JPS63277064A - リポソームで被覆された基体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は生物学的適合性表面（ｂ　ｉｏ　ｃｏｍｐαｔ
ｉｂｌｅｓｕｒｆαｃｅｓ）、即ち生きている組織及び
体液との長い接触に適した表面に関し、更に詳しくは新
規なリン脂質、その製造、それで為ら誘導された重合体
、及び該重合体の製造及びリン脂質の使用及び生物学的
適合性表面の製造における”１１’）ン囮質及びそれら
の重合体の使用及び生理学的に活性な化合物の長期の放
出？辱える組成物に関する。

少なくとも友とえば人工器官の表面及び血液透析装置の
構成部品紮形底するのに生物学的適合性の重合体を使用
するのに普通に実確されていることである。しかしなが
ら、これらの材料は完全なものではなく、生きている組
織との反応は問題ン残している。たとえば表面に誘発さ
れる血栓症は、荷に大量の血液が人工肺及び人工腎臓に
おける如き異質の表面（ｆｏｒｅｉｇｎ　５ｕｒｆａｃ
ｅｓ）と接触する場合には依然として大きな困４である
。人工器官におけるクロットの形成は、もしクロットが
人工表面ケ破壊しくｂｒｅａｋ　　ｏｆｆ）そして宿作
用ｒ及ぼ丁。最近、撲面凝塊形成庇（ｓｕｒｆａｃｅｔ
ｈｒｏｍｂｇｅｎｉｃｉｔｙ　）ｆｌ長期保存人工心臓
ｒ使用ぜんとする試み？挫折させた。人工心臓により支
持され次動物に起こる死の多くに人工石・＋伐の機械的
破損によって引起されるのではなくてクロット形成によ
り引起こされる。透析膜、代用皿孜（ｂｌｏｏｄ　　５
ｔｔｂｓｔ　１ｔｔｔｔｅｓ　）及び人工肺ｆｌｊべて
この問題ケ共育する。

一般的な生物学的適合性に対して医薬用途に使用される
材料は望ましくぼ、 α】　純粋な物質として再生可能な製品であることがで
き、。

ｂ）　　劣化したり不利に変化することなく製造するこ
とができ、 Ｃ）　特定の機能に対して必要な機械的特性及び透過性
特性を有し、 ｄ）　機械的透過性又は表面特性が不利に変化すること
なく滅菌可能であり、 ｅ）　生物学的環境によって有害な方法で作用されず、 ｆ）　発癌性でないことが望ましい。

血液との直接の接触を包含する用途において制約がある
。物質は１）問題となる程の血栓症を誘発するべきでａ
なく、正常なりロツティング機構ヶ妨害するべきではな
く、１１）細眠要素又は血液の可溶性成分に問題となる
程の損傷で引起すべきではない。生物学的適合性の荷に
血液適合性の表面、即ち、血液凝固プロセス盆活性化せ
ずそして血栓形成紮促進しない表面ｒ製造する多くの試
みがなされた。刀りする試みの例はアニオン件重合体又
は適当に配向したエレクトレット重合体の如き代に帯域
し７’（表面、天然の抗凝固剤ヘパリン又は合成ヘパリ
ン負似体、固有に低い表面自由エネルギーン有する荷電
した表面、アルブミン七帽菫した表面、及び血液から憂
先的にアルブミン全吸収すると考えられるある橿のポリ
メタンの如き表１ｆｉｒ包含する。しかしながらすべて
は限界盆臂している。

表面の性質の一般的事項としてその問題ン考察すると、
生物学的膜は体の丁べての区域において１安であるとい
うことに重大な意義があるとの印象ｒうけ友。アベての
生きているａ＠は外ｍのａケ有し１．洲胞内にぼ、種々
の細＠器官、九とえば、ミトコンドリア、核及び内質細
網（ｅ　ｎｄｏ　ｐ　ｌ　ａｓｍｉ　ｃｒｅｔｉｃｕｌ
ｕｍ　）　ｉ区分する工うに作用する膜がある。様々な
ａ絶膜が極性脂質（友とえばりン脂質λのマトリックス
から構成される。刀瓢＜シて赤血球は、たとえば、リン
脂質二重膜のマトリックス上に傳成さｎた細胞壁で有す
る。脂質は細胞壁の外側表面上にリン脂質レシチン（ホ
スファチジルコリンノ及びスフィンゴミエリンと対称に
、そして、刑胞壁の内側面上に、Ｂスファチジルセリン
及びホス７アチジルエタノールアミンと対称に配置され
ている。後者は正味の銭の荷［ｋ有しそしてそれ自身の
上に血ｆｆ、凝固勿引起アことが矧られている。前者な
ぺ性・Φオｚ４造’ｋ　ｆｉ　Ｌ　、二°４胞壁Ｏ外Ｒ
我＋訃２　＃ｆｉｌ　ｊ”！　ａ： 本７発明に、リン脂質が体全体にわたり生物学的膜の必
須のｇ酸成分であるので、生きている組織と接触するべ
き異質物の表面におけるリン脂質によりこれらの膜（８
与えられ７？：表面の漢造物（イミテーション］がそれ
ら盆生物学的適合性ならしめることの契現に基づくもの
である、 これが実際にそのようであり、そして本出顧人の提案の
必須事項は含すンオキーシｒｌＲ（ｐｈｏｓｐｈｏ　−
ｒｒｂｓ　　ｏｚｙ−ａｃｉｄ　）　／−窒素双性イオ
ン基が分子構造の外側面に存在している人工的生物学的
適合性のべ面ｒ有する物品又は物体ｒ与えることである
ことケ見出した。

