JPS62242699A - 抗生物質ａ４０９２６ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン類および抗生物質ａ４０９２６アグリコン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
クロニルアグリコン複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０９２６
Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ａ、抗生
物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリ
コン因子Ｂ、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグ
ルクロニルアグリコン因子Ｂ０、抗生物質Ａ４０９２６
Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂ＋　、
　抗生物質Ａ４０９２６アグリコンと表示される新規な
抗生物質およびそれらの付加塩類、抗生物質Ａ４０９２
６複合体またはその因子から出発するそれらの製造方法
、およびそれらに感受性の微生物を含む伝染病の処置に
おけるそれらの使用に関する。

抗生物質Ａ４０９２６複合体およびその因子は、グラム
陽性バクテリア、およびアクチノマズ之（Ａｃｔ　ｉ　
ｎｏｍａｄｕ　ｒ４）により生産されるネイセリア（Ｎ
ｅｉｓｓｅｒｉａｅ）菌株に対して活性な抗生物質であ
る。

アクチノマズラ（Ａｃｔ　ｉ　ｎｏｍａｄｕｒ４）属の
Ａ４０９２６生産菌株は、ブタペスト条約の規定に従い
、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（Ａ
ｍｅｒｉｃａｎ　　Ｔｙｐｅ　　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　　Ｃ
Ｏ１１ｅｃｔｉｏｎ、１２３０１　　Ｐａｒｋｌａｗｎ
　　Ｄｒｉｖｅ、Ｒｏｃｋｖｉ　ｌｌｅ、Ｍａｒｙｌａ
ｎｄ、Ｕ、Ｓ、Ａ、２０８５２）に１９８４年６月８日
に受託された。

抗生物質Ａ４０９２６およびその因子、ならびに生産性
微生物およびそれらを製造する方法は、欧州特許出願公
告第１７７８８２号に開示されている。既知の抗生物質
の物理化学的データに基づきかつ構造を参照することに
より、次の式をＡ４０９２６因子類に帰属させることが
できる（番号はＪ、ウィリアムス（Ｗｉ　ｌ　ｌ　ｉ　
ａｍｓ）　　、　Ｊ　。

Ａ、Ｃ，Ｓ、、１０６．４８９５−４９０８　（１９８
４）に提案されているものに類似する］　：０　　　　
　　ｌ−。

０Ｃ） 式中、 ＡはＮ　　（ＣＩ−Ｃ４）アシルアミノグルクロニル基
を表わす、そして Ｂはマンノシルおよびアセチルマンノシル基を表わす。

さらに詳しくは、抗生物質Ａ４０９２６因子ＡはＡがウ
ソデカノイルアミノグルクロニルでありそしてＢがマン
ノシルを表わす上の式の化合物であり、抗生物質Ａ４０
９２６因子Ｂ０はＡがイソドデカノイルアミノグルクロ
ニルであ先わす上の式の化合物であり、そ して抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ、はＡがドデカノイル
アミ／グルクロニルでありモしてＢがマンノシルを表わ
すヒの式１の化合物である。

抗生物質Ａ４０９２Ｂ因子ＦＡおよび因子ＰＲは、マン
ノース単位が７セチル一マンノース単位により置換され
ていることによおいて、対応する因子ＡおよびＢと異な
る。

抗生物質Ａ４０９２６は複合（ｃｏｍｐｌｅＸ）抗微生
物物質である；その成分の５つは中離され、そして因／
−ＰＡ、ＦＢ、Ａ、ＢおよびＢ。

と識別されている。

抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＡおよびＦＢは。

少なくともある発酵条件下で、Ａ４０９２６生産性の主
要な抗生生成物である。

抗生物質Ａ４０９２６因子ＡおよびＢは、それぞれ抗生
物質Ａ４０９２６因子ＦＡおよび因子ＰＢの主な転化生
成物であり、そしてしばしば発酵ブイヨン中にすでに存
在する。

塩基性条件下に、抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＡは抗生
物質Ａ４０９２６因子Ａに転化することができ、そして
抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＢは抗生物質Ａ４０９２６
因子Ｂに転化することができることが発見された。

結局、転化ブイヨン、あるいはＡ４０９２６含有抽出液
またはその濃縮物を塩基性条件下ににある時間放置する
（例えば、親核性塩基、ｐＨ＞９において一夜）下に放
置すると、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａおよび因子Ｂに
富んだ抗生物質Ａ４０９２６複合体が得られるであろう
。

この説明および特許請求の範囲において、「抗生物質Ａ
４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン類
」は、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロ
ニルアグリコン複合体ＡＢおよび／またはその単一の因
子、すなわち、抗生物ｆｉＡ４０９２６Ｎ−アシルアミ
ノグルクロニルアグリコン因子Ａ、抗生物質Ａ４０９２
６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂ、抗
生物ｆｉＡ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン因子Ｂ。および抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシ
ルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂ１を呼ぶ。

