JPS62275694A - ジフルクト−ス、ジアンヒドリド▲ｉｉｉ▼の製造法 - Google Patents
ジフルクト−ス、ジアンヒドリド▲ｉｉｉ▼の製造法Info
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- JPS62275694A JPS62275694A JP11908886A JP11908886A JPS62275694A JP S62275694 A JPS62275694 A JP S62275694A JP 11908886 A JP11908886 A JP 11908886A JP 11908886 A JP11908886 A JP 11908886A JP S62275694 A JPS62275694 A JP S62275694A
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
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Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野］
本発明は、イヌリン及び／またはイヌリン含有植物抽出
液より微生物及び／またはその産生ずる酵素を利用して
ジフルクトース ジアンヒドリド■（以下ＤＦＡＩＩＩ
という）を高収率で製造する方法に関するものである。
液より微生物及び／またはその産生ずる酵素を利用して
ジフルクトース ジアンヒドリド■（以下ＤＦＡＩＩＩ
という）を高収率で製造する方法に関するものである。
ＤＦＡＩ［Ｉは１９３１年ジャクソンら（Ｂｕｒ、５ｔ
ａｎｄ、Ｊ。
ａｎｄ、Ｊ。
Ｒｅｓ、Ｊ、７０９．１９３１）によって単離同定され
た２糖類で、その構造より還元基を持たず、非発酵性の
糖であることなどにより、着色をおさえた食品への利用
、発酵食品への糖せ味付加等に有用である。
た２糖類で、その構造より還元基を持たず、非発酵性の
糖であることなどにより、着色をおさえた食品への利用
、発酵食品への糖せ味付加等に有用である。
［従来の技術］
イヌリンはフラクトースを主構成糖とする多糖である。
ジャクソンらは、イヌリンを酸分解してその加水分解物
よりＤＦＡＩＩＩを単離しているが、収率は約２％と低
く、効率的な製造法とはいえない。口中ら（Ｂｉｏｃｈ
ｉｍ、Ｂｉｏｐｙｓ、Ａｃｔａ、２ｆｌｌ、２４８．１
０７２）は１９７２年アース口バクター・ウレアファシ
ェンスの産生ずる酵素を用いてＤＦＡＩＩＩを生成させ
ている。
よりＤＦＡＩＩＩを単離しているが、収率は約２％と低
く、効率的な製造法とはいえない。口中ら（Ｂｉｏｃｈ
ｉｍ、Ｂｉｏｐｙｓ、Ａｃｔａ、２ｆｌｌ、２４８．１
０７２）は１９７２年アース口バクター・ウレアファシ
ェンスの産生ずる酵素を用いてＤＦＡＩＩＩを生成させ
ている。
［発明が解決しようとする問題点］
近年、食文化の変遷により甘味料も多様化の傾向にあり
、特にＤＦＡＩ［Ｉ等のこれまでの甘味料とは性質の異
なったものが要求されるようになってきた。しかし、Ｄ
ＦＡＩＩＩの従来の製造法を工業化することは困難であ
った。そこで、ＤＦＡＩＩＩの生産には独自の高活性Ｄ
ＦＡＩ［Ｉ合成酵素生産菌が必要となった。
、特にＤＦＡＩ［Ｉ等のこれまでの甘味料とは性質の異
なったものが要求されるようになってきた。しかし、Ｄ
ＦＡＩＩＩの従来の製造法を工業化することは困難であ
った。そこで、ＤＦＡＩＩＩの生産には独自の高活性Ｄ
ＦＡＩ［Ｉ合成酵素生産菌が必要となった。
［問題点を解決するための手段］
そこで本発明者等は微生物の検索を行った結果、ある種
の微生物がイヌリン及び／またはイヌリン含有植物抽出
液より高活性でＤ ＦＡＩＩＩを合成する酵素を産生す
ることを見い出した。
の微生物がイヌリン及び／またはイヌリン含有植物抽出
液より高活性でＤ ＦＡＩＩＩを合成する酵素を産生す
ることを見い出した。
本草の産生ずる酵素をイヌリン及び／またはイヌリン含
有植物抽出液に作用させることにより、ＤＦＡ［を効率
的に得ることができる。
有植物抽出液に作用させることにより、ＤＦＡ［を効率
的に得ることができる。
以下、本菌株の菌学的諸性質を述べる。
１．５Ａ胞形態
形ａ：Ｏ，Ｓ〜１．ＯＸ １．５〜４．０の桿菌胞子：
形成しない 鞭毛：なし ダラム染色：陽性 ２、培養所見 寒天集落：円形、丘状、光沢あり、不透明、白色 寒天斜面：中程度の生育、光沢あり、白色肉汁ゼラチン
：液化する ３、生理的諸性質 好気性 生育温度：３０°Ｃで良好な生育を示す３７℃で生育し
ない 硝酸塩の還元性：あり メチルレッド反応：陰性 硫１ヒ水索の生成：あり （システィン添加培地酢酸鉛
試験紙） クエン酸の利用：あり（クリステンセン培地）カタラー
