JPH08131186A - 抗菌性物質ｂｅ−４３７６７類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 一般式 【化１】 ［式中、Ｒ¹は水素原子又は低級アルキル基を示し、Ｒ²
は水素原子又は式： 【化２】 で表される基を示す。］で表される化合物又はその薬学
的に許容しうる塩及びその製造法。 【効果】本発明に係る化合物はＭＲＳＡを含む各種の病
原性微生物に対して顕著な抗菌活性を示し、医薬の分野
で有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は医薬の分野で有用であ
り、より具体的には微生物の増殖を阻害して抗菌作用を
発揮する新規化合物群、その製造法及びその用途並びに
該化合物を産生する微生物に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏ
ｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）は化膿性疾患の起炎菌として
知られているが、特に重症患者をかかえる大病院ではメ
チシリン耐性黄色ブドウ球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ
ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ
ａｕｒｅｕｓ： ＭＲＳＡ）等の多剤耐性菌の院内感
染が多く、臨床上深刻な問題となっている［小栗ら、臨
床と微生物、１５巻、７〜１５頁（１９８８年）等参
照］。

【０００３】かかる状況下、ＭＲＳＡに対して有効な薬
剤の開発が強く求められている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】既存の抗菌剤が、充分
に効果を発揮できない多剤耐性のＭＲＳＡに対して、優
れた抗菌活性を有する新規な化合物を提供することが、
本発明が解決しようとする課題である。

【０００５】

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決すべ
く、抗菌活性を有する物質について微生物二次代謝産物
を鋭意スクリーニングした結果、一般式［Ｉ］で表され
る化合物が、優れた抗菌作用を示すことを見いだして本
発明を完成した。

【０００６】即ち、本発明は新規な一般式［Ｉ］

【０００７】

【化１１】 ［式中、Ｒ¹は水素原子、低級アルキル基を示し、Ｒ²は
水素原子又は式：

【０００８】

【化１２】 で表される基を示す。］で表される抗菌物質ＢＥ−４３
７６７類又はその薬学的に許容しうる塩、その製法及び
用途、並びにＢＥ−４３７６７類を産生する能力を有す
るストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属に
属する微生物に関する。

【０００９】次に本明細書において使用する用語につい
て説明する。

【００１０】「低級」なる語は、この語の付された基又
は化合物の炭素数が６個以下、好ましくは４個以下であ
ることを意味する。

【００１１】「低級アルキル基」とは炭素数１〜６個の
直鎖状又は分岐状のアルキル基を示し、例えば、メチル
基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル
基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチ
ル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、
ヘキシル基等が挙げられる。