抗生物ｆｉＡ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニル
アグリコン複合体ＡＢ（酸付加塩でない形ｆｆ、　）は
、次の特性を有する： Ａ）　次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル（添付
図面の第１図中に示す）： λｍａｘ （ｎｍ） ４）　　０．１Ｎ（７）ＨＣｌ　　　　　２８２ｂ）　
リン酸塩緩衝液ｐＨ７、２８２ ４３１Ｏ （肩） ｃ）　　０　、１ＮのＫＯＨ３０２Ｂ）　次の吸収最大
を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ−’）（添付図面の第
２図中に示す）： ３７００−３１００．３０００−２８００（ｎｕｊｏｌ
）；１６５０；１６２０−１５５０；　１５００；　１
４６０　（ｎｕｊ。

１）：１３７５　（ｎｕｊｏ　ｌ）；　１３００．１２
５０−１１８０．．１１５０．１０６０；　１０１０．
９７０．８４０．８２０Ｃ）　　ＤＭＳＯｄ６　（：ヘ
キサデューテロジメチルスルホキシド）＋ＣＦ３　Ｃ０
ＯＨ中で記録した２７０ＭＨｚにおいて次の信号群（ｐ
ｐｍ）を示す　’　Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内部標準Ｔ
ＭＳ　（０，００ｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）（添付図面
の第３図中に示す）： ０．８４．ｄおよびｔ　［インプロピルのＣＨ３および
末端のＣＨａ］；１．１４ ｍ　［（ＣＨ２）　ｎｌ　：　ｌ　、４４　　ｍ　　［
−ＣＨ２−Ｃ−ＣＯおよびイソプロピルのＣＨＩ　；　
２．００　　ｔ　　［−ＣＨｔ　−（ＣＯ）］；２．５
、ｓ　（ＤＭＳＯｄ、）；２．５　　ｓ　（Ｎ−ＣＨｓ
）：２．９３ｍ　［ＣＨｌ（Ｚ２）］　；３．３３　　
ｍ［ｃＨ，（Ｚ’２）］　　；３３．２０３３．８０ｍ
［糖のＣＨＩ　　；　５．３４　　ｄ　［アシルアミノ
グルクロン酸の７ノマーのプロトン］；４．１０　　ｍ
（Ｘ６）；４．３３　　　ｄ（Ｘ５）；４．４３　　ｄ
　（Ｘ７）；４．９ｍ　（Ｘ２）；　５．１　（４Ｆお
よびＺ６）；５．４　５（Ｘｉ）；５．５８　　ｃｉ（
ｘ４）；５．７　　ｓ　（４Ｂ）：６．０６　　ｄ（Ｘ
３）；７．７３　　ｓ　（６Ｂ）；６．２６−８．４２
ｓおよびｍ［芳香族１７）ＣＨおよびペプチド（７）Ｎ
Ｈ］　　；８．７０−１０．５　　ｂｒ　　ｒ’７ｘノ
ールのＯＨおよびＮＨ，＋］ ｂｒ＝広い ｄ　＝二重線 ｍ　＝多重線 Ｓ　＝一重線 ｔ　冨四重線 Ｄ）　次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、ティ
コプラニンＡ２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１
−２０および１．３０の保持時間（Ｒｔ）。

カラム：　ウルトラスフェア−（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒ
ｅ）０１）Ｓ　（５μｍ ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ） ［ベックマン（Ｂｅｃｋｍａ ｎ）］　４．６ｍｍ　（内径）Ｘ２ ０ｍｍ 予備カラム：　ブラウンリー・ラプス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　ａ　　ｂ ｓ）ＲＰ１８　（５ｇｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　１０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ３０％ ｐＨ６，０に調節 溶＃：　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線
の勾配、４０分 流速：　　１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２５４ｎｍ 内部標準：　ティコプラニンＡ２成分２［グルツボ・レ
ペチット社 ＣＧｒｕＰＰＯＬｅｐｅｔ ｆｔ　　Ｓ、ｐ、Ａ、］ Ｅ）　塩類を形成できる酸機能 Ｆ）　　ＪｆＪ類を形成できるアミノａ能Ｇ）　中心部
分に結合するマンノース単位をもたない。

抗’物　Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコンＡ（酸付加塩でない形態）は、次の特性を有す
る： Ａ）　次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトルλｍ　
ａ　ｘ （ｎｍ） ４）　　０．１ＮのＨｃＩ　　　　　２８２ｂ）　リン
酸塩緩衝液ｐＨ７．４２８ ２３１０（肩） ｃ）　　０．１ＮのＫＯ８３０２ Ｂ）　次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ−
’）（添付図面の第４図中に示す）： ３７００−３０００．３０００−２８００．１６５０．
１５８５，１５０５．１４６０　（ｎｕｊｏｌ）；１３
７５　（ｎｕｊ。

１）；　１２９５．１２３０．１２１０．１１５０．１
０７０．１０６０；８４５．８２０　；　７２０　（ｎ
ｕ　Ｊ　ｏ　Ｉ）Ｃ）　　ＤＭＳＯｄｓ　　（ヘキサデ
ユーテロジメチルスルホキシド）中で記録した２７０Ｍ
）Ｉ２において次の信号群（ｐｐｍ）を示すＩ　Ｈ−Ｎ
ＭＲスペクトル、内部標準ＴＭＳ（０，ＯＯｐｐｍ）、
（δ＝ｐｐｍ）（添付図面の第５図中に示す）： ０．８５　　ｔ（末端のＣＨ，）；１．０−１．３（脂
肪族（’）ＣＨ２）　；　ｌ　、　４２　　ｍ（（ＱＣ
−Ｃ）　ＣＨ２）　；　２　、００　　　ｔ（（ＣＯ）
ＣＨ２）；　２．３５　　ｓ　（ＮＣＨ３）；　２．４
９　　Ｓ　（ＤＭＳＯｄｓ）；２．８２　　ｍ　（Ｚ２
）：　２．８−３．８（糖のプロトンおよびＺ’）、４
．１２ｍ　（Ｘ６）；４．５６　　ｓ　（Ｘｉ）；　４
　。

