JPS5988424A - 医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 本発明は、本出願人による１９８１年４月６日本出願人
による先の出願は、止血の方法に関するものであった。

この先の出願の後に、本発明者は、キト−サンが繊維増
殖を阻害し、かつ組織再生の促進に使用可能であること
を発見した。

創傷の治癒における膠原質の合成の阻害方法については
、長い間、研究が成さｎて＠た。膠原質の合成阻害につ
いての研究のほとんどは、種々の化学的拮抗質による膠
原質の生物学的変質に関するものであった。

下等動物は、鍛痕組織によって治癒することはできない
が、既存の細胞から、正常な構造体を再生することがで
きる。

通常の創傷治癒は、ブイプリン網を含む血塊ができるこ
とがら始せシ、そｎと共に、繊維芽細胞によって繊維増
殖が始まる。血液の損失が、フィブリン塊の存在によっ
て制御さｎる時は、繊維芽細胞は刺激を受ける。逆に言
えば、血液の損失が、フィブリン塊の欠乏によって制御
さｆＬる際には、繊維芽細胞は刺激を受けず、分化細胞
が失なわｎた組織と交替する機会を得ることになる。

そのため、通常の血塊因子が無い場合に血液の損失を制
御し、かつ通常の組織素材の内方への成長を助長する物
質が必要であることが判明した。

すでに、キチンと数種類のキチン誘導体は、創傷治癒の
最初の数日間に、膠原質の繊維合成を促進することによ
って、創傷の張力を大きくすることが判明している。そ
ｆ′Ｌｉｌ″！：、アメリカ合衆国特許第３，９０２，
２６８号明細書、同第３，９１１．＋１６号明細書、及
び同第３，９１４，４１３号明細書に開示さｎている。

この問題については、１９７０年５月発行の「アメリカ
ン・ジャーナル・オブ・サージエリ−（Ａｍｅｒｉｃａ
ｎ　Ｊｎｕｒｎａｌ　　ｏｆ　５ｕｒｊｅｒｙ　）　Ｊ
　　の５６０−？−ジ乃至５６４ページに記載さ几てい
る。

また１９６９年６月発行の［ニス・ジー・アンドオーＣ
８，Ｇ、＆Ｏ）Ｊの１６２１ズージ乃至１３２６に−ジ
にも記載ｄｆＬでいる。

しかし、従来の文献は、キチンとその誘導体に対して論
じているのみであシ、本発明による脱アセチル化キト−
サンは、そｎとは性質が全く異なるものである。そｎに
ついては、後で詳しく説明する。

天然キチンの基本的構造は、Ｎ−アゼチルグルコサミン
のポリマーである。しかし、バラノサ（Ｂａ１ａｓｓａ
　）は、数種類の分子構造の変更と鎖の短縮について論
じているが、各単量体上のＮ−アセチル構造については
、その１１としている。

本発明の第１の目的は、止血効果を有し、繊維増殖を阻
害し、かつ細胞の再生を促進はせ、もって、組織創傷の
治療に有効な方法を提供することにある。

本発明の第２の目的は、キト−サンの溶液、又は固体キ
ト−サンのシート、粉末、もしくは繊維を、細織創傷に
接触させ、そ几によって出血を防止し、かつフィブリン
繊維の形成を防ぐために生じた血塊を破壊するために、
凝塊を形成芒せることにある。この凝塊は繊維芽細胞の
増殖と膠原質の合成を防止し、通常の細胞再生を促進−
ｇ−ｖる。

本発明の第６の目的は、キト−サンを血管組織移植片に
接触させ、もしくはその移植片材料内にキト−サンを混
入して、血管組織移植片内の繊維増殖を阻害し組織再生
を促進させる方法を提供烙せることである。

本発明の第４の目的は止血の方法を提供させることであ
る。

こｎらの目的やその他の目的については、以下詳しく説
明するところによシ、関係者には容易ｔτ理解きｎるも
のと思う。

パランサ（Ｂａ１ａｓｓａ　）がアメリカ合衆国特許第
３，８０４，９４９号明細書において開示している「キ
チンＪＵ、天然のキチンと、ポリマー（Ｎ−アセチルグ
ルコサミン）と、そのエピマーポリ（Ｎ−アセチルガラ
クトサミン）のような合成のキチンを指している。

