JPWO2018101358A1 - タンパク質組成物、その製造方法及び熱安定性向上方法 - Google Patents
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Abstract
Description
すなわち、モールド成形体は、鋳型(モールド)にタンパク質組成物1を導入し成形加工する等して得ることができ、成形加工の工程において、加熱及び加圧することが可能である。成形加工の対象のタンパク質組成物1は、粉末状(凍結乾燥粉末等)又は繊維状(紡糸して得られる繊維等)の形状を有することができる。また、モールド成形体は、上記形状のタンパク質組成物の融着体であり得る。
プロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエートと2,2’−メチレンビス(4,6−ジ−tert−ブチルフェニル) 2−エチルヘキシルホスファイトの組み合わせ、
6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾールとチオビス[2−(1,1−ジメチルエチル)−5−メチル−4,1−フェニレン]−ビス[3−(ドデシルチオ)プロピオネート]の組み合わせ、
N,N’−ヘキサン−1,6−ジイルビス(3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニルプロピオンアミド))と2,2’−メチレンビス(4,6−ジ−tert−ブチルフェニル) 2−エチルヘキシルホスファイトの組み合わせ、
ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6−ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]])と3,9−ビス(2,6−ジ−tert−ブチル−4−メチルフェノキシ)−2,4,8,10−テトラオキサ−3,9−ジホスファスピロ[5.5]ウンデカンの組み合わせ、又は
ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6−ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]])と2,2’−メチレンビス(4,6−ジ−tert−ブチルフェニル) 2−エチルヘキシルホスファイトの組み合わせ、又は
ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6−ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]])とチオビス[2−(1,1−ジメチルエチル)−5−メチル−4,1−フェニレン] ビス[3−(ドデシルチオ)プロピオネート]の組み合わせであることが好ましい。安定化剤が上記組み合わせのいずれかであると、それを含有するタンパク質組成物の熱安定性がさらに向上する。
さらに、安定化剤を溶解させた溶液に、上記クモ糸フィブロインを分散させて分散体を得、この分散体から溶媒を除去して得られる乾燥物を用いてドープ溶液を作製してもよい。
(クモ糸タンパク質をコードする遺伝子の合成、及び発現ベクターの構築)
ネフィラ・クラビペス(Nephila clavipes)由来のフィブロイン(GenBankアクセッション番号:P46804.1、GI:1174415)の塩基配列及びアミノ酸配列に基づき、配列番号1で示されるアミノ酸配列を有する改変フィブロイン(以下、「PRT410」ともいう。)を設計した。
IPTGを添加してから2時間後に回収した菌体を20mM Tris−HCl buffer(pH7.4)で洗浄した。洗浄後の菌体を約1mMのPMSFを含む20mM Tris−HCl緩衝液(pH7.4)に懸濁させ、高圧ホモジナイザー(GEA Niro Soavi社)で細胞を破砕した。破砕した細胞を遠心分離し、沈殿物を得た。得られた沈殿物を、高純度になるまで20mM Tris−HCl緩衝液(pH7.4)で洗浄した。洗浄後の沈殿物を100mg/mLの濃度になるように8M グアニジン緩衝液(8Mグアニジン塩酸塩、10mMリン酸二水素ナトリウム、20mM NaCl、1mM Tris−HCl、pH7.0)で懸濁し、60℃で30分間、スターラーで撹拌し、溶解させた。溶解後、透析チューブ(三光純薬株式会社製のセルロースチューブ36/32)を用いて水で透析を行った。透析後に得られた白色の凝集タンパク質を遠心分離により回収し、凍結乾燥機で水分を除き、凍結乾燥粉末を回収した。
上記精製工程で得られた人工クモ糸タンパク質粉末200mgをそれぞれサンプル瓶に導入した。以下の表3に示す安定化剤を0.3mg/mLの濃度で溶媒(アセトン/メタノールを体積比1/1とした混合溶媒)に溶解させ、その安定化剤溶液2mLをそれぞれサンプル瓶に導入した(安定化剤量:0.6mg)。そして、サンプル瓶に封をして室温で16時間撹拌を行った後、自然乾燥を行い、溶媒を揮発させることで安定化剤含有粉末(粉末状タンパク質組成物)(乾燥物全量に対する安定化剤含有量:0.3質量%)を調製した。
安定化剤を添加しなかった以外は、上記と同様にしてタンパク質粉末を調製し、それをコントロールとした。
(T1−T0)/T0×100 [%]
