JPS615793A - Ｄ−アスパラギン酸の製法 - Google Patents
Ｄ−アスパラギン酸の製法Info
- Publication number
- JPS615793A JPS615793A JP12520584A JP12520584A JPS615793A JP S615793 A JPS615793 A JP S615793A JP 12520584 A JP12520584 A JP 12520584A JP 12520584 A JP12520584 A JP 12520584A JP S615793 A JPS615793 A JP S615793A
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- Japan
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- aspartic acid
- microorganism
- acid
- reaction
- cryptococcus
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はＤＬ−アスパラギン酸またはその塩に微生物を
作用せしめて生化学的にＤ−アスパラギン酸を製造する
方法に関するものである。
作用せしめて生化学的にＤ−アスパラギン酸を製造する
方法に関するものである。
従来ＤＬ−アスパラギン酸に微生物を作用させてＤ−ア
スパラギン酸を得る方法として特公昭５３−１８３１号
公報記載の方法がある。
スパラギン酸を得る方法として特公昭５３−１８３１号
公報記載の方法がある。
この方法は微生物としてアクロモバクタ−属４ 等に属
する微生物を利用しており、相当すくれた方法ではある
が、この方法はＬ−アラニンが同時にできるので、反応
生成物から同じアミノ酸であるＤ−アスパラギン酸を高
純度で分離するのが容易ではないという問題がある。
する微生物を利用しており、相当すくれた方法ではある
が、この方法はＬ−アラニンが同時にできるので、反応
生成物から同じアミノ酸であるＤ−アスパラギン酸を高
純度で分離するのが容易ではないという問題がある。
そこで本発明者らはＤＬ−アスパラギン酸から高純度の
Ｄ−アスパラギン酸を得る方法の確りを目的に鋭意研究
した。
Ｄ−アスパラギン酸を得る方法の確りを目的に鋭意研究
した。
その結果、上記の目的はクリプトコツカス属、キャンデ
ィダ属、及びトリコスポロン属から選ばれる少なくとも
一種の微生物であって、Ｌ−アスパラギン酸をオキシカ
ルボン酸および脂肪族カルボン酸の少なくとも１ｍから
選ばれる有機酸に置換することができる微生物まｔこは
その処理物の含有液と、ＤＬ−アスパラギン酸及び／又
はその塩を接触反応させ、次いでｎｈ記機微生物作用を
受けなかったＤ−アスパラギン酸を反応生成物から分離
するという手段によって達成できる。
ィダ属、及びトリコスポロン属から選ばれる少なくとも
一種の微生物であって、Ｌ−アスパラギン酸をオキシカ
ルボン酸および脂肪族カルボン酸の少なくとも１ｍから
選ばれる有機酸に置換することができる微生物まｔこは
その処理物の含有液と、ＤＬ−アスパラギン酸及び／又
はその塩を接触反応させ、次いでｎｈ記機微生物作用を
受けなかったＤ−アスパラギン酸を反応生成物から分離
するという手段によって達成できる。
なお１） Ｌ−アスパラギン酸からＤ−アスパラギン酸
を取得する方法としては、有機合成的にＤ Ｌ −７ス
バ５ギノ酸を合成し、ラセミ体より、ジアステレオマー
分割する方法（特公昭３２−５４１９号公報）、優先晶
析する方法（特公昭５ ’４−２５００６号°公報）等
により分割する方法が知られているが、反応工程が複雑
で、高価な光学分割剤を必要とする等、工業的に有利な
方法ではない。
を取得する方法としては、有機合成的にＤ Ｌ −７ス
バ５ギノ酸を合成し、ラセミ体より、ジアステレオマー
分割する方法（特公昭３２−５４１９号公報）、優先晶
析する方法（特公昭５ ’４−２５００６号°公報）等
により分割する方法が知られているが、反応工程が複雑
で、高価な光学分割剤を必要とする等、工業的に有利な
方法ではない。
以下本発明の構成を詳述し、次いで本発明の効果を述べ
る。
る。