キチンは、ロブスタ−、シュリンプ、又はその他の甲殻
類や菌類から得らｎる。キト−サンは、キチンの一誘導
体であシ、キト−サンの調整方法は、アメリカ合衆国特
許第３，５３３，９４０号明細書に開示さ几ている。そ
几は、本発明による方法の一部を成している。

本発明で用いらｎるキト−サンは、脱アセチル化キト−
サンである。

本発明で用いるキト−サン材料を分析した結果、キト−
サン材料から、アセチルのほとんど（７８乃至９２係）
が除去さｎてお９、かつほとんどのグルコサミン単量体
の２位の炭素上に、活性遊離アミン基（ＮＨ２）が残存
していることが判った。

本発明の方法で用いらｎるキト−サンは、部分脱アセチ
ル化キチンであシ、またβ−１−４グリコシド結合によ
って結合式ｉたポリグルコサミンを形成し、かつ２位か
らほとんどのアセチル基が除去さｎている部分的解重合
キチンである。

分子量の定量は、ウー（Ｗｕ　）とボー（Ｂａｕｇｈ　
）の方法によって行うものとする。（「ジャーナル・オ
フ・クロマトグラフィー（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＣｈｒ
ｏｍａｔｏｇｒａｐｂｙ　）Ｊ　Ｉ　２８号、８７ペー
ジ乃至９９ば一部（１９７６年版）参照。） キト−サンの脱アセチル化の程度は、ヘイズ（Ｈａｙｅ
ｓ）とデーヴイス（Ｄａｖｉｅｓ　）の方法に依るもの
とし、それについては、「プロシーディンゲス・オフ・
ザ・ファースト・インターナショナル・コンフエレンス
・オン・キチン／キト−”ｊン（Ｐｒｏｑｅｅｄｉｉｎ
ｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ
ｏｎａｌＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｎ　Ｃｈｉｔｉｎ／
　Ｃｈｉｔｏｓａｎ）の１９７８年版１９６ズージ乃至
１９９ページに記載てｎでいる。

生理学的性質及び化学的性質で限定Ｊ、ｆＬるキト−サ
ンは、節足動物の外骨格、もしくは菌類の細胞壁のよう
な自然界から得ら几る材料の脱アセチル化、及び解重合
化を調節することによって調整きｎる。

本発明で用いらｎるキト−サンとしては、例えば、アメ
リカ合衆国ワン／トン州ベルヴユー、カールソンビル２
０８に所在するキプロインコーポレイテッド（Ｋｙ　ｐ
　ｒ　ｏ　ｒ　Ｉ　ｎ　ｃ　ｒ　）が、商標名「Ｃｈｉ
ｔｏｓａｎ−Ｈｉｇｈ　ＶｉｓｃｏｓｉｔｙＪ　トして
売ッテイルモノカ適当である。

このキト−サンは、ポリマーの混合物であり、分子量１
ｌ−１：１ｏ、ｏ６ｏ乃至２，０５５，０００で、各分
子は、７８乃至９２係まで脱アセチル化ざｆている。こ
九らのキト−サンを試験したところ、最も豊富な分子は
、分子量１．４８７．０００乃至１．６８２．０００で
あり、分散度５での数平均は、ｊ２９．Ｏ’００乃至５
２２．０００であった。生成物は、７８乃至９２％、平
均で８５％脱アセチル化さｆ′したものである。

キト−サンは、溶液のもの、又は繊維、シフト、粉末の
ような固体のものも使用しいる。

後で挙げる種々の実施例において用いらｆしたキト−サ
ンは、前記キプロインコーポレイテッドから購入したも
のであるが、「キト−サン」という言葉は、キチンを部
分的に脱アセチル化して得らｎる誘導体を示すものとし
て、業界では認識されている。

以下に挙げる実施例で使用したキト−サンは、種々の業
者より購入したものである。

次に、キト−サンを種々の実施例で使用し得るように調
整するための好ましい方法及び割合について、詳しく説
明する。しかし、後に示す我人け、本発明によるキト−
サン材料の（好捷しい、もしくは許容しつる９性質を示
すものである。

様々な方面より入手した解重合状態、もしくけ脱アセチ
ル化状態のキト−サンを、固体材料を溶解はせるのに必
要な最小量の酢酸を含む蒸留水内に、１１轟シ２ｇの濃
度で溶解はせる。好適な止並用キトーサン溶液は、キト
−サン２ｇを、９９８．５ｍｌの蒸留水と、１．５　ｍ
ｌの氷酢酸内に溶解して調整したものである。