Extention of Time at Imax[%]は化学発光強度が最大値に達するまでの遅延時間を意味し、数値が大きい方が熱安定性が高いことを示す。表3の安定化剤について、結果を以下の表4に示す。
上記精製工程で得られた人工クモ糸タンパク質粉末(PRT410)200mgをサンプル瓶に導入した。安定化剤としてプロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエートを用い、安定化剤の含有量を0.5質量%とした他は、上記2−1.と同様にして安定化剤含有粉末(粉末状タンパク質組成物)(乾燥物全量に対する安定化剤含有量:0.5質量%)を調製した。
コントロールとして、安定化剤を添加しなかった以外は、上記と同様にしてタンパク質粉末を調製した。
上記精製工程で得られた人工クモ糸タンパク質粉末(PRT410)0.56gをそれぞれサンプル瓶に導入した。蒸留水8.4mL、エタノール6.7mLの混合溶液に塩化カルシウムを2.22g溶解させて、人工クモ糸タンパク質粉末の溶解溶媒を作成した後、その溶解溶媒5gをそれぞれサンプル瓶に導入した。以下の表5に示す安定化剤を1.4質量%の濃度でエタノールに溶解させた。その安定化剤溶液100μLをそれぞれサンプル瓶に導入し(安定化剤量:1.12mg)、65℃で6時間、撹拌を行うことでドープ溶液を調製した。
調製したドープ溶液をポリスチレン(PS)製のペトリ皿に0.63gキャストし、60℃、550hPaの状態で7日間静置させることで乾燥を行った。乾燥後は、アセトン、メタノール混合溶液(比率7:3)にペトリ皿ごと30分間浸漬させた。その後、ペトリ皿からフィルムを剥がし取り、メタノール溶液に30分浸漬させてから自然乾燥を行うことによって、厚み120μmの安定化剤含有人工クモ糸フィルム(乾燥物全量に対する安定化剤含有率:0.2質量%)を作製した。
表5に示した安定化剤の内、以下の表7に示す組み合わせで安定化剤を使用した。2種類の安定化剤をそれぞれ1.4質量%の濃度でエタノールに溶解させた以外は、上記3−1.と同様にして、ドープ溶液(安定化剤量:2.24mg)を調製し、厚み120μmの安定化剤含有人工クモ糸フィルム(乾燥物全量に対する安定化剤含有率:0.4質量%)を作製した。
比較のために、プロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエートを単独で安定化剤として使用し、2.8質量%の濃度でエタノールに溶解させた以外は、上記3−1.と同様にして、厚み120μmの安定化剤含有人工クモ糸フィルム(乾燥物全量に対する安定化剤含有率:0.4質量%)を作製した。
以下の表9に示す組み合わせで安定化剤を使用した以外は、上記3−2.と同様にして、厚み120μmの安定化剤含有人工クモ糸フィルム(乾燥物全量に対する安定化剤含有率:0.4質量%)を作製した。
比較のために、6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾールを単独で安定化剤として使用した以外は、上記3−2.と同様にして、厚み120μmの安定化剤含有人工クモ糸フィルム(乾燥物全量に対する安定化剤含有率:0.4質量%)を作製した。
以下の表11に示す組み合わせで安定化剤を使用した以外は、上記3−2.と同様にして、厚み120μmの安定化剤含有人工クモ糸フィルム(乾燥物全量に対する安定化剤含有率:0.4質量%)を作製した。
比較のために、N,N’−ヘキサン−1,6−ジイルビス(3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニルプロピオンアミド))を単独で安定化剤として使用した以外は、上記3−2.と同様にして、厚み120μmの安定化剤含有人工クモ糸フィルム(乾燥物全量に対する安定化剤含有率:0.4質量%)を作製した。
以下の表13に示す組み合わせで安定化剤を使用した以外は、上記3−2.と同様にして厚み120μmの安定化剤含有人工クモ糸フィルム(乾燥物全量に対する安定化剤含有率:0.4質量%)を作製した。
比較のために、ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6−ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]])を単独で安定化剤として使用した以外は、上記3−2.と同様にして、厚み120μmの安定化剤含有人工クモ糸フィルム(乾燥物全量に対する安定化剤含有率:0.4質量%)を作製した。
上記精製工程で得られた人工クモ糸タンパク質粉末(PRT410)9.98gをバイアル瓶に導入した。安定化剤としてプロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエートを1mg/mLの濃度でエタノールに溶解させ、その安定化剤溶液を20mLバイアル瓶に導入した(安定化剤量:20mg)。そして、バイアル瓶に封をして室温で超音波攪拌を60分行った。さらに60時間撹拌を行った後、40℃で4時間減圧乾燥を行い、溶媒を揮発させることで安定化剤含有粉末(乾燥物全量に対する安定化剤含有量率:0.2質量%)を調製した。
