JPS63310835A

JPS63310835A - 免疫調節剤

Info

Publication number: JPS63310835A
Application number: JP62146767A
Authority: JP
Inventors: Masato Kobori; 正人小堀; Kunihiko Ishida; 石田　邦彦
Original assignee: Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1987-06-11
Filing date: 1987-06-11
Publication date: 1988-12-19

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、　ＳＣＭ−１２７物質を有効成分とじて含有
する医薬、殊に免疫調節剤に関する。

（発明を解決するための手段）本発明医薬の有効成分であるＳ　ＣＭ−１２７物質は、
つぎの理化学的性状を有する化学物質である。

（ｉ）融点：１５３〜１５８℃（ｉｉ）元素分析値（Ｃ２５Ｈ３０ＮＯ８ＰＮａ・　２　
Ｈ２Ｏとして）ＣＨ，Ｎ　　　　Ｐ理論値（彌　　５２．５３　７，５８　２，４５　５．
４２実測値（憎　　５２．１３　７．２６　２，５０　
５．１４（ｉ１０赤外部吸収スペクトル：第１図（ＩＶ
）　水素核磁気共鳴スペクトル：第２図（ｖ）炭素−１
３核磁気共鳴スペクトル：第３図（ｖ−分子量：　５１
３　（ＦＡＢマススペクトルによる）（ｖｉ［ｌ紫外部
吸収スペクトル：第４図酢酸エチルに難溶　　　　　　
　　　　゛ぐ（Ｘ）薄層クロマトグラフィーでのＲｆ値
：Ｒｆ値　展開溶媒０．３８　　７セトニトリルー水混液（混合比５：２）
０．３１　　　ｎ−プロパノ−ルー水混液（、＝３：１
）（但し、シリカゲル６０Ｆ２．（メルク社製）薄層ク
ロマトグラフィーグレートを使用し、　ＵＶ　２５４　
ｎｍ　　で検出した。）ＳＣＭ　　１２７物質は２本発明者等がストレプトミセ
ス属に属する微生物の培養物から分離した化合物で、そ
の製造法は後述する（参考側参照）。

本発明者等は、ＳＣＭ−１２７物質の薬理活性を検討し
たところ、この化合物が免疫調節作用を有し、且つ毒性
が極めて低いことを見出した。

ＳＣＭ−１２７物質は、以下の試験結果から明らかなよ
うに、宿主の感染防禦能の増強、担癌マウスの免疫抑制
状態の回復、マクロファージの抗腫瘍活性誘導等の免疫
調節作用を有し、しかも毒性が低い。したがって、ＳＣ
Ｍ−１２７物質は免疫調節剤として使用できるものであ
る。

（実施例）つぎに、有効成分ＳＣＭ−１２７物質についてその薬理
作用および毒性等を試験方法と共に示す。

＋１）　　ＳＣＭ−１２７物質の宿主感染防禦能増強作
用１群１０匹のＩＣＲマウス（雌、８週令）に。

５Ｘ１０’個のＬｉ５ｔｅｒｉａ　ｍｏｎｏｃｙｔｏｇ
ｅｎｅｓを尾静脈投与して感染させた。ＳＣＭ−１２７
物質０．４　ｓ　ｍｇ／ｋｇ　。

０９０■″Ａｇ又は１．８ｆｆ１ｇ／ｋｇを感染７，５
オよび３日前、計３回皮下投与し、マウスの生存数を１
２日間計測した。対照群には、生理食塩水を同様に投与
した。１２日目上生存しているマウスは全て生存期間を
１３日間とみなし、各々の群について平均生存日数を計
算した。

その結果を表１に示す。

表１から明らかなように、ＳＣＭ−１２７物質投与によ
り宿主の感染防禦能は著しく増強した。

表１１２　　０　　　０．２０３０最下段を除き、生存率を示す。

※無装置対照群との有意差有り（を検定による）。

Ｐ＜０．０１（２）担癌マウスにおけるナチュラルキラー活性の低下
Ｃ５７ＢＬ／６マウス（雌、６週令）に、ＥＬ−４胸線
リンパ腫細胞をマウス１匹当り、２Ｘ１０’個皮下移植
した。ついでＳＣＭ−１２７物質０．９ｍｇＡｇ。

１．８　ｒｒＴｇＡｇ　、を癌細胞移植後０．１８目に
計２回皮下投与し、移植後１３日目上、それぞれのマウ
ス牌細胞のナチュラルキラー活性を　５１Ｃｒで標識さ
れたＹＡＣ−１白血病リンパ腫細胞を用いて＋　”Ｃｒ
　ｒｅｌｅａｓｅ法により測定した。

