JPS6244194A - Ｌ−ソルボ−スの製造法 - Google Patents
Ｌ−ソルボ−スの製造法Info
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- JPS6244194A JPS6244194A JP9144786A JP9144786A JPS6244194A JP S6244194 A JPS6244194 A JP S6244194A JP 9144786 A JP9144786 A JP 9144786A JP 9144786 A JP9144786 A JP 9144786A JP S6244194 A JPS6244194 A JP S6244194A
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- sorbose
- medium
- dissolved oxygen
- oxygen concentration
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- Pending
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/02—Monosaccharides
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- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は微生物によるＬ−ソルボースの製造法に関する
。
。
従来の技術
Ｌ−ソルボースは、ビタミンＣ合成の原料として有用で
あり、本物質はＤ−ソルビットを微生物、たとえばグル
コノバクタ−属菌により酸化する方法により製造されて
いる。
あり、本物質はＤ−ソルビットを微生物、たとえばグル
コノバクタ−属菌により酸化する方法により製造されて
いる。
発明が解決しようとする問題点
従来のＬ−ソルボースの醗酵生産法によると原料である
Ｄ−ソルビットをＬ−ソルボースへ変換する収率は約９
３％程度までてあり、５−ケトフラクトース、Ｄ−フラ
クトースあるいは２−ケトグルコン酸などがかなり副生
ずる。ビタミンＣの原料コスト低減のために、その中間
製造工程におけるＤ−ソルビットのＬ−ソルボースへの
変換収率を従来以上に増大させ、上記副生物の生成をで
きるだけ抑制することが要望されている。
Ｄ−ソルビットをＬ−ソルボースへ変換する収率は約９
３％程度までてあり、５−ケトフラクトース、Ｄ−フラ
クトースあるいは２−ケトグルコン酸などがかなり副生
ずる。ビタミンＣの原料コスト低減のために、その中間
製造工程におけるＤ−ソルビットのＬ−ソルボースへの
変換収率を従来以上に増大させ、上記副生物の生成をで
きるだけ抑制することが要望されている。
問題点を解決するための手段
本発明者らは上記の状況に鑑み、Ｌ−ソルボースを効率
よく生産する方法につき種々検討し、本発明を完成した
。
よく生産する方法につき種々検討し、本発明を完成した
。
すなわち、本発明はＤ−ソルビットを微生物学的に酸化
してＬ−ソルボースを製造する方法において、利用する
微生物の増殖期における培地中の溶存酸素濃度を約１〜
４ ｐｐｍに制御しながら培養することを特徴とするＬ
−ソルボースの製造法である。
してＬ−ソルボースを製造する方法において、利用する
微生物の増殖期における培地中の溶存酸素濃度を約１〜
４ ｐｐｍに制御しながら培養することを特徴とするＬ
−ソルボースの製造法である。
本発明製造法では、Ｄ−ソルビットを酸化してＬ−ソル
ボースを生成せしめる能力を有する微生物であればいず
れも用いることができる。その例としては、グルコノバ
クタ−属に属する微生物、たとえばグルコノバクタ−・
サブオキシダンス（Ｇ １ｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ
５ｕｂｏｘｙｄａｎｓ）あるいはグルコノバクタ−・オ
キシダンス（Ｇ １ｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒｏｘｙｄａ
ｎｓ）の種菌があげられ、その具体的な菌株例としては
