JPS6269996A - カルニチン・アルキルエステルの製造法 - Google Patents
カルニチン・アルキルエステルの製造法Info
- Publication number
- JPS6269996A JPS6269996A JP20886385A JP20886385A JPS6269996A JP S6269996 A JPS6269996 A JP S6269996A JP 20886385 A JP20886385 A JP 20886385A JP 20886385 A JP20886385 A JP 20886385A JP S6269996 A JPS6269996 A JP S6269996A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- carnitine
- alkyl ester
- oxopropyl
- alkoxycarbonyl
- trimethylammonium halide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は（３−アルコキシカルボニル−２−オキソプロ
ピル〕トリメチルアンモニウム・ハライドを微生物的に
還元してカルニチン・アルキルエステルを製造する方法
に関するものである。本発明によりｓ造さｎるカルニチ
ン・アルキルエステルは氷解により容易にカルニチンに
変換することができるので、カルニチン製造の有用な中
間体である。カルニチンは脂肪酸代謝に関連する物質で
ビタミンＢＴ と呼ばれたことがあり、心臓疾患など
に医薬として使用される有用な物質である。従来ＤＬ体
が医薬として使われてきているが、最近では、特に５体
が注目されている（例えば、医学のあゆみ１２３巻、６
６０頁、１９８２年）。
ピル〕トリメチルアンモニウム・ハライドを微生物的に
還元してカルニチン・アルキルエステルを製造する方法
に関するものである。本発明によりｓ造さｎるカルニチ
ン・アルキルエステルは氷解により容易にカルニチンに
変換することができるので、カルニチン製造の有用な中
間体である。カルニチンは脂肪酸代謝に関連する物質で
ビタミンＢＴ と呼ばれたことがあり、心臓疾患など
に医薬として使用される有用な物質である。従来ＤＬ体
が医薬として使われてきているが、最近では、特に５体
が注目されている（例えば、医学のあゆみ１２３巻、６
６０頁、１９８２年）。
従来の技術
本発明の原料物質として用いられる（３−アルコキシカ
ルボニル−２−オキソプロピル〕トリメチルアンモニウ
ム・ハライドの製法としては、ｒ−へロアセト酢酸エス
テルをトリメチルアミンと反応させる方法が知られてお
シ（例えば公開特公昭５ｌ−６３１２３）、かくして見
られた（３−アルコキンカルボニル−２−オキソプロピ
ル）トリメチルアンモニウムを還元すのに、従来は白金
−活性炭、ラネーニッケル又はルテニウム−活性炭など
の水素化触媒を用い、高圧の水素中で接触水素化する方
法（公開特公昭５１−６！５１２３）が矧られている。
ルボニル−２−オキソプロピル〕トリメチルアンモニウ
ム・ハライドの製法としては、ｒ−へロアセト酢酸エス
テルをトリメチルアミンと反応させる方法が知られてお
シ（例えば公開特公昭５ｌ−６３１２３）、かくして見
られた（３−アルコキンカルボニル−２−オキソプロピ
ル）トリメチルアンモニウムを還元すのに、従来は白金
−活性炭、ラネーニッケル又はルテニウム−活性炭など
の水素化触媒を用い、高圧の水素中で接触水素化する方
法（公開特公昭５１−６！５１２３）が矧られている。
しかし、この方法に、高価な触媒と高圧を用いる点が不
利であり、本発明方法のような微生物による還元は従来
全く知られていなかった。
利であり、本発明方法のような微生物による還元は従来
全く知られていなかった。
