JPS62275693A - ジフルクト−スジアンヒドリド１の製造法 - Google Patents
ジフルクト−スジアンヒドリド１の製造法Info
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- JPS62275693A JPS62275693A JP11908786A JP11908786A JPS62275693A JP S62275693 A JPS62275693 A JP S62275693A JP 11908786 A JP11908786 A JP 11908786A JP 11908786 A JP11908786 A JP 11908786A JP S62275693 A JPS62275693 A JP S62275693A
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野コ
本発明は、イヌリン及び／またはイヌリン含有植物抽出
液より微生物及び／またはその産生ずる酵素を利用して
ジフルクトース ジアンヒドリド■ （以下ＤＦＡＩと
いう）を高収率で製造する方法に間するものである。
液より微生物及び／またはその産生ずる酵素を利用して
ジフルクトース ジアンヒドリド■ （以下ＤＦＡＩと
いう）を高収率で製造する方法に間するものである。
ＤＦＡＩは１９２９年ジャクソンら（Ｂｕｒ、５ｔａｎ
ｄ、Ｊ 。
ｄ、Ｊ 。
Ｒｅｓ、ユ、２７．１９２９）によって単離同定された
２糖頚で、その構造より還元基を持たず、非発酵性の糖
であることなどにより、着色をおさえた食品への利用、
発酵食品への糖せ味付加等に有用である。
２糖頚で、その構造より還元基を持たず、非発酵性の糖
であることなどにより、着色をおさえた食品への利用、
発酵食品への糖せ味付加等に有用である。
［従来の技術］
イヌリンはフラグド−スを主構成糖とする多糖である。
ジャクソンらは、イヌリンを酸分解してその加水分解物
よりＤＦＡＩを単離しているが、収率は２％以下と低く
、効率的な製造法とはいえない。口中ら（Ｃａｒｂｏｈ
ｙｄ ｒ −Ｒｅｓ −＋ ７５ ＞ ３４０ ＋ １
９７！１））は１９７９年かびの産生ずる酵素を用いて
Ｄ Ｆ Ａ Ｉを生成させている。
よりＤＦＡＩを単離しているが、収率は２％以下と低く
、効率的な製造法とはいえない。口中ら（Ｃａｒｂｏｈ
ｙｄ ｒ −Ｒｅｓ −＋ ７５ ＞ ３４０ ＋ １
９７！１））は１９７９年かびの産生ずる酵素を用いて
Ｄ Ｆ Ａ Ｉを生成させている。
［発明が解決しようとする問題点コ
近年、食文化の変遷により甘味料も多様化の傾向にあり
、特にＤＦＡＩ等のこれまでの甘味料とは性質の異なっ
たものが要求されるようになってきた。しかし、ＤＦＡ
Ｉの従来の製造法を工業化することは困難であった。そ
こで、ＤＦ、ｌ’ｌの生産には独自の高活性ＤＦＡＩ合
成酵素生産菌が必要となった・ ［問題点を解決するための手段］ そこで本発明者等は微生物の検索を行った結果、ある種
の微生物がイヌリン及び／またはイヌリン含有植物抽出
液より高活性でＤＦＡＴを合成する酵素を産生すること
を見い出した。
、特にＤＦＡＩ等のこれまでの甘味料とは性質の異なっ
たものが要求されるようになってきた。しかし、ＤＦＡ
Ｉの従来の製造法を工業化することは困難であった。そ
こで、ＤＦ、ｌ’ｌの生産には独自の高活性ＤＦＡＩ合
成酵素生産菌が必要となった・ ［問題点を解決するための手段］ そこで本発明者等は微生物の検索を行った結果、ある種
の微生物がイヌリン及び／またはイヌリン含有植物抽出
液より高活性でＤＦＡＴを合成する酵素を産生すること
を見い出した。
本菌の産生ずる酵素をイヌリン及び／またはイヌリン含
有植物抽出液に作用させることにより、ＤＦＡＩを効率
的に得ることができる。
有植物抽出液に作用させることにより、ＤＦＡＩを効率
的に得ることができる。
以下、本菌株の菌学的諸性質を述べる。