【００１２】以下に本発明に係る新規な抗菌性物質ＢＥ
−４３７６７類の物理化学的な性状を示す。

【００１３】ここで、一般式［Ｉ］のＲ¹、Ｒ²が共に水
素原子である化合物をＢＥ−４３７６７Ａ、Ｒ¹が水素
原子、Ｒ²が式：

【００１４】

【化１３】 で表される基である化合物をＢＥ−４３７６７Ｂと称す
る。下記にＮＭＲ測定における略号の意味を示す。

【００１５】ｓ ： シングレット ｄ ： ダブレット ｔ ： トリプレット ｑ ： カルテット ｍ ： マルチプレット ｂｒ： ブロード Ｊ ： カップリング定数 Ｈｚ： ヘルツＢＥ−４３７６７Ａの物理化学的性状 性状 ；黄褐色アモルファス状固体若しくは結晶 分子式 ；Ｃ₂₉Ｈ₂₆Ｏ₈ 質量分析；［ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｎａ）⁺として：実
測値 ５２５ 紫外部吸収スペクトル；λｍａｘ（ＭｅＯＨ，ｎｍ）２
４８，２６４，２８６，３１５，３９０ 赤外部吸収スペクトル；（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）３４５２，
２９２７，１６１４，１５９８，１４５６，１３７６，
１３３２，１２６８，１１７２，１０４９，１０１４，
８１９¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−
ｄ₆，δｐｐｍ）１３．５（１Ｈ，ｓ），１２．４（１
Ｈ，ｓ），１１．０（１Ｈ，ｓ），９．７６（１Ｈ，
ｓ），８．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．７
２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．３２（１Ｈ，
ｓ），６．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），６．２
８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），６．２３（１Ｈ，ｂ
ｒｓ），３．０６（２Ｈ，ｍ），１．６２（２Ｈ，
ｍ），１．５４（３Ｈ，ｓ），１．３３（４Ｈ，ｍ），
０．８６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
₆，δｐｐｍ）１８９．２（ｓ），１７４．５（ｓ），
１６６．０（ｓ），１６４．８（ｓ），１６４．４
（ｓ），１５９．２（ｓ），１５５．３（ｓ），１４
６．８（ｓ），１４４．２（ｓ），１３８．０（ｓ），
１３５．６（ｓ），１２６．１（ｄ），１２３．６
（ｄ），１２１．１（ｄ），１２０．６（ｓ），１１
７．１（ｓ），１１５．９（ｄ），１０９．９（ｓ），
１０８．５（ｓ），１０６．６（ｓ），１０６．２
（ｄ），１０１．３（ｄ），７０．３（ｓ），３９．５
（ｑ），３５．９（ｔ），３１．５（ｔ），３１．１
（ｔ），２１．９（ｔ），１３．９（ｑ） 溶解性；メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け易く、水に溶けにくい。

【００１６】酸性、中性、塩基性物質の区別；酸性 Ｒｆ値０．４８［メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ₂₅₄使
用、展開溶媒：クロロホルム／メタノール／水（１４：
６：１）］ 呈色反応；硫酸反応陽性ＢＥ−４３７６７Ｂの物理化学的性状 性状 ；黄褐色アモルファス状固体若しくは結晶 分子式 ；Ｃ₃₅Ｈ₃₆Ｏ₁₂ 質量分析；［ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺として：実測
値 ６４９ 紫外部吸収スペクトル；λｍａｘ（ＭｅＯＨ，ｎｍ）２
４８，２６７，２８６，３１３，３９２ 赤外部吸収スペクトル；（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）３４５０，
２９２９，１６１４，１５８９，１４８４，１４５６，
１３７３，１２８４，１１７８，１１３０，１０６４，
１０３３¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−
ｄ₆，δｐｐｍ）１３．６（１Ｈ，ｓ），１２．７（１
Ｈ，ｓ），１１．１（１Ｈ，ｓ），１０．０（１Ｈ，
ｓ），８．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．６
５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．０６（１Ｈ，ｂ
ｒｓ），６．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），６．
３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），４．６２（１Ｈ，
ｂｒｓ），４．４６（２Ｈ，ｂｒｓ），４．１７（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），３．７５（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ
＝９．２，６．４Ｈｚ），３．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
９．２，２．７Ｈｚ），３．５４（１Ｈ，ｂｒｓ），
３．２２（１Ｈ，ｍ），３．１０（１Ｈ，ｍ），２．９
８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），１．８３（３Ｈ，
ｓ），１．６２（２Ｈ，ｍ），１．３３（４Ｈ，ｍ），
０．８７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），０．４１（３
Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
₆，δｐｐｍ）１８９．３，１７３．０，１６７．９，
１６５．８，１６４．７，１５８．０，１４９．３，１
４５．６，１４０．６，１３６．９，１３６．２，１２
６．８，１２０．２，１１９．３，１１７．４，１１
６．６，１１６．５，１１３．９，１０８．１，１０
７．６，１０５．８，１０２．５，９８．０，７５．
８，７２．０，７１．２，７０．４，６９．２，３６．
６，３５．８，３１．７，３１．２，２２．１，１７．
２，１４．０ 溶解性；メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け易く、水に溶けにくい。