ゼの生成：あり 澱粉分解性；あり カゼインの分解：あり 糖より酸の生成ニゲルコース、シュクロース、ラクトー
ス、マンニットのい ずれの糖からも酸及びガスを 生成しない Ｇ−Ｃ含量： ６２．０％ 上記の諸性質から、パージエイズ マニュアルオブ デ
タミネイティブ バクテリオロジー第８版により検索し
た結果、本菌株はアースロバフタ−属に属する。さらに
種については栄養要求性がなく澱粉を分解すること、及
びＧ−Ｃ含量などによりアースロバクター・グロビフォ
ルミスと同定される。アースロバクター・グロビフォル
ミスと本菌株の菌学的諸性質を比較すればきわめてよく
合致することから、本閏はアースロバクター・グロビフ
ォルミスと確定され、アースロバクター・グロビフォル
ミス Ｃ１１−１と命名された。ざらに同書第７版によ
れば、ノンクロモゲニックで澱粉を分解することなどか
ら、これまでにＤ Ｆ Ａ Ｉ合成酵素産生菌として知
られているアースロバフタ−・ウレアファシェンスとは
異なった種であるといえる。公知のアースロバクター・
グロビフォルミスも、該酵素産生菌である可ｈＦ性があ
る。
形成しない 鞭毛：なし ダラム染色：陽性 ２、培養所見 寒天集落：円形、丘状、光沢あり、不透明、白色 寒天斜面：中程度の生育、光沢あり、白色肉汁ゼラチン
：液化する ３、生理的諸性質 好気性 生育温度：３０°Ｃで良好な生育を示す３７℃で生育し
ない 硝酸塩の還元性：あり メチルレッド反応：陰性 硫１ヒ水索の生成：あり （システィン添加培地酢酸鉛
試験紙） クエン酸の利用：あり（クリステンセン培地）カタラー
ゼの生成：あり 澱粉分解性；あり カゼインの分解：あり 糖より酸の生成ニゲルコース、シュクロース、ラクトー
ス、マンニットのい ずれの糖からも酸及びガスを 生成しない Ｇ−Ｃ含量： ６２．０％ 上記の諸性質から、パージエイズ マニュアルオブ デ
タミネイティブ バクテリオロジー第８版により検索し
た結果、本菌株はアースロバフタ−属に属する。さらに
種については栄養要求性がなく澱粉を分解すること、及
びＧ−Ｃ含量などによりアースロバクター・グロビフォ
ルミスと同定される。アースロバクター・グロビフォル
ミスと本菌株の菌学的諸性質を比較すればきわめてよく
合致することから、本閏はアースロバクター・グロビフ
ォルミスと確定され、アースロバクター・グロビフォル
ミス Ｃ１１−１と命名された。ざらに同書第７版によ
れば、ノンクロモゲニックで澱粉を分解することなどか
ら、これまでにＤ Ｆ Ａ Ｉ合成酵素産生菌として知
られているアースロバフタ−・ウレアファシェンスとは
異なった種であるといえる。公知のアースロバクター・
グロビフォルミスも、該酵素産生菌である可ｈＦ性があ
る。
本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所にＦＥＲＭ
、 Ｐ−，８７４８として寄託されている。
、 Ｐ−，８７４８として寄託されている。
本菌株をイヌリン及び／またはイヌリン含有植物の抽出
液を唯一の炭素源としたｆｇ地に培養すれは、高活性の
Ｄ ＦＡＩＩ！合成静素が得られろ。培養温度範囲は２
０〜３７℃であり、培養時間は１２〜６０時間が適当で
ある。培養終了後、培養液をそのままあるいは遠心分離
等ｙにより固液分離して得た菌体を用いてもよいが、陥
凹処理して得られた培養上澄を、イヌリン及び／または
イヌリン含有植物抽出液に加えて反応させると、ＤＦＡ
Ｉが合成される。なお、イヌリン含有植物としてはダリ
ア、ゴボウ等があり、この細微生物起源のフラクトース
ポリマー（フラクトースの三糖類以上）も原料としての
利用が考えられる。反応液を加熱または酸処理して酵素
を失活させ、ア過、脱色、脱塩等の方法を用いて精製す
れば、オリゴ糖やフラクトースを含んだＤＦＡＩ［Ｉの
製品が得られる。さらに高純度のＤＦＡＩＩＩを得るに
は、精製した糖液を活性炭カラムクロマトグラフィ、市
販の充填剤を用いたゲルア過カラムクロマトグラフィ、
種々の膜を用いた膜分離濃縮などを行えばよい。または
、反応液に酵母を加えてＤＦＡＩ以外の糖を発酵させ、
その後精製する方法もＤ Ｆ Ａ、 ＩＩＩの純度を高
めるに有効な手段である。ゲルｊ濾過や膜外スπで分画
されたフラクトオリゴ糖等は、副産物として既存の利用
を行うこともできる。
液を唯一の炭素源としたｆｇ地に培養すれは、高活性の
Ｄ ＦＡＩＩ！合成静素が得られろ。培養温度範囲は２
０〜３７℃であり、培養時間は１２〜６０時間が適当で
ある。培養終了後、培養液をそのままあるいは遠心分離
等ｙにより固液分離して得た菌体を用いてもよいが、陥
凹処理して得られた培養上澄を、イヌリン及び／または
イヌリン含有植物抽出液に加えて反応させると、ＤＦＡ
Ｉが合成される。なお、イヌリン含有植物としてはダリ