３４　　ｄ（Ｘ５）；４．４１　　ｄ（Ｘ７）：４．９
６　　ｍ（Ｘ２）；５．０８−５゜１２（４ＦおＪ：び
Ｚ６）、５．４０　　　ｄ（アシルアミノグルクロン酸
のアノマーのプロトン）；５．５８　　ｄ　（Ｘ４）；
　５　。

７４　　ｓ　（４Ｂ）；６．０５　　ｄ　（Ｘ３）；７
．７５　５（６Ｂ）；６．２５−８゜４０５、ｄおよび
ｍ（芳香族のＣＨおよびペプチドのＮＨ） Ｄ）　次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、ティ
コプラニンＡ２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１
．２０の保持時間（Ｒｔ）： カラム：　ウルトラスフェア−（ｔＪｌｔｒａｓｐｈｅ
ｒｅ）ＯＤＳ　（５ｇ ｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ） ［ベックマフ　（Ｂ　ｅ　Ｃｋｍａ ｎ）］　４．６ｍｍ　（内径）Ｘ２ ０ｍｍ 予備カラム：　ブラウンリーーラブス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　ａ　　ｂ ｓ）　ＲＰ　１　ｇ　（５Ｂｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＩ（３ＣＮ　　　　　　　１０％（２−
５ｇ／１）Ｎａ Ｈ，ＰＯ４−Ｈ２Ｏ９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤ＡＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２，５ｇ／
１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４１１Ｈ２０３０％ ＰＨ６，０に調節 溶＃：　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線
の勾配、４０分 流速：　　１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２５４ｎｍ 内部標準：　ティコプラニンＡ２成分２［グルツボ・レ
ペチット社 （Ｇｒｕｐｐｏ　　Ｌｅｐｅｔ ｉｔ　　Ｓ、ｐ、Ａ、］ Ｅ）　　ＦＡＢ−ＭＳにより決定した約１５５４の分子
量 Ｆ）　塩類を形成できる酸機能 Ｇ）　塩類を形成できるアミン機能 Ｈ）　中心部分に結合するマンノース単位をもたない。

は、次の特性を有する： Ａ）　次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトルλｍａ
ｘ （ｎｍ） ４）　　０．１ＮのＭＣＩ　　　　　２８２ｂ）　　リ
ン酸塩緩衝液ｐＨ７．４２８２３１０（肩） ｃ）　　０．１ＮのＫＯＨ３０２ Ｂ）　次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ−
１）（添付図面の第６図中に示す）： ３７００−３１００．３０００−２８００（ｎｕｊｏｌ
）　　；１６５０；１５８５；１５０５；１４６０（ｎ
ｕｊｏｌ）；１３７５　　（ｎｕｊｏｌ）；１２９５；
１２３０；１２１０；　　１１５０．１０６０；　　１
０１０；　９８０　；　８４０　；　８２０　；　７２
０　　（ｎｕｊ　ｏ　１） Ｃ）　　ＤＭＳＯｄ６　　（ヘキサデユーテロジメチル
スルホキシド）中で記録した２７０ＭＨ２において次の
信号群（ｐｐｍ）を示すＩ　Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内
部標準ＴＭＳ（０，００ｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）（添
付図面の第７図中に示す）： ０．８５　　ｄ（イソプロピルのＣＨ３）；１．０−１
．３（脂肪族のＣＨ２）；１゜３−１．６　（（ＱＣ−
Ｃ）−ＣＨ２およびイソプロピルの−ＣＨ）；２．００
　　ｔ（（ＣＯ）ＣＨ２・）　　；２．３２　　Ｓ　（
ＮＣＨ３）；　２．４９　　Ｓ　（ＤＭＳＯｄｓ　）；
２．８２　　　ｍ（Ｚ２）　　：２．９−：Ｊ、８（糖
のプロトン）；４．１２　　ｍ（Ｘ６）；　４．４４　
　ｓ　　（ＸＩ）；４．３３　　　ｄ（Ｘ５）；　４．
３７　　ｍ　（Ｘ７）：　４．９５　　ｍ（Ｘ２）；５
．０６−５．１０（４Ｆおよび２Ｂ）：５．３８　　ｄ
　（アシルアミノグルクロン酸のアノマーのプロトン）
；５．５９　　ｄ（Ｘ４）；５．７２　　５（４Ｂ）；
６．０５　　ｄ　（Ｘ３）；７．７４　　ｓ　（６Ｂ）
；　６．２７−８．５　（芳香族およびペプチドのＮ１
（） Ｄ）　次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、ティ
コプラニンＡ２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１
．３０の保持時間（Ｒｔ）： カラム：　ウルトラスフェア−（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒ
ｅ）００５　（５４ ｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ） ［ベックマン（Ｂ　ｅ　ｃ　１ｃｍａ ｎ）］　４．６ｍｍ　（内径）×２ ０ｍｍ 予備カラム：　ブラウンリー・ラプス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　ａ　　ｂ ｓ）ＲＰ１８　（５ＪＬｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　１０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４φＨ２０９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４・Ｎ２０　　３０％ ｐＨ６，０に調節 溶離：　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線
の勾配、４０分 流速：　　１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２５４ｎｍ 内部標準：　ティコプラニンＡ２成分２［グルツボ・レ
ペチット社 （Ｇｒｕｐｐｏ　　Ｌｅｐｅｔ ｉｔ　　Ｓ、ｐ、Ａ、］ Ｅ）　　ＦＡＢ−ＭＳにより決定した約１５６８の分子
量 Ｆ）　塩類を形成できる酸機能 Ｇ）　塩類を形成できるアミノ機能 Ｈ）　中心部分に結合するマンノース単位をもたない。