【００１７】酸性、中性、塩基性物質の区別；酸性 Ｒｆ値； ０．３２［メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ
₂₅₄使用、展開溶媒：クロロホルム／メタノール／水
（１４：６：１）］ 呈色反応；硫酸反応陽性 また本発明化合物は塩の形で存在することができ、その
ような塩としては例えばナトリウム塩、カリウム塩等の
アルカリ金属塩、例えばトリメチルアミン塩、トリエチ
ルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、エタノールア
ミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン
塩、プロカイン塩等の脂肪族アミン塩、例えばＮ、Ｎー
ジベンジルエチレンジアミン等のアラルキルアミン塩、
例えばピリジン塩、ピコリン塩、キノリン塩、イソキノ
リン塩等の複素環芳香族アミン塩、例えばテトラメチル
アンモニウム塩、テトラエチルアンモニウム塩、ベンジ
ルトリメチルアンモニウム塩、ベンジルトリエチルアン
モニウム塩、ベンジルトリブチルアンモニウム塩、メチ
ルトリオクチルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニ
ウム塩等の第４級アンモニウム塩、アルギニン塩、リジ
ン塩等の塩基性アミノ酸塩等が挙げられる。

【００１８】ＢＥ−４３７６７類の抗菌活性 ＢＥ−４３７６７類の抗菌活性を各種の病原性微生物に
対して測定し、その最少発育阻止濃度を求めた。ＢＥ−
４３７６７類 についての結果を第１表に示す。

【００１９】

【表１】 第１表に示したごとく、ＢＥ−４３７６７類はＭＲＳＡ
を含む各種の病原性微生物に対して顕著な抗菌活性を示
す。従って、これらの病原性微生物を起炎菌とする疾病
に対しての抗菌剤として有用である。

【００２０】次にＢＥ−４３７６７類の製造法について
説明する。

【００２１】本発明の抗菌性物質ＢＥ−４３７６７類の
製造に使用する微生物又はその変異株は、抗菌性物質Ｂ
Ｅ−４３７６７Ａを生産するものならばいずれでも良い
が、例えば以下の菌学的性状を有する微生物が挙げられ
る。 １．形態 Ａ４３７６７株は、よく伸長し分岐する基生菌糸と気菌
糸を形成し、輪生岐及び菌糸の分断は認められない。気
菌糸上には胞子の長い連鎖（３０〜５０個）を作り、そ
の形態は、螺旋状である。

【００２２】胞子の表面は刺状で大きさが１．２〜０．
９×０．９〜０．７μｍ位の卵形であり、胞子のう、鞭
毛胞子及び菌核等の特殊な器官は観察されない。 ２．各種寒天平板培地における培養性状（２８℃、１４
日間培養）

【００２３】

【表２】 ３．生育温度（イースト・麦芽寒天培地、１４日間培
養） １３℃；生育せず １７℃；生育良好、気菌糸形成せず ２１℃；生育及び気菌糸形成良好 ２３℃；生育及び気菌糸形成非常に良好 ２７℃；生育及び気菌糸形成非常に良好 ３０℃；生育及び気菌糸形成非常に良好 ３８℃；生育及び気菌糸形成非常に良好 ４０℃；生育及び気菌糸形成非常に良好 ４４℃；生育せず ４．生理学的諸性質 （１）ゼラチンの液化 陽性 （グルコース・ペプトン・ゼラチン培地） （２）スターチの加水分解 陽性 （スターチ・無機塩寒天培地） （３）脱脂粉乳の凝固 陰性 （スキムミルク培地） （４）脱脂粉乳のペプトン化 陽性 （スキムミルク培地） （５）メラニン様色素の生成 陰性 （６）食塩耐性 食塩含有量７％以下で生育 （イースト・麦芽寒天培地） ５．炭素源の利用能 プリドハム・ゴドリーブ寒天を基礎培地とし、下記各種
糖を添加して２８℃１４日間培養した。

【００２４】

【表３】 ６．細胞壁組成 ＬＬ−ジアミノピメリン酸とグリシンが検出された。

【００２５】以上の菌学的諸性質よりＡ４３７６７株は
放線菌ストレプトミセス属に属すると考えられる。

【００２６】したがってＡ４３７６７株をストレプトミ
セス エスピー Ａ４３７６７（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ ｓｐ．Ａ４３７６７）と称することとした。

