JPWO2018154791A1 - 細胞処理システム及び細胞処理装置 - Google Patents
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Abstract
Description
D=2(s/π)1/2 (1)
ここで、Dは直径、Sは面積を表す。
(準備)
ヒト血液細胞は健康な成人男性から入手した。また、修飾化mRNA(TriLink社)、非接着ディッシュ、15mLチューブ、50mLチューブ、フィコール、サイトフローメータ(BD)、CD34に対する抗体(Miltenyi Biotec)、CD3に対する抗体(Miltenyi Biotec)、MACS(登録商標)バッファ(Miltenyi Biotec)、T細胞培地、低血清培地(Opti−MEM(登録商標)、Gibco)、siRNA導入試薬(Lipofectamine(登録商標)RNAiMAX、ThermoFisherScience)、及びTRA−1−60に対する抗体(BD)を用意した。
遠心機を18℃に設定した。5mLから50mLの血液を採血し、血液にEDTAを加えて優しく混ぜた。また、ヒトリンパ球分離用の媒体(Ficoll−Paque PREMIUM、GEヘルスケア・ジャパン)を5mLずつ2本の15mLチューブに分注した。5mLのPBSを血液に加えて希釈し、チューブ中のヒトリンパ球分離用の媒体の上に5mLずつ重層した。この時、界面を乱さないように、希釈血液をチューブの管壁を伝わらせてゆっくりと媒体上に加えた。
1×107個の単核球と、CD34抗体又はCD3抗体と、を、4℃の溶液100μL中で15分反応させた。反応後、溶液に5mLのMACS(登録商標)バッファ(Miltenyi Biotec)を加え、270gで遠心した。遠心後、上清を除去し、1mLのMACSバッファを添加した。その後、自動磁気細胞分離装置(autoMACS、Miltenyi Biotec)の分離プログラムを利用して、単核球のうち、CD34陽性細胞又はCD3陽性細胞を分離した。
分離した5×106個の単核球を1mLのT細胞培地、又は血液幹・前駆細胞培地に懸濁し、12ウェルプレートに播種し、培養した。培養条件は、CO2濃度が5%、酸素濃度が19%、及び温度が37℃であった。
100μLの低血清培地(Opti−MEM(登録商標)、Gibco)と25μLの初期化因子混合液を混合し、第1の混合液とした。また、112.5μLの低血清培地(Opti−MEM(登録商標)、Gibco)と12.5μLのsiRNA導入試薬(Lipofectamine(登録商標)RNAiMAX、ThermoFisherScience)を混合し、第2の混合液とした。その後、第1の混合液と、第2の混合液と、を混合し、15分室温で静置してリポフェクション反応液とした。
リポフェクションを開始してから7日目に、リポフェクションを合計4回した細胞の密度は、3×106であった。細胞の一部を12ウェルプレートから取り出し、蛍光顕微鏡でGFPの発現を確認したところ、図55に示すように、GFPの発現が確認された。これにより、単核球にmRNAがトランスフェクションし、トランスフェクトされたmRNAからタンパク質が合成されていることが確認された。
リポフェクションを開始してから7日目に、細胞の一部を12ウェルプレートから取り出し、取り出した細胞を、初期化され始めたiPS細胞で特異的に発現する表面抗原であるTRA−1−60に対する抗体であって、Allophycocyanin(APC)蛍光色素で標識された抗体で染色した。その後、蛍光活性化セルソータ(FACS(登録商標)、BD)で、TRA−1−60陽性細胞の割合を確認することによって、細胞においてリプログラミングが開始され、iPS細胞遺伝子が発現し、iPS細胞ができてくる事を確認した。
500mLのPrimate ES Cell Medium(ReproCELL)、及び0.2mLの濃度が10μg/mLのbFGF(Gibco PHG0266)を混合し、bFGF含有ヒトiPS培地を調製した。
実施例2と同じbFGF含有ヒトiPS培地、及びbFGF含有ヒトiPSゲル培地を調製した。フィーダー細胞上でiPS細胞を培養している6ウェルディッシュにCTK溶液を300μL添加し、CO2インキュベーター中で3分間インキュベートした。3分後、インキュベーターからディッシュを取り出し、フィーダー細胞のみがはがれていることを確認し、アスピレータを用いてCTK溶液を取り除いた。CTK溶液を取り除いた後、ディッシュにPBSを500μL添加し、iPS細胞を洗浄後、ディッシュからPBSを取り除き、0.3mLのAccumaxをディッシュに添加し、ディッシュをCO2インキュベーターに入れ、5分間インキュベートした。その後、0.7mLのbFGF含有iPS培地をディッシュに添加し、iPS細胞をシングルセルになるまで懸濁した。
透析チューブを格納する容器として、二酸化炭素透過性ではない容器であるFalcon コニカルチューブ 50 mL(登録商標)と、二酸化炭素透過性の容器であるG−Rex(登録商標、Wilson Wolf)を用いて、容器以外は同条件で細胞を浮遊培養した。その結果、図62に示すように、二酸化炭素透過性の容器を用いて培養したほうが、細胞の生存率は高かった。