定した約１５６８の分子量および抗生物質Ａ４０９２６
Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂｏにつ
いて上に報告したのと実質的同一の物理化学的特性を有
するが、ただしＥに報告したＮＭＲ系においてｎ−プロ
ピル機能のメチル基に起因する０、８４δｐｐｍにおけ
る三爪線および上に報告した系において１．３２のティ
コプラニンＡ２成分２に関する保持時間を有する。

抗生物質Ａ４０９２６アグリコンは、次の特性を有する
： Ａ）　次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル（添付
図面の第８図中に示す）： 入ｍ　ａ　Ｘ （ｎｍ） ４）　　０．１Ｎ（７）ＨＣｌ　　　　　２８０ｂ）　
リン酸塩緩衝液ＰＨ７，２８０ （肩） ｃ）　　０．１ＮのＫＯＨ２９９ Ｂ）　次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ−
’）（添付図面の第９図中に示す）： ３７００−３１００；３０００−２８００（ｎｕｊ　ｏ
　ｌ）；　　１６５５；　　１６２０−１５５０；１５
００；１４６０（ｎｕｊ。

１）；　　１３７５　　（ｎｕ　ｊ　ｏ　ｌ）；　　１
３００；　　１２０５；　　１１４５；　　１０１０；
９７０；　　９３０　；　　８４０ Ｃ）　　ＤＭＳＯｄｓ　　（ヘキサデユーテロジメチル
スルホキシド）中で記録した２７０ＭＨ２において次の
信号群（ｐｐｍ）を示すＩ　Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内
部標準ＴＭＳ（０，００ｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）（添
付図面の第１０図中に示す）： ２．５１　　ｓ　（ＤＭＳＯｄ５）；２．５０ｓ　（Ｎ
ＣＨ３）；２．８８　　ｍ（Ｚ２）；３．３３　　ｍ（
Ｚ’２）；４．１０　　ｍ（Ｘ６）；４．３４　　ｄ　
（Ｘ５）；４．４３　　ｄ　（Ｘ７）；４．９３　　ｍ
（Ｘ２）；５．０４　　ｓ　　（４Ｆ）；５−０９　　
　ｓ　　（Ｚ６）；ｓ、ｓ４　ｄ　　（Ｘ４）、５．７
５ｓ　　（４Ｂ）；６．０５　　ｄ　　（Ｘ３）ニア。

７６　　ｓ　（６Ｂ）；６．３−８．４　（芳香族およ
びペプチドのＮＨ） Ｄ）　次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、ティ
コプラニンＡ２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して０
．５９の保持時間（Ｒｔ）： カラム：　ウルトラスフェア−（Ｕ　ｌ　ｔ　ｒａｓ　
ｐｈｅ　ｒｅ）ＯＤＳ　（５μ ｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ） ［ベック−Ｆ７　（Ｂ　ｅ　ｃ　ｋｍａｎ）１４．６ｍ
ｍ（内径）Ｘ２ ０ｍｍ 予備カラム：　ブラウンリー・ラプス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　ａ　　ｂ ｓ）　ＲＰ　１８　（５ｇｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　１０％（２，５
ｇ／　１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ｐｏａ　　＊Ｈ２０３０％ ｐＨ６，０に調節 溶ｇｌ：　　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの
直線の勾配、４０分 流速：　　１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２５４ｎｍ 内部標準：　ティコプラニンＡ２成分２［グルツボ・レ
ペチット社 （Ｇｒｕｐｐｏ　　Ｌｅｐｅｔ ｉｔ　　Ｓ、ｐ、Ａ、］ 同一条件下で、抗生物質Ｌ１７０５４　（グルツボ令レ
ペチット、欧州特許（ＥＰ−Ａ）１１９５７５）に関す
る保持時間は１．４２である Ｅ）　　ＦＡＢ−ＭＳにより決定した約１２１１の分子
だ Ｆ）　塩類を形成できる酸機能 Ｇ）　塩類を形成できるアミン機能 Ｈ）　中心部分に結合するマンノース単位をもたない。

同一クラスの既知の抗生物質の物理化学的特性に基づき
かつ構造を参照することにより、ＡがＮ−（Ｃ＋　＋　
−ＣＩ　２）アシルアミノグルクロニルでありかつＢが
水素である上の式１は抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシル
アミノグルクロニルアグリコン類に帰属させることがで
きる。