本発明に用いる微生物はクリプトコツカス、キャノデイ
ダ、トリコスポロンの各属に属する微生物である。より
具体的には、クリプトコツカス・ラウレノテイー（Ｃｒ
ｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ １ａｕｒｅｎ（ｉｉ ）ＦＥＲ
Ｍ−Ｐ２Ｏ３、キャノデイダ・フミコーラ（Ｃａｎｄｉ
ｄａ ｈｕｊＴｌｉｃＯＩａ ） Ｆ ＥＲＭ −Ｐ
７１５、トリコスポＯノａクラノカム（Ｔｒｉｃｌｐ
ｓｐｏｒｏｎ ｃｕｌａｎｃｕｍ ） に Ｅ ＲＭ−
Ｐ２１４等が好適にあげられる。
ダ、トリコスポロンの各属に属する微生物である。より
具体的には、クリプトコツカス・ラウレノテイー（Ｃｒ
ｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ １ａｕｒｅｎ（ｉｉ ）ＦＥＲ
Ｍ−Ｐ２Ｏ３、キャノデイダ・フミコーラ（Ｃａｎｄｉ
ｄａ ｈｕｊＴｌｉｃＯＩａ ） Ｆ ＥＲＭ −Ｐ
７１５、トリコスポＯノａクラノカム（Ｔｒｉｃｌｐ
ｓｐｏｒｏｎ ｃｕｌａｎｃｕｍ ） に Ｅ ＲＭ−
Ｐ２１４等が好適にあげられる。
前述の如き微生物を培養するための培地Ｉこは通常の栄
養培地を適宜使用すればよく、例えば炭素源とし、では
グルコース、シュークロース、糖蜜等の糖類、酢酸等の
有機酸、エタノール、メタノール等のアルコール類等、
Ｍｇ源としては硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム等
、有機栄養源としては酵母エキス、ペブトノ、コーン令
ステイープ拳リカー、肉エキス等、無機イオンとしてマ
グネシウム、鉄、マノカッ、カリウム、ナトリウム等の
イオンが適宜用いられる。
養培地を適宜使用すればよく、例えば炭素源とし、では
グルコース、シュークロース、糖蜜等の糖類、酢酸等の
有機酸、エタノール、メタノール等のアルコール類等、
Ｍｇ源としては硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム等
、有機栄養源としては酵母エキス、ペブトノ、コーン令
ステイープ拳リカー、肉エキス等、無機イオンとしてマ
グネシウム、鉄、マノカッ、カリウム、ナトリウム等の
イオンが適宜用いられる。
培養は常法によればよく、例えば培地のｐＨ６〜９とし
、接種後２０〜４０℃で１〜３日、好気的に培養する。
、接種後２０〜４０℃で１〜３日、好気的に培養する。
このようにして得られた培養物はＬ−アスパラギン酸を
有機酸に変換する能力を有し、その形態は培養中、もし
くは得られた培養液、分離菌体、洗浄生菌体、凍結乾燥
菌体、アセトノ乾燥菌体、物理的、化学的もしくは生化
学的に破壊された菌体、抽出液、粗精製物、精製物、又
は菌体もしくは精製処理物の固定化物等のいずれであっ
てもよい。
有機酸に変換する能力を有し、その形態は培養中、もし
くは得られた培養液、分離菌体、洗浄生菌体、凍結乾燥
菌体、アセトノ乾燥菌体、物理的、化学的もしくは生化
学的に破壊された菌体、抽出液、粗精製物、精製物、又
は菌体もしくは精製処理物の固定化物等のいずれであっ
てもよい。
本発明で原料としてＤＬ−アスパラギン酸またはその塩
が用いられるが、ここでいう塩とはアンモニウム塩、カ
リウム塩、ナトリウム塩、マグネシウム塩、カルンウム
塩等が好適にあげられる。
が用いられるが、ここでいう塩とはアンモニウム塩、カ
リウム塩、ナトリウム塩、マグネシウム塩、カルンウム
塩等が好適にあげられる。
本発明に言う有機酸とは、フマール酸、コハク酸等の脂
肪族カルボッ酸やリンゴ酸等のオキシ酸をいう。
肪族カルボッ酸やリンゴ酸等のオキシ酸をいう。
反応はかくして得られた微生物の存在下、通 ゛常１）
Ｈ５〜１１、好ましくはｐＨ６〜９の水性媒質中で行な
われる。反応温度は１５〜８０℃、好ましくは３０〜５
０℃が適当である。反応時間は、酵素の活性、基質１１
１１１１ｆおよびその種類、ならびに反応温度によって
かわるが、１〜１００時間程度である。基質濃度は０，
１〜３０％、好ましくは０．５〜２０％程度である。反
応終了後、例えば直接晶析法、イオン交換樹脂処理等に
よｔｌ、Ｄ−アスパラギン酸を分１１ｉ１１する。
Ｈ５〜１１、好ましくはｐＨ６〜９の水性媒質中で行な