ア、ゴボウ等があり、この細微生物起源のフラクトース
ポリマー（フラクトースの三糖類以上）も原料としての
利用が考えられる。反応液を加熱または酸処理して酵素
を失活させ、ア過、脱色、脱塩等の方法を用いて精製す
れば、オリゴ糖やフラクトースを含んだＤＦＡＩ［Ｉの
製品が得られる。さらに高純度のＤＦＡＩＩＩを得るに
は、精製した糖液を活性炭カラムクロマトグラフィ、市
販の充填剤を用いたゲルア過カラムクロマトグラフィ、
種々の膜を用いた膜分離濃縮などを行えばよい。または
、反応液に酵母を加えてＤＦＡＩ以外の糖を発酵させ、
その後精製する方法もＤ Ｆ Ａ、 ＩＩＩの純度を高
めるに有効な手段である。ゲルｊ濾過や膜外スπで分画
されたフラクトオリゴ糖等は、副産物として既存の利用
を行うこともできる。
精製されたＤＦＡＩ［Ｉの旋光度は［αコ＝＋ｔ３ｓ、
１：１Ｎクロマトグラフィによると、イヌリンの酸分解
により得られた標準のＤＦＡＩとＲｆ可は一致した。
１：１Ｎクロマトグラフィによると、イヌリンの酸分解
により得られた標準のＤＦＡＩとＲｆ可は一致した。
口実旋削］
次に実施例をあげて本発明をざらに詳しく説明するが、
これらに限定されるものではない。
これらに限定されるものではない。
実施例１
市販イヌリン０．３％、酵母エキス０．０５％、リン酸
２ナトリウム０．４％、リンＩＩ！２１カリウム０．１
％、硫酸マグネシウム０．０５％、硫酸第一鉄０．００
１％、塩化カルシウム０．００３％を含んだ培地１００
ｍｌを、ｐＨ７に調整して１２０℃で１５分間蒸気滅
滅菌る。この滅菌した培地にアースロバクター・グロビ
フォルミス Ｃ１１−１（ＦＥＲＭ Ｐ−８７４８）を
−白金耳接種し、３０℃で２４時間培養を行う。培養終
了後、遠心分ｇ！機で陥凹して得た培養上澄をｐＦ（５
に調整する。調整培養上澄液５ｒａｌに１０％イヌリン
溶液５ｍｌを加えて、３０℃において一夜反応させる。
２ナトリウム０．４％、リンＩＩ！２１カリウム０．１
％、硫酸マグネシウム０．０５％、硫酸第一鉄０．００
１％、塩化カルシウム０．００３％を含んだ培地１００
ｍｌを、ｐＨ７に調整して１２０℃で１５分間蒸気滅
滅菌る。この滅菌した培地にアースロバクター・グロビ
フォルミス Ｃ１１−１（ＦＥＲＭ Ｐ−８７４８）を
−白金耳接種し、３０℃で２４時間培養を行う。培養終
了後、遠心分ｇ！機で陥凹して得た培養上澄をｐＦ（５
に調整する。調整培養上澄液５ｒａｌに１０％イヌリン
溶液５ｍｌを加えて、３０℃において一夜反応させる。
反応液を加熱して酵素を失活後、反応）α中のＤＦＡＩ
ＩＩの生成率を高速液体クロマトグラフィを用いて求め
ると、ＤＦＡＩ１１８０．２％、フラクトース１５．４
％、オリゴ塘４．４％であった。
ＩＩの生成率を高速液体クロマトグラフィを用いて求め
ると、ＤＦＡＩ１１８０．２％、フラクトース１５．４
％、オリゴ塘４．４％であった。
実施例２
実施例１で得られた調整培養上澄液５ｍｌを、６５℃で
２０分間加温してイヌリナーゼを失活させた後、１０％
イヌリン溶液５ｍｌを加えて３０℃において一夜反応さ
せる。反応液を加熱して酵素を失活後、反応液中のＤＦ
ＡＩの生成率を高速液体クロマトグラフィを用いて求め
ると、ＤＦＡＩＩＩ８５．５％、オリゴ糖１４．５％で
あった。
２０分間加温してイヌリナーゼを失活させた後、１０％
イヌリン溶液５ｍｌを加えて３０℃において一夜反応さ
せる。反応液を加熱して酵素を失活後、反応液中のＤＦ
ＡＩの生成率を高速液体クロマトグラフィを用いて求め
ると、ＤＦＡＩＩＩ８５．５％、オリゴ糖１４．５％で
あった。
［発明の効果］
本発明によれば、ＤＦＡＩＩＩを高収率で製造すること
ができ、ＤＦＡＩＩＩはダイエツト甘味料として広い分
野での利用が期待される。
ができ、ＤＦＡＩＩＩはダイエツト甘味料として広い分
野での利用が期待される。
特許出願人 農林水産省食品総合研究所長日本澱粉工業
株式会社
株式会社
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）イヌリン及び／またはイヌリン含有植物抽出液にア
ースロバクター・グロビフォルミスに属する細菌及び／
またはその産生する酵素を作用させることを特徴とする
ジフルクトースジアンヒドリドIIIの製造法。 ２）アースロバクター・グロビフォルミスが、アースロ
バクター・グロビフォルミスＣ１１−１（ＦＥＲＭ Ｐ
−８７４８）である特許請求の範囲第一項に記載の製造
