JPH1017527A

JPH1017527A - 抗菌性物質ｂｅ−３９５８９類及びその製造法

Info

Publication number: JPH1017527A
Application number: JP19390396A
Authority: JP
Inventors: Masahisa Tsukamoto; 匡央塚本; Shigeru Nakajima; 中島　　茂; Mioko Hirayama; 美央子平山; Katsuhisa Ojiri; 勝久小尻; Hiroyuki Suda; 寛之須田
Original assignee: Banyu Phamaceutical Co Ltd
Current assignee: MSD KK
Priority date: 1996-07-04
Filing date: 1996-07-04
Publication date: 1998-01-20

Abstract

(57)【要約】【構成】本発明は新規な一般式［Ｉ］【化１】［式中、Ｘ₁及びＹ₁は一緒になって、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ
₂−で表される基を示すか、又はＸ₁は−ＣＯＯＲ₁（こ
こにおいて、Ｒ₁は水素原子又は低級アルキル基を示
す）で表される基を、Ｙ₁は−ＣＯＯＲ₂（ここにおい
て、Ｒ₂は水素原子又は低級アルキル基を示す）又は−
ＣＨ₂ＯＨで表される基を示す］で表される化合物、そ
の製造法及びその用途並びに該化合物を産生する能力を
有することを特徴とする微生物に関する。【効果】本発明化合物はＭＲＳＡを含む各種の病原性微
生物に対して顕著な抗菌活性を示す。したがって、これ
らの病原性微生物を起炎菌とする疾病に対する抗菌剤と
して有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は医薬の分野で有用で
あり、より具体的には微生物の増殖を阻害して抗菌作用
を発揮する新規化合物群、その製造法及びその用途並び
に該化合物を産生する微生物に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏ
ｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）は化膿性疾患の起炎菌として
知られているが、特に重症患者をかかえる大病院ではメ
チシリン耐性黄色ブドウ球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ
ｒｅｓｉｓｔａｎｔＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ
ａｕｒｅｕｓ：ＭＲＳＡ）などの多剤耐性菌の院内感
染が多く、臨床上非常に問題となっている［小栗ら、臨
床と微生物、１５巻、７〜１５頁（１９８８年）参
照］。

【０００３】このような状況下、ＭＲＳＡに対して有効
な薬剤の開発が求められている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、既存
の抗菌剤が充分に効果を発揮できない多剤耐性のＭＲＳ
Ａに対しても優れた抗菌活性を有する新規な化合物を提
供することである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、抗菌活性
を有する物質について微生物二次代謝産物を広くスクリ
ーニングした結果、後記一般式［Ｉ］で表される化合物
が優れた抗菌作用を示すことを見いだし、本発明を完成
した。

【０００６】即ち、本発明は新規な一般式［Ｉ］

【０００７】

【化６】［式中、Ｘ₁及びＹ₁は一緒になって、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ
₂−で表される基を示すか、又はＸ₁は−ＣＯＯＲ₁（こ
こにおいて、Ｒ₁は水素原子又は低級アルキル基を示
す）で表される基を、Ｙ₁は−ＣＯＯＲ₂（ここにおい
て、Ｒ₂は水素原子又は低級アルキル基を示す）又は−
ＣＨ₂ＯＨで表される基を示す］で表される化合物又は
その薬学的に許容されうる塩、その製造法及びその用途
並びに該化合物を産生する能力を有することを特徴とす
るミクロテトラスポラ（Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａｓｐｏｒ
ａ）属に属する微生物に関するものである。

【０００８】本発明の新規化合物をＢＥ−３９５８９類
と称す。

【０００９】次に本明細書において使用する用語につい
て説明する。

【００１０】「低級」なる語は、この語の付された基又
は化合物の炭素数が６個以下、好ましくは４個以下であ
ることを意味する。「低級アルキル基」は炭素数が１〜
６個の直鎖状又は分岐状のアルキル基であり、例えばメ
チル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチ
ル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブ
チル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル
基、ヘキシル基等が挙げられる。

