種子粉末を得る工程、および
c)前記工程b)で得られた種子粉末を、水、有機溶媒または含水有機溶媒で抽出して得られた抽出液を、ポリフェノール吸着剤と接触させた後、その吸着剤への吸着成分をアルコール系溶出溶媒を用いて溶出し、必要に応じて得られた溶出分画を濃縮し、有効成分として利用可能な抽出物(ボイセンベリー種子抽出物)を得る工程
を含んでなる方法である。この方法により、未利用資源であるボイセンベリー搾汁滓を原料とする、安全な血圧上昇抑制剤を、製造コストを安価に抑えかつ効率的に製造することができる。
d)前記工程c)で得られたボイセンベリー種子抽出物を、オクタノール/水分配係数0〜1の溶媒で水と分配し、必要に応じて得られた溶媒相を濃縮することによって、有効成分として利用可能な分配濃縮された抽出物(分配濃縮ボイセンベリー種子抽出物)得る工程
をさらに含んでなる方法である。この方法により、種子中のプロアントシアニジン含有量をさらに高めることはできるため、比活性の高い、使い勝手の良好な、高品質な血圧上昇抑制剤を製造することができる。
本発明による有効成分であるボイセンベリー種子の抽出物、または2量体もしくは3量体のプロアントシアニジンは、血圧上昇抑制作用を有し(後述する実施例の例2および3参照)、また血管拡張作用および血管弛緩作用を有する(後述する実施例の例5参照)。
前記したように、本発明によれば、本発明による血圧上昇抑制剤を含んでなる組成物が提供される。したがって、これらの組成物は、ボイセンベリーの種子抽出物、またはボイセンベリー種子から抽出された2量体もしくは3量体のプロアントシアニジンを有効成分として含んでなるものである。
製剤化のために許容されうる添加剤としては、例えば、賦形剤、安定剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、滑沢剤、甘味料、着色料、香料、緩衝剤、酸化防止剤、pH調整剤などが挙げられる。
(a)果汁搾汁滓からの種子の調製
ボイセンベリー果汁の製造時に排出された搾汁滓2kgを、熱風乾燥機(STAC−P400K、株式会社島津理化製)に入れ、70℃で、20時間乾燥して、ボイセンベリー乾燥搾汁滓1.1kg(種子物質純度66%、図1−A参照)を得た。得られた乾燥搾汁滓を、ゴムロール形ロール粉砕機(中形試験用籾摺機:ST−50A型、株式会社藤原製作所製)に入れ、30分間処理し、続いてナイロン被覆ボール(粒径6.4mm、ナイロン被覆鉄球、アズワン株式会社製)使用ボール粉砕機(小型ボールミル:AV−1、アズワン株式会社製)に入れ、30分間処理し、乾燥搾汁滓に含まれる果皮塊を、種子の損傷を抑えつつ、選択的に粉砕した。選択的に粉砕した搾汁滓を、目開き1.0mmの篩(株式会社タケショー製)を用いて篩別し、篩の上に通過できずに残ったものとしてボイセンベリー種子642g(種子物質純度95%、図1−B参照、乾燥減量1.5重量%)を、篩通過分としてボイセンベリー果皮粉末376gを得た(図1−C参照)。
また、ナイロン被膜ボール使用ボール粉砕機での処理時間を1時間にする以外は、上記と同様の処理を行い、種子物質純度97%の種子628gを得た。
得られたボイセンベリー種子100gを、粉砕器(グラインドミックスGM200、レッチェ(Retsch)製)を用いて細かく砕き(粒径約0.2〜2mm)、得られた種子粉末に対し、重量当たり3倍量のヘキサン(関東化学株式会社より入手)を加え、1時間、室温で、攪拌して種子粉末に含まれる脂質を抽出した後、静置し、ヘキサンを除去し、残部(沈殿物)を空気中で乾燥させて、ボイセンベリー種子脱脂粉末95gを得た。
また、得られたボイセンベリー種子を、90℃の熱水中で1時間処理し、70℃で乾燥させた熱水処理種子についても、上記と同様の処理を行い、ボイセンベリー熱水処理種子脱脂粉末を得た。
また、得られたボイセンベリー種子を、90℃の熱水中で1時間処理し、70℃で乾燥させた熱水処理種子についても、上記と同様の処理を行い、ボイセンベリー熱水処理種子脱脂粉末を得た。