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61119088A JPH072116B2 (ja) | 1986-05-26 | 1986-05-26 | ジフルクト−ス、ジアンヒドリド▲ｉｉｉ▼の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61119088A JPH072116B2 (ja) | 1986-05-26 | 1986-05-26 | ジフルクト−ス、ジアンヒドリド▲ｉｉｉ▼の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62275694A true JPS62275694A (ja) | 1987-11-30 |
| JPH072116B2 JPH072116B2 (ja) | 1995-01-18 |
Family
ID=14752594
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61119088A Expired - Fee Related JPH072116B2 (ja) | 1986-05-26 | 1986-05-26 | ジフルクト−ス、ジアンヒドリド▲ｉｉｉ▼の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH072116B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01225492A (ja) * | 1988-03-07 | 1989-09-08 | Mitsubishi Kasei Corp | ジフルクトース・ジアンヒドリド３の製造法 |
| JPH01285195A (ja) * | 1988-05-13 | 1989-11-16 | Natl Food Res Inst | ジフルクトース・ジアンヒドリドの製造方法 |
| JP2005132774A (ja) * | 2003-10-30 | 2005-05-26 | Nippon Beet Sugar Mfg Co Ltd | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5626400A (en) * | 1979-08-09 | 1981-03-13 | Mitsuo Watanabe | Device for discharging movable charger |
-
1986
- 1986-05-26 JP JP61119088A patent/JPH072116B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5626400A (en) * | 1979-08-09 | 1981-03-13 | Mitsuo Watanabe | Device for discharging movable charger |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01225492A (ja) * | 1988-03-07 | 1989-09-08 | Mitsubishi Kasei Corp | ジフルクトース・ジアンヒドリド３の製造法 |
| EP0332108A2 (en) * | 1988-03-07 | 1989-09-13 | Mitsubishi Kasei Corporation | Process for the preparation of difructose dianhydride III |
| US5057418A (en) * | 1988-03-07 | 1991-10-15 | Mitsubishi Kasei Corporation | Process for the preparation of difructose dianhydride iii |
| JPH01285195A (ja) * | 1988-05-13 | 1989-11-16 | Natl Food Res Inst | ジフルクトース・ジアンヒドリドの製造方法 |
| JP2005132774A (ja) * | 2003-10-30 | 2005-05-26 | Nippon Beet Sugar Mfg Co Ltd | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
| JP4617077B2 (ja) * | 2003-10-30 | 2011-01-19 | 日本甜菜製糖株式会社 | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH072116B2 (ja) | 1995-01-18 |
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Legal Events
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