さらに詳しくは、Ａがｎ−ウンデカノイルアシルアミノ
グルクロニルでありかつＢが水素である上の式Ｉは抗生
物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリ
コン因子Ａに帰属させることができ、Ａがインドデカノ
イルアシルアミノグルクロニルでありかつＢが水素であ
る上の式Ｉは抗生物質Ａ４０９２ＢＮ−アシルアミノグ
ルクロニルアグリコン因子Ｂｏに帰属させることができ
、そしてＡがｎ−ドデカノイルアシルアミノグルクロニ
ルでありかつＢが水素である上の式１は抗生物質Ａ４０
９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂ
１に帰属させることができる。後者は本発明の方法に従
い抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ！から得られ、そして抗
生物質Ａ４０９２６因子Ｂ１は欧州特許（ＥＰ−Ａ）１
７７８８２−）に記載されている逆相系においてティコ
プラニンＡ２成分２に関して１．２７に等しいＲｔを有
する抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂの成分であり、そして
後述する。それは因子Ｂｏ　　（主要因子）の分離後抗
生物質Ａ４０９２６因子Ｂから得られる。

ＡおよびＢが水素を表わす上に式１は抗生物質Ａ４０９
２６アグリコンに帰属させることができる。

この説明および特許請求の範囲において、抗生物質Ａ４
０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン複合
体またはその因子または抗生物質Ａ４０９２６アグリコ
ンを取扱うとき、「内部塩」ならびに可能な酸および塩
基の付加塩類を包含することを意図する。

本発明の化合物の抗バクテリア活性は、異なる微生物培
養物についての標準希釈試験により生体外で立証するこ
とができる。

ＭＩＣ（最小阻止濃度）の決定のための培地および生長
条件は、次の通りであった：アインセンシテスト（Ｉｓ
ｏｓｅｎｓｉｔｅｓｔ）ブイヨン［オキソイド（Ｏｘｏ
　ｉｄ）］　、２２４時間スタフィロコッキ（Ｓｔａｐ
ｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、ストレプトマイセス・ファエ力
リス（ＳｔｒｅＬエ　ｆａｅｃａｌｉｓ）およびグラム
陰性バクテリア［大腸Ｗ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　　
ｃ。

１ｉ）；　トッドーヘウ！−／ト　（Ｔｏｄｄ−Ｈｅｗ
ｉ　ｔ　ｔ）ブイヨン［ディフコ（Ｄｉｆｃｏ）１゜２
４時間、他のストレプトコッキ種、ＧＣ基本ブイヨン（
ディフコ）＋１％のアイツバイタレックス（■５ｏｖｉ
ｔａｌｅｘ）（ＢＢＬ）、４８時ａｅ）；脳心臓ブイヨ
ン（ディフコ）＋１％の補充’ｈ’ｆｌＣ（ティフコ）
、４８時間、ヘモフィルス番インフルエンザエ（Ｈａｅ
ｍｏｐｈｉ　１ｕｓｉｎｆ　Ｉｕｅｎｚａｅ）；ＡＣブ
イヨン（ディフコ）　、　　２４１１！ｊｌｉｉ１．　
ｇ気的雰囲気、クロストリジウム・ペルフリンゲンス（
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）；ウ
ィルキンスーチャルグレン（Ｗｉ　ｌｋｉ　ｎｓ−Ｃｈ
ａｌｇｒｅｎ）寒天（Ｔ、Ｄ、ウィルキンスおよびＳ、
チャルグレン、１９７６、抗モルの化合物剤および化学
療法（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ、　　Ａｇ、　　Ｃｈｅｍ
ｏｔｈｒ、）１０，９２６参照］、４８時間、嫌気的雰
囲気、他の嫌気的有機体［見工ａｇｉ　ｌ　ｉｓ）；Ｐ
ＰＬＯブイヨン（ディフコ）＋１０％のウマ血清＋１％
のグルコース、４８時１１ｉ４．エバンス（Ｅｖａｎｓ
）およびり、タイラーーロビンソン（Ｔａｙｌｏｒ−Ｒ
ｏｂｉｎｓｏｎ）におけるような補充物質を含むＰＰＬ
Ｏブイヨン［抗微生物化学療法雑誌（Ｊ、　　Ａｎｔｉ
ｍｉｃｒｏｂ、　　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、）４．５７）
、２４時間、ｙしエ　ウレアリチクム（且工至ａｌｙｔ
ｉｃｕｍ）；インキュページ重ンは３７℃で実施した。

接種物は次の通りであった２１％（Ｖ／ｖ）の８時間の
ブイヨン、ｙエエ　ガリセプ＋７Ａ（ａｌｌｉｓｅｐｔ
ｉｃｕｍ）；約１０４色変化量位／ｍ１．Ｕユ　ウレア
リチクム（旦ｒｅａｌｙｔ　ｉｃｕｍ）；約１０’−１
０５コ。

ニー形成単位／　ｍ　ｌ、他のブイヨン希釈のＭＩＣ：
約約１０４−１０５バクテリア／スポツト（多点接種器
を使用して接種した）、寒天希釈のＭＩＣ［Ｃエ　ディ
フィシレ（ｄｉｆｆｉｃｆｌ（旦、　　ｆｒａｇｉｌｉ
ｓ）］。