その渚も広い観点において、本発明は下記一般式の共役
ジーイｔ７ｈ提供する。

ＣＨ，−０−Ｂ。

式中、Ｂ、及びＢ２の少なくとも一つは式−＜Ｃｏ　Ｊ
、ｐ−Ｘ、−Ｃ＝Ｃ−Ｃ＝Ｃ−Ｙ。

式中ｐは０又は１であり、Ｘ、は直接の結合又は二価の
脂肪族又は項状脂肪族基であり、Ｙ、はＨ又は−価の脂
肪族又は環状脂肪族基であり、各Ｂ。

及び／又はＢ２におけるＸｌ及びＹ、の炭素原子の総数
は８乃至２６であり、Ｂ１及びＢ２の他方は（α）式 ％式％ の同−又は相異なる基であるた或いに（ｂ）少なくとも
８個の炭素原子ヶ含有する脂肪族又は環状脂肪族基であ
り、ｎは０又は１であり、ｆｒＬζ２．３又は４であり
、各Ｒは独立に１〜４個の炭素原子ケ含有するアルキル
基を表わす。

本発明の池の視点は前記した如き共役ジーイン全架凋す
ることに工り傅られ定直合体〒提共する。

これらの重合体は構造 式中、Ｚ□、２．．２３及びＺ４の二つぼ前記し之如き
Ｙｌを表わし、２．．２．．２３及びＺ４の他め二つは
各々−Ｘ、−（Ｃｏ　鴨−Ｇｒ辰わ踵ここでＸ、及びｐ
は前記した通りであり、ＧはＣＨ，−０− 七表わし、式中、ｎ、ｍ及びＲに前記した通りであり、
架橋した鎖は同−又は相異なるＧ残基に結合している、
の、４厘し単位を通常含有する。

式■の共役ジーインは好ましくは双性イオン性基が天然
のリン脂質レシチン及びスフィンゴミエリンのホスフェ
ート結合しｔ基、即ち、コリンホスフェート基： 父に関連したホスフィン結合した４： であるところの共役ジーインである。

好ｆしい双性イオン性基は慣が２であるがｍが３又は４
であることもできる天然に存在する生成物の類似体であ
り゛、そして各Ｒ基は天然に存在する生成物においては
そうであるが、メチルであることが好ましいが、しかし
Ｒはエチル、グロビル又はブチルであることもでき、そ
して双性イオン性基は四級窒素において非対称に置換さ
れていてもよい。

本発明の共役ジーインにおいてに、両Ｂ１及びＢ２は各
々式 ％式％ の基を表わすことも好ましい〇 実際問題として、対称化合物は合成するのが最も容易な
化合例、即ちＢ、及びＢ、においてｐ、Ｘｌ及びＹ、が
同一である化合物である。し〃為シなから、たかる対称
性は本発明に従えば必須ではなく、そして各Ｘ１及びＹ
ｌが同−又は相異なる場合に８１及びＢ、の一つにおい
てｐがＯであり、Ｂ、及びＢ２の他方においてｐが１で
ある化合物ｔｉ史用することが可能である。し刀為しな
がら、刀１語る物質？合成することはより困難である。

本発明の理論的基礎に関する限り、Ｂ１及びＢ。

における共役ジーイン系の位置は重要ではない。

たとえば、Ｘ、は共役ジーインがカルボン酸エステル又
はエーテルにすぐ隣接しているように直ポ結合であるこ
とができ、そして刀瓢小る場合にＹｌは少なくとも８個
の炭素原子金含有する必要があるであろう。共役ジ−イ
ン系が、Ｙｌが水素であり、Ｘｌが少なくとも８１１１
！Ｉの炭素原子ｒ含有するようにカルボン酸エステル又
にエーテル基刀１ら遠い疎水性鎖のその端部にあること
も同じく可能である。し刀）しながら、以下に更に詳細
に議論する理由によって、兵役ジ−イン系がＸｌ及びＹ
ｌにおいて１１ぼ同じ数の炭素原子があるように疎水性
基の中心に向かって位・ｄ′ｊるように配置されている
のが最も便利であることが通常見出される。

Ｘ、及びＹｌは各々好ましくは脂肪族又は環状脂肪族基
である。本発明者の初期の実験は脂肪族又は嘴状脂肪族
基が未分岐炭化水素基である化合物に県中されているけ
れども、脂肪族又は譲状脂肪族基が分岐状炭化水素基で
あるべきではない理由又は炭化水素鎖上に＃、換基、た
とえばアルコキシ壇換基父は・・ロゲン勿含有すべきで
あるという理由は同もない。下記説明において明らかと
なる理由で、共役ジ−イン系が疎水性鎖における唯一の
炭素−炭素不飽和を表わアが、もし追加の架橋結合が所
望されるならば、更なる炭素−炭素不飽和が基Ｘ、及び
Ｙ、に存在することができることが好ましい。

各疎水性鎖が総数１２〜３０個の炭素原子金含有するよ
うに各基Ｂ、及びＢ、におけるＸ、及びＹ、における炭
素原子の４数が８〜２６であることは重要である。もし
４Ｂ、及び／又ｉｒ、　Ｅ　ｚが１２個エリ少ない炭素
原子を含有するならば得られるｖＩ質は井筒に低い温度
の場合を除いて重合するのが困！碓であることｔ見出し
た。実際問題として、４Ｂ、及び／又はＢ、に１６乃至
２６個の炭素原子がある場合は、特に鎖が２２又は２４
個の炭素原子全含有する場きに最も満足すべき結果が得
られること７見出した。

ＸＩ及びＹｌにおける炭素原子の正確な礪造配置は本発
明にとって重要ではなく、それらの主要な機能は該化合
物に正しい程度の疎水性ン付与し、そして都合の良い温
度で重合全許容することであるが、炭素原子か直鎖又は
分岐ａ造内にあるがＸｌ及びＹｌは賀状脂肪族配置中に
３〜８個又は更に多くの炭素原子金含有する環状脂肪族
残基７含むこともできることは必須ではない。

