JPS63156726A

JPS63156726A - 骨疾患治療剤

Info

Publication number: JPS63156726A
Application number: JP30355886A
Authority: JP
Inventors: Kenji Namita; 波多　賢治; Nobuyuki Miyajima; 宮島　信幸; Moriaki Higo; 盛明肥後; Junichi Nakayama; 順一中山
Original assignee: Lion Corp
Current assignee: Lion Corp
Priority date: 1986-12-19
Filing date: 1986-12-19
Publication date: 1988-06-29
Anticipated expiration: 2011-08-21
Also published as: JP2527317B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、骨疾患、例えば前孔症、ベーチェット病、リ
ュウマチ関節炎、骨折、骨移植、抜歯後の歯槽骨吸収等
の治療に用いられる薬剤に関するものであり、特に骨の
石灰化作用を促進させ、骨の強度向、上及び修復作用を
有する温血動物用の骨疾患治療剤に関するものである。

〔従来技術〕

これまでに、骨疾患の治療に関して種々の検討が行なわ
れている。例えば、同化ステロイド、エストロゲン、ポ
リリン酸塩、活性型ビタミンＤ３誘導体、プロスタグラ
ンジン類、バラサイロイドホルモン（ＰＴＨ）−、フッ
化物、カルシトニン、芳香族カルボン酸類などである。

しかしながら、同化ステロイド、エストロゲンは副作用
が強く、ポリリン酸塩は副作用が強い上に、骨吸収抑制
作用しか示さないという欠点がある。また、活性型ビタ
ミンＤ３誘導体、プロスタグランジン類、バラサイロイ
ドホルモンは、局所的には骨吸収作用を示し、石灰化と
相反する作用を有しており、使用がむずかしい。一方、
フッ化物及びカルシトニンは、骨吸収抑制作用のみを有
し、芳香族カルボン酸類は、骨吸収抑制作用と石灰化作
用を有するが、石灰化作用が低いという欠点がある。

〔発明が解決しようとする問題点〕

従って、本発明は、安定性が高く副作用もなく、かつ骨
吸収抑制作用とすぐれた石灰化作用とを有する温血動物
用の骨疾患治療剤を提供することを目的とする。

〔問題点を解決するための手段〕

骨が骨基質（主にコラーゲン）と骨塩（ヒドロキシアパ
タイト）とから成り、形成と吸収を繰り返しているダイ
ナミックな生物体であり、その形成と吸収のバランスが
くずれると正常の骨形成が行なわれないこと、そして骨
形成を司るのは、骨芽細胞（ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔ　）
であり、骨や歯などの硬組織形成に伴いアルカリフォス
ファクーゼ活性が上昇すること、また骨吸収を司るのは
破骨細胞（ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔ　）であることから、
結局、正常な骨を形成するためには骨芽細胞の活性を増
加させる必要があることを見出した。この観点から多数
の化合物について検討を行ったところ、キチン、キトサ
ン及びその誘導体を用いると上記の問題点を解決できる
ことを見出し、これに基づいて本発明をなしたのである
。

すなわち、本発明は、キチン、キトサン及びその誘導体
の群から選ばれる少なくとも１種を有効成分とする骨疾
患治療剤を提供するものである。

本発明に用いられるキチンは、一般式（Ｉ）で示すよう
に、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンがβ−１，４で結
合したものであり、キトサンはその脱アセチル化物であ
って、一般式（ｎ）で表わされる。

本発明では脱アセチル化率が６０％以上のものをキトサ
ンと定義し、キチンには、実質上すべての構成単位がＮ
−アセチル−Ｄ−グルコサミンであるものの他に脱アセ
チル化率が６０％未満の一部脱アセチル化物も包含する
ものとする。

キチンまたはキトサンとしては解重合して低分子化した
オリゴマーも使用することができ、高分子量の水不溶性
キチンまたはキトサン（ｎ＞３５）および低分子化水溶
性キチンまたはキトサン（１＜ｎ＜３４）またはモノマ
ーのいずれもが使用できる。

また、キトサンと有機酸もしくは無機酸との塩、Ｎ−置
換体、またはキチン、キトサンの〇−置換体などの各種
誘導体も本発明で用いられる。これら誘導体の具体例を
、一般式とともに次に例示する。

（Ａ）キトサンと有機酸または無機酸との塩（式中、Ｘ
は有機酸または無機酸のアニオン残基を表わす。）ここで、有機酸としては酢酸、プロピオン酸、酪酸、乳
酸、マロン酸、コノ＼り酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石
酸、マレイン酸、フマル酸等の炭素数２〜１０のカルボ
ン酸、炭素数１０から２０のアルキルベンゼンスルホン
酸、炭素数１０から２０の脂肪族オレフィンスルホン酸
、炭素数１０から２０のアルキルリン酸エステルなどが
、また無機酸としては塩酸、硫酸、リン酸などが例示さ
れる。