１、細胞形態
形７１Ｊ：０．５〜１．ＯＸ １．５〜４．０の＋ｔ
ｌＦ苗胞子：形成しない 鞭毛：なし ダラム染色：陽性 ２、培養所見 寒天集落二円形、丘状、光沢あり、不透明、白色 寒天斜面：中程度の生育、光沢あり、白色肉汁ゼラチン
：液化する ３、生理的諸性質 好気性 生育温度：３０°Ｃて良好な生育を示す３７℃で生育し
ない 硝酸塩の還元性：あり メチルレッド反応：陰性 硫化水素の生成：あり （システィン添加培地酢酸鉛試
験紙） クエン酸の利用：あり（クリステンセン培地）カタラー
ゼの生成：あり 澱粉分解性：あり カゼインの分解：あり 糖より酸の生成ニゲルコース、シュクロース、ラクトー
ス、マンニットのい ずれの糖からも酸及びガスを 生成しない Ｇ−Ｃ含ｆｉ：６３．９％ 上記の諸性質から、パージエイズ マニュアルオブ デ
タミネイティブ バクテリオロジー第８版により検索し
た結果、本菌株はアースロノ旬ター属に属する。さらに
種については栄養要求性がなく澱粉を分解すること、及
びＧ−Ｃ含量などによりアースロバフタ−・グロビフオ
ルミスと同定される。アースロバクター・グロビフォル
ミスと本菌株の菌学的諸性質を比較すればきわめてよく
合致することから、本菌はアースロバクター・グロビフ
ォルミスと確定され、アースロバクター・グロビフォル
ミス Ｈ２−１と命名された。公知のアースロバクター
・グロビフォルミスも、該酵素産生菌である可能性があ
る。
ｌＦ苗胞子：形成しない 鞭毛：なし ダラム染色：陽性 ２、培養所見 寒天集落二円形、丘状、光沢あり、不透明、白色 寒天斜面：中程度の生育、光沢あり、白色肉汁ゼラチン
：液化する ３、生理的諸性質 好気性 生育温度：３０°Ｃて良好な生育を示す３７℃で生育し
ない 硝酸塩の還元性：あり メチルレッド反応：陰性 硫化水素の生成：あり （システィン添加培地酢酸鉛試
験紙） クエン酸の利用：あり（クリステンセン培地）カタラー
ゼの生成：あり 澱粉分解性：あり カゼインの分解：あり 糖より酸の生成ニゲルコース、シュクロース、ラクトー
ス、マンニットのい ずれの糖からも酸及びガスを 生成しない Ｇ−Ｃ含ｆｉ：６３．９％ 上記の諸性質から、パージエイズ マニュアルオブ デ
タミネイティブ バクテリオロジー第８版により検索し
た結果、本菌株はアースロノ旬ター属に属する。さらに
種については栄養要求性がなく澱粉を分解すること、及
びＧ−Ｃ含量などによりアースロバフタ−・グロビフオ
ルミスと同定される。アースロバクター・グロビフォル
ミスと本菌株の菌学的諸性質を比較すればきわめてよく
合致することから、本菌はアースロバクター・グロビフ
ォルミスと確定され、アースロバクター・グロビフォル
ミス Ｈ２−１と命名された。公知のアースロバクター
・グロビフォルミスも、該酵素産生菌である可能性があ
る。
本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所にＦＥＲＭ
Ｐ−８７４０として寄託されている。
Ｐ−８７４０として寄託されている。
本菌株をイヌリン及び／またはイヌリン含有植物の抽出
液を唯一の炭素源とした培地に培養すれは、高活性のＤ
ＦＡＩ合成酵素が得られる。培養温度範囲は２０〜３７
°Ｃであり、培養時間は１２〜６０時間が適当である。
液を唯一の炭素源とした培地に培養すれは、高活性のＤ
ＦＡＩ合成酵素が得られる。培養温度範囲は２０〜３７
°Ｃであり、培養時間は１２〜６０時間が適当である。
培養終了後、培養）αをそのまま、あるいは遠心分能等
により固液分離して得た菌体を用いてもよいが、除菌処
理して得られた培養上澄を、イヌリン及び／またはイヌ
リン含有植物油出）αに加えて反応さ−せると、ＤＦＡ
Ｉが合成される。なお、イヌリン含有植物としてはダリ
ア、ゴボウ等があり、この細微生物起源のフラクトース
ポリマー（フラクトースの三糖類以上）も原料としての
使用が考えられる。反応）戊を加熱または酸処理して酵
