JPS637199B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はＥ−５−（２−ハロゲノビニル）−2′−
デオキシシチジン類、例えば、Ｅ−５−（２−ブ
ロモビニル）−2′−デオキシシチジンおよびＥ−
５−（２−ヨードビニル）−2′−デオキシシチジ
ン、ならびに、かかる化合物の化学合成および薬
理学的組成物への利用に関する。 Ｅ−５−（２−ブロモビニル）−2′−デオキシシ
チジンおよびＥ−５−（２−ヨードビニル）−2′−
デオキシシチジン、いいかえれば、Ｅ−５−（２
−ブロモビニル）−およびＥ−５−（２−ヨードビ
ニル）−１−（2′−デオキシ−β−Ｄ−エリスロ−
ペントフラノシル）−４−アミノ−１・２−ジヒ
ドロピリミジン−２−オンは、 式 〔式中、Halは臭素またはヨウ素原子である〕 で示され得る化合物である。 式〔〕において、ハロゲノビニル側鎖のビニ
ル二重結合の周りの基はトランスまたはＥ配列状
態にあり、また、ピリミジン核はペントフラノシ
ル基に対しβ位にある。 該化合物〔〕は種々の方法で製造することが
でき、例えば、Ｅ−５−（２−ハロビニル）−、例
えば、Ｅ−５−（２−ヨードビニル）−側鎖をデオ
キシシチジンに導入するか、あるいは保護された
反応性２−デオキシ−Ｄ−エリスロ−ペントフラ
ノシル誘導体とＥ−５−（２−ブロモビニル）−ま
たはＥ−５−（２−ヨードビニル）−シトシンのト
リアルキルシリル誘導体を縮合させる方法が挙げ
られる。 Ｅ−５−（２−ブロモビニル）−2′−デオキシシ
チジンおよびＥ−５−（２−ヨードビニル）−2′−
デオキシシチジンは単純疱疹ウイルス（herpes
simplex virus）に対し非常に特異な抗ウイルス
活性を有することが見い出された。さらに、これ
らは細胞培養において明確な非毒性を示すので、
この種ウイルスに対し高い抗ウイルス指数を発揮
し、ヒトおよび動物における単純疱疹を原因とす
る病気の治療に有用である。 この分野においては、いくつかの抗ウイルス活
性を有するいくつかの関連デオキシシチジンおよ
び数種の関連デオキシウリジン化合物がすでに知
られている。これらは、E.De Clercg等著J.
Carbohydrates Nuclesides、Nucleotides、５
(3)、187−224（1978）に記載されている。しかし
ながら、これらは種痘症（vaccinia）および単純
疱疹等の種々のDNAウイルスに対して等しく作
用するため、多くのこれらの化合物の抗ウイルス
活性は高い特異性を有するものでないことに留意
すべきである。また、これら多くの化合物の毒
性、特に通常使用される標準化合物５−ヨード−
2′−デオキシウリジンの毒性は無視することがで
きない。したがつて、ある種のウイルス（単純疱
疹ウイルス）に対しＥ−５−（２−ブロモビニル）
デオキシシチジンおよびＥ−５−（２−ヨードビ
ニル）デオキシシチジンが特異な抗ウイルス活性
を有し、細胞培養における毒性が上述したように
存在しないのは驚くべきことである。 また、最近、Ｅ−５−（２−ブロモビニル）−
2′−デオキシウリジンおよびＥ−５−（２−ヨー
ドビニル）−2′−デオキシウリジンが、単純疱疹
ウイルスに対して特異な抗ウイルス活性ならびに