iPS細胞を含有するゲル培地を分画分子量が100kDaの透析チューブを備える2つの透析モジュール(Spectrum G235035)のそれぞれに入れた。さらに、透析モジュールを50mL遠心チューブにそれぞれ入れ、遠心チューブ内の透析チューブの周囲にゲル培地を入れた。また、iPS細胞を含有するゲル培地を別の50mL遠心チューブに直接入れた。
Claims (116)
- 筐体と、
前記筐体を内包する外側筐体と、
前記筐体に設けられた、前記筐体外から吸引された気体を浄化する吸気浄化フィルターと、
前記外側筐体内の気体が、前記吸気浄化フィルターを経て前記筐体内に吸引され、前記筐体内の気体が、前記外側筐体内に排出されるよう、前記気体を、前記外側筐体内において、前記筐体内外に循環させる循環装置と、
前記筐体内に配置される、細胞を処理するための細胞処理装置と、
を備える、細胞処理システム。 - 前記外側筐体に圧力調整孔が設けられている、請求項1に記載の細胞処理システム。
- 前記循環装置が、前記筐体に設けられた、前記筐体内から気体を吸引し、浄化した前記気体を前記筐体外に排出する気体排出装置を備える、請求項1に記載の細胞処理システム。
- 前記気体排出装置が、
前記筐体内の気体を前記筐体外に排気する排気装置と、
前記排気装置で吸引された前記気体を浄化する排気浄化フィルターと、
を備える、請求項3に記載の細胞処理システム。 - 前記排気浄化フィルターが、前記排気装置の上流側に配置されている、請求項4に記載の細胞処理システム。
- 前記排気浄化フィルターを遮蔽するように前記排気浄化フィルターに取り付けることができる遮蔽部材をさらに備える、請求項5に記載の細胞処理システム。
- 前記遮蔽部材が、
前記排気浄化フィルターを前記筐体内から遮蔽するように前記排気浄化フィルターに取り付けることができる筐体側遮蔽部材と、
前記排気浄化フィルターを前記排気装置から遮蔽するように前記排気浄化フィルターに取り付けることができる排気装置側遮蔽部材と、
を備える、請求項6に記載の細胞処理システム。 - 前記排気浄化フィルターを滅菌する滅菌装置をさらに備える、請求項6又は7に記載の細胞処理システム。
- 前記排気装置の下流側に配置される第2の排気浄化フィルターをさらに備える、請求項5に記載の細胞処理システム。
- 前記第2の排気浄化フィルターを遮蔽するように前記第2の排気浄化フィルターに取り付けることができる遮蔽部材をさらに備える、請求項9に記載の細胞処理システム。
- 前記遮蔽部材が、前記第2の排気浄化フィルターを前記排気装置から遮蔽するように前記第2の排気浄化フィルターに取り付けることができる排気装置側遮蔽部材を備える、請求項10に記載の細胞処理システム。
- 前記第2の排気浄化フィルターを滅菌する滅菌装置をさらに備える、請求項10又は11に記載の細胞処理システム。
- 前記循環装置が、前記筐体に設けられた、前記吸気浄化フィルターで浄化される前記気体を前記筐体外から吸引する導入装置を備える、請求項1から12のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記吸気浄化フィルターが、前記導入装置の下流側に配置されている、請求項13に記載の細胞処理システム。
- 前記吸気浄化フィルターを遮蔽するように前記吸気浄化フィルターに取り付けることができる遮蔽部材をさらに備える、請求項14に記載の細胞処理システム。
- 前記遮蔽部材が、
前記吸気浄化フィルターを前記筐体内から遮蔽するように前記吸気浄化フィルターに取り付けることができる筐体側遮蔽部材と、
前記吸気浄化フィルターを前記導入装置から遮蔽するように前記吸気浄化フィルターに取り付けることができる導入装置側遮蔽部材と、
を備える、請求項15に記載の細胞処理システム。 - 前記吸気浄化フィルターを滅菌する滅菌装置をさらに備える、請求項15又は16に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内が、前記筐体外と比較して陰圧になる、請求項1から17のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記細胞処理装置において、幹細胞が培養される、請求項1から18のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内の前記細胞処理装置が配置される空間を滅菌する滅菌装置をさらに備える、請求項1から19のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内の前記細胞処理装置が配置される空間の温度を管理する温度管理装置をさらに備える、請求項1から20のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内の前記細胞処理装置が配置される空間の二酸化炭素濃度を管理する二酸化炭素濃度管理装置をさらに備える、請求項1から21のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内が複数の領域に区分される、請求項1から22のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記細胞処理装置が、