表２に担癌マウスにおける免疫抑制状態およびＳＣＭ−
１２７物質によるその免疫反応回復を示す。

表２から明らかなように、　ＳＣＭ−１２７物質投与に
より担癌マウスのナチュラルキラー活性は著しく回復し
た。

表２プロテオースペプトンで誘導したマウス腹腔マクロファ
ージを、試験管内で、各種希釈濃度のＳＣＭ−１２７物
質存在下で培養した。培養後のマクロファージの抗腫瘍
活性を５１Ｃｒで標識されたＰ８１５肥満細胞腫を用い
、　”Ｃｒ　ｒｅｌｅａｓｅ法により測定した。その結
果は表３のとおりである。

表３から明らかなように、ＳＣＭ−１２７物質はマクロ
ファージの抗腫瘍活性を誘導する。

表３（４）　　毒性Ｃ５７ＢＬ／６系マウスを用い、ＳＣＭ−１２７物質を
３ｍｇ／ｋｇ皮下投与したが、死亡例はなかった。

（効果）上記試験結果より、ＳＣＭ−１２７物質はすぐれた免疫
増強作用を有する一方、毒性が低（・ので免疫増強剤と
して有用である。

本発明の免疫調節剤の臨床投与量は経口または主剤の場
合、活性成分として成人１日当り５０〜２００■、好ま
しくは８０〜１２０Ｉ［１ｇであり、これを１〜４回に
分けて投与する。この投与量は。

患者の状態や他剤との併用２年令等個々の場合に応じて
適宜調節される。

投与の列形は、経口の場合２錠剤、カプセル剤、顆粒剤
、シロップ剤が用いられ、非経口の場合、主剤、注射剤
が利用できる。経口投与剤の調製に際しては用いられる
賦形剤としては乳糖、デンプン、シヨ糖、タルク、ステ
アリン酸マグネシウム、ソルビット、微結晶セルロース
。

カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセル
ロースが挙げられる。主剤の調製に用いられる基剤とし
ては、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、
ウイテプゾル（商品名、ダイナミツトノーベル社製）が
挙げられる。

以下にカプセル剤の調製例を示す。

カプセル剤の調製例ＳＣＭ−１２７物質　　　　　　　２００　ｍｇ乳　　
　糖　　　　　　　　　　　　　　　　２０５　ｍｇ結
晶セルロース　　　　　　　　５０１１ｒ１ｇヒドロキ
シグロピルセルロース　　　　１５ｒｒｊｇデンプン　
　　　　　　　　　　　２５１ｒ＠００ｍｇ上記の組成に従〜・主薬、乳糖、結晶セルロースヲ混合
し、ヒドロキシプロピルセルロース水溶液を加えて練合
整粒し、乾燥後、デンプン。

ステアリン酸マグネシウムを加えて混合し、１号ゼラチ
ンカプセルに充填してカプセル剤を製する。

つぎに、ＳＣＭ−１２７物質の製造法を参考例によって
説明する。

（参考例）グルコース０５％、グリセリン１．０％、デキストリン
２．０％、大豆粉０５％、肉エキス０３％、ポリペプト
ン０．５％、イーストエキストラクト０５％。

プレンハートインフユジョ／ブイヨン培地（栄研）０５
２％、炭酸カルシウム０２％を含む培地（ｐＨ８，０）
　１２０　ｍｌを５００　ｍｔ容三角フラスコに分注し
、１２０°Ｃ２０分間滅菌したのち、寒天培地上に生育
させたストレプトミセス・パイグロスコピカス拳すフ゛
拳スピーシズφルテオラス・サフ゛・スピーシズ・ノブ
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃ
ｕｓ　ｓｂ。

ｓｐ、　１ｕｔｅｏｌｕｓ　ｓｂ、ｓｐ、　ｎｏｖ　）
と命名したＳＣＭ−１２７物、質産生株（微工研菌寄第
８８２２号）を接種し、毎分２２０回転のロータリー　
シェーカーで２８°Ｃ２４８時間振盪培養する。次に、
この培養液を同様に調製した滅菌培地２０本（ｉ２０ｍ
ｌ／　５００　ｍｌ容三角フラスコ）に４　ｍｌずつ接
種し同様に培養する。