【００１１】以下に本発明の新規な抗菌性物質ＢＥ−３
９５８９類の物理化学的な性状を示す。

【００１２】ここで、一般式［Ｉ］のＸ₁が−ＣＯＯＨ
で表される基であり、かつＹ₁が−ＣＨ₂ＯＨで表される
基である化合物をＢＥ−３９５８９Ｂ−１、Ｘ₁及びＹ₁
が一緒になって−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ₂−で表される基であ
る化合物をＢＥ−３９５８９Ｂ−２、Ｘ₁が−ＣＯＯＨ
で表される基であり、かつＹ₁が−ＣＯＯＨで表される
基である化合物をＢＥ−３９５８９Ｃ−１、Ｘ₁が−Ｃ
ＯＯＨで表される基であり、かつＹ₁が−ＣＯＯＣＨ₃で
表される基である化合物をＢＥ−３９５８９Ｃ−２と称
する。

【００１３】下記にＮＭＲ測定における略号の意味を示
す。ｓ：シングレットｄ：ダブレットｔ：トリプレットｑ：カルテットｍ：マルチプレットｂｒ：ブロードＪ：カップリング定数Ｈｚ：ヘルツＢＥ−３９５８９Ｂ−１の物理化学的性状性状：赤色アモルファス状固体又は結晶分子式：Ｃ₂₆Ｈ ₂₀Ｏ₁₀ 質量分析：［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｎａ）⁺と
して：計算値５１５．０９５４；実測値５１５．０９８
１紫外部吸収スペクトル：λ_max（ＭｅＯＨ，ｎｍ
（ε））２４１（２５，９００），２８７（１９，５０
０），３１９（１２，１００），４７６（１０，４０
０）赤外部吸収スペクトル：（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）３４４４，
１６１６，１４３１，１３５６，１２６７，１０９０，
６１１¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ，δ
ｐｐｍ）７．１８（１Ｈ，ｓ），６．７４（１Ｈ，
ｓ），４．７６（２Ｈ，ｓ），３．８４（３Ｈ，ｓ），
２．７９（２Ｈ，ｂｒｓ），２．６２（２Ｈ，ｂｒ
ｓ），２．１０（３Ｈ，ｓ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ，
δｐｐｍ）１８８．８（ｓ），１８７．５（ｓ），１７
６．１（ｓ），１６３．９（ｓ），１６３．２（ｓ），
１６１．８（ｓ），１５８．７（ｓ），１５１．８
（ｓ），１４６．９（ｓ），１４５．２（ｓ）×２，１
３２．７（ｓ），１３２．６（ｓ），１２２．８
（ｓ），１１９．９（ｓ），１１９．５（ｓ），１１
８．６（ｄ），１１７．４（ｓ），１１４．９（ｓ），
１１１．２（ｓ），１０６．９（ｄ），６６．１
（ｔ），６１．５（ｑ），３０．０（ｔ），２３．８
（ｔ），８．０（ｑ）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け易く、水に溶けにくい。

【００１４】薄層クロマトグラフィー：［メルク社製キ
ーゼルゲル６０Ｆ₂₅₄］Ｒｆ値０．３２［展開溶媒：ク
ロロホルム−メタノール−水（１５：６：１）］呈色反応：硫酸反応陽性ＢＥ−３９５８９Ｂ−２の物理化学的性状性状：赤色アモルファス状固体又は結晶分子式：Ｃ₂₆Ｈ ₁₈Ｏ₉ 質量分析：［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：計算値４７５．１０２９；実測値４７５．１０４５紫外部吸収スペクトル：λ_max（ＭｅＯＨ，ｎｍ
（ε））２３９（１５，５００），２８１（１０，２０
０），３２７（４，７００），４８５（４，６００）赤外部吸収スペクトル：（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）３３７５，
１７３６，１６２２，１４２５，１３５８，１２６９，
１２１７，１１０７，１０８６，１０３６，６０９¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−
ｄ₆，δｐｐｍ）１４．３（１Ｈ，ｂｒｓ），１３．６
（１Ｈ，ｓ），１１．２（１Ｈ，ｂｒｓ），９．９０
（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２９（１Ｈ，ｓ），７．０６
（１Ｈ，ｓ），５．３０（２Ｈ，ｓ），３．７９（３
Ｈ，ｓ），２．７７（４Ｈ，ｂｒｓ），２．０９（３
Ｈ，ｓ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
₆，δｐｐｍ）１８７．３（ｓ），１８５．８（ｓ），
１６９．１（ｓ），１６２．４（ｓ），１６２．１
（ｓ），１５６．９（ｓ），１５４．７（ｓ），１５
０．４（ｓ），１４９．８（ｓ），１４９．３（ｓ），
１４６．１（ｓ），１３１．０（ｓ），１２９．９
（ｓ），１２２．１（ｓ），１１８．７（ｓ），１１
８．２（ｓ），１１４．２（ｓ），１１１．９（ｄ），
１１１．３（ｓ），１０９．７（ｓ），１０６．３
（ｄ），６８．４（ｔ），６１．１（ｑ），２９．９
（ｔ），２２．３（ｔ），８．２（ｑ）溶解性：ジメチルスルホキシド等の有機溶媒に溶け易
く、水に溶けにくい。

