JPH1059975A

JPH1059975A - 抗腫瘍性物質ｂｅ−５４２３８類及びその製造法

Info

Publication number: JPH1059975A
Application number: JP23840696A
Authority: JP
Inventors: Masahisa Tsukamoto; 匡央塚本; Shigeru Nakajima; 中島　　茂; Masao Nagashima; 正生長嶋; Katsuhisa Ojiri; 勝久小尻; Hiroyuki Suda; 寛之須田
Original assignee: Banyu Phamaceutical Co Ltd
Current assignee: MSD KK
Priority date: 1996-08-21
Filing date: 1996-08-21
Publication date: 1998-03-03

Abstract

(57)【要約】【構成】本発明は新規な一般式［Ｉ］【化１】［式中、Ｒ₁は水素原子を、Ｒ₂は−ＣＨ₂ＣＯＯＸ（こ
こにおいて、Ｘは水素原子又は低級アルキル基を示す）
で表される基を示すか、又はＲ₁及びＲ₂は一緒になって
−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ₂−で表される基を示す］で表される
化合物に関する。【効果】本発明の化合物は、マウス及びヒトの腫瘍細胞
に対して増殖抑制効果を示すことから、医薬の分野で癌
の治療剤として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は医薬の分野で有用で
あり、より具体的には腫瘍細胞の増殖を阻害して抗腫瘍
作用を示す新規化合物、その製造法及びその用途並びに
該化合物を産生する微生物に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】癌化学療法の分野においては、既に多く
の化合物が医薬品として実用化されている。しかしなが
らさまざまな種類の腫瘍に対してその効果は必ずしも充
分ではなく、また臨床上これらの薬剤に対する腫瘍細胞
の耐性現象が明らかにされるにつれ、その臨床的応用性
は複雑化している［第４７回日本癌学会総会記事、１２
頁〜１５頁（１９８８年）等参照］。

【０００３】このような状況下、癌治療の分野において
は常に新規抗腫瘍性物質の開発が求められている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明は上記の希求に
応えることのできる新規な抗腫瘍性物質を提供すること
を目的とするものである。即ち、既存の抗腫瘍性物質が
充分に効果を発揮できない種々の腫瘍に対しても抗腫瘍
効果を発揮する化合物を提供することが本発明が解決し
ようとする課題である。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく、抗腫瘍活性を有する物質について微生
物二次代謝産物を広くスクリーニングした結果、後記一
般式［Ｉ］で表される化合物が優れた抗腫瘍作用を示す
ことを見いだして本発明を完成した。

【０００６】即ち、本発明は新規な一般式［Ｉ］

【０００７】

【化６】［式中、Ｒ₁は水素原子を、Ｒ₂は−ＣＨ₂ＣＯＯＸ（こ
こにおいて、Ｘは水素原子又は低級アルキル基を示す）
で表される基を示すか、又はＲ₁及びＲ₂は一緒になって
−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ₂−で表される基を示す］で表される
化合物又はその薬学的に許容されうる塩、その製造法及
びその用途並びに該化合物を産生する能力を有すること
を特徴とするストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ）属に属する微生物に関するものである。

【０００８】構造式［Ｉ］の化合物は、その抗腫瘍効果
及び産生菌株ストレプトミセスエスピーＡ５４２
３８株に因んで、抗腫瘍性物質ＢＥ−５４２３８類と命
名された。

【０００９】次に本明細書において使用する用語につい
て説明する。

【００１０】「低級」なる語は、この語の付された基又
は化合物の炭素数が６個以下、好ましくは４個以下であ
ることを意味する。

【００１１】「低級アルキル基」とは炭素数が１〜６個
の直鎖状又は分岐状のアルキル基であり、例えばメチル
基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル
基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチ
ル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、
ヘキシル基等が挙げられる。

【００１２】以下に本発明にかかわる新規な抗腫瘍性物
質ＢＥ−５４２３８類の物理化学的な性状を示す。

【００１３】ここで、一般式［Ｉ］のＲ₁が水素原子で
あり、かつＲ₂が−ＣＨ₂ＣＯＯＨで表される基である化
合物をＢＥ−５４２３８Ａ、Ｒ₁及びＲ₂が一緒になって
−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ₂−で表される基である化合物をＢＥ
−５４２３８Ｂと称する。

