WO2016133209A1 - 細胞培養装置、培地交換用カートリッジ、培地交換方法 - Google Patents

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WO2016133209A1
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culture
liquid
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cartridge
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裕嗣 白岩
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東京エレクトロン株式会社
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    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor

Definitions

  • the present invention relates to a cell culture apparatus for culturing cells.
  • the present invention also relates to a medium replacement cartridge used in a cell culture apparatus.
  • the present invention also relates to a medium replacement method using a medium replacement cartridge.
  • Patent Document 1 is known as an example of a medium exchange mechanism.
  • a culture container placed on a medium exchange stage container loading table
  • a culture medium storage container, and a recovery container are connected using different tubes, and culture is performed from the culture medium storage container through one tube.
  • a mechanism is disclosed in which a new culture medium is supplied to a container and an old culture medium is recovered from the culture container to a recovery container via the other tube.
  • a process for the next culture container is started until a series of processes of medium supply, medium exchange, medium recovery, and channel washing is completed for one culture container.
  • the working time for processing a plurality of culture vessels becomes longer.
  • An object of the present invention is to provide a cell culture apparatus, a medium replacement cartridge, and a medium replacement method capable of shortening and automatically replacing a liquid flow path.
  • the cell culture device comprises: An incubator that can accommodate a closed culture vessel; A medium exchange cartridge having a liquid supply channel and a liquid recovery channel, and removable from the culture vessel; A medium supply unit for supplying a liquid medium to the liquid supply channel of the medium replacement cartridge; With the medium replacement cartridge connected to the culture container, the liquid medium in the liquid supply channel is allowed to flow into the culture container and the liquid medium in the culture container is allowed to flow out to the liquid recovery channel.
  • a medium exchange part A medium recovery unit for recovering a liquid medium from the liquid recovery flow path of the medium replacement cartridge, The medium replacement cartridge is movable among the medium supply unit, the medium replacement unit, and the medium recovery unit.
  • the cell culture device comprises: You may further provide the cartridge conveyance part which moves the said culture medium replacement
  • a flow path cleaning section for cleaning the liquid supply flow path and the liquid recovery flow path of the medium replacement cartridge may be movable among the medium supply unit, the medium replacement unit, the medium recovery unit, and the flow path cleaning unit.
  • the culture medium exchange part is provided adjacent to the incubator part, and the culture container can be exchanged via the culture medium replacement cartridge while the culture container is accommodated in the incubator part. Also good.
  • the culture medium recovery part may be provided with a culture medium analysis part for analyzing the recovered liquid medium.
  • the cell culture device comprises: A cartridge storage unit for storing a plurality of unused medium replacement cartridges; A cartridge recovery unit for recovering the used medium replacement cartridge; May be further provided.
  • the liquid supply flow path includes a first inlet that can be connected to the culture medium supply section, a first outlet that can be connected to the inlet of the culture vessel, the first inlet, and the first outlet.
  • a liquid storage chamber that communicates with the vent hole that communicates with the liquid storage chamber;
  • the liquid recovery flow path includes a second inlet that can be connected to the outlet of the culture vessel, a second outlet that can be connected to the culture medium recovery unit, the second inlet and the second outlet.
  • a curved flow path including a plurality of bent portions or curved portions communicating with each other.
  • the curved channel may have a serpentine or spiral shape.
  • the first outlet and the second inlet may be provided adjacent to each other.
  • the medium replacement cartridge according to the present invention comprises: It has a liquid supply channel and a liquid recovery channel, It can be attached to and detached from the closed culture vessel, and can be moved among the medium supply unit, the medium exchange unit, and the medium recovery unit of the cell culture apparatus.
  • the liquid supply flow path includes a first inlet that can be connected to the culture medium supply section, a first outlet that can be connected to the inlet of the culture vessel, the first inlet, and the first outlet.
  • a liquid storage chamber that communicates with the vent hole that communicates with the liquid storage chamber;
  • the liquid recovery flow path includes a second inlet that can be connected to the outlet of the culture vessel, a second outlet that can be connected to the culture medium recovery unit, the second inlet and the second outlet.
  • a curved flow path including a plurality of bent portions or curved portions communicating with each other.
  • the curved channel may have a serpentine or spiral shape.
  • the first outlet and the second inlet may be provided adjacent to each other.
  • the medium exchange method comprises: A medium replacement cartridge having a liquid supply channel and a liquid recovery channel is connected to a medium supply unit, a liquid medium is supplied from the medium supply unit to the liquid supply channel, and the medium replacement cartridge is connected to the medium supply unit.
  • a medium supply step for separating from, The culture medium replacement cartridge is connected to a closed culture container, and the liquid medium in the liquid supply channel is allowed to flow into the culture container and the liquid medium in the culture container is allowed to flow into the liquid recovery path.
  • the medium exchange method according to the present invention comprises: After the culture medium recovery step, a washing step of washing the liquid supply channel and the liquid recovery channel of the medium replacement cartridge may be further provided.
  • the culture medium exchange step may be performed in a state where the culture container is accommodated in an incubator unit.
  • the medium exchange method according to the present invention comprises: A medium analysis step for analyzing the recovered liquid medium may be further provided after the medium recovery step.
  • the culture medium replacement cartridge capable of storing a predetermined amount of liquid culture medium moves between the culture medium supply unit, the culture medium replacement unit, and the culture medium recovery unit, so that the culture container becomes the culture medium supply unit and the culture medium recovery unit.
  • the medium can be exchanged in a state separated from the medium. For this reason, the liquid flow path can be shortened.
  • the liquid flow path is formed in a medium replacement cartridge, that is, a cartridge-type component, the replacement of the liquid flow path is easy.
  • FIG. 1 is a schematic top plan view showing a configuration of an automatic culture system according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 2 is a control block diagram of the automatic culture system according to the embodiment of the present invention.
  • FIG. 3 is a front view showing a container transport unit used in the embodiment of the present invention.
  • FIG. 4 is a schematic plan view showing the configuration in the vicinity of the liquid storage and supply unit and the incubator unit used in the embodiment of the present invention.
  • FIG. 5A is a schematic diagram showing a configuration of a medium replacement cartridge used in the embodiment of the present invention.
  • FIG. 5B is a schematic diagram illustrating a configuration of a first modification of the medium replacement cartridge.
  • FIG. 5C is a schematic diagram illustrating a configuration of a second modification of the medium replacement cartridge.
  • FIG. 6A is a schematic plan view showing a structure of a valve of the medium replacement cartridge of FIG. 5A.
  • FIG. 6B is a cross-sectional view of the valve of FIG. 6A along the line AA.
  • FIG. 7A corresponds to FIG. 6B and is a view for explaining the operation of the valve.
  • FIG. 7B is a diagram corresponding to FIG. 6B for explaining the operation of the valve.
  • FIG. 7C is a diagram corresponding to FIG. 6B for explaining the operation of the valve.
  • FIG. 8A is a diagram corresponding to FIG. 5A and is a view for explaining a medium supply step.
  • FIG. 8B is a diagram corresponding to FIG. 5A and is a diagram for explaining a culture medium supply step.
  • FIG. 8A is a diagram corresponding to FIG. 5A and is a diagram for explaining a culture medium supply step.
  • FIG. 9A is a diagram corresponding to FIG. 5A and is a diagram for explaining a culture medium exchange step.
  • FIG. 9B is a diagram corresponding to FIG. 5A and is a diagram for explaining a medium exchange step.
  • FIG. 10A is a diagram corresponding to FIG. 5A and is a diagram for explaining a culture medium recovery step.
  • FIG. 10B is a diagram corresponding to FIG. 5A and is a diagram for explaining a culture medium recovery step.
  • FIG. 11A is a diagram corresponding to FIG. 5A, for explaining the flow path cleaning step.
  • FIG. 11B is a diagram corresponding to FIG. 5A, for explaining the flow path cleaning step.
  • FIG. 11C is a diagram corresponding to FIG. 5A, for explaining the flow path cleaning step.
  • FIG. 11A is a diagram corresponding to FIG. 5A, for explaining the flow path cleaning step.
  • FIG. 11D is a diagram corresponding to FIG. 5A for explaining the flow path cleaning step.
  • FIG. 12A is an internal top view showing the configuration of the first modified example of the transport container.
  • FIG. 12B is an internal side view showing the configuration of the first modified example of the transport container.
  • FIG. 13 is a diagram corresponding to FIG. 12B for explaining the operation of the transport container.
  • FIG. 14 is a drawing corresponding to FIG. 12A and is an internal top view showing the configuration of the second modified example of the transport container.
  • FIG. 15A is a schematic plan view showing a configuration of a modification of the cell culture device.
  • FIG. 15B is a cross-sectional view taken along line BB of the cell culture device of FIG. 15A.
  • FIG. 15C is a cross-sectional view taken along the line CC of the cell culture device of FIG. 15A.
  • FIG. 15D is a left side view of the cell culture device of FIG. 15A.
  • the culture apparatus according to the present embodiment can be used for culturing all types of cells, including (human) iPS cells, pluripotent stem cells such as (human) ES cells, and chondrocytes such as bone marrow stromal cells (MSC). It can be used when culturing various cells such as dendritic cells.
  • an automatic culture system for automatically culturing iPS cells will be described below. However, it should be noted that this is only an example. That is, it should be noted that the culture apparatus according to the present embodiment can be used even if the cells are not automatically cultured as in the present embodiment.
  • the automatic culture system includes a raw material storage device 10 that stores raw material cells, and a container transport unit that transports a transport container 70 (see FIG. 3) that contains cells and the like in a sealed state. 60 and a transport container 70 transported by the container transport unit 60, take out a closed culture container 75 containing cells from the transport container 70, and culture the cells in the removed culture container 75 inside 20 and 30.
  • the raw material storage device 10 includes an iPS cell establishment device 11 for establishing iPS cells.
  • the raw material storage device 10 includes a unit thermostat, a centrifuge, an automatic blood cell counter, an automatic magnetic cell separator, a flow cytometer, a gene transfer device, and the like.
  • the cell culture devices 20 and 30 of the present embodiment automatically use a plurality (four in the embodiment shown in FIG. 1) of iPS cell automatic culture devices 20 for automatically culturing iPS cells and differentiated cells differentiated from iPS cells. And a plurality (8 in the embodiment shown in FIG. 1) of differentiated cell automatic culturing apparatuses 30 to be cultured.
  • the iPS cell automatic culture device 20 when simply referred to as “cell culture device”, the iPS cell automatic culture device 20, the differentiated cell automatic culture device 30, or the iPS cell automatic culture device 20 and the differentiated cell automatic culture device 30 are used. It means both.
  • source cells such as somatic cells, iPS cells, differentiated cells, or source cells, iPS cells and iPS cells. It means any two or all of differentiated cells.
  • the transport container 70 has a plurality of (eight in FIG. 3) shelves 71 on which the culture containers 75 are placed, and the culture containers 75 are placed on each shelf 71. And the conveyance container 70 will be conveyed by the container conveyance part 60 in the state in which the some culture container 75 was accommodated in the conveyance container 70.
  • FIG. 3 shows that the transport container 70 has a plurality of (eight in FIG. 3) shelves 71 on which the culture containers 75 are placed, and the culture containers 75 are placed on each shelf 71. And the conveyance container 70 will be conveyed by the container conveyance part 60 in the state in which the some culture container 75 was accommodated in the conveyance container 70.
  • the iPS cell automatic culture apparatus 20 includes a housing 22 as shown in FIG. 1, a medium analysis unit 24 for analyzing liquid medium components that change as the iPS cells are cultured, and iPS cells as shown in FIG.
  • the cell inspection / removal unit 25 that inspects and removes iPS cells in a poor state, and stores and supplies a liquid medium or a liquid containing a proteolytic enzyme, and performs pretreatment before seeding iPS cells, or iPS
  • the iPS cell automatic culture apparatus 20 also includes an in-device transport unit 23 that transports the culture container 75 and the like in the iPS cell automatic culture apparatus 20.
  • the liquid storage and supply unit 26 described above also has a function of inverting the culture container 75 upside down.
  • the liquid storage and supply unit 26 described above automatically supplies the liquid medium into the culture container 75 from an inflow port (not shown), thereby automatically replacing the old liquid medium in the culture container 75 with a new liquid medium.
  • the cell inspection removal unit 25 selectively separates defective iPS cells from ECM (Extracellular Matrix) applied to the surface of a film (not shown) of the culture vessel 75 based on the acquired information of iPS cells. Thereafter, the liquid storage and supply unit 26 supplies the liquid medium from the inflow port into the culture vessel 75, thereby pushing out the suspended defective iPS cells from the culture vessel 75 through the outflow port (not shown).
  • a method of selectively detaching the iPS cells in the culture vessel 75 a method of applying ultrasonic waves or light to the iPS cells, a method of applying a physical force from the outside of the culture vessel 75, or the like can be taken. it can. Further, when using such a technique, a proteolytic enzyme may be used in combination.
  • the liquid storage and supply unit 26 peels iPS cells from the ECM applied to the surface of the film of the culture container 75 by appropriately supplying the proteolytic enzyme from the inflow port into the culture container 75. Thereafter, the liquid storage and supply unit 26 supplies the liquid medium from the inflow port into the culture vessel 75, whereby the suspended iPS cells are pushed out of the culture vessel 75 through the outflow port.
  • the extruded iPS cells are diluted into a suspension and then housed (seeded) in a plurality of separate culture vessels 75. In this way, the iPS cell automatic culture apparatus 20 automatically performs the passage of iPS cells.
  • the temperature in the iPS cell automatic culture apparatus 20 is adjusted by the incubator unit 27 so that the temperature becomes about 37 ° C., for example. Further, the gas concentration in the iPS cell automatic culture apparatus 20 is adjusted by the incubator unit 27 by appropriately adding carbon dioxide or nitrogen. Further, the humidity may be adjusted to about 100% by the incubator unit 37 as necessary.
  • the differentiated cell automatic culture apparatus 30 includes a housing 32 as shown in FIG. 1, a medium analysis unit 34 for analyzing liquid medium components that change as the differentiated cells are cultured, and a differentiated cell as shown in FIG.
  • a cell inspection / removal unit 35 that inspects and removes differentiated cells in a poor state, and stores and supplies a liquid medium, a liquid containing a proteolytic enzyme, and performs pretreatment before seeding differentiated cells, or differentiation.
  • the differentiated cell automatic culture apparatus 30 also includes an in-apparatus transport unit 33 that transports the culture vessel 75 and the like in the differentiated cell automatic culture apparatus 30.
  • the liquid storage and supply unit 36 described above automatically replaces the old liquid medium in the culture container 75 with a new liquid medium by appropriately supplying the liquid medium to the culture container 75 from the inlet.
  • the cell test removal unit 35 selectively peels off poorly differentiated cells from the ECM applied to the surface of the film 77 of the culture vessel 75 based on the acquired information of differentiated cells. Thereafter, the liquid storage and supply unit 36 supplies the liquid medium from the inflow port into the culture vessel 75, thereby pushing out the floating poorly differentiated cells from the culture vessel 75 through the outflow port.