安定化剤含有粉末をミル(IWATANI社製、IFM−80)にて粉砕して粒子径を調節した後、粒子径調節後の安定化剤含有粉末(以下「タンパク質組成物」という。)を1.35g量り取り、このタンパク質組成物を図1に示す加圧成形機10の金型2(円柱形状の金型であり、断面が35mm×15mmの長方形状の貫通孔を有している。)の貫通孔内に導入した。この際、厚みが均等になるようにタンパク質組成物を加えていった。全てのタンパク質組成物を導入した後、金型2の加熱を開始するとともに、ハンドプレス機(NPaシステム株式会社製、NT−100H−V09)を用いて、上側ピン4と下側ピン6を貫通孔内に挿入することでタンパク質組成物の加圧を行った。この際、タンパク質組成物の加圧条件が40kNとなるように制御した。タンパク質組成物の温度が200℃になったところで加熱を中止し、自然放冷して、タンパク質組成物の温度が50℃になったところで取り出し、バリ取りを行った後、35mm×15mm×2mmの直方体形状の安定化剤含有モールド成形体を得た(乾燥物全量に対する安定化剤含有量率:0.2質量%)。
上記4−1.と同様にして調製した安定化剤含有粉末(以下「タンパク質組成物」という。)を1.35g量り取り、金型2(図1)の貫通孔内に導入した(乾燥物全量に対する安定化剤含有量率:0.2質量%)。タンパク質組成物の加熱を、タンパク質組成物の温度が130℃に達したところで5分間ホールドした後で、加熱を中止した他は、上記4−1.と同様の手順で安定化剤含有モールド成形体を得た(乾燥物全量に対する安定化剤含有量率:0.2質量%)。
比較のため、上記精製工程で得られた人工クモ糸タンパク質粉末10g(PRT410)をバイアル瓶に導入し、その後エタノール20mLを導入した。その他は、上記4−1.と同様にしてモールド成形体を得た(安定化剤の添加なし)。
安定化剤として6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾールを1mg/mLの濃度でエタノールに溶解させ、その安定化剤溶液を30mLバイアル瓶に導入した(安定化剤量:30mg)。上記精製工程で得られた人工クモ糸タンパク質粉末(PRT410)9.97gをバイアル瓶に導入した。バイアル瓶に封をして室温で市販のマグネチックスターラーを用いて攪拌を一晩行った。分散液を蓋のない容器に移し替え、3日間ドラフト内に静置してエタノールを揮発除去した後、さらに35℃で数時間減圧乾燥を行い、安定化剤含有粉末(粉末状タンパク質組成物)を調製した(以下「タンパク質組成物」という)。タンパク質組成物を1.35g量り取り、金型2(図1)の貫通孔内に導入した。タンパク質組成物の加熱を、タンパク質組成物の温度が190℃に達したところで5分間ホールドした後に、加熱を中止した。その他は、上記4−1.と同様にして、35mm×15mm×2mmの直方体形状の安定化剤含有モールド成形体を得た(乾燥物全量に対する安定化剤含有量率:0.3質量%)。
比較のために、上記精製工程で得られた人工クモ糸タンパク質粉末(PRT410)10gをバイアル瓶に導入し、その後エタノール30mLを導入した。その他は、上記4−1.と同様にして35mm×15mm×2mmの直方体形状のモールド成形体を得た(安定化剤の添加なし)。
<ドープ溶液の調製>
溶媒として、LiClを濃度4質量%で溶解させたジメチルスルホキシド(LiCl/DMSO)を調製した。上記精製工程で得られた人工クモ糸タンパク質粉末(PRT410)の乾燥粉末を3.5g秤量し、バイアル瓶に導入した。濃度24質量%となるようにLiCl/DMSO溶媒を添加し、メカニカルスターラーを使用して撹拌させながら、90℃に加熱して溶解させ、60℃まで放冷してタンパク質溶液を調製した。
2−プロパノールを別のバイアル瓶に導入し、安定化剤としてプロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエートを添加して溶解させ、安定化剤溶液を調製した。調製した安定化剤溶液を、上記タンパク質溶液に添加した。メカニカルスターラーを使用して混合溶液を撹拌させながら、90℃に加熱して溶解させ、安定化剤含有ドープ溶液を調製した。安定化剤含有ドープ溶液の安定化剤含有率は、それぞれ0.2質量%、0.5質量%、1.0質量%、4.0質量%とした。
比較のため、安定化剤を含まないドープ溶液を調製した。上記精製工程で得られた人工クモ糸タンパク質粉末(PRT410)の乾燥粉末を3.5g秤量し、バイアル瓶に導入した。濃度24質量%となるように上記のLiCl/DMSO溶媒を添加し、上記と同様にしてドープ溶液を調製した(安定化剤添加なし)。
得られた安定化剤含有ドープ溶液を、公知の紡糸装置を用いて、下記の条件で乾湿式紡糸を行い、形成された繊維を乾燥してから巻き取ることにより、タンパク質組成物2(繊維)を作製した。乾湿式紡糸の条件は以下のとおりである。
凝固液:メタノール
総延伸倍率:5倍
乾燥温度:60℃
熱安定性の評価は、以下のように行った。試料を収容するチャンバーに上記安定化剤含有タンパク質繊維を設置し、このチャンバーを装置にセットした。その後、乾燥空気を流速100mL/minで流通し、190℃に保持して化学発光強度の経時変化をケミルミネッセンスアナライザー(東北電子産業株式会社製CLA−ID2−HS)で検出した。安定化剤を添加していないタンパク質繊維の化学発光強度が最大値に達するまでの時間をT0、安定化剤含有タンパク質繊維の化学発光強度が最大値に達するまでの時間をT1として、次式よりExtention of Time at Imaxを算出した。
