JPWO2015098919A1 - 細胞の剥離方法、細胞支持用基材、並びに、細胞の培養方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の細胞の剥離方法は、光応答性ガス発生剤を含む基材の表面に接着した細胞を、該光応答性ガス発生剤から発生させたガスの気泡を利用して剥離するものである。まず、図1に示す本発明の実施形態を参照しつつ、本発明の基本概念を説明する。図1は本発明の一実施形態を模式的に表したものである。
基材1は光応答性ガス発生剤を含むものである。本実施形態では、基材1は、光応答性ガス発生剤を含むガス発生フィルム3と、光透過性のガスバリア層5とが積層された構造を有する。そして、ガス発生フィルム3が上側、ガスバリア層5が下側となる姿勢で使用され、細胞2はガス発生フィルム3の表面に接着している。光応答性ガス発生剤の詳細については後述する。
ガスバリア層5の裏側には、光非透過性のフォトマスク6が設けられている。そして、フォトマスク6により、ガスバリア層5の一部が覆われている。逆に言えば、ガスバリア層5の裏側は、フォトマスク6に覆われていない部分のみが露出している。
ガス発生フィルム3において光が照射された領域で、ガスが発生する。発生したガスは気泡7となり、主に細胞2における基材1との接着面に供給され、細胞2に当たる(接触する)。これにより、図1(b)に示すように、細胞2が基材1から浮き上がり、基材1から剥離する。
ここで、本実施形態ではガスの発生が光照射された領域に限られるので、光を照射した領域に位置する細胞2のみが剥離する。逆に言えば、フォトマスク6で覆われた領域にはガスは発生せず、同領域に位置する細胞2は剥離しない。
また本実施形態では、光の照射域を限定することにより、特定の領域のみにガスを発生させている。そのため、同一平面上に接着している複数の細胞(群)のうち、所望の細胞(群)のみを効率的に剥離することができる。
前記マイクロチャンバーのサイズや形状としては、例えば、直径20〜1000μm程度、深さ7〜2000μm程度の円筒形とすることができる。
次に、ガス発生フィルムの裏側の一部をフォトマスクで覆った後、LEDを用いて光を10秒間照射し、ガスを発生させた。ガスの発生量は約2μLであった。ガス発生後の細胞の様子を図3(b)に示す。すなわち、光照射前にはガス発生フィルムに一様に接着していた細胞が、光照射により、ガス発生フィルムから剥離した。また、フォトマスクで覆った部分の細胞はガス発生フィルムに接着したままであり、光を照射した部分の細胞のみが剥離された。
2 細胞
3 ガス発生フィルム
7 気泡
10 レンズ
Claims (9)
- 支持体たる基材の表面に接着した細胞を前記基材から剥離する細胞の剥離方法であって、
前記基材は、光を照射することによりガスを発生する光応答性ガス発生剤を含むものであり、
前記基材に光を照射して発生させたガスの気泡を前記細胞に接触させることにより、前記細胞を前記基材から剥離することを特徴とする細胞の剥離方法。 - 前記基材の一部であって、剥離対象となる細胞が接着している部位に対して選択的に光を照射することを特徴とする請求項1に記載の細胞の剥離方法。
- 光を集光させるレンズを用いて前記部位に対して選択的に光を照射することを特徴とする請求項2に記載の細胞の剥離方法。
- 前記基材は複数の区画を有し、剥離対象の細胞が含まれる区画のみに光を照射することを特徴とする請求項1〜3のいずれかに記載の細胞の剥離方法。
- 前記ガス発生剤は、粘着性を有するバインダー樹脂に含有されていることを特徴とする請求項1〜4のいずれかに記載の細胞の剥離方法。
- 表面に細胞を接着させて支持するための細胞支持用基材であって、
光を照射することによりガスを発生する光応答性ガス発生剤を含むものであり、
前記光応答性ガス発生剤から発生したガスの気泡を前記細胞に接触させることが可能であることを特徴とする細胞支持用基材。 - 複数の区画を有し、各々の区画内で細胞を支持可能であることを特徴とする請求項6に記載の細胞支持用基材。
- 前記ガス発生剤は、粘着性を有するバインダー樹脂に含有されていることを特徴とする請求項6又は7に記載の細胞支持用基材。
- 請求項6〜8のいずれかに記載の細胞支持用基材に細胞を接着させて、前記細胞を培養することを特徴とする細胞の培養方法。
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