  • a method of selectively separating the differentiated cells in the culture vessel 75 a method of applying ultrasonic waves or light to the differentiated cells, a method of applying a physical force from the outside of the culture vessel 75, or the like can be taken. it can. Further, when using such a technique, a proteolytic enzyme may be used in combination.
  • the liquid storage and supply unit 36 peels the differentiated cells from the ECM applied to the surface of the film of the culture container 75 by appropriately supplying the proteolytic enzyme into the culture container 75 from the inflow port. Thereafter, the liquid storage and supply unit 36 supplies the liquid medium from the inflow port into the culture vessel 75, whereby the suspended differentiated cells are pushed out of the culture vessel 75 through the outflow port.
  • the differentiated cells that have been pushed out are diluted into a suspension and then housed (seeded) in a plurality of separate culture vessels 75. In this way, the differentiated cell automatic culture apparatus 30 automatically performs passage of differentiated cells.
  • the temperature in the differentiated cell automatic culture apparatus 30 is adjusted by the incubator unit 37 so that the temperature becomes approximately 37 ° C., for example. Further, the gas concentration in the differentiated cell automatic culture apparatus 30 is adjusted by the incubator unit 37 by appropriately adding carbon dioxide, nitrogen or oxygen. Note that the liquid storage and supply unit 36 of the differentiated cell automatic culture device 30 may supply a liquid medium containing a differentiation-inducing factor when inducing differentiation. Further, the humidity may be adjusted to about 100% by the incubator unit 37 as necessary.
  • the iPS cell automatic culture apparatus 20 is connected to each of a medium analysis unit 24, a cell test removal unit 25, a liquid storage supply unit 26, an incubator unit 27, a discharge unit 28, and an in-device transport unit 23. And has a control unit 29 for controlling them.
  • the control unit 29 manages the status, manages the log, manages the culture schedule, and performs a user interface function with respect to the iPS cell automatic culture apparatus 20.
  • the differentiated cell automatic culture apparatus 30 is connected to and communicates with the medium analysis unit 34, the cell test removal unit 35, the liquid storage and supply unit 36, the incubator unit 37, the discharge unit 38, and the in-device transport unit 33.
  • a control unit 39 manages the status, manages the log, manages the culture schedule, and performs the user interface function with respect to the differentiated cell automatic culture apparatus 30.
  • the above-described iPS cell establishment device 11 has the same configuration as the iPS cell automatic culture device 20 and the differentiated cell automatic culture device 30. That is, the iPS cell establishment device 11 includes a housing 12b as shown in FIG. 1, a medium analysis unit 14 for analyzing a liquid medium as shown in FIG. Any one of the temperature inspection, the humidity, and the gas concentration in the housing 12b, or the cell storage / removal unit 15 for storing and supplying the liquid culture medium or the liquid containing the protease, etc. An incubator unit 17 that automatically adjusts all of these, and a waste liquid containing a used liquid medium, a used cleaning solution, a used reagent, and the like used in the iPS cell establishment device 11 are discharged downward from the housing 12b.
  • the iPS cell establishment device 11 also includes an in-device transport unit 13 that transports the culture container 75 and the like in the iPS cell establishment device 11.
  • the iPS cell establishment device 11 is connected to and communicates with each of the medium analysis unit 14, the cell test removal unit 15, the liquid storage and supply unit 16, the incubator unit 17, the discharge unit 18, and the in-device transport unit 13.
  • a control unit 19 is included.
  • Each control unit 19, 29, 39 is connected to an external device 90 such as a personal computer.
  • the container transport unit 60 of the present embodiment has a holding unit 61 that holds the transport container 70 so as to hang downward, and moves along a rail 65 provided on the ceiling. It has become.
  • the iPS cell automatic culture apparatus 20 has a carry-in portion 21 for carrying a culture container 75 from a transfer container 70.
  • the carry-in unit 21 carries in the iPS cells accommodated in the culture vessel 75 and also carries out the cell carry-in / out unit (not shown) for carrying out the cultured iPS cells, and the materials accommodated in other sealed containers. And a material carrying-in part (not shown) for carrying in.
  • the differentiated cell automatic culture apparatus 30 has a carry-in unit 31 for carrying a culture container 75 from a transfer container 70.
  • the carry-in unit 31 also carries a cell carry-in / out unit (not shown) for carrying in iPS cells contained in the culture vessel 75 and carrying out the cultured differentiated cells, and materials contained in other sealed containers. And a material carrying-in part (not shown) for carrying in.
  • the materials are a liquid medium, a reagent, a cleaning liquid, a culture plate, a vial, a filter, a needle, and the like.
  • the iPS cell establishment device 11 also has a carry-in part 12 a for carrying a transfer container 70.
  • the automatic culture system of the present embodiment includes a sterilizer 1 for sterilizing the inside of the transfer container 70 and a iPS cell cultured in the iPS cell automatic culture apparatus 20 at a predetermined timing.
  • a sterilizer 1 for sterilizing the inside of the transfer container 70 and a iPS cell cultured in the iPS cell automatic culture apparatus 20 at a predetermined timing.
  • an iPS cell analyzer 80 that examines iPS cells
  • a differentiated cell analyzer 85 that receives differentiated cells cultured in the differentiated cell automatic culture device 30 from the carry-in unit 86 at a predetermined timing and examines the differentiated cells.
  • a cryopreservation apparatus 40 that receives the iPS cells, differentiated cells, or both iPS cells and differentiated cells cultured in the automatic culture apparatuses 20 and 30 from the carry-in unit 41 and stores them in a frozen state.
  • cryopreservation devices 40 may be provided, or the entire room may be cooled and the room itself may function as a freezer.
  • a rail 65 is provided on the ceiling of the room, and a container transport unit is provided along the rail 65. 60 may be able to move.
  • a sterilization apparatus that supplies sterilization gas such as hydrogen peroxide gas or high-temperature gas into the transfer container 70 can be cited.
  • Another example of the sterilization apparatus 1 is one that sterilizes the inside of the transport container 70 by irradiating, for example, ⁇ rays or ultraviolet rays from the outside while the transport container 70 is in a closed state.
  • the inside of the transport container 70 may be sterilized using, for example, ⁇ rays or ultraviolet rays.
  • the liquid medium or the like may contain proteins that are damaged by ⁇ rays or ultraviolet rays. In this case, it is desirable to sterilize with a sterilizing gas such as hydrogen peroxide gas or high-temperature gas.
  • liquid storage and supply unit 16 of the iPS cell establishment device 11 any one or two of the liquid storage and supply unit 16 of the iPS cell establishment device 11, the liquid storage and supply unit 26 of the iPS cell automatic culture device 20, and the liquid storage and supply unit 36 of the differentiated cell automatic culture device 30 will be described. Or, all of them will be described as “liquid storage and supply unit 110”.
  • the liquid storage and supply unit 16 of the iPS cell establishment device 11, the liquid storage and supply unit 26 of the iPS cell automatic culture device 20 and the liquid storage and supply unit 36 of the differentiated cell automatic culture device 30 are the same. It has a configuration.
  • any one, any two, or all of the incubator unit 17 of the iPS cell establishment device 11, the incubator unit 27 of the iPS cell automatic culture device 20, and the incubator unit 37 of the differentiated cell automatic culture device 30 will be described. This will be described as “incubator unit 101”.
  • the incubator unit 17 of the iPS cell establishment device 11, the incubator unit 27 of the iPS cell automatic culture device 20, and the incubator unit 37 of the differentiated cell automatic culture device 30 have the same configuration.
  • any one, any two of the medium analysis unit 14 of the iPS cell establishment device 11, the medium analysis unit 24 of the iPS cell automatic culture device 20, and the medium analysis unit 34 of the differentiated cell automatic culture device 30, or All of this will be described as “medium analysis unit 106”.
  • each of the medium analysis unit 14 of the iPS cell establishment device 11, the medium analysis unit 24 of the iPS cell automatic culture device 20, and the medium analysis unit 34 of the differentiated cell automatic culture device 30 has the same configuration. ing.
  • FIG. 4 is a schematic plan view showing the configuration in the vicinity of the liquid storage and supply unit 110 and the incubator unit 101.
  • the liquid storage and supply unit 110 includes a medium replacement cartridge 200 that has a liquid supply channel 201 and a liquid recovery channel 202 (see FIG. 5A) and can be attached to and detached from the culture vessel 75, and a medium.
  • the medium supply unit 102 that supplies the liquid medium to the liquid supply channel 201 of the replacement cartridge 200 and the medium replacement cartridge 200 are connected to the culture container 75, the liquid medium in the liquid supply channel 201 is cultured in the culture container.
  • a medium exchanging unit 103 that allows the medium in the culture vessel 75 to flow out into the liquid recovery channel 202 and a medium recovery unit 104 that recovers the liquid medium from the liquid recovery channel 202 of the medium replacement cartridge 200;
  • a cartridge transport unit 109 that moves the medium replacement cartridge 200 between the medium supply unit 102, the medium exchange unit 103, and the medium collection unit 104.
  • a thin arrow indicates the direction in which the medium replacement cartridge 200 moves
  • a thick arrow indicates the direction in which the liquid medium moves.
  • the culture medium recovery unit 104 is provided with a culture medium analysis unit 106 that analyzes the components of the recovered liquid medium.
  • a flow path cleaning unit 105 for cleaning the liquid supply flow path 201 and the liquid recovery flow path 202 of the medium replacement cartridge 200 is provided.
  • the cartridge transport unit 109 is configured to move the medium replacement cartridge 200 among the medium supply unit 102, the medium replacement unit 103, the medium recovery unit 104, and the flow path cleaning unit 105.
  • a cartridge storage unit 107 that stores a plurality of unused medium replacement cartridges 200 and a cartridge recovery unit 108 that recovers used medium replacement cartridges are further provided. Is provided.
  • the cartridge transport unit 109 periodically discharges the used medium replacement cartridge 200 to the cartridge collection unit 108 and takes out the unused medium replacement cartridge 200 from the cartridge storage unit 107.
  • cartridge transport unit 109 for example, a known transport robot having a hand capable of gripping cartridge-type parts can be used.
  • the liquid supply channel 201 includes a first inlet 211 that can be connected to the culture medium supply unit 102 and a first outlet 212 that can be connected to the inlet of the culture vessel 75. And a liquid storage chamber 213 communicating with the first inflow port 211 and the first outflow port 212, and a vent hole 214 communicating with the liquid storage chamber 213.
  • a filter 218 for preventing entry of foreign matter from outside air is attached to the vent hole 214.
  • the capacity of the liquid storage chamber 213 is about 1 to 1.5 times the capacity of the culture vessel 75 and is preferably larger than the capacity of the culture vessel 75. Specifically, for example, 30 ml.
  • a valve 215 that can be opened and closed is provided in the flow path between the first inlet 211 and the liquid storage chamber 213.
  • a valve 216 that can be opened and closed is also provided in the flow path between the liquid storage chamber 213 and the first outlet 212.
  • a valve 217 that can be opened and closed is also provided in the flow path between the liquid storage chamber 213 and the vent 214. By closing the valves 215, 216, and 217, the liquid storage chamber 213 is sealed.
  • the liquid recovery channel 202 includes a second inlet 221 that can be connected to the outlet of the culture vessel 75, a second outlet 222 that can be connected to the culture medium recovery unit 104, and the second inlet 221 and the second inlet.
  • the curved channel 223 includes a plurality of bent portions or curved portions, so that the channel diameter can be reduced and the channel length can be increased, whereby the old medium flowing out of the culture vessel 75 and the new medium can be formed. It can collect
  • the curved channel 223 has a meandering shape.
  • the meandering shape is obtained. It is not always essential to have the shape, and for example, as shown in FIG. 5B, it may have a spiral shape.
  • the capacity of the curved channel 223 is about 1 to 1.5 times the capacity of the culture vessel 75 and is preferably larger than the capacity of the culture vessel 75. Specifically, for example, 30 ml.
  • the diameter of the curved flow path 223 is preferably 4 mm or less.
  • a valve 225 that can be opened and closed is provided in the flow path between the second inlet 221 and the curved flow path 223.
  • a valve 226 that can be opened and closed is also provided in the flow path between the curved flow path 223 and the second outlet port 222.
  • the curved flow path 223 is sealed by closing the valves 225 and 226.
  • the entire flow path from the second inlet 221 to the second outlet 222 is a thin curved channel 223.
  • a part of the flow path from the second inlet 221 to the second outlet 222 is a tank-like flow path 224 within a range where mixing of the liquid does not occur (for example, within 1/2 of the recovery volume), and the remaining portion May be a narrow curved channel 223.
  • a part of the flow path be a tank-shaped flow path 224.
  • the first outlet 212 and the second inlet 221 are provided adjacent to each other. Thereby, the 1st outflow port 212 and the 2nd inflow port 221 can be easily connected with the inflow port and the outflow port of the culture container 75, respectively.
  • valve 215 between the first inlet 211 and the liquid storage chamber 213, a valve 216 between the liquid storage chamber 213 and the first outlet 212, and a valve between the liquid storage chamber 213 and the vent 214. 217, any one, any two, or all of the valve 225 between the second inlet 221 and the curved flow path 223 and the valve 226 between the curved flow path 223 and the second outlet 222 This will be described as “valve 240”.
  • the valves 215, 216, 217, 225, and 226 have the same configuration.
  • FIG. 6A is a schematic plan view showing the structure of the valve 240
  • FIG. 6B is a cross-sectional view taken along the line AA of the valve 240 in FIG. 6A.
  • the valve 240 has a main body 241 in which a pair of flow paths 243 and 244 are formed, and a sheet-like valve body 242 fixed to the upper surface of the main body 241.
  • the valve body 242 is made of an elastomer, and is bonded to the upper surface of the main body 241 at the peripheral edge portion 242a.
  • One end 243a of one channel 243 and one end 244a of the other channel 244 are open to the upper surface of the main body 241 in a region inside the peripheral edge 242a of the valve body 242.
  • the lower surface of the valve body 242 is in close contact with the upper surface of the main body 241 by the restoring force (elastic force) of the sheet-like valve body 242. Therefore, one end 243a of one channel 243 and one end 244a of the other channel 244 are respectively closed by the valve body 242, and as a result, one channel 243 is blocked from the other channel 244. .
  • valve 240 The operation of the valve 240 will be described with reference to FIGS. 7A to 7C.
  • a cylindrical valve drive mechanism 249 When opening the valve 240, first, as shown in FIG. 7A, a cylindrical valve drive mechanism 249 is pressed against the upper surface of the peripheral portion 242a of the valve body 242, and then, as shown in FIG. The inside of the drive mechanism 249 is evacuated, and the inner region of the peripheral portion 242a of the valve body 242 is deformed so as to expand upward. Thereby, the valve body 242 is separated from the one end 243a of the one flow path 243 and the one end 244a of the other flow path 244, and in the region inside the peripheral edge 242a of the valve body 242, the one flow path 243 is It communicates with the other channel 244.
  • the medium replacement cartridge 200 configured as described above can be manufactured by injection molding a hard resin such as polystyrene.
  • the portion of the valve 240 can be formed from a hard resin and an elastomer by a two-color molding method.
  • the manufacturing method of the cartridge 200 for culture medium replacement is not limited to injection molding, For example, you may manufacture by the layered modeling method using a 3D printer.
  • FIG. 4 ⁇ Medium exchange method>
  • FIGS. 8A to 11D show the flow paths through which the liquid passes.
  • the cartridge transport unit 109 takes out the medium replacement cartridge 200 from the cartridge storage unit 107 and moves it to the medium supply unit 102.
  • the medium storage container 102a is connected to the first inlet 211 of the medium replacement cartridge 200. Then, as shown in FIG. 8B, the valve 215 between the first inlet 211 and the liquid storage chamber 213 and the valve 217 between the liquid storage chamber 213 and the vent 214 are opened. On the other hand, the valve 216 between the liquid storage chamber 213 and the first outlet 212 is closed. In this state, the liquid medium is supplied from the medium storage container 102a via the first inlet 211. Since the valve 216 between the liquid storage chamber 213 and the first outlet 212 is closed, the supplied liquid medium is stored in the liquid storage chamber 213.