(T1−T0)/T0×100 [%]
その結果を以下の表18に示す。
Claims (37)
- タンパク質が安定化剤溶液中に分散した分散体の乾燥物を含有するタンパク質組成物であって、
前記安定化剤は、カテコール系安定化剤、6−ヒドロキシ−2,5,7,8−テトラメチルクロマン−2−カルボン酸、2,6−ジ−tert−ブチル−p−クレゾール、2−tert−ブチル−4−メトキシフェノール、及び6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾールからなる群より選ばれる少なくとも一種を含む、タンパク質組成物。 - 前記カテコール系安定化剤は、2−(3,4−ジヒドロキシフェニル)−3,5,7−トリヒドロキシ−4H−クロメン−4−オン、(1S,3R,4R,5R)−3−{[3−(3,4−ジヒドロキシフェニル)アクリロイル]オキシ}−1,4,5−トリヒドロキシシクロヘキサン−1−カルボン酸、2−(3,4−ジヒドロキシフェニル)−5,7−ジヒドロキシ−3−{[(2S,3R,4S,5S,6R)−3,4,5−トリヒドロキシ−6−({[(2R,3R,4R,5R,6S)−3,4,5−トリヒドロキシ−6−メチルオキサン−2−イル]オキシ}メチル)オキサン−2−イル]オキシ}−4H−クロメン−4−オン、プロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエート又は4,4’−(2,3−ジメチルブタン−1,4−ジイル)ジベンゼン−1,2−ジオールを含む、請求項1に記載のタンパク質組成物。
- 粉末状である、請求項1又は2に記載のタンパク質組成物。
- モールド成形体である、請求項1又は2に記載のタンパク質組成物。
- タンパク質と安定化剤が溶解した溶液の乾燥物を含有するタンパク質組成物であって、
前記安定化剤は、N,N’−ヘキサン−1,6−ジイルビス[3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニルプロピオンアミド)、1,6−ヘキサンジオールビス[3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニル)プロピオナート]、6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾール、2,6−ジ−tert−ブチル−p−クレゾール、3,9−ビス(2,6−ジ−tert−ブチル−4−メチルフェノキシ)−2,4,8,10−テトラオキサ−3,9−ジホスファスピロ[5.5]ウンデカン、ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6−ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]]]、α−トコフェロール、プロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエート及び4,4’,4’’−(1−メチルプロパニル−3−イリデン)トリス(6−tert−ブチル−m−クレゾール)からなる群より選ばれる少なくとも一種を含む、タンパク質組成物。 - 前記安定化剤が、3,9−ビス(2,6−ジ−tert−ブチル−4−メチルフェノキシ)−2,4,8,10−テトラオキサ−3,9−ジホスファスピロ[5.5]ウンデカン、2,2’−メチレンビス(4,6−ジ−tert−ブチルフェニル) 2−エチルヘキシルホスファイト、及びチオビス[2−(1,1−ジメチルエチル)−5−メチル−4,1−フェニレン]−ビス[3−(ドデシルチオ)プロピオネート]からなる群から選ばれるいずれか一種と、ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6 ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]]]と、を含む、請求項5に記載のタンパク質組成物。
- 前記安定化剤が、6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾールと、チオビス[2−(1,1−ジメチルエチル)−5−メチル−4,1−フェニレン]−ビス[3−(ドデシルチオ)プロピオネート]と、を含む、請求項5又は6に記載のタンパク質組成物。
- 前記安定化剤が、N,N’−ヘキサン−1,6−ジイルビス[3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニルプロピオンアミド)と、2,2’−メチレンビス(4,6−ジ−tert−ブチルフェニル) 2−エチルヘキシルホスファイトと、を含む、請求項5〜7のいずれか一項に記載のタンパク質組成物。
- 非粉末状である、請求項5〜8のいずれか一項に記載のタンパク質組成物。
- 前記タンパク質100質量部に対して、前記安定化剤が0質量部超10質量部以下である、請求項1〜9のいずれか一項に記載のタンパク質組成物。
- 前記タンパク質が構造タンパク質である、請求項1〜10のいずれか一項に記載のタンパク質組成物。
