JPS62284A - キラ−因子Ｋｈ−１及びその製造法 - Google Patents
キラ−因子Ｋｈ−１及びその製造法Info
- Publication number
- JPS62284A JPS62284A JP60118772A JP11877285A JPS62284A JP S62284 A JPS62284 A JP S62284A JP 60118772 A JP60118772 A JP 60118772A JP 11877285 A JP11877285 A JP 11877285A JP S62284 A JPS62284 A JP S62284A
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- killer
- factor
- killer factor
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- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Soy Sauces And Products Related Thereto (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新規なキラー因子Ｋｈ−Ｉ及びその製造法に関
するものである。
するものである。
更に詳細には、本発明は、塩類存在下で高活性の新規な
キラー因子Ｋｈ−Ｉ及びその製造法に関するものである
。
キラー因子Ｋｈ−Ｉ及びその製造法に関するものである
。
従来、キラー活性を有する酵母は数多く見出されている
。（化学と生物 Ｖｏ１２５． Ｎｏ、 ３１５１−１
６１頁１９８５）また、これら酵母によって生産される
それぞれのキラー因子についてもかなり詳細に解明され
るに至っている。
。（化学と生物 Ｖｏ１２５． Ｎｏ、 ３１５１−１
６１頁１９８５）また、これら酵母によって生産される
それぞれのキラー因子についてもかなり詳細に解明され
るに至っている。
しかしながら、従来、高濃度食塩存在下で生育するキラ
ー因子生産陶が高濃度食塩存在下でキラー活性を示すキ
ラー因子を生産するという報告はみられない。
ー因子生産陶が高濃度食塩存在下でキラー活性を示すキ
ラー因子を生産するという報告はみられない。
本発明者らは、高濃度＊塩存在下で、生育し、かつ、活
性を有するキジ−因子を生産する菌が見出せれば、醤油
醸造の菌そう制御に有効に利用できるとの発想のもとに
、該菌を求めて鋭意研究したところ、この目的に合致す
る一陶株を分離することに成功したのである。
性を有するキジ−因子を生産する菌が見出せれば、醤油
醸造の菌そう制御に有効に利用できるとの発想のもとに
、該菌を求めて鋭意研究したところ、この目的に合致す
る一陶株を分離することに成功したのである。
新たに分離された園株はノ・ンゼヌラ・アノマラ（Ｈａ
ｎｓｅｎｕｌａ ａｎｏｍａｌａ ）に属すものと認め
られた（ザーイースト・ア・タキソノミツク・スタディ
・サード・リバイスド・アンド・エンラージド・エディ
ジョンによる）ので、ハンセヌラ−アノマラＫｈ−Ｉと
命名され、微工研にＦＥＲＭ Ｐ−８１５９として寄
託された。
ｎｓｅｎｕｌａ ａｎｏｍａｌａ ）に属すものと認め
られた（ザーイースト・ア・タキソノミツク・スタディ
・サード・リバイスド・アンド・エンラージド・エディ
ジョンによる）ので、ハンセヌラ−アノマラＫｈ−Ｉと
命名され、微工研にＦＥＲＭ Ｐ−８１５９として寄
託された。
ハンゼヌラ・アノマラＫｈ−Ｉの菌学的性質は次の通ゆ
である。
である。
１、ＹＭ培地（ペプトン０．５％、麦芽エキス０．３俤
、酵母エキス０．３チ、グルコース１％）によく生育す
る。細胞は円形、柑円形又は伸長形をなす。
、酵母エキス０．３チ、グルコース１％）によく生育す
る。細胞は円形、柑円形又は伸長形をなす。
２、胞子は山高帽状を呈す。
３、ＹＭ液体培地で２０℃６日間の培養により、ガスの
発生が認められ、表面に弱く生育し、クリープ状を呈す
。培地はやや濁り、粉状の沈澱物を生成する。
発生が認められ、表面に弱く生育し、クリープ状を呈す
。培地はやや濁り、粉状の沈澱物を生成する。
４、ＹＭ寒天培地で２０℃６日間の培養により、よく生
育し、コロニーは隆起状となる。コロニー表面はスムー