、たとえばグルコノバクタ−・サブオキシダンスＩＦ’
０ ３２５４．ＩＦＯ３２５７゜ＩＦＯ１２５２８，Ｉ
ＦＯ３２５５，ＩＦＯ３２５６、ＩＦＯ３２５８あるい
はＩＦ’０３２９１や、さらにはグルコノバクタ−・オ
キシダンス ＩＰｏ ３１８９などが挙げられる。
ボースを生成せしめる能力を有する微生物であればいず
れも用いることができる。その例としては、グルコノバ
クタ−属に属する微生物、たとえばグルコノバクタ−・
サブオキシダンス（Ｇ １ｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ
５ｕｂｏｘｙｄａｎｓ）あるいはグルコノバクタ−・オ
キシダンス（Ｇ １ｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒｏｘｙｄａ
ｎｓ）の種菌があげられ、その具体的な菌株例としては
、たとえばグルコノバクタ−・サブオキシダンスＩＦ’
０ ３２５４．ＩＦＯ３２５７゜ＩＦＯ１２５２８，Ｉ
ＦＯ３２５５，ＩＦＯ３２５６、ＩＦＯ３２５８あるい
はＩＦ’０３２９１や、さらにはグルコノバクタ−・オ
キシダンス ＩＰｏ ３１８９などが挙げられる。
上記に例示された各菌株は、財団法人発酵研究所（Ｉｎ
ｓｔｉｔｕｔｅ Ｆｏｒ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏ
ｎ ０ｓａｋａ。
ｓｔｉｔｕｔｅ Ｆｏｒ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏ
ｎ ０ｓａｋａ。
ＩＦＯ）発行のリスト・オブ・カルチャーズ、 １９８
４、セブンス・エディジョン（Ｌｉｓｔ ｏｆＣｕｌ
ｔｕｒｅｓ、 １９８４．５ｅｖｅｎｔｈ Ｅｄｉｔ
ｉｏｎ）に掲載されており、該研究所に保管されている
。
４、セブンス・エディジョン（Ｌｉｓｔ ｏｆＣｕｌ
ｔｕｒｅｓ、 １９８４．５ｅｖｅｎｔｈ Ｅｄｉｔ
ｉｏｎ）に掲載されており、該研究所に保管されている
。
次に、本発明でいう微生物の増殖期とは、利用する微生
物を培養する際における誘導期および増殖対数期が終わ
るまでの培養期間をいう。本増殖期間は利用する微生物
の種類や培養条件によって異なるが、常法により増殖曲
線を求めることにより容易に知ることができる。一般に
は、培地中の窒素源が消費されるまでの培養期間で、た
とえば培養開始後約９時間までがこの増殖期に相当する
ことが多い。
物を培養する際における誘導期および増殖対数期が終わ
るまでの培養期間をいう。本増殖期間は利用する微生物
の種類や培養条件によって異なるが、常法により増殖曲
線を求めることにより容易に知ることができる。一般に
は、培地中の窒素源が消費されるまでの培養期間で、た
とえば培養開始後約９時間までがこの増殖期に相当する
ことが多い。
本発明では増殖期における培地中の溶存酸素濃度が約１
〜４ ｐｐｍに制御される。この場合、溶存酸素濃度の
変動幅をできるだけ少なくするのが有利であり、通常は
上記の濃度範囲内で選択された設定値を中心に約０ 、
５ ｐｐｍ以内、さらに好ましくは約０ 、３ ｐｐｍ
以内の変動幅に制御する。
〜４ ｐｐｍに制御される。この場合、溶存酸素濃度の
変動幅をできるだけ少なくするのが有利であり、通常は
上記の濃度範囲内で選択された設定値を中心に約０ 、
５ ｐｐｍ以内、さらに好ましくは約０ 、３ ｐｐｍ
以内の変動幅に制御する。
溶存酸素濃度は、酸素電極を用いて常法により測定し培
地中の該濃度を連続測定しながら培養の進行と共に通気
量、内圧、攪拌条件等を調整して制御される。たとえば
、培養の進行と共に通気量を約０．１〜１．ＯＶ、Ｖ、
Ｍ、まで、内圧を０〜２ 、０ ｋｇ／ ｃｍ２Ｇまで
、それぞれ段階的に組み合わせていくとにより、さらに
必要に応じて攪拌機の回転数を調整しながら本発明で特
定する所定の溶存酸素濃度に制御することができる。
地中の該濃度を連続測定しながら培養の進行と共に通気
量、内圧、攪拌条件等を調整して制御される。たとえば
、培養の進行と共に通気量を約０．１〜１．ＯＶ、Ｖ、
Ｍ、まで、内圧を０〜２ 、０ ｋｇ／ ｃｍ２Ｇまで
、それぞれ段階的に組み合わせていくとにより、さらに