- 前記タンパク質がコラーゲン、エラスチン、レシリン、絹フィブロイン及びクモ糸フィブロインからなる群より選ばれる少なくとも一種である、請求項1〜11のいずれか一項に記載のタンパク質組成物。
- 前記タンパク質がクモ糸フィブロインである、請求項1〜12のいずれか一項に記載のタンパク質組成物。
- 安定化剤溶液中にタンパク質を分散させて分散体を得る工程と、該分散体から揮発分を除去して乾燥物を得る工程と、を備えるタンパク質組成物の製造方法であって、
前記安定化剤は、カテコール系安定化剤、6−ヒドロキシ−2,5,7,8−テトラメチルクロマン−2−カルボン酸、2,6−ジ−tert−ブチル−p−クレゾール、2−tert−ブチル−4−メトキシフェノール、及び6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾールからなる群より選ばれる少なくとも一種を含む、製造方法。 - 前記カテコール系安定化剤は、2−(3,4−ジヒドロキシフェニル)−3,5,7−トリヒドロキシ−4H−クロメン−4−オン、(1S,3R,4R,5R)−3−{[3−(3,4−ジヒドロキシフェニル)アクリロイル]オキシ}−1,4,5−トリヒドロキシシクロヘキサン−1−カルボン酸、2−(3,4−ジヒドロキシフェニル)−5,7−ジヒドロキシ−3−{[(2S,3R,4S,5S,6R)−3,4,5−トリヒドロキシ−6−({[(2R,3R,4R,5R,6S)−3,4,5−トリヒドロキシ−6−メチルオキサン−2−イル]オキシ}メチル)オキサン−2−イル]オキシ}−4H−クロメン−4−オン、プロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエート、又は4,4’−(2,3−ジメチルブタン−1,4−ジイル)ジベンゼン−1,2−ジオールを含む、請求項14に記載の製造方法。
- 前記タンパク質組成物は、粉末状である、請求項14又は15に記載の製造方法。
- タンパク質、該タンパク質の溶解溶媒、及び安定化剤溶液を混合して混合溶液を得る工程と、該混合溶液から揮発分を除去して乾燥物を得る工程と、を備えるタンパク質組成物の製造方法であって、
前記安定化剤は、N,N’−ヘキサン−1,6−ジイルビス[3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニルプロピオンアミド)、1,6−ヘキサンジオールビス[3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニル)プロピオナート]、6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾール、2,6−ジ−tert−ブチル−p−クレゾール、3,9−ビス(2,6−ジ−tert−ブチル−4−メチルフェノキシ)−2,4,8,10−テトラオキサ−3,9−ジホスファスピロ[5.5]ウンデカン、ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6−ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]]]、α−トコフェロール、プロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエート及び4,4’,4’’−(1−メチルプロパニル−3−イリデン)トリス(6−tert−ブチル−m−クレゾール)からなる群より選ばれる少なくとも一種を含む、製造方法。 - 前記安定化剤が、3,9−ビス(2,6−ジ−tert−ブチル−4−メチルフェノキシ)−2,4,8,10−テトラオキサ−3,9−ジホスファスピロ[5.5]ウンデカン、2,2’−メチレンビス(4,6−ジ−tert−ブチルフェニル) 2−エチルヘキシルホスファイト、及びチオビス[2−(1,1−ジメチルエチル)−5−メチル−4,1−フェニレン]−ビス[3−(ドデシルチオ)プロピオネート]からなる群から選ばれるいずれか一種と、ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6−ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]]]と、を含む、請求項17に記載の製造方法。
- 前記安定化剤が、6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾールと、チオビス[2−(1,1−ジメチルエチル)−5−メチル−4,1−フェニレン]−ビス[3−(ドデシルチオ)プロピオネート]と、を含む、請求項17又は18に記載の製造方法。
- 前記安定化剤が、N,N’−ヘキサン−1,6−ジイルビス[3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニルプロピオンアミド)と、2,2’−メチレンビス(4,6−ジ−tert−ブチルフェニル) 2−エチルヘキシルホスファイトと、を含む、請求項17〜19のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記タンパク質組成物は、非粉末状である、請求項17〜20のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記タンパク質100質量部に対して、前記安定化剤が0質量部超10質量部以下である、請求項17〜21のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記タンパク質が構造タンパク質である、請求項17〜22のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記タンパク質がコラーゲン、エラスチン、レシリン、絹フィブロイン及びクモ糸フィブロインからなる群より選ばれる少なくとも一種である、請求項17〜23のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記タンパク質がクモ糸フィブロインである、請求項17〜24のいずれか一項に記載の製造方法。