細胞培養中の低毒性を有することも報告されてい
る（E.De Clercg等著Proceedings National
Academy of Science USA、76、No.６、2947−
2951頁（1979年）参照）。 これらデオキシウリジン対応物と比較すると、
本発明化合物は少なくとも等価な特異性を有する
とともにより一層毒性がなく、したがつて、薬理
学的組成物としてヒトおよび動物の単純疱疹に起
因する病気の治療に使用するに好ましいものと思
える。 したがつて、本発明の目的は、Ｅ−５−（２−
ハロゲノビニル）−2′−デオキシシチジン類、例
えば、Ｅ−５−（２−ブロモビニル）−2′−デオキ
シシチジンおよびＥ−５−（２−ヨードビニル）−
2′−デオキシシチジンを提供しようとするもので
ある。さらに、本発明の目的は、2′−デオキシシ
チジンにＥ−５−（２−ハロゲノビニル）側鎖を
導入するかあるいはヒドロキシル保護された反応
性２−デオキシ−Ｄ−エリスロ−ペントフラノシ
ル誘導体とＥ−５−（２−ハロゲノビニル）シト
シンのトリアルキルシリル誘導体を縮合させるこ
とによつて、Ｅ−５−（２−ハロゲノビニル）−
2′−デオキシシチジンを製造する方法を提供する
ことにもある。さらにまた、本発明の目的は、少
なくとも１つのＥ−５−（２−ハロゲノビニル）−
2′−デオキシシチジン、好ましくはＥ−５−（２
−ブロモビニル）−2′−デオキシシチジンまたは
Ｅ−５−（２−ヨードビニル）−2′−デオキシシチ
ジンを活性成分として担体中に含有する薬理学的
組成物を提供することにある。さらに、本発明の
目的は、Ｅ−５−（２−ハロゲノビニル）−2′−デ
オキシシチジン、好ましくはＥ−５−（２−ブロ
モビニル）−2′−デオキシシチジンまたはＥ−５
−（２−ヨードビニル）−2′−デオキシシチジンを
賦形剤と結合させるこの種組成物の製造法を提供
することにある。 本発明化合物の化学的合成法については、以下
に詳細に説明する。 化学的合成法の好ましい経路は次の通りであ
る。 この経路は、2′−デオキシシチジンに３つの連
続工程を使用してＥ−５−（２−ハロゲノビニル）
基を導入する工程を含む。 この好ましい経路の最初の工程では、５−クロ
ロマーキユリ−2′−デオキシシチジン〔〕を塩
素化リチウムパラジウムの存在下アクリル酸エチ
ルと反応させてＥ−５−（２−カルボエトキシビ
ニル）−2′−デオキシシチジン〔〕を形成する。
この反応は、室温またはわずかにそれ以上で無水
メタノール等の好ましい溶媒中でスムーズに進行
する。他の溶媒としては、例えばアセトニトリル
が使用されてよい。該反応混合物は、還元された
パラジウムおよび水銀塩を沈澱させるために、例
えばH₂SまたはNaHB₄等の還元剤で処理されて
もよい。該反応生成物は良好な収率で得ることが
でき、式〔〕で示されるようなトランスまたは
Ｅ配列を有する。 アクリル酸エチルに代え、対応するメチルエス
テルまたは他のアクリル酸低級アルキルエステル
を使用することができる。 この第１工程は、BergstromおよびOgawa著J.
A.C.S.、100、8106（1978年）に記載の、2′−デオ
キシウリジン誘導体を製造するための反応工程と
同様にして行い得る。原料物質〔〕はそれ自体
知られており、BergstromおよびRuth著J.