【００１４】下記にＮＭＲ測定における略号の意味を示
す。ｓ：シングレットｄ：ダブレットｔ：トリプレットｑ：カルテットｍ：マルチプレットｂｒ：ブロードＪ：カップリング定数Ｈｚ：ヘルツＢＥ−５４２３８Ａの物理化学的性状性状：黄褐色アモルファス状固体若しくは結晶分子式：Ｃ₂₂Ｈ₂₃Ｏ₆Ｎ質量分析：［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：実測値３９８．１５９１；計算値３９８．１６０３比旋光度：［α］²⁰ _D＝−２６４°（ｃ０．１０，Ｄ
ＭＳＯ）紫外部吸収スペクトル：λ_max（ＭｅＯＨ，ｎｍ
（ε））２７６（１６７００），４１１（２７７００）赤外部吸収スペクトル：（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）３４４４，
２９７６，１７０９，１６４５，１５２７，１４８９，
１４６４，１３８１，１２５９，１２２３，１１７６，
１１２２，１０７６，６０８¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−
ｄ₆）δｐｐｍ：１２．３（１Ｈ，ｂｒｓ），７．９５
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），６．４２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝９．２Ｈｚ），５．１５（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．４Ｈ
ｚ），４．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），４．６
９（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），４．４６（１
Ｈ，ｍ），４．１５（１Ｈ，ｍ），３．２０（２Ｈ，
ｍ），３．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．７，７．３Ｈ
ｚ），２．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１０．４
Ｈｚ），２．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．６，４．８
Ｈｚ），２．６５（２Ｈ，ｍ），２．４９（ｏｖｅｒ
ｌａｐｐｅｄｗｉｔｈｓｏｌｖｅｎｔ），１．５３
（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．２０（３Ｈ，ｄ，
Ｊ＝６．４Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
₆）δｐｐｍ：１８４．７（ｓ），１７２．１（ｓ），
１５５．４（ｓ），１５４．６（ｓ），１３４．９
（ｄ），１２９．０（ｓ），１２７．１（ｓ），１２
１．８（ｓ），１２１．４（ｄ），１１９．５（ｓ），
１０９．６（ｓ），１０３．６（ｓ），６８．７
（ｄ），６７．２（ｄ），６４．２（ｄ），６２．８
（ｄ），４０．４（ｔ），３０．０（ｔ），２７．３
（ｔ），２４．７（ｔ），２０．３（ｑ），１９．５
（ｑ）溶解性：ジメチルスルホキシド等の有機溶媒に溶け易
く、水に溶けにくい。

【００１５】酸性、中性、塩基性物質の区別：酸性物質呈色反応：硫酸反応陽性ＢＥ−５４２３８Ｂの物理化学的性状性状：黄色アモルファス状固体若しくは結晶分子式：Ｃ₂₂Ｈ₂₁Ｏ₆Ｎ質量分析：［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：実測値３９６．１４４６；計算値３９６．１４４７比旋光度：［α］²⁰ _D＝−５８６°（ｃ０．１０，Ｄ
ＭＳＯ）紫外部吸収スペクトル：λ_max（ＭｅＯＨ，ｎｍ
（ε））２７８（２１５００），４２０（２７６００）赤外部吸収スペクトル：（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）３４４４，
２９７２，１７７４，１６４７，１５３７，１４９７，
１２５９，１１５７，１１２２，６０８¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−
ｄ₆）δｐｐｍ：１２．５（１Ｈ，ｂｒｓ），８．０３
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），６．４７（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝９．２Ｈｚ），５．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．０Ｈ
ｚ），５．２５（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），５．０
１（１Ｈ，ｍ），４．９５（１Ｈ，ｂｒｓ），４．６１
（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），４．１７（１Ｈ，
ｂｒｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），３．３４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ
＝１７．７，５．２Ｈｚ），３．２３（２Ｈ，ｍ），
２．７０（２Ｈ，ｍ），２．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
７．７Ｈｚ），１．５６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Ｈ
ｚ），１．２０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
₆）δｐｐｍ：１８５．４（ｓ），１７５．０（ｓ），
１５６．０（ｓ），１５４．３（ｓ），１３５．９
（ｄ），１２９．８（ｓ），１２３．１（ｓ），１２
１．７（ｄ），１２０．７（ｓ），１１９．９（ｓ），
１１０．９（ｓ），１０３．６（ｓ），７１．６
（ｄ），６８．９（ｄ），６６．４（ｄ），６５．７
（ｄ），６４．０（ｄ），３６．８（ｔ），２７．５
（ｔ），２４．８（ｔ），２０．１（ｑ），１８．５
（ｑ）溶解性：ジメチルスルホキシド等の有機溶媒に溶け易
く、水に溶けにくい。