必要に応じて攪拌機の回転数を調整しながら本発明で特
定する所定の溶存酸素濃度に制御することができる。
次に、増殖期以後における培地中の溶存酸素濃度は特定
の水準に調整する必要はないが、通常増殖期終了時の通
気攪拌条件でもって約０，５〜４ｐｐｍ程度で培養を継
続すればよい。
の水準に調整する必要はないが、通常増殖期終了時の通
気攪拌条件でもって約０，５〜４ｐｐｍ程度で培養を継
続すればよい。
本発明の特徴は増殖期における培地中の溶存酸素濃度を
約ｌ〜４ ｐｐｍに制御することにあり、その他の製造
条件は通常の方法に従かえばよく、たとえば次の方法に
よって実施される。
約ｌ〜４ ｐｐｍに制御することにあり、その他の製造
条件は通常の方法に従かえばよく、たとえば次の方法に
よって実施される。
培地中の炭素源としては主原料のＤ−ソルビット（Ｄ
−Ｓ ｏｒｂｉｔｏｌ）と、それに加えてＤ−グルコー
ス、Ｄ−フラクトース、Ｄ−マンニトール、エタノール
等を添加してもよい。一般に、培地中のＤ−ソルビット
は約１０〜５０Ｗ／Ｖ％、好ましくは約３０〜５０Ｗ／
Ｖ％で培養が開始される。
−Ｓ ｏｒｂｉｔｏｌ）と、それに加えてＤ−グルコー
ス、Ｄ−フラクトース、Ｄ−マンニトール、エタノール
等を添加してもよい。一般に、培地中のＤ−ソルビット
は約１０〜５０Ｗ／Ｖ％、好ましくは約３０〜５０Ｗ／
Ｖ％で培養が開始される。
また、窒素源としてはコーンステイープリカー。
綿実粉、酵母エキス、乾燥酵母、フィツシュミール。
肉エキス、ペプトン、カザミノ酸その他の含窒素有機資
源、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、酢酸アンモ
ニウム、リン酸アンモニウム、塩化アンモニウム、アン
モニア水、アンモニアガスなどの無機窒素化合物の池、
グルタミン酸ソーダ、アラニンなどのアミノ酸、尿素な
どの有機窒素化合物が使用される。培地には上記の炭素
源や窒素源に加えて、微生物の生育に必要な種々の金属
、ビタミン。
源、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、酢酸アンモ
ニウム、リン酸アンモニウム、塩化アンモニウム、アン
モニア水、アンモニアガスなどの無機窒素化合物の池、
グルタミン酸ソーダ、アラニンなどのアミノ酸、尿素な
どの有機窒素化合物が使用される。培地には上記の炭素
源や窒素源に加えて、微生物の生育に必要な種々の金属
、ビタミン。
アミノ酸、核酸類などが適宜添加される。
本発明において、主培地としては合成培地を有利に用い
ることができる。この場合には炭素源として主原料とし
てのＤ−ソルビトールと、それに加えてＤ−グルコース
、Ｄ−フラクトース、Ｄ−マンニトールあるいはメタノ
ールを用いてもよい。
ることができる。この場合には炭素源として主原料とし
てのＤ−ソルビトールと、それに加えてＤ−グルコース
、Ｄ−フラクトース、Ｄ−マンニトールあるいはメタノ
ールを用いてもよい。
窒素源としては硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、
酢酸アンモニウムあるいはリン酸アンモニウムなどの無
機窒素源と、これに加えてグルタミン酸ナトリウムある
いはアラニンなどを併用してもよい。特に酢酸アンモニ
ウムを好ましくは使用できる。合成培地中の各種成分の
濃度（重量／容量％）は、たとえば次のような範囲から
選択し得る。
酢酸アンモニウムあるいはリン酸アンモニウムなどの無
機窒素源と、これに加えてグルタミン酸ナトリウムある
いはアラニンなどを併用してもよい。特に酢酸アンモニ
ウムを好ましくは使用できる。合成培地中の各種成分の
濃度（重量／容量％）は、たとえば次のような範囲から
選択し得る。
Ｄ−ソルビット １０〜５０
Ｋ Ｈ、Ｐ Ｏ４０，００５〜０．１
Ｍｇ５Ｏ，・７Ｈ２００，００５〜０．０５ＣａＣＯ３
０，００５〜０．０５ 酢酸アンモニウム ０．０２〜０．０５グルタミン
酸ソーダ ０．０５〜０．２Ｆ ｅＳ Ｏ４・７
ＨｔＯＯ，００００５〜０．０００５ＭｎＳ Ｏ４・ｍ
Ｈｔｏ Ｏ，００００００５〜０．００００５
ニコチン酸アミド ０．０００１〜０．０１パン
トテン酸カルシウム０．００００１〜０．０１パラアミ