細胞を含む溶液が通過する導入前細胞送液路と、
前記導入前細胞送液路に接続され、前記細胞に多能性誘導因子を導入して誘導因子導入細胞を作製する因子導入装置と、
誘導因子導入細胞を培養して幹細胞からなる複数の細胞魂を作製する細胞塊作製装置と、
を備える、請求項1から23のいずれか1項に記載の細胞処理システム。 - 筐体と、
前記筐体に設けられた、前記筐体外から吸引された気体を浄化する吸気浄化フィルターと、
前記筐体から排出された気体を、前記吸気浄化フィルターに返送するための返送部材と、
前記筐体内の気体が、前記返送部材内に排出され、前記返送部材内の気体が、前記吸気浄化フィルターを経て前記筐体内に吸引されるよう、前記気体を、前記筐体と、前記返送部材と、の間で循環させる循環装置と、
前記筐体内に配置される、細胞を処理するための細胞処理装置と、
を備える、細胞処理システム。 - 前記返送部材が、前記筐体と勘合する形状を有する、請求項25に記載の細胞処理システム。
- 前記返送部材が、
前記筐体の底面と接する、内部が空洞である基部と、
前記基部に設けられた第1開口と前記筐体の第1端面に設けられた通風部を連通させる第1カバーと、
前記基部に設けられた第2開口と前記筐体の第2端面に設けられた通風部を連通させる第2カバーと、
を備える、請求項25又は26に記載の細胞処理システム。 - 前記返送部材がダクトである、請求項25に記載の細胞処理システム。
- 前記循環装置が、前記筐体に設けられた、前記筐体内から気体を吸引し、浄化した前記気体を前記返送部材内に排出する気体排出装置を備える、請求項25から28のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記気体排出装置が、
前記筐体内の気体を前記返送部材内に排気する排気装置と、
前記排気装置で吸引された前記気体を浄化する排気浄化フィルターと、
を備える、請求項29に記載の細胞処理システム。 - 前記排気浄化フィルターが、前記排気装置の上流側に配置されている、請求項30に記載の細胞処理システム。
- 前記排気浄化フィルターを遮蔽するように前記排気浄化フィルターに取り付けることができる遮蔽部材をさらに備える、請求項31に記載の細胞処理システム。
- 前記遮蔽部材が、
前記排気浄化フィルターを前記筐体内から遮蔽するように前記排気浄化フィルターに取り付けることができる筐体側遮蔽部材と、
前記排気浄化フィルターを前記排気装置から遮蔽するように前記排気浄化フィルターに取り付けることができる排気装置側遮蔽部材と、
を備える、請求項32に記載の細胞処理システム。 - 前記排気浄化フィルターを滅菌する滅菌装置をさらに備える、請求項32又は33に記載の細胞処理システム。
- 前記排気装置の下流側に配置される第2の排気浄化フィルターをさらに備える、請求項31に記載の細胞処理システム。
- 前記第2の排気浄化フィルターを遮蔽するように前記第2の排気浄化フィルターに取り付けることができる遮蔽部材をさらに備える、請求項35に記載の細胞処理システム。
- 前記遮蔽部材が、前記第2の排気浄化フィルターを前記排気装置から遮蔽するように前記第2の排気浄化フィルターに取り付けることができる排気装置側遮蔽部材を備える、請求項36に記載の細胞処理システム。
- 前記第2の排気浄化フィルターを滅菌する滅菌装置をさらに備える、請求項36又は37に記載の細胞処理システム。
- 前記循環装置が、前記筐体に設けられた、前記吸気浄化フィルターで浄化される前記気体を前記返送部材内から吸引する導入装置をさらに備える、請求項25から38のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記吸気浄化フィルターが、前記導入装置の下流側に配置されている、請求項39に記載の細胞処理システム。
- 前記吸気浄化フィルターを遮蔽するように前記吸気浄化フィルターに取り付けることができる遮蔽部材をさらに備える、請求項40に記載の細胞処理システム。
- 前記遮蔽部材が、
前記吸気浄化フィルターを前記筐体内から遮蔽するように前記吸気浄化フィルターに取り付けることができる筐体側遮蔽部材と、
前記吸気浄化フィルターを前記導入装置から遮蔽するように前記吸気浄化フィルターに取り付けることができる導入装置側遮蔽部材と、
を備える、請求項41に記載の細胞処理システム。 - 前記吸気浄化フィルターを滅菌する滅菌装置をさらに備える、請求項41又は42に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内が、前記返送部材内と比較して陰圧になる、請求項25から43のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記細胞処理装置において、幹細胞が培養される、請求項25から44のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内の前記細胞処理装置が配置される空間を滅菌する滅菌装置をさらに備える、請求項25から45のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内の前記細胞処理装置が配置される空間の温度を管理する温度管理装置をさらに備える、請求項25から46のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内の前記細胞処理装置が配置される空間の二酸化炭素濃度を管理する二酸化炭素濃度管理装置をさらに備える、請求項25から47のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記筐体内が複数の領域に区分される、請求項25から48のいずれか1項に記載の細胞処理システム。