【００１６】酸性、中性、塩基性物質の区別：中性物質呈色反応：硫酸反応陽性ＢＥ−５４２３８類の生物学的活性（抗腫瘍作用）抗腫瘍性物質ＢＥ−５４２３８類のマウス実験腫瘍細胞
に対する増殖阻止作用を決定するため、試験管内で試験
を行なった。マウス白血病細胞Ｐ３８８に対する抗腫瘍
作用試験は、ＢＥ−５４２３８類をジメチルスルホキシ
ドに溶解した後、ジメチルスルホキシドで逐次希釈して
から、牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０培地（２
０ｍＭの２−メルカプトエタノールを含む）に加え検液
とした。１ｘ１０³個の腫瘍細胞を含む細胞培養培地
（牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０培地、２０ｍ
Ｍの２−メルカプトエタノールを含む）５０μｌを９６
穴マイクロプレートに分注し、３７℃で２４時間、５％
ＣＯ₂下で培養した後に上記の検液を５０μｌを加え、
３７℃で７２時間、５％ＣＯ₂下で培養後、ＭＴＴ測定
法により対照群と比較した。

【００１７】マウス大腸癌細胞ｃｏｌｏｎ２６に対す
る抗腫瘍試験は、ＢＥ−５４２３８類をジメチルスルホ
キシドに溶解した後ジメチルスルホキシドで逐次希釈し
てから、牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０培地
に加え検液とした。１ｘ１０³個の腫瘍細胞を含む細胞
培養培地（牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０培
地）１００μｌを９６穴マイクロプレートに分注し、３
７℃で２４時間、５％ＣＯ₂下で培養した後に上記の検
液１００μｌを加え、３７℃で７２時間、５％ＣＯ₂下
で培養後、５０％トリクロロ酢酸で固定し、０．４％ス
ルホローダミンＢで染色後、１０ｍＭトリス液を用いて
細胞から色素を抽出した。４５０ｎｍを対照波長として
５５０ｎｍに於ける吸光度を測定して対照群と比較し
た。その結果、ＢＥ−５４２３８類は両腫瘍細胞に対
し、増殖阻止活性を示し、５０％増殖阻害濃度は第１表
の通りであった。

【００１８】更に、ＢＥ−５４２３８類のヒト腫瘍細胞
に対する抗腫瘍活性を試験管内で試験した。細胞は、ヒ
ト大腸癌細胞ＤＬＤ−１、ヒト肺癌細胞ＰＣ−１３及び
ヒト胃癌細胞ＭＫＮ−４５を使用し、細胞培養用培地
は、全ての腫瘍細胞共に牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ
１６４０培地を用い、上記のマウス大腸癌細胞ｃｏｌ
ｏｎ２６と同様の方法を用いて測定した。その結果、
ＢＥ−５４２３８類はヒト腫瘍細胞に対しても増殖阻害
活性を示し、その５０％増殖阻止濃度は第１表の通りで
あった。

【００１９】

【表１】上述したようにＢＥ−５４２３８類はマウス及びヒトの
腫瘍細胞に対し顕著な増殖阻止作用を示す。したがっ
て、本発明はヒトをはじめとする哺乳動物の抗腫瘍剤と
して有用である。