ノ安息香酸 ０．０００００１〜ｏ、ｏｏｏｔビタミ
ンＢ 、 ０．００００１〜０．０ＯＬ
本発明において、溶存酸素濃度以外の培養条件は、通常
の条件と同様でよく、特に限定されない。すなわち、培
養温度は、一般的には約１５°Ｃないし４５°Ｃで、好
ましくは２５°Ｃないし４０℃であり、培地のｐＨは一
般的には約３．０ないし８．０で、好ましくは約３．５
ないし６．５である。また培養時間は一般的には約ＩＯ
ないし１００時間であり、好ましくはＩ５ないし４０時
間である。
０，００５〜０．０５ 酢酸アンモニウム ０．０２〜０．０５グルタミン
酸ソーダ ０．０５〜０．２Ｆ ｅＳ Ｏ４・７
ＨｔＯＯ，００００５〜０．０００５ＭｎＳ Ｏ４・ｍ
Ｈｔｏ Ｏ，００００００５〜０．００００５
ニコチン酸アミド ０．０００１〜０．０１パン
トテン酸カルシウム０．００００１〜０．０１パラアミ
ノ安息香酸 ０．０００００１〜ｏ、ｏｏｏｔビタミ
ンＢ 、 ０．００００１〜０．０ＯＬ
本発明において、溶存酸素濃度以外の培養条件は、通常
の条件と同様でよく、特に限定されない。すなわち、培
養温度は、一般的には約１５°Ｃないし４５°Ｃで、好
ましくは２５°Ｃないし４０℃であり、培地のｐＨは一
般的には約３．０ないし８．０で、好ましくは約３．５
ないし６．５である。また培養時間は一般的には約ＩＯ
ないし１００時間であり、好ましくはＩ５ないし４０時
間である。
かくして、培養を終了した培養物中からし一ンルボース
を常法により、たとえば培養物をろ過して除菌後、活性
炭を用いて脱色し、減圧濃縮を経て、メタノール、エタ
ノール、アセトンなどでＬ−ソルボースを晶出させて得
ることができる。
を常法により、たとえば培養物をろ過して除菌後、活性
炭を用いて脱色し、減圧濃縮を経て、メタノール、エタ
ノール、アセトンなどでＬ−ソルボースを晶出させて得
ることができる。
実施例
以下に、実験例と共に実施例を挙げて本発明をさらに具
体的に説明する。
体的に説明する。
実験例！
後述の実施例Ｉと同様の微生物および培地を用いて、増
殖期における培地中の溶存酸素濃度を種々変化させた以
外は、実施例１と同様の培養条件で培養を行なった。培
養終了後のＬ−ソルボース。
殖期における培地中の溶存酸素濃度を種々変化させた以
外は、実施例１と同様の培養条件で培養を行なった。培
養終了後のＬ−ソルボース。
Ｄ−フラクトース、２−ケトグルコン酸、５−ケトフラ
クトースのＤ−ソルビットに対する収率を表−１に示す
。
クトースのＤ−ソルビットに対する収率を表−１に示す
。
表−１
ト
フ
表−１において、Ｌ−ソルボース、Ｄ−フラクトース、
５−ケトフラクトース、２−ケトグルコン酸は、いずれ
も高速液体クロマトグラフィーにょって測定した。すな
わち、Ｌ−ソルボースは、ウォーターズンユガーバッタ
ーをカラムとしてｌｏ−４モル濃度ＥＤＴＡカルシウム
塩水溶液を移動相に検出器として高感度示差屈折計を使
用した。Ｄ−フラクトース及び５−ケトフラクトースは
ｌ５Ａ−０７／５２５０４（島原製作所（株）製）をカ
ラムとして３ホウ酸（１）Ｉ−４８，０）を移動相にし
てアルギニン発色法を用いて蛍光分析器によって測定し
た。
５−ケトフラクトース、２−ケトグルコン酸は、いずれ
も高速液体クロマトグラフィーにょって測定した。すな
わち、Ｌ−ソルボースは、ウォーターズンユガーバッタ
ーをカラムとしてｌｏ−４モル濃度ＥＤＴＡカルシウム
塩水溶液を移動相に検出器として高感度示差屈折計を使
用した。Ｄ−フラクトース及び５−ケトフラクトースは
ｌ５Ａ−０７／５２５０４（島原製作所（株）製）をカ
ラムとして３ホウ酸（１）Ｉ−４８，０）を移動相にし
てアルギニン発色法を用いて蛍光分析器によって測定し
た。
また２−ケトグルコン酸はショウデックスイオンバック
Ｃ−８１１（昭和電工（株）製）をカラムとして０．８
５％リン酸を移動相にして紫外部吸収（２１０ｎｍ）で
測定した。
Ｃ−８１１（昭和電工（株）製）をカラムとして０．８
５％リン酸を移動相にして紫外部吸収（２１０ｎｍ）で
測定した。
表１の結果に示されるように、増殖期における培地中の
溶存酸素濃度を本発明で特定するように制御し、培養す
ると（Ｎｏ、１．２および３参照）、これらよりも溶存