Carbohydrates−Nucleosides、Nucleotides、４
(5)、257−269頁（1977年）に記載されている。 好ましい経路の第２工程においては、Ｅ−５−
（２−カルボエトキシビニル）誘導体〔〕を加
水分解して対応するＥ−５−（２−カルボキシビ
ニル）誘導体〔〕を得る。この加水分解はアル
カリまたは酸性条件下に行われてよいが、副反応
を防止しうる点から、酸性条件が好ましい（例え
ば、５位における置換基の分離または糖部分の分
離）。アルカリ条件下の加水分解は、種々の塩基
性剤、例えば、KOH、NaOH、K₂CO₃、
Na₂CO₃を用いて行われてよいが、KOHを使用
するのが好ましい。 好ましい経路の第３工程においては、Ｅ−５−
（２−カルボキシビニル）誘導体〔〕を対応す
るＥ−５−（２−ハロゲノビニル）誘導体（〕
に変換する。これはカルボキシ基を除去するよう
な条件下におけるハロゲン化によつて行われてよ
い。種々のハロゲン化剤を使用することができ、
例えば、原子状ハロゲン、ハロゲン化水素、オキ
シハロゲン化水素、有機ハロゲン化剤（例えば、
Ｎ−ハロゲノスクシンイミド類）が挙げられる。
就中、ハロゲン化水素およびＮ−ハロゲノスクシ
ンイミド類が最良の結果を与えるので好ましい。
さらに、好ましい溶媒、例えば水、ジメチルホル
ムアミド、ジメチルスルホキシド等が反応媒体と
して使用されてよい。 ハロゲン化剤および反応媒体の選択はハロゲン
化剤の溶解度および安定度、溶媒中の原料物質の
溶解度に依存して行われる。したがつて、Ｎ−ブ
ロモスクシンイミドは水性媒体中において良好な
結果をもつて使用することができるが、Ｎ−ヨー
ドスクシンイミドおよび原子状臭素、ヨウ素は水
を含まない状態、例えば乾燥ジメチルホルムアミ
ド中において使用するのが好ましい。さらに、原
料物質カルボキシビニル誘導体は水に対し溶解度
は低いが、この問題は酢酸カリウム水溶液で処理
して易溶性カリウム塩を形成するかまたは前工程
の加水分解によつて形成される水溶液で直接開始
することにより、解消される。ジメチルホルムア
ミド中の原料物質の溶解度は水中のそれより幾分
良好であるが、この場合でも酢酸カリウムおよび
ハロゲン化剤を併用するのが好ましい。 上記３工程合成の結果として、所望のＥ−５−
（２−ハロゲノビニル）−2′−デオキシシチジンが
良好な収率で得られる。この最終製品はβ−アノ
マーである。なぜなら、糖部分に対するピリミジ
ン核の所望のβ位は原料物質中にすでに存在して
いたからである。さらに、これは、選択方法によ
り、ビニル二重結合に対しハロゲン原子およびピ
リミジン核のＥ配列を示す。これら双方の事実は
本発明にとつて有利な点であり、上記３工程法が
好ましいことがわかる。 第２の好ましい合成法は次の通りである。 この経路は、Ｅ−５−（２−ハロゲノビニル）−
シトシンのトリアルキルシリル誘導体〔〕とヒ
ドロキシル保護された反応性２−デオキシ−Ｄ−
エリスロ−ペントフラノシル誘導体〔〕を縮合
反応させ、最終目的物質を得るものである。かか
る式中、Ｒはアルキル基、好ましくはメチル；
R¹は容易に除去可能な基、好ましくはメトキシ
またはクロロ；R²およびR³はヒドロキシル保護
基、好ましくはｐ−トルオイル；Halは例えば臭
素またはヨウ素；〜印はαおよび／またはβ配列
を示す。 該縮合反応は、モレキユラシーブ、塩化または
臭化スズまたは水銀、トリメチルシリルパーフル
オルアルキルスルホネイトのようなルイス酸触媒
の影響の下にスムーズに進行する。さらに、溶媒
が存在してもよいが、反応物質および生成物に対
し不活性であつて、充分量が反応物質および触媒
に溶解するのが好ましい。好ましい溶媒として、
アセトニトリル、ベンゼン、トルエン、ジクロロ
メタン、１・２−ジクロロエタンおよび四塩化炭
