JPS6256433A - 制癌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、抗生物￥ｔＲＫ−６４７Ａ′８！Ｊ質を有効
成分として含存することを特徴とする新規な制癌剤に関
するものである。

従来、癌化学療法剤として、アルキル化剤（ナイトクジ
エンマスタード類、エチレンイミン類、スルフォン酸エ
ステル類）、代謝拮抗物質（葉酸拮抗剤、プリン拮抗剤
、ピリミジン拮抗剤）、植物性核分裂前（コルセミド、
ビンブラスチン等）、抗生物Ｍ　（ザルコマイシン、カ
ルチノフィリン、マイトマイシン等）、ホルモン類（副
腎ステロイド、男性ホルモン、女性ホルモン）及びポル
フィリン錯塩（マーフィリン、ｃｏｐρ）等が用いられ
ている。

本発明者らは、すぐれた制癌活性を有する物質を探索し
て、ストレプトミセス（Ｓ　ｔｒｅｐ　ｔｏｍｙｃｅｓ
　）属に属する微生物の代謝産物の生理活性につき、鋭
意研究の結果、新規抗生物質ＲＫ−６４７Ａ物質が、優
れた制癌活性を有することを見出し、この物質が癌治療
に顕著な効果を発揮し得ることの新たな知見を得て、本
発明の制癌剤を完成するに至った。本発明の制癌剤の有
効成分は、人、家畜、犬、猫等の温血動物に対する優れ
た癌化学療法剤となり得るものである。

本発明に用いる制癌活性を有する抗生物質ＲＫ−６４，
７Ａ物質及びその生産菌については、特許出願公開昭５
９−１９８９８１号「新規抗生物質ＲＫ−６４７Ａ及び
その製造法」公報に詳述されている。本物質を生産する
に当っては、ストレプトミセス属に属する抗生物質ＲＫ
−６４７Ａ生産菌を、抗生物質を生産する通常の方法で
培養することができる。培養の形態は、液体培養でも固
体培養でもよ（、工業的に有利に培養するためには、上
記生産菌の胞子懸濁液又は培養液を培地に接種し、通気
攪拌培養を行えばよい。

培地の栄養剤としては特に限定されることなく、微生物
の培養に通常用いられる炭素源、窒素源その他を培地中
に含有させることができる。

炭素源としては、澱粉、デキストリン、グリセリン、グ
ルコース、シュークロース、ガラクトース、イノシトー
ル、マンニトールなどが、また窒素源としては、ペプト
ン、大豆粉、肉エキス、米ぬか、麩、尿素、コーンステ
イープリカー、アンモニウム塩、硝酸塩、その他の有機
または無機の窒素含有物が用いられる。その他、無機塩
類、例えば食塩、リン酸塩類、カルシウム、亜鉛、マン
ガン、鉄等の金属塩類等を適宜に添加してもよく、必要
に応じて消泡剤としての動、植、鉱物油等を添加しても
よい。

培養温度、培養時間等の培養条件は使用菌の発育に適し
、しかもＲＫ−６４７Ａの生産が最高となるような条件
が選ばれる。たとえば、培地のｐＨは中性付近がよく、
培養の適温は２５℃〜３５℃程度が望ましい。また培養
時間は通常２〜７日間程度がよい。

しかし、これらの培養組成物、培地の液性、培養温度、
攪拌条件などの培養条件は使用する菌株の種類や外部の
条件などに応じて好ましい結果が得られるよう適宜調節
選択されるべきであることはいうまでもない。このよう
にして得られる培養物から、抗生物質ＲＫ−６４７Ａを
得るには代謝産物を採取するのに通常用いられる手段を
適宜に利用して採取し得る。たとえば、ＲＫ−６４７Ａ
と不純物との溶解度差を利用する手段、吸着親和力の差
を利用する手段、イオン結合力の差を利用する手段、有
８１溶剤との間の分配の差を利用する手段のいずれも、
それぞれ単独で、または組合わせて、あるいは反復して
利用される。