共役ジーインの重合に関しての下記の説明から明らかに
なる理由によって、両Ｂ、及びＢ２は共役ジ−イン系が
分子内及び分子間重合に参加することができるように共
役ジ−イン系を含むことは好ましい。し刀為しながら、
単に分子間重合に二って十分な程度の架橋を傅ることが
でき、その場合に、基Ｂ、及びＢｔの一つは共役ジーイ
ン系ｒ含有することのみが必須である。Ｂ１及びＢ２の
１しくに炭化水素残基であることができ、これは飽和さ
れていてもよく又は、孤立もしくは共役ジ−イン系と共
役していてもよいオレフィン又は多分単一のアセチレン
性不砲和？含有していてもよい。

か刀為る基にやはリエステル又ａエーテル基を介してグ
リセロール残基に結合しており、そして少なくとも１２
個の炭素原＋７やはり含有するべきである。

本発明の共役ジーインはそれ自体公知の方法によって人
造することができる。故に、双性イオン性基は適当なホ
スホン酸又はホスフィン酸或いはそのエステル化可能な
誘導体でグリセロール又は勉 そのニスデル化イ１誘導体との反応に付しそれに工りグ
リセロールのα−ヒドロキシ−４ヶ反応させて公安なリ
ンエステル基を形成することにエリ導入することができ
る。基Ｂ、及びＢ２ぼ、カルボン、￥ｌ！ＢＩＣυＵＨ
もしくはアルコールＢ、ＯＨ又は対応するＥ、Ｃｏｏｌ
−１もしくにＢＯＨ物質或いは上記刀ルボン酸又はアル
コールの一つのグリセロール又ぼそのエーテル形成性も
しくにニスデル形成性誘導体とのエステルもしくにエー
テル形成性誘導体を使用するエステル化又はエーテル化
により分子中に導入することができる。これらの反応は
一万ではグリセロール又はその誘導体と、他方カルボン
又はアルコール及びリンエステルとの間で同時に又はい
ずれかの順序で引続いて行なうことができる。本発明の
好ましい化合物である対称リン脂質の製造に対して、我
々は、実際上は選ばれｔ含すン酸又はリン酸との必要な
グリセロールモノエステル勿形灰し、次いでこのモノ−
′リンエステル？選ばれた共役ジ−インカルボン酸の無
水物（上記酸ｔジシクロへキシル−カルボジイミドと処
理することによって得られた］と反応させ、次いでグリ
セロールモノエステルを有機浴媒中で且つ有機塩基の存
在下に無水物と反応させるのが便利であることがわ刀島
った。

エステル基の形成のための他の既知の方法も等しく使用
することができる。ｐが０である化合物ｋｇ造すること
が望まれる４合には、対応する常用のエーテル形成性プ
ロセスと使用することができる。

本発明の共役ジーインは、それらヶ化学活性線放射しく
αｃｔｉｎｉｃ　　ｒａｄｉａｔｉｏｎ）、普通は＜３
００ｒＬｍの範囲の波長の紫外線放射にさらすことによ
り重合することができる。たかる照射は隣接鎖の共役ジ
−イン系間の架橋を生底する。これは下記構造の繰返し
単位γ含有する重合体に生じる。

式中、Ｚｌ　、　Ｚ２　、Ｚ３及びＺ４は前記した通り
である。架構に関与する兵役ジ−イン系は非対称が、Ｃ
１及びＣ４は非対称置換の故に相互に同等ではないので
架橋が各鎖のＣＩ及びＣ１闇で又はＣ８及びＣ４間スル
Ｃ４及びＣ４間で起こる７０１どうかに依存して種々の
架橋し友生成物が生じ得る九とえば、もし架橋がＣ１及
びＣ４間に起こるならば、繰返し単位は である。

重合体に関する我々の構造研究は架橋した重合体が一つ
又は一つエリ多くの可能な架橋し之生成物？含有してい
り刀１いないがに未だ確立していないが、それらがすべ
ての架橋し７′？：ＷＩｔ造に共通である共役系 ＝４：Ｃ−ＣＥ　Ｃ−Ｃ＝Ｃ−Ｃ＝Ｃ−Ｃｊｙ−１゜ｌ
；　　　　　　ＩＩ＋　　　　　　１２含Ｍすることｔ
確立した。

Ｂ、及びＢ２は両方用共役ジーイン系に含有する場きに
は、本発明の重合体の大抵の用途に対して望ましい分子
内及び分子間架橋の両方が存在するであろう。この理由
で、Ｂ、及びＢ２は両方用共役ジーイン系を含有するこ
とが好ましく、そして分子内果ａ〒巷最適にするために
、Ｂ１及ヒＢｔの兵役ジ−イン系の相対位置がほぼ同じ
であること、換言丁れば共役ジーイン系紫グリセロール
残基に接続する炭素鎖は長さにおいて炭戎原子が２個よ
り多く異なるべきではないことが好ましい。

本発明の重合体の意図する生物医学的用途の点刀）ら、
重合は化学活性線、普通に可視線の波長工９短い波長に
有する化学活性線に曝露することによって衆も良く誘発
されるが、原理的に兵役ジ−イン系の重合ｒ誘発するこ
とができることが知られた任意の方法ｒ本発明の重合体
の装造に対してて使用することができる。共役ジーイン
は種々の状態で、たとえば水上の単層として、疎水性基
体念とえば７″７０ン上の多層として、リボソーム（ｌ
ｉｐｏｓｏｍｅ　）として又ｆｌＫＢｒ円板内の固体の
状態で重合することができる。