- タンパク質の熱安定性向上方法であって、
カテコール系安定化剤、6−ヒドロキシ−2,5,7,8−テトラメチルクロマン−2−カルボン酸、2,6−ジ−tert−ブチル−p−クレゾール、及び2−tert−ブチル−4−メトキシフェノール、及び6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾールからなる群より選ばれる少なくとも一種の化合物が溶解した溶液に、前記タンパク質を分散させて分散体を得、該分散体から揮発分を除去して、前記タンパク質と前記化合物が共存した乾燥物を得る、熱安定性向上方法。 - 前記カテコール系安定化剤は、2−(3,4−ジヒドロキシフェニル)−3,5,7−トリヒドロキシ−4H−クロメン−4−オン、(1S,3R,4R,5R)−3−{[3−(3,4−ジヒドロキシフェニル)アクリロイル]オキシ}−1,4,5−トリヒドロキシシクロヘキサン−1−カルボン酸、2−(3,4−ジヒドロキシフェニル)−5,7−ジヒドロキシ−3−{[(2S,3R,4S,5S,6R)−3,4,5−トリヒドロキシ−6−({[(2R,3R,4R,5R,6S)−3,4,5−トリヒドロキシ−6−メチルオキサン−2−イル]オキシ}メチル)オキサン−2−イル]オキシ}−4H−クロメン−4−オン、プロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエート、又は4,4’−(2,3−ジメチルブタン−1,4−ジイル)ジベンゼン−1,2−ジオールを含む、請求項26に記載の熱安定性向上方法。
- 前記乾燥物は粉末状である、請求項26又は27に記載の熱安定性向上方法。
- タンパク質の熱安定性向上方法であって、
前記タンパク質と、
前記タンパク質の溶解溶媒と、
N,N’−ヘキサン−1,6−ジイルビス[3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニルプロピオンアミド)、1,6−ヘキサンジオールビス[3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニル)プロピオナート]、6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾール、2,6−ジ−tert−ブチル−p−クレゾール、3,9−ビス(2,6−ジ−tert−ブチル−4−メチルフェノキシ)−2,4,8,10−テトラオキサ−3,9−ジホスファスピロ[5.5]ウンデカン、ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6−ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]]]、α−トコフェロール、プロピル 3,4,5−トリヒドロキシベンゾエート及び4,4’,4’’−(1−メチルプロパニル−3−イリデン)トリス(6−tert−ブチル−m−クレゾール)からなる群より選ばれる少なくとも一種の化合物の溶液と、を混合して混合溶液を得、
該混合溶液から揮発分を除去して、
前記タンパク質と前記化合物が共存した乾燥物を得る、熱安定性向上方法。 - 前記化合物が、3,9−ビス(2,6−ジ−tert−ブチル−4−メチルフェノキシ)−2,4,8,10−テトラオキサ−3,9−ジホスファスピロ[5.5]ウンデカン、2,2’−メチレンビス(4,6−ジ−tert−ブチルフェニル) 2−エチルヘキシルホスファイト、及びチオビス[2−(1,1−ジメチルエチル)−5−メチル−4,1−フェニレン]−ビス[3−(ドデシルチオ)プロピオネート]からなる群から選ばれるいずれか一種と、ポリ[[6−[(1,1,3,3−テトラメチルブチル)アミノ]−1,3,5−トリアジン−2,4−ジイル][(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]−1,6−ヘキサンジイル[(2,2,6,6−テトラメチル−4−ピペリジニル)イミノ]]]と、を含む、請求項29に記載の熱安定性向上方法。
- 前記化合物が、6,6’−ジ−tert−ブチル−4,4’−ブチリデンジ−m−クレゾールと、チオビス[2−(1,1−ジメチルエチル)−5−メチル−4,1−フェニレン]−ビス[3−(ドデシルチオ)プロピオネート]と、を含むものである、請求項29又は30に記載の熱安定性向上方法。
- 前記化合物が、N,N’−ヘキサン−1,6−ジイルビス[3−(3,5−ジ−tert−ブチル−4−ヒドロキシフェニルプロピオンアミド)と、2,2’−メチレンビス(4,6−ジ−tert−ブチルフェニル) 2−エチルヘキシルホスファイトと、を含む、請求項29〜31のいずれか一項に記載の熱安定性向上方法。