ボイセンベリー種子脱脂粉末100g、またはボイセンベリー熱水処理種子脱脂粉末100gに対し、60%エタノール(和光純薬工業株式会社より入手)1.0Lを加え、70℃で、3時間攪拌して、種子粉末に含まれるポリフェノール成分を抽出した。得られた抽出液を、エバポレーターを用いて減圧濃縮した後、凍結乾燥機(DC−400、ヤマト科学株式会社製)を用いて、粉末状にして、種子粉末抽出物5.30g(プロアントシアニジン含有量0.7%)、または熱水処理種子粉末抽出物3.98g(プロアントシアニジン含有量1.0%)を得た。それぞれの抽出物を脱イオン水に溶解し、その溶液をポリフェノール吸着樹脂カラム(AmberliteXAD―7HP、株式会社オルガノ製)に負荷し、カラム体積と等量の脱イオン水で洗浄した。その後、吸着カラムを、カラム体積の2倍量のエタノール(99.5%以上)で溶出し、得られた溶出液を減圧濃縮した後、凍結乾燥機を用いて、粉末状にして、ボイセンベリー種子抽出物1.80g(プロアントシアニジン含有量4.2%)、または熱水処理種子抽出物1.26g(プロアントシアニジン含有量6.5%)を得た。
1)オクタノール/水分配係数の設定
ボイセンベリー種子に含まれるプロアントシアニジンの分配濃縮を行うため、ボイセンベリー種子に含まれるプロアントシアニジンおよび夾雑ポリフェノールであるエラジタンニンのオクタノール/水分配係数を求めた。具体的には、ボイセンベリー種子抽出物10mgに、オクタノール3mLおよび水3mLを加え、30分間激しく攪拌した後、10分間静置することによりオクタノール相と水相を分離して、両相に含まれるポリフェノール成分量をHPLCを用いて定量して、分配係数を求めた。その結果、プロアントシアニジンの分配係数は、−1.0〜0.1の範囲にあり、また夾雑ポリフェノールであるエラジタンニン類のこの係数は、−2.0以下であった。したがって、ボイセンベリー種子のプロアントシアニジンの分配濃縮を行う際の有機溶媒は、やや疎水性を示す誘電率0〜1のものを選定した。この範囲の溶媒は、やや疎水性であるため、親水性を示す(すなわち、オクタノール/水の分配係数が小さい)物質を溶解させることができる。
種子抽出物1.0g、または熱水処理種子抽出物1.0gを、それぞれ脱イオン水100mLに溶かし、その水溶液を酢酸エチル100mLで7回分配した。それぞれの酢酸エチル相を濃縮し、乾燥して分配濃縮種子抽出物0.24g(プロアントシアニジン含有量8.9%)、または分配濃縮熱水処理種子抽出物0.26g(プロアントシアニジン含有量13.6%)を得た。
得られた種子抽出物、熱水種子抽出物、分配濃縮種子抽出物、および分配濃縮熱水種子抽出物、を、それぞれ高速液体クロマトグラフィー(HPLC)(Prominence HPLC+蛍光検出器:RF−10AXL、株式会社島津製作所製)で分析した。コントロールとして、果皮抽出物および上記(d)濃縮工程で得られる水相を乾燥した抽出物についても同様に分析した。結果を表1および図2に示す。
HPLC測定条件は以下のとおりである:
カラムInertsilODS−3(250×4.6mm):移動相A(0.5%トリフルオロ酢酸水溶液)、移動相B(0.5%トリフルオロ酢酸メタノール溶液)、グラジエント0−5分(A/B=90/10)、5−15分(A/B=10/90−25/75)、15−35分(A/B=25/75−35/65);流速1.0mL/分;検出法UV(280&520nm)
高血圧自然発症ラット(Spontaneously Hypertensive Rat):SHR/Izm(雄性、14〜15週令、体重280〜310g、日本エスエルシー株式会社より入手)を、3群(n=5または6)に分けた。15時間絶食後、1群には対照群として脱イオン水を経口投与した。残りの2群には、サンプル投与群として、例1で得た種子抽出物を、群ごとに、種子抽出物200mg/kgまたは100mg/kgの用量で胃内にゾンデで強制的に経口投与し、それぞれを高用量群または低用量群とした。投与2、4、6、8、または24時間後の収縮期血圧を、ラット・マウス非観血式自動血圧測定装置(株式会社ソフトロン製)を用いて、tail−cuff法で、一匹につき3回測定した。それぞれ3回の測定値を平均し測定値とした。有意差検定はStudentのt−検定によって行った。結果を図3に示す。図3に示されるように、高用量群は、投与2〜6時間後まで、低用量群は、投与6時間後に、対照群と比べて、収縮期血圧の有意な低下が確認された。