- 前記細胞処理装置が、
細胞を含む溶液が通過する導入前細胞送液路と、
前記導入前細胞送液路に接続され、前記細胞に多能性誘導因子を導入して誘導因子導入細胞を作製する因子導入装置と、
誘導因子導入細胞を培養して幹細胞からなる複数の細胞魂を作製する細胞塊作製装置と、
を備える、請求項25から49のいずれか1項に記載の細胞処理システム。 - 細胞を処理する細胞処理器具と、
前記細胞処理器具を包埋する包埋部材と、
前記包埋部材の外と前記包埋部材内の前記細胞処理器具とを連通させる連通送液路と、
を備える、細胞処理装置。 - 前記包埋部材がガラス又は樹脂からなる、請求項51に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材が金属からなる、請求項51に記載の細胞処理装置。
- 前記連通送液路内の液体を送液するための、前記包埋部材の外部に配置される駆動部をさらに備える、請求項51から53のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記駆動部が、前記包埋部材の外壁に接続される、請求項54に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材内に、前記駆動部から駆動力が伝達される従動部が設けられており、当該従動部が、前記連通送液路に接続されている、請求項54又は55に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、血液から単核球を分離する、前記包埋部材の内部に配置された単核球分離部を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材の外部に配置される、血液及び血液細胞の少なくともいずれかを保存する血液保存部をさらに備え、
前記連通送液路が、前記血液保存部と前記単核球分離部を連通させる血液送液路を備える、請求項57に記載の細胞処理装置。 - 前記包埋部材の外部に配置される、単核球を分離するための分離剤を保存する分離剤保存部をさらに備え、
前記連通送液路が、前記分離剤保存部と前記単核球分離部を連通させる分離剤送液路を備える、請求項57又は58に記載の細胞処理装置。 - 前記細胞処理器具が、細胞を単離する、前記包埋部材の内部に配置されたフィルターを備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、前記包埋部材の内部に配置された単核球精製フィルターを備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、
血液から単核球を分離する、前記包埋部材の内部に配置された単核球分離部と、
前記包埋部材の内部に配置された単核球精製フィルターと、
前記単核球分離部と前記単核球精製フィルターを連通させる、前記包埋部材の内部に配置された単核球送液路と、
を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。 - 前記単核球送液路内の液体を送液するための、前記包埋部材の外部に配置される駆動部をさらに備える、請求項62に記載の細胞処理装置。
- 前記駆動部が、前記包埋部材の外壁に接続される、請求項63に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材内に、前記駆動部から駆動力が伝達される従動部が設けられており、当該従動部が、前記単核球送液路に接続されている、請求項63又は64に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、細胞に多能性誘導因子を導入して誘導因子導入細胞を作製する、前記包埋部材の内部に配置された因子導入部を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材の外部に配置される、多能性誘導因子を保存する因子保存部をさらに備え、
前記連通送液路が、前記因子保存部と前記因子導入部を連通させる因子送液路を備える、請求項66に記載の細胞処理装置。 - 前記因子導入部において、RNAリポフェクションにより、前記細胞に前記多能性誘導因子が導入される、請求項66又は67に記載の細胞処理装置。
- 前記多能性誘導因子がDNA、RNA、又はタンパク質である、請求項68に記載の細胞処理装置。
- 前記多能性誘導因子がベクターに組み込まれている、請求項66又は67に記載の細胞処理装置。