【００２７】尚、本菌株は通商産業省工業技術院生命工
学工業技術研究所に寄託されており、その受託番号はＦ
ＥＲＭ Ｐ−１４４４６である。

【００２８】本発明で使用する抗菌性物質ＢＥ−４３７
６７類を生産する微生物の変異株は、例えばＸ線若しく
は紫外線等の照射処理、例えばナイトロジェンマスター
ド、アザセリン、亜硝酸、２−アミノプリン若しくはＮ
−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（Ｎ
ＴＧ）等の変異誘起剤による処理、ファージ接触、形質
転換、形質導入又は接合等の通常用いられる菌種変換処
理方法によりＢＥ−４３７６７類生産菌を変異させた微
生物である。

【００２９】本発明のＢＥ−４３７６７類を製造するに
あたり、ＢＥ−４３７６７類の生産菌株を栄養源含有培
地に接種して好気的に発育させることにより、ＢＥ−４
３７６７類を含む培養物が得られる。栄養源としては、
放線菌の栄養源として公知のものが使用できる。炭素源
としては、例えば市販されているブドウ糖、麦芽糖、デ
ンプン、庶糖、糖蜜又はデキストリン等が単独又は混合
物として用いられる。窒素源としては、例えば市販され
ている大豆粉、コーンステイープリカー、肉エキス、酵
母エキス、乾燥酵母、綿実粉、ペプトン、小麦胚芽、魚
粉、ミートミール、脱脂米ヌカ、脱脂肉骨粉、無機アン
モニウム塩又は硝酸ナトリウム等が単独又は混合物とし
て用いられる。無機塩としては、例えば市販されている
炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸
マグネシウム、臭化ナトリウム、ホウ酸ナトリウム又は
各種リン酸塩等を使用することができる。その他必要に
応じて、例えば鉄、マンガン、亜鉛、コバルト、モリブ
デン酸等の重金属塩を微量添加することもできる。ま
た、発泡の激しい場合には消泡剤として、例えば大豆油
又は亜麻仁油等の植物油、オクタデカノール等の高級ア
ルコール類、各種シリコン化合物等を適宜添加してもよ
い。これらのもの以外でも、該生産菌が利用し、ＢＥ−
４３７６７類の生産に役立つもの例えば３−（Ｎ−モル
ホリノ）プロパンスルホン酸又はホウ酸ナトリウム等で
あれば、いずれも使用することができる。

【００３０】培養方法としては、一般の微生物代謝産物
の生産方法と同様に行なえばよく、固体培養でも液体培
養でもよい。液体培養の場合は、静置培養、攪拌培養、
振とう培養又は通気培養等のいずれを実施してもよい
が、特に振盪培養又は深部通気攪拌培養が望ましい。培
養温度は１７〜４０℃が適当であるが、好ましくは２３
〜４０℃である。好ましい培地のｐＨは４〜８の範囲
で、培養時間は４８時間〜２４０時間、好ましくは７２
時間〜１６８時間である。培養物から目的とするＢＥ−
４３７６７類を採取するには、微生物の生産する代謝物
から採取するのに通常使用される分離手段を適宜利用す
ることができる。

【００３１】ＢＥ−４３７６７類は培養濾液中及び菌体
中に存在するので、培養濾液又は菌体より通常の分離手
段、例えば溶媒抽出法、イオン交換樹脂法又は吸着若し
くは分配クロマトグラフィー法及びゲル濾過法等を単独
又は組み合わせて行なうことにより精製できる。

【００３２】好ましい分離精製の例として次の方法が挙
げられる。まず培養液を濾過し、菌体を得る。得られた
菌体をメタノール又はアセトン等の有機溶媒を用いて抽
出する。得られた粗抽出物について、水−酢酸エチル分
配を行ない、酢酸エチルを留去後得られる抽出物につい
てセファデックスＬＨ−２０クロマトグラフィー（クロ
ロホルム／メタノールで溶出）等を行なうことにより、
ＢＥ−４３７６７Ａを黄褐色粉末として得ることができ
る。

【００３３】一般式［１］で表される化合物は有機合成
化学の分野で公知の低級アルキル化の方法によりＲ¹が
低級アルキル基である化合物に容易に変換することがで
きる。