高血圧自然発症ラット:SHR/Izm(雄性、14〜15週令、体重280〜310g)を、3群(n=6)に分けた。15時間絶食後、1群には対照群として脱イオン水を経口投与し、別の1群には分配濃縮種子抽出物(酢酸エチル相)投与群として例1で得られた分配濃縮種子抽出物50mg/kgを経口投与し、残りの1群には水相投与群として例1で得られた分配濃縮工程の水相を乾燥した抽出物50mg/kgを強制的に経口投与した。投与2、4、6、または8時間後の血圧を、例2と同様に測定し、図4に示される結果を得た。分配濃縮種子抽出物(酢酸エチル相)投与群では、対照群と比べて、投与後6時間で収縮期血圧の有意な低下を示した。しかしながら、分配水相濃縮物投与群では収縮期血圧の有意な低下は認められなかった。
実験動物として、ウイスターラット(雄性、9週令、初期体重190〜210g、日本エスエルシー株式会社より入手)を用いた。12時間絶食後、ウイスターラットに、例1で得られた分配濃縮種子抽出物、または分配濃縮熱水処理種子抽出物を、それぞれ1000mg/kgずつ強制的に経口投与して、投与1、2、4、6時間後ごとに屠殺して全血液を採取した。それぞれの全血液を、4℃、2,000×gで10分間遠心分離し、上清として血漿を得た。それぞれの血漿1mLに、50%ギ酸30μLおよび10mMアスコルビン酸水溶液100μLを加えて混合し、この混合血漿溶液1mLに、内部標準試薬としてのカテコール水溶液50μL(1μg)、およびリン酸30μLを加えて、分析用の試料とした。試料は、液体クロマトグラフィー・質量分析(LC/MS)装置(Simadzu Prominence UFLC、島津製作所株式会社製、ODSカラム装着、ギ酸・メタノール・水によるグラジエント溶出);MS/MS(API3200、アプライドバイオシステムズ製、negative−ionモード)を用いて、分子量577/289、561/289、865/289、および849/289にて、それぞれプロシアニジン2量体、プロペラルゴニジン2量体、プロシアニジン3量体、およびプロペラルゴニジン3量体を測定し、血漿中のプロアントシアニジン量を定量した。結果を表2に示す。
また、分配濃縮種子抽出物を投与した2時間後の血漿中のプロアントシアニジン2量体および3量体成分を測定したLC/MSチャートを図5および表3に示す。
(1)サンプル溶液の調製
ボイセンベリーの種子抽出物
例1のボイセンベリー種子抽出物の製造方法に従って、ボイセンベリー種子抽出物を製造し、得られた抽出物(プロアントシアニジン含有量4.3%)を脱イオン水に溶解して、ボイセンベリーの種子抽出物溶液(10mg/mL)を調製した。
ボイセンベリー果実を搾汁・濃縮して得たボイセンベリー果汁濃縮液100mL(ベリーフルーツエクスポートNZより入手)を脱イオン水(400mL)で希釈した溶液を、ポリフェノール吸着樹脂カラム(AmberliteXAD―7HP、4L、オルガノ株式会社)に負荷し、カラム体積と等量の脱イオン水で洗浄した。その後、吸着カラムを、カラム体積の2倍量のエタノールで溶出し、得られた溶出液を濃縮した後、凍結乾燥してボイセンベリー果汁抽出物粉末(4.40g)(プロアントシアニジン含有量0.13%)を得た。この粉末を脱イオン水に溶解して、ボイセンベリーの果汁抽出物溶液(10mg/mL)を調製した。
8〜11週齢のウイスターラットの胸部大動脈を2〜3mmに切断し、リン酸緩衝液20mLを満たしたマグヌス実験装置(AP−5型、いわしや岸本医科産業株式会社製)に付し、300mgの張力を負荷した。平衡化し、張力のベースラインが安定した後、収縮剤として10μMノルエピネフリン(NE)を0.2mL添加した(NE終濃度0.1μM)。張力が3000mg程度に上昇して一定となった後、各サンプル溶液を、オーガンバス内の初発濃度が0.01μg/mLになるように添加し、続いてオーガンバス内の濃度が0.1、1、10、30、60μg/mL、最後に終濃度が100μg/mLになるように累積添加した。サンプルの添加による張力の減少量を、各サンプルを添加していない値を100としたときの百分率を血管拡張率として、平均値±標準偏差で示した(n=4)。結果を図6に示す。
(1)サンプル溶液の調製
例1で得られたボイセンベリーの種子抽出物と、例5のボイセンベリー果汁抽出物の製造方法に従って製造した果汁抽出物(プロアントシアニジン含有量0.13%)を、メタノールに溶解(1mg/mL)して、種子抽出物溶液、および果汁抽出物溶液とした。
メタノールに溶解したボイセンベリー種子抽出物溶液、および果汁抽出物溶液を、例1(e)プロアントシアニジン成分の分析に記載の方法に従って、分析した。結果を表4に示す。
例1のボイセンベリー種子抽出物の製造方法の工程(c)において、ポリフェノール吸着カラムをカラム体積の2倍量の60%エタノールで溶出後、さらに60%アセトン水溶液で溶出し、かつ凍結乾燥を行わなかった以外は、例1に従って製造したボイセンベリー種子抽出物と、例5のボイセンベリー果汁抽出物の製造方法において、ポリフェノール吸着カラムをカラム体積の2倍量の60%エタノールで溶出後、さらに60%アセトン水溶液で溶出し、かつ凍結乾燥を行わなかった以外は、例5に従って製造した果汁抽出物を、メタノールに溶解(1mg/mL)して、種子抽出物溶液、および果汁抽出物溶液とした。
上記(2)に従い、ポリフェノール成分の分析を行った。結果を表5に示す。また、末端ユニットと延長ユニットの比から、プロアントシアニジンの平均重合度も測定した。
5種類のプロシアニジン:PC B2(2量体)(Extrasynthese(Genay Cedex,フランス)より入手)、PC B4(2量体)(ボイセンベリー種子ポリフェノールより分取用HPLCにて精製)、PC C1(3量体)、PC 4(4量体)およびPC 5−10(5〜10量体)(カカオポリフェノールより分取用HPLCにて精製)と、エピカテキン(1量体)(Extrasynthese(Genay Cedex,フランス)より入手)とを用いて、血管拡張率を測定した(n=3または4)。
ショ糖58重量%、水飴38重量%、およびクエン酸1重量%に対し、例1で得られた種子抽出物を3重量%の配合率となるように添加し、血圧上昇抑制作用を賦与したキャンディを製造した。得られたキャンディは、味覚等に問題はなく、良質なキャンディであった。
ショ糖70.5重量%、ガムベース20.0重量%、香料3.0重量%、およびクエン酸1.5重量%に対し、例1で得られた分配濃縮種子抽出物を5.0重量%の配合率となるように添加し、血圧上昇抑制作用を賦与したチューインガムを製造した。得られたチューインガムは、味覚等に問題はなく、良質なチューインガムであった。
チョコレート部分が60重量%、クリーム部分が40重量%のチョコレートの中にクリームが入っているチョコレートを製造した。クリーム部分は、砂糖20重量%、油脂44重量%、粉乳30重量%、香料1重量%、および例1で得られた種子抽出物5重量%となるようにそれぞれを配合し、血圧上昇抑制作用を賦与したチョコレートを製造した。得られたチョコレートは、味覚等に問題はなく、良質なチョコレートであった。
異性化糖液3.0重量%、ショ糖3.0重量%、濃縮果汁0.1重量%、酸味料0.3重量%、および香料0.2重量%に対し、例1で得られた分配濃縮種子抽出物を0.1重量%の配合率となるように添加し、100重量%になるように水を加えて、血圧上昇抑制作用を賦与した清涼飲料水を製造した。得られた清涼飲料水は、味覚等に問題はなく、良質な清涼飲料水であった。
含水結晶ブドウ糖93.5重量%、ショ糖エステル1.0重量%、および香料0.5重量%に対し、例1で得られた分配濃縮種子抽出物を10重量%の配合率となるように添加し、加圧成型して、血圧上昇抑制作用を賦与した錠剤を製造した。
Claims (22)
- ボイセンベリー種子抽出物である2量体または3量体のプロアントシアニジンを有効成分とし、かつ該2量体または3量体のプロアントシアニジンがプロペラルゴニジンを含んでなる、血圧上昇抑制剤。
- 抽出物が、水抽出物、有機溶媒抽出物または含水有機溶媒抽出物である、請求項1に記載の血圧上昇抑制剤。