酸素濃度が高い場合（Ｎｏ、４゜５および６参照）に比
較して、５−ケトフラクトース、Ｄ−フラクトースある
いは２−ケトグルコン酸などの副生物量が減少し、目的
物であるＬ−ソルボースの収率を増大させることができ
る。
溶存酸素濃度を本発明で特定するように制御し、培養す
ると（Ｎｏ、１．２および３参照）、これらよりも溶存
酸素濃度が高い場合（Ｎｏ、４゜５および６参照）に比
較して、５−ケトフラクトース、Ｄ−フラクトースある
いは２−ケトグルコン酸などの副生物量が減少し、目的
物であるＬ−ソルボースの収率を増大させることができ
る。
実験例２
実験例１におけると同様の微生物および培地を用いて、
増殖期における溶存酸素濃度を表−２のように調整した
以外は実験例１と同様の方法により培養してＬ−ソルボ
ースを製造した。
増殖期における溶存酸素濃度を表−２のように調整した
以外は実験例１と同様の方法により培養してＬ−ソルボ
ースを製造した。
表−２
表−２の結果に示されるように、溶存酸素濃度の変動幅
が±０．３内に制御されるとき、Ｌ−ソルボースの収率
が高くなる。
が±０．３内に制御されるとき、Ｌ−ソルボースの収率
が高くなる。
実施例１
グルコノバクタ−・サブオキシダンスＩＦＯ３２５４を
Ｄ−ソルビット２０％、グルタミン酸ソーダ０．２％、
炭酸カルシウム０．０１８％、ニコチン酸アミド０．０
０３％、パントテン酸カルシウム０．０００３％、ビタ
ミンＢ２ ０．０００１％。
Ｄ−ソルビット２０％、グルタミン酸ソーダ０．２％、
炭酸カルシウム０．０１８％、ニコチン酸アミド０．０
０３％、パントテン酸カルシウム０．０００３％、ビタ
ミンＢ２ ０．０００１％。
パラアミノ安息香酸０．０００１％、リン酸−カリウム
０．０４７％、酵母エキス０．０３％、硫酸マグネシウ
ム０．０１％、硫酸第一鉄０．０００１５％。
０．０４７％、酵母エキス０．０３％、硫酸マグネシウ
ム０．０１％、硫酸第一鉄０．０００１５％。
硫酸マンガン０．００００１％、アクトコール０．００
０５％からなる培地１（Ｈ２に接種し、３０℃、２４時
間培養し、これを種としてＤ−ソルビット３０％、酢酸
アンモニウム００３９％、炭酸カルシウム０．０１８％
、ニコチン酸アミド０．００３％、パントテン酸カルシ
ウム０．０００２５％、ビタミン８２０．０００１％。
０５％からなる培地１（Ｈ２に接種し、３０℃、２４時
間培養し、これを種としてＤ−ソルビット３０％、酢酸
アンモニウム００３９％、炭酸カルシウム０．０１８％
、ニコチン酸アミド０．００３％、パントテン酸カルシ
ウム０．０００２５％、ビタミン８２０．０００１％。
パラアミノ安息香酸０．００００１％、リン酸−カリウ
ム０．０２％、硫酸マグネシウム０．０１％、硫酸第一
鉄０．０００１５％、硫酸マンガン０．００００１％か
らなる培地１００Ｑに移植した。
ム０．０２％、硫酸マグネシウム０．０１％、硫酸第一
鉄０．０００１５％、硫酸マンガン０．００００１％か
らなる培地１００Ｑに移植した。
これを３０℃で培養し、培養開始後９時間、溶存酸素濃
度を２．５±０ 、５ ｐｐｍになるように通気量を０
．１〜０．６Ｖ、Ｖ、Ｍ、及び内圧を０．１〜１ 、５
ｋｇ／ ｃｍ’ Ｇの範囲で調整し、次いで増殖期以
後は通気ｆｉｌ ０．６Ｖ、Ｖ、Ｍ、、内圧１．５ｋ
ｇ／ｃｍ”Ｇで培養し、合計２０時間培養した。このと
きの、溶存酸素濃度（ＤＯ）、Ｄ−ソルビットおよびＬ
−ソルボースの濃度変化と培養時間の関係を第１図に示
す。本培養法により、Ｌ−ソルボースが対ソルビット収
率９６１％で蓄積された。
度を２．５±０ 、５ ｐｐｍになるように通気量を０
．１〜０．６Ｖ、Ｖ、Ｍ、及び内圧を０．１〜１ 、５
ｋｇ／ ｃｍ’ Ｇの範囲で調整し、次いで増殖期以
後は通気ｆｉｌ ０．６Ｖ、Ｖ、Ｍ、、内圧１．５ｋ
ｇ／ｃｍ”Ｇで培養し、合計２０時間培養した。このと
きの、溶存酸素濃度（ＤＯ）、Ｄ−ソルビットおよびＬ
−ソルボースの濃度変化と培養時間の関係を第１図に示
す。本培養法により、Ｌ−ソルボースが対ソルビット収
率９６１％で蓄積された。
実施例２
グルコノバクタ−・サブオキシダンスＩＦＯ３２５７を
Ｄ−ソルビット２０％、グルタミン酸ソーダ０２％、炭
酸カルシウム０．０１８％、ニコチン酸アミド０．００