発明が解決しようとする問題点と問題点を解決する為の
手段 本発明者らに、上記した化学的逮元法の不利な点を克服
する念め、微生物〜酵素を用いる生化学的還元によシ（
３−アルコキンカルボニル−２−オキソプロビルントリ
メチルアンモニウム・ハライトヲカルニチン・アルキル
エステルに変換せしめる方法について種々の微生物およ
び酵素について広く研究し九結果、本発明を完成するに
至った。
手段 本発明者らに、上記した化学的逮元法の不利な点を克服
する念め、微生物〜酵素を用いる生化学的還元によシ（
３−アルコキンカルボニル−２−オキソプロビルントリ
メチルアンモニウム・ハライトヲカルニチン・アルキル
エステルに変換せしめる方法について種々の微生物およ
び酵素について広く研究し九結果、本発明を完成するに
至った。
発明の効果、作用
上にも述べたように本発明によ九ば、生化学的方法の故
に、従来法のような苛酷な条件でなく、常温常圧で反応
が行われるので、公害克服の点、省エネルギー、さらに
は設備的にも有利に目的とするカルニチン・アルキルエ
ステルを製造することができる。
に、従来法のような苛酷な条件でなく、常温常圧で反応
が行われるので、公害克服の点、省エネルギー、さらに
は設備的にも有利に目的とするカルニチン・アルキルエ
ステルを製造することができる。
本発明に使用する微生物は、（５−アルコ中ジカルボニ
ルー２−オキソプロピル）トリメチルアンモニウム・ハ
ライトヲカルニテンーフルキルエステルに変換せしめる
酵素系ｒ有する微生物であれば、微生物の分類上の位置
に無関係に使用できる。即ち、実施例に示すように、シ
ュードモナス属、バチルス属、ブレビバクテリウム属の
細菌、アクユビア属、タルイフエロミセス属の酵母、ア
スペルギルス属、ベニンリウム属のかび、ストレプトミ
セス属の放線園などが例としてらげら：ｒＬる。
ルー２−オキソプロピル）トリメチルアンモニウム・ハ
ライトヲカルニテンーフルキルエステルに変換せしめる
酵素系ｒ有する微生物であれば、微生物の分類上の位置
に無関係に使用できる。即ち、実施例に示すように、シ
ュードモナス属、バチルス属、ブレビバクテリウム属の
細菌、アクユビア属、タルイフエロミセス属の酵母、ア
スペルギルス属、ベニンリウム属のかび、ストレプトミ
セス属の放線園などが例としてらげら：ｒＬる。
このような能力を有する微生物を培地に培養して、ｔた
菌体を（３−アルコキシカルボニル−２−オキンブロビ
ル〕トリメチルアンモニウム・ハライドに接触反応させ
ると、カルニチン・アルキルエステルがえられる。本発
明に使用する微生物菌体をえるための培養法は通常の培
養法によればよく、特に説明を要しないが、基質として
用いる（３−アルコキシカルボニル−２−オキソプロピ
ル）トリメチルアンモニウム・ハライドを含有する培地
に微生物を生育せしめＺと、転換活性の鍋い菌体をえる
ことができる。
菌体を（３−アルコキシカルボニル−２−オキンブロビ
ル〕トリメチルアンモニウム・ハライドに接触反応させ
ると、カルニチン・アルキルエステルがえられる。本発
明に使用する微生物菌体をえるための培養法は通常の培
養法によればよく、特に説明を要しないが、基質として
用いる（３−アルコキシカルボニル−２−オキソプロピ
ル）トリメチルアンモニウム・ハライドを含有する培地
に微生物を生育せしめＺと、転換活性の鍋い菌体をえる
ことができる。
固形培地、液体培地の何ｎもが使用可能である。
このようにしてえた菌体を基質に作用せしめてもよく、
また菌体抽出液、あるいは祠裂酵索標品あるいはその固
定化標品を補酵素（ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨ）再生系
と共役させて基質に作用させてもよい。また微生物菌体
を培養液から分けることなく、生培培養の培養液に基質
を加えて反応させてもよい。