本発明の重合体の主斐な用途の一つは、基体、特に皿液
又に他の体液又は内部体表面と後に直接接触ぜしめられ
るこｎらの基体上への表面′４覆勿与えることである。

か′Ｄ）る表面被覆は、実際上、不発明の共役ジーイン
で基体ｘ：４１１ａし、次いで化学活性線にＢａ霧丁Φ
ことによってその場で兵役ジーインｔＸ合することによ
って普通は最も良く導入される。本発明の共役ジーイン
は無色の物質でめるが、重合が進むにつれて、共役ジー
インが中間体カルベンに先ず転化されると先ず背色範囲
にわたって進行するきわだつｔ色の変化があり、次いで
この遷移状態カルベン中間体は赤色又は紫色の着色含有
する最終重合体分子に転化さｎる。結果として、基体上
の重合は目で視て追うことができる。基体にたとえば重
合体、金属、ガラス、セラミック及び多くの他のもので
あることができ、重合体の例はセロファン、ポリ塩化ビ
ニル、ポリカーボネート、ポリメチルメタクリレート、
ポリエチレン、ポリテトラフルオロエチレン及ヒシリコ
ーンゴムである。７０１刀為る被覆された基体は人工器
官＃値組ｔｉｐ、（ｐｒｏｓｔｈｅｔｉｃ　　ｉｍｐｌ
ａｎｔｓ　）。

目謬植４ｇ織（ｅｙｅ　　ｉｍｐｌａｎｔｓ　）及ヒコ
ンタクトレンズ、診断装置、人工肺（Ｌｕｎｇ　ｍａｃ
ｈｉｎｅｔ　）へ工腎−鴫、縫合糸、人工レンズ、随意
に使用できる組織、培養容器及び他の外科器具、手袋、
カテーテル、恒久的入口ボート（ｅｎｔｒｙ　　ｐｏｒ
ｔ　Ｊ医薬送給シス尤ム、注射器、子宮内器具、〒包含
する避妊装置、及び包帯に使用丁＠ことができｏ０本発
明は角膜内皮損傷（ｃｏｒｎｅａｌ　　ｅｎｄｏｔｈｔ
ｔ−１ｉａｌ　ｄαｍαｇｇ　Ｊに減少させるのに眼内
レンズ上に表面被覆ｒ与え；ｂために特に好適である。

眼内レンズの最すの移植は白内障抽出と関１し几皮内細
胞損失（ｇｎｄｏｔｈｅｌｉａＬ　　ｃｅｌｌ　　１ｏ
ｓｓ　）及び損傷葡＠題となる程増加させることができ
る。

この損傷はもしレンズが角膜内皮に接触するならば内皮
表面へのレンズ材料、ポリメチルメタクリレ−）　（Ｐ
ＭＭＡＪの瞬間的付着により引起こされるように見える
。

電子顕微鏡を使用して、カッタマン（Ｋａｕｆ−ｍａｎ
）及びカッタ（Ｋａｔｚ）はＰＭＭＡ’ｌ）−らつくら
れたレンズと角膜内皮細胞との間の瞬間的接触ですら細
胞膜がＩＯＬ表面への付着からの引雅しγ生じたことで
示し友。

ときどき起るレンズ−内皮接触におけるカリする細胞損
傷上域じｔり防止したりするポリメチルメタクリレート
の表面変性に関する研究は、この重合体が問題になる程
の短期又は長期の劣化？示すことなく眼内で十分に耐性
であめことが既に示されたので実除的方法であるように
思われる。新規物質に導入する変法は同様に広範な安全
及び有効性試験の繰返しに公安とするであろう。

この分野における従来の研究はレンズと内皮との間の付
着が疎水性ポリメチルメタクリレートと親水性眼内組織
との藺の相互作用であるという考えに基づいていた。ポ
リメチルメタクリレート表面ｒ謬植に先立ちポリビニル
ピロリドン＜ＰＶＪ’１又はメチルセルロース溶液中に
浸漬することによって該ポリメチルメタクリレートｆｉ
面に親水性にすると、内皮損傷の臨床発生率（ｃＬｉｎ
ｉｅｔｘｌｉｎｃｉｄｅｎｃｔｔ　）を減少させること
が示された。ｊ二これらの眼内し７ズ表面〒一時的に変
え；うとする同様な試みにおいてＦＶＰ、シリコーン油
及び血清の浸漬溶液が使用された。しかしながら、これ
らのンンズ？手術のすぐ前に浴液に浸漬することは面倒
で且つ不便でろ９、滅菌性（ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ　Ｊ及
び再生可能性の新しい問題が起こる。

本発明の物質は、本発明の物質のそれらの極性基が、１
＠胞外ｇ　（ｅｘｔｒａ　　ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｆＬｙ
ｔｉｄｓ　）に面する工うに眼内レンズ業被覆するのに
使用される。これは生きている組織及びイ本辰との短い
又ζ長い接触に対してそれ？好適ならしめそして皮肉Ｍ
ｊＪ絶膜の引裂き？減じるであろう。次いで共役ジーイ
ンに安定化さｎて表面が親水性であり同時に生きている
組織に生物学的に適合性の重合体被覆ｒ形成する。

眼内レンズ又は他の支持体表面は、様々な方法、九とえ
は各液又はエマルジョン被覆又はラングミアープロジェ
ット（Ｌａｎｇｍｔｂｉｒ　−ＢＬｏｄｇｔｔｔｔ　）
多層浸漬方法によって被覆することができ配向し定着に
得そして不規則な表面上処理することｒ可能とする〇 被ｇの付着（ａｔ　ｔ　ａｃｈｍｇｎｔ　）　ｒｌ、友
とえば被覆されるべき重合体又は他の物質又は九とえば
溶媒処理の後それに工９吸収されｔ物質と反応性である
基紫脂肪ばの鎖内又は鎖の末端に有する脂質ケ使用して
該表面への共有結合に１９改良することができる。別法
として、たとえば重合体基体を低分子量溶媒によって膨
潤させて脂肪酸残基の脂肪鎖が重合体構造中にその後に
吸収を生じることによって被覆の物理的付着が起こり得
る。