  • valve 215 between the first inlet 211 and the liquid storage chamber 213 and the valve 217 between the liquid storage chamber 213 and the vent 214 are also closed, and the liquid storage chamber 213 is sealed.
  • the culture medium supply unit 102 is provided with a valve drive mechanism 249, and the valves 215 and 217 that operate here are opened and closed by the valve drive mechanism 249.
  • the cartridge exchange cartridge 200 is separated from the medium supply unit 102 by the cartridge transport unit 109 in a state where the medium is accommodated in the liquid storage chamber 213, and is transferred to the medium exchange unit 103. And moved.
  • a culture vessel 75 is accommodated in advance in the incubator unit 101 adjacent to the medium exchange unit 103.
  • a decompression pump is connected to the second outlet 222 of the medium exchange cartridge 200.
  • the first outlet 212 and the second inlet 221 of the medium replacement cartridge 200 are respectively connected to the inlet and the outlet of the culture container 75 in a state where the culture container 75 is accommodated in the incubator unit 101. Connected to the outlet.
  • the valve 225 and the valve 226 between the curved channel 223 and the second outlet 222 are opened, and the curved channel 223 is depressurized via the second outlet 222 by a decompression pump.
  • the old medium in the culture vessel 75 flows out from the second inlet 221 into the curved flow path 223, and the new medium in the liquid storage chamber 213 flows into the culture vessel 75 from the first outlet 212.
  • the culture medium exchanging unit 103 is provided with a valve drive mechanism 249, and the valves 216, 217, 225, and 226 operating here are opened and closed by the valve drive mechanism 249.
  • the culture medium is exchanged while the culture vessel 75 is housed in the incubator unit 101 without the culture vessel 75 being taken out from the incubator unit 101. Therefore, the environmental fluctuation
  • the cartridge exchange cartridge 200 is separated from the culture medium exchange unit 103 and the culture vessel 75 in a state where the culture medium is accommodated in the curved flow path 223 by the cartridge transport unit 109, It is moved to the collection unit 104.
  • a pressure pump (not shown) is connected to the second outlet 222 of the medium replacement cartridge 200.
  • the volume of the medium supplied to the culture container 75 is preferably larger than the capacity of the culture container 75.
  • the curved channel 223 is supplied from the liquid storage chamber 213 to the culture vessel 75 on the second inlet 221 side. New media is contained.
  • a part of the boundary between the new medium and the old medium may be in a mixed state.
  • valve 226 between the second outlet 222 and the curved flow path 223 and the valve 225 between the curved flow path 223 and the second inlet 221 are opened, and the curved flow is generated by the pressurizing pump.
  • the path 223 is pressurized from the second outlet 222 side, and a new culture medium accommodated on the second inlet 221 side of the curved flow path 223 and a mixing part of the new culture medium and the old culture medium are the second inlet 221. It is pushed out from the outside and discharged. After all of the medium including the new medium is discharged from the second inlet 221, pressurization by the pressurization pump is stopped.
  • the medium analysis unit 106 is connected to the second inlet 221 of the medium replacement cartridge 200. Then, the valve 226 between the second outlet 222 and the curved flow path 223 and the valve 225 between the curved flow path 223 and the second inlet 221 are opened, respectively, by a pressure pump. The curved channel 223 is pressurized again from the second outlet 222 side. As a result, the old medium in the curved channel 223 is pushed out from the second inlet 221 to the medium analyzer 106 and collected. The medium analysis unit 106 analyzes the components of the collected old liquid medium.
  • the culture medium recovery unit 104 is provided with a valve drive mechanism 249, and the valves 225 and 226 that operate here are opened and closed by the valve drive mechanism 249.
  • the cartridge replacement cartridge 200 is separated from the medium collection unit 104 and the medium analysis unit 106 by the cartridge transport unit 109 and moved to the flow path cleaning unit 105.
  • the cleaning liquid storage container 105a is connected to the first inlet 211 and the second outlet 222 of the medium replacement cartridge 200 via the three-way valve 105b. Then, as shown in FIG. 11B, the valve 215 between the first inlet 211 and the liquid storage chamber 213 and the valve 217 between the liquid storage chamber 213 and the vent 214 are opened. On the other hand, the valve 216 between the liquid storage chamber 213 and the first outlet 212 is closed. In this state, the cleaning liquid storage container 105a and the first inlet 211 are communicated by the three-way valve 105b, and the cleaning liquid is supplied from the cleaning liquid storage container 105a through the first inlet 211.
  • the valve 216 between the liquid storage chamber 213 and the first outlet 212 is closed, the supplied cleaning liquid is stored in the liquid storage chamber 213. After the liquid storage chamber 213 is filled with the cleaning liquid, the flow path between the cleaning liquid storage container 105a and the first inlet 211 is closed by the three-way valve 105b.
  • the waste liquid container 105c is connected to the first inlet 211 and the second outlet 222 of the medium replacement cartridge 200, and a pressure pump (not shown) is connected to the vent 214. Connected. Next, the valve 216 between the liquid storage chamber 213 and the first outlet 212 is opened, the inside of the liquid storage chamber 213 is pressurized by a pressurizing pump, and the cleaning liquid in the liquid storage chamber 213 is transferred to the first outlet 212. To the waste liquid container 105c and discharged.
  • the valve 226 between the second outlet 222 and the curved channel 223 and the valve 225 between the curved channel 223 and the second inlet 221 are opened.
  • the cleaning liquid storage container 105a and the second outlet 222 are communicated by the three-way valve 105b, and the cleaning liquid is supplied from the cleaning liquid storage container 105a through the second outlet 222.
  • the cleaning liquid supplied from the second outlet 222 passes through the curved channel 223 and is discharged from the second inlet 221 to the waste liquid container 105c.
  • the flow path cleaning unit 105 is provided with a valve drive mechanism 249, and the valves 215, 216, 217, 225, and 226 operating here are opened and closed by the valve drive mechanism 249.
  • liquid recovery flow path 202 is cleaned after the liquid supply flow path 201 is cleaned, but the liquid supply flow path 201 may be cleaned after the liquid recovery flow path 202 is cleaned.
  • the medium replacement cartridge 200 cleaned by the cartridge transport unit 109 is separated from the flow path cleaning unit 105 and returned to the medium supply unit 102 for the next medium replacement. Reused.
  • the cartridge transport unit 109 periodically discharges the used medium replacement cartridge 200 to the cartridge recovery unit 108 and removes the unused medium replacement cartridge 200 from the cartridge storage unit 107.
  • the culture medium replacement cartridge 200 that can store a predetermined amount of liquid culture medium moves among the culture medium supply unit 102, the culture medium replacement unit 103, and the culture medium recovery unit 104, whereby the culture container 75 is
  • the culture medium can be exchanged while being separated from the culture medium supply unit 102 and the culture medium recovery unit 104. For this reason, it is not necessary to concentrate other devices such as the culture medium storage container 102a and the collection container around the culture container 75, and the liquid flow path does not become redundant due to physical restrictions due to the concentration of the equipment. Therefore, the liquid flow path can be shortened as compared with the conventional medium exchange mechanism.
  • the liquid flow path is formed in the medium replacement cartridge 200, that is, a cartridge-like part, even a commercially available robot hand can be easily grasped and carried. It is easy to automate the replacement of the liquid flow path.
  • each of the medium supply, medium replacement, medium recovery, and flow path cleaning processes can be performed in parallel. Therefore, it is possible to suppress an increase in work time when processing a plurality of culture vessels 75.
  • the present embodiment it is possible to remarkably reduce environmental fluctuations for the cells in the culture container 75 by exchanging the culture medium while the culture container 75 is accommodated in the incubator unit 101.
  • the culture vessel 75 is removed from the incubator unit 101 and a medium exchange stage (not shown) is performed. The medium exchange may be performed above.
  • the liquid recovery flow path 202 of the medium replacement cartridge 200 since the liquid recovery flow path 202 of the medium replacement cartridge 200 has the curved flow path 223 having a small flow path diameter and a long flow path length, The old culture medium and the new culture medium that flow out can be collected so as not to be mixed along the curved flow path 223. Thereby, the old culture medium and the new culture medium can be distinguished and discharged from the curved flow path 223, and the components of the old culture medium used in the culture vessel 75 can be analyzed accurately.
  • FIG. 12A is an internal top view showing a configuration of a first modified example of a transport container that can accommodate a plurality of culture containers 75
  • FIG. 12B is an internal side view of the transport container of FIG. 12A.
  • the 12A and 12B includes a casing 171 and a cassette 180 that can hold a plurality of culture vessels 75.
  • casing 171 has the square cylinder shape which a lower end part opens.
  • the cassette 180 is lined up along the column 174, a lid 172 that fits and seals with the opening at the lower end of the housing 171, a column 174 that extends vertically upward from the lid 172, and the column 174. And a plurality of (eight in the illustrated example) shelves 173 provided.
  • Each shelf 173 has a disk shape and is fixed to the support column 174 in a horizontally oriented posture.
  • a plurality of (four in the illustrated example) culture vessels 75 are placed in rotational symmetry (four-fold symmetrical in the illustrated example) around the support column 174. Yes.
  • the transport container 170 shown in FIGS. 12A and 12B is similar to the transport container 70 shown in FIG. 3 in a state where the transport container 170 is hung by the holding unit 61 of the container transport unit 60, and the differentiation unit 21 of the iPS cell automatic culture device 20 is differentiated. It is conveyed along the rail 65 to the carrying-in part 31 of the cell automatic culture apparatus 30 or the carrying-in part 12a of the iPS cell establishment apparatus 11.
  • the cassette 180 When taking out the culture container 75 from the transport container 170, as shown in FIG. 13, the cassette 180 is pulled downward by a rotary lifting mechanism (not shown), and a plurality of culture containers 75 are held in the cassette 180. The outside of the housing 171 is taken out. Then, one culture vessel 75 is grasped and taken out from the top of one shelf 173 by a robot hand (not shown). After the culture vessels 75 are taken out one by one from the top of each shelf 173, the cassette 180 is rotated by 90 ° about the support column 174 by the rotary lifting mechanism. Then, the next culture vessel 75 is grasped and taken out from the top of one shelf 173 by the robot hand. By repeating the removal of the culture vessel 75 by the robot hand and the rotation of the cassette 180 by the rotary lifting mechanism, all the culture vessels 75 held in the cassette 180 can be taken out by the robot hand.
  • a transport container 170 since a plurality of culture containers 75 can be placed on each shelf 173, the number of stored culture containers 75 can be increased as compared with the transport container 70 shown in FIG.
  • the culture vessel 75 can be transported collectively into the apparatus.
  • the cassette 180 is rotated about the support column 174, so that the robot can be moved relative to each shelf 173.
  • the access point of the culture vessel 175 by hand can be shared by one point. Thereby, simplification of a container taking-out mechanism is attained.
  • each shelf 173 In the example shown in FIGS. 12A and 12B, four culture vessels 75 are placed on each shelf 173, but the present invention is not limited to this.
  • two culture vessels 75 may be placed on each shelf 173 symmetrically about the support column 174.
  • FIG. 15A is a schematic plan view showing a configuration of a modified example of the cell culture device.
  • FIG. 15B is a cross-sectional view taken along line BB of the cell culture device of FIG. 15A.
  • FIG. 15C is a cross-sectional view taken along the line CC of the cell culture device of FIG. 15A.
  • FIG. 15D is a left side view of the cell culture device of FIG. 15A.
  • the cell culture device 100b shown in FIGS. 15A to 15D takes out a cassette 180 (not shown in FIGS. 15A to 15D) holding a plurality of culture containers 75 from the transfer container 170 shown in FIGS.
  • An in-apparatus transport unit 111 that transports the cassette 180 holding the culture vessel 75 to the incubator unit 101, and a plurality (16 in the illustrated example) that can be accommodated while being held in the cassette 180.
  • an incubator unit 101 similarly to the cell culture device 100 shown in FIG. 4, the cell culture device 100b includes a cartridge transport unit 109 that transports the medium replacement cartridge 200, a medium supply unit 102, and a medium replacement unit (FIGS. 15A to 15D). (Not shown), a medium recovery unit 104, and a flow path cleaning unit 105.
  • the culture medium replacement cartridge 200 shows only the first outlet and the second inlet that can be connected to the culture vessel 75.
  • the 16 incubator units 101 are arranged in a 4 ⁇ 4 matrix along the vertical and horizontal directions. Each incubator unit 101 is accessible from both the in-device transport unit 111 and the cartridge transport unit 109. Each incubator unit 101 is provided with a turntable (not shown) so that a cassette 180 holding a plurality of culture vessels 75 can be rotated around a column 174.
  • a cytological test removing unit 112 is connected to the incubator unit 101 located at the lower right.
  • the cell inspection / removal unit 112 takes out the culture containers 75 one by one from the connected incubator unit 101, inspects the cells in the culture container 75, and removes cells in a bad state.
  • the transport container 170 transported by the container transport unit 60 is connected to the in-device transport unit 111, and the cassette 180 holding the plurality of culture vessels 75 is taken out from the transport container 170 to the in-device transport unit 111.
  • the in-apparatus transport unit 111 carries a cassette holding a plurality of culture vessels 75 into one incubator unit 101.
  • the incubator 101 any one or all of temperature, humidity and gas concentration are automatically adjusted. From the viewpoint of running cost, it is preferable to stop the operation of the other incubator units 101 not in use at this point.
  • medium replacement using the medium replacement cartridge 200 is performed on the culture container 75 accommodated in the incubator unit 101 in the same manner as the medium replacement method described above.
  • the culture medium replacement cartridge 200 transported by the cartridge transport unit 109 is connected to the culture medium supply unit 102, and after the liquid culture medium is supplied to the liquid supply channel 201 of the culture medium replacement cartridge 200, the culture medium replacement cartridge 200. Is separated from the culture medium supply unit 102.
  • the medium replacement cartridge 200 transported by the cartridge transport unit 109 is connected to one culture vessel 75 on one shelf 173 accommodated in the incubator unit 101, and is stored in the liquid supply channel 201.
  • the liquid medium is supplied into the culture container 75 and the liquid medium in the culture container 75 is recovered in the liquid recovery channel 202. Thereafter, the medium replacement cartridge 200 is separated from the culture vessel 75.
  • the medium replacement cartridge 200 transported by the cartridge transport unit 109 is connected to the medium recovery unit 104, and after the liquid medium is recovered from the liquid recovery channel 202 to the medium recovery unit 104, the medium replacement cartridge 200 is recovered. Is separated from the culture medium collection unit 104.
  • the medium replacement cartridge transported by the cartridge transport unit 109 is connected to the flow path cleaning unit 105, and the liquid supply flow path 201 and the liquid recovery flow path 202 are cleaned.
  • the washed medium replacement cartridge 200 is separated from the flow path cleaning unit 105, returned to the medium supply unit 102, and used for the next medium replacement.
  • the cassette 180 is rotated 90 ° around the support column 174 by the turntable provided in the incubator unit 101. Then, the medium is exchanged for the next culture container 75 on each shelf 173.
  • the in-apparatus transport unit 111 periodically transports the cassette 180 holding the plurality of culture vessels 75 to another incubator unit 101 to which the cell test removal unit 112 is connected.
  • the cell inspection / removal unit 112 takes out the culture containers 75 one by one from the incubator unit 101, inspects the cells in the culture container 75 and removes bad cells, and then removes the inspected culture container 75 from the incubator. Return to the part 101. Thereafter, the in-device transport unit 111 returns the cassette 180 holding the plurality of inspected culture vessels 75 to the original incubator unit 101.