素が例示される。反応は、乾燥雰囲気中でトリア
ルキルシリル誘導体〔〕が加水分解しないよう
に行われるべきである。反応温度は厳密でない
が、ほとんどの場合、室温またはそれ以下となろ
う。 反応を完結させ、反応混合物を採取した後、常
法、例えば加水分解またはアルコーリシスにより
得られる生成物から保護基を脱離する。 この第２法では、αおよびβ−アノマーの混合
物を通常生成するが、β−アノマーだけが必要で
あるから分離することを要す。かかる分離はヒド
ロキシル保護基の脱離前に行われるのがもつとも
効果的であり、分別結晶および／またはシリカゲ
ル上のクロマトグラフイにより実行することがで
きる。全分離工程はむしろ不便であるので、第２
法はやや好ましいものである。 原料物質〔〕は前述したが、２−デオキシ−
Ｄ−エリスロ−ペントフラノーズから１−ヒドロ
キシ基のメチル化、３位および５位においてヒド
ロキシル基への保護基の結合により、要すれば、
塩素原子による１−メトキシ基の置換により製造
することができる（例えば、C.C.Bath、
Synthetic Procedures in Nucleic Acid
Chemistry、Tipson R.S.およびZorbach W.W、
eds、Interscieuce、Vol、１、521−522（1968）
参照）。 他の原料物質はＥ−５−（２−ハロゲノビニル）
−シトシン〔〕をヘキサメチルジシラザンまた
はトリメチルクロロシランあるいはその混合物の
ようなシリル化剤によつてシリル化して製造する
こともできる（A.S.Jones等著Tetrahedron
Letters、28、2459−2460頁（1977年）記載の同
様の反応を参照）。Ｅ−５−（２−ハロゲノビニ
ル）−シトシンは５−ビニルシトシンを臭素化ま
たはヨ素化し、次いで加熱によりHBrまたはHI
を除去することにより簡単に得られる（Ｒ、C.
Bleakley等著Tetrahedron、32、2795−2797頁
（1976年）記載の５−ビニルウラシルに対する類
似反応を参照）。さらに、上記Ｅ−５−（２−ハロ
ゲノビニル）−シトシンは５−ホルミルシトシン
のマロン酸との反応によりＥ−５−（２−カルボ
キシビニル）シトシンを形成し、次いで、第１法
の上述の記載と同様に適当なハロゲン化を行つて
得ることができる。 第１法および、最終製品の物理定数は次の実施
例に例示されるが、本発明を限定するものと解釈
すべきではない。 実施例 １ (a) Ｅ−５−（２−カルボエトキシビニル）−2′−
デオキシシチジン〔〕の製造： 乾燥メタノール（100ml）中の、５−クロロ
マーキユリ−2′−デオキシシチジン〔〕
（4.62ｇ、10ミリモル）、アクリル酸エチル（６
ｇ、60ミリモル）および0.1モルLi₂PdCl₄を250
ml容の丸底フラスコ内で合し、窒素雰囲気下24
時間撹拌して黒色懸液液を得る。これを過
し、黒色沈澱物を集める。該沈澱物をメタノー
ル100ml中で温めて過する。液を合し、完
全に黒色物質が沈澱し、溶液が無色となるまで
NaBH₄で処理する。過後、溶液を30mlまで
減圧濃縮して標記化合物を晶出させる。収量
1.4ｇ（43％）。 U.V.スペクトル（エタノール中） PH２において、λmin237nｍ（ε8.230）、
λmax268nｍ（ε17.430）、λmin297nｍ
（ε8.250）、λmax327nｍ（ε13.920）： PH７において、λmax221nｍ（ε21.670）、
λmin245nｍ（ε8.560）、λmax275nｍ
（ε13.730）、λmin297nｍ（ε8.050）、λmax326n
ｍ（ε14.260）。 NMRスペクトル Ｓ（d₆DMSO）；8.50（ｓ、1H、Ｈ−６）、7.57
（ｄ、1H、ビニルＨ、ｊ＝16Hz）、7.42（ｓ、