- 前記乾燥物は非粉末状である、請求項29〜32のいずれか一項に記載の熱安定性向上方法。
- 前記タンパク質100質量部に対して、前記化合物が0質量部超10質量部以下である、請求項29〜33のいずれか一項に記載の熱安定性向上方法。
- 前記タンパク質が構造タンパク質である、請求項29〜34のいずれか一項に記載の熱安定性向上方法。
- 前記タンパク質がコラーゲン、エラスチン、レシリン、絹フィブロイン及びクモ糸フィブロインからなる群より選ばれる少なくとも一種である、請求項29〜35のいずれか一項に記載の熱安定性向上方法。
- 前記タンパク質がクモ糸フィブロインである、請求項29〜36のいずれか一項に記載の熱安定性向上方法。
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Citations (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH02113066A (ja) * | 1988-10-20 | 1990-04-25 | Kanebo Ltd | 保存安全性に優れた絹フィブロイン水溶液及びその製造法 |
JPH02240165A (ja) * | 1989-03-13 | 1990-09-25 | Kanebo Ltd | 保存安定性に優れた絹フィブロイン水溶液及びその製造法 |
JPH04306236A (ja) * | 1991-04-03 | 1992-10-29 | Kanebo Ltd | 保存安定性に優れた絹フィブロイン水溶液及びその製造法 |
JPH0790182A (ja) * | 1993-09-22 | 1995-04-04 | Kanebo Ltd | 保存安定性に優れた絹フィブロイン及びその製造法 |
JP2001057851A (ja) * | 1999-08-23 | 2001-03-06 | T Hasegawa Co Ltd | 安定化された絹フィブロイン及びそれを含有する飲食品 |
WO2005103158A1 (ja) * | 2004-04-20 | 2005-11-03 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | 絹フィブロインフィルム |
JP2012505297A (ja) * | 2008-10-09 | 2012-03-01 | トラスティーズ オブ タフツ カレッジ | グリセロールを含有する改変された絹フィルム |
WO2015163294A1 (ja) * | 2014-04-21 | 2015-10-29 | 日立化成株式会社 | 多孔質材料及び多孔質シート |
JP2016517443A (ja) * | 2013-03-15 | 2016-06-16 | トラスティーズ オブ タフツ カレッジ | 低分子量絹組成物および絹組成物の安定化 |
JP6019506B1 (ja) * | 2015-12-28 | 2016-11-02 | 株式会社松田養蚕場 | 高分子量シルクフィブロイン水溶液の製造方法および高分子量シルクフィブロイン粉末の製造方法 |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BE722298A (ja) | 1967-10-19 | |||
JP2727112B2 (ja) | 1988-04-26 | 1998-03-11 | コニカ株式会社 | 安定なペルオキシダーゼ組成物及び安定な抗体組成物 |
JP2745331B2 (ja) | 1989-09-27 | 1998-04-28 | 日東電工株式会社 | シロアリ検知材 |
JPH0565296A (ja) | 1991-01-24 | 1993-03-19 | Sumitomo Chem Co Ltd | 新規ペプチド |
JPH0551397A (ja) | 1991-08-26 | 1993-03-02 | Sumitomo Chem Co Ltd | 環状ペプチド系化合物、その製造法およびそれを有効成分として含有する抗かび剤ならびに培養物 |
JPH08113714A (ja) | 1994-10-18 | 1996-05-07 | Idemitsu Petrochem Co Ltd | タンパク質粉末含有複合材料 |
DE19720853A1 (de) | 1997-05-17 | 1998-11-19 | Dade Behring Marburg Gmbh | Erhöhung der FVII Empfindlichkeit eines Thromboplastinreagenzes |
SE9704405D0 (sv) * | 1997-11-28 | 1997-11-28 | Pharmacia & Upjohn Ab | New syringe |
CA2426587A1 (en) | 2000-10-24 | 2002-08-08 | Diatide, Inc. | Stabilization of radiopharmaceutical compositions using hydrophilic thioethers and hydrophilic 6-hydroxy chromans |
