JPS63165323A - 抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、ＳＣＭ−１２７物質を有効成分とじて含有す
る医薬、殊に抗腫瘍剤に関する。

（問題点を解決するための手段） 本発明医薬の有効成分であるＳＣＭ−１２７物質は、つ
ぎの理化学的性状を有する化学物質である。

（１）融点：１５３〜１５８℃ （ｉｉ）赤外部吸収スペクトル：第１図（ｉｉ０水素核
磁気共鳴スペクトル：第２図ｅＶｌ　炭素−１３核磁気
共鳴スペクトル：第３図（ψ　分子量：　５１３　（Ｆ
ＡＢ　　マススペクトルによる）（ｌ／：　元素分析値
（Ｃ２５Ｈ３９ＮＣ２５Ｈ３’　２　Ｈ２Ｏとして）Ｃ
ＨＮＰ 理論値（＠５２．５３　７．５８　２．４５　５．４２
実測値（ｑａ５２．１３　７．２６　２．５０　５．１
４〜ＩＤ紫外部吸収スペクトル：第４図 ＆１ｉ１１比旋光度：［αコせ＝＋８１（ｃ＝１．０．
メタノール）ＯＸ）溶解性：・メタノール、水に可溶；
ヘキサン、酢酸エチルに難溶 （Ｘ）薄層クロマトグラフィーでのＲｆ値：Ｒｆ値　　
展開溶媒 ０．３８　　　アセトニトリル−水温′ｔｊ、（混合比
５：２）０３１　　ｎ−プロパノ−ルー水混液（〃　３
：１）（但し、シリカゲル６０Ｆ２５４（メルク社製）
薄層クロマトグラフィープレートを使用し。

ＵＶ　２５４　ｎｍで検出した。） ＳＣＭ−１２７物質は２本発明者等がストレプトミセス
属に属する微生物の培養物から分離した化合物で、その
製造法は後述する（参考側参照）。

本発明者等は、ＳＣＭ−１２７物質の薬理活性を検討し
たところ、この化合物が抗腫瘍活性を有し。

且つ毒性が極めて低いことを見出した。

ＳＣＭ−１２７物質は、以下の試験結果から明らかなよ
うに、リンパ性白血病細胞、肥満細胞腫細胞。

胸腺リンパ腫細胞等の腫瘍細胞の増殖阻止作用を示すと
共に、腫瘍細胞の免疫を増強し、しかも毒性がきわめて
低い。したがって、　ＳＣＭ−１２７物質は、安全で強
力な抗腫瘍剤として、あるいは腫瘍の転移抑制剤として
使用できる。

（実施例） つぎに、有効成分について、その薬理作用および毒性を
試験方法と共に示す。

（ｉｉ８ＣＭ−１２７物質の試験管内癌細胞増殖阻止作
用 試験方法： リンパ性白血病細胞（Ｌ　１２１０　）　、肥満細胞腫
細胞（Ｐ　８１５　）　、胸腺リンパ腫細胞（ＥＬ−４
）の各癌細胞を細胞培養液（Ｌ　１２１０の場合は１０
％新生牛血清を含むＲＰＭＩ　１６４０培養液、Ｐ８１
５、　ＥＬ−４の場合は１０％牛脂仔血清を含むＲＰＭ
Ｉ　１６４０培養液）にＩ　Ｘ　１０’細胞　／　ｍｌ
に浮遊させ、細胞浮遊液１　ｍｌを試験用容器に分注し
、それに各種希釈濃度のＳＣＭ−１２７物質を加え炭酸
ガス培養器内で３７℃、３日間培養後、ｉＪバンプルー
染色により、生細胞数を計数した。細胞増殖阻止濃度（
ＩＣ５０値）は薬剤無添加の生細胞数を対象として各濃
度での細胞増殖阻止率から求めた。

表Ｉ　　ＳＣＭ−１２７の細胞障害作用抗腫瘍作用 試験方法： Ｃ５７ＢＬ／６マウス（雌、６週令）に、ＥＬ−４胸腺
リンパ腫細胞をマウス１匹当り、２ＸＩＯ’個皮下移植
した。ついでＳＣＭ−１２７物質０．４ｍｇ／ｋｇを癌
細胞移植後０．１．２．３．６．８日目に計６回又は、
　０．９ｍｇ／ｋｇを０．１．６．８日目に計４回皮下
投与し、移植後１３３日目腫瘍の大きさを測定した。対
照群には、生理食塩水を０．１．２．３．６．８日目に
同様に投与した。

その結果は表２のとおりである。

表２から明らかなように、ＳＣＭ−１２７物質投与群に
は著しい腫瘍増殖阻害作用が認められた。

表２ 試験方法： Ｃ５７ＢＬ／６マウス（雌、６週令）に、ＥＬ−４胸腺
リンパ腫細胞をマウス１匹当り、２Ｘ１０’個皮下移植
シタ。ライ”ｉ（−Ｓ　ＣＭ−１２７物質ｏ９ｍｇＡｇ
。