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Abstract

【課題】液流路の短縮化および自動交換が可能な細胞培養装置、培地交換用カートリッジ、および培地交換方法を提供する。 【解決手段】細胞培養装置１００は、閉鎖系の培養容器７５を収容可能なインキュベータ部１０１と、培養容器７５に対して着脱可能な培地交換用カートリッジ２００と、培地交換用カートリッジ２００の液供給流路に液体培地を供給する培地供給部１０２と、培地交換用カートリッジ２００が培養容器７５に連結された状態で、液供給流路内の液体培地を培養容器７５内に流入させるとともに培養容器７５内の液体培地を液回収流路に流出させる培地交換部１０３と、培地交換用カートリッジ２００の液回収流路から液体培地を回収する培地回収部１０４と、を備える。培地交換用カートリッジ２００は、培地供給部１０２と培地交換部１０３と培地回収部１０４との間で移動可能である。

Description

細胞培養装置、培地交換用カートリッジ、培地交換方法
　本発明は、細胞を培養する細胞培養装置に関する。また、本発明は、細胞培養装置で用いられる培地交換用カートリッジに関する。また、本発明は、培地交換用カートリッジを用いた培地交換方法に関する。
　従来から、細胞を培養するために用いられる培養装置が知られている。この培養装置には、通常、培養容器内の培養環境が徐々に悪化することを防止するために、培養容器内の液体培地を定期的に交換するための培地交換機構が設置されている。培地交換機構の一例として、例えば特許文献１が知られている。特許文献１には、培地交換ステージ（容器積載台）に載置された培養容器と培地貯蔵容器および回収容器とをそれぞれ異なるチューブを用いて接続し、一方のチューブを介して培地貯蔵容器から培養容器に新しい培地を供給するとともに、他方のチューブを介して培養容器から回収容器に古い培地を回収する、という機構が開示されている。
特開２００８－２７１８５０号公報
　しかしながら、従来から提供されている培地交換機構では、培地交換ステージ周辺に培地貯蔵容器や回収容器、培地温度調整器、培地用時調整器などの他の機器が集中するため、物理的な制約により培養容器と培地貯蔵容器等をつなぐ液流路が冗長化する。また、この液流路の内壁には使用しているうちに徐々にタンパクが付着して汚染されるため、液流路を定期的に交換する必要があるが、この液流路がチューブであることから交換の自動化が困難であり、また機器集中のために作業性の確保も難しい。
　さらに、従来から提供されている培地交換機構では、１つの培養容器に対して培地供給、培地交換、培地回収、流路洗浄の一連の処理を終えるまで、次の培養容器に対する処理を開始することができず、複数の培養容器を処理する場合の作業時間が長時間化する。
　本発明は、このような点を鑑みてなされたものである。本発明の目的は、液流路の短縮化および自動交換が可能な細胞培養装置、培地交換用カートリッジ、および培地交換方法を提供することにある。
　本発明による細胞培養装置は、
　閉鎖系の培養容器を収容可能なインキュベータ部と、
　液供給流路および液回収流路を有し、前記培養容器に対して着脱可能な培地交換用カートリッジと、
　前記培地交換用カートリッジの前記液供給流路に液体培地を供給する培地供給部と、
　前記培地交換用カートリッジが前記培養容器に連結された状態で、前記液供給流路内の液体培地を前記培養容器内に流入させるとともに前記培養容器内の液体培地を前記液回収流路に流出させる培地交換部と、
　前記培地交換用カートリッジの前記液回収流路から液体培地を回収する培地回収部と、を備え、
　前記培地交換用カートリッジは、前記培地供給部と前記培地交換部と前記培地回収部との間で移動可能である。
　本発明による細胞培養装置は、
　前記培地交換用カートリッジを、前記培地供給部と前記培地交換部と前記培地回収部との間で移動させるカートリッジ搬送部をさらに備えてもよい。
　本発明による細胞培養装置において、
　前記培地交換用カートリッジの前記液供給流路および前記液回収流路をそれぞれ洗浄する流路洗浄部をさらに備え、
　前記培地交換用カートリッジは、前記培地供給部と前記培地交換部と前記培地回収部と前記流路洗浄部との間で移動可能であってもよい。
　本発明による細胞培養装置において、
　前記培地交換部は、前記インキュベータ部に隣接して設けられており、前記培養容器が前記インキュベータ部に収容されたまま、前記培地交換用カートリッジを介して前記培養容器の培地交換が可能であってもよい。
　本発明による細胞培養装置において、
　前記培地回収部には、回収された液体培地を分析する培地分析部が設けられていてもよい。
　本発明による細胞培養装置は、
　未使用の前記培地交換用カートリッジを複数保管するカートリッジ保管部と、
　使用済みの前記培地交換用カートリッジを回収するカートリッジ回収部と、
をさらに備えてもよい。
　本発明による細胞培養装置において、
　前記液供給流路は、前記培地供給部に連結可能な第１流入口と、前記培養容器の流入口に連結可能な第１流出口と、前記第１流入口と前記第１流出口とを連通する液貯蔵室と、前記液貯蔵室に連通する通気口と、を有し、
　前記液回収流路は、前記培養容器の流出口に連結可能な第２流入口と、前記培地回収部に連結可能な第２流出口と、前記第２流入口と前記第２流出口とを連通する複数の屈曲箇所または湾曲箇所を含む曲線流路と、を有してもよい。
　本発明による細胞培養装置において、
　前記曲線流路は、蛇行状または渦巻き状の形状を有してもよい。
　本発明による細胞培養装置において、
　前記第１流出口と前記第２流入口とは互いに隣接して設けられていてもよい。
　本発明による培地交換用カートリッジは、
　液供給流路および液回収流路を備え、
　閉鎖系の培養容器に対して着脱可能であるとともに、細胞培養装置の培地供給部と培地交換部と培地回収部との間で移動可能である。
　本発明による培地交換用カートリッジにおいて、
　前記液供給流路は、前記培地供給部に連結可能な第１流入口と、前記培養容器の流入口に連結可能な第１流出口と、前記第１流入口と前記第１流出口とを連通する液貯蔵室と、前記液貯蔵室に連通する通気口と、を有し、
　前記液回収流路は、前記培養容器の流出口に連結可能な第２流入口と、前記培地回収部に連結可能な第２流出口と、前記第２流入口と前記第２流出口とを連通する複数の屈曲箇所または湾曲箇所を含む曲線流路と、を有してもよい。
　本発明による培地交換用カートリッジにおいて、
　前記曲線流路は、蛇行状または渦巻き状の形状を有してもよい。
　本発明による培地交換用カートリッジにおいて、
　前記第１流出口と前記第２流入口とは互いに隣接して設けられていてもよい。
　本発明による培地交換方法は、
　液供給流路および液回収流路を有する培地交換用カートリッジを培地供給部に連結し、前記培地供給部から前記液供給流路に液体培地を供給し、前記培地交換用カートリッジを前記培地供給部から分離する培地供給工程と、
　前記培地交換用カートリッジを閉鎖系の培養容器に連結し、前記液供給流路内の液体培地を前記培養容器内に流入させるとともに前記培養容器内の液体培地を前記液回収流路内に流出させ、前記培地交換用カートリッジを前記培養容器から分離する培地交換工程と、　前記培地交換用カートリッジを培地回収部に連結し、前記液回収流路から前記培地回収部に液体培地を回収し、前記培地交換用カートリッジを前記培地回収部から分離する培地回収工程と、
を備える。
　本発明による培地交換方法は、
　前記培地回収工程の後、前記培地交換用カートリッジの前記液供給流路および前記液回収流路をそれぞれ洗浄する洗浄工程をさらに備えてもよい。
　本発明による培地交換方法において、
　前記培地交換工程は、前記培養容器がインキュベータ部に収容された状態で行われてもよい。
　本発明による培地交換方法は、
　前記培地回収工程の後、回収された液体培地を分析する培地分析工程をさらに備えてもよい。
　本発明によれば、所定量の液体培地を収容可能な培地交換用カートリッジが培地供給部と培地交換部と培地回収部との間で移動することで、培養容器が培地供給部および培地回収部から分離された状態で培地交換を行うことができる。このため、液流路の短縮化が可能である。また、液流路が培地交換用カートリッジ、すなわちカートリッジ式の部品に形成されているため、液流路の交換の自動化が容易である。
図１は、本発明の実施の形態による自動培養システムの構成を示す概略上方平面図である。 図２は、本発明の実施の形態による自動培養システムの制御ブロック図である。 図３は、本発明の実施の形態で用いられる容器搬送部を示す正面図である。 図４は、本発明の実施の形態で用いられる液体保管供給部およびインキュベータ部近辺の構成を示す概略平面図である。 図５Ａは、本発明の実施の形態で用いられる培地交換用カートリッジの構成を示す概略図である。 図５Ｂは、培地交換用カートリッジの第１変形例の構成を示す概略図である。 図５Ｃは、培地交換用カートリッジの第２変形例の構成を示す概略図である。 図６Ａは、図５Ａの培地交換用カートリッジのバルブの構造を示す概略平面図である。 図６Ｂは、図６ＡのバルブのＡ－Ａ線に沿った断面図である。 図７Ａは、図６Ｂに対応する図面であって、バルブの動作を説明するための図である。 図７Ｂは、図６Ｂに対応する図面であって、バルブの動作を説明するための図である。 図７Ｃは、図６Ｂに対応する図面であって、バルブの動作を説明するための図である。 図８Ａは、図５Ａに対応する図面であって、培地供給工程を説明するための図である。 図８Ｂは、図５Ａに対応する図面であって、培地供給工程を説明するための図である。 図９Ａは、図５Ａに対応する図面であって、培地交換工程を説明するための図である。 図９Ｂは、図５Ａに対応する図面であって、培地交換工程を説明するための図である。 図１０Ａは、図５Ａに対応する図面であって、培地回収工程を説明するための図である。 図１０Ｂは、図５Ａに対応する図面であって、培地回収工程を説明するための図である。 図１１Ａは、図５Ａに対応する図面であって、流路洗浄工程を説明するための図である。 図１１Ｂは、図５Ａに対応する図面であって、流路洗浄工程を説明するための図である。 図１１Ｃは、図５Ａに対応する図面であって、流路洗浄工程を説明するための図である。 図１１Ｄは、図５Ａに対応する図面であって、流路洗浄工程を説明するための図である。 図１２Ａは、搬送容器の第１変形例の構成を示す内部上面図である。 図１２Ｂは、搬送容器の第１変形例の構成を示す内部側面図である。 図１３は、図１２Ｂに対応する図面であって、搬送容器の動作を説明するための図である。 図１４は、図１２Ａに対応する図面であって、搬送容器の第２変形例の構成を示す内部上面図である。 図１５Ａは、細胞培養装置の変形例の構成を示す概略平面図である。 図１５Ｂは、図１５Ａの細胞培養装置のＢ－Ｂ線に沿った断面図である。 図１５Ｃは、図１５Ａの細胞培養装置のＣ－Ｃ線に沿った断面図である。 図１５Ｄは、図１５Ａの細胞培養装置の左側面図である。
　以下、図面を参照して、本発明の実施の形態について具体例を説明する。なお、本明細書に添付する図面においては、図示と理解のしやすさの便宜上、適宜縮尺および縦横の寸法比等を、実物のそれらから変更し誇張してある。
　本実施の形態による培養装置は、あらゆる細胞を培養するために用いることができ、（ヒト）ｉＰＳ細胞、（ヒト）ＥＳ細胞等の多能性幹細胞、骨髄間質細胞（ＭＳＣ）等の軟骨細胞、樹状細胞等の様々な細胞を培養する際に用いることができる。本実施の形態では、以下、ｉＰＳ細胞を自動で培養する自動培養システムを用いて説明するが、これはあくまでも一例であることには留意が必要である。つまり、本実施の形態のように自動で細胞を培養するものでなくても、本実施の形態による培養装置を用いることができることには留意が必要である。
＜全体構成＞
　まず、本実施の形態による自動培養システムの装置構成について説明する。
　図１に示すように、本実施の形態による自動培養システムは、原料細胞を保管する原料保管装置１０と、細胞等を密閉状態で収容した搬送容器７０（図３参照）を搬送する容器搬送部６０と、容器搬送部６０で搬送された搬送容器７０を受け取り、搬送容器７０から細胞を収容した閉鎖系の培養容器７５を取り出し、取り出した培養容器７５内の細胞を内部で培養する細胞培養装置２０，３０と、を備えている。
　本実施の形態では、上述したようにｉＰＳ細胞を用いた態様で説明することから、原料保管装置１０はｉＰＳ細胞を樹立するｉＰＳ細胞樹立装置１１を含んでいる。なお、原料保管装置１０は、他にも、ユニット恒温槽、遠心分離機、自動血球計数装置、自動磁気細胞分離器、フローサイトメーター、遺伝子導入装置等を含んでいる。
　本実施の形態の細胞培養装置２０，３０は、ｉＰＳ細胞を自動で培養する複数（図１に示した態様では４つ）のｉＰＳ細胞自動培養装置２０と、ｉＰＳ細胞から分化した分化細胞を自動で培養する複数（図１に示した態様では８つ）の分化細胞自動培養装置３０と、を有している。なお、本実施の形態において、単に「細胞培養装置」と述べたときは、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０、分化細胞自動培養装置３０、又は、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０及び分化細胞自動培養装置３０の両方のことを意味している。また、特に断りが無い限り、本実施の形態において単に「細胞」と述べたときは、ｉＰＳ細胞の元となる体細胞等の原料細胞、ｉＰＳ細胞、分化細胞、又は、原料細胞、ｉＰＳ細胞及び分化細胞のいずれか２つもしくは全部のことを意味している。
　図３に示すように、搬送容器７０は培養容器７５を載置するための複数（図３では８つ）の棚７１を有しており、各棚７１に培養容器７５が載置される。そして、複数の培養容器７５が搬送容器７０内に収容された状態で、搬送容器７０が容器搬送部６０によって搬送されることとなる。