【００３４】本発明の化合物ＢＥ−４３７６７類は病原
性微生物の増殖を阻害し、抗菌効果を発揮するが、本発
明化合物を抗菌剤として使用する際の投与形態としては
各種の形態を選択でき、例えば錠剤、カプセル剤、散
剤、顆粒剤若しくは液剤等の経口剤、又は例えば溶液若
しくは懸濁液等の殺菌した液状の非経口剤が挙げられ
る。

【００３５】固体の製剤は、そのまま錠剤、カプセル
剤、顆粒剤又は粉末の形態として製造することもできる
が、適当な添加物を使用して製造することもできる。そ
のような添加物として、例えば乳糖若しくはブドウ糖等
の糖類、例えばトウモロコシ、小麦若しくは米等のデン
プン類、例えばステアリン酸等の脂肪酸類、例えばメタ
ケイ酸アルミン酸マグネシウム若しくは無水リン酸カル
シウム等の無機塩類、例えばポリビニルピロリドン若し
くはポリアルキレングリコール等の合成高分子類、例え
ばステアリン酸カルシウム若しくはステアリン酸マグネ
シウム等の脂肪酸塩類、例えばステアリルアルコール若
しくはベンジルアルコール等のアルコール類、例えばメ
チルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチル
セルロース若しくはヒドロキシプロピルメチルセルロー
ス等の合成セルロース誘導体類、又は、水、ゼラチン、
タルク、植物油、アラビアゴムなど通常用いられる添加
物が挙げられる。

【００３６】これらの錠剤、カプセル剤、顆粒剤及び粉
末等の固形製剤は一般的には０．１〜１００重量％、好
ましくは５〜１００重量％の有効成分を含む。

【００３７】液状製剤は、水、アルコール類又は例えば
大豆油、ピーナッツ油若しくはゴマ油等の植物由来の油
など液状製剤において通常用いられる適当な添加剤を使
用し、懸濁液、シロップ剤若しくは注射剤等の形態とし
て製造される。

【００３８】特に、非経口的に筋肉内注射、静脈注射又
は皮下注射で投与する場合の適当な溶剤としては、例え
ば注射用蒸留水、塩酸リドカイン水溶液（筋肉注射
用）、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エタノール、静脈
内注射用液体（例えばクエン酸及びクエン酸ナトリウム
等の水溶液）若しくは電解質溶液（点滴静注及び静脈内
注射用）など、又はこれらの混合溶液が挙げられる。

【００３９】これらの注射剤はあらかじめ溶解したもの
のほか、粉末のままあるいは適当な添加剤を加えたもの
を要時溶解する形態もとり得る。これらの注射液は通
常、０．１〜１０重量％、好ましくは１〜５重量％の有
効成分を含む。

【００４０】又、経口投与の懸濁剤又はシロップ剤等の
液剤は、０．５〜１０重量％の有効成分を含む。

【００４１】本発明の化合物の好ましい投与量は、使用
される化合物の種類、配合された組成物の種類、適用頻
度及び患者の病状によって変化することに注意すべきで
ある。例えば、１日あたりの成人の投与量は、経口投与
の場合、１０〜５００ｍｇであり、非経口投与、好まし
くは静脈注射の場合、１日あたり、１０〜１００ｍｇで
ある。なお、投与回数は投与方法及び症状によって異な
るが、１回ないし５回である。

【００４２】

【実施例】以下に、実施例を挙げて本発明を具体的に説
明するが、本発明はこれらによって何ら限定されるもの
ではない。

【００４３】実施例１ＢＥ−４３７６７Ａの製造法 ：斜面軟寒天培地に接種し
た放線菌Ａ４３７６７株をグルコース０．２％、デキス
トリン２％、ミートミール０．５％、脱脂米ヌカ０．５
％、脱脂肉骨粉０．１％、乾燥酵母０．０５％、硫酸マ
グネシウム０．０２５％、臭化ナトリウム０．０２５
％、塩化ナトリウム０．２５％、リン酸水素二カリウム
０．０５％、硫酸第一鉄０．０００２％、塩化第二銅
０．００００４％、塩化マンガン０．００００４％、塩
化コバルト０．００００４％、硫酸亜鉛０．００００８
％、ホウ酸ナトリウム０．００００８％、及びモリブデ
ン酸ナトリウム０．０００２４％からなる培地（ｐＨ
７．２）１００ｍｌを含む５００ｍｌ容の三角フラスコ
３本に接種し、２８℃で７２時間、回転振盪機（毎分１
８０回転）上で培養した。この培養液を２ｍｌずつ上記
の培地を１００ｍｌ含む５００ｍｌ容の三角フラスコ１
００本に接種し２８℃で１２０時間、回転振盪機（毎分
１８０回転）上で培養した。