１．８ｆｆ１ｇ／ｋｇを癌細胞移植後０，１日目に計２
回皮下投与し、移植後１３３日目、それぞれのマウス牌
細胞のナチュラルキラー活性を　５１Ｃｒで標識された
ＹＡＣ−１白血病リンパ腫細胞を用いて、　”Ｃｒ　ｒ
ｅｌｅａｓｅ法により測定した。

表３に担癌マウスにおける免疫抑制状態およびＳＣＭ−
１２７物質によるその免疫反応回復を示す。

表３から明らかなように、　ＳＣＭ−１２７物質投与に
より担癌マウスのナチュラルキラー活性は著しく回復し
た。

表３ 試験方法： プロテオースベブトンで誘導したマウス腹腔マクロファ
ージを試験管内で、各種希釈濃度のＳＣＭ−１２７物質
存在下で培養した。

で標識されたＰ８１５肥満細胞腫を用い　５１（ｒｒｅ
ｌｅａｓｅ法により測定した。

その結果は表４のとおりである。

表４から明らかなように、ＳＣＭ−１２７物質はマクロ
ファージの抗腫瘍活性を誘導する。

表４ 毒性試験 Ｃ５７ＢＬ／６系マウスを用い、　ＳＣＭ−１２７物質
を３ｍｇ／ｋｇ皮下投与したが、死亡例はなかった。

（効果） 上記試験結果より、ＳＣＭ−１２７物質は、すぐれた抗
腫瘍作用を有する一方、毒性が低いので抗腫瘍剤として
有用である。

本発明の抗腫瘍剤の臨床投与量は経口または土用の場合
、活性成分として成人１日当り５０〜２００　ｍｇ　、
好ましくは８０〜１２０　ｒＱｇであり、これを１〜４
回に分けて投与する。この投与量は。

患者の状態や他剤との併用２年令等個々の場合に応じて
適宜調節される。

投与の剤形は、経口の場合２錠剤、カプセル剤、顆粒剤
、シロップ剤が用いられ、非経口の場合、土用、注射剤
が利用できる。経口投与剤の調製に際して用いられる賦
形剤としては乳糖。

デンプン、シヨ糖、タルク、ステアリン酸マグネシウム
、ソルビット、微結晶セルロース、カルボキシメチルセ
ルロース、ヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる
。土用の調製に用いられる基剤としては、ポリエチレン
グリコール。

ラノリン、カカオ脂、ウイテプゾル（商品名。

ダイナミツトノーベル社製）が挙げられる。

以下にカプセル剤の調製例を示す。

カプセル剤の調製例 ＳＣＭ−１２７物質　　　　　　　　　２００■乳　　
　糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２０５
ｍｇ結晶セルロース　　　　　　　　　　５０ｍｇヒド
ロキシプロピルセルロース　　　　　１５［１］ｇデン
プン　　　　　　　　　　　　　　２５ｍｇステアリン
酸マグネシウム　　　　　　　５１０ｇ５００ｒｌ１ｇ 上記の組成に従い主薬、乳糖、結晶セルローラ混合し、
ヒドロキシプロピルセルロース水溶液を加えて練合整粒
し、乾燥後、デンプン、ステアリン酸マグネシウムを加
えて混合し、１号ゼラチンカプセルに充填してカプセル
剤を製する。

つぎに、　ＳＣＭ−１２７物質の製造法を参考例によっ
て説明する。

（参考例） グルコース０．５％、クリセリン１．０％、テキストリ
ン２．０％、大豆粉０．５％、肉エキス０．３％、ポリ
ペプトン０．５％、イーストエキストラクト０２５％、
プレンハートインクユジョンブイヨン培地（栄研）　０
．５２％、炭酸カルシウム０．２％を含む培地（ｐＨ８
，０）　１２０　ｍｌを５００　ｍｌ容三角フラスコに
分注し、１２０℃２０分間滅菌したのち、寒天培地上に
生育させたストレプトミセス・バイグロスコピカスｅサ
ブ＠スビーシズφルテオラス・サブ・スピーシズ・ノブ
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃ
ｕｓｓｂ、　ｓｐ、Ｉｕｔｅｏｌｕｓ　ｓｂ、　ｓｐ、
　ｎｏｖ、）と命名したＳＣＭ−１２７物質産生株（微
工研菌寄第８８２２号）を接種し、毎分２２０回転のロ
ータリーシェーカーで２８°ｃ、４８時間振盪培養する
。次に、この培養液を同様に調製した滅菌培地２０本（
１２０ｍｌ／　５００　ｍｌ容三角フラスコ）に４　ｍ
ｌずつ接種し同様に培養する。本培養用培地として、デ
キストリン１．０％、Ｄ−マンノース１，０％、大豆粉
１．０％、ファーマメディア０．５％、硫酸マグネシウ
ム０，０５％、リン酸水素二カリウム０．０５％、アデ
カノール０．０３％を含む培地（ｐＨ７，０）　８（Ｍ
を１５ｏｚ容培養槽に入れて、上記培養液２０本全量を
接種し１通気量８０１　／分攪拌速度１５０回転／分で
２８６Ｃ，９０時間通気攪拌培養を行う。培養終了後４
Ｎの塩酸を加えてｐＨ７，０に調整したのち、ラジオラ
イト＃６００（昭和化学工業ＫＫ製）を加えて吸引ｒ遇
する。この培養Ｐ液７２１をダイヤイオンＨＰ−２０（
三菱化成工業ＫＫ製）　７．２ｔを充填したカラムに吸
着せしめ。