スで、きらきら輝く光沢を有し、ムコイド状を呈す。
育し、コロニーは隆起状となる。コロニー表面はスムー
スで、きらきら輝く光沢を有し、ムコイド状を呈す。
５、糖の資化性及びガス発生の有無
資化性 ガス発生
グルコース ＋ ＋ガラクトース
＋ ＋シュークロース ＋
十 〇マルトース ＋
＋ラクトース − −
ラフィノース ＋ ＋メリビオース
−− イヌリン 十 − キシロース ＋ −可溶性澱粉
＋ 試験せずトレハロース 十
−アラビノース ±
−α−メチルグルコシド ＋ −イノシ
トール −− ６、塩類添加培地でキラー因子Ｋｈ−Ｉをよく生産する
。次の表は各塩類を８チにしたＹＭ培地におけるキラー
活性の生産を示すものである。
＋ ＋シュークロース ＋
十 〇マルトース ＋
＋ラクトース − −
ラフィノース ＋ ＋メリビオース
−− イヌリン 十 − キシロース ＋ −可溶性澱粉
＋ 試験せずトレハロース 十
−アラビノース ±
−α−メチルグルコシド ＋ −イノシ
トール −− ６、塩類添加培地でキラー因子Ｋｈ−Ｉをよく生産する
。次の表は各塩類を８チにしたＹＭ培地におけるキラー
活性の生産を示すものである。
Ｚ 食塩濃度６〜１０チで最適生育を示す。第５図は各
食塩一度のＹＭ培地（ｐＨ４，８）における６０℃４日
培養の生育曲線を６６０ ｎｍの吸光度で示す。
食塩一度のＹＭ培地（ｐＨ４，８）における６０℃４日
培養の生育曲線を６６０ ｎｍの吸光度で示す。
８、高食塩濃度でも十分生育する。第６図は食塩１６チ
添加培地における増殖曲線を示し、第７図は食塩１８チ
添加培地における増殖曲線を示す。
添加培地における増殖曲線を示し、第７図は食塩１８チ
添加培地における増殖曲線を示す。
９、ｐＨ５〜５に至適培養…がある。第８図は各ｐｉ（
におけるＹＭ培地（食塩０チ）で６０℃４日間培養した
生育曲線である。
におけるＹＭ培地（食塩０チ）で６０℃４日間培養した
生育曲線である。
１０．３０℃に最適培養温度がある。第９図は各温度に
おけるＹＭ培地（食塩０チ、ｐｉ（４，８）で４日間培
養した生育曲線である。
おけるＹＭ培地（食塩０チ、ｐｉ（４，８）で４日間培
養した生育曲線である。
へンゼヌラ・アノマラＫｈ−Ｉの培養は、キラー因子Ｋ
ｈ−Ｉを生産しうる培地で行なわれる。
ｈ−Ｉを生産しうる培地で行なわれる。
資化し得る炭素源、窒素源、栄養料等適宜含有する培地
であればいかなる培地でもよい。また、醤油諸法、醤油
諸法液汁等またはこれらを含有する培地で培養すること
も好ましい。
であればいかなる培地でもよい。また、醤油諸法、醤油
諸法液汁等またはこれらを含有する培地で培養すること
も好ましい。
次に示すのけ、一般的で菌体の増殖及びキラー因子Ｋｈ
−Ｉの生産に好ましいＹＥＰＤ培地である。
−Ｉの生産に好ましいＹＥＰＤ培地である。
（ＹＥＰＤ培地）
グルコース ２チ
ポリにプトン ２チ
酵母エキス １チ
ＮａＣｌ２ ％
培養は１５〜２５℃程度で、５〜６日間静置培養によっ
て行なわれる。
て行なわれる。
得られた培養液は濾過して、培ａＦ液とし、これをフオ
ロファイバーＨＩＰ−１０（アミコン社製）で濃縮し、
濃縮液をセファデックスＧ−２５でゲル濾過にかけ、キ
ラー因子Ｋｈ−Ｉの溶出画分をウルトラフィルターＵＫ
−１０（アトパンティク社製）にて限外濾過にかけ、得
られた濃縮液をＣＭ−セファデックスＣ−２５でイオン
交換し、キラー因子Ｋｈ−Ｉ溶出画分をウルトラフィル
ターＵＫ−１０にて限外濾過にかけ、得られた虚縮液を
真空凍結乾燥して、キラー因子Ｋｈ−Ｉの乾燥白色粉末
を得る。
ロファイバーＨＩＰ−１０（アミコン社製）で濃縮し、
濃縮液をセファデックスＧ−２５でゲル濾過にかけ、キ
ラー因子Ｋｈ−Ｉの溶出画分をウルトラフィルターＵＫ
−１０（アトパンティク社製）にて限外濾過にかけ、得
られた濃縮液をＣＭ−セファデックスＣ−２５でイオン
交換し、キラー因子Ｋｈ−Ｉ溶出画分をウルトラフィル
ターＵＫ−１０にて限外濾過にかけ、得られた虚縮液を
真空凍結乾燥して、キラー因子Ｋｈ−Ｉの乾燥白色粉末
を得る。
次に、ここに得られたキラー因子Ｋｈ−Ｉの理化学的性
質を示す。
質を示す。
１、分子量二約！１０万ダルトン（ゲル濾過法による測
定） ２、元素分析： Ｃ： ４７．４５チ、Ｈ：６．５５％
Ｎ：３．４６％ ３、等電点：ｐＨ＝２．９０ ４、紫外線吸収スペクトル：第１図だ示す通り。