本培養用培地として、デキストリン１．０％、Ｄ−マン
ノース１，０％、大豆粉１．０％、ファーマメディア０
５％、硫酸マグネシウム０．０５％、リン酸水素二カリ
ウム０．０５％、アデカノール０．０３％を含む培地（
ｐＨ７，０）　８０ｔを１５０６容培養槽に入れて。

上記培養液２０本全量を接種し２通気量８０ｔ／分攪拌
速度１５０回転／分で２８°Ｃ２９０時間通気攪拌培養
を行う。培養終了後４Ｎの塩酸を加えてｐＨ７，０に調
整したのち、ラジオライ）＄６００（昭和化学工業■製
）を加えて吸引濾過する。この培養Ｐ液７２１をダイヤ
イオンＨＰ　−２０（三菱化成工業にに製）７．２ｔを
充填したカラムに吸着せしめ。

水２２ｔで洗浄後５０％アセトン水溶液２２ｔで溶出す
る。

活性画分を減圧下に６６まで濃縮したのち。

濃縮液をｐＨ７，０に調整し、酢酸エチル６ｔを加えて
分液する。水層を分離したのち、４Ｎ水酸化ナトリウム
でｐＨ８，０に調整し、　ｎ−ブタノール６ｔを加えて
さらに分液する。ｎ−ブタノール層を水洗後減圧濃縮す
ると８ｇのブタノール抽出物が得られる。

この抽出物をｎ−プロパツール：水＝５＝１混液に溶解
し、ワコーゲルＣ−２００（和光紬薬せ、同混液でカラ
ムクロマトグラフィーな行い活性画分を集めて減圧濃縮
すると４５０１１１ｇの活性物質が得られる。

これをア七トニトリル：メタノール：水：イソプロパノ
ール＝１８：８：６：２かも成る溶液に溶解し、シリカ
ゲルクロマトグラフィー（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ　６０　
（メルク社製）　４１ｇ　）に供する。　同溶液で展開
、溶出する活性画分を集めて減圧濃縮すると１２０■の
活性物質が得られる。さらにこの物質をアセトニトリル
：水＝５：１の溶液に溶解し同溶液で展開するシリカゲ
ルクロマトグラフィー　（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ　６０υ
ルク社製ン１０ｇ）を行　１う。活性画分を集めて減圧
濃縮すると４５ｍｇの活性物質が得られる。これをＯＤ
Ｓ−４２５１−ＡＭ（ｉ０１Ｘ　２５０ｍｍ、センシー
ウ科学■製）を担体とするる。活性画分を集め、濃縮し
、濃縮液を３０％メタノールに溶かし、　ＨＰ　　２０
（５ｍＺ）を充填したカラムに吸着せしめ、水５０　ｒ
ｎｔで洗浄後、５０％アセトン水１５ｍ７で溶出し、減
圧濃縮して純粋な白色粉末として活性物質９ｍｇを得た
。本物質は高速液体クロマトグラフィーで単一ピークを
示す。本物質の理化学的性状は前述の通りである。なお
２本物質の活性区分の確認にはカンジダアルビカンスＡ
ＴＣＣ１０２３４を用いる生物検定。

高速液体クロマトグラフィーを用いて行った。

【図面の簡単な説明】第１図は、　ＳＣＭ−１２７物質の光外部吸収スペクト
ルを示す。第２図は、ＳＣＭ−１２７物質の水素核磁気共鳴スペク
トルを示す。第３図は、ＳＣＭ−１２７物質の炭素−１３核磁気共鳴
スペクトルを示す。第４図は、ＳＣＭ−１２７物質の紫外部吸収スペクトル
を示す。手続補正書昭和６２年２月シ；日

Claims

【特許請求の範囲】１、つぎの理化学的性状を有するＳＣＭ−１２７物質を
有効成分として含有する免疫調節剤（ｉ）融点：１５３〜１５８℃ （ｉｉ）元素分析値（Ｃ＿２＿５Ｈ＿３＿０ＮＯ＿８Ｐ
Ｎ＿ａ・２Ｈ＿２Ｏとして）　　　　　　　Ｃ　　　　　Ｈ　　　　Ｎ　　　　Ｐ理論値（％）　５２．５３　７．５８　２．４５　５．
４２実測値（％）　５２．１３　７．２６　２．５０　５．
１４（ｉｉｉ）赤外部吸収スペクトル：第１図（ｉｖ）水素核磁気共鳴スペクトル：第２図（ｖ）炭素−１３核磁気共鳴スペクトル：第３図（ｖｉ）分子量：５１３