いく種類かの微生物についての最小阻止濃度）ＭＩＣ，
ｇｇ／ｍｌ）を表Ｉに報告する。

抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン複合体ＡＢおよびその因子はコアグラーゼ陰性
スタフィロコッキに対してとくに活性であることがわか
った。ｌ系列の旦ユ　三に互）の臨床単離物に関するＭ
ＩＣ（ルｇ／ｍｌ）を下に報告する： 表ＩＩ 抗生物ＩＡＡ４０９２６Ｎ− アシルアミノグルクロニル アグリコン複合体ＡＢ 菌株　　　　　ＭＩＣ（μｇ／ｍ１） Ｓ、　　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｓ Ｌ　　３９３　　　　　　　　　　　０．０６Ｓ、　　
ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｓ Ｌ　　４０８　　　　　　　　　　　０．１３Ｓ、　　
ｅｐｉｄｅｒｍｉ−ｄｓ Ｌ　　　４１０　　　　　　　　　　　　　　　　　０
．０６Ｓ、　　　ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃ ｕｓ　　　Ｌ３８１　　　　　　　　　　　　　　　０
．２５ｓ、　　　ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃ ｕｓ　　　Ｌ３８２　　　　　　　　　　　　　　０．
１３Ｓ、　　　ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃ ｕｓ　　　Ｌ３８３　　　　　　　　　　　　　　０．
５ｓ、　　ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃ ｕｓ　　　Ｌ４０３　　　　　　　　　　　　　　０．
２５その−し、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノ
グルクロニルアグリコン複合体ＡＢのＭＩＣ９ｏ　　（
ｇｇ／ｍｌ）、すなわち、３６の処置したコアグラーゼ
陰性スタフィロコッキの臨床単離物の少なくとも９０％
を阻止する濃度は０，５μｇ　／　ｍ　ｌであることが
わかった。

本発明の化合物の抗微生物活性は、また、マウスにおけ
る実験的敗血症において立証される。

対照群および処置群は１０匹の体重１８〜２２ｇのＣＤ
−１マウス［チャールス・リバー（Ｃｈａｒｌｅｓ　　
Ｒｉｖｅｗｒ）］を含有した。Ｓ。

ピオゲネス（、ＬＬＬｌ見ユ且５）Ｃ２０３（Ｌ４９）
の−夜の培養物を無菌のペプトン化生理的食塩水で希釈
することによって調製したバクテリア懸濁液の０．５ｍ
ｌを、マウスの腹腔内に感染させた０敗血症をもつ未処
置動物が４８時間以内に死ぬように、接種を調節した。

試験すべき化合物は感染後直ちに皮下投与した。第７日
日に、ＥＤ５０　　（ｍｇ／ｋｇ）をスピア−マン（Ｓ
ｐｅａｒｍａ’ｎ）およびケルバー（Ｋａｒｂｅｒ）［
Ｄ、Ｊ、＝ｙイニー（Ｆｉｎｎｅｙ）、ｒ生物学のアッ
セイにおける統計学的方法（Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　
　Ｍｅｔｈｏｄｓ　　ｉｎ　　Ｂｉｏｌ。

ｇｉｃａｌ　　Ａｓ５ａｙ）Ｊ　、グリフイン（Ｇｒｉ
ｆｆｉｎ）、５２４ページ、１９５２］により、各投与
量において生きている動物の百分率から計算した。

これらの条件下で、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルア
ミノグルクロニルアグリコン複合体ＡＢおよび抗生物質
Ａ４０９２６アグリコンのＥＤＳｏ値は、それぞれ、０
．５４ｍｇ／ｋｇおよび６．２ｍｇ／ｋＨであった。

抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン複合体ＡＢ、その因子および抗生物質Ａ４０９
２６アグリコンは酸および塩基の機部を有し、そして慣
用法に従い有機および無機の反対イオンと塩類を形成す
ることができる。

本発明の化合物の代表的および適当な酸付加塩類は、有
機酸および無機酸との標準の反応により形成される塩類
を包含し、そしてそれらの酸類の例は次の通りである：
塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ
酢酸、トリクロロ酢酸、コハク酸、クエン酸、アスコル
ビン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、パルミチン酸、
葉酸、パモン酸、粘液酸、グルタミン酸、ショウノウ酸
、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酩、ラウ
リン耐、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸
、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酩、ピクリン酸、安、
０鉱酸、桂皮酸など。

これらの塩基の代表例は１次の通りである：アルカリ金
属またはアルカリ土類金属の水酸化物、例えば、ナトリ
ウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、バリウム
の水酸化物：アンモニアおよび脂肪族、脂環族または芳
香族の有機アミン、例えば、メチルアミン、ジメチルア
ミン、トリメチルアミン、そしてピコリン。

本発明の「塩でない」化合物を対応する付加塩類へ転化
すること、およびその逆、すなわち、本発明の化合物の
付加塩を塩でない形態に転化することは、当業者の技律
の範囲内であり、そして本発明に包含される。

例えば、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルク
ロニルアグリコン複合体ＡＢおよび／またはその因子お
よび抗生物質Ａ４０９２６アグリコンは、塩でない形態
を水性溶媒中に溶解し、そしてわずかにモル過剰量の選
択した酸または塩基を添加することによって、対応する
酸または塩基の形態に転化することができる。次いで、
得られる溶液または懸濁液を凍結乾燥して所望の塩を回
収する。