　ｉＰＳ細胞自動培養装置２０は、図１に示すように筐体２２と、図２に示すように、ｉＰＳ細胞の培養に伴って変化する液体培地成分を分析する培地分析部２４と、ｉＰＳ細胞を検査するとともに状態の悪いｉＰＳ細胞の除去を行う細胞検査除去部２５と、液体培地やタンパク質分解酵素を含む液体等を保管するとともに供給し、ｉＰＳ細胞を播種する前の前処理を行ったり、ｉＰＳ細胞を播種したり、ｉＰＳ細胞を回収したりする液体保管供給部２６と、培養容器７５を保持し、温度、湿度及び気体濃度のいずれか一つ又はこれらの全てを自動で調整するインキュベータ部２７と、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０内で用いられた使用済み液体培地、使用済み洗浄液、使用済み試薬等を含む廃液を筐体２２から下方に排出するための排出部２８と、を有している。また、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０は、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０内で培養容器７５等を搬送する装置内搬送部２３も有している。なお、上述した液体保管供給部２６は、培養容器７５の上下を反転させる機能も有している。ちなみに、本実施の形態のように閉鎖系の培養容器７５を用いる場合には、インキュベータ部２７内の湿度の管理に関しては開放系の培養容器を用いる場合に比べて厳密なレベルでの管理が必ずしも必要ではないことから、細胞培養環境の管理を簡素化することができる。また、このような閉鎖系の培養容器７５を採用することで、空気中からのコンタミネーションが起こるおそれがなく、搬送も容易となる。
　上述した液体保管供給部２６は、液体培地を図示しない流入口から培養容器７５内に適宜供給することで、培養容器７５内の古い液体培地を新しい液体培地に自動で入れ替える。また、細胞検査除去部２５は、取得されたｉＰＳ細胞の情報に基づいて、培養容器７５の図示しないフィルムの表面に塗られたＥＣＭ（Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｍａｔｒｉｘ）から不良ｉＰＳ細胞を選択的に剥離させる。その後で、液体保管供給部２６が液体培地を流入口から培養容器７５内に供給することで、浮遊した不良ｉＰＳ細胞を図示しない流出口を介して培養容器７５から押し出す。なお、培養容器７５内のｉＰＳ細胞を選択的に剥離させる手法としては、ｉＰＳ細胞に超音波や光をあてるという手法、培養容器７５の外方から物理的な力を与える手法等をとることができる。また、このような手法を用いる際には、タンパク質分解酵素を併用してもよい。
　また、液体保管供給部２６は、タンパク質分解酵素を流入口から培養容器７５内に適宜供給することで培養容器７５のフィルムの表面に塗られたＥＣＭからｉＰＳ細胞を剥離させる。その後で、液体保管供給部２６が液体培地を流入口から培養容器７５内に供給することで、浮遊したｉＰＳ細胞が流出口を介して培養容器７５から押し出される。押し出されたｉＰＳ細胞は、薄めて懸濁液とした後で複数の別の培養容器７５内に収容される（播種される）。このようにして、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０はｉＰＳ細胞の継代を自動で行う。
　ｉＰＳ細胞自動培養装置２０内の温度は、インキュベータ部２７によって、例えば温度が約３７℃となるように調整される。また、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０内の気体濃度は、インキュベータ部２７によって、二酸化炭素や窒素を適宜加えることで調整される。また、必要に応じて、インキュベータ部３７によって湿度が約１００％となるように調整されてもよい。
　分化細胞自動培養装置３０は、図１に示すように筐体３２と、図２に示すように、分化細胞の培養に伴って変化する液体培地成分を分析する培地分析部３４と、分化細胞を検査するとともに状態の悪い分化細胞の除去を行う細胞検査除去部３５と、液体培地やタンパク質分解酵素を含む液体等を保管するとともに供給し、分化細胞を播種する前の前処理を行ったり、分化細胞を播種したり、分化細胞を回収したりする液体保管供給部３６と、培養容器７５を保持し、温度、湿度及び気体濃度のいずれか一つ又はこれらの全てを自動で調整するインキュベータ部３７と、分化細胞自動培養装置３０内で用いられた使用済み液体培地、使用済み洗浄液、使用済み試薬等を含む廃液を筐体３２から下方に排出するための排出部３８と、を有している。また、分化細胞自動培養装置３０は、分化細胞自動培養装置３０内で培養容器７５等を搬送する装置内搬送部３３も有している。
　上述した液体保管供給部３６は、液体培地を流入口から培養容器７５に適宜供給することで、培養容器７５内の古い液体培地を新しい液体培地に自動で入れ替える。また、細胞検査除去部３５は、取得された分化細胞の情報に基づいて、培養容器７５のフィルム７７の表面に塗られたＥＣＭから不良分化細胞を選択的に剥離させる。その後で、液体保管供給部３６が液体培地を流入口から培養容器７５内に供給することで、浮遊した不良分化細胞を流出口を介して培養容器７５から押し出す。なお、培養容器７５内の分化細胞を選択的に剥離させる手法としては、分化細胞に超音波や光をあてるという手法、培養容器７５の外方から物理的な力を与える手法等をとることができる。また、このような手法を用いる際には、タンパク質分解酵素を併用してもよい。
　また、液体保管供給部３６は、タンパク質分解酵素を流入口から培養容器７５内に適宜供給することで培養容器７５のフィルムの表面に塗られたＥＣＭから分化細胞を剥離させる。その後で、液体保管供給部３６が液体培地を流入口から培養容器７５内に供給することで、浮遊した分化細胞が流出口を介して培養容器７５から押し出される。押し出された分化細胞は、薄めて懸濁液とした後で複数の別の培養容器７５内に収容される（播種される）。このようにして、分化細胞自動培養装置３０は分化細胞の継代を自動で行う。
　分化細胞自動培養装置３０内の温度は、インキュベータ部３７によって、例えば温度が約３７℃となるように調整される。また、分化細胞自動培養装置３０内の気体濃度は、インキュベータ部３７によって、二酸化炭素や窒素や酸素を適宜加えることで調整される。なお、分化細胞自動培養装置３０の液体保管供給部３６は、分化を誘導させる際に、分化誘導因子を含む液体培地を供給してもよい。また、必要に応じて、インキュベータ部３７によって湿度が約１００％となるように調整されてもよい。
　図２に示すように、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０は、培地分析部２４、細胞検査除去部２５、液体保管供給部２６、インキュベータ部２７、排出部２８、装置内搬送部２３の各々に通信接続され、これらを制御する制御部２９を有する。この制御部２９は、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０に関して、ステータスを管理したり、ログを管理したり、培養スケジュールを管理したり、ユーザインターフェース機能を果たしたりする。また、分化細胞自動培養装置３０は、培地分析部３４、細胞検査除去部３５、液体保管供給部３６、インキュベータ部３７、排出部３８、装置内搬送部３３の各々に通信接続され、これらを制御する制御部３９を有する。この制御部３９は、分化細胞自動培養装置３０に関して、ステータスを管理したり、ログを管理したり、培養スケジュールを管理したり、ユーザインターフェース機能を果たしたりする。
　なお、上述したｉＰＳ細胞樹立装置１１も、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０及び分化細胞自動培養装置３０と同様の構成となっている。つまり、ｉＰＳ細胞樹立装置１１は、図１に示すように筐体１２ｂと、図２に示すように、液体培地を分析する培地分析部１４と、原料細胞を検査するとともに状態の悪い原料細胞の除去を行う細胞検査除去部１５と、液体培地やタンパク質分解酵素を含む液体等を保管するとともに供給する液体保管供給部１６と、筐体１２ｂ内の温度、湿度及び気体濃度のいずれか一つ又はこれらの全てを自動で調整するインキュベータ部１７と、ｉＰＳ細胞樹立装置１１内で用いられた使用済み液体培地、使用済み洗浄液、使用済み試薬等を含む廃液を筐体１２ｂから下方に排出するための排出部１８と、を有している。また、ｉＰＳ細胞樹立装置１１は、ｉＰＳ細胞樹立装置１１内で培養容器７５等を搬送する装置内搬送部１３も有している。また、ｉＰＳ細胞樹立装置１１は、培地分析部１４、細胞検査除去部１５、液体保管供給部１６、インキュベータ部１７、排出部１８、装置内搬送部１３の各々に通信接続され、これらを制御する制御部１９を有する。なお、各制御部１９，２９，３９は、例えばパソコン等の外部装置９０に接続されている。
　本実施の形態の容器搬送部６０は、図３に示すように、搬送容器７０を下方にぶら下げるようにして保持する保持部６１を有し、天井に設けられたレール６５に沿って移動するようになっている。
　図１に示すように、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０は、搬送容器７０から培養容器７５を搬入するための搬入部２１を有している。この搬入部２１は、培養容器７５に収容されたｉＰＳ細胞を搬入するとともに培養されたｉＰＳ細胞を搬出するための細胞用搬入出部（図示せず）と、他の密閉容器に収容された資材を搬入するための資材用搬入部（図示せず）と、を有していてもよい。同様に、図１に示すように、分化細胞自動培養装置３０は、搬送容器７０から培養容器７５を搬入するための搬入部３１を有している。この搬入部３１も、培養容器７５に収容されたｉＰＳ細胞を搬入するとともに培養された分化細胞を搬出するための細胞用搬入出部（図示せず）と、他の密閉容器に収容された資材を搬入するための資材用搬入部（図示せず）と、を有していてもよい。本実施の形態において資材とは、液体培地、試薬、洗浄液、培養プレート、バイアル、フィルタ、針等である。また、図１に示すように、ｉＰＳ細胞樹立装置１１も、搬送容器７０を搬入するための搬入部１２ａを有している。
　本実施の形態の自動培養システムは、図１に示すように、搬送容器７０内を殺菌するための殺菌装置１と、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０で培養されたｉＰＳ細胞を所定のタイミングで搬入部８１から受け取り、ｉＰＳ細胞を検査するｉＰＳ細胞分析装置８０と、分化細胞自動培養装置３０で培養された分化細胞を所定のタイミングで搬入部８６から受け取り、分化細胞を検査する分化細胞分析装置８５と、自動培養装置２０，３０で培養されたｉＰＳ細胞、分化細胞、又は、ｉＰＳ細胞及び分化細胞の両方を搬入部４１から受け取り冷凍保存する冷凍保存装置４０と、を備えている。なお、冷凍保存装置４０は複数個設けられていてもよいし、部屋全体が冷やされており部屋自体が冷凍庫として機能してもよい。そして、部屋に冷凍保存装置４０が複数個設けられている場合や部屋自体が冷凍庫として機能するような場合には、当該部屋の天井にレール６５が設けられ、このレール６５に沿って容器搬送部６０が移動できるようになってもよい。
　上述した殺菌装置１の一例としては、搬送容器７０内に過酸化水素ガスや高温ガス等の殺菌ガスを供給することで殺菌するものを挙げることができる。また、殺菌装置１の別の例としては、搬送容器７０を閉状態としたまま外部から例えばγ線や紫外線を照射することで搬送容器７０内を殺菌するものも挙げることができる。ちなみに、外部から搬送容器７０が搬入される前に、搬送容器７０の内部が例えばγ線や紫外線を用いて殺菌されてもよい。なお、液体培地等はγ線や紫外線で破損してしまうタンパク質等を含有している場合がある。この場合は、過酸化水素ガスや高温ガス等の殺菌ガスで殺菌することが望ましい。
＜液体保管供給部およびインキュベータ部近辺の構成＞
　次に、上述した液体保管供給部およびインキュベータ部近辺の構成について説明する。
　以下では、ｉＰＳ細胞樹立装置１１の液体保管供給部１６、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０の液体保管供給部２６及び分化細胞自動培養装置３０の液体保管供給部３６のいずれか１つ、いずれか２つ、又は、全てのことを「液体保管供給部１１０」と示して説明する。なお、本実施の形態では、ｉＰＳ細胞樹立装置１１の液体保管供給部１６、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０の液体保管供給部２６及び分化細胞自動培養装置３０の液体保管供給部３６の各々は同様の構成となっている。
　また以下では、ｉＰＳ細胞樹立装置１１のインキュベータ部１７、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０のインキュベータ部２７及び分化細胞自動培養装置３０のインキュベータ部３７のいずれか１つ、いずれか２つ、又は、全てのことを「インキュベータ部１０１」と示して説明する。なお、本実施の形態では、ｉＰＳ細胞樹立装置１１のインキュベータ部１７、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０のインキュベータ部２７及び分化細胞自動培養装置３０のインキュベータ部３７の各々は同様の構成となっている。
　また以下では、ｉＰＳ細胞樹立装置１１の培地分析部１４、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０の培地分析部２４及び分化細胞自動培養装置３０の培地分析部３４のいずれか１つ、いずれか２つ、又は、全てのことを「培地分析部１０６」と示して説明する。なお、本実施の形態では、ｉＰＳ細胞樹立装置１１の培地分析部１４、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０の培地分析部２４及び分化細胞自動培養装置３０の培地分析部３４の各々は同様の構成となっている。
　図４は、液体保管供給部１１０およびインキュベータ部１０１近辺の構成を示す概略平面図である。図４に示すように、液体保管供給部１１０は、液供給流路２０１および液回収流路２０２（図５Ａ参照）を有し培養容器７５に対して着脱可能な培地交換用カートリッジ２００と、培地交換用カートリッジ２００の液供給流路２０１に液体培地を供給する培地供給部１０２と、培地交換用カートリッジ２００が培養容器７５に連結された状態で、液供給流路２０１内の液体培地を培養容器７５内に流入させるとともに培養容器７５内の培地を液回収流路２０２に液体流出させる培地交換部１０３と、培地交換用カートリッジ２００の液回収流路２０２から液体培地を回収する培地回収部１０４と、培地供給部１０２と培地交換部１０３と培地回収部１０４との間で培地交換用カートリッジ２００を移動させるカートリッジ搬送部１０９と、を備えている。図４において、細い矢印は培地交換用カートリッジ２００の移動する向きを示しており、太い矢印は液体培地の移動する向きを示している。