2H、NH₂）6.21（ｄ、1H、ビニルＨ、ｊ＝16
Hz）6.10（ｔ、1H、Ｈ−1′）5.16（ｄ、1H、OH
−3′）5.14（ｔ、1H、OH−5′）4.20（ｍ、1H、
Ｈ−3′）4.13（ｇ、2H、CH₂−CH₃）3.79（ｍ、
1H、Ｈ−4′）3.62（ｍ、2H、Ｈ−5′）2.13（ｍ、
2H、Ｈ−2′）1.24（ｔ、3H、CH₂−CH₃） なお、原料物質５−クロロマーキユリ−2′−
デオキシシチジンは、BergstromおよびRuth
著Ｊ−Carbohydrates−Nucleosides、
Nucleotides、４(5)、257−269頁（1977年）に
記載の方法により製造されたものである。 (b) Ｅ−５−（２−カルボキシビニル）−2′−デオ
キシシチジン〔〕の製造： カルボエトキシビニルデオキシシチジン
（325mg、１ミリモル）を0.5MNaOH溶液（40
ml）に懸濁させ、室温で２時間撹拌する。該清
澄溶液をDowex−50H⁺型を加えて中和してPH
７とし、過する。該溶液は即時、Ｅ−５−
（２−ブロモビニル）−2′−デオキシシチジンの
製造に利用される。 (c) Ｅ−５−（２−ブロモビニル）−2′−デオキシ
シチジン〔〕（ただし、Hal＝Br）の製造： 上述のようにカルボエトキシビニルデオキシ
シチジン（325mg、１ミリモル）を加水分解し
た溶液を、Ｎ−ブロモスクシンイミド（178mg、
１ミリモル）で処理し、室温で15時間撹拌す
る。溶媒を除去後、残渣をSiO₂上溶離液とし
てCHCl₃−MeOH（80：20）で精製し、標記化
合物（150mg、48％、Rf＝0.32）を得る。 U.V.スペクトル（水中） PH７において、λmax244nｍ（ε16.090）、
λmin280nｍ（ε5.260）、λmax302nｍ
（ε7.610）；PH２において、λmax250nｍ
（ε15.830）、λmin286nｍ（ε6.390）、λmax292n
ｍ（ε6.590）；PH11において、λmax249nｍ
（ε17.360）、λmin283nｍ（ε7.300）、λmax292n
ｍ（ε7.660）。 N.M.R.スペクトル Ｓ（d₆DMSO）；8.10（ｓ、1H、Ｈ−６）7.21
（br、2H、NH₂）7.05（ｄ、1H、ビニル−Ｈ、
ｊ＝13Hz）6.70（ｄ、1H、ビニル−Ｈ、ｊ＝13
Hz）6.10（ｔ、1H、Ｈ−1′）5.05（br、2H、OH
−3′及びOH−5′）4.10（ｍ、1H、Ｈ−3′）3.75
（ｍ、1H、Ｈ−4′）3.60（ｍ、2H、Ｈ−5′）2.10
（ｍ、2H、Ｈ−2′） 実施例 ２ (a) Ｅ−５−（２−カルボエトキシビニル）−2′−
デオキシシチジンを実施例１(a)と同様にして製
造する。 (b) 実施例１(b)のように、加水分解してＥ−５−
（２−カルボキシビニル）−2′−デオキシシチジ
ンを製造する。ただし、中和および過後、溶
媒を真空留去し、残渣をP₂O₅で乾燥させる。 (c) Ｅ−５−（２−ヨードビニル）−2′−デオキシ
シチジン〔〕（ただし、Hal＝Ｉ）の製造： 工程２(b)から得られる残渣を乾燥DMF（20
ml）中に懸濁させ、Ｎ−ヨードスクシンイミド
（225mg、１ミリモル）を加える。該混合物を室
温で４時間撹拌し、常法のようにして仕上げて
標記化合物（105mg、28％）を得る。 U.V.スペクトル（エタノール中） PH７において、λmax258nｍ（ε17.282）
λsh200nｍ（ε7.504）；PH２において、
λmax256nｍ（ε15.160）λmin293nｍ（ε4.700）
λmax315nｍ（ε6.216） N.M.R.スペクトル Ｓ（d₆DMSO）；8.06（ｓ、1H、Ｈ−６）7.26
（ｄ、1H、ビニルＨ、ｊ＝14Hz）7.20（br、