塩でない形態が可溶性である溶媒中に最終の塩が不溶性
であるとき、理論量またはわずかにモル過剰量の選択し
た酸または塩基の添加後、それは濾過により塩でない形
態の有機溶液から回収される。

これらの不溶性塩の例は、カルシウム塩、マグネシウム
塩およびバリウム塩である。

塩でない形態は水性溶媒中に溶解した対応する酸または
塩基の塩から調製することができ１次いでこれを中和し
て塩でない形態を遊離する。

中和後、酸または塩基の過剰量を排除することが必要で
あるとき、普通の脱塩手順を用いることができる。

例えば、シラン化シリカゲル、非官能化ポリスチレン、
アクリル樹脂およびコントロールされた孔をもつポリデ
キストラン樹脂［例えば、セファデックス（Ｓｅｐｈａ
ｄｅｘ）ＬＨ２０］または活性炭のクロマトグラフィー
を便利に用いることができる。不必要の塩類を水溶液で
溶離した後。

所望生成物は水と極性または非極性の有機溶媒との直線
勾配または段階勾配、例えば、５０　：　５０から約１
００％のアセトニトリルのアセトニトリル／水により溶
離される。

この分野において知られているように、製薬学的に許容
されうる酸類（またはａｌ！基類）あるいは製薬学的に
許容されえない酸類（または塩基類）との塩の形成を便
利な精製技術として使用することができる。形成および
＠１ｌＩｌ後、Ａ４０９２６抗生物質の塩の形態を対応
する塩でない形態に、あるいは製薬学的に許容されうる
塩の形態に転化することができる。

ある場合において、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルア
ミノグルクロニルアグリコン複合体ＡＢ、その因子およ
び抗生物質Ａ４０９２６アグリコンの塩基付加塩は、水
および親水性溶媒中にいっそう可溶性である。

抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシル
アミノグルクロニルアグリコン因子Ａ、抗生物質Ａ４０
９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂ
、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニル
アグリコン因子ＢＯ１抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシル
アミノグルクロニルアグリコン因子Ｂ１、および抗生物
質Ａ４０９２６アグリコンは、抗生物質Ａ４０９２６複
合体またはその単一の因子あるいは前記因子の任意の比
率の混合物、すなわち、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａ、
抗生物賀Ａ４０９２６因子Ｂ、抗生物質Ａ４０９２６因
子ＰＡ、抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＢ、抗生物質Ａ４
０９２６因子ＢＯおよび抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ１
から、コントロールされた加水分解により調製される。

一般に、この加水分解は適当な有機溶媒中で強酸の存在
下に実施される０反応温度はかなり変化させることがで
きる。好ましくは、それは４℃〜１００″Ｃ１最も好ま
しくは２５℃〜８０℃である。

反応時間は特定の反応条件に依存して変化する。

一般に、反応時間は３０分〜１２０時間である。

しかしながら、反応過程はＴＬＣまたはＨＰＬＣにより
監視できるので、当業者は出発物質の加水分解が完結し
た時を決定することができ、そして回収手順を開始する
ことができる。

強酸の代表例は１強鉱酸または強有機酸１例えば、塩酸
、臭化水素酸およびヨウ化水素酸、リン酸類、硫酸、ハ
ロ酢酸類、例えば、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸
、クロロジフルオロ酢酸などである。

適当な有機溶媒は、次のようなものである：４）　溶媒
は出発物質を少なくとも部分的に可溶化することができ
る； ｂ）　生成物は、いったん得られると、ん分離するか、
あるいは通常の技術に従い溶媒から分離されることがで
き、そして Ｃ）　いずれの場合においても、溶媒は反応過程を不都
合に妨害しない。

前記適当な有機溶媒の例は、プロトン性または非プロト
ン性の溶媒１例えば、（Ｃ＋　−Ｃ４）アルキルスルホ
キシド、例えば、ジメチルスルホキシドおよびジエチル
スルホキシド、ＣＣ＋　−Ｃ４）アルキルホルムアミド
、例えば、ジメチルホルムアミド、ジエチルホルムアミ
ド、ジオキサン、テトラヒドロフランおよび同様な溶媒
であり、これらは選択した酸ともちろん相溶性である。

−・般に、加水分解は限定した量、例えば、反応混合物
の０．１〜１０％（ｗ／　ｗ）の量の水の存在ドに実施
する。この量は明らかに出発物質、溶媒および／または
試薬の中にすでに存在するか、あるいは、必要に応じて
、その場で添加することができる。

本発明の好ましい実施態様は、ジメチルスルホキシド／
Ｃ塩酸の混合物を４０℃〜８０℃で使用することによっ
て代表される。典型的には、ジメチルスルホキシド／濃
塩酸の混合物の比は８：２〜９．５：０．５である。好
ましい濃塩酸は３７％（ｗ／ｗ）の塩酸である。

一般に、反応生成物はＮ−アシルアミノグルクロニルア
グリコンとアグリコンとの混合物である。温度をコント
ロールすることにより、そしである場合において、また
、酸の濃度および強度をコントロールすることにより、
この方？１を、２つの主要生成物のうちの１つ、すなわ
ち、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニ
ルアグリコン類または抗生物質Ａ４０９２６アグリコン
の生成に、少なくともある程度、向けることが可能であ
る。より特定的には、反応を比較的低く保持し、可能な
らば酸混合物の強度を低くしかつ反応時間を適切にコン
トロールすることにより、Ｎ−アシルアミノグルクロニ
ルアグリコン類の収率を増加し、一方比較的高い温度お
よび長い時間において、アグリコン単独が得られる。