定） ２、元素分析： Ｃ： ４７．４５チ、Ｈ：６．５５％
Ｎ：３．４６％ ３、等電点：ｐＨ＝２．９０ ４、紫外線吸収スペクトル：第１図だ示す通り。
５、赤外線吸収スＲクトル：第２図に示す通り。
６、酵母に対する致死作用：塩類存在下においてのみ致
死作用を 示す。
死作用を 示す。
Ｚ 致死作用ｐＨ： ｐＨ３，０〜６．０（２チ食塩存
在下）１５℃でチゴサッカロミ セス・ルキシーに対する活性 曲線は第６図に示す通り。
在下）１５℃でチゴサッカロミ セス・ルキシーに対する活性 曲線は第６図に示す通り。
（キラー活性はメチレンプル
を含有するＹＭ培地に感受性
Ｉ＠をスプｖ−し、カップをの
せ、その中にキラー因子を含
む溶液１０μｔを入れ２０℃。
４日間培養後の阻止円の面積
−で表示した）
８、 分ＭＩＨｌパパインによって分解される。麹菌
プロテアーゼによって徐々に分 解される。
プロテアーゼによって徐々に分 解される。
９ 温度感受性二食塩２チ添加培地における各＠度にお
けるキラー相対活性 の経時変化は第４図に示す通 りである。
けるキラー相対活性 の経時変化は第４図に示す通 りである。
１０、 キラースペクトル：キラー因子Ｋｈ−Ｉのキ
ラースペクトル は表１に示される。
ラースペクトル は表１に示される。
（食塩２チ添加培地
による）
表１
次に本発明の実施例を示す。
実施例１゜
グルコース ２チ
ボリにプトン ２％
酵母エキス １％
Ｎａ（、ｔ ８％上記組成のＹＥ
ＰＩ）培地にハンゼヌラ働アノマラＫｈ−１，Ｆ’ＥＲ
Ｍ Ｐ−８１５９を接種し。
ＰＩ）培地にハンゼヌラ働アノマラＫｈ−１，Ｆ’ＥＲ
Ｍ Ｐ−８１５９を接種し。
２０℃で、５日間静置培養した。
得られた培養液２０１をハイフロス−パーセルで濾過し
、得られた培養Ｐ液２０１を７オロフアイバーＨＩＰ−
１０（アミコン社製）で５０−に濃縮した。
、得られた培養Ｐ液２０１を７オロフアイバーＨＩＰ−
１０（アミコン社製）で５０−に濃縮した。
得られたＪ＠養謎縮／１５［１ｍｊをセファデックスＧ
−２５でゲル濾過し、キラー因子Ｉ（ｈ −１溶出画分
を分離し、これをウルトラフィルターＵＫ−１０（アト
パンティク社製）で限外Ｐ遇する。
−２５でゲル濾過し、キラー因子Ｉ（ｈ −１溶出画分
を分離し、これをウルトラフィルターＵＫ−１０（アト
パンティク社製）で限外Ｐ遇する。
得られたゲル濾過濃縮液５０ｍ１をＣＭ−セファデック
スＣ−２５でイオン交換にかけ、キラー物、 質溶出
画分を分離し、これをウルトラフィルターＵＫ−１０に
て限外濾過にかけ、得られたイオン交換＃縮液５０ｍ１
を真空凍結乾Ｊ栗し、キラー因子Ｋｈ−Ｉの凍結乾条白
色粉末１０３■を得た。
スＣ−２５でイオン交換にかけ、キラー物、 質溶出
画分を分離し、これをウルトラフィルターＵＫ−１０に
て限外濾過にかけ、得られたイオン交換＃縮液５０ｍ１
を真空凍結乾Ｊ栗し、キラー因子Ｋｈ−Ｉの凍結乾条白
色粉末１０３■を得た。
第１図は、キラー因子Ｋｈ−Ｉの紫外線吸収スにクトル
を示す図で、第２図はその赤外線吸収スペクトルを示す
図で、第６図はその致死作用−を示す図で、第４図はそ
の温度感受性を示す図で、第５図はハンゼヌラ・アノマ
ラＫｈ−Ｉの各食塩濃度における生育曲線を示す図で、
第６図はその食塩１６％添加培地における増殖曲線を示
す図で、第７図はその食塩１８チ添加培地における増殖
曲線を示す図で、第８図はその各ｐａｌにおける生育曲
線を示す図で、第９図はその各温度における生育曲線を
示す図である。 代理人 弁理士 戸 １）親 男 Φ 区 −三ト続ネ市正書 昭和６１年 ７月２５日
を示す図で、第２図はその赤外線吸収スペクトルを示す
図で、第６図はその致死作用−を示す図で、第４図はそ
の温度感受性を示す図で、第５図はハンゼヌラ・アノマ
ラＫｈ−Ｉの各食塩濃度における生育曲線を示す図で、
第６図はその食塩１６％添加培地における増殖曲線を示
す図で、第７図はその食塩１８チ添加培地における増殖
曲線を示す図で、第８図はその各ｐａｌにおける生育曲
線を示す図で、第９図はその各温度における生育曲線を
示す図である。 代理人 弁理士 戸 １）親 男 Φ 区 −三ト続ネ市正書 昭和６１年 ７月２５日
Claims (2)
- （１）下記の理化学的性質を有するキラー因子 １、分子量：約３０万ダルトン（ゲル濾過法による測定