JP3753945B2 (ja) | 2001-02-14 | 2006-03-08 | ヒゲタ醤油株式会社 | 大腸菌とブレビバチルス属細菌間のプラスミドシャトルベクター |
GB0230102D0 (en) | 2002-12-23 | 2003-01-29 | Spinox Ltd | Apparatus and method for storing proteins |
US20050233046A1 (en) * | 2004-04-05 | 2005-10-20 | Fmc Corporation | MCC/hydrocolloid stabilizers and edible compositions comprising the same |
JP4575755B2 (ja) | 2004-11-22 | 2010-11-04 | 興和株式会社 | 外用液剤 |
DE602005022616D1 (de) | 2004-12-22 | 2010-09-09 | Basf Se | Mittel gegen radikale |
US20090155420A1 (en) | 2007-12-12 | 2009-06-18 | Conopco, Inc., D/B/A Unilever | Food product with stabilized non-protein amino acids |
WO2010017282A1 (en) * | 2008-08-05 | 2010-02-11 | Biomimedica, Inc. | Polyurethane-grafted hydrogels |
MX2011002372A (es) | 2008-09-10 | 2011-04-04 | Genentech Inc | Composiciones y metodos para la prevencion de la degradacion oxidativa de proteinas. |
JP2011177128A (ja) | 2010-03-02 | 2011-09-15 | Kurume Univ | ショウジョウバエ由来生理活性ペプチド |
CN102869679B (zh) | 2010-04-27 | 2015-11-25 | Scil技术股份有限公司 | 稳定的水性mia/cd-rap制剂 |
KR102192494B1 (ko) | 2014-08-04 | 2020-12-18 | 시에스엘 리미티드 | 인자 viii 제형 |
-
2017
- 2017-11-29 US US16/463,470 patent/US11142553B2/en active Active
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Patent Citations (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH02113066A (ja) * | 1988-10-20 | 1990-04-25 | Kanebo Ltd | 保存安全性に優れた絹フィブロイン水溶液及びその製造法 |
JPH02240165A (ja) * | 1989-03-13 | 1990-09-25 | Kanebo Ltd | 保存安定性に優れた絹フィブロイン水溶液及びその製造法 |
JPH04306236A (ja) * | 1991-04-03 | 1992-10-29 | Kanebo Ltd | 保存安定性に優れた絹フィブロイン水溶液及びその製造法 |
JPH0790182A (ja) * | 1993-09-22 | 1995-04-04 | Kanebo Ltd | 保存安定性に優れた絹フィブロイン及びその製造法 |
JP2001057851A (ja) * | 1999-08-23 | 2001-03-06 | T Hasegawa Co Ltd | 安定化された絹フィブロイン及びそれを含有する飲食品 |
WO2005103158A1 (ja) * | 2004-04-20 | 2005-11-03 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | 絹フィブロインフィルム |
JP2012505297A (ja) * | 2008-10-09 | 2012-03-01 | トラスティーズ オブ タフツ カレッジ | グリセロールを含有する改変された絹フィルム |
JP2016517443A (ja) * | 2013-03-15 | 2016-06-16 | トラスティーズ オブ タフツ カレッジ | 低分子量絹組成物および絹組成物の安定化 |
WO2015163294A1 (ja) * | 2014-04-21 | 2015-10-29 | 日立化成株式会社 | 多孔質材料及び多孔質シート |
JP6019506B1 (ja) * | 2015-12-28 | 2016-11-02 | 株式会社松田養蚕場 | 高分子量シルクフィブロイン水溶液の製造方法および高分子量シルクフィブロイン粉末の製造方法 |
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