【００４４】このようにして得られた培養液（約１０
Ｌ）から濾過により菌体を分離し、菌体にメタノール
（５Ｌ×２）を加えて抽出した。メタノール抽出液を減
圧下に濃縮してから濃縮物をメチルエチルケトンで抽出
した（１．５Ｌ×２）。メチルエチルケトン抽出液を減
圧下に濃縮し、残留物にクロロホルム／メタノール
（１：１）２００ｍｌを加え可溶部をセファデックスＬ
Ｈ−２０（３×７６ｃｍ）のクロマト用カラムにかけ、
クロロホルム／メタノール（１：１）で溶出することに
より、ＢＥ−４３７６７Ａを含む分画を得た。減圧下に
濃縮乾固することにより、ＢＥ−４３７６７Ａの黄褐色
粉末２３４．７ｍｇを得た。

【００４５】実施例２ＢＥ−４３７６７Ｂの製造法 ：斜面軟寒天培地に接種し
た放線菌ストレプトミセス バージニアＪＣＭ４０９３
株をグルコース０．２％、デキストリン２％、ミートミ
ール０．５％、脱脂米ヌカ０．５％、脱脂肉骨粉０．１
％、乾燥酵母０．０５％、硫酸マグネシウム０．０２５
％、臭化ナトリウム０．０２５％、塩化ナトリウム０．
２５％、リン酸水素二カリウム０．０５％、硫酸第一鉄
０．０００２％、塩化第二銅０．００００４％、塩化マ
ンガン０．００００４％、塩化コバルト０．００００４
％、硫酸亜鉛０．００００８％、ホウ酸ナトリウム０．
００００８％、及びモリブデン酸ナトリウム０．０００
２４％からなる培地（ｐＨ７．２）１００ｍｌを含む５
００ｍｌ容の三角フラスコ２本に接種し、２８℃で７２
時間、回転振盪機（毎分１８０回転）上で培養した。こ
の培養液を２ｍｌずつ上記の培地を１００ｍｌ含む５０
０ｍｌ容の三角フラスコ２本に接種し２８℃で９６時
間、回転振盪機（毎分１８０回転）上で培養した。この
三角フラスコにＢＥ−４３７６７Ａを２０ｍｇずつ加え
２８℃で１６８時間、回転振盪機（毎分１８０回転）上
で培養した。

【００４６】このようにして得られた培養液（約２００
ｍｌ）から濾過により菌体を分離し、菌体にメタノール
（１００ｍｌ×２）を加えて抽出した。メタノール抽出
液を減圧下に濃縮してから濃縮物を酢酸エチル（２００
ｍｌ×２）で抽出した。酢酸エチル抽出液を減圧下に濃
縮し、残留物をセファデックスＬＨ−２０（１．５×５
２ｃｍ）のクロマト用カラムにかけて精製した。クロロ
ホルム／メタノール（１：１）で溶出した目的の分画を
減圧化に濃縮し、次いでセファデックスＬＨ−２０
（１．５×５２ｃｍ）のクロマト用カラムにかけ、メタ
ノールで溶出しＢＥ−４３７６７Ｂを含む分画を得、減
圧下に濃縮乾固して、ＢＥ−４３７６７Ｂの黄褐色粉末
４．３ｍｇを得た。

【００４７】以下に本発明の化合物の製剤例を示すが、
本発明の化合物の製剤は本製剤例に限定されるものでは
ない。

【００４８】製剤例１ 本物質（ＢＥ−４３７６７Ａ） １０部 重質酸化マグネシウム １５部 乳糖 ７５部 を均一に混合して、３５０μｍ以下の粉末状又は細粒状
の散剤とする。この散剤をカプセル容器に入れカプセル
剤とした。