2H、NH₂）6.64（ｄ、1H、ビニルＨ、ｊ＝14
Hz）6.08（ｔ、1H、Ｈ−1′）5.11（ｄ、1H、OH
−3′）5.03（ｔ、1H、OH−5′）4.20（ｍ、1H、
Ｈ−3′）3.76（ｍ、1H、Ｈ−4′）3.58（ｍ、2H、
Ｈ−5′）2.08（ｍ、2H、Ｈ−2′）。 生物学的試験 本発明化合物の特異な抗ウイルス活性、低毒性
および高抗ウイルス指数を示すために、次の一連
の生物学的試験を行なつた。 これらの試験において、Ｅ−５−（２−ハロゲ
ノビニル）−2′−デオキシシチジンおよび関連化
合物の細胞培養におけるウイルスの成長および収
量に対する効果を測定した。 試験された化合物は、Ｅ−５−（２−ブロモビ
ニル）−2′−デオキシシチジンおよびＥ−５−（２
−ヨードビニル）−2′−デオキシシチジン（前記
実施例に従つて製造）ならびにＥ−５−（２−ブ
ロモビニル）−2′−デオキシウリジンおよびＥ−
５−（２−ヨードビニル）−2′−デオキシウリジ
ン、さらに５−ヨード−2′−デオキシウリジン
（Ludeco、Brusselsによつて提供）である。全て
の化合物はβ−アノマーである。 該化合物をバシニア・ウイルスおよびヘルペス
シンプレツクス−１・ウイルスの３菌株（ストレ
インKOS、ストレインMcIntyreおよびストレイ
ンＦ）について試験した。これらウイルスは
PRK（Primary rabbit kidney）およびHSF
（human skin fibroblast）細胞培養において育
成した。 細胞培養におけるウイルス成長測定の技術は、
Clercq等著Biochem.Pharmacol.24、523〜527頁
（1975年）に記載されている。 試験１ この試験においては、PRKおよびHSF細胞培
養におけるバシニアおよびヘルペス・シンプレツ
クス−１・ウイルスに対するＥ−５−（２−ハロ
ゲノビニル）−2′−デオキシシチジンおよび関連
化合物の抑制活性を測定した。細胞はプラスチツ
クスミクロプレート（PRK、HSF）中に群生し
た。群生したら、該細胞にバシニアまたはヘルペ
ス・シンプレツクス−１・ウイルスのいずれかを
100CCID₅₀、接種した。１回のCCID₅₀（cell
culture infecting dose−50）は細胞培養の50％
を感染するに必要なウイルス投与量である。ウイ
ルス接種１時間後、上記化合物を濃度を変えて
（0.001μｇ／ml〜100μｇ／mlの範囲）添加する。
各ウイルス−細胞系に対し、ID₅₀（inhibitory
dose−50）を測定した。ID₅₀はウイルスに対し細
胞病理学的効果（CPE）を50％まで抑制するの
に必要な化合物の濃度である。このCPEは未処
理ウイルス感染細胞培養が完了するや否や記録す
る（一般にウイルスを細胞に接種後３日間）。結
果を第１表に示す。第１表において、データは別
の３つの実験の平均値を表わす。 【表】 上記第１表から、Ｅ−５−（２−ハロゲノビニ
ル）−2′−デオキシシチジンは、それらのデオキ
シウリシン対応物よりも幾分活性が劣るが、標準
化合物５−ヨード−2′−デオキシウリジンよりも
ヘルペス・シンプレツクス−１に対し同等または
わずかにすぐれた活性を有することがわかる。さ
らに、上記基準化合物とは反対に、Ｅ−５−（２
−ハロゲンビニル）−2′−デオキシシチジンはヘ
ルペス・シンプレツクス−１・ウイルスに対し特
異的である抗ウイルス活性を有することがわか
る。この特異性はデオキシウリジン対応物のそれ
とほぼ同等であつた。 試験２ PRK細胞培養におけるヘルペス・シンプレツ
クス−１（株KOS）ウイルスの増加に対するＥ−
５−（２−ハロゲノビニル）−2′−デオキシシチジ
ンおよび関連化合物の抑制効果を測定した。 プラスチツク製ペトリデイツシユ（直径55mm）