【００１５】薄層クロマトグラフィー：［メルク社製キ
ーゼルゲル６０Ｆ₂₅₄］Ｒｆ値０．６６［展開溶媒：ク
ロロホルム−メタノール−水（１５：６：１）］呈色反応：硫酸反応陽性ＢＥ−３９５８９Ｃ−１の物理化学的性状性状：赤色アモルファス状固体又は結晶分子式：Ｃ₂₆Ｈ ₁₈Ｏ₁₁ 質量分析：［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：計算値５０７．０９２７；実測値５０７．０９０９紫外部吸収スペクトル：λ_max（ＭｅＯＨ，ｎｍ
（ε））２３９（２９，１００），２８８（２３，９０
０），３１８（１３，７００），４７３（１２，５０
０）赤外部吸収スペクトル：（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）３１２０，
１７１３，１６１８，１４２５，１３５４，１２７１，
１０９０，６１１¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ−Ｄ
ＭＳＯ−ｄ₆，δｐｐｍ）７．３９（１Ｈ，ｓ），７．
２１（１Ｈ，ｓ），３．８６（３Ｈ，ｓ），２．９１
（２Ｈ，ｂｒｓ），２．８０（２Ｈ，ｂｒｓ），２．０
９（３Ｈ，ｓ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ−
ＤＭＳＯ−ｄ₆，δｐｐｍ）１８９．５（ｓ），１８
７．０（ｓ），１７１．６（ｓ），１６９．４（ｓ），
１６４．０（ｓ），１６３．４（ｓ），１５７．０
（ｓ），１５５．５（ｓ），１５２．４（ｓ），１４
８．７（ｓ），１４５．２（ｓ），１３３．４（ｓ），
１３２．１（ｓ），１３０．３（ｓ），１２４．４
（ｓ），１２３．８（ｓ），１２１．７（ｓ），１２
０．５（ｄ），１２０．４（ｓ），１１５．７（ｓ），
１１１．２（ｓ），１０７．７（ｄ），６２．０
（ｑ），３０．１（ｔ），２３．９（ｔ），８．７
（ｑ）溶解性：メタノール、アセトン、ジメチルスルホキシド
等の有機溶媒に溶け易く、水に溶けにくい。

【００１６】薄層クロマトグラフィー：［メルク社製キ
ーゼルゲル６０Ｆ₂₅₄］Ｒｆ値０．１５［展開溶媒：ク
ロロホルム−メタノール−水（１５：６：１）］呈色反応：硫酸反応陽性ＢＥ−３９５８９Ｃ−２の物理化学的性状性状：赤色アモルファス状固体又は結晶分子式：Ｃ₂₇Ｈ ₂₀Ｏ₁₁ 質量分析：［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：計算値５２１．１０８４；実測値５２１．１０８１紫外部吸収スペクトル：λ_max（ＭｅＯＨ，ｎｍ
（ε））２３８（２４，３００），２８８（１９，９０
０），３１３（１２，１００），４７４（１０，６０
０）赤外部吸収スペクトル：（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）３４４４，
１７１４，１６５７，１６２６，１４３３，１３６０，
１２７３，１０９０，６１１¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，Ａｃｅｔｏｎ
ｅ−ｄ₆，δｐｐｍ）１３．７（１Ｈ，ｓ），７．３７
（１Ｈ，ｓ），６．９０（１Ｈ，ｓ），６．７９（１
Ｈ，ｂｒｓ），６．１０（１Ｈ，ｂｒｓ），３．８８
（３Ｈ，ｓ），３．８４（３Ｈ，ｓ），２．９０（２
Ｈ，ｂｒｓ），２．７６（２Ｈ，ｂｒｓ），２．１５
（３Ｈ，ｓ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，Ａｃｅｔｏｎ
ｅ−ｄ₆，δｐｐｍ）１８７．８（ｓ），１８６．３
（ｓ），１７０．６（ｓ），１６９．４（ｓ），１６
２．８（ｓ），１６１．９（ｓ），１５８．７（ｓ），
１５７．０（ｓ），１５１．２（ｓ），１４６．６
（ｓ），１４４．９（ｓ），１３５．７（ｓ），１３
１．７（ｓ），１３０．６（ｓ），１２２．８（ｓ），
１２１．５（ｓ），１１８．６（ｓ），１１６．１
（ｄ），１１６．１（ｓ），１１４．７（ｓ），１１
０．５（ｓ），１０６．３（ｄ），６０．８（ｑ），５
１．７（ｑ），２９．１（ｔ），２２．７（ｔ），７．
５（ｑ）溶解性：メタノール、アセトン、ジメチルスルホキシド
等の有機溶媒に溶け易く、水に溶けにくい。