また、この場合において、反応過程をＴＬＣまたは好ま
しくはＨＰＬＣで監視し、そして所望物質の最適な生成
が得られたとき、反応を停止して引続く回収工程の収率
を最大にすることができる。

抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン類と抗生物質Ａ４０９２６アグリコンとの混合
物である生成物が得られるとき、それはクロマトグラフ
ィー、例えば、液体／液体クロマトグラフィー、フラッ
シュクロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー
および親和クロマトグラフィーにより分割することがで
きる。

親和クロマトグラフィーを使用するとき、好ましい吸着
剤は欧州特許（ＥＰ−Ａ）１２２９６９りに記載されて
いるように固定化したＤ−アラニル−Ｄ−アランニンで
ある。溶離混合物は水性緩衝液と生理的食塩水との混合
物である。ｐＨおよびＪ′！！濃度を２１ｇ節すること
により、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルク
ロニルアグリコン類は抗生物質Ａ４０９２６アグリコン
から分離される。

本発明のそれ以上の目的および好ましい実施態様は、抗
生物質Ａ４０９２６複合体またはその単一の因子、抗生
物質Ａ４０９２６複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０９２６因
子Ａ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ、抗生物質Ａ４０９
２６因子Ｂ０、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ１．抗生物
質Ａ４０９２６因子ＦＡおよび抗生物質Ａ４０９２６因
子ＦＢを、制限された（０．１〜１０％ｗ／ｗ）量の水
の存在下に、極性比プロトン性溶媒と強い鉱酸または有
機酸との混合物を使用するコントロールされた加水分解
に、室温〜１００℃、好ましくは４０℃〜６５℃の温度
において３時間〜１２０時間付すことを含む、抗生物質
Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン
複合体ＡＢおよびその因子を広く調製する方法である。

より好ましくは、加水分解混合物は９：１〜９．５〜０
．５のジメチルスルホキシドと３７％の塩酸との混合物
であり、温度は６５複合体であり、そして反応時間は５
時間である。

Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコンを製造するた
めの出発物質が抗生物質Ａ４０９２６複合体であるとき
、なおもとの複合体に因子に実質的に相当する因子の混
合物である最終生成物が得られるが、単一の因子、例え
ば、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａまたは因子Ｂを使用す
ると、それぞれ、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミ
ノグルクロニルアグリコン因子Ａおよび抗生物質Ａ４０
９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂ
、ＢｏまたはＢ１である単一のＮ−アシルアミノグルク
ロニルアグリコン因子が得られる。

抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン複合体ＡＢが得られるとき、それはそれ自体既
知の技術、例えば、液体／液体クロマトグラフィーおよ
び好ましくは調製用ＨＰＬＣによりその単一の因子に分
割することができる。

好ましい手順は、好ましくはステンレス鋼性カラム中の
、適度な圧力（５〜５０バール）または高圧（１００〜
２００バール）における逆相液体クロマトグラフィーを
包含する。固相は（２〜１８）炭素原子（最も好ましく
はＣｌ８）の炭化水素相またはフェニル基をもつシラン
化シリカゲルであることができ、モして溶離剤は樹脂と
適合性のｐＨ（ｐＨ４〜８）における上に定義した極性
水混和性溶媒と水性緩衝液との混合物である。

ｐＨ４〜８．好ましくはＰＨ約６のアセトニトリルから
選択される極性水溶性非プロトン性溶媒と水性緩衝液と
の直線勾配溶離混合物、例えば、アセトニトリル／リン
酸塩緩衝液の混合物、ｐＨ６，７０：　３０およびアセ
トニトリル／リン酸塩緩衝液の混合物、ｐＨ６，１０：
９０の５％から４５％の直線の勾配は最も好ましい。

本発明の他の目的および好ましい実施態様は、抗生物質
Ａ４０９２６複合体またはその単一の因子、抗生物質Ａ
４０９２６複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａ、
抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ、抗生物質Ａ４０９２６因
子ＰＡ、抗生物ｊｆＩＡ４０９２６因子ＦＢ、抗生物質
Ａ４０９２６因子Ｂ０、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ１
、抗生物質Ａ４０９２６マンノシルアグリコンおよび抗
生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグ
リコン（複合体ＡＢおよび／またはそのの単一の因子）
を、（Ｌ）脂肪族酸およびアルファーハロゲン化脂肪族
酸（これらは反応温度において液体である）、脂肪族ア
ルカノールおよび環式脂肪族アルカノール（これらは反
応温度において水とわずかに混合する液体である）、フ
ェニル置換低級アルカノール（ここでフェニル部分は（
Ｃ＋　−Ｃ４）アルキル、（Ｃ＋　−Ｃａ　）アルコキ
シまたはハロ残基を有してもよい）（これは反応温度に
おいて水とわずかに混合する液体である）、およびベー
ターハロゲン化低級アルカノール（これは反応温度にお
いて液体である）から選択される有機プロトン性溶媒の
存在下に、（ｂ）前