における群生PRK細胞単一層にヘルペス・シン
プレツクス−１（4.5log₁₀PFU／0.5ml／ペトリデ
イツシユ）を37℃で１時間にわたつて接種する。
その後すぐに、試験すべきいずれかの化合物0.1μ
ｇ／mlを投与する。この細胞培養を37℃で時間を
変えて（１、２または３日間）インキユベート
し、その終期に細胞を−70℃で冷凍する。この細
胞均等質をVERO（グリーンモンキー細胞の連続
細胞ライン）細胞培養における血小板形成によつ
てウイルス濃度に対する分析を行なう。結果を第
２表に示す。結果は処理ウイルス感染細胞培養お
よび未処理ウイルス感染細胞培養間のウイルス収
量における差異として表わされる。PFUは血小
板形成単位（plaque formation units）を意味す
る。 【表】 第２表から、Ｅ−５−（２−ハロゲノビニル）−
2′−デオキシシチジンによるウイルス収量の減少
は基準化合物５−ヨード−2′−デオキシウリジン
のそれに匹敵することがわかる。 試験３ PRK細胞培養においてＥ−５−（２−ハロゲノ
ビニル）−2′−デオキシシチジンの抗代謝活性を
測定する。 このため、一定の放射線ラベルされたDNA前
駆物質の細胞のDNAへの合体、および５−（２−
ハロゲノビニル）−2′−デオキシシチジンおよび
関連化合物の効果を試験した。この方法は、De
Clercg等によりBiochemical Pharmacology、
26、794−797頁（1977年）およびMolecular
Pharmacology、14、422−430頁（1978年）に記
載されている。 使用されるDNA前駆物質は、（メチル− ³H）
（2′−デオキシチミジン）（TdR）および（２−
¹⁴C）（2′−デオキシウリジン）（UdR）である。 細胞は、化合物の種々の濃度（１−200μｇ／
ml）において、0.12μCi：0.01nmol（メチル−
³H）TdR（10⁵細胞あたり）または14μCi／
250nmol（２− ¹⁴C）UdR（10⁵細胞あたり）に16
時間にわたつてさらされる。 放射線ラベルされた前駆物質の合体を測定し、
ID₅₀を決定する。ID₅₀は抑制投与量−50に対応
し、（メチル− ³H）TdRまたは（２− ¹⁴C）
UdRのいずれかの合体を50％まで抑制するに必
要な化合物濃度である。 【表】 なお、（ ）内のデータは、De Clercq等著
Proceedings of the National Academy of
Sciences（USA）、76、2947−2951頁（1979年）
に報告された他の実験法によつて得られたもので
ある。 第３表から、Ｅ−５−（２−ハロゲノビニル）−
2′−デオキシシチジンは最高試験濃度200μｇ／ml
においてさえも細胞DNAへの（メチル− ³H）
TdRまたは（２− ¹⁴C）UdRの合体を抑制する
結果を示さないことがわかる。 試験４ 前記試験の測定結果として、Ｅ−５−（２−ハ
ロゲノビニル）−2′−デオキシシチジンおよび関
連化合物の抗ウイルス指数を決定する。 抗ウイルス指数は、ヘルペス・シンプレツクス
−１（株KOS）ウイルスに対するID₅₀に対し（２
− ¹⁴C）UdRの細胞DNAへの合体に対するID₅₀
の比率として決定する（第１表および第３表参
照）。結果を第４表に示す。 【表】 なお、（ ）内の数値は第３表に対する注釈を
参照。 第４表から、Ｅ−５−（２−ハロゲノビニル）−
2′−デオキシシチジンの抗ウイルス指数は2000−
3000を越えることがわかる。これら化合物は最高
試験濃度（200μｇ／ml）においても毒性を示さ
ないので、これらの正確な抗ウイルス指数を決定
することができない。 以上の説明から、Ｅ−５−（２−ブロモビニル）
−2′−デオキシシチジンおよびＥ−５−（２−ヨ