【００１７】薄層クロマトグラフィー：［メルク社製キ
ーゼルゲル６０Ｆ₂₅₄］Ｒｆ値０．２８［展開溶媒：ク
ロロホルム−メタノール−水（１５：６：１）］呈色反応：硫酸反応陽性ＢＥ−３９５８９類の抗菌活性ＢＥ−３９５８９類の抗菌活性を各種の病原性微生物に
対して測定し、その最少発育阻止濃度を求めた。

【００１８】ＢＥ−３９５８９類についての結果を第１
表に示す。

【００１９】

【表１】第１表に示したごとく、ＢＥ−３９５８９類はＭＲＳＡ
を含む各種の病原性微生物に対して顕著な抗菌活性を示
す。したがって、これらの病原性微生物を起炎菌とする
疾病に対する抗菌剤として有用である。

【００２０】ＢＥ−３９５８９類の製造法について説明
する。

【００２１】本発明の抗菌性物質ＢＥ−３９５８９類の
製造に使用する微生物は、抗菌性物質ＢＥ−３９５８９
類を生産するものならばいずれでも良いが、例えば島根
県美保関の草地から採取された以下の菌学的性状を有す
る微生物、即ち、Ａ３９５８９株を用いることができ
る。１．形態Ａ３９５８９株はよく伸長し分岐する基生菌糸と気菌
糸を形成し輪生岐及び菌糸の分断は認められない。気菌
糸上には胞子の長い連鎖（５０個以上）を作り、その形
態は、直線状である。胞子の表面は平滑で大きさが１．
０〜１．３×０．５〜０．８μｍ位の円筒状であり、疑
似胞子のう、胞子のう、鞭毛胞子及び菌核等の特殊な器
官は観察されない。

【００２２】

【表２】

【００２３】

【表３】

【００２４】

【表４】

【００２５】

【表５】

【００２６】

【表６】

【００２７】

【表７】

【００２８】

【表８】５．５０℃、８時間における生存能＋６．細胞壁組成細胞壁からは、ｍｅｓｏ−ジアミノピメリン酸が検出さ
れたが、グリシン、ガラクトース及びアラビノースは認
められず、細胞壁型はＩＩＩ型であることが示唆され
た。全菌体主要糖成分は、グルコース、マジュロース及
びリボースが検出されたが、アラビノース及びキシロー
スは認められず、糖パターンはＢ型であった。またミコ
ール酸は検出されず、主要メナキノンはＭＫ−９（Ｈ
２）、ＭＫ−９（Ｈ４）であった。リン脂質は、ホスフ
ァチジルコリン、ホスファチジルグリセロールは検出さ
れず、ジホスファチジルグリセロール、ホスファチジル
エタノールアミン、ホスファチジルメチルエタノールア
ミン及び未知のグルコサミン含有リン脂質が認められリ
ン脂質タイプはＰＩＶ型であった。

【００２９】以上の菌学的諸性質よりＡ３９５８９株
は放線菌ミクロテトラスポラ属に属すると考えられる。

【００３０】したがって、Ａ３９５８９株をミクロテ
トラスポラエスピーＡ３９５８９（Ｍｉｃｒｏｔ
ｅｔｒａｓｐｏｒａｓｐ．Ａ３９５８９）と称す
ることとした。

【００３１】なお、本菌株は通商産業省工業技術院生命
工学工業技術研究所に寄託されており、その受託番号は
ＦＥＲＭＰ−１５３９６である。

【００３２】本発明のミクロテトラスポラエスピー
Ａ３９５８９（Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａｓｐｏｒａｓ
ｐ．Ａ３９５８９）の変異株は、例えばＸ線若しく
は紫外線などの照射処理、例えばナイトロジェンマスタ
ード、アザセリン、亜硝酸、２−アミノプリン若しくは
Ｎ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン
（ＮＴＧ）等の変異誘起剤による処理、ファージ接触、
形質転換、形質導入又は接合などの通常用いられる菌種
変換処理方法によりミクロテトラスポラエスピーＡ
３９５８９（Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａｓｐｏｒａｓ
ｐ．Ａ３９５８９）を変異させることにより得るこ
とができる。