この混合液を、２時間乃至３時間、室温で攪拌し、Ｉ）
Ｈカ４．ｌ±０．：２テあルキトーサ７の０．０２６Ｎ
の清澄な酢酸溶液を生成きせる。この溶液は、４℃で保
存することが望ましい。

止血用キト−サン繊維マットは、適量の殺菌溶液を、殺
菌したシリコーン塗布のチューブに注入し、その溶液を
、−６０℃で結晶苫せ、凍結乾燥させることによって調
整する。

チューブの直径を変化させたシ、チューブを冷凍庫内に
直立寸たは側面を下にして置くことによって、短く太い
プラグ、菫たは長い薄片が得られる。２．５　ｍｌのキ
ト−サン溶液を用いて、５ｍ９のマットを生成させるの
が望ましい。

キト−サン薄膜は、溶液の薄片を、凍結さぞずに、平た
いテフロン板上で乾燥させることによって調整で７しる
。平たい繊維マットは、薄膜よりも取り扱いが容易であ
ることが判明（−でいる。

止血用のキト−サン粉末は、マットを滅菌モルタル及び
はストルと共に研摩して調整でｎる。キト−サン止血剤
の中に、繊維シートや管状移植片を浸漬して、表面に接
着てせた９、繊維の割九目内で、キト−サン繊維や非結
晶性のキト−サンを乾燥させることによって、繊維シー
トや管状移植片にキト−サン止血剤を混入きせる。

キト−サン止血剤は、２ミクロンのフィルターを介して
濾過することによって滅菌できる。しかし、この方法は
、時間がかかり、かつ収量は少ない。また、キト−サン
溶液を蒸気オートクレーズにかけると、凝固生成効果は
著しく減少する。

酢酸キに一サンや塩化水素酸キ［・−サン溶液や凍結乾
燥した固体（塩）は、１００℃程度で熱に対して不安定
であるので、キト−サン止血溶液や、繊維や粉末は、調
整後に滅菌するよりも、滅菌性キト−サンから調整する
必要がある。

以下説明する本発明の実施例で用いた最良のキト−サン
は、熱安定性がよく、かつ１２１°Ｃ（２５０°Ｆ）に
おいて、蒸気オートクレーブ内で滅菌したものである。

本発明者は、シュリンプと２種類のクラブ、及び２種類
の未知の取得源（実用等級キト−サン）から得たキト−
サンを、様々の濃度の酸溶液として、試験管内の酸溶液
や犬の皮膚切開部に接触させると止血凝塊が生成するこ
とを発見した。

４２％だけ脱アセチル化さｎたキト−サンは、溶液とし
て、１．　ＯＮ以下の酸を必要とした（その際いくらか
の固体が残渣する）。

ポリグルコ−サミン（１００％脱アセチル化キト−サン
）は、優良な凝塊を生成したが、試験の量が少量であっ
た。

低粘度もしくは粘度が中位のキト−サンは、容易に溶解
し、ｐ膜で迅速に殺菌烙ｎだ。しかし、凝塊の安定性は
、溶液中に最も多く存在するポリマーの分子量に直接比
例した。

以下の実験によシ、キト−サンが、繊維の増殖を防止し
、かつ組織再生を促進させることが判明した。

前記パランサによるアメリカ合衆国特許第３．９１４，
４１３号、同第３，９１１’、１１６号及び同第３．９
０３，２６８号では、キト−サン以外のキチン誘導体を
、固体状にしてラットの創傷に与えて処置している。そ
の際、ブルゾン（Ｐｒｕｄｄｅｎ）による組織の張力測
定方法を用いている。

処置済みのラットと、未処置のラットの腹部の空胴に、
バルーンと、５日間、７日間及び’１１日間の間隔で挿
入した。バルーンは、創傷が破壊するまで膨張させられ
た。破裂圧力（ｍｍＨｇ）をもって、張力の指標とした
。

ブルゾン及びパランサが特許請求している発明によると
、軟骨処置されたラットは、５日及び７日後では、コン
トロールされたラットよりも、張力が２０乃至４０％増
加したが、１１日目では違いは見られなかった。パラン
サの特許では、キチンを用いると、張力が２５％増加す
ることが、特許請求の範囲で述べられている。