- 前記ベクターがセンダイウイルスベクターである、請求項70に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、
血液から単核球を分離する、前記包埋部材の内部に配置された単核球分離部と、
細胞に多能性誘導因子を導入して誘導因子導入細胞を作製する、前記包埋部材の内部に配置された因子導入部と、
前記単核球分離部と前記因子導入部を連通させる、前記包埋部材の内部に配置された導入前細胞送液路と、
を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。 - 前記導入前細胞送液路内の液体を送液するための、前記包埋部材の外部に配置される駆動部をさらに備える、請求項72に記載の細胞処理装置。
- 前記駆動部が、前記包埋部材の外壁に接続される、請求項73に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材内に、前記駆動部から駆動力が伝達される従動部が設けられており、当該従動部が、前記導入前細胞送液路に接続されている、請求項73又は74に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、
前記包埋部材の内部に配置された単核球精製フィルターと、
細胞に多能性誘導因子を導入して誘導因子導入細胞を作製する、前記包埋部材の内部に配置された因子導入部と、
前記単核球精製フィルターと前記因子導入部を連通させる、前記包埋部材の内部に配置された導入前細胞送液路と、
を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。 - 前記導入前細胞送液路内の液体を送液するための、前記包埋部材の外部に配置される駆動部をさらに備える、請求項76に記載の細胞処理装置。
- 前記駆動部が、前記包埋部材の外壁に接続される、請求項77に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材内に、前記駆動部から駆動力が伝達される従動部が設けられており、当該従動部が、前記導入前細胞送液路に接続されている、請求項76又は77に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、多能性誘導因子を導入した誘導因子導入細胞を培養する、前記包埋部材の内部に配置された初期化培養器を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材の外部に配置される、血液細胞培地を保存する血液細胞培地保存部をさらに備え、
前記連通送液路が、前記血液細胞培地保存部と前記初期化培養器を連通させる培地送液路を備える、請求項80に記載の細胞処理装置。 - 前記血液細胞培地が、前記初期化培養器に連続的に補給される、請求項81に記載の細胞処理装置。
- 前記血液細胞培地が、前記初期化培養器に所定のタイミングで補給される、請求項81に記載の細胞処理装置。
- 前記血液細胞培地を冷蔵保存する、前記包埋部材の外部に配置される冷蔵保存部をさらに備える、請求項81に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材の外部に配置される、幹細胞培地を保存する幹細胞培地保存部をさらに備え、
前記連通送液路が、前記幹細胞培地保存部と前記初期化培養器を連通させる培地送液路を備える、請求項80に記載の細胞処理装置。 - 前記幹細胞培地が、前記初期化培養器に連続的に補給される、請求項85に記載の細胞処理装置。
- 前記幹細胞培地が、前記初期化培養器に所定のタイミングで補給される、請求項85に記載の細胞処理装置。
- 前記幹細胞培地を冷蔵保存する、前記包埋部材の外部に配置される冷蔵保存部をさらに備える、請求項85に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材の外部に配置される、廃液を保管する廃液保管部をさらに備え、
前記連通送液路が、前記初期化培養器と前記廃液保管部を連通させる廃液送液路を備える、請求項80に記載の細胞処理装置。 - 前記初期化培養器が、
前記誘導因子導入細胞と培地が入れられる透析チューブと、
前記透析チューブが入れられ、前記透析チューブの周囲に培地が入れられる容器と、
を備える、浮遊培養器
を備える、
請求項80に記載の細胞処理装置。 - 前記細胞処理器具が、
細胞に多能性誘導因子を導入して誘導因子導入細胞を作製する、前記包埋部材の内部に配置された因子導入部と、
前記誘導因子導入細胞を培養する、前記包埋部材の内部に配置された初期化培養器と、
前記因子導入部と前記初期化培養器を連通させる、前記包埋部材の内部に配置された導入細胞送液路と、
を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。 - 前記導入細胞送液路内の液体を送液するための、前記包埋部材の外部に配置される駆動部をさらに備える、請求項91に記載の細胞処理装置。
- 前記駆動部が、前記包埋部材の外壁に接続される、請求項92に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材内に、前記駆動部から駆動力が伝達される従動部が設けられており、当該従動部が、前記導入細胞送液路に接続されている、請求項91又は92に記載の細胞処理装置。