われる。反応温度は１５〜８０℃、好ましくは３０〜５
０℃が適当である。反応時間は、酵素の活性、基質１１
１１１１ｆおよびその種類、ならびに反応温度によって
かわるが、１〜１００時間程度である。基質濃度は０，
１〜３０％、好ましくは０．５〜２０％程度である。反
応終了後、例えば直接晶析法、イオン交換樹脂処理等に
よｔｌ、Ｄ−アスパラギン酸を分１１ｉ１１する。
本発明法は次の効果を有する。反応生成物からＤ−アス
パラギン酸を純度高く取得できる。
パラギン酸を純度高く取得できる。
また、ＤＬ体からの分割法に比して簡単な操作で低コス
トである。
トである。
実施例１
グルコース２％、ポリペプトン０．５％、酵母エキス０
．１％の組成の培地１００ ｗｉを１４容フラスコに入
れ、クリプトコツカス・ラウレ／ティ（’ＦＥＲＭ−Ｐ
７０９ ）を接種し、３０℃で２４時間種培養を行なっ
た。この種培養液２０ ＃／を、グルコース０．５％、
ＤＬ−α−アεノーε−カブロラククム１９６、Ｉ’Ｇ
（２ＰＯ１０，２％、Ｍｇ５Ｏ＜・７Ｈ２００，０５％
、ＭｎＣ４２”４Ｈ２０ｏ、 ０２ ％、−Ｊ−７ｍ
ステイープ番リカー０．２％、１）Ｈ７の培地１ｅに添
加し、３０℃で１５時時間項養する。この培養液を遠心
分離し、集菌する。培地３０ ｍｌより得られる菌体を
ＤＬ−アスパラギン酸３１を含む１） Ｈ６，４の水溶
液１００肩ｔに添加し、４０℃で４８時間反応を行なっ
た。反応終了後、遠心除菌し上清を１５ｓ＋ｌまで減圧
濃縮する。この濃縮液をｐＨ２，８に調整し、１０℃に
て３時間攪拌する。析出した結晶を口取し、冷水で洗浄
することによりＤ−アスパラギン酸１．３１を得た。
．１％の組成の培地１００ ｗｉを１４容フラスコに入
れ、クリプトコツカス・ラウレ／ティ（’ＦＥＲＭ−Ｐ
７０９ ）を接種し、３０℃で２４時間種培養を行なっ
た。この種培養液２０ ＃／を、グルコース０．５％、
ＤＬ−α−アεノーε−カブロラククム１９６、Ｉ’Ｇ
（２ＰＯ１０，２％、Ｍｇ５Ｏ＜・７Ｈ２００，０５％
、ＭｎＣ４２”４Ｈ２０ｏ、 ０２ ％、−Ｊ−７ｍ
ステイープ番リカー０．２％、１）Ｈ７の培地１ｅに添
加し、３０℃で１５時時間項養する。この培養液を遠心
分離し、集菌する。培地３０ ｍｌより得られる菌体を
ＤＬ−アスパラギン酸３１を含む１） Ｈ６，４の水溶
液１００肩ｔに添加し、４０℃で４８時間反応を行なっ
た。反応終了後、遠心除菌し上清を１５ｓ＋ｌまで減圧
濃縮する。この濃縮液をｐＨ２，８に調整し、１０℃に
て３時間攪拌する。析出した結晶を口取し、冷水で洗浄
することによりＤ−アスパラギン酸１．３１を得た。
（α） −−２４，８°（Ｃ＝ ２．６ＮＨＣＩ ）
実施例２ 実施例１と同様にして培養したクリプトコツカス・ラウ
レンテイ（ＦＥＲＭ−Ｐ２Ｏ３）の培地３０ ｍｌより
得られる菌体をＤＬ−アスパラギン酸３ｆを含むｐＨ６
，５の水溶液１００ ｍｌに添加し、４０℃で反応を行
なった。さらに２４．４８時時間区ＤＬ−アスパラギン
酸を各々４ｆずつ添加し、その後２４時間反応を続けた
。反応終了後、遠心除菌し上清を２０１１ｔまで減圧濃
縮する。この濃縮液をｐＨ２，８に調整し、１０℃にて
３時曲攪拌する。析出した結晶を口取し、冷水で洗浄す
ること４によりＤ−アスパラギン酸４、７ ｆ を
ｆ！７ ｆこ 。 〔α ）２８ ＝−２５，０
° （Ｃ−２ゾロＮＨＣｌ ） 実施例３ 実施例１と同様にして培養したキャノティダーフミコー
ラ（ＦＥＲＭ−Ｐ７１５ ）の培地５０＊ｔより得られ
る菌体をＤＬ−アスパラギン酸３ｆを含むＩ） Ｈ７，
０の水溶液１００ ｘｉに添加し、４０℃で４８時間反
応を行なった。反応終了後、実施例１と同様に処理し、
Ｄ−アスパラギン酸１．３ｆを得た。〔α）２５＝−２
４，’５°（Ｃ＝ ２，６ＮＨＣｌ ） 実施例４ 実施例１と同様にして培養したトリコスポロン・フラノ
カム（ＦＥＲＭ−Ｐ２１４ ）の培地４５１１ｔより得
られた菌体をＤＬ−アスパラギン酸３ｔを含むＩ） Ｈ
６，５の水溶液１００ ｍｌに添加し、４０℃で４８時
間反応を行なった。反応終了後、実施例１と同様に処理
し、Ｄ−アスパラギン酸１、２ １ を 得 ｊこ 。
実施例２ 実施例１と同様にして培養したクリプトコツカス・ラウ
レンテイ（ＦＥＲＭ−Ｐ２Ｏ３）の培地３０ ｍｌより