また菌体抽出液、あるいは祠裂酵索標品あるいはその固
定化標品を補酵素（ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨ）再生系
と共役させて基質に作用させてもよい。また微生物菌体
を培養液から分けることなく、生培培養の培養液に基質
を加えて反応させてもよい。
基質濃度は、パッチ式、連続式の何れによるかによって
も異るが、バラを式では一般に媒質中α１〜３０％、好
ましくは１５〜１．０％程度で、連続式ではこれよりや
＼濃度を低下させた方がよい。
も異るが、バラを式では一般に媒質中α１〜３０％、好
ましくは１５〜１．０％程度で、連続式ではこれよりや
＼濃度を低下させた方がよい。
反応は普通１０〜６０℃、好ましくは２５〜４０℃附近
、ｐＨ４〜１０附近で行われる。反応時間は、静置、攪
拌、流下等の手段、あるいは酵素標品の形態、力価によ
って異ってくるので一様ではないが、パッチ法では通常
３０分〜７２時間程度である。反応は、例えばｎ−プロ
パツール：３８％アンモニヤ水：水（ａＳ：Ｓ：１０）
の溶媒系で薄ノークロマトグラフィーを行い、ドラゲン
ドルフ試薬の噴霧でＲｆ α４９のスポットの濃度に
より追跡できる。また、生成したカルニチン・アルキル
エステルを高速液体クロマトグラフィーで検出定量する
ことによっても追跡できる。反応終了後、反応液？イオ
ン交換樹脂のカラムにかけ、溶出、濃縮するなど公知の
方法によりカルニチン・アルキルエステルは回収される
。あるいにそのま＼酸加水分解などの手段によシカルニ
チンに変換せしめてカルニチンとして回収することもで
きる。
、ｐＨ４〜１０附近で行われる。反応時間は、静置、攪
拌、流下等の手段、あるいは酵素標品の形態、力価によ
って異ってくるので一様ではないが、パッチ法では通常
３０分〜７２時間程度である。反応は、例えばｎ−プロ
パツール：３８％アンモニヤ水：水（ａＳ：Ｓ：１０）
の溶媒系で薄ノークロマトグラフィーを行い、ドラゲン
ドルフ試薬の噴霧でＲｆ α４９のスポットの濃度に
より追跡できる。また、生成したカルニチン・アルキル
エステルを高速液体クロマトグラフィーで検出定量する
ことによっても追跡できる。反応終了後、反応液？イオ
ン交換樹脂のカラムにかけ、溶出、濃縮するなど公知の
方法によりカルニチン・アルキルエステルは回収される
。あるいにそのま＼酸加水分解などの手段によシカルニ
チンに変換せしめてカルニチンとして回収することもで
きる。
次に本発明の実施例を示す。
実施例１
第１表°に示した培地５ｄをふくむ大型試験管に第２表
に示した細菌、酵母、かび、放線菌を植菌して、２６℃
で、細菌は４８時間、酵母は４日間、かびは７日間、放
線菌は１０日間振とう培養した。培養液５−から遠心分
離ま友は濾過によりえた菌勿２回水洗したものに、（３
−エトキクカルボニル−２−オキソプロピル）トリメチ
ルアンモニウム・クロリドを１ｏａｙ／７の濃度にふく
むｐＨ７，０の燐酸緩衝液α５ｄを加え、５０℃で１８
時間撮とう培養で反応させ九結果、第２表に示したよう
にカルニチン・エチルエステルが生成していた。
に示した細菌、酵母、かび、放線菌を植菌して、２６℃
で、細菌は４８時間、酵母は４日間、かびは７日間、放
線菌は１０日間振とう培養した。培養液５−から遠心分
離ま友は濾過によりえた菌勿２回水洗したものに、（３
−エトキクカルボニル−２−オキソプロピル）トリメチ
ルアンモニウム・クロリドを１ｏａｙ／７の濃度にふく
むｐＨ７，０の燐酸緩衝液α５ｄを加え、５０℃で１８
時間撮とう培養で反応させ九結果、第２表に示したよう
にカルニチン・エチルエステルが生成していた。
第１表
に、ＨＰＯ４７，５ｒ／ｉ巳 ２．０ ２し／
１う ７．５ Ｖ’ｔＫＨＩＰＯ４２，
５１Ｂ［／／ ２．５ ／／Ｍ ｇ Ｓ ０４・
７Ｈ１００，１＃ α１ 〃 α１ 〃ｌＦｅＳ