具体的には、ＲＫ−６４７Ａは培養濾液及び培養菌体に
存在するが、培養濾液より陽イオン交換樹脂Ｄｏ智ｅｘ
　５０　ＷＸ　８　（Ｈ型）に吸脱着させることが適当
である。培養菌体中に存在するＲＫ−６４７Ａは、菌体
を含水アセトン、あるいは含水メタノール等を用いて抽
出することが出来る。このように抽出されたＲＫ−６４
７Ａは、その両性の性質を利用して、吸着クロマトグラ
フィー、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロ
マトグラフィー等を組合わせて精製することが出来る。

吸着クロマトグラフィーの担体としては、ダイヤイオン
ＨＰ−４０、活性炭、シリカゲル等の吸着剤が使用され
る。イオン交換クロマトグラフィーの担体としては、Ｄ
ＥＡＥ−セルロース、ＤＥＡＥ　−セファロース、ＣＭ
−セルロース、ＣＭ−セファデックス等のイオン交換体
を利用することが出来る。又、ゲル濾過には、セファデ
ックスＬＨ−２０が有利に使用し得る。更に高度の精製
には高速液体クロマトグラフィーが利用される。この場
合の使用カラムは逆層分配型のものが有利に使用出来る
。このようにして精製されたＲＫ−６４７Ａは、その水
溶液にエタノール、アセトン等を加えると高純度の白色
の粉末として沈澱するので、これを濾過により採取する
ことが出来る。この白色粉末を含水アルコール、含水ア
セトン等により再結晶して無色結晶のＲＫ−６４７Ａ物
質を得る。

本発明の制癌剤は、経口及び非経口投与のいずれも使用
可能であり、経口投与する場合は、軟・硬カプセル剤又
は錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤として投与され、非経口
投与する場合は、水溶性）話濁液、油性製剤などの皮下
或いは静脈注射剤、点滴剤及び固体状又は懸濁粘稠液状
として持続的な粘膜吸収が維持できるように生薬のよう
な剤型で投与され得る。

本発明の有効成分の製剤化は、界面活性剤、賦形剤、滑
沢剤、佐剤、及び有効成分の性質を考慮して腸溶性製剤
とするために医薬的に許容し得る皮膜形成物質、コーテ
ィング助剤等を用いて適宜行うことができ、その具体例
を挙げれば、次のとおりである。

本発明の組成物の崩壊、溶出を良好ならしめるために、
界面活性剤、例えばアルコール、エステル類、ポリエチ
レングリコール誘導体、ソルビタンの脂肪酸エステル類
、硫酸化脂肪アルコール類等の１種又は２種以上を添加
することができる。

また、賦形剤として、例えば蔗糖、乳糖、デンプン、結
晶セルロース、マンニット、ＩＩ　Ｋ　＝、　水珪酸、
アルミン酸マグネシウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシ
ウム、合成珪酸アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸水
素ナトリウム、リン酸水素カルシウム、カルボキシメチ
ルセルロースカルシウム等の１種又は２種以上を組合わ
せて添加することができる。

滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タ
ルク、硬化油等を１種又は２種以上添加することができ
、また矯味剤及び矯臭剤として、食塩、サッカリン、糖
、マンニット、オレンジ油カンゾウエキス、クエン酸、
ブドウ糖、メントール、ユーカリ油、リンゴ酸等のけ味
剤、香料、着色料、保存料等を含有させてもよい。

懸濁剤、湿潤剤の如き佐剤としては、例えばココナツツ
油、オリーブ油、ゴマ油、落花生油、乳酸カルシウム、
ヘニバナ油、大豆リン脂質等を含有させることができる
。

また皮膜形成物質としては、セルロース、糖類等の炭水
化物誘導体として酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）　
、またアクリル酸系共重合体、二塩基酸モノエステル類
等のポリビニル誘導体としてアクリル酸メチル・メタア
クリル酸共重合体、メタアクリル酸メチル・メタアクリ
ル酸共重合体が挙げられる。

また、上記皮膜形成物質をコーティングするに際し、通
常使用されるコーティング助剤、例えば可塑剤の他、コ
ーティング操作時の薬剤相互の付着防止のための各種添
加剤を添加することによって皮膜形成剤の性質を改良し
たり、コーティング操作をより容易ならしめることがで
きる。なお、有効成分を皮膜形成物質を用いてマイクロ
カプセル化してから賦形剤等と混合した剤型としても良
い。