水２２ｔで洗浄後５０％アセトン水溶液２２ｔ　で溶出
する。

活性画分を減圧下に６ｔまで濃縮したのち。

濃縮液をｐＨ７，０に調整し、酢酸エチル６ｔを加えて
分液する。水層を分離したのち、４Ｎ水酸化ナトリウム
でｐＨ８，０に調整し、ｎ−ブタノール６１を加えてさ
らに分液する。ｎ−ブタノール層を水洗後減圧濃縮する
と８ｇのブタノール抽出物が得られる。

この抽出物をｎ−プロパツール：水＝５＝１混液に溶解
し、ワコーゲルＣ−２００（和光紬薬ＫＫ製）　２４０
ｇを同溶剤系にて充填したカラムにのせ同混液でカラム
クロマトグラフィーな行い活性画分を集めて減圧濃縮す
ると４５０■の活性物質が得られる。

これをアセトニトリル：メタノール：水：イソプロパノ
ール＝１８：８：６：２から成る溶液に溶解し、シリカ
ゲルクロマトグラフィー（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ　６０　
（メルク社製）　４１ｇ　）に供する。同溶液で展開、
溶出する活性画分を集めて減圧濃縮すると１２０　ｍｇ
の活性物質が得られる。さらにこの物質なアセトニトリ
ル：水＝５：１の溶液に溶解し同溶液で展開するシリカ
ゲルクロマトノグラフィー　（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ　６
０　（メルク社製）　１０ｇ　）を行う。活性画分を集
めて減圧濃縮すると４５ｒＯｇの活性物質が得られる。

これをＯＤＳ−４２５１−ＡＭ（１０１Ｘ　２５０　ｍ
ｍ、センシュウ科学■製）を担体とする分取用液体クロ
マトグラフィーに付し。

テトラヒドロフラン：アセトニトリル：メタノール＝０
．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７，０）　＝　１０　：　
２０　：　５　：　６５で溶出分画する。活性画分を集
め、濃縮し、濃縮液を３０％メタノールに溶かし、　Ｈ
Ｐ−２０（５ｍＺ）を充填したカラムに吸着せしめ、水
５０ｍ１で洗浄後。

５０％アセトン水１５ｍｔで溶出し、減圧濃縮して純粋
な白色粉末として活性物質９ｆｆ１ｇを得た。

本物質は高速液体クロマトグラフィーで単一ピークを示
す。本物質の理化学的性状は前述の通りである。なお２
本物質の活性区分の確認にはカンジダアルビカンスＡＴ
ＣＣ１０２３４を用いる生物検定、高速液体クロマトグ
ラフィーを用いて行った。

【図面の簡単な説明】

第１図は、　ＳＣＭ−１２７物質の光外部吸収スペクト
ルを示す。 第２図は、ＳＣＭ−１２７物質の水素核磁気共鳴スペク
トルを示す。 第３図は、ＳＣＭ−１２７物質の炭素−１３核磁気共鳴
スペクトルを示す。 第４図は、　ＳＣＭ−１２７物質の紫外部吸収スペクト
ルを示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、つぎの理化学的性状を有するＳＣＭ−１２７物質を
   有効成分として含有する抗腫瘍剤 （ｉ）融点：１５３〜１５８℃ （ｉｉ）元素分析値（Ｃ＿２＿５Ｈ＿３＿９ＮＯ＿８Ｐ
   Ｎａ・２Ｈ＿２Ｏとして）　　　　　　　　　　　Ｃ　
   　　　Ｈ　　　　Ｎ　　　　Ｐ 理論値（％）５２．５３　７．５８　２．４５　５．４
   ２ 実測値（％）５２．１３　７．２６　２．５０　５．１
   ４ （ｉｉｉ）赤外部吸収スペクトル：第１図 （ｉｖ）水素核磁気共鳴スペクトル：第２図 （ｖ）炭素−１３核磁気共鳴スペクトル：第３図 （ｖｉ）分子量：５１３