本発明の共役ジーインの他の重要な用途はリボソーム（
ｌｉｐｏｓｏｍｇ　）の製造にある。２７為ηするリボ
Ｖ−ムは生理学的に活性な物質を支持し、その故にたと
えば非代謝性医薬品又は酵素７体へ持続放出させる生物
学的適合性処方を与えることができるからである。

カでするリボソームは水性媒体中に共役ジーインを分散
させ、分散液の温度ｙ２　＋７ポンームの生成が起こる
温度である脂質又はチャツプマン転移温度（Ｌｉｐｉｄ
　　ｏｒ　　ｃｈａｐｍａｎ　　ｔｒａｎｃｉｔｉ０３
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　）より高い温度に分散液の温
度ヶ上昇させ、次いで分散液ｒ周囲温度に冷却すること
にエリ人造することができる。もし生理学的に活性な物
質がリボンーム生成期間中水性媒体中に存在するならば
、リボソームに活性物質で含有し、そしてリポソーム膜
構造の代謝の結果として長期にわ几り活性物質にゆっく
りと放出する。

カミかる取合わせの冥際上の利点の一つは、このように
して水溶性及び水不溶性活性宅質ｒ処万し、又は所望に
エリ書溶性及び水不溶性物質７同じ処方内に、水不溶性
物質ｒ脂肪中に先ず配合することに工って処方すること
が可能であるということである。

本発明の共役ジ−インリン脂質又はリポソームの膜？形
成するそれらの重合体はリポソーム内に導入された多く
の生理学的に活性な物質の補助薬として作用することが
しばしば見出される。

リポンーム形成期間中水酸化アルミニウム又は他の補助
薬に水性媒体中に導入することによってこれらの処方に
水酸化アルミニウム又は他の補助薬ｒ配合して生理学的
に活性な物質の活性に強化することも可能である。

リポソーム形成は多層ラメラ構造ｒ生じるように既知の
方法に工って行なうことができる。小さな直径の率−ラ
メラリポソームは多重ラメラリポソーム（ｍｕｌ　ｔｉ
　−ｌａｍｅ　Ｏａｒ　　Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ　）に超
音波振動に付することに工っで発生させることができる
。より大きい単一ラメラリポソームは共役ジーインをア
ルコール中に溶解し、次いでこの溶液ケ注射器ｒ通して
水性媒体中に注入−ｊにとに工９発生させることができ
る。これらの単一ラメラ物質は成るときは微小小＠　＜
ｍ１ｃｒｏｕｅ−ｓｉｅｔｔｔｓ　）として知られてい
る。

単一ラ〆うであるが又は多層ラメラであり、そして普通
は生理学的活性物質及び場合により補助薬？含む得られ
るリポソームは前記し之如きイＯ学活性線に＠露するこ
とによって兵役ジーイン系ｒ架橋することに、ｃ＃７安
定化することができる。かかる照射は分子間で起こり、
そして共役ジーインの構造、多分分子内架橋に依存して
、本発明の重合体を含んで成るリポソーム分散液７与え
る。本発明の共役ジーインの架橋の前文は後に本発明の
リポソーム分散液中に他のリン脂質のリボノーム會含ま
せることも可能である。

リポソーム形態にある本発明の重合体で処方することは
普通最も便利であるが、共役ジーインを大量に重合し、
次いで重合体？押出してリン脂質重合体カプセルに与え
ることも可能である。或いは、本発明のリン脂質重合体
は他のリン脂質ｔペースとするリポソーム形成に含ませ
ることもできる。

抗原物質、ホルモン、酵素及び抗炎症剤の如き医薬？含
む広範に種類の生理学的に活性な物質を本発明のリポソ
ーム分散液内に処決することができる。リポソーム中の
インフルエンデビールス又ａそのフラグメント、ジフテ
リアトキシン、破傷風トキシン及びリポソームにおける
ウィルス源又はバクテリア源から導かれた他の抗原性物
質の配合ハ、インシュリンの如きホルモン、抗炎症性ス
テロイド之とえばコルチコステロイド、たとえばコルチ
ゾン、コルチゾール及びそれらのΔ′−デヒドロー及び
９−フルオロ誘導体；抗炎症性非ステロイド、たとえば
ペプチド、免疫抑制性化合物、比とえはメントレキセー
ト、サリチレート、フェニルブタシン、及び加水分解性
酵素１；対する抑制剤と同じく現在では文献に十分に記
載されている。

これらの及び他の生理学的活性な物質がいかにしてリポ
ソーム組成物内に導入され得るかについては、友とえば
米国特許第４．１７７．１１３号及び第４、１９９．５
６５号及び西ドイツ公開公報第２２４９５５２号、第２
５２８４１１号、＠２６４３６４１号、第２７１２０３
０号及び第２７１２０３１号ｒ参照することができる。

これらの物質は本発明のリポソームに編入することがで
きる生理学的に活性な物質の典型的なものである。

下記実施例により本発明を説明する。

実施例　１ （α）　ジアセチレン憎の合成 （＋Ｊ　　Ｈ，Ｃ＝ＣＨ＜ＣＨｔ）、Ｃｏ、Ｈｚ　−２
ＨＥｒ ＨＣ＝Ｃ（ＣＩ−１２）、Ｃｏ、Ｈ（Ａ）Ｈ（５Ｃ（Ｃ
Ｈ２）　３０Ｈ。