特に代表的な剤型における配合比は下記の通りである。

特に好ましい範囲 有効成分　　０．１〜９０重量％　　０．３〜１５重量
％賦形剤　　　１０〜９９．９〃８５〜９９．７　　〃
滑沢剤　　　　Ｏ〜５０　〃　　　　０〜２０〃界面活
性剤　　０〜５０　Ｎ　　　　Ｏ〜２０〃皮膜形成物質
０．１〜５０〃０．３〜２０〃特に好ましい賦形剤は、
乳糖、結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースカ
ルシウムである。

また、投与量は、対象腫瘍を有効に治療するに十分な量
であり、腫瘍の症状、投与経路、剤型などによって左右
されるが、一般に、経口投与の場合、大人では１日当り
、約０．０１〜１００可／ｋｇ体重（小人では、０．０
１〜６０■／　ｋｇ体重）の範囲で、その上限は好まし
くは約５０■／　ｋｇ体重、更に好ましくは約１０■／
　ｋｇ体重程度であり、非経口投与の場合、その上限は
約１０　ｍｇ／　ｋｇ体重程度であり、好ましくは５ｔ
ｒｇ／ｋｇ体重、更に好ましくは２■／ｋｇ体重が適当
である。

次に、ＲＫ−６４７Ａ物質（以下「アスカマイシン」と
もいう。）の制癌活性を確認した制癌性試験について述
べる。

各種細胞を各々の培地で３７℃５％ＣＯ□を含む培養器
中に培養し５〜１０　Ｘ　１．０　’　ｃｅｌｌｓ／ｍ
６となった時に培地中にアスカマイシンを添加する。

アスカマイシンの培地中濃度は５ＸＩＯ−’〜１０−５
Ｍの間である。アスカマイシン処理２０時間後に各濃度
のアスカマイシンを含む新鮮なハムのＦ１２培地（１０
％ＦＣ３を含む）に交換し、５μＣｉ／ｍＡとなるよう
に３ＳＳ−メチオニンを加える。３５Ｓ−メチオニンで
３時間細胞をラベルした後、細胞をよく洗浄し、水冷ト
リクロル酢酸に不溶な両分の放射活性を測定する。

結果を次表に示す。

臼皿猶綱肥　　　　　　　　　＋１２．１ストヒ５上記
細胞の蛋白合成を５０％阻害するアスカマイシンの濃度
は０．５〜６．６μＭであった。

以下に本発明の製剤例を示す。

製剤例Ｉ　（注射・点滴剤） ＲＫ−６４７Ａ物質１０■を含存するように粉末ぶどう
ｊＪ！　５　ｇを加えてバイアルに無菌的に分配し、密
封した上、窒素、ヘリウム等の不活性ガスを密封して冷
暗所に保存する。使用前に０．８５％生理的食塩水１０
０ｍｊ！を添加して静脈内注射剤とし、１日、１０〜１
００ｍｊ！を症状に応じて静脈内注射又は点滴で投与す
る。

製剤例２（注射・点滴剤） ＲＫ−６４７Ａ物質２■を用いて、製剤例１と同様の方
法により軽症用静脈内注射剤とし、１日、１０＝１００
ｍｊ２を症状に応じて静脈内注射又は点滴で投与する。

製剤例３（腸溶性カプセル剤） ＲＫ−６４７Ａ物質５ｇ、乳糖２．４６　ｇ及びヒドロ
キシプロピルセルロース０．０４　ｇを各々とり、よく
混合した後、常法に従って粒状に成形し、これをよく乾
燥して篩別してビン、ヒートシール包装などに適した顆
粒剤を製造する。次に、酢酸フタル酸セルロース０．５
ｇ及びヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート
０．５ｇを溶解して被覆基材となし、前記顆粒を浮遊流
動させつ＼この基材を被覆して腸溶性の顆粒剤とする。

この組成物をカプセルに充填して腸溶性カプセル製剤１
００個を特徴する

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）抗生物質ＲＫ−６４７Ａ物質を有効成分として含
   有することを特徴とする制癌剤。
2. （２）非経口投与形態による特許請求の範囲第１項記載
   の制癌剤。
3. （３）経口投与形態による特許請求の範囲第１項記載の
   制癌剤。