実施例工 第１実験では、４４匹のラットを体重によシ、２匹ずつ
分けた。１匹のラットの切開部に、キト−サン溶液（０
，０２６Ｎの酢酸にキｉ・−サン２００”９／　Ｉ　Ｄ
　Ｏｃ、ｃ、　）で浸したスポンジを当て、他のラット
には、生理食塩水で浸したスポンジを当てた。

２ｍ９のキト−サンを含む粘性のキト−サン１ｄを、側
部の創傷部の側部に塗布した。

キト−サン止血溶液の創傷治癒評価の結果を、第１図に
示す。

５日後に、８匹のキト−サン処置したラットのうら、６
匹の創傷が、対をなすコントロールラットよりも低い腸
内圧力で破裂した。

キト−サン処理したラットと、コントロールラットの圧
力差の合計（６対減って２対増えｆ？：、）を８で割る
と、平均の破壊圧力減少値は、−１４４ｍＨ９となった
。これを、平均コントロール破壊圧力で割ると、キト−
サン処理のラットの創傷の張力の減少は、１１％となる
。

７日目には、８匹のキト−サン処理のラットのりら３５
匹の創傷が、対をなすコントロールラットよりも低い圧
力で破壊した。計算した結果、張力は、わずか６．４％
減少していることが判った。

１１日目では、キト−サン処理したラットのりら、５匹
の創傷がコントロールラットよシわずかに高い圧力で破
壊することがわかった。計算したところ、張力は、わず
か２％だけ減少していることが判った。

実施例■ 第２の実験では、キト−サンの、繊維マットを、ブルゾ
ンの標準腹部創傷に加えた。テフロン塗布したピンセッ
トで、４ｍ９のキト−サン繊維マットをめすのラットの
各標準膓壁切開部の一端部に沿って当てた。縫合によっ
て創傷を閉じると、固体キト−サンを変則的に塗布する
ことになるが、各マットの一部分を、傷のある縁部の反
対側に直接にあてた。コントロールラットには、創傷の
縁部に何も加えなかった。

５日後、キト−サン処置した創傷は、コントロールラッ
トに比べて、相当に悪かった。マットが創傷の血塊の生
成を閉塞している個所は、バルーンの挿入中に、その創
傷が破壊された。処置した創傷を破壊しないようにして
、バルーンを挿入している際に、創傷は、コントロール
ラットの創傷よりも低圧で、（破裂ではなくｐしろ）不
規則に破壊した。

従来、Ｎ−アセチル化部分解重合キチンは、創傷治癒の
初期（５日、７日及び１１日目）において、（破壊に対
する）張力を増加させることによって、治療の初期段階
を促進させることが判っている。

また本実験によって、キト−サン止血溶液とキト−サン
止血繊維マットは、創傷治癒の初期段階（５日目）にお
いて、張力を減少させることによって、初期の創傷治癒
を妨げることが判明した。

さらにキト−サン止血溶液は、後の段階（７日及び１１
日）における創傷治癒に関しては、重要な効果がないこ
とも判明した。

実施例■ 多孔性合成血管移植片と動脈節に入れると、繊維の形成
によって治癒がなされることは公知である。繊維組織と
フィブリンの層が、その構造の内部を被膜し、外部は、
他の繊維膜によって被膜される。組織は、他人の体の、
脳血４ｐ＆痕に効力かあるが、生命組織のように成長し
たり、再生したりすることはない。これらのことに留意
して、この実験を行った。

多孔性癒着ダクロンディベイキー移植片を、犬の腎、城
下の大動脈に入れた。コントロールには、キト−サン溶
液を加えずに、該移植片を入れた。

この実験的移植片は、前述のキト−サン止血溶液を浸漬
したものである。

１．２．３及び４ケ月後１両群の移植片を、肉眼と光学
顕微鏡及び電子顕微鏡によって、食入シに調べた。コ刈
・ロール移植片は、血管皐維組織内に包囲されていた。

キト−サン処理の移植片は平滑筋に包まれておシ、それ
が、移植片の裂は目を浸透していた。移植片は、生命内
皮細胞で裏付けされ、数多の血管（脈管血管）が、この
細胞へ供給され、有髄神経線維が内方へ生成されていた
。つ−！９、通常の動脈の種々の組織素材が、新たに再
生されることが判明した。