- 前記駆動部と前記従動部が磁力により接続される、請求項94に記載の方法。
- 前記細胞処理器具が、樹立された幹細胞からなる複数の細胞塊を拡大培養する、前記包埋部材の内部に配置された拡大培養器を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材の外部に配置される、幹細胞培地を保存する幹細胞培地保存部をさらに備え、
前記連通送液路が、前記幹細胞培地保存部と前記拡大培養器を連通させる培地送液路を備える、請求項96に記載の細胞処理装置。 - 前記幹細胞培地が、前記拡大培養器に連続的に補給される、請求項97に記載の細胞処理装置。
- 前記幹細胞培地が、前記拡大培養器に所定のタイミングで補給される、請求項97に記載の細胞処理装置。
- 前記幹細胞培地を冷蔵保存する、前記包埋部材の外部に配置される冷蔵保存部をさらに備える、請求項97に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材の外部に配置される、廃液を保管する廃液保管部をさらに備え、
前記連通送液路が、前記拡大培養器と前記廃液保管部を連通させる廃液送液路を備える、請求項96に記載の細胞処理装置。 - 前記拡大培養器が、
前記誘導因子導入細胞と培地が入れられる透析チューブと、
前記透析チューブが入れられ、前記透析チューブの周囲に培地が入れられる容器と、
を備える、浮遊培養器
を備える、
請求項96に記載の細胞処理装置。 - 前記細胞処理器具が、
前記誘導因子導入細胞を培養する、前記包埋部材の内部に配置された初期化培養器と、
樹立された幹細胞からなる複数の細胞塊を拡大培養する、前記包埋部材の内部に配置された拡大培養器と、
前記初期化培養器と前記拡大培養器を連通させる、前記包埋部材の内部に配置された導入細胞送液路と、
を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。 - 前記導入細胞送液路内の液体を送液するための、前記包埋部材の外部に配置される駆動部をさらに備える、請求項103に記載の細胞処理装置。
- 前記駆動部が、前記包埋部材の外壁に接続される、請求項104に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材内に、前記駆動部から駆動力が伝達される従動部が設けられており、当該従動部が、前記導入細胞送液路に接続されている、請求項104又は105に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、前記導入細胞送液路に設けられた、細胞塊を分割するための、前記包埋部材の内部に配置された細胞分割器をさらに備える、請求項103から104のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、細胞周囲の溶液を置換する溶液置換器を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材の外部に配置される、凍結保存液を含む凍結保存液保存部をさらに備え、
前記連通送液路が、前記凍結保存液保存部と前記溶液置換器を連通させる凍結保存液送液路を備える、請求項108に記載の細胞処理装置。 - 前記包埋部材の外部に配置される、細胞塊を分散させた凍結保存液を保存するための凍結保存容器をさらに備え、
前記連通送液路が、前記溶液置換器と前記凍結保存容器とを連通させる凍結用細胞送液路を備える、請求項109に記載の細胞処理装置。 - 前記細胞処理器具が、
樹立された幹細胞からなる複数の細胞塊を拡大培養する、前記包埋部材の内部に配置された拡大培養器と、
細胞周囲の溶液を置換する溶液置換器と、
前記拡大培養器と前記溶液置換器を連通させる、前記包埋部材の内部に配置された導入細胞送液路と、
を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。 - 前記導入細胞送液路内の液体を送液するための、前記包埋部材の外部に配置される駆動部をさらに備える、請求項111に記載の細胞処理装置。
- 前記駆動部が、前記包埋部材の外壁に接続される、請求項112に記載の細胞処理装置。
- 前記包埋部材内に、前記駆動部から駆動力が伝達される従動部が設けられており、当該従動部が、前記導入細胞送液路に接続されている、請求項112又は113に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、前記導入細胞送液路に設けられた、細胞塊を分割するための、前記包埋部材の内部に配置された細胞分割器をさらに備える、請求項111から114のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
- 前記細胞処理器具が、細胞塊を分割する細胞塊分割器を備える、請求項51から56のいずれか1項に記載の細胞処理装置。
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