ｎ＝９、　ｌｌ ＆　　＋Ｃｔｉ、ＣＨ２ＭｇＥｒ Ｂｒ　ＭｇＣ＝Ｃ（ＣＨ，）、ＣＭ。

４−　　＋　Ｉ　ｚ　　　　Ｉ　Ｃ””’　Ｃ（ＣＨｚ
　）　３　ＣＨｓ　（Ｂ　）（３）　　（／ｌ）÷（Ｂ
） ＣＨ，ＣＨ，ＮＨ。

ＣＨ，（ＣＨ，）　ＣＴＣ−Ｃ＝Ｃ−（ＣＨ山Ｃｏ、Ｈ
（Ｃ）Ｉ４）　　２　（Ｃ）　　Ｒ−Ｎ＝Ｃ＝Ｎ−ＲＣ
Ｈ，（ＣＨ２）ｎＣＣＩ−Ｃ＝　Ｃ−（ＣＨ，）。

０−ＣｄＣ１゜ アルクン及びアルケンｒＲ’ｋ１モル当量の臭素紮ゆっ
くりと加えることによって石油エーテル中において臭Ｘ
化し九〇ジブロモ誘導体ｔエタノール中で過剰のＫＯＨ
と還流することによってジプロ誘導体ｒただちに脱臭化
水素化し几。アルコールｒ留去しそして＊ＨＣｔｘ７７
ｎえｔ後、アルキン紫エーテル抽出に工９単趣しそして
真空蒸留（１０−’趨ＨＵ）により＃ｌ＃した。

非対称性コドキーヴイクツ　カップリング（Ｃｈｏｄｏ
ｋｉｅｗｉｃｚ　　ｃｏｕｐｌｉｎｇ）ＯＤため、反応
、成分の一つにヨウ化しなければならない。故に１−ア
ルキン紫乾燥ジエチルエーテル（ＣαＨ２−α理し之］
中の４かに過ＪＪの臭化エチルマグネシウムに０口えた
。生成し几アセチレン性グリニヤー試＝Ｘ？添Ｕｎした
Ｉ２と直接に反応させて所望の・・口誘導体ｒ傅九〇反
応フラスコの内容＄Ａ荀過剰の希昨酸中に注ぎそしてヨ
ー化アセチレンｔジエチルエーテル中に抽出した。未反
応のＩ２〒チオ硫酸塩洗浄に１９除去し、そしてソエチ
ルエーテルを蒸発させ几後真空蒸留に工９精製を達成し
た。

アセチレンカップリング反応の詳細は広範に検討されて
いる。希ＫＯＨ浴液に溶解しｔ藪に痕跡量のヒドロキシ
ル塩酸塩及び水性エチルアミン中に弓解し、ｆｅ　０．
２５モル当量のＣｕ、Ｃ１２２加えた。

次いでヨウ化アルキン（１モル当量］一時に少量ずつ’
？ｆ−７１０え之。始めたら黄色の溶液は緑色に変わつ
几。アルキンの次の添加前に数滴の１０％ヒドロキシル
アミンｍ液勿加えることによって回復した。最後に、反
応混合物ｒ酸性にし、そして生成物ｔジエチルエーテル
中に抽出した。ジイン酸ｔ４０−６０℃の石油エーテル
から再結晶し几。

戚は谷筋に重合した。紫外線及び赤外分光法はそれぞれ
共役三重結合及びカルボン酸基の存在？示した。

ｂλ　リン脂質の合成 鍍金塩化メチノン中ｉＣ溶解し、０．５５モルの当量の
シンクロへキシルカルボンイミドに’ＪＪＤえることに
工って無水物に転化し之。無水物は赤外分光法にエリ同
足した。

リン脂質はグブタ等（Ｇｕｐ　ｔ　ａ　　ｅ　ｔ　　Ｃ
１）の方法ｋ　Ｅｅ用して合、截した。グリセロホス７
アチジルコリ：ｙ−ＣｄＣＬ２錯体（１，０モル当量）
に乾燥クロロホルム（Ｐ　２０　ｓ　％哩した］中で３
０時間無水物（Ｚ５モル当貢］及び４−Ｎ、Ｎ−ジメチ
ルアミノピリジン（λＯ当霊］と攪拌した。溶媒の除去
後、メタノール／クロロホルム／水（５：４：１、Ｖ／
Ｖ）に可溶な画分７レキシンｌ−３００（Ｒｅｘｙｎ　
　Ｉ　−３００１’ｌｌｌ脂のカラムを下へ通過させた
。今度はＣｄＣｌ２及びアミノ−ピリジン【含マない生
成物ｒセファデックスＬＨ〜２０（Ｃｅｐｈａｄｅｚ　
　ＬＨ−２０）によるりａマドグラフィによって４４し
た。出発アルケンγ４準とする全収率は５％である。

生成物及びジパルミトイルホスファチジルコリン〔ビニ
Ｌ’）ス　グＶ−Ｆ（ｐｕｒｉｓｓ　　ｇｒａｄご）Ｆ
ｌｕｋαＥｘ薄１ｔｊクロマトグラフィー〔メルクシリ
カゲル　グレート；溶媒、クロσホルム／メタノール／
水（６５：３５　：４、Ｖ／Ｖ）Ｅ及び赤外分光法にエ
リ比；ｉｔ！２　した。Ｒｆｌｌｉｆ及びスペクトルは
同一であった。虫取ｖ！ｊにデイットマー試薬（Ｄｉｔ
ｔｍｅｒ　　ｒｅａｇｅｎｔ　）　で噴ＩＩ　Ｌ　７を
場合に正の試験（ｐｏｓｉｔｉｎｅ　　ｔｅｓｔ　）　
（ＩＦ色に変つ之２ｆ与えた。紫外線分元法による倹肴
は共役した三重結合が存在していること〒示した。生成
物ｆｌ”ｌ　１７７脂質１．２−ジトリコサノイル（Ｃ
２３Ｊ−及び１．２−ペンタコサノイル（Ｃ２５）　−
１０、１２−ジイン−５ｎ−りＩＪセロ−３−ホスホリ
ルコリンであった。