【００３３】

【発明の実施の形態】本発明のＢＥ−３９５８９類を製
造するにあたり、ＢＥ−３９５８９類の生産菌株を栄養
源含有培地に接種して好気的に発育させることにより、
ＢＥ−３９５８９類を含む培養物が得られる。栄養源と
しては、放線菌の栄養源として公知のものが使用でき
る。例えば、炭素源としては、市販されているブドウ
糖、麦芽糖、デンプン、庶糖、糖蜜又はデキストリンな
どが単独又は混合物として用いられる。窒素源として
は、市販されている大豆粉、コーンスティープリカー、
肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、綿実粉、ペプトン、
小麦胚芽、魚粉、ミートミール、脱脂米ヌカ、脱脂肉骨
粉、無機アンモニウム塩又は硝酸ナトリウムなどが単独
又は混合物として用いられる。無機塩としては、市販さ
れている炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウ
ム、硫酸マグネシウム、臭化ナトリウム、ホウ酸ナトリ
ウム又は各種リン酸塩などを使用することができる。そ
の他必要に応じて、鉄、マンガン、亜鉛、コバルト、モ
リブデン酸などの重金属塩を微量添加することもでき
る。また、発泡の激しい場合には消泡剤として、例えば
大豆油又は亜麻仁油などの植物油、オクタデカノールな
どの高級アルコール類、各種シリコン化合物などを適宜
添加してもよい。これらのもの以外でも、該生産菌が利
用し、ＢＥ−３９５８９類の生産に役立つもの、例えば
３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸又はホウ酸
ナトリウムなどであれば、いずれも使用することができ
る。

【００３４】培養方法としては、一般の微生物代謝産物
の生産方法と同様に行なえばよく、固体培養でも液体培
養でもよい。液体培養の場合は、静置培養、攪拌培養、
振とう培養又は通気培養などのいずれを実施してもよい
が、特に振盪培養又は深部通気攪拌培養が望ましい。培
養温度は２１〜３６℃が適当であるが、好ましくは２７
〜３６℃である。好ましい培地のｐＨは４〜８の範囲
で、培養時間は１２０時間〜２８８時間、好ましくは１
６８時間〜２４０時間である。培養物から目的とするＢ
Ｅ−３９５８９類を採取するには、微生物の生産する代
謝物から採取するのに通常使用される分離手段が適宜利
用される。

【００３５】ＢＥ−３９５８９類は培養濾液中及び菌体
中に存在するので、培養濾液又は菌体より通常の分離手
段、例えば溶媒抽出法、イオン交換樹脂法又は吸着若し
くは分配クロマトグラフィー法及びゲル濾過法などを単
独又は組み合わせて行なうことにより精製できる。

【００３６】好ましい分離精製の例として次の方法が挙
げられる。まず培養液を濾過し、菌体を得る。得られた
菌体をメタノール又はアセトンなどの有機溶媒を用いて
抽出する。得られた粗抽出物について、水／酢酸エチル
分配を行ない、酢酸エチルを留去後得られる抽出物につ
いてセファデックスＬＨ−２０クロマトグラフィー（酢
酸エチル／アセトニトリル／水で溶出）などを行なうこ
とにより、ＢＥ−３９５８９類を得ることができる。

【００３７】本発明のＢＥ−３９５８９類のうち、一般
式［ＩＩ］で表される化合物は、化学の分野で良く知ら
れた低級アルキル化の方法によって、一般式［Ｉ］のＲ
₁及び／又はＲ₂が低級アルキル基である化合物に容易に
変換することができる。例えば一般式［ＩＩ］で表され
る化合物に、塩基の存在下、低級アルキルハライドを反
応させることにより、一般式［Ｉ］のＲ₁及び／又はＲ₂
が低級アルキル基である化合物に導くことができる。