このように、これらの実験によって、キト−サンを血管
移植片に与えたら、繊維増殖は阻害され。

通常の素材の再生が促進されることが示された。

手術前に、ヘパリンナ）　ＩＪウムを挿入することによ
って、完全に抗凝固性分有する（血塊生成時間が１時間
以上かかる状態）ようになった犬は、多孔性移植片から
血液が渥れることがなかった。

移植片を包囲する平滑筋の再生は、１，２，３゜及び４
ケ月毎に観察した。

実施例■ ５匹の健康な雑種犬の腹部の皮膚に、皮下組織まで貫通
する２Ｃｍ長の皮膚創傷２付けた。各犬に、４個所の創
傷を付け、各創傷を、食塩水湿布、標準止血剤（セラチ
ン泡状）、前述のキト−サン溶液、及びキト−シーン溶
液繊維マットで処置した。

それらの創傷を、２４時間、７２時間、７日。

及び１ケ月の間隔で調べた。

肉眼的検査と光学顕微鏡による検査を行った。

食塩水を用いたコントロールにおいては、通常の場合の
ように鍛痕が広がった。止血剤で処置した創傷は、ゼラ
チン泡が創傷内に残存し、組織が再生されていた。固体
キトーサンの処置による創傷の癒痕は、ゼラチン泡によ
る処置と同様の結果となった。キト−サン溶液で処置し
た創傷は、搬痕が薄ぐなって治癒した。

実施例Ｖ ５匹の健康な雑種犬の左腹部直情に、長さ２ｃ１ｒＬ深
さ１ｃｍの深襞創傷を付けた。実施例■と同じように、
この創傷を、食塩湿布と止血剤とキト−サン溶液とキト
−サン繊維マットで処置した。検査間隔は、２４時間、
７２時間、７日及び３０日とした。肉眼的検査と光学顕
微鏡によって、癒痕組織の残存量を調べた。

筋肉は、深襞を受けると退縮するので、組織の欠損はか
なシ広かった。食塩水処理の筋肉創傷は、広い鍛痕とな
った。標準止血剤で処理した創傷は、かなシ組織再生さ
れ、ゼラチン泡は、１ケ月後にも残存していた。キト−
サン溶液や凍結乾燥したキト−サンで処理した創傷では
、痩痕組織と筋力の増殖がち丑シ見られなかった。

実施例■ ５匹の健康な雑種犬の肝蔵に、長さ２Ｃ：ＩｒＬ深さ１
鑞の深襞創傷を付けた。この創傷を、標準止血剤、キト
−サン溶液、及び凍結乾燥したキト−サンで処理した。

創傷を間隔とおいて、肉眼及び光学顕微鏡で検査した。

止血剤で処理した創傷は、かなり鍛痕が見られ、止血物
質が、１ケ月後でも創傷内に残っていた。キト−サン溶
液や凍結乾燥したキト−サンで処理した創傷は、絡痕も
小さぐ、肝組織の再生もいくらか見られた。

実施例■ ５匹の健康な雑種犬の肺臓に、長さ２園深さ１αの深襞
創傷を付けた。これらの創傷を、標準止血剤と前述のキ
ト−サン溶液と凍結乾燥したキト−サンで処理した。時
間的間隔をおいて、肉眼及び光学顕微鏡で検査を行った
が、その結果、標準止血剤で処理した創傷は、組織が反
応を示し癒痕が見られ、止血剤が残件していた。

キト−サン溶液と凍結乾燥したキト−サンによって処理
した創傷には、組織反応は見られず、鍛痕は小さかった
。

実施例■ 雑種のネコの脳の左右の頭頂葉に、同様の扶出（スクー
プ創傷）を付けた。本発明によるキト−サン止血溶液は
、他の液体（トロンビン溶液）や止血剤と同様に、止血
効果があった。

１ケ月後に、止血効果が最良であったキトーサン処理し
た創傷は、繊維癒−痕が少なく、色素を有する大食刷胞
も少ぐ、かつ神経膠の素材が多く見られた。

実施例■ 本発明のキトーサン止迫袷液を、犬の腰の露出した骨の
骨髄表面に与えると、この溶液は、表面上から滲出する
血液を止血した。１週間後、コントロール部位は、大食
細胞及び、繊維芽細胞を含む組織化した薄い血塊によっ
て包囲されていた。

キト−サンで処理した表面は、大食細胞及び、繊維芽細
胞をあまり含′１８々い凝塊によって包囲されていた。

また、キト−サン溶液を、雑種犬の創傷のある股関節に
注入した。１週間後、この溶液を注入てれた関節は、０
．０２６Ｎの酢酸を注入したコン１０一ル関節よりも、
出血が少なく、炎症のある渭胞も少なかった。