【００４９】製剤例２ 本物質（ＢＥ−４３７６７Ａ） ４５部 澱粉 １５部 乳糖 １６部 結晶性セルロース ２１部 ポリビニルアルコール ３部 蒸留水 ３０部 を均一に混合した後、破砕造粒して乾燥し、次いで篩別
して直径１４１０〜１７７μｍの大きさの顆粒剤とし
た。

【００５０】製剤例３ 製剤例２と同様の方法で顆粒剤を作製した後、この顆粒
剤９６部に対してステアリン酸カルシウム３部を加えて
圧縮成形し直径１０ｍｍの錠剤を作製した。

【００５１】製剤例４ 製剤例２の方法で得られた顆粒剤９０部に対して結晶性
セルロース１０部及びステアリン酸カルシウム３部を加
えて圧縮成形し、直径８ｍｍの錠剤とした後、これにシ
ロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液を加
えて糖衣錠を作製した。

【００５２】製剤例５ 本物質（ＢＥ−４３７６７Ａ） ０．６部 非イオン系界面活性剤 ２．４部 生理的食塩水 ９７部 を加温混合してからアンプルに入れ、滅菌を行なって注
射剤を作製した。

【００５３】

【発明の効果】本発明に記載するＢＥ−４３７６７類は
ＭＲＳＡを含む各種の病原性微生物に対して顕著な抗菌
活性を示し、これらの病原性微生物を起炎菌とする疾病
に対しての抗菌剤として有用である。

【００５４】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｄ 309/10 //(Ｃ１２Ｐ 29/00 Ｃ１２Ｒ 1:465） (72)発明者 小尻 勝久 茨城県つくば市大久保３番地 萬有製薬株 式会社つくば研究所内 (72)発明者 須田 寛之 茨城県つくば市大久保３番地 萬有製薬株 式会社つくば研究所内

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式［Ｉ］ 【化１】 ［式中、Ｒ¹は水素原子又は低級アルキル基を示し、Ｒ²
   は水素原子又は式： 【化２】 で表される基を示す。］で表される化合物又はその薬学
   的に許容しうる塩。
2. 【請求項２】ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
   ｅｓ）属に属し、式［Ｉ−ａ］の化合物を産生する能力
   を有する微生物又はその変異株を培養し、その培養液及
   びその菌体から式［Ｉ−ａ］ 【化３】 で表される化合物を採取し、必要に応じて、式［Ｉ−
   ａ］の化合物を （１）ストレプトミセス属に属し式［Ｉ−ａ］の化合物
   を一般式［Ｉ−ｂ］の化合物に変換しうる能力を有する
   微生物又はその変異株を用いた培養法によって変換し、
   その培養液から一般式［Ｉ−ｂ］ 【化４】 ［式中、Ｒ³は式： 【化５】 で表される基を示す。］を採取する工程 （２）低級アルキルエステル化の工程の二つの工程の
   内、少なくとも一つを行い、必要に応じて薬学的に許容
   しうる塩とすることを特徴とする、一般式［Ｉ］ 【化６】 ［式中、Ｒ¹は水素原子又は低級アルキル基を示し、Ｒ²
   は水素原子又は式： 【化７】 で表される基を示す。］で表される化合物又はその薬学
   的に許容しうる塩の製造法。
3. 【請求項３】式［Ｉ−ａ］ 【化８】 の化合物を産生する能力を有するストレプトミセス（Ｓ
   ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属に属する微生物又はその変
   異株。
4. 【請求項４】微生物が、ストレプトミセス エスピー
   （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．）である請求項３
   記載の微生物又はその変異株。
5. 【請求項５】微生物が、ストレプトミセス エスピー
   Ａ４３７６７（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ． Ａ
   ４３７６７）である請求項３記載の微生物又はその変異
   株。
6. 【請求項６】一般式［Ｉ］ 【化９】 ［式中、Ｒ¹は水素原子又は低級アルキル基を示し、Ｒ²
   は水素原子又は式： 【化１０】 で表される基を示す。］で表される化合物又はその薬学
   的に許容しうる塩を有効成分とする抗菌剤。