３％、パントテン酸カルシウム０．０００３％、ビタミ
ンＢ、 ０．０００１％。
Ｄ−ソルビット２０％、グルタミン酸ソーダ０２％、炭
酸カルシウム０．０１８％、ニコチン酸アミド０．００
３％、パントテン酸カルシウム０．０００３％、ビタミ
ンＢ、 ０．０００１％。
パラアミノ安息香酸ｏ、ｏｏｏｔ％、リン酸−カリウム
０．０４７％、酵母エキス０．０３％、硫酸マグネシウ
ム０．０１％、硫酸第一鉄０．０００１５％。
０．０４７％、酵母エキス０．０３％、硫酸マグネシウ
ム０．０１％、硫酸第一鉄０．０００１５％。
硫酸マンガン０．００００１％、アクトコール０．００
０５％からなる培地１０ｆ２に接種し、３０℃２４時間
培養し、これを種にして、Ｄ−ソルビット３０％、酢酸
アンモニウム０．０２９％、炭酸カルシウム０．０１８
％、ニコチン酸アミド０．００３％、パントテン酸カル
シウム０．０００２５％、ビタミンＢ、 ０．０００
１％。
０５％からなる培地１０ｆ２に接種し、３０℃２４時間
培養し、これを種にして、Ｄ−ソルビット３０％、酢酸
アンモニウム０．０２９％、炭酸カルシウム０．０１８
％、ニコチン酸アミド０．００３％、パントテン酸カル
シウム０．０００２５％、ビタミンＢ、 ０．０００
１％。
パラアミノ安息香酸０．００００１％、リン酸−カリウ
ム０．０２％、硫酸マグネノウム０．Ｏ１％、硫酸第−
鉄０．０００１５％、硫酸マンガンｏ、ｏｏｏｏｉ％か
らなる培地１００Ｑに移植し、これを３０℃で２０時間
培養した。この培養期間中、培養開始後、９時間までの
溶存酸素濃度を３．５±０ 、５ ｐｐｍになるように
通気量を０．２〜０．６Ｖ、Ｖ、Ｍ、、内圧を０ 、２
〜１ 、５ ｋｇ／ｃｍ２Ｇ 。
ム０．０２％、硫酸マグネノウム０．Ｏ１％、硫酸第−
鉄０．０００１５％、硫酸マンガンｏ、ｏｏｏｏｉ％か
らなる培地１００Ｑに移植し、これを３０℃で２０時間
培養した。この培養期間中、培養開始後、９時間までの
溶存酸素濃度を３．５±０ 、５ ｐｐｍになるように
通気量を０．２〜０．６Ｖ、Ｖ、Ｍ、、内圧を０ 、２
〜１ 、５ ｋｇ／ｃｍ２Ｇ 。
攪拌を２３０〜３００ ｒｐｍまで変更して培養し、増
殖期以後は通気量 ０．６Ｖ、Ｖ、Ｍ、、内圧１．５ｋ
ｇ／ｃｍ”Ｇ、Ｑ拌３００ ｒｐｍで培養したところＬ
−ソルボースが対Ｄ−ソルビット収率９５．７％で蓄積
された。
殖期以後は通気量 ０．６Ｖ、Ｖ、Ｍ、、内圧１．５ｋ
ｇ／ｃｍ”Ｇ、Ｑ拌３００ ｒｐｍで培養したところＬ
−ソルボースが対Ｄ−ソルビット収率９５．７％で蓄積
された。
実施例３
グルコノバクタ−・ザブオキシダンスＩＦＯ１２５２８
をＤ−ソルビット２０％、グルタミン酸ソーダ０．２％
、炭酸カルシウム０．０１８％、ニコチン酸アミド０．
００３％、パントテン酸カルシウム０．０００３％、ビ
タミン８２０．０００１％。
をＤ−ソルビット２０％、グルタミン酸ソーダ０．２％
、炭酸カルシウム０．０１８％、ニコチン酸アミド０．
００３％、パントテン酸カルシウム０．０００３％、ビ
タミン８２０．０００１％。
パラアミノ安息香酸０．０００１％、リン酸−カリウム
０．０４７％、酵母エキス０．０３％、硫酸マグネシウ
ム０．０１％、硫酸第一鉄０．０００１５％。
０．０４７％、酵母エキス０．０３％、硫酸マグネシウ
ム０．０１％、硫酸第一鉄０．０００１５％。
硫酸マンガン０．００００１％、アクトコール０．００
０５％からなる培地１００Ｑに移植し、３０℃２４時間
培養し、これを種としてＤ−ソルビット３０％、酢酸ア
ンモニウム０．０３９％、炭酸カルシウム０．０１８％
、ニコチン酸アミド０．００３％、パントテン酸カルシ
ウム０．０００２５％、ビタミンＢ、 ０．０００１
％。
０５％からなる培地１００Ｑに移植し、３０℃２４時間
培養し、これを種としてＤ−ソルビット３０％、酢酸ア
ンモニウム０．０３９％、炭酸カルシウム０．０１８％
、ニコチン酸アミド０．００３％、パントテン酸カルシ
ウム０．０００２５％、ビタミンＢ、 ０．０００１
％。
バラアミノ安息香酸ｏ、ｏｏｏｏｔ％、リン酸−カリウ
ム０．０２％、硫酸マグネシウム０．０１．％、硫酸第
−鉄０．０００１５％、硫酸マンガン０．００００１％
、からなる培地１，０ＯＯｉ２１：移植し、これを３０