これらのジアセチレンリン脂質（Ｃ１０及びＣｄ５）に
対する転移温度及びエンタルピーは以下に示される： 実施例　２ 実施例１に使用され九方法を変性してＣ２ｓ　’）ン脂
質の共役トリーイン煩似体を生成し友。アルキノイドカ
ルボ：ｙ＃ｌ！Ｈｃ＝Ｃ−（ＣＨ，）ａＣＯＯＨ紮実施
例１に記載の如くして製造し之。段階１０ビス−（クロ
ロメチル）−アセチレン勿デトラヒドロフラン及びヘキ
サメチルホスホルアミド中３モルのプチルーリチ９ムと
反応させてジアセチレンＨＣ＝　Ｃ−Ｃａ　ＣＯＬ　ｉ
■のリチウム塩を得、次いでこれ葡臭化ｎ−オクチルと
反応させて約４０％収率でドデカジ−イン−１，３を形
底し之。

次いでドデカジ−イン−１，ａ２ＮαＯｒと反応させて
１−ヨード誘導体ＣＨ，−（ＣＨ２）、−Ｃ＝、Ｃ−Ｃ
＝、Ｃ−１ケ得、これで次いで実施例１段階３に示され
た条件下に前記したアルキン酸と反応させて兵役トリー
インＣＨ，−（ＣＨ，）ツーＣ：；Ｃ−Ｃ’；；Ｃ−Ｃ
＝Ｃ（ＣＨ２）、Ｃ０ＯＨケ得た。

この共役トリアセチレンｒＩＲｉｌｃ実施例１の段階３
で得られｔ共役ジアセチレンｆｌＩよりもＵＶスペクト
ルスペクトルにおける高いピーク全示し、そのより高い
程度の共役を示す。共役トリアセチレン酸に実施ＩＰＩ
１１の段階４に記載の方法によってその無水物に転化し
次いで無水物に実施例１の段階５に記載のグリセロホス
７アチジルコリンのＣｄＣ１゜錯体と反応させて共役ト
リーアセチレンリン脂質ｒ形放し、これは活性線にさら
すと重合する。

兵役トリーアセチレンりン脂質はトリーアセチレンカル
ボンｅＲｋｙ″トラヒドロ７ラン中のケトンｔジメチル
スルホキシド中でリン脂質のＣｄＣＬ２錯体と反応させ
て共役トリーアセチレンリン脂質？得ることによっても
製造された。

共役トリーアセチノン酸は、酸ＨＣ＝Ｃ。

（ＣＨ２）、　ＣＯＯＨｚアセチレン結合のところでヨ
ウ化し、ヨード−デシン酸？ジーインＣＨ，。

（ＣＨｔ）ｔ　　ＣミＣ−Ｃ：；ＣＨと前記カッグリ。

グ方法により反応させることエリ成る方法によっても製
造された。

実施例　３ 実施例１のジアセチレンリン酸脂質ｒラングミアーブロ
ジェット法に使用してポリメチルメタクリレートからつ
くられ之眼内しンズｒ被覆するのに使用した。この方法
において、脂質の表面層は空気−水界面において形成さ
れる。硯水性極性表面を有する最終脂質層が必要である
。

リン脂質単層荀ＣｄＣｌ　、含有純水（１、Ｆ　／ｌ　
。

ＣｄＣｌ２、水の抵抗１ｓＭΩ／１７に機汚染物を検出
できない）上に広げる。レンズｔ〜６０℃の洗剤溶液（
ＲＢＳ　３５　ｊ中で２時間ソーキングすることによっ
て清浄化し、次いで純粋中で完全に丁すいだ。単層は比
較的高い速度（自由に落下する又は〜７３　ｃｙｔ　／
分ンで下向きに単層７通して繰返し浸漬することによっ
て移行せしめられる。上向きの移動期間中のみ堆積が起
こる。被覆され友物体が空気中へと抜き出されるとき、
それは最終層が外側親水性表面含有する工うに０．３　
ａｔｒ　７分又はそれ以下の速度で抜き出さｎる。次い
で被覆したレンズはその而たら１２００ｕｗ／ａｄ　１
５゜２ｃ！ＩＬのエネルギー出力で２５４ｎｍにおいて
ピーク放射強度を有する紫外線ラングで室温で１０秒間
照射し友。或いは、最終外側表面として所望の親水性極
性表面ｒ製造する九めに、被覆（所望の数の単層の］の
間脂質層の照射による重合は水の下で行なうことができ
、レンズは氷表面が完全に洗浄されて後抜き出され得る
。

脂質層の表面圧力はこれらの層の破壊圧に近い３５ダイ
ン／ｃＩ！Ｌであるように選ばれ、温度は２０〜２２℃
（室＠Ｊであつ九。不純物の影＃Ｉｒ最小にする几めに
、サブ７エーズ（５ｕｂｐｈａｓ　ｅ　）（１９／ｌ）
にＣｄＣｌ、上顎えそして＃友な噴霧単層のみｒ使用す
ることが必要である。水はＺ’）ボア（Ｍｉｌｌ　　ｐ
ａｒｅ　）水精製システムｖｃ工り禮製し、製造後唯ち
に使用して再汚染金最小にする。