） ２、元素分析：Ｃ：４７．４５％、Ｈ：６．５５％Ｎ：
３．４６％ ３、等電点：ｐＨ＝２．９０ ４、紫外線吸収スペクトル：第１図に示す通り。 ５、赤外線吸収スペクトル：第２図に示す通り。 ６、酵母に対する致死作用：塩類存在下においてのみ致
死作用を示す。 ７、致死作用ｐＨ：ｐＨ３．０〜６．０（２％食塩存在
下）１５℃でチゴサッカロミセス・ルキシーに対する活
性曲線は第３図に示す通り。 ８、分解性：パパインによって分解される。麹菌プロテ
アーゼによって徐々に分解される。 ９、温度感受性：食塩２％添加培地における各温度にお
けるキラー相対活性の経時変化は第４図に示す通りであ
る。 １０、キラースペクトル：キラー因子Ｋｈ− I のキラ
ースペクトルは表１に示される。（食塩２％添加培地に
よる） 表１ ▲数式、化学式、表等があります▼ - （２）ハンゼヌラ属に属するキラー因子Ｋｈ− I 生産
菌を培養し、培養物よりキラー因子Ｋｈ− I を採取す
ることを特徴とするキラー因子Ｋｈ− I の製造法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60118772A JPS62284A (ja) | 1985-06-03 | 1985-06-03 | キラ−因子Ｋｈ−１及びその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60118772A JPS62284A (ja) | 1985-06-03 | 1985-06-03 | キラ−因子Ｋｈ−１及びその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62284A true JPS62284A (ja) | 1987-01-06 |
| JPH0570639B2 JPH0570639B2 (ja) | 1993-10-05 |
Family
ID=14744691
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60118772A Granted JPS62284A (ja) | 1985-06-03 | 1985-06-03 | キラ−因子Ｋｈ−１及びその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62284A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6778325B2 (en) | 1998-03-31 | 2004-08-17 | Nikon Corporation | Optical filter and optical device provided with this optical filter |
-
1985
- 1985-06-03 JP JP60118772A patent/JPS62284A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6778325B2 (en) | 1998-03-31 | 2004-08-17 | Nikon Corporation | Optical filter and optical device provided with this optical filter |
| US7075719B2 (en) | 1998-03-31 | 2006-07-11 | Nikon Corporation | Optical filter and optical device provided with this optical filter |
| US7961244B2 (en) | 1998-03-31 | 2011-06-14 | Nikon Corporation | Optical filter and optical device provided with this optical filter |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0570639B2 (ja) | 1993-10-05 |
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