素を失活させ、テ過、脱色、脱塩等の方法を用いて精製
すれば、オリゴ糖やフラグ）−スを含んだＤＦＡＩの製
品が得られる。さらに高純度のＤＦＡＩを得るには、精
製した糖液を活性炭カラムクロマトグラフィ、市販の充
填剤を用いたゲルｊ濾過カラムクロマトグラフィ、ｆｆ
ｆｉ々の膜を用いた膜分離濃縮などを行えばよい。また
は、反応液に酵母を加えてＤＦＡｒ以外の糖を発酵させ
、その後Ｍ製する方法もＤＦ、ｌの純度を高めるに有効
な手段である。ゲルｉ濾過や膜分雅で分画されたフラク
トオリゴ糖等は、副産物として既存の利用を行うことも
できる。
により固液分離して得た菌体を用いてもよいが、除菌処
理して得られた培養上澄を、イヌリン及び／またはイヌ
リン含有植物油出）αに加えて反応さ−せると、ＤＦＡ
Ｉが合成される。なお、イヌリン含有植物としてはダリ
ア、ゴボウ等があり、この細微生物起源のフラクトース
ポリマー（フラクトースの三糖類以上）も原料としての
使用が考えられる。反応）戊を加熱または酸処理して酵
素を失活させ、テ過、脱色、脱塩等の方法を用いて精製
すれば、オリゴ糖やフラグ）−スを含んだＤＦＡＩの製
品が得られる。さらに高純度のＤＦＡＩを得るには、精
製した糖液を活性炭カラムクロマトグラフィ、市販の充
填剤を用いたゲルｊ濾過カラムクロマトグラフィ、ｆｆ
ｆｉ々の膜を用いた膜分離濃縮などを行えばよい。また
は、反応液に酵母を加えてＤＦＡｒ以外の糖を発酵させ
、その後Ｍ製する方法もＤＦ、ｌの純度を高めるに有効
な手段である。ゲルｉ濾過や膜分雅で分画されたフラク
トオリゴ糖等は、副産物として既存の利用を行うことも
できる。
精製されたＤＦＡＩの旋光度は［α］ ：＋２７．７″
。
。
薄層クロマトグラフィによると、イヌリンの酸分解によ
り得られた標準のＤＦＡｒとＲｆ値は一致した。
り得られた標準のＤＦＡｒとＲｆ値は一致した。
［実施例コ
次に実施例をあげて本発明をさらに詳しく説明するが、
これらに限定されるものではない。
これらに限定されるものではない。
実施例１
市販イヌリン０．３％、酵母エキス０．０５％、リン酸
２ナトリウム０．４％、リン酸１カリウム０．１％、硫
酸マグネシウム０．０５％、硫酸第一鉄０．００１％、
塩化カルシウム０．００３％を含んだ培地１００ ｍｌ
を、ｐ１１７に調整して１２０℃で１５分間蒸気滅菌す
る。この滅菌した培地にアースロバクター・グロビフォ
ルミス Ｈ２−１（ＦＥＲＭ Ｐ−８７４９）を−白金
耳接憧し、３０℃で２４時間培養を行う。培′＃終了後
、遠心分離機で除菌して得た培養上澄をｐＨ５に調整す
る。調整培養上澄液５ｍｌに１０％イヌリン溶液５ｍｌ
を加えて、３０°Ｃにおいて一夜反応させる。反応液を
加熱して酵素を失活後、反応液中のＤＦＡＩの生成率を
高速液体クロマトグラフィを用いて求めると、ＤＦＡｒ
４９．７％、オリゴ糖６．２％、フラクトース０，３％
、その他４３．８％であフた。
２ナトリウム０．４％、リン酸１カリウム０．１％、硫
酸マグネシウム０．０５％、硫酸第一鉄０．００１％、
塩化カルシウム０．００３％を含んだ培地１００ ｍｌ
を、ｐ１１７に調整して１２０℃で１５分間蒸気滅菌す
る。この滅菌した培地にアースロバクター・グロビフォ
ルミス Ｈ２−１（ＦＥＲＭ Ｐ−８７４９）を−白金
耳接憧し、３０℃で２４時間培養を行う。培′＃終了後
、遠心分離機で除菌して得た培養上澄をｐＨ５に調整す
る。調整培養上澄液５ｍｌに１０％イヌリン溶液５ｍｌ
を加えて、３０°Ｃにおいて一夜反応させる。反応液を
加熱して酵素を失活後、反応液中のＤＦＡＩの生成率を
高速液体クロマトグラフィを用いて求めると、ＤＦＡｒ
４９．７％、オリゴ糖６．２％、フラクトース０，３％
、その他４３．８％であフた。
実施例２
実施例１で得られた調整培養上澄液５ｍ１を、６５°Ｃ
で２０分間加温してイヌリナーゼを失活させた後、１０
％イヌリン溶）々５ｍｌを加えて３０’Ｃにおいて一夜