【００２０】つぎに、ＢＥ−５４２３８類の製造法につ
いて説明する。

【００２１】本発明の抗腫瘍性物質ＢＥ−５４２３８類
の製造に使用する微生物は、抗腫瘍性物質ＢＥ−５４２
３８類を生産するものならばいずれでも良いが、例えば
以下の菌学的性状を有する微生物、即ち、Ａ５４２３
８株を用いることができる。１．形態Ａ５４２３８株はよく伸長し分岐する基生菌糸と気菌
糸を形成し、輪生岐及び菌糸の分断は認められない。気
菌糸上には胞子の長い連鎖（３０〜５０個）を作り、そ
の形態は、らせん状である。胞子の表面はしわ状で大き
さが１．５〜０．３×１．１〜０．９μｍ位の卵形であ
り、胞子のう、鞭毛胞子及び菌核等の特殊な器官は観察
されない。コロニーはイースト・麦芽寒天培地等で気菌
糸の成熟とともに次第に湿潤化することが観察される。

【００２２】

【表２】

【００２３】

【表３】

【００２４】

【表４】

【００２５】

【表５】６．細胞壁組成ＬＬージアミノピメリン酸とグリシンが検出された。

【００２６】以上の菌学的諸性質よりＡ５４２３８株
は放線菌ストレプトミセス属に属すると考えられる。し
たがって、Ａ５４２３８株をストレプトミセスエス
ピーＡ５４２３８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓ
ｐ．Ａ５４２３８）と称することとした。

【００２７】なお、本菌株は通商産業省工業技術院生命
工学工業技術研究所に寄託されており、受託番号はＦＥ
ＲＭＰ−１５７２１である。

【００２８】本発明のストレプトミセスエスピーＡ
５４２３８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐ．Ａ
５４２３８）の変異株は、例えばＸ線若しくは紫外線
などの照射処理、例えばナイトロジェンマスタード、ア
ザセリン、亜硝酸、２−アミノプリン若しくはＮ−メチ
ル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）
等の変異誘起剤による処理、ファージ接触、形質転換、
形質導入又は接合などの通常用いられる菌種変換処理方
法によりストレプトミセスエスピーＡ５４２３８
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐ．Ａ５４２３
８）を変異させることにより得ることができる。

【００２９】

【発明の実施の形態】本発明のＢＥ−５４２３８類を製
造するにあたり、ＢＥ−５４２３８類の生産菌株を栄養
源含有培地に接種して好気的に発育させることにより、
ＢＥ−５４２３８類を含む培養物が得られる。栄養源と
しては、放線菌の栄養源として公知のものが使用でき
る。例えば、炭素源としては、市販されているブドウ
糖、麦芽糖、デンプン、庶糖、糖蜜又はデキストリンな
どが単独又は混合物として用いられる。窒素源として
は、市販されている大豆粉、コーンステイープリカー、
グルテンミール、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、綿
実粉、ペプトン、小麦胚芽、魚粉、ミートミール、脱脂
米ヌカ、脱脂肉骨粉、無機アンモニウム塩又は硝酸ナト
リウムなどが単独又は混合物として用いられる。無機塩
としては、市販されている炭酸カルシウム、塩化ナトリ
ウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、臭化ナトリウ
ム、ホウ酸ナトリウム又は各種リン酸塩などを使用する
ことができる。その他必要に応じて、鉄、マンガン、亜
鉛、コバルト、モリブデン酸などの重金属塩を微量添加
することもできる。また、発泡の激しい場合には消泡剤
として、例えば大豆油又は亜麻仁油などの植物油、オク
タデカノールなどの高級アルコール類、各種シリコン化
合物などを適宜添加してもよい。これらのもの以外で
も、該生産菌が利用し、ＢＥ−５４２３８類の生産に役
立つもの、例えば３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスル
ホン酸又はホウ酸ナトリウムなど、いずれも使用するこ
とができる。

【００３０】培養方法としては、一般の微生物代謝産物
の生産方法と同様に行なえばよく、固体培養でも液体培
養でもよい。液体培養の場合は、静置培養、攪拌培養、
振とう培養又は通気培養などのいずれを実施してもよい
が、特に振盪培養又は深部通気攪拌培養が望ましい。培
養温度は１６〜４３℃が適当であるが、好ましくは２６
〜３３℃である。好ましい培地のｐＨは４〜８の範囲
で、培養時間は７２時間〜１６８時間、好ましくは９６
時間〜１４４時間である。培養物から目的とするＢＥ−
５４２３８類を採取するには、微生物の生産する代謝物
から採取するのに通常使用される分離手段を適宜利用す
ることができる。