ードビニル）−2′−デオキシシチジンは優れたか
つ非常に特異的な抗ウイルス活性を単純疱疹ウイ
ルスに対し有すること、さらに細胞培養における
毒性は明らかに無視できることがわかろう。対応
するＥ−５−（２−ハロゲノビニル）−2′−デオキ
シウリジンと比較すると、単純疱疹ウイルスに対
しより高い特異性を有し、かつ細胞培養における
生細胞に対しより低い毒性を有する場合がある。
抗ウイルス指数の絶対値は2′−デオキシウリジン
類似化合物のそれよりも幾分低いが、細胞培養に
おける毒性が明らかに不足することは、2′−デオ
キシウリジン類似化合物により達成される治療的
指数と同等またはそれ以上の治療指数が結局得ら
れることを示唆している。このように、本発明化
合物は薬理学的組成物の製造および、ヒトおよび
動物における単純疱疹ウイルスによる病気の治療
に有効に使用することができる。 活性成分として、Ｅ−５−（２−ブロモビニル）
−2′−デオキシシチジンまたはＥ−５−（２−ヨ
ードビニル）−2′−デオキシシチジンを含有する
薬理学的組成物は、軟膏およびペーストはもちろ
ん粉末、懸濁液、溶液、エマルジヨンの形態であ
つてよいが、非経口的（皮内、筋肉内など）注
射、経口、肛門内、腔内および鼻内投与または局
部適用（例えば、皮膚、粘膜および眼の病巣）と
して使用してもよい。これら組成物は活性成分と
通常この目的に使用される薬理学的に許容される
賦形剤と結合して製造してもよい。これら賦形剤
は水性または非水性溶媒、安定化剤、懸濁剤、分
散剤、湿潤剤等からなつてよく、当業者に周知で
ある。さらに、本発明組成物はポリエチレングリ
コール等の適当な添加剤を含んでいてよく、要す
れば、染料および香料を含んでいてもよい。 通常、薬理学的組成物は少なくとも0.1重量／
体積％の活性成分を含むであろうが、現実の濃度
は投与ルートにしたがつて決定され、一般に0.1
〜100％の範囲で変り得る。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式 で示されるＥ−５−（２−ハロゲノビニル）−2′−
   デオキシシチジン類。 ２ Ｅ−５−（２−ブロモビニル）−2′−デオキシ
   シチジンである第１項記載の化合物。 ３ Ｅ−５−（２−ヨードビニル）−2′−デオキシ
   シチジンである第１項記載の化合物。 ４ 2′−デオキシシチジンにＥ−５−（２−ハロ
   ゲノビニル）基を導入することを特徴とするＥ−
   ５−（２−ハロゲノビニル）−2′−デオキシシチジ
   ンの製法。 ５ 式 で示される５−クロロマーキユリ−2′−デオキシ
   シチジンとアクリル酸エチルを塩化リチウムパラ
   ジウム触媒の存在下に反応させて 式 で示されるＥ−５−（２−カルボエトキシビニル）
   −2′−デオキシシチジンを得、これを加水分解し
   て 式 で示されるＥ−５−（２−カルボキシビニル）−
   2′−デオキシシチジンを得、これをハロゲン化し
   て 式 で示されるＥ−５−（２−ハロゲノビニル）−2′−
   デオキシシチジンを得る第４項記載の方法。 ６ 式 【式】 で示される２−デオキシ−Ｄ−エリスロ−ペント
   フラノーズのヒドロキシル保護反応性誘導体と式 で示されるＥ−５−（２−ハロゲノビニル）シト
   シンのトリアルキルシリル誘導体を反応させ、次
   いで全保護基を除去することを特徴とするＥ−５
   −（２−ハロゲノビニル）−2′−デオキシシチジン
   の製法。 〔式中、Ｒはアルキル、R¹は容易に除去可能な
   基、R²およびR³はヒドロキシル保護基、Halは
   ハロゲン、〜印はαおよび／またはβ配列を表わ
   す〕。 ７ 式 で示されるＥ−５−（２−ハロゲノビニル）−2′−
   シチジンを活性成分として含有する抗ウイルス活
   性剤。