反応させる。反応液を加熱して酵素を失活後、反応液中
のＤＦＡＩの生成率を高速液体クロマトグラフィを用い
て求めると、Ｄ ＦＡ ｒ ５１．２％、オリゴ糖５．
７％、その他４３．１％であった。
で２０分間加温してイヌリナーゼを失活させた後、１０
％イヌリン溶）々５ｍｌを加えて３０’Ｃにおいて一夜
反応させる。反応液を加熱して酵素を失活後、反応液中
のＤＦＡＩの生成率を高速液体クロマトグラフィを用い
て求めると、Ｄ ＦＡ ｒ ５１．２％、オリゴ糖５．
７％、その他４３．１％であった。
［発明の効果コ
本発明によれば、ＤＦＡＩを高収率で製造することがで
き、ＤＦＡＴはダイエツト甘味料として広い分野での利
用が期待される。
き、ＤＦＡＴはダイエツト甘味料として広い分野での利
用が期待される。
特許出願人 農林水産省食品総合研究所長日本澱粉工業
株式会社
株式会社
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）イヌリン及び／またはイヌリン含有植物抽出液にア
ースロバクター・グロビフォルミスに属する細菌及び／
またはその産生する酵素を作用させることを特徴とする
ジフルクトースジアンヒドリド I の製造法。 ２）アースロバクター・グロビフォルミスが、アースロ
バクター・グロビフォルミスＨ２−１（ＦＥＲＭ Ｐ・
８７４９）である特許請求の範囲第一項に記載の製造法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11908786A JPH0632628B2 (ja) | 1986-05-26 | 1986-05-26 | ジフルクト−スジアンヒドリド▲ｉ▼の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11908786A JPH0632628B2 (ja) | 1986-05-26 | 1986-05-26 | ジフルクト−スジアンヒドリド▲ｉ▼の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62275693A true JPS62275693A (ja) | 1987-11-30 |
| JPH0632628B2 JPH0632628B2 (ja) | 1994-05-02 |
Family
ID=14752568
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11908786A Expired - Fee Related JPH0632628B2 (ja) | 1986-05-26 | 1986-05-26 | ジフルクト−スジアンヒドリド▲ｉ▼の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0632628B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01285195A (ja) * | 1988-05-13 | 1989-11-16 | Natl Food Res Inst | ジフルクトース・ジアンヒドリドの製造方法 |
-
1986
- 1986-05-26 JP JP11908786A patent/JPH0632628B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01285195A (ja) * | 1988-05-13 | 1989-11-16 | Natl Food Res Inst | ジフルクトース・ジアンヒドリドの製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0632628B2 (ja) | 1994-05-02 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |