KR101018404B1 - 정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물 - Google Patents

정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 정금나무 잎 추출물이 혈중 총콜레스테롤을 감소시키고, HDL(highdensitylipoprotein) 콜레스테롤을 증가시키며, LDL(low density lipoprotein) 콜레스테롤을 감소시킴으로써 콜레스테롤 저하용 조성물, 또는 건강기능식품의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있다.
정금나무, 잎, 고콜레스테롤 저하, 혈중 콜레스테롤 저하

Description

정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물{Compositions for reducing cholesterol comprising extracts of Vaccinium oldhami Miquel leaf as an active ingredient}
본 발명은 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물, 또는 건강기능식품에 관한 것이다.
정금나무(Vaccinium oldhami Miquel)는 낙엽관목으로서 높이 2~3 cm이고 가지는 짙은 갈색이며 어린 가지는 회갈색이고 선모가 있다. 잎은 호생하며 타원형, 긴 타원형 또는 난형이고 첨두(尖頭)이며 넓은 예저이고 길이 3~8 cm, 나비 2~4 cm로서 톱니 끝이 선모상으로 된다. 어린 잎은 붉은빛이 돌며 양면 맥 위에 털이 있고 표면에 털이 있거나 없으며 엽병은 길이 1~2.5 cm로서 짧은 털이 있다. 꽃은 6~7월에 피고 길이 3~6 cm로서 새가지 끝에 총상으로 달려 쳐지며 선모와 잔털이 있고 포는 피침형 또는 좁은 난형이며 예첨두(銳尖頭)이고 길이 4~7 mm로서 열매가 달릴 때까지 일부분이 남아 있으며 소화경은 길이 1~3 mm이다. 꽃받침잎은 삼각형이고 화관은 종형(鐘形)이며 길이 4~5 mm 로서 붉은빛이 도는 연한 황갈색이고 털이 없으며 끝이 5개로 갈라진다. 수술은 10개이고 수술대에 털이 있으며 자방은 10실이고 열매는 둥글며 지름 6~8 mm 로서 9월에 익고 백분(白粉)으로 덮여 있으며 신맛이 있으나 먹을 수 있다. 과실은 생식하나 술 또는 잼으로 이용하며, 그 잎은 이용되고 있지 않으며 정금나뭇가지에서는 아세틸콜린에스테라제 저해제가 분리된 바가 있다(Jae Hyeok Lee, et al., Arch Pharm Res, 27(1), 53-56, 2004).
콜레스테롤은 모든 동물 조직에서 볼 수 있는 필수 신체성분인데, 특히 뇌나 신경조직에 많이 농축되어 있으며, 담즙과 비타민 D의 합성을 위한 전구물질이다. 또한, 콜레스테롤은 테스토스테론과 에스트로젠 같은 성호르몬의 합성을 위한 시작물질이지만 그 양에서 문제가 된다. 콜레스테롤은 3가지의 지단백의 성분이 되는데, LDL(low density lipoprotein), HDL(high density lipoprotein) 및 VLDL(very low density lipoprotein)이 그것이다. LDL과 HDL은 그 구성성분에서 중성지방의 양이 40%로 적으며 나머지 구성은 모두 콜레스테롤로 이루어진다.
HDL(High Density Lipoprotein) 콜레스테롤은 혈관 벽의 콜레스테롤을 제거하는 인자로 알려져 있다. 혈중 중성지방이 높으면 HDL이 낮아지게 되는데, HDL은 조직의 콜레스테롤을 간으로 운반하여 체외로 배설하는 일을 하므로 혈관 청소부 역할을 한다. 그리고, 리포프로테인(Lipoprotein)은 지단백이라 하며, 리피 드(Lipid)(지질, 일종의 지방질 또는 기름기)와 프로테인(Protein)(단백질)이 결합된 복합체(복합 단백질)를 말한다. 지방 그 자체로는 우리 몸에 흡수가 안 되기 때문에 단백질과 결합하여 이동하는데, 이때 지단백은 혈액 내에서 지방(fat)과 콜레스테롤(cholesterol)을 운반하는 역할을 한다.
LDL(low density lipoprotein) 콜레스테롤은 심장병이나 동맥경화를 촉진하는 인자로 알려진 있으며, 이는 40% 이상의 많은 양의 콜레스테롤을 함유하고 있기 때문이다. 또한, 당뇨의 경우에 인슐린 저항성과 심혈관계 합병증을 촉진한다.
고콜레스테롤혈증은 병이 상당히 진행될 때까지 증상이 거의 없는 편이고, 심장마비 같은 가슴 통증이 있으며 심장병의 위험을 증가시킨다. 또한, 다리의 동맥이 막히거나 좁아지기 때문에 보행시 장단지 통증 등을 유발한다. 그 원인은 지방이나 콜레스테롤이 높은 음식을 섭취하는 것이며, 그 외에도 콜레스테롤 대사에 이상이 있는 유전질환이나 당뇨병(diabetes mellitus), 신장질환(kidney disease), 간질환(liver disease) 또는 갑상선부전증(hypothyroidism)의 원인으로 콜레스테롤의 수치가 높아지기도 한다. 유전성 고콜레스테롤의 원인에는 여러 가지가 보고 되어 있는데, 그 중 대표적인 것이 19번 염색체의 단완의 13.2부분(19q13.2)에 존재하는 LDL 수용체를 만드는 유전자의 이상에 의한 것, 및 2번 염색체의 단완의 24부분에 존재하는 아폴리포프로테인(apolipoprotein) B-100의 LDL 수용체 결합부분(APOB 유전자)의 돌연변이에 의한 것이 있다(FH type B). 또한, 원인이 완전히 밝혀지지는 않았으나 1번 염색체의 단완의 34.1-32(1p34.1-32)부분의 이상에 의한 것, 및 15번 염색체의 장완의 25-26(15q25-26)부분에 연관된 고콜레스테롤이 있다.
고콜레스테롤의 치료는 포화지방의 섭취를 줄이는 것이 가장 효율적이며, 가용 섬유질(과일, 야채, 마른콩, 곡류)을 많이 섭취하고 적색을 띄는 육류보다는 생선을 선택하는 것이 좋으며, 패스트푸드나 자판기 음식은 줄이고 주당 4개 이상의 계란을 먹지 말아야 한다.
고지혈증과 고콜레스테롤혈증의 개선을 위해서 콜레스테롤 합성저해제가 다각적으로 연구되어 있는데, 주로 콜레스테롤 합성의 주된 조절효소인 3-하이드록시-3-메틸글루타릴 코엔자임 A(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A)를 낮추는 피부린산 유도체 계통들의 약물들이 개발되어 사용되고 있다. 그러나 이들은 장기간 복용할 때 지용성 비타민 결핍증, 간 및 신장의 기능이 저하되는 부작용을 동반한다.
따라서, 천연물을 이용하여 인체에 대하여 안전하고 부작용이 없으며 종래의 콜레스테롤 저하제의 물질과 동등하거나 또는 그 이상의 효능을 가지는 새로운 물질을 개발할 필요성이 대두되고 있으며, 심혈관질환으로 이환될 위험을 저하시킬 뿐만 아니라 동맥경화증의 예방이나 치료를 가능하게 할 수 있는 생리활성 물질을 찾아내려는 노력이 이루어지고 있다.
지금까지 귤피를 이용한 실험동물에서 고지혈증 및 동맥경화 예방에 탁월한 효능이 보고된 바 있고, 감귤류의 과피에 많은 플라보논(flavanone)으로서 그 중 헤스페리딘(hesperidin)은 콜레스테롤치를 강하시키고, 혈압강하, 혈중 중성지질저하 효과가 있다고 보고된 바 있다. 또한, 혈중콜레스테롤 및 혈청지질 저하물질 등을 가지는 구기자잎과, 혈청 중성지질 저하작용을 가지는 치커리가 보고된 바 있다. 또한, 귀리, 타우린, 마늘의 알리신(allicin), 양파의 플라보노이드(flavonoids)계는 혈중 콜레스테롤 및 중성지방의 함량을 감소시키는 효과를 가지는 것으로 보고된 바 있다. 그러나 정금나무의 잎에 대한 고콜레스레톨 저하 효과에 대한 연구개발에 대한 보고는 없는 실정이다.
이에, 본 발명자들은 천연물을 이용한 콜레스테롤 저하 물질을 개발하던 중, 정금나무 잎 추출물을 실험동물에 투여한 경우 상기 실험동물의 혈중 총콜레스테롤이 감소하고, HDL(highdensitylipoprotein) 콜레스테롤을 증가하며, LDL(low density lipoprotein) 콜레스테롤을 감소하는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물 및 건강기능식품, 고콜레스테롤혈증 예방 및 치료용 조성물, 및 고콜레스테롤혈증 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 고콜레스테롤혈증 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 건강기능식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 고콜레스테롤혈증 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
아울러, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 상기 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 콜레스테롤 저하방법을 제공한다.
본 발명의 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물은 혈중 콜레스테롤을 저하시킴으로써 혈중 콜레스테롤 저하용 약학제제 및 건강기능식품에 이용될 수 있으며, 상기 혈중 콜레스테롤의 저하가 고콜레스테롤혈증에 효과를 주어 고콜레스테롤혈증 예방 및 치료용 약학제제 및 건강기능식품에 이용될 수 있다.
이하, 본 발명에서 사용되는 용어들을 정의한다.
본 발명에서 사용된 용어 "비만"은 과다한 체지방 축적으로 인해 건강에 위협을 주는 모든 상태를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "예방"은 본 발명의 조성물의 투여로 비만 형성을 억제시키거나 진행을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "치료" 및 "개선"은 본 발명의 조성물의 투여로 비만의 증상이 호전 또는 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 개체에게 소정의 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "개체"는 본 발명의 조성물을 투여하여 비만의 증상이 호전될 수 있는 질환을 가진 인간, 원숭이, 개, 염소, 돼지 또는 쥐 등 모든 동물을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜 또는 위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 이는 개체의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출비율, 치료기간, 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물을 제공한다.
상기 정금나무 잎 추출물은 하기와 같은 단계를 포함하는 방법으로 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다:
1) 건조된 정금나무 잎을 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이의 혼합물을 가하여 추출하는 단계; 및
2) 상기 단계 1)의 추출물을 여과 후 감압농축하여 정금나무 잎 추출물을 수득하는 단계.
상기 방법에 있어서, 단계 1)의 정금나무 잎은 재배한 것 또는 시판하는 것을 모두 사용할 수 있다.
상기 방법에 있어서, 단계 2)의 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이의 혼합 물은 정금나무 잎 무게의 1배 내지 10배를 첨가하여 추출하는 것이 바람직하고, 2배 내지 5배를 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출 온도는 20℃ 내지 100℃인 것이 바람직하며, 40℃ 내지 80℃인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출시간은 1일 내지 5일인 것이 바람직하며, 2일 내지 3일인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출 횟수는 2번 내지 5번 반복 추출하는 것이 바람직하며, 3번 내지 4번 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 2)의 감압농축은 감압농축기(Vacuum Evaporator)를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 추출물은 30℃ 내지 60℃에서 감압농축하는 것이 바람직하고 40℃ 내지 50℃에서 감압농축하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명자들은 정금나무 잎 추출물이 혈중 콜레스테롤 변화에 미치는 영향을 알아보기 위해, 실험모델동물을 이용하여 정상식이를 섭취하는 대조군 및 본 발명의 정금나무 잎 에탄올, 열수, 메탄올 및 70% 에탄올 수용액 추출물을 각각 첨가한 식이를 섭취하는 실험군들로 분리하여 사육한 후 각 동물에서 채취한 혈액을 분석하여 혈중 콜레스테롤의 변화를 측정하였다. 그 결과, 혈중 총콜레스테롤의 경우는 대조군에 비해 각 실험군에서 12.8 ~ 13.6% 정도 감소하였고(표 1 및 도 1 참조), HDL 콜레스테롤의 경우는 대조군에 비해 각 실험군에서 6.2 ~ 6.6% 정도 증가하였으며(표 2 및 도 2 참조), LDL 콜레스테롤의 경우는 대조군에 비해 각 실험군에서 20.1 ~ 20.5% 정도 감소하였다(표 3 및 도 3 참조).
상기 결과, 정금나무 잎 추출물은 적은 양으로도 혈중 총콜레스테롤을 감소시키고, HDL(highdensitylipoprotein) 콜레스테롤을 증가시키며, LDL(low density lipoprotein) 콜레스테롤을 감소시키는 효능이 있음을 알 수 있다. 따라서 본 발명의 정금나무 잎 추출물은 콜레스테롤 저하용 조성물의 유효성분으로 이용할 수 있음을 알 수 있다.
본 발명의 콜레스테롤 저하용 조성물은 정금나무 잎 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물은 임상 투여 시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 본 발명의 조성물은 실제 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 본 발명의 약학적 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 비경구 투여시 피하주사, 정맥주사 또는 근육내 주사를 통할 수 있다.
투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다. 본 발명의 조성물의 유효용량은 0.0001 ~ 10 g/㎏이고, 바람직하기로는 0.0001 g ~ 5 g/kg이며, 하루 1 ~ 6회 투여될 수 있다.
또한, 본 발명은 정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 고콜레스테롤혈증 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명의 정금나무 잎 추출물은 적은 양으로도 혈중 총콜레스테롤을 감소시키고, HDL(highdensitylipoprotein) 콜레스테롤을 증가시키며, LDL(low density lipoprotein) 콜레스테롤을 감소시키는 효능이 있으므로 혈액내 콜레스테롤의 과잉으로 인한 고콜레스테롤혈증 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 상기 조성물을 개체에 투여하는 단 계를 포함하는 콜레스테롤 저하방법을 제공한다.
상기 조성물은 정금나무 잎 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
상기 투여는 경구 또는 비경구가 모두 가능하며, 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다.
상기 투여의 단위는, 개별 투여량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투여량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다. 본 발명의 조성물의 유효용량은 0.0001 ~ 10 g/㎏이고, 바람직하기로는 0.0001 g ~ 5 g/kg이며, 하루 1 ~ 6회 투여될 수 있다.
또한, 본 발명은 정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 건강기능식품을 제공한다.
아울러, 본 발명은 정금나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 고콜레스테롤혈증 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 정금나무 잎 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 정금나무 잎 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 상기 정금나무 잎 추출물은 열수 및 에탄올을 이용하여 추출하는 것이 바람직하다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 정금나무 잎 추출물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 정금나무 잎 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.
상기 외에 본 발명의 정금나무 잎 추출물은 여러가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로 이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 정금나무 잎 추출물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예 및 제조예에 의하여 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 제조예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것이며, 본 발명의 내용이 실시예 및 제조예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 정금나무 잎 추출물의 제조
<1-1> 정금나무 잎의 에탄올 추출물의 제조
본 발명자들은 전라북도 정읍 야산 일대에서 채취한 정금나무 잎을 수돗물을 이용하여 깨끗이 세척 후 바람이 잘 통하는 서늘한 곳에서 3일간 건조 하여 수분을 완전히 제거하였다. 수분이 완전히 제거된 정금나무 잎 1.6 Kg에 에탄올 20 L를 첨가하여 상온에서 3일간 3회 추출한 후 여과한 다음, 상기 여액을 감압농축기를 이용하여 감압하에 농축하여 정금나무 잎의 에탄올 추출물 510 g을 수득하였다.
<1-2> 정금나무 잎의 물 추출물의 제조
상기 실시예 <1-1>에서 에탄올 대신 열수를 사용한 것을 제외하고 동일하게 추출하여 정금나무 잎의 물 추출물 605 g을 수득하였다.
<1-3> 정금나무 잎의 메탄올 추출물의 제조
상기 실시예 <1-1>에서 에탄올 대신 메탄올을 사용한 것을 제외하고 동일하게 추출하여 정금나무 잎의 메탄올 추출물 551 g을 수득하였다.
<1-4> 정금나무 잎의 에탄올 수용액 추출물의 제조
상기 실시예 <1-1>에서 메탄올 대신 70% 에탄올 수용액을 사용한 것을 제외하고 동일하게 추출하여 정금나무 잎의 에탄올 수용액 추출물 532 g을 수득하였다.
<실시예 2> 실험동물의 사육 및 분류
<2-1> 실험동물의 사육
본 발명자들은 실험동물로서 db/db 마우스인 Leprdb/Leprdb 마우스 5주령(The Jackson Labator사, 일본)을 수령받아 각 그룹당 7수를 1주일간의 적응시기를 거친 다음, 체중 범위에 따른 무작위법에 의하여 군(group) 분리를 실시하여 실험에 사용하였다.
상기 db/db 마우스는 렙틴 유전자가 결여되어 있는 유전자 변형쥐이며, 상기 렙틴은 지방세포에서 합성이 되고, 포만중추를 자극시켜 음식물의 섭취억제 및 포만감 형성 등을 조정하는 신경전달물질의 일종으로 몸 안에서 대사활동을 증가시키 고 음식물의 섭취를 억제하며, 몸 안에 축적된 지방량을 줄여준다. 또한, 렙틴 신호가 없으면 심한 비만이 생기고, 이것이 결핍되면 불임이 되고 뼈의 손실을 초래하게 된다(Taylor et al, Calcif Tissue Int 63: 456-458, 1998; Ducy et al, Cell 100: 197-207, 2000). db 유전자의 산물은 렙틴 수용체로 주로 뇌의 시상하부에서 작용하고, 지방조직에서 만들어져 분비된 렙틴을 인지하며, 상기 신호를 뇌 세포에 전달하는 기능을 담당한다. 따라서 이들 두 유전자 중 어느 하나라도 결핍되면 과도한 비만이 유도된다.
상기 실험동물들의 사육환경은 (주)쓰리샤인에서 제조된 케이지 시스템(Caging System)에서 온도 22±2℃, 습도 49±5%, 조도 150 ~ 300 Lux, 그리고 조명은 12시간 명암(점등:06:00, 소등:18:00)으로 조정하여 실험기간 동안 일정하게 특정 병원성미생물 부재(specific pathogen free; SPF) 상태로 유지하였다.
<2-2> 실험동물의 분류
본 발명자들은 고형사료(Harlan, 미국) 100 g을 33 ㎖의 멸균수를 이용하여 형태를 만든 후 50℃에서 건조하여 제조한 고형물을 섭취하는 대조군, 고형사료 99 g을 분쇄한 후 정금나무 잎 에탄올 추출물을 1 g을 첨가한 다음 33 ㎖의 멸균수를 이용하여 형태를 만든 후 50℃에서 건조하여 제조한 고형물을 섭취하는 실험군 1, 고형사료 99 g을 분쇄한 후 정금나무 잎 물 추출물을 1 g을 첨가한 다음 33 ㎖의 멸균수를 이용하여 형태를 만든 후 50℃에서 건조하여 제조한 고형물을 섭취하는 실험군 2, 고형사료 99 g을 분쇄한 후 정금나무 잎 메탄올 추출물을 1 g을 첨가한 다음 33 ㎖의 멸균수를 이용하여 형태를 만든 후 50℃에서 건조하여 제조한 고형물을 섭취하는 실험군 3, 고형사료 99 g을 분쇄한 후 정금나무 잎 70% 에탄올 수용액 추출물을 1 g을 첨가한 다음 33 ㎖의 멸균수를 이용하여 형태를 만든 후 50℃에서 건조하여 제조한 고형물을 섭취하는 실험군 4로 나누어 실험하였다. 상기 식이와 식수는 자유롭게 섭취하도록 하였다. 상기 실험동물의 체중 변화량은 5일 간격으로(오전 10:00) 30일 동안 군 단위로 측정하였으며, 30일 경과 후 부검 및 샘플링(sampling)을 하기 위하여 12시간 동안 절식시켰다.
<실시예 3> 실험동물의 혈중 콜레스테롤 측정
본 발명자들은 상기 <실시예 2>의 각 실험군의 마우스들의 눈 모세혈관에서 채취한 혈액을 4℃에서 밤새(overnight) 방치한 후, 12000 rpm에서 10분간 원심분리 하여 얻어진 혈장을 Fuji dry-chem System(FDC3500 V3.0-P06 Machine 942×162)을 이용하여 분석하였다. 모든 혈장 시료는 분석 직전까지 -70℃의 저온냉동고에서 보관하였다.
그 결과, 하기 표 1에서 보는 바와 같이 혈중 총콜레스테롤은 대조군에 비해 실험군 1에서 13.6%, 실험군 2에서 12.8%, 실험군 3에서 13.0% 및 실험군 4에서 13.2% 정도가 각각 감소하였다(표 1 및 도 1). 또한, 표 2에서 보는 바와 같이 HDL 콜레스테롤은 대조군에 비해 실험군 1에서 6.6%, 실험군 2에서 6.2%, 실험군 3에서 6.3% 및 실험군 4에서 6.4% 정도가 각각 증가하였다(표 2 및 도 2). 아울러, LDL 콜레스테롤은 대조군에 비해 실험군 1에서 20.5%, 실험군 2에서 20.1%, 실험군 3에서 20.3% 및 실험군 4에서 20.4% 정도가 각각 감소하였다(표 3 및 도 3).
30일 동안 1% 정금나무 잎 추출물을 섭취한 db/db 마우스의 혈중 총콜레스테롤
샘플 총콜레스테롤(mg/ml)
대조군 189.0
실험군 1 163.3
실험군 2 164.8
실험군 3 164.4
실험군 4 164.1
30일 동안 1% 정금나무 잎 추출물을 섭취한 db/db 마우스의 혈중 HDL-콜레스테롤
샘플 총콜레스테롤(mg/ml)
대조군 108.2
실험군 1 115.3
실험군 2 114.9
실험군 3 115.0
실험군 4 115.1
30일 동안 1% 정금나무 잎 추출물을 섭취한 db/db 마우스의 혈중 LDL-콜레스테롤
샘플 총콜레스테롤(mg/ml)
대조군 85.6
실험군 1 68.1
실험군 2 68.4
실험군 3 68.2
실험군 4 68.1
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제조예를 예시한다.