【００３８】また本発明化合物は薬学的に許容されうる
塩の形で存在することができ、そのような塩としてはカ
ルボキシル基における塩基付加塩を挙げることができ、
例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、
例えばトリメチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシ
クロヘキシルアミン塩、エタノールアミン塩、ジエタノ
ールアミン塩、トリエタノールアミン塩、プロカイン塩
等の脂肪族アミン塩、例えばＮ、Ｎージベンジルエチレ
ンジアミン等のアラルキルアミン塩、例えばピリジン
塩、ピコリン塩、キノリン塩、イソキノリン塩等の複素
環芳香族アミン塩、例えばテトラメチルアンモニウム
塩、テトラエチルアンモニウム塩、ベンジルトリメチル
アンモニウム塩、ベンジルトリエチルアンモニウム塩、
ベンジルトリブチルアンモニウム塩、メチルトリオクチ
ルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニウム塩等の第
４級アンモニウム塩、アルギニン塩、リジン塩等の塩基
性アミノ酸塩等が挙げられる。

【００３９】これらの塩と遊離カルボン酸は化学の分野
で良く知られた方法により、互いに容易に変換すること
ができる。

【００４０】本発明の化合物ＢＥ−３９５８９類は病原
性微生物の増殖を阻害し、抗菌効果を発揮するが、本発
明化合物を抗菌剤として使用する際の投与形態としては
各種の形態を選択でき、例えば錠剤、カプセル剤、散
剤、顆粒剤若しくは液剤などの経口剤、又は例えば溶液
若しくは懸濁液などの殺菌した液状の非経口剤が挙げら
れる。

【００４１】固体の製剤は、そのまま錠剤、カプセル
剤、顆粒剤又は粉末の形態として製造することもできる
が、適当な添加物を使用して製造することもできる。そ
のような添加物としては、例えば乳糖若しくはブドウ糖
などの糖類、例えばトウモロコシ、小麦若しくは米など
のデンプン類、例えばステアリン酸などの脂肪酸、例え
ばメタケイ酸アルミン酸マグネシウム若しくは無水リン
酸カルシウムなどの無機塩、例えばポリビニルピロリド
ン若しくはポリアルキレングリコールなどの合成高分
子、例えばステアリン酸カルシウム若しくはステアリン
酸マグネシウムなどの脂肪酸塩、例えばステアリルアル
コール若しくはベンジルアルコールなどのアルコール
類、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロ
ース、エチルセルロース若しくはヒドロキシプロピルメ
チルセルロースなどの合成セルロース誘導体、その他、
水、ゼラチン、タルク、植物油、アラビアゴムなど通常
用いられる添加物が挙げられる。

【００４２】これらの錠剤、カプセル剤、顆粒剤及び粉
末などの固形製剤は一般的には０．１〜１００重量％、
好ましくは５〜１００重量％の有効成分を含む。

【００４３】液状製剤は、水、アルコール類又は例えば
大豆油、ピーナッツ油若しくはゴマ油などの植物由来の
油など液状製剤において通常用いられる適当な添加剤を
使用し、懸濁液、シロップ剤若しくは注射剤などの形態
として製造される。

【００４４】特に、非経口的に筋肉内注射、静脈注射又
は皮下注射で投与する場合の適当な溶剤としては、例え
ば注射用蒸留水、塩酸リドカイン水溶液（筋肉注射
用）、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エタノール、静脈
内注射用液体（例えばクエン酸及びクエン酸ナトリウム
などの水溶液）若しくは電解質溶液（点滴静注及び静脈
内注射用）など、又はこれらの混合溶液が挙げられる。

【００４５】これらの注射剤はあらかじめ溶解したもの
のほか、粉末のままあるいは適当な添加剤を加えたもの
を用時溶解する形態もとり得る。これらの注射液は通
常、０．１〜１０重量％、好ましくは１〜５重量％の有
効成分を含む。

【００４６】また、経口投与の懸濁剤又はシロップ剤な
どの液剤は、０．５〜１０重量％の有効成分を含む。

【００４７】本発明の化合物の好ましい投与量は、使用
される化合物の種類、配合された組成物の種類、適用頻
度及び患者の病状によって変化することに注意すべきで
ある。例えば、１日あたりの成人の投与量は、経口投与
の場合、１０〜５００ｍｇであり、非経口投与、好まし
くは静脈注射の場合、１日あたり、１０〜１００ｍｇで
ある。なお、投与回数は投与方法及び症状によって異な
るが、１回ないし５回である。