以上の実験は、キト−サンの中で、ｐｒ＋　４の酢蔭の
溶液と、繊維マントと、粉末のどれが、１駆血Ｃ際に、
繊維増殖を阻害し、細胞の再生を促進さゼるかを試した
ものである。

表Ａは、止血と、繊維増殖の阻害と、組織再件を可能に
するキト−サン溶液の様々な方法を示すものである。

性　質　　好適値　　許容範囲 供給源１５ワ、　　　節足動物もしくは甲殻類 脱アセチル化　８５係　　　　４２乃至１００係分子量
範囲　　１０，０００乃至　ｉｏ、ｏｏｏ乃至２．０５
５，０００　　２，０５５，０００濃　度　　　　　、
／、　　　　０．５ｇ／ｌ乃至８　ｇ／Ｉ ＰＨ４１乃至８ 溶質濃度　　　劣浸圧液　　劣浸ｆｔＥ　液７’７　”
Ｍ優浸圧液（°、） 酸　　　　　　酢酸　　　　塩酸、硫酸、リン酸、有機
酸 酸濃Ｋ　　　　ｏ、ｃｈ２６Ｎ””乃至１、ＯＮ 許容範囲は独立変数ではない。高分子量を有し、脱アセ
チル化の程度が低いキト−サンは、溶液内に材料を入れ
るだめには、酸濃度を高くすることが必要である。

（、’、１通常の血液溶質濃度との比較による。

第１実施例乃至第９実施例から本発明によるキト−サン
は、止血作用を有し、繊維の増殖を阻害し、かつ組織再
生を促進させる効果があることが判明した。

【図面の簡単な説明】

第１図は、キト−サン止血剤による創傷治癒の一例を示
すグラフである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）創傷に、キト−サンを接触させることからなる、
   止血、繊維増殖阻害、及び組織再生促進方法。 （２）キト−フンが、部分的脱アセチル化キチンである
   ことを特徴とする特許請求範囲第（１）項に記載の方法
   。 （３）キト−サンが、７８％乃至９２％脱アセチル化さ
   ｎていることを特徴とする特許請求の範囲第（２）項に
   記載の方法。 （４）キト−サンが、分子量ｉｏ、ｏｏｏ乃至２，０５
   ５，０００を有するものであることを特徴とする特許請
   求の範囲第（１）項に記載の方法。 （５）キト−サンが、蒸留水と酢酸の溶液であシ、かつ
   ｐＨが約４であることを特徴とする特許請求の範囲第（
   ４）項に記載の方法。 （６）キト−サンが、固体であることを特徴とする特許
   請求の範囲第ｆｌ）項に記載の方法。 （７）　　キト−サンがキト−サンの酸溶液を脱アセチ
   ル化して調整した塩であることを特徴とする特許請求の
   範囲第（６）項に記載の方法。 （８）キト−サンが、粉末であることを特徴とする特許
   請求の範囲第（７）項に記載の方法。 （９）キト−サンが、薄膜であることを特徴とする特許
   請求の範囲第（７）項に記載の方法。 ００）キト−サンが、シートであることを特徴とする特
   許請求の範囲第（７）項に記載の方法。 αυ　キト−サンが、繊維状を成していることを特徴と
   する特許請求の範囲第（７）項に記載の方法。 （］２）キト−サン繊維が、マット状をなしていること
   を特徴とする特許請求の範囲第Ｕ項に記載の方法。 ０３）キト−サン繊維が、プラグ状を成していることを
   特徴とする特許請求の範囲第００項に記載の方法。 側　治療対象の創傷が、抗凝固性であることを特徴とす
   る特許請求の範囲第（１）項に記載の方法。 （１５）創傷が、部分的に抗凝固性であることを特徴と
   する特許請求の範囲第（１）項に記載の方法。 ０６）組織移植片にキト−サンを接触きせることを特徴
   とする、血管移植片の繊維増殖阻害、及び、組織再生促
   進方法。 ０７）キト−サンを移植片材料に混入することを特徴と
   する特許請求の範囲第０６）項に記載の方法。 （１８）創傷にポリグルコサミンを接触させることを特
   徴とする止血、繊維増殖阻害、及び、組織再生促進方法
   。