℃２０時間培養した。この培養期間中、培養期間中開始
後９時間溶存酸素濃度が１．５±０ 、５ ｐｐｍにな
るように通気量を０．１〜０．５Ｖ、Ｖ、Ｍ、、内圧を
Ｏ〜１ 、５ ｋｇ／ｃｍ’Ｇまで変更して培養し増殖
期以後通気ｆｉｏ、５Ｖ、Ｖ。
ム０．０２％、硫酸マグネシウム０．０１．％、硫酸第
−鉄０．０００１５％、硫酸マンガン０．００００１％
、からなる培地１，０ＯＯｉ２１：移植し、これを３０
℃２０時間培養した。この培養期間中、培養期間中開始
後９時間溶存酸素濃度が１．５±０ 、５ ｐｐｍにな
るように通気量を０．１〜０．５Ｖ、Ｖ、Ｍ、、内圧を
Ｏ〜１ 、５ ｋｇ／ｃｍ’Ｇまで変更して培養し増殖
期以後通気ｆｉｏ、５Ｖ、Ｖ。
Ｍｌ、内圧１ 、５ ｋｇ／ｃｍ”Ｇで培養したところ
し−ソルボースが対Ｄ−ソルビット収率９６．３％で蓄
積された。
し−ソルボースが対Ｄ−ソルビット収率９６．３％で蓄
積された。
発明の効果
本発明によると、Ｄ−ソルビットを微生物学的に酸化し
てＬ−ソルボースを製造する方法において従来法に比較
して、Ｌ−ソルボースの収率を増大させることができる
。すなわち、従来法ではＤ−ソルビットに対するＬ−ソ
ルボースの収率は高くても約９３％程度までであったが
、本発明によると従来法よりも２〜３％以上収率を上げ
ることができ、しかもＤ−フラクトース、２−ケトグル
コン酸、５−ケトフラクトースなどの副生物の生成を少
なくすることができる。この結果、ビタミンＣ製造にお
ける原料コスト中、その占める割合がきわめて高いＬ−
ソルボースを従来法よりも安価に供給することができ、
医薬、食品等において幅広い用途を有するビタミンＣの
製造コストが低減される。
てＬ−ソルボースを製造する方法において従来法に比較
して、Ｌ−ソルボースの収率を増大させることができる
。すなわち、従来法ではＤ−ソルビットに対するＬ−ソ
ルボースの収率は高くても約９３％程度までであったが
、本発明によると従来法よりも２〜３％以上収率を上げ
ることができ、しかもＤ−フラクトース、２−ケトグル
コン酸、５−ケトフラクトースなどの副生物の生成を少
なくすることができる。この結果、ビタミンＣ製造にお
ける原料コスト中、その占める割合がきわめて高いＬ−
ソルボースを従来法よりも安価に供給することができ、
医薬、食品等において幅広い用途を有するビタミンＣの
製造コストが低減される。
第１図は実施例１に従って本発明を実施したときの培養
時間と培養液中の溶存酸素、Ｄ−ソルビットおよびＬ−
ソルボースの濃度の関係を示す。図中、−０−は溶存酸
素濃度を、−・−はＤ−ソルビット濃度を、また−〇−
はＬ−ソルボース濃度をそれぞれ示す。
時間と培養液中の溶存酸素、Ｄ−ソルビットおよびＬ−
ソルボースの濃度の関係を示す。図中、−０−は溶存酸
素濃度を、−・−はＤ−ソルビット濃度を、また−〇−
はＬ−ソルボース濃度をそれぞれ示す。
Claims (1)
- Ｄ−ソルビットを微生物学的に酸化してＬ−ソルボース
を製造する方法において、利用する微生物学的の増殖期
における培地中の溶存酸素濃度を約１〜４ｐｐｍに制御
しながら培養することを特徴とするＬ−ソルボースの製
造法
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8674785 | 1985-04-22 | ||
| JP60-86747 | 1985-04-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6244194A true JPS6244194A (ja) | 1987-02-26 |
Family
ID=13895368
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9144786A Pending JPS6244194A (ja) | 1985-04-22 | 1986-04-21 | Ｌ−ソルボ−スの製造法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0199548A3 (ja) |
| JP (1) | JPS6244194A (ja) |
| CN (1) | CN86102773A (ja) |