【００４８】

【実施例】以下に、実施例を挙げて本発明を具体的に説
明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるもの
ではない。実施例１ＢＥ−３９５８９類の製造法：斜面軟寒天培地に接種し
た放線菌Ａ３９５８９株をグルコース０．２％、デキ
ストリン２％、ミートミール０．５％、脱脂米ヌカ０．
５％、脱脂肉骨粉０．１％、乾燥酵母０．０５％、硫酸
マグネシウム０．０２５％、臭化ナトリウム０．０２５
％、塩化ナトリウム０．２５％、リン酸水素二カリウム
０．０５％、硫酸第一鉄０．０００２％、塩化第二銅
０．００００４％、塩化マンガン０．００００４％、塩
化コバルト０．００００４％、硫酸亜鉛０．００００８
％、ホウ酸ナトリウム０．００００８％、及びモリブデ
ン酸ナトリウム０．０００２４％からなる培地（ｐＨ
７．２）１１０ｍｌを含む５００ｍｌ容の三角フラスコ
３本に接種し、２８℃で７２時間、回転振盪機（毎分１
８０回転）上で培養した。この培養液を２ｍｌずつ上記
の培地を１１０ｍｌ含む５００ｍｌ容の三角フラスコ１
００本に接種し、２８℃で２４０時間回転振盪機（毎分
１８０回転）上で培養した。

【００４９】このようにして得られた培養液（約１０
Ｌ）から濾過により菌体を分離後、菌体にアセトン／
０．０１ＮＨＣｌ（１：１、５Ｌ×２）を加えて抽出
し、抽出液を減圧下に濃縮して酢酸エチル（１．５Ｌ×
２）を加えた。得られた酢酸エチル抽出液を減圧下に濃
縮し、残留物を酢酸エチル／アセトニトリル／水（１
０：５：１）５ｍｌに溶かし、セファデックスＬＨ−２
０（ファルマシア社製）のクロマト用カラム（３．０×
７６ｃｍ）を用いて酢酸エチル／アセトニトリル／水
（１０：５：１）で溶出した。得られたＢＥ−３９５８
９Ｂ−１、Ｂ−２、Ｃ−１を含むそれぞれの分画を減圧
下に濃縮乾固することにより、ＢＥ−３９５８９Ｂ−
１、Ｂ−２、Ｃ−１をそれぞれ１５６．９ｍｇ、１２．
３ｍｇ、１０．７ｍｇ得た。実施例２ＢＥ−３９５８９Ｃ−２の製造法：ＢＥ−３９５８９Ｃ
−１２５．３ｍｇを塩酸−メタノール５ｍｌ中で７０
℃、８時間反応させた後、反応物をセファデックスＬＨ
−２０（ファルマシア社製）のクロマト用カラム（１．
５×９０ｃｍ）を用いてメタノールで溶出した。得られ
たＢＥ−３９５８９Ｃ−２を含む画分を更にセファデッ
クスＬＨ−２０（ファルマシア社製）のクロマト用カラ
ム（２．５×３０ｃｍ）を用いて酢酸エチル／アセトニ
トリル／水（１０：５：１）で溶出し、ＢＥ−３９５８
９Ｃ−２を９．２ｍｇ得た。

【００５０】以下に本発明の化合物の製剤例を示すが、
本発明の化合物の製剤は本製剤例に限定されるものでは
ない。製剤例１本物質（ＢＥ−３９５８９Ｂ−１）１０部、重質酸化
マグネシウム１５部及び乳糖７５部を均一に混合して、
３５０μｍ以下の粉末状又は細粒状の散剤とする。この
散剤をカプセル容器に入れカプセル剤とした。製剤例２本物質（ＢＥ−３９５８９Ｂ−１）４５部、澱粉１５
部、乳糖１６部、結晶性セルロース２１部、ポリビニル
アルコール３部及び蒸留水３０部を均一に混合した後、
破砕造粒して乾燥し、次いで篩別して直径１４１０〜１
７７μｍの大きさの顆粒剤とした。製剤例３製剤例２と同様の方法で顆粒剤を作製した後、この顆粒
剤９６部に対してステアリン酸カルシウム３部を加えて
圧縮成形し直径１０ｍｍの錠剤を作製した。製剤例４製剤例２の方法で得られた顆粒剤９０部に対して結晶性
セルロース１０部及びステアリン酸カルシウム３部を加
えて圧縮成形し、直径８ｍｍの錠剤とした後、これにシ
ロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液を加
えて糖衣錠を作製した。製剤例５本物質（ＢＥ−３９５８９Ｂ−１）０．６部、非イオ
ン系界面活性剤２．４部及び生理的食塩水９７部を加温
混合してからアンプルに入れ、滅菌を行なって注射剤を
作製した。