Ｏ４−７Ｈ１０α０１〃 α０１１ α０１〃
ＩＪＨ４Ｃ！ｔ１．０ Ｎ １．０ ／／
１．０ １ＮａＣ１５，ｎ ｓ ５．Ｏｔｔ
５．Ｏｔｔグルコース １αＯＩ １α０
〃 １αＯＩ肉エキス ５．０ Ｎ
５．Ｏｔｔ ５．Ｏｓポリペプトン
ａｎ ｓ ５．０ ｇ ５．Ｏｓ酵母
エキス − 〃 五〇 〃 五〇
〃基質化合物” ＩＱ、０ ＃ １［ＬＯ＃
１αＯ〃ｐＨ７，２ｐＨ６，０ｐＨ７，２ ＊ （３−エトキシカルボニル−２−オキソプロピル
）トリメチルアンモニウム・クロリド 第２表 シュードモナス・エルギ、ノーザ シュードモナス・クルジビニ ７ユードモナス・ダクンヘ （Ｐｓｅｕｄｏｍｃｎａｓ ｄａｃｕｎｈａｅ）１Ｆ０
１２０４８ ＋＋７
ニー）”モナス・フルオレッスンスシュードモナス・フ
ルオレッスンス ｐＴｃｃ１７９２６ ＋ バチルス伊セレウス バチルス・リケニホルミス ブレビバクテリウム・アンモニャゲネスアシュビア・ゴ
シツビー アスペルギルス・ヤポニクス アスペルギルス・ニガー ペニシリウム・トミイイ ペニシリウム・トルゼビンスキイ （Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｔｒｚｅｂｅｎｓｋｉｉ）
ＡＴＣＣ！ １０５０７
＋ストレプトミセス・インターメジウス （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅａ １ｎｔ−ｅｒｔｎｅｄ
ｉｕａ）工ＦＯ５１７７−）− 峠＋：０．１〜１り／−の生成 ＋）−：１ 〜３Ｉｌｉ／−の生地 実施例２ 実施例１で（５−メトキシカルボニル−２−オキソプロ
ピルフトリメチルアンモニウム・クロリドを用いる他、
実施例１と同様に実施した場合、第１表に示した何ｎの
微生物を用いた場合ともカルニチン・メチルニスデルが
生成した。
１う ７．５ Ｖ’ｔＫＨＩＰＯ４２，
５１Ｂ［／／ ２．５ ／／Ｍ ｇ Ｓ ０４・
７Ｈ１００，１＃ α１ 〃 α１ 〃ｌＦｅＳ
Ｏ４−７Ｈ１０α０１〃 α０１１ α０１〃
ＩＪＨ４Ｃ！ｔ１．０ Ｎ １．０ ／／
１．０ １ＮａＣ１５，ｎ ｓ ５．Ｏｔｔ
５．Ｏｔｔグルコース １αＯＩ １α０
〃 １αＯＩ肉エキス ５．０ Ｎ
５．Ｏｔｔ ５．Ｏｓポリペプトン
ａｎ ｓ ５．０ ｇ ５．Ｏｓ酵母
エキス − 〃 五〇 〃 五〇
〃基質化合物” ＩＱ、０ ＃ １［ＬＯ＃
１αＯ〃ｐＨ７，２ｐＨ６，０ｐＨ７，２ ＊ （３−エトキシカルボニル−２−オキソプロピル
）トリメチルアンモニウム・クロリド 第２表 シュードモナス・エルギ、ノーザ シュードモナス・クルジビニ ７ユードモナス・ダクンヘ （Ｐｓｅｕｄｏｍｃｎａｓ ｄａｃｕｎｈａｅ）１Ｆ０
１２０４８ ＋＋７
ニー）”モナス・フルオレッスンスシュードモナス・フ
ルオレッスンス ｐＴｃｃ１７９２６ ＋ バチルス伊セレウス バチルス・リケニホルミス ブレビバクテリウム・アンモニャゲネスアシュビア・ゴ
シツビー アスペルギルス・ヤポニクス アスペルギルス・ニガー ペニシリウム・トミイイ ペニシリウム・トルゼビンスキイ （Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｔｒｚｅｂｅｎｓｋｉｉ）
ＡＴＣＣ！ １０５０７
＋ストレプトミセス・インターメジウス （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅａ １ｎｔ−ｅｒｔｎｅｄ
ｉｕａ）工ＦＯ５１７７−）− 峠＋：０．１〜１り／−の生成 ＋）−：１ 〜３Ｉｌｉ／−の生地 実施例２ 実施例１で（５−メトキシカルボニル−２−オキソプロ
ピルフトリメチルアンモニウム・クロリドを用いる他、
実施例１と同様に実施した場合、第１表に示した何ｎの
微生物を用いた場合ともカルニチン・メチルニスデルが
生成した。
実施例３