得られる菌体をＤＬ−アスパラギン酸３ｆを含むｐＨ６
，５の水溶液１００ ｍｌに添加し、４０℃で反応を行
なった。さらに２４．４８時時間区ＤＬ−アスパラギン
酸を各々４ｆずつ添加し、その後２４時間反応を続けた
。反応終了後、遠心除菌し上清を２０１１ｔまで減圧濃
縮する。この濃縮液をｐＨ２，８に調整し、１０℃にて
３時曲攪拌する。析出した結晶を口取し、冷水で洗浄す
ること４によりＤ−アスパラギン酸４、７ ｆ を
ｆ！７ ｆこ 。 〔α ）２８ ＝−２５，０
° （Ｃ−２ゾロＮＨＣｌ ） 実施例３ 実施例１と同様にして培養したキャノティダーフミコー
ラ（ＦＥＲＭ−Ｐ７１５ ）の培地５０＊ｔより得られ
る菌体をＤＬ−アスパラギン酸３ｆを含むＩ） Ｈ７，
０の水溶液１００ ｘｉに添加し、４０℃で４８時間反
応を行なった。反応終了後、実施例１と同様に処理し、
Ｄ−アスパラギン酸１．３ｆを得た。〔α）２５＝−２
４，’５°（Ｃ＝ ２，６ＮＨＣｌ ） 実施例４ 実施例１と同様にして培養したトリコスポロン・フラノ
カム（ＦＥＲＭ−Ｐ２１４ ）の培地４５１１ｔより得
られた菌体をＤＬ−アスパラギン酸３ｔを含むＩ） Ｈ
６，５の水溶液１００ ｍｌに添加し、４０℃で４８時
間反応を行なった。反応終了後、実施例１と同様に処理
し、Ｄ−アスパラギン酸１、２ １ を 得 ｊこ 。
〔α ）２５ ＝ −２４，６° （Ｃ＝
２．６ＮＨＣｌ ）
２．６ＮＨＣｌ ）
Claims (1)
- クリプトコッカス属、キャンディダ属、及びトリコスポ
ロン属から選ばれる少なくとも一種の微生物であって、
Ｌ−アスパラギン酸をオキシカルボン酸及び脂肪族カル
ボン酸の少なくとも１種から選ばれる有機酸に変換する
ことができる微生物またはその処理物の含有液と、ＤＬ
−アスパラギン酸及び／又はその塩を接触反応させ、次
いで前記微生物の作用を受けなかったＤ−アスパラギン
酸を反応生成物から分離することを特徴とするＤ−アス
パラギン酸の製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12520584A JPS615793A (ja) | 1984-06-20 | 1984-06-20 | Ｄ−アスパラギン酸の製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12520584A JPS615793A (ja) | 1984-06-20 | 1984-06-20 | Ｄ−アスパラギン酸の製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS615793A true JPS615793A (ja) | 1986-01-11 |
| JPH0378999B2 JPH0378999B2 (ja) | 1991-12-17 |
Family
ID=14904498
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12520584A Granted JPS615793A (ja) | 1984-06-20 | 1984-06-20 | Ｄ−アスパラギン酸の製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS615793A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6360398A (ja) * | 1986-08-28 | 1988-03-16 | 藤田 昌利 | トンネルの防水方法 |
-
1984
- 1984-06-20 JP JP12520584A patent/JPS615793A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6360398A (ja) * | 1986-08-28 | 1988-03-16 | 藤田 昌利 | トンネルの防水方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0378999B2 (ja) | 1991-12-17 |
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