【００５１】

【発明の効果】本発明に記載するＢＥ−３９５８９類は
ＭＲＳＡを含む各種の病原性微生物に対して顕著な抗菌
活性を示す。したがって、これらの病原性微生物を起炎
菌とする疾病に対しての抗菌剤として有用である。

【００５２】特許出願人萬有製薬株式会社

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｎ 1/20 ＡＣ１２Ｐ 29/00 Ｃ１２Ｐ 29/00 //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 29/00 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者小尻勝久茨城県つくば市大久保３番地萬有製薬株式会社つくば研究所内 (72)発明者須田寛之茨城県つくば市大久保３番地萬有製薬株式会社つくば研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式［Ｉ］【化１】［式中、Ｘ₁及びＹ₁は一緒になって、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ
₂−で表される基を示すか、又はＸ₁は−ＣＯＯＲ₁（こ
こにおいて、Ｒ₁は水素原子又は低級アルキル基を示
す）で表される基を、Ｙ₁は−ＣＯＯＲ₂（ここにおい
て、Ｒ₂は水素原子又は低級アルキル基を示す）又は−
ＣＨ₂ＯＨで表される基を示す］で表される化合物又は
その薬学的に許容されうる塩。
【請求項２】ミクロテトラスポラ（Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒ
ａｓｐｏｒａ）属に属し、一般式［ＩＩ］【化２】［式中、Ｘ₂及びＹ₂は一緒になって、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ
₂−で表される基を示すか、又はＸ₂は−ＣＯＯＨで表さ
れる基を、Ｙ₂は−ＣＯＯＨ又は−ＣＨ₂ＯＨで表される
基を示す］で表される化合物を産生する能力を有する微
生物を培養し、その培養液及び菌体から一般式［ＩＩ］
で表される化合物を採取することを特徴とする一般式
［ＩＩ］で表される化合物又はその薬学的に許容されう
る塩の製造法。
【請求項３】一般式［ＩＩ］【化３】［式中、Ｘ₂及びＹ₂は一緒になって、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ
₂−で表される基を示すか、又はＸ₂は−ＣＯＯＨで表さ
れる基を、Ｙ₂は−ＣＯＯＨ又は−ＣＨ₂ＯＨで表される
基を示す］で表される化合物を産生する能力を有する微
生物が、ミクロテトラスポラエスピーＡ３９５８
９（Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａｓｐｏｒａｓｐ．Ａ３９
５８９）又はその変異株である請求項２記載の製造法。
【請求項４】一般式［Ｉ］【化４】［式中、Ｘ₁及びＹ₁は一緒になって、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ
₂−で表される基を示すか、又はＸ₁は−ＣＯＯＲ₁（こ
こにおいて、Ｒ₁は水素原子又は低級アルキル基を示
す）で表される基を、Ｙ₁は−ＣＯＯＲ₂（ここにおい
て、Ｒ₂は水素原子又は低級アルキル基を示す）又は−
ＣＨ₂ＯＨで表される基を示す］で表される化合物又は
その薬学的に許容されうる塩を有効成分とする抗菌剤。
【請求項５】一般式［ＩＩ］【化５】［式中、Ｘ₂及びＹ₂は一緒になって、−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ
₂−で表される基を示すか、又はＸ₂は−ＣＯＯＨで表さ
れる基を、Ｙ₂は−ＣＯＯＨ又は−ＣＨ₂ＯＨで表される
基を示す］で表される化合物を産生する能力を有するこ
とを特徴とするミクロテトラスポラ（Ｍｉｃｒｏｔｅｔ
ｒａｓｐｏｒａ）属に属する微生物。
【請求項６】ミクロテトラスポラ（Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒ
ａｓｐｏｒａ）属に属する微生物が、ミクロテトラスポ
ラエスピーＡ３９５８９（Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａ
ｓｐｏｒａｓｐ．Ａ３９５８９）又はその変異株
である請求項５記載の微生物。