実施例１の方法で生育させたシュードモナス・フルオレ
ツスンスエＦ０３０８１ のｍ体’＆２０゜グ／−の
濃度になるよう生理食塩水に懸濁したｉｌ ０ｓｄに４
％アルギン酸ナトリウム峙液１〇−を加えて混合した後
、１５％の塩化カルシウム溶液にこの混合液を徐々に滴
下して、粒状の固定化菌体をえた。この固定化醒体全ｔ
を（３−エトキシ−２−オキンプロビル〕トリメチルア
ンモニウムクロリド１％、コハク酸ナトリウム１％、硫
酸マグネシウム（７水塩）ＣＬ１％をふくむｐＨ７，０
の燐酸緩衝０．２０−に加え、３０℃で１８時間反応さ
せたところ、Ｌ−カルニチ面 ンエチルエステルが９６ａｙ／に％の濃度に生成した。
ツスンスエＦ０３０８１ のｍ体’＆２０゜グ／−の
濃度になるよう生理食塩水に懸濁したｉｌ ０ｓｄに４
％アルギン酸ナトリウム峙液１〇−を加えて混合した後
、１５％の塩化カルシウム溶液にこの混合液を徐々に滴
下して、粒状の固定化菌体をえた。この固定化醒体全ｔ
を（３−エトキシ−２−オキンプロビル〕トリメチルア
ンモニウムクロリド１％、コハク酸ナトリウム１％、硫
酸マグネシウム（７水塩）ＣＬ１％をふくむｐＨ７，０
の燐酸緩衝０．２０−に加え、３０℃で１８時間反応さ
せたところ、Ｌ−カルニチ面 ンエチルエステルが９６ａｙ／に％の濃度に生成した。
反応液中のＬ−カルニチンエチルエステルは稀塩酸で加
水分解後り一カルニチンをカルニチンアセチルトラスフ
ェラーゼを用いるベアソンらの方法（Ｍｅｔｈｏｄ ｏ
ｆ Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ第２版、第
４巻、１７５８頁、１９７４年）の方法で分析して計算
した。
水分解後り一カルニチンをカルニチンアセチルトラスフ
ェラーゼを用いるベアソンらの方法（Ｍｅｔｈｏｄ ｏ
ｆ Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ第２版、第
４巻、１７５８頁、１９７４年）の方法で分析して計算
した。
特許出願人 パイオール株式会社
代表者中山 清
中央化成品株式会社
代表者 水 島 喜三部
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、（３−アルコキシカルボニル−２−オキソプロピル
）トリメチルアンモニウム・ハライドをカルニチン・ア
ルキルエステルに変換せしめる能力を持つ微生物もしく
はこれに由来する酵素系の作用により、水性媒体中にて （３−アルコキシカルボニル−２−オキソプロピル）ト
リメチルアンモニウムハライドをカルニチン・アルキル
・エステルに変換せしめることを特徴とするカルニチン
・アルキルエステルの製造法。 ２、生成するカルニチン・アルキルエステルが光学活性
体である特許請求範囲第１項記載の製造法。 ３、使用する微生物がシュードモナス（￥Ｐｓｅｕ−ｄ
ｏｍｏｎａｓ￥）属、バチルス（￥Ｂａｃｉｌｌｕｓ￥
）属、ブレビバクテリウム（￥Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ￥）属、アシュビア（￥Ａｓｈｂｙａ￥）属、ク
ルイフェロミセス（￥Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ￥）
属、アスペルギルス（￥Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ￥）属
、ペニシリウム（￥Ｐｅｎｉ−ｃｉｌｌｉｕｍ￥）属、
ストレプトミセス（￥Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｍｙｃｅｓ￥）
属の何れかの属の微生物である特許請求範囲第１項記載
の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20886385A JPS6269996A (ja) | 1985-09-24 | 1985-09-24 | カルニチン・アルキルエステルの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20886385A JPS6269996A (ja) | 1985-09-24 | 1985-09-24 | カルニチン・アルキルエステルの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6269996A true JPS6269996A (ja) | 1987-03-31 |
Family
ID=16563365
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20886385A Pending JPS6269996A (ja) | 1985-09-24 | 1985-09-24 | カルニチン・アルキルエステルの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6269996A (ja) |
-
1985
- 1985-09-24 JP JP20886385A patent/JPS6269996A/ja active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3858505B2 (ja) | Ｒ−３−キヌクリジノールの製造方法 | |
| JPS62289A (ja) | α−ケト酸からのＬ−α−アミノ酸の酵素学的製造方法 | |
| JPS6269996A (ja) | カルニチン・アルキルエステルの製造法 | |
| JPS60145095A (ja) | 固定化微生物によるキシリト−ルの製造法 | |
| US3703439A (en) | Process for the preparation of l-beta-(3,4-dihydroxyphenyl)-alpha-alanine by fermentation | |
| JP2786500B2 (ja) | 光学活性１，３―ブタンジオールの製法 | |
| JP3030916B2 (ja) | βーグルコオリゴ糖の製造方法 | |
| JP3605153B2 (ja) | Ｌ−フラクトースの製造方法 | |
| JPH0424992B2 (ja) | ||
| JPH04152895A (ja) | 光学活性１，３―ブタンジオールの製法 | |
| JPH04341195A (ja) | 光学活性マンデル酸の製法 | |
| JPH0591895A (ja) | Ｄ−セリンの製造法 | |
| JPH0419835B2 (ja) | ||
| JP2828720B2 (ja) | 光学活性１，３―ブタンジオールの製造方法 | |
| JPS61173789A (ja) | ４−クロロ−３−ヒドロキシ酪酸の製造法 | |
| JPH0556954B2 (ja) | ||
| JPS615793A (ja) | Ｄ−アスパラギン酸の製法 | |
| JPS6342692A (ja) | Ｌ−イソロイシンの製造法 | |
| JPH0254076B2 (ja) | ||
| JPH04316496A (ja) | （ｒ）−（＋）−３−ハロ乳酸の製造法 | |
| JPH0555112B2 (ja) | ||
| JPS63267285A (ja) | Ｌ−バリンの製造法 | |
| JPH0759582A (ja) | 固定化微生物によるパラヒドロキシ安息香酸の製造方法 | |
| JPS62289194A (ja) | フエニルアラニン又はその誘導体の製造法 | |
| JPS6219095A (ja) | ２−オキソ−オキサゾリジン−４−カルボン酸のラセミ化法 |