- 抽出物が、含水有機溶媒抽出物である、請求項1または2に記載の血圧上昇抑制剤。
- 請求項1〜3のいずれか一項に記載の血圧上昇抑制剤を含んでなる、血圧上昇抑制用組成物。
- 医薬品である、請求項4に記載の組成物。
- 飲食品である、請求項4に記載の組成物。
- 2量体または3量体のプロアントシアニジンを4重量%以上含有する、請求項4〜6のいずれか一項に記載の組成物。
- 飲食品が、飲料類、菓子類または乳製品である、請求項6または7に記載の組成物。
- 飲食品が、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、または特定保健用食品である、請求項6〜8のいずれか一項に記載の組成物。
- ボイセンベリー種子の抽出物である2量体または3量体のプロアントシアニジンを有効成分とし、かつ該2量体または3量体のプロアントシアニジンがプロペラルゴニジンを含んでなる、血圧上昇抑制用飲食品。
- 飲食品が、飲料類、菓子類または乳製品である、請求項10に記載の飲食品。
- 飲食品が、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、または特定保健用食品である、請求項10または11に記載の飲食品。
- 請求項1〜3のいずれか一項に記載の血圧上昇抑制剤を、飲食品の材料成分に添加することを含んでなる、血圧上昇抑制用飲食品の製造方法。
- ボイセンベリー種子から2量体または3量体のプロアントシアニジンを抽出することを含んでなる、ボイセンベリー種子の抽出物である2量体または3量体のプロアントシアニジンを有効成分とし、かつ該2量体または3量体のプロアントシアニジンがプロペラルゴニジンを含んでなる、血圧上昇抑制剤の製造方法。
- ボイセンベリー種子から水、有機溶媒または含水有機溶媒を用いて2量体または3量体のプロアントシアニジンを抽出することを含んでなる、請求項14に記載の血圧上昇抑制剤の製造方法。
- 熱水処理をしたボイセンベリー種子から2量体または3量体のプロアントシアニジンを抽出することを含んでなる、請求項14または15に記載の血圧上昇抑制剤の製造方法。
- ボイセンベリー種子がボイセンベリー搾汁滓から得られる、請求項14〜16のいずれか一項に記載の血圧上昇抑制剤の製造方法。
- ボイセンベリー種子と果皮を含むボイセンベリー搾汁滓から、ボイセンベリー種子の抽出物である2量体または3量体のプロアントシアニジンを有効成分とする血圧上昇抑制剤を製造する方法であって、
a)前記搾汁滓を乾燥させて得られる乾燥搾汁滓から、果皮塊を選択的に粉砕し、種子をふるい分ける工程、
b)前記工程a)で得られた種子を細かく砕き、必要に応じて脱脂用有機溶媒を用いて抽出し有機溶媒分を除去し残部を乾燥し、ボイセンベリー種子粉末を得る工程、および
c)前記工程b)で得られた種子粉末を、水、有機溶媒または含水有機溶媒を用いて抽出して得られた抽出液を、ポリフェノール吸着剤と接触させた後、その吸着剤への吸着成分をアルコール系溶出溶媒を用いて溶出し、必要に応じて得られた溶出分画を濃縮し、目的のボイセンベリー種子抽出物を得る工程
を含んでなる、方法。 - 前記工程a)の選択的粉砕が、種子の損傷を抑えつつ、乾燥搾汁滓から果皮塊を、粉砕器によって圧縮粉砕することである、請求項18に記載の方法。
- 前記工程b)において、工程a)で得られた種子を細かく砕く前に、種子を熱水処理する工程
をさらに含んでなる、請求項18または19に記載の方法。 - d)前記工程c)で得られたボイセンベリー種子抽出物を、オクタノール/水分配係数0〜1の溶媒で水と分配し、必要に応じて得られた溶媒相を濃縮し、濃縮分配ボイセンベリー種子抽出物を得る工程
をさらに含んでなる、請求項18〜20のいずれか一項に記載の方法。 - オクタノール/水分配係数0〜1の溶媒が、酢酸エチル、酢酸メチル、ギ酸エチル、またはブタノールからなる群から選択される1以上の溶媒である、請求項21に記載の方法。
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