（Ｂ）　　○−ヒドロキシアルキルキチンまたはキトサ
ン式中、ｍは１〜４であり、Ｒは水素又はアセチル基を表
わす。）（Ｃ）　　〇−カルボキシアルキルキチンまたはキトサ
ンあるいは、それらの塩（式中、Ｚｌ　は−ＣＩＩ２ＣＯＯＭ　、　−ＣＨ２Ｃ
Ｈ２Ｃ００Ｍ。

−ＣＨ２０８２０８２０００Ｍ（ＭはＨ１アルカリ金属
あるいは有機アンモニウム塩を示す）等のカルボキシレ
ート基を表わし、Ｚ２は−ＨまたはＺｌであり、Ｒは−
Ｈまたはアセチル基を表わす。）（Ｄ）　Ｎ−アシルキ
トサン（式中、ＲＩはホルミル、プロピオニル、ブチリル、ス
テアロイルなどのアルキルカルボニル基、オレイルなど
のアルケニルカルボニル基１、クロルアセチノペグリシ
ノペサクシニルなどの置換アルキルカルボニル基などの
アシル基を表わす。）（Ｂ）　　Ｎ−アルキリデンまたはＮ−アリリデンキト
サン（式中、Ｒ２は−Ｈ、−Ｃ）１Ｇ　、−Ｃ２Ｈ５などの
炭素数１〜５のアルキル基、　ＣｅＨｓ、−Ｃ，Ｈ２Ｎ
０□、−Ｃ６Ｈ，Ｆ　、−Ｃ６Ｈ２Ｃｊｌ！、−Ｃ，Ｈ
，０ＣＩＩ３、　　Ｃ５ＨａＯ１ｌ。

−Ｃ６Ｈ３（ＯＣＨ３）　２などを表わす。）（Ｆ）０
−アシルキチンまたはキトサン（式中、Ｒ３は−ＣＯＣ
Ｈ３、−ＣＯＣ２Ｈ，などのアシル基であり、Ｒは−Ｈ
またはアセチル基を表わす。）（Ｇ）硫酸化キチンまたはキトサンあるいはそれらの塩（式中、ＭはＨ、アルカリ金属あるいは有機アンモニウ
ム塩であり、Ｒ４は−Ｈ１アセチル基または一３０３Ｍ
を表わす。）（Ｈ）　　リン酸化キチンまたはキトサンあるいはそれ
らの塩Ｚ３であり、Ｍｌ、Ｍ２はＨ１アルカリ金属あるいは有
機アンモニウム塩であり、Ｒは−Ｈまたはアセチル基を
表わす。）上記有効成分である薬剤は、２種以上混合して用いるこ
とができる。

本発明の骨疾患治療剤は、疾患部位への注射、内服等種
々の投与方法を採ることができる。また投与量としては
、体重１ｋｇ当り、１日につき０．０１〜１０００ｍｇ
、好ましくは１〜２００ｍｇである。

投与形態としては、例えば、圧縮錠剤、被覆錠剤、硬ま
たは軟弾性ゼラチン力プセノペエタノール溶液、油性ま
たは水溶液または懸濁液、塗布剤等があげられる。なお
、製剤化にあたっては、安定化を目的としてβ−シクロ
デキストリン等の水溶性高分子物質による包接化合物と
して用いることができる。

本発明の骨疾患治療剤には、さらに製剤化（安定化）の
ためにグリセリン、ソルビトール、プロピレングリコー
ノベポリエチレングリコーノペデキストラン、メチルセ
ルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメ
チルセルロース、ゼラチン、アルギン酸塩、トラガント
、ペクチン、アラビアゴム、可溶性デンプン等を添加す
ることができる。

本発明で用いる有効成分は安全性の高いものである。

表−１に安全性のデータを示す。

表−１＊　平均分子量：５０００〔発明の効果〕本発明の骨疾患治療剤によれば、薬剤が骨芽細胞に直接
作用し、その分化誘導を促進させ、骨ミネラル合成を促
進するアルカリフォスファターゼ活性が上昇し、骨基質
の形成及び骨の石灰化が促進され、骨の強度向上及び修
復作用が行なわれる。