<제조예 1> : 약학적 제제의 제조
1. 산제의 제조
실시예 <1-1>의 추출물 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
2. 정제의 제조
실시예 <1-1>의 추출물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
3. 캡슐제의 제조
실시예 <1-1>의 추출물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
4. 환의 제조
실시예 <1-3>의 추출물 1 g
유당 1.5 g
글리세린 1 g
자일리톨 0.5 g
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1환 당 4 g이 되도록 제조하였다.
5. 과립의 제조
실시예 <1-3>의 추출물 150 ㎎
대두추출물 50 ㎎
포도당 200 ㎎
전분 600 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 30 % 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 섭씨 60 ℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.
<제제예 2> : 식품의 제조
1. 밀가루 식품의 제조
본 발명의 실시예 <1-2>의 추출물을 0.5~5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
2. 스프 및 육즙(gravies)의 제조
본 발명의 실시예 <1-2>의 추출물을 0.1~5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
3. 그라운드 비프(ground beef)의 제조
본 발명의 실시예 <1-2>의 추출물의 추출물을 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
4. 유제품(dairy products)의 제조
본 발명의 실시예 <1-2>의 추출물을 5~10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
5. 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
본 발명의 실시예 <1-4>의 추출물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 실시예 <1-4>의 추출물의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부),
종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부),
실시예 <1-4>의 추출물(3 중량부),
영지(0.5 중량부),
지황(0.5 중량부)
<제제예 3> : 음료의 제조
1. 건강음료의 제조
액상과당(0.5 %), 올리고당(2 %), 설탕(2 %), 식염(0.5 %), 물(75 %)과 같은 부재료와 본 발명의 실시예 <1-2>의 추출물 5 g을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다.
2. 야채쥬스의 제조
본 발명의 실시예 <1-2>의 추출물 5 g을 토마토 또는 당근 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 건강 증진용 야채쥬스를 제조하였다.
3. 과일쥬스의 제조
본 발명의 실시예 <1-2>의 추출물 1 g을 사과 또는 포도 쥬스 1,000 ㎖ 에 가하여 건강 증진용 과일쥬스를 제조하였다.
본 발명의 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물은 혈중 총콜레스테롤을 감소시키고, HDL(highdensitylipoprotein) 콜레스테롤을 증가시키며, LDL(low density lipoprotein) 콜레스테롤을 감소시킴으로써 고콜레스테롤혈증 또는 동맥경화 등과 같은 질환의 치료제 및 건강기능식품 개발에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 30일 동안 1% 정금나무 잎 에탄올 추출물을 섭취한 db/db 마우스의 혈중 총콜레스테롤 함량을 나타내는 그래프이다.
도 2는 30일 동안 1% 정금나무 잎 에탄올 추출물을 섭취한 db/db 마우스의 혈중 HDL-콜레스테롤 함량을 나타내는 그래프이다.
도 3은 30일 동안 1% 정금나무 잎 에탄올 추출물을 섭취한 db/db 마우스의 혈중 LDL-콜레스테롤 함량을 나타내는 그래프이다.

Claims (11)

  1. 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 약학적 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 콜레스테롤 저하용 약학적 조성물.
  3. 제 2항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 콜레스테롤 저하용 약학적 조성물.
  4. 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 고콜레스테롤혈증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  5. 제 4항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 고콜레스테롤혈증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  6. 제 5항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 고콜레스테롤혈증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  7. 약학적으로 유효한 양의 제 1항의 조성물을 인간을 제외한 동물에 투여하는 단계를 포함하는 콜레스테롤 저하방법.
  8. 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하용 건강기능식품.
  9. 제 8항에 있어서, 상기 추출물은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 콜레스테롤 저하용 건강기능식품.
  10. 정금나무(Vaccinium oldhami Miquel) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 고콜레스테롤혈증 예방 및 개선용 건강기능식품.
  11. 제 10항에 있어서, 상기 추출물은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 고콜레스테롤혈증 예방 및 개선용 건강기능식품.
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