【００３１】ＢＥ−５４２３８類は菌体及びろ液中に存
在するので、菌体及びろ液より通常の分離手段、例えば
溶媒抽出法、イオン交換樹脂法又は吸着若しくは分配ク
ロマトグラフィー法及びゲル濾過法などを単独又は組み
合わせて行なうことにより精製できる。

【００３２】好ましい分離精製の例として次の方法が挙
げられる。まず培養液を濾過し、ろ液を得る。得られた
ろ液を水−酢酸エチル系で分配を行ない、酢酸エチルを
留去後得られる残留物についてセファデックスＬＨ−２
０クロマトグラフィー（酢酸エチル／アセトニトリル／
水で溶出）などを行なうことにより、ＢＥ−５４２３８
類を粉末若しくは固体として得ることができる。

【００３３】本発明のＢＥ−５４２３８類のうち、一般
式［ＩＩ］で表される化合物は化学の分野でよく知られ
た低級アルキル化の方法によって、一般式［Ｉ］のＸが
低級アルキル基である化合物に容易に変換することがで
きる。

【００３４】例えば一般式［ＩＩ］で表される化合物
に、塩基の存在下、低級アルキルハライドを反応させる
ことにより、一般式［Ｉ］のＸが低級アルキル基である
化合物に導くことができる。

【００３５】また本発明化合物は薬学的に許容されうる
塩の形で存在することができ、そのような塩としてはカ
ルボキシル基における塩基付加塩を挙げることができ、
例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、
例えばトリメチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシ
クロヘキシルアミン塩、エタノールアミン塩、ジエタノ
ールアミン塩、トリエタノールアミン塩、プロカイン塩
等の脂肪族アミン塩、例えばＮ，Ｎ−ジベンジルエチレ
ンジアミン等のアラルキルアミン塩、例えばピリジン
塩、ピコリン塩、キノリン塩、イソキノリン塩等の複素
環芳香族アミン塩、例えばテトラメチルアンモニウム
塩、テトラエチルアンモニウム塩、ベンジルトリメチル
アンモニウム塩、ベンジルトリエチルアンモニウム塩、
ベンジルトリブチルアンモニウム塩、メチルトリオクチ
ルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニウム塩等の第
４級アンモニウム塩、例えばアルギニン塩、リジン塩等
の塩基性アミノ酸塩等が挙げられる。

【００３６】これらの塩と遊離カルボン酸は化学の分野
で良く知られた方法により、互いに容易に変換すること
ができる。

【００３７】本発明の化合物ＢＥ−５４２３８類は腫瘍
細胞の増殖を阻害し、抗腫瘍効果を発揮するが、本発明
化合物を抗腫瘍剤として使用する際の投与形態としては
各種の形態を選択でき、例えば錠剤、カプセル剤、散
剤、顆粒剤若しくは液剤などの経口剤、又は例えば溶液
若しくは懸濁液などの殺菌した液状の非経口剤が挙げら
れる。

【００３８】固体の製剤は、そのまま錠剤、カプセル
剤、顆粒剤又は粉末の形態として製造することもできる
が、適当な添加物を使用して製造することもできる。そ
のような添加物としては、例えば乳糖若しくはブドウ糖
などの糖類、例えばトウモロコシ、小麦若しくは米など
のデンプン類、例えばステアリン酸などの脂肪酸、例え
ばメタケイ酸アルミン酸マグネシウム若しくは無水リン
酸カルシウムなどの無機塩、例えばポリビニルピロリド
ン若しくはポリアルキレングリコールなどの合成高分
子、例えばステアリン酸カルシウム若しくはステアリン
酸マグネシウムなどの脂肪酸塩、例えばステアリルアル
コール若しくはベンジルアルコールなどのアルコール
類、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロ
ース、エチルセルロース若しくはヒドロキシプロピルメ
チルセルロースなどの合成セルロース誘導体、その他、
水、ゼラチン、タルク、植物油、アラビアゴムなど通常
用いられる添加物が挙げられる。

【００３９】これらの錠剤、カプセル剤、顆粒剤及び粉
末などの固形製剤は一般的には０．１〜１００重量％、
好ましくは５〜１００重量％の有効成分を含む。

【００４０】液状製剤は、水、アルコール類又は例えば
大豆油、ピーナッツ油若しくはゴマ油などの植物由来の
油など液状製剤において通常用いられる適当な添加剤を
使用し、懸濁液、シロップ剤又は注射剤などの形態とし
て製造される。