従って、管孔症、バーチエツト病、リュウマチ関節炎、
骨折、骨移植、抜歯後の歯槽骨吸収等の骨疾患に対して
すぐれた効果を発揮するものである。

このうちでも抜歯等により減少した歯槽骨の補修に対し
ては、口腔内投与により薬剤が直接疾患部位に作用し、
骨の修復が行なわれるので、特に効果的である。

次に実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明
はこれらに限定されるものではない。

〔実施例〕

実施例１分子量２．２００．　ＯＯＯ１脱アセチル化率９６％の
キトサン１０ｇを５％酢酸水溶液１００ｒｒ＋ｊ！に溶
解させ、これに特願昭６１−４２６１３号に記載される
方法、具体的にはアルカリ土類金属ＭＨＫ−１株（微工
研菌寄第８６６２号）により生産したキトサナーゼ１０
０Ｕを加えて４５℃１５時間反応させて平均分子量１５
００の低分子化キトサンを得た。

この低分子化キトサンを用いＩｎ　ｖｉｔｒｏでアルカ
リフォスファターゼ活性の測定を行なった。結果を表−
２に示す。なおアルカリフォスファターゼ活性の測定は
、栗原ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏ−
ｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｃｏｍｍｕｎｉ
ｃａｔｉｏｎｓ　ｌ　ｌ　９　（２）７６７〜７７１　
（１９８４）に記載の方法にもとづいて、次のようにし
て行なった。

活性測定法新生仔マウスＣ５７ＢＬ／６の頭蓋冠より取出され、３
Ｔ３方式で継代し、アルカリフォスファターゼ活性最高
のクローンであるＭＣ３Ｔ３−Ｅ１細胞を分離した。こ
の細胞３０万個を３５＋＋＋ｍプラスチックシャーレに
入れ、１０％牛脂児血清を含むα−ＭＥＭ　（フロー・
ラボラトリ−社）２ｍＩｌを加え、２０間培養した。次
に種々の濃度の低分子化キトサンを含み、かつ０．１％
牛血清アルブミンを含むα−ＭＥＭ２ｍβに交換して２
日間培養した。この後、細胞をリン酸緩衝液で２回洗浄
し、０．２％ノニデットＰ−４０水溶液２ｍｊ！を加え
て細胞を解離し、５分間超音波により細胞を破壊した。

この上清液０．２ｍｌと、１０ｍＭ’Ｊン酸ｐ−ニトロ
フェニル水溶液０．８ｍｌとを３７℃で２０分間反応さ
せ、０．２Ｎ　ＮａＯＨ２ｍｊ２を加えて反応を停止し
、４１０ｎｍの吸光度を測定し、アルカリフォスファタ
ーゼ活性を求めた。

表−２数値は平均値上標準偏差を示す（以下同じ）。

実施例２分子量１１４，０００、脱アセチル化率６０％のキトサ
ン１ｇを５％乳酸水溶液１００ｍｊ２に加えて均一溶液
を得た。このキトサン・乳酸塩を、薬剤として、低分子
化キトサンの代わりに用いたほかは、実施例１と同様の
方法でアルカリフォスファターゼ活性を測定した。結果
を表−３に示す。

表−３実施例３分子！１１４．　ＯＯＯ１脱アセチル化率４８％のキチ
７５０ｇをエタノール２５０ｍＬ水５０ｍｊ２及びＮａ
Ｏ８４５ｇよりなる混合液中に室温で１時間懸濁後、モ
ノクロル酢酸Ｎａ４０ｇを水、５０ｍ１ｌ及びエタノー
ル１５０ｍ１よりなる混合液中に懸濁させたものを加え
、攪拌下に５時間かけて加熱しながら還流させた。反応
後、生成物を濾過し、乾燥してカルボキシメチルキチン
を得た。このカルボキシメチルキチンを、薬剤として、
低分子化キトサンの代わりに用いたほかは、実施例１と
同様の方法でアルカリフォスファターゼ活性を測定した
。結果を表−４に示す。

表−４実施例４分子量４７．０００、脱アセチル化率７７％のキトサン
１ｇをジシクロへキシルカルボジイミド１ｇの存在下、
ピリジン５０ｍｊ２中で塩化プロピオン酸５ｇと反応さ
せることにより、Ｎ−プロピオニル化キトサンを得た。

このＮ−プロピオニル化キトサンを、薬剤として、低分
子化キトサンの代わりに用いたほかは、実施例１と同様
の方法でアルカリフォスファターゼ活性を測定した。結
果を表−５に示す。

表−５

Claims

【特許請求の範囲】

（１）キチン、キトサン及びこれらの誘導体からなる群
から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とす
る骨疾患治療剤。
（２）注射剤又は経口投与の形態にある特許請求の範囲
第（１）項記載の治療剤。