外釜表面の親水性は水滴の表面層がりの程度として定義
された１水接触角を測定することにエリアッセイされる
。水ハ標準（疎水性）ＰＭＭＡの表面上にビーズを形成
し、しかし、被覆された表面では、それは約ｌＯ秒開広
がりそして非常にゆっくりと押し流される（ｒｏｌｌｓ
ｏｆｆ）。この挙動は被覆されｆｉ　ハースペックス＜
ｐｅｒｓｐｇｚ　）が数週間後空気上に保存され又は数
日水中に浸される場合変化しない。安定性は、数日間７
０％ＮａＯＨｍ液中の浸ｒｊｔを含む数百方法が表面特
性を変えないという事英かられかることができる。

ｒ＃ｊ照射全使用する眼内ンンズ上への脂質重合体の恒
久的グラフト化はレンズ表面の衡る親水性変性を生じる
。変性されないＰＭＭＡｔｌＣｇする水接触角は７２ｃ
′であり、グラフト化の後この角度は減少する（広がり
が増加した］。

これらのレンズは１宋試験に付しｔ０被覆され友レンズ
は皮内損傷會起こし九りニケ月の試験期間にわたり患者
に何ら有害な作用ヶ生じることなく人間に導入された。

実施例　４ レンズで柔軟なテフロンシートαｌａｇ厚さに工９置換
えることにより実施例３に記載の被覆方法γ線区し九。

被覆され九シート紮実織例３に記載の如くして空気中で
重合した。次いで柔軟なシートケ管に底形し、血液ｒ管
に導入し友。トロンビン活性全誘発する表面の能力の目
安として試験管内フィブリノペプチドＡ発生試験音使用
し友。表面は血液クロッディングγ開始する傾向を殆ん
ど示さず、この点で未処理のニア″７０ン材料よりもす
ぐれていた。

実施例　５ レンズ全シリコーンコンタクトレンズ、カラスシート及
び酢酸セルロース透析膜〔クズロファン（Ｃｕｐｒｏｐ
ｈαｒＬｇ））により置換えることにより実＠例３の被
覆方法金繰返した。照射後の目による倹ｆはこれらの三
つの基体の各々に対する重合体フィルムの形成ｒ示した
。被覆された基体上の接触角測定は各場合に親水性外側
表面が形成されたことに示した。

実施例　６ 実施例１のジーＣ２，−ジー共役リン脂質ｔ５０℃で水
中に導入し友。これはそのリボゾーム形成温度より高い
温度であり、次いて分散液ｔ、もし眠子懸微鏡が多重ラ
メラリポソームの存在を示す場合には室温に冷却した。

次いでこの分散液？紫外線で照射し次色の変化が見られ
た時は共役ジイン系の架橋による重合金示す。やはり同
定されたスペクトル変化はこの有機物質の増加した共役
路と合致してい友。

この方法ヶ繰返して酵素的に活性な固有タンパク質Ｃａ
Ｘ”ＡＴＰ−アーゼ（＝ｔｒｉｎｓｉｃｐｒｏｔｅｉｎ
　　Ｃａ”ＡＴＰ−ａｓｅ）ｙｚ金含有ｊる水性媒体中
に共役リン脂質ｒ導入した。得られるリボゾームのその
後の検査ハリポソームがいくらかの酵素がリボンーム内
に導入されたこと？示す酵素活性金示した。

実施列１のジ−Ｃ２５共役リン脂質勿使用して上記の方
法を繰返し九が、それを導入した水性体の温度はジー０
２．物質のリポソーム形成温度より高くするために６０
℃に上げ友。この場合もやはり、リポソームにおいて酵
素活性が検出され之ことが見出された。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、（Ａ）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｂ＿１及びＢ＿２の少なくとも一つは式−（ＣＯ
   ）ｐ−Ｘ＿１−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Ｙ＿１式中、ｐは０又
   は１であり、Ｘ＿１は直接の結合又は二価の脂肪族又は
   環状脂肪族基であり、Ｙ＿１はＨ又は一価の脂肪族又は
   環状脂肪族基であり、Ｂ＿１及び／又はＢ＿２の各々に
   おけるＸ＿１及びＹ＿１の炭素原子の総数は８乃至２６
   である、の基であり、Ｂ＿１及びＢ＿２の他方は（ａ）
   式 −（ＣＯ）ｐ−Ｘ＿１−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Ｙ＿１式中、
   Ｘ＿１、Ｙ＿１又はｐは前記した通りである、の同一又
   は相異なる基であるか或は（ｂ）少なくとも８個の炭素
   原子を含有する脂肪族又は環状脂肪族基であり、ｎは０
   又は１であり、ｍは２、３又は４であり、各Ｒは独立に
   １〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わす、の
   共役ジーイン、又は （Ｂ）上記共役ジーインを架橋することにより得られた
   重合体、 で被覆されている基体。 ２、上記重合体（Ｂ）が、 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｚ＿１、Ｚ＿２、Ｚ＿３及びＺ＿４の二つは特許
   請求の範囲第１項記載した通りのＹ＿１を表わし、Ｚ＿
   １、Ｚ＿２、Ｚ＿３及びＺ＿４の他の二つは各々 −Ｘ＿１−（ＣＯ）ｐ−Ｇを表わし、ここでＸ＿１及び
   ｐは特許請求の範囲第１項に記載した通りであり、Ｇは ▲数式、化学式、表等があります▼ を表わし、式中、ｎ、ｍ及びＲは特許請求の範囲第１項
   に記載した通りである、の繰返し単位を有し、架橋した
   鎖は同一又は相異なるＧ残基に結合している重合体であ
   る特許請求の範囲第１項に記載の基体。 ３、基体が人口レンズである特許請求の範囲第１項又は
   第２項に記載の基体。