【００４１】特に、非経口的に筋肉内注射、静脈注射又
は皮下注射で投与する場合の適当な溶剤としては、例え
ば注射用蒸留水、塩酸リドカイン水溶液（筋肉注射
用）、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エタノール、静脈
内注射用液体（例えばクエン酸及びクエン酸ナトリウム
などの水溶液）若しくは電解質溶液（点滴静注及び静脈
内注射用）など、又はこれらの混合溶液が挙げられる。

【００４２】これらの注射剤はあらかじめ溶解したもの
のほか、粉末のままあるいは適当な添加剤を加えたもの
を用時溶解する形態もとり得る。これらの注射液は通
常、０．１〜１０重量％、好ましくは１〜５重量％の有
効成分を含む。

【００４３】また、経口投与の懸濁剤又はシロップ剤な
どの液剤は、０．５〜１０重量％の有効成分を含む。

【００４４】本発明の化合物の実際に好ましい投与量
は、使用される化合物の種類、配合された組成物の種
類、適用頻度及び治療すべき特定部位、宿主及び腫瘍に
よって変化することに注意すべきである。例えば、１日
あたりの成人の投与量は、経口投与の場合、１０〜５０
０ｍｇであり、非経口投与、好ましくは静脈注射の場
合、１日あたり、１０〜１００ｍｇである。なお、投与
回数は投与方法及び症状によって異なるが、１回ないし
５回である。

【００４５】

【実施例】以下に、実施例を挙げて本発明を具体的に説
明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるもの
ではない。実施例ＢＥ−５４２３８類の製造法斜面軟寒天培地に接種した放線菌Ａ５４２３８株をグ
ルコース０．１％、デキストリン２％、魚粉０．５％、
コーングルテンミール１％、酵母エキス０．１％、硫酸
マグネシウム０．０５％、塩化ナトリウム０．１％、塩
化カルシウム０．０５％、硫酸第一鉄０．０００２％、
塩化第二銅０．００００４％、塩化マンガン０．０００
０４％、塩化コバルト０．００００４％、硫酸亜鉛０．
００００８％、ホウ酸ナトリウム０．００００８％、及
びモリブデン酸ナトリウム０．０００２４％からなる培
地（ｐＨ７．０）１１０ｍｌを含む５００ｍｌ容の三角
フラスコ２本に接種し、２８℃で４８時間、回転振盪機
（毎分１８０回転）上で培養した。この培養液を２ｍｌ
ずつ上記の培地を１１０ｍｌ含む５００ｍｌ容の三角フ
ラスコ５０本に接種し、２８℃で１２０時間回転振盪機
（毎分１８０回転）上で培養した。

【００４６】このようにして得られた培養液（約５．５
Ｌ）から濾過によりろ液を分離後、ろ液を１Ｎ塩酸でｐ
Ｈ３に調整した後、ＨＰ−２０に吸着させ、水で洗浄
後、活性物質をメタノールで溶出した。この溶出液を減
圧下に濃縮して酢酸エチル（１Ｌｘ２）を加えた。得ら
れた酢酸エチル抽出液を減圧下に濃縮後、残留物をセフ
ァデックスＬＨ−２０（ファルマシア社製）のクロマト
用カラム（３．０ｘ８０ｃｍ）を用いて酢酸エチル／ア
セトニトリル／水（１０：５：１）で溶出し、ＢＥ−５
４２３８Ａ、Ｂを含むそれぞれの分画を濃縮乾固するこ
とによりＢＥ−５４２３８Ａを６５．２ｍｇ、ＢＥ−５
４２３８Ｂを３７．８ｍｇ得た。