| DK (1) | DK184086A (ja) |
| ES (1) | ES8706834A1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000049133A1 (de) * | 1999-02-19 | 2000-08-24 | Basf Aktiengesellschaft | Verfahren zur herstellung von l-sorbose |
| JP2002115624A (ja) * | 2000-09-29 | 2002-04-19 | Robert Bosch Gmbh | ディスクフィルタを備えた絞りエレメント |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0233050B1 (en) * | 1986-02-11 | 1992-09-16 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Method for producing l-sorbose |
| FR2677665A1 (fr) * | 1991-06-14 | 1992-12-18 | Asahi Chemical Ind | Plasmide contenant un gene d'un cytochrome specifique et procede de fermentation par oxydation. |
| CN112625955B (zh) * | 2020-12-24 | 2022-07-08 | 浙江新和成股份有限公司 | 一种氧化葡糖杆菌及其在生产古龙酸中的应用 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS592691A (ja) * | 1982-06-29 | 1984-01-09 | Asahi Chem Ind Co Ltd | アルコールおよび糖質の酸化法 |
-
1986
- 1986-04-17 EP EP86302878A patent/EP0199548A3/en not_active Withdrawn
- 1986-04-21 JP JP9144786A patent/JPS6244194A/ja active Pending
- 1986-04-21 ES ES554207A patent/ES8706834A1/es not_active Expired
- 1986-04-22 DK DK184086A patent/DK184086A/da not_active Application Discontinuation
- 1986-04-22 CN CN198686102773A patent/CN86102773A/zh active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000049133A1 (de) * | 1999-02-19 | 2000-08-24 | Basf Aktiengesellschaft | Verfahren zur herstellung von l-sorbose |
| JP2002115624A (ja) * | 2000-09-29 | 2002-04-19 | Robert Bosch Gmbh | ディスクフィルタを備えた絞りエレメント |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0199548A3 (en) | 1988-08-24 |
| ES554207A0 (es) | 1987-07-01 |
| EP0199548A2 (en) | 1986-10-29 |
| CN86102773A (zh) | 1986-11-12 |
| DK184086D0 (da) | 1986-04-22 |
| ES8706834A1 (es) | 1987-07-01 |
| DK184086A (da) | 1986-10-23 |
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