　また本実施の形態では、回収された液体培地の成分を分析する培地分析部１０６が培地回収部１０４に設けられている。
　さらに本実施の形態では、図４に示すように、培地交換用カートリッジ２００の液供給流路２０１および液回収流路２０２をそれぞれ洗浄する流路洗浄部１０５が設けられている。カートリッジ搬送部１０９は、培地供給部１０２と培地交換部１０３と培地回収部１０４と流路洗浄部１０５との間で培地交換用カートリッジ２００を移動させるようになっている。
　また本実施の形態では、図４に示すように、未使用の培地交換用カートリッジ２００を複数保管するカートリッジ保管部１０７と、使用済みの培地交換用カートリッジを回収するカートリッジ回収部１０８と、がさらに設けられている。カートリッジ搬送部１０９は、定期的に、使用済みの培地交換用カートリッジ２００をカートリッジ回収部１０８へ排出するとともに、未使用の培地交換用カートリッジ２００をカートリッジ保管部１０７から取り出すようになっている。
　カートリッジ搬送部１０９としては、たとえば、カートリッジ式の部品を把持可能なハンドを有する、それ自体は公知の搬送ロボットを用いることができる。
＜培地交換用カートリッジの構成＞
　次に、図５Ａを参照して、培地交換用カートリッジ２００の構成について詳しく説明する。
　本実施の形態では、図５Ａに示すように、液供給流路２０１は、培地供給部１０２に連結可能な第１流入口２１１と、培養容器７５の流入口に連結可能な第１流出口２１２と、第１流入口２１１と第１流出口２１２とを連通する液貯蔵室２１３と、液貯蔵室２１３に連通する通気口２１４と、を有している。通気口２１４には外気からの異物の侵入を防止するためのフィルタ２１８が取付けられている。
　液貯蔵室２１３の容量は、培養容器７５の容量の１～１．５倍程度であり、培養容器７５の容量より大きいほうが好ましい。具体的には例えば３０ｍｌである。図５Ａに示すように、第１流入口２１１と液貯蔵室２１３との間の流路には開閉可能なバルブ２１５が設けられている。また、液貯蔵室２１３と第１流出口２１２との間の流路にも開閉可能なバルブ２１６が設けられている。さらに、液貯蔵室２１３と通気口２１４との間の流路にも開閉可能なバルブ２１７が設けられている。各バルブ２１５、２１６、２１７を閉じることで、液貯蔵室２１３が密閉される。
　一方、液回収流路２０２は、培養容器７５の流出口に連結可能な第２流入口２２１と、培地回収部１０４に連結可能な第２流出口２２２と、第２流入口２２１と第２流出口２２２とを連通する、複数の屈曲箇所または湾曲箇所を含む曲線流路２２３と、を有している。曲線流路２２３は、複数の屈曲箇所または湾曲箇所を含むことで、流路口径を小さく、かつ流路長を長く形成することができ、これにより、培養容器７５から流出される古い培地と新しい培地とを流路に沿って混ざらないように回収することができる。
　なお、図５Ａに示す例では、曲線流路２２３は蛇行状の形状を有しているが、古い培地と新しい培地とを流路に沿って混ざらないように回収できるならば、蛇行状の形状を有していることは必ずしも必須では無く、たとえば図５Ｂに示すように、渦巻き状の形状を有していてもよい。
　曲線流路２２３の容量は、培養容器７５の容量の１～１．５倍程度であり、培養容器７５の容量より大きいほうが好ましい。具体的には例えば３０ｍｌである。曲線流路２２３内での乱流の発生を抑制するために、曲線流路２２３の口径は４ｍｍ以下であることが好ましい。図５Ａに示すように、第２流入口２２１と曲線流路２２３との間の流路には開閉可能なバルブ２２５が設けられている。また、曲線流路２２３と第２流出口２２２との間の流路にも開閉可能なバルブ２２６が設けられている。各バルブ２２５、２２６を閉じることで、曲線流路２２３が密閉される。
　なお図５Ａおよび図５Ｂに示す例では、第２流入口２２１から第２流出口２２２までの全体が細い曲線流路２２３となっているが、図５Ｃに示すように、古い培地と新しい培地との液の混合が起きない範囲（例えば回収容量の１／２以内）で、第２流入口２２１から第２流出口２２２までの流路の一部をタンク状の流路２２４とし、残りの部分を細い曲線流路２２３としてもよい。第２流入口２２１から第２流出口２２２までの流路のコンダクタンスを考えると、流路の一部をタンク状の流路２２４とするほうが好ましい。
　第１流出口２１２と第２流入口２２１とは互いに隣接して設けられている。これにより、第１流出口２１２および第２流入口２２１をそれぞれ培養容器７５の流入口および流出口に容易に連結することができる。
　以下では、第１流入口２１１と液貯蔵室２１３との間のバルブ２１５、液貯蔵室２１３と第１流出口２１２との間のバルブ２１６、液貯蔵室２１３と通気口２１４との間のバルブ２１７、第２流入口２２１と曲線流路２２３との間のバルブ２２５、および曲線流路２２３と第２流出口２２２との間のバルブ２２６のいずれか１つ、いずれか２つ以上、または全てのことを「バルブ２４０」と示して説明する。なお、本実施の形態では、各バルブ２１５、２１６、２１７、２２５、２２６は同様の構成となっている。
　図６Ａは、バルブ２４０の構造を示す概略平面図であり、図６Ｂは、図６Ａのバルブ２４０のＡ－Ａ線に沿った断面図である。
　図６Ａおよび図６Ｂに示すように、バルブ２４０は、一対の流路２４３、２４４が形成された本体２４１と、本体２４１の上面に固定されたシート状の弁体２４２と、を有している。弁体２４２は、エラストマーからなり、その周縁部２４２ａにおいて本体２４１の上面に接着されている。一方の流路２４３の一端部２４３ａと他方の流路２４４の一端部２４４ａとは、それぞれ、弁体２４２の周縁部２４２ａの内側の領域において、本体２４１の上面に開口している。通常、シート状の弁体２４２の復元力（弾性力）により弁体２４２の下面が本体２４１の上面に密着されている。そのため、一方の流路２４３の一端部２４３ａと他方の流路２４４の一端部２４４ａとはそれぞれ弁体２４２により閉塞され、その結果、一方の流路２４３は他方の流路２４４から遮断されている。
　図７Ａ～図７Ｃを参照して、バルブ２４０の動作を説明する。
　バルブ２４０を開く場合には、まず、図７Ａに示すように、弁体２４２の周縁部２４２ａの上面に筒状のバルブ駆動機構２４９が押し当てられ、次に、図７Ｂに示すように、バルブ駆動機構２４９の内部が真空引きされ、弁体２４２の周縁部２４２ａの内側の領域が上方に膨らむように変形される。これにより、弁体２４２が一方の流路２４３の一端部２４３ａと他方の流路２４４の一端部２４４ａとから離間され、弁体２４２の周縁部２４２ａの内側の領域において、一方の流路２４３は他方の流路２４４に連通される。
　次に、バルブ２４０を閉じる場合には、図７Ｃに示すように、バルブ駆動機構２４９の内部が大気圧に復帰され、弁体２４２の復元力により弁体２４２の下面が本体２４１の上面に密着される。これにより、一方の流路２４３の一端部２４３ａと他方の流路２４４の一端部２４４ａとはそれぞれ弁体２４２により閉塞され、その結果、一方の流路２４３は他方の流路２４４から遮断される。
　以上のような構成の培地交換用カートリッジ２００は、たとえばポリスチレン等の硬質樹脂を射出成形することにより製造され得る。この場合、バルブ２４０の部分は硬質樹脂とエラストマーとから二色成型法により形成することができる。なお、培地交換用カートリッジ２００の製造方法は、射出成形に限定されず、たとえば３Ｄプリンタを用いた積層造形法により製造されてもよい。
＜培地交換方法＞
　次に、図４および図８Ａ～図１１Ｄを参照して、培地交換用カートリッジ２００を用いた培地交換方法について説明する。図８Ａ～図１１Ｄにおける太線は、液体が通っている状態の流路を示している。
　まず、図４に示すように、カートリッジ搬送部１０９により、培地交換用カートリッジ２００がカートリッジ保管部１０７から取り出されて、培地供給部１０２へと移動される。
　培地供給部１０２では、図８Ａに示すように、培地交換用カートリッジ２００の第１流入口２１１に培地貯蔵容器１０２ａが連結される。そして、図８Ｂに示すように、第１流入口２１１と液貯蔵室２１３との間のバルブ２１５と、液貯蔵室２１３と通気口２１４との間のバルブ２１７とが、それぞれ開かれる。一方、液貯蔵室２１３と第１流出口２１２との間のバルブ２１６は閉じられる。この状態で、培地貯蔵容器１０２ａから第１流入口２１１を介して液体培地が供給される。液貯蔵室２１３と第１流出口２１２との間のバルブ２１６が閉じられているため、供給された液体培地は液貯蔵室２１３内に貯蔵される。その後、第１流入口２１１と液貯蔵室２１３との間のバルブ２１５と、液貯蔵室２１３と通気口２１４との間のバルブ２１７も、それぞれ閉じられ、液貯蔵室２１３が密閉される。なお、培地供給部１０２にはバルブ駆動機構２４９が設けられており、ここで動作するバルブ２１５、２１７はバルブ駆動機構２４９により開閉される。
　次に、図４に示すように、カートリッジ搬送部１０９により、培地交換用カートリッジ２００は、液貯蔵室２１３内に培地を収容した状態で、培地供給部１０２から分離されて、培地交換部１０３へと移動される。培地交換部１０３に隣接するインキュベータ部１０１には、培養容器７５が予め収容されている。
　培地交換部１０３では、図９Ａに示すように、培地交換用カートリッジ２００の第２流出口２２２に減圧ポンプが連結される。そして、培養容器７５がインキュベータ部１０１に収容された状態で、図９Ｂに示すように、培地交換用カートリッジ２００の第１流出口２１２および第２流入口２２１がそれぞれ培養容器７５の流入口および流出口に連結される。次いで、液貯蔵室２１３と第１流出口２１２との間のバルブ２１６と、液貯蔵室２１３と通気口２１４との間のバルブ２１７と、第２流入口２２１と曲線流路２２３との間のバルブ２２５と、曲線流路２２３と第２流出口２２２との間のバルブ２２６とが、それぞれ開かれるとともに、減圧ポンプにより第２流出口２２２を介して曲線流路２２３が減圧される。これにより、培養容器７５内の古い培地が第２流入口２２１から曲線流路２２３内に流出されるとともに、液貯蔵室２１３内の新しい培地が第１流出口２１２から培養容器７５内に流入される。その後、第２流入口２２１と曲線流路２２３との間のバルブ２２５と、曲線流路２２３と第２流出口２２２との間のバルブ２２６とが、それぞれ閉じられ、曲線流路２２３が密閉される。なお、培地交換部１０３にはバルブ駆動機構２４９が設けられており、ここで動作するバルブ２１６、２１７、２２５、２２６はバルブ駆動機構２４９により開閉される。
　本実施の形態では、培養容器７５がインキュベータ部１０１から取り出されること無く、培養容器７５がインキュベータ部１０１に収容されたまま培地交換が行われる。そのため、培養容器７５内の細胞に対する環境変動を顕著に低減することができる。
　次に、図４に示すように、カートリッジ搬送部１０９により、培地交換用カートリッジ２００は、曲線流路２２３内に培地を収容した状態で、培地交換部１０３および培養容器７５から分離されて、培地回収部１０４へと移動される。
　培地回収部１０４では、図１０Ａに示すように、培地交換用カートリッジ２００の第２流出口２２２に加圧ポンプ（図示せず）が連結される。培養容器７５に新しい培地を供給して培養容器７５内を完全に新しい培地に置き換えるためには、培養容器７５に供給される培地の容量は培養容器７５の容量より大きいほうが好ましい。ここで、培養容器７５へ供給される新しい培地の容量が培養容器７５の容量より大きい場合、曲線流路２２３の第２流入口２２１側には、液貯蔵室２１３から培養容器７５に供給された新しい培地が収容されている。また、新しい培地と古い培地の境界部は一部が混合状態となっている可能性がある。そのため、第２流出口２２２と曲線流路２２３との間のバルブ２２６と、曲線流路２２３と第２流入口２２１との間のバルブ２２５とが、それぞれ開かれるとともに、加圧ポンプにより曲線流路２２３が第２流出口２２２側から加圧され、曲線流路２２３の第２流入口２２１側に収容された新しい培地と、新しい培地と古い培地との混合部とが、第２流入口２２１から外部に押し出されて排出される。新しい培地を含む培地がすべて第２流入口２２１から排出された後、加圧ポンプによる加圧が停止される。
　次に、図１０Ｂに示すように、培地交換用カートリッジ２００の第２流入口２２１に培地分析部１０６が連結される。そして、第２流出口２２２と曲線流路２２３との間のバルブ２２６と、曲線流路２２３と第２流入口２２１との間のバルブ２２５とが、それぞれ開かれた状態で、加圧ポンプにより曲線流路２２３が第２流出口２２２側から再び加圧される。これにより、曲線流路２２３内の古い培地が第２流入口２２１から培地分析部１０６へと押し出されて回収される。培地分析部１０６では回収した古い液体培地の成分が分析される。なお、培地回収部１０４にはバルブ駆動機構２４９が設けられており、ここで動作するバルブ２２５、２２６はバルブ駆動機構２４９により開閉される。
　次に、図４に示すように、カートリッジ搬送部１０９により、培地交換用カートリッジ２００は、培地回収部１０４および培地分析部１０６から分離されて、流路洗浄部１０５へと移動される。
　流路洗浄部１０５では、図１１Ａに示すように、培地交換用カートリッジ２００の第１流入口２１１および第２流出口２２２に三方弁１０５ｂを介して洗浄液貯蔵容器１０５ａが連結される。そして、図１１Ｂに示すように、第１流入口２１１と液貯蔵室２１３との間のバルブ２１５と、液貯蔵室２１３と通気口２１４との間のバルブ２１７とが、それぞれ開かれる。一方、液貯蔵室２１３と第１流出口２１２との間のバルブ２１６は閉じられる。この状態で、三方弁１０５ｂにより洗浄液貯蔵容器１０５ａと第１流入口２１１とが連通され、洗浄液貯蔵容器１０５ａから第１流入口２１１を介して洗浄液が供給される。液貯蔵室２１３と第１流出口２１２との間のバルブ２１６が閉じられているため、供給された洗浄液は液貯蔵室２１３内に溜められる。液貯蔵室２１３内に洗浄液が充填された後、三方弁１０５ｂにより洗浄液貯蔵容器１０５ａと第１流入口２１１との間の流路が閉じられる。
　次に、図１１Ｃに示すように、培地交換用カートリッジ２００の第１流入口２１１および第２流出口２２２に廃液容器１０５ｃが連結されるとともに、通気口２１４に加圧ポンプ（図示せず）が連結される。次いで、液貯蔵室２１３と第１流出口２１２との間のバルブ２１６が開かれるとともに、加圧ポンプにより液貯蔵室２１３内が加圧され、液貯蔵室２１３内の洗浄液が第１流出口２１２から廃液容器１０５ｃへと押し出されて排出される。
　次に、図１１Ｄに示すように、第２流出口２２２と曲線流路２２３との間のバルブ２２６と、曲線流路２２３と第２流入口２２１との間のバルブ２２５とが、それぞれ開かれる。この状態で、三方弁１０５ｂにより洗浄液貯蔵容器１０５ａと第２流出口２２２とが連通され、洗浄液貯蔵容器１０５ａから第２流出口２２２を介して洗浄液が供給される。第２流出口２２２から供給される洗浄液は、曲線流路２２３を通過して、第２流入口２２１から廃液容器１０５ｃへと排出される。なお、流路洗浄部１０５にはバルブ駆動機構２４９が設けられており、ここで動作するバルブ２１５、２１６、２１７、２２５、２２６はバルブ駆動機構２４９により開閉される。
　なお、ここでは液供給流路２０１が洗浄された後に液回収流路２０２が洗浄されたが、液回収流路２０２が洗浄された後に液供給流路２０１が洗浄されてもよい。
　次に、図４に示すように、カートリッジ搬送部１０９により、洗浄された培地交換用カートリッジ２００は、流路洗浄部１０５から分離されて、培地供給部１０２へと戻され、次の培地交換に再利用される。
　培地交換用カートリッジ２００の再利用を繰り返すと、液供給流路２０１および液回収流路２０２に徐々にタンパクが付着して汚染される。そのため、カートリッジ搬送部１０９により、定期的に、使用済みの培地交換用カートリッジ２００がカートリッジ回収部１０８へと排出されるとともに、未使用の培地交換用カートリッジ２００がカートリッジ保管部１０７から取り出される。
＜効果＞
　次に、上述した構成からなる本実施の形態によって達成される効果であって、まだ述べていない効果又はとりわけ重要な効果について説明する。
　本実施の形態によれば、所定量の液体培地を収容可能な培地交換用カートリッジ２００が培地供給部１０２と培地交換部１０３と培地回収部１０４との間で移動することで、培養容器７５が培地供給部１０２および培地回収部１０４から分離された状態で培地交換を行うことができる。このため、培養容器７５の周辺に培地貯蔵容器１０２ａや回収容器などの他の機器を集中して配置する必要がなく、機器集中による物理的な制約により液流路が冗長化することがない。したがって、従来の培地交換機構に比べて、液流路の短縮化が可能である。
　また本実施の形態によれば、液流路が培地交換用カートリッジ２００、すなわちカートリッジ状の部品に形成されているため、市販のロボットハンドであっても容易に把持して持ち運ぶことが可能であり、液流路の交換の自動化が容易である。
　また本実施の形態によれば、複数の培地交換用カートリッジ２００を使用することで、培地供給、培地交換、培地回収、流路洗浄の各処理を同時並行で行うことができる。そのため、複数の培養容器７５を処理する場合の作業時間が長時間化することを抑制できる。
　また本実施の形態によれば、培養容器７５がインキュベータ部１０１に収容されたまま培地交換を行うことで、培養容器７５内の細胞に対する環境変動を顕著に低減することができる。なお、本実施の形態において、培養容器７５がインキュベータ部１０１に収容されたまま培地交換が行われることは、必ずしも必須ではなく、培養容器７５がインキュベータ部１０１から取り出されて不図示の培地交換ステージ上で培地交換が行われてもよい。
　また本実施の形態によれば、培地交換用カートリッジ２００の液回収流路２０２が流路口径を小さく、かつ流路長を長く形成した曲線流路２２３を有しているため、培養容器７５から流出される古い培地と新しい培地とを曲線流路２２３に沿って混ざらないように回収することができる。これにより、曲線流路２２３から古い培地と新しい培地とを区別して排出することができ、培養容器７５内で使用された古い培地の成分を正確に分析することができる。
＜変形例＞
　なお、上述した本実施の形態に対して様々な変更を加えることが可能である。以下、図面を参照しながら、変形例について説明する。以下の説明および以下の説明で用いる図面では、上述した本実施の形態と同様に構成され得る部分について、上述の実施の形態における対応する部分に対して用いた符号と同一の符号を用いることとし、重複する説明を省略する。また、上述した実施の形態において得られる作用効果が変形例においても得られることが明らかである場合、その説明を省略することもある。
　図１２Ａは、複数の培養容器７５を収容可能な搬送容器の第１変形例の構成を示す内部上面図であり、図１２Ｂは、図１２Ａの搬送容器の内部側面図である。
　図１２Ａおよび図１２Ｂに示す搬送容器１７０は、筐体１７１と、複数の培養容器７５を保持可能なカセット１８０と、を有している。このうち筐体１７１は、下端部が開口する四角筒形状を有している。一方、カセット１８０は、筐体１７１の下端部の開口に嵌合して密閉する蓋体１７２と、蓋体１７２から鉛直上向きに延びるように設けられた支柱１７４と、支柱１７４に沿って並んで設けられた複数（図示された例では８つ）の棚１７３と、を有している。
　各棚１７３は、円板形状を有しており、水平に向けられた姿勢で支柱１７４に対して固定されている。各棚１７３の上には、複数（図示された例では４枚）の培養容器７５が、支柱１７４を中心として回転対称（図示された例では４回対称）で載置されるようになっている。
　図１２Ａおよび図１２Ｂに示す搬送容器１７０は、図３に示す搬送容器７０と同様に、容器搬送部６０の保持部６１によってぶら下げられた状態で、ｉＰＳ細胞自動培養装置２０の搬入部２１、分化細胞自動培養装置３０の搬入部３１、またはｉＰＳ細胞樹立装置１１の搬入部１２ａへと、レール６５に沿って搬送されることになる。
　この搬送容器１７０から培養容器７５を取り出す際には、図１３に示すように、不図示の回転昇降機構によりカセット１８０が下方に引き下げられ、複数の培養容器７５がカセット１８０に保持された状態で筐体１７１の外側に取り出される。そして、不図示のロボットハンドにより１つの棚１７３の上から１枚の培養容器７５が把持されて取り出される。各棚１７３の上から１枚ずつ培養容器７５が取り出された後、回転昇降機構により、カセット１８０が支柱１７４を中心として９０°回転される。そして、ロボットハンドにより１つの棚１７３の上から次の培養容器７５が把持されて取り出される。ロボットハンドによる培養容器７５の取出しと、回転昇降機構によるカセット１８０の回転とが繰り返されることで、カセット１８０に保持された全ての培養容器７５がロボットハンドにより取り出され得る。
　このような搬送容器１７０によれば、各棚１７３に複数の培養容器７５を載置できるため、図３に示す搬送容器７０に比べて培養容器７５の収納枚数を増やすことができ、より多くの培養容器７５を装置内に一括で搬送することができる。
　また、各棚１７３の上の複数の培養容器７５は支柱１７４を中心として回転対称で載置されているため、カセット１８０を支柱１７４を中心として回転させることで、各棚１７３に対して、ロボットハンドによる培養容器１７５のアクセスポイントを一点に共通化することができる。これにより、容器取出し機構の簡素化が可能となる。
　なお、図１２Ａおよび図１２Ｂに示す例では、各棚１７３に４枚の培養容器７５が載置されるようになっていたが、これに限定されない。たとえば図１４に示すように、各棚１７３に２枚の培養容器７５が支柱１７４を中心として２回対称で載置されてもよい。ありいは、各棚１７３にｎ枚（ｎ＝３，５，６，７…）の培養容器７５が支柱１７４を中心としてｎ回対称で載置されてもよい。
　次に、図１２Ａおよび図１２Ｂに示す搬送容器１７０と一緒に用いられる細胞培養装置の変形例について説明する。
　図１５Ａは、細胞培養装置の変形例の構成を示す概略平面図である。図１５Ｂは、図１５Ａの細胞培養装置のＢ－Ｂ線に沿った断面図である。図１５Ｃは、図１５Ａの細胞培養装置のＣ－Ｃ線に沿った断面図である。図１５Ｄは、図１５Ａの細胞培養装置の左側面図である。
　図１５Ａ～図１５Ｄに示す細胞培養装置１００ｂは、図１２Ａおよび図１２Ｂに示す搬送容器１７０から複数の培養容器７５を保持するカセット１８０（図１５Ａ～図１５Ｄでは不図示）を取り出すととともに、複数の培養容器７５を保持するカセット１８０をインキュベータ部１０１まで搬送する装置内搬送部１１１と、複数の培養容器７５をカセット１８０に保持されたまま収容可能な複数（図示された例では１６個）のインキュベータ部１０１と、を備えている。また、この細胞培養装置１００ｂは、図４に示す細胞培養装置１００と同様に、培地交換用カートリッジ２００を搬送するカートリッジ搬送部１０９と、培地供給部１０２と、培地交換部（図１５Ａ～図１５Ｄでは不図示）と、培地回収部１０４と、流路洗浄部１０５と、をさらに備えている。なお、図１５Ａ～図１５Ｄにおいて、培地交換用カートリッジ２００は、培養容器７５と連結可能な第１流出口および第２流入口の部分のみが図示されている。
　図１５Ｃに示すように、１６個のインキュベータ部１０１は、鉛直方向および水平方向に沿って４×４の行列状に設置されている。各インキュベータ部１０１は、装置内搬送部１１１とカートリッジ搬送部１０９の両方からアクセス可能となっている。また、各インキュベータ部１０１には、不図示のターンテーブルが設けられており、複数の培養容器７５を保持するカセット１８０を、支柱１７４を中心として回転できるようになっている。
　また、図１５Ｃに示す例において右下に位置するインキュベータ部１０１には、細胞検査除去部１１２が連結されている。細胞検査除去部１１２は、連結されたインキュベータ部１０１から培養容器７５を一枚ずつ取出して、培養容器７５内の細胞を検査するとともに状態の悪い細胞の除去を行うようになっている。
　次に、図１５Ａ～図１５Ｄに示す細胞培養装置１００ｂの使用方法について説明する。
　まず、容器搬送部６０により搬送された搬送容器１７０が装置内搬送部１１１に連結され、複数の培養容器７５を保持するカセット１８０が搬送容器１７０から装置内搬送部１１１へと取り出される。
　次に、装置内搬送部１１１は、複数の培養容器７５を保持するカセットを１つのインキュベータ部１０１内に搬入する。このインキュベータ部１０１内は、温度、湿度及び気体濃度のいずれか一つ又はこれらの全てが自動で調整される。なお、ランニングコストの観点から、使用していない他のインキュベータ部１０１は、この時点では動作を停止させておくことが好ましい。
　次に、インキュベータ部１０１内に収容された培養容器７５に対して、上述した培地交換方法と同様にして、培地交換用カートリッジ２００を用いた培地交換が行われる。
　すなわち、カートリッジ搬送部１０９により搬送される培地交換用カートリッジ２００が、培地供給部１０２に連結され、培地交換用カートリッジ２００の液供給流路２０１に液体培地が供給された後、培地交換用カートリッジ２００が培地供給部１０２から分離される。
　次に、カートリッジ搬送部１０９により搬送される培地交換用カートリッジ２００が、インキュベータ部１０１内に収容された１つの棚１７３の上の１枚の培養容器７５に連結され、液供給流路２０１内の液体培地が培養容器７５内に供給されるとともに培養容器７５内の液体培地が液回収流路２０２内に回収される。その後、培地交換用カートリッジ２００が当該培養容器７５から分離される。
　次に、カートリッジ搬送部１０９により搬送される培地交換用カートリッジ２００が、培地回収部１０４に連結され、液回収流路２０２から培地回収部１０４に液体培地が回収された後、培地交換用カートリッジ２００が培地回収部１０４から分離される。
　次に、カートリッジ搬送部１０９により搬送される培地交換用カートリッジが、流路洗浄部１０５に連結され、液供給流路２０１および液回収流路２０２がそれぞれ洗浄される。洗浄された培地交換用カートリッジ２００は、流路洗浄部１０５から分離されて、培地供給部１０２へと戻され、次の培地交換に利用される。
　各棚１７３の上の１枚の培養容器７５に対して培地交換が行われた後、インキュベータ部１０１に設けられたターンテーブルにより、カセット１８０が支柱１７４を中心として９０°回転される。そして、各棚１７３の上の次の培養容器７５に対して培地交換が行われる。
　このように複数の培養容器７５がカセット１８０に保持された状態でインキュベータ部１０１内に収容され、カセット１８０が支柱１７４を中心として回転されることで、各棚１７３において、カートリッジ搬送部１０９による培地交換用カートリッジ２００のアクセスポイントを一点に共通化することができる。これにより、カートリッジ搬送部１０９の簡素化が可能となる。
　装置内搬送部１１１は、定期的に、複数の培養容器７５を保持するカセット１８０を、細胞検査除去部１１２が連結された別のインキュベータ部１０１へと搬送する。細胞検査除去部１１２は、インキュベータ部１０１から培養容器７５を一枚ずつ取出して、培養容器７５内の細胞を検査するとともに状態の悪い細胞の除去を行った後、検査済みの培養容器７５をインキュベータ部１０１内に戻す。その後、装置内搬送部１１１は、検査済みの複数の培養容器７５を保持するカセット１８０を、元のインキュベータ部１０１へと戻す。
　ところで、細胞培養工程においては、細胞の成長によって複数の培養容器７５に分けて培養を継続させるため、複数の培養容器７５を取り扱う必要がある。従来の細胞培養装置のように、装置内における培養容器７５の搬送が１個ずつ行われる場合、培養の進行にともなって、基を同じにする細胞であっても、最初の培養容器７５と最後の培養容器７５との間に時間差が生じてしまい、培養条件が大きく異なってしまう。
　一方、図１５Ａ～図１５Ｄに示す細胞培養装置１００ｂによれば、複数の培養容器７５がカセット１８０に保持された状態で一括で搬送されるため、培養時間の差異を低減することができる。
　なお、図１５Ａ～図１５Ｄに示す細胞培養装置１００ｂにおいて細胞の継代を行う場合には、増加する培養容器７５の数に合わせて、使用するインキュベータ部１０１の数を増やしていくことが好ましい。使用するインキュベータ部１０１の数を徐々に増やしていくことで、ランニングコストを低減できる。
　最後になったが、上述した実施の形態の記載及び図面の開示は、特許請求の範囲に記載された発明を説明するための一例に過ぎず、上述した実施の形態の記載又は図面の開示によって特許請求の範囲に記載された発明が限定されることはない。また、各実施の形態は、処理内容を矛盾させない範囲で適宜組み合わせることが可能である。
７５　　　培養容器
１００、１００ｂ　　細胞培養装置
１０１　　インキュベータ部
１０２　　培地供給部
１０３　　培地交換部
１０４　　培地回収部
１０５　　流路洗浄部
１０６　　培地分析部
１０７　　カートリッジ保管部
１０８　　カートリッジ回収部
１０９　　カートリッジ搬送部
２００　　培地交換用カートリッジ
２０１　　液供給流路
２０２　　液回収流路
２１１　　第１流入口
２１２　　第１流出口
２１３　　液貯蔵室
２１４　　通気口
２２１　　第２流入口
２２２　　第２流出口
２２３　　曲線流路
２２４　　タンク状の流路

Claims (17)

  1. 　閉鎖系の培養容器を収容可能なインキュベータ部と、
    　液供給流路および液回収流路を有し、前記培養容器に対して着脱可能な培地交換用カートリッジと、
    　前記培地交換用カートリッジの前記液供給流路に液体培地を供給する培地供給部と、
    　前記培地交換用カートリッジが前記培養容器に連結された状態で、前記液供給流路内の液体培地を前記培養容器内に流入させるとともに前記培養容器内の液体培地を前記液回収流路に流出させる培地交換部と、
    　前記培地交換用カートリッジの前記液回収流路から液体培地を回収する培地回収部と、を備え、
    　前記培地交換用カートリッジは、前記培地供給部と前記培地交換部と前記培地回収部との間で移動可能である
    ことを特徴とする細胞培養装置。
  2. 　前記培地交換用カートリッジを、前記培地供給部と前記培地交換部と前記培地回収部との間で移動させるカートリッジ搬送部
    をさらに備えたことを特徴とする請求項１に記載の細胞培養装置。
  3. 　前記培地交換用カートリッジの前記液供給流路および前記液回収流路をそれぞれ洗浄する流路洗浄部をさらに備え、
    　前記培地交換用カートリッジは、前記培地供給部と前記培地交換部と前記培地回収部と前記流路洗浄部との間で移動可能である
    ことを特徴とする請求項１または２に記載の細胞培養装置。
  4. 　前記培地交換部は、前記インキュベータ部に隣接して設けられており、前記培養容器が前記インキュベータ部に収容されたまま、前記培地交換用カートリッジを介して前記培養容器の培地交換が可能である
    ことを特徴とする請求項１～３のいずれかに記載の細胞培養装置。
  5. 　前記培地回収部には、回収された液体培地を分析する培地分析部が設けられている
    ことを特徴とする請求項１～４のいずれかに記載の細胞培養装置。
  6. 　未使用の前記培地交換用カートリッジを複数保管するカートリッジ保管部と、
    　使用済みの前記培地交換用カートリッジを回収するカートリッジ回収部と、
    をさらに備えたことを特徴とする請求項１～５のいずれかに記載の細胞培養装置。
  7. 　前記液供給流路は、前記培地供給部に連結可能な第１流入口と、前記培養容器の流入口に連結可能な第１流出口と、前記第１流入口と前記第１流出口とを連通する液貯蔵室と、前記液貯蔵室に連通する通気口と、を有し、
    　前記液回収流路は、前記培養容器の流出口に連結可能な第２流入口と、前記培地回収部に連結可能な第２流出口と、前記第２流入口と前記第２流出口とを連通する複数の屈曲箇所または湾曲箇所を含む曲線流路と、を有する
    ことを特徴とする請求項１～６のいずれかに記載の細胞培養装置。
  8. 　前記曲線流路は、蛇行状または渦巻き状の形状を有する
    ことを特徴とする請求項７に記載の細胞培養装置。
  9. 　前記第１流出口と前記第２流入口とは互いに隣接して設けられている
    ことを特徴とする請求項７または８に記載の細胞培養装置。
  10. 　液供給流路および液回収流路を備え、
    　閉鎖系の培養容器に対して着脱可能であるとともに、細胞培養装置の培地供給部と培地交換部と培地回収部との間で移動可能である
    ことを特徴とする培地交換用カートリッジ。
  11. 　前記液供給流路は、前記培地供給部に連結可能な第１流入口と、前記培養容器の流入口に連結可能な第１流出口と、前記第１流入口と前記第１流出口とを連通する液貯蔵室と、前記液貯蔵室に連通する通気口と、を有し、
    　前記液回収流路は、前記培養容器の流出口に連結可能な第２流入口と、前記培地回収部に連結可能な第２流出口と、前記第２流入口と前記第２流出口とを連通する複数の屈曲箇所または湾曲箇所を含む曲線流路と、を有する
    ことを特徴とする請求項１０に記載の培地交換用カートリッジ。
  12. 　前記曲線流路は、蛇行状または渦巻き状の形状を有する
    ことを特徴とする請求項１１に記載の培地交換用カートリッジ。
  13. 　前記第１流出口と前記第２流入口とは互いに隣接して設けられている
    ことを特徴とする請求項１１または１２に記載の培地交換用カートリッジ。
  14. 　液供給流路および液回収流路を有する培地交換用カートリッジを培地供給部に連結し、前記培地供給部から前記液供給流路に液体培地を供給し、前記培地交換用カートリッジを前記培地供給部から分離する培地供給工程と、
    　前記培地交換用カートリッジを閉鎖系の培養容器に連結し、前記液供給流路内の液体培地を前記培養容器内に流入させるとともに前記培養容器内の液体培地を前記液回収流路内に流出させ、前記培地交換用カートリッジを前記培養容器から分離する培地交換工程と、　前記培地交換用カートリッジを培地回収部に連結し、前記液回収流路から前記培地回収部に液体培地を回収し、前記培地交換用カートリッジを前記培地回収部から分離する培地回収工程と、
    を備えたことを特徴とする培地交換方法。
  15. 　前記培地回収工程の後、前記培地交換用カートリッジの前記液供給流路および前記液回収流路をそれぞれ洗浄する洗浄工程
    をさらに備えたことを特徴とする請求項１４に記載の培地交換方法。
  16. 　前記培地交換工程は、前記培養容器がインキュベータ部に収容された状態で行われる
    ことを特徴とする請求項１４または１５に記載の培地交換方法。
  17. 　前記培地回収工程の後、回収された液体培地を分析する培地分析工程
    をさらに備えたことを特徴とする請求項１４～１６のいずれかに記載の培地交換方法。
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Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018105540A1 (ja) * 2016-12-05 2018-06-14 東京エレクトロン株式会社 培養処理システムおよび培養処理方法
WO2018154788A1 (ja) * 2017-02-27 2018-08-30 剛士 田邊 体細胞製造システム
WO2018154791A1 (ja) * 2017-02-27 2018-08-30 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
WO2018154785A1 (ja) * 2017-02-27 2018-08-30 剛士 田邊 温度管理ケース
JP2019088335A (ja) * 2019-03-20 2019-06-13 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
JP2019088337A (ja) * 2019-03-20 2019-06-13 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
JP2019088336A (ja) * 2019-03-20 2019-06-13 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
CN110023483A (zh) * 2016-10-13 2019-07-16 昕芙旎雅有限公司 培养容器连结装置、培养系统和用于洗涤针的方法
WO2020255929A1 (ja) * 2019-06-20 2020-12-24 シンフォニアテクノロジー株式会社 細胞培養装置

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113302500A (zh) * 2018-11-16 2021-08-24 爱新诺有限公司 用于处理生物材料的包括多个统一设计的存储模块的系统
JP7303300B2 (ja) 2018-11-16 2023-07-04 アイキシンノ・リミテッド ラボウェア及び細胞培養プロセスにおけるラボウェアのハンドリングシステム
WO2020098957A1 (en) 2018-11-16 2020-05-22 Aixinno Limited A process module for an automated biology system
EP3881082B1 (en) 2018-11-16 2024-03-13 Aixinno Limited Module for an automated biology laboratory system with an interface to transfer microplates or lab-ware
EP4232793A1 (en) * 2020-10-23 2023-08-30 Merck Patent GmbH Transfer device for transferring a plurality of objects through a transfer port
WO2024062262A1 (en) * 2022-09-21 2024-03-28 The Automation Partnership (Cambridge) Limited Method for performing a bioprocess on liquid immune cell cultures comprising a sequence of processing steps

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002262856A (ja) * 2001-03-07 2002-09-17 Japan Tissue Engineering:Kk 自動培地交換方法、プログラム及び自動培地交換装置
JP2010104299A (ja) * 2008-10-30 2010-05-13 Hitachi Ltd 自動培養装置
JP2010524498A (ja) * 2007-04-23 2010-07-22 ティシュー・ジェネシス・インコーポレーテッド 細胞分離装置および使用方法
US20110136225A1 (en) * 2009-12-07 2011-06-09 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Bioreactor, devices, systems and methods
JP2015062383A (ja) * 2013-09-25 2015-04-09 東京エレクトロン株式会社 自動培養システム及び自動培養装置

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0801674A4 (en) * 1995-10-30 1999-07-07 Cellex Biosciences Inc APPARATUS FOR CULTIVATING BIOARTIFICIAL LIVER
JP3572341B2 (ja) * 2000-11-21 2004-09-29 独立行政法人 宇宙航空研究開発機構 細胞培養容器の培地交換用システム
JP2005168384A (ja) * 2003-12-10 2005-06-30 Olympus Corp 培養容器および自動培養装置
AU2006309682A1 (en) * 2005-11-01 2007-05-10 Medinet Co., Ltd. Cell culture apparatus, cell culture method, cell culture program and cell culture system
WO2011103359A2 (en) * 2010-02-17 2011-08-25 Inq Biosciences Corporation Culture systems, apparatus, and related methods and articles
KR101589356B1 (ko) * 2011-04-13 2016-01-27 가부시키가이샤 히타치세이사쿠쇼 세포 배양 장치 및 반송 장치

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002262856A (ja) * 2001-03-07 2002-09-17 Japan Tissue Engineering:Kk 自動培地交換方法、プログラム及び自動培地交換装置
JP2010524498A (ja) * 2007-04-23 2010-07-22 ティシュー・ジェネシス・インコーポレーテッド 細胞分離装置および使用方法
JP2010104299A (ja) * 2008-10-30 2010-05-13 Hitachi Ltd 自動培養装置
US20110136225A1 (en) * 2009-12-07 2011-06-09 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Bioreactor, devices, systems and methods
JP2015062383A (ja) * 2013-09-25 2015-04-09 東京エレクトロン株式会社 自動培養システム及び自動培養装置

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP3260527A4 *

Cited By (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11377631B2 (en) 2016-10-13 2022-07-05 Sinfonia Technology Co., Ltd. Culture container linkage device, culture system, and method for washing needle
CN110023483A (zh) * 2016-10-13 2019-07-16 昕芙旎雅有限公司 培养容器连结装置、培养系统和用于洗涤针的方法
EP3527654A4 (en) * 2016-10-13 2020-06-03 Sinfonia Technology Co., Ltd. CONNECTING DEVICE FOR CULTURE CONTAINERS, CULTURE SYSTEM AND METHOD FOR WASHING NEEDLES
WO2018105540A1 (ja) * 2016-12-05 2018-06-14 東京エレクトロン株式会社 培養処理システムおよび培養処理方法
WO2018154785A1 (ja) * 2017-02-27 2018-08-30 剛士 田邊 温度管理ケース
JPWO2018154788A1 (ja) * 2017-02-27 2019-03-14 剛士 田邊 体細胞製造システム
JPWO2018154785A1 (ja) * 2017-02-27 2019-04-11 剛士 田邊 温度管理ケース
CN109641691A (zh) * 2017-02-27 2019-04-16 田边刚士 温度管理罐
US11959058B2 (en) 2017-02-27 2024-04-16 I Peace, Inc. Cell processing system and cell processing device
JP6480093B2 (ja) * 2017-02-27 2019-03-06 剛士 田邊 体細胞製造システム
WO2018154791A1 (ja) * 2017-02-27 2018-08-30 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
JPWO2018154791A1 (ja) * 2017-02-27 2019-06-27 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
WO2018154788A1 (ja) * 2017-02-27 2018-08-30 剛士 田邊 体細胞製造システム
EP3480131A4 (en) * 2017-02-27 2020-03-18 Koji Tanabe TEMPERATURE CONTROL HOUSING
JP2019088336A (ja) * 2019-03-20 2019-06-13 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
JP7090337B2 (ja) 2019-03-20 2022-06-24 アイ ピース，インコーポレイテッド 細胞処理システム及び細胞処理装置
JP2019088337A (ja) * 2019-03-20 2019-06-13 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
JP2019088335A (ja) * 2019-03-20 2019-06-13 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
WO2020255929A1 (ja) * 2019-06-20 2020-12-24 シンフォニアテクノロジー株式会社 細胞培養装置
JP2021000005A (ja) * 2019-06-20 2021-01-07 シンフォニアテクノロジー株式会社 細胞培養装置
JP7481608B2 (ja) 2019-06-20 2024-05-13 シンフォニアテクノロジー株式会社 細胞培養装置

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