【００４７】以下に本発明の化合物の製剤例を示すが、
本発明の化合物の製剤は本製剤例に限定されるものでは
ない。製剤例１本物質（ＢＥ−５４２３８Ａ）１０部、重質酸化マグ
ネシウム１５部及び乳糖７５部を均一に混合して、３５
０μｍ以下の粉末状又は細粒状の散剤とする。この散剤
をカプセル容器に入れカプセル剤とした。製剤例２本物質（ＢＥ−５４２３８Ａ）４５部、澱粉１５部、
乳糖１６部、結晶性セルロース２１部、ポリビニルアル
コール３部及び蒸留水３０部を均一に混合した後、破砕
造粒して乾燥し、次いで篩別して直径１４１０〜１７７
μｍの大きさの顆粒剤とした。製剤例３製剤例２と同様の方法で顆粒剤を作製した後、この顆粒
剤９６部に対してステアリン酸カルシウム３部を加えて
圧縮成形し直径１０ｍｍの錠剤を作製した。製剤例４製剤例２の方法で得られた顆粒剤９０部に対して結晶性
セルロース１０部及びステアリン酸カルシウム３部を加
えて圧縮成形し、直径８ｍｍの錠剤とした後、これにシ
ロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液を加
えて糖衣錠を作製した。製剤例５本物質（ＢＥ−５４２３８Ａ）０．６部、非イオン系
界面活性剤２．４部及び生理的食塩水９７部を加温混合
してからアンプルに入れ、滅菌を行なって注射剤を作製
した。

【００４８】

【発明の効果】本発明に記載するＢＥ−５４２３８類
は、マウス及びヒトの腫瘍細胞に対して増殖抑制効果を
示すことから、医薬の分野で癌の治療剤として有用であ
る。

【００４９】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所 //(Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｒ 1:465） (72)発明者小尻勝久茨城県つくば市大久保３番地萬有製薬株式会社つくば研究所内 (72)発明者須田寛之茨城県つくば市大久保３番地萬有製薬株式会社つくば研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式［Ｉ］【化１】［式中、Ｒ₁は水素原子を、Ｒ₂は−ＣＨ₂ＣＯＯＸ（こ
こにおいて、Ｘは水素原子又は低級アルキル基を示す）
で表される基を示すか、又はＲ₁及びＲ₂は一緒になって
−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ₂−で表される基を示す］で表される
化合物又はその薬学的に許容されうる塩。
【請求項２】ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ）属に属し、一般式［ＩＩ］【化２】［式中、Ｒ₁は水素原子を、Ｒ₂₀は−ＣＨ₂ＣＯＯＨで表
される基を示すか、又はＲ₁及びＲ₂₀は一緒になって−
Ｏ−ＣＯ−ＣＨ₂−で表される基を示す］で表される化
合物を産生する能力を有する微生物を培養し、その培養
液及び菌体から一般式［ＩＩ］で表される化合物を採取
し、要すれば薬学的に許容されうる塩とすることを特徴
とする一般式［ＩＩ］で表される化合物又はその薬学的
に許容されうる塩の製造法。
【請求項３】一般式［ＩＩ］【化３】［式中、Ｒ₁は水素原子を、Ｒ₂₀は−ＣＨ₂ＣＯＯＨで表
される基を示すか、又はＲ₁及びＲ₂₀は一緒になって−
Ｏ−ＣＯ−ＣＨ₂−で表される基を示す］で表される化
合物を産生する能力を有する微生物が、ストレプトミセ
スエスピーＡ５４２３８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓｓｐ．Ａ５４２３８）又はその変異株である請
求項２記載の製造法。
【請求項４】一般式［Ｉ］【化４】［式中、Ｒ₁は水素原子を、Ｒ₂は−ＣＨ₂ＣＯＯＸ（こ
こにおいて、Ｘは水素原子又は低級アルキル基を示す）
で表される基を示すか、又はＲ₁及びＲ₂は一緒になって
−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ₂−で表される基を示す］で表される
化合物又はその薬学的に許容されうる塩を有効成分とす
る抗腫瘍剤。
【請求項５】一般式［ＩＩ］【化５】［式中、Ｒ₁は水素原子を、Ｒ₂₀は−ＣＨ₂ＣＯＯＨで表
される基を示すか、又はＲ₁及びＲ₂₀は一緒になって−
Ｏ−ＣＯ−ＣＨ₂−で表される基を示す］で表される化
合物を産生する能力を有することを特徴とするストレプ
トミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属に属する微生
物。
【請求項６】ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ）属に属する微生物が、ストレプトミセスエスピ
ーＡ５４２３８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓ
ｐ．Ａ５４２３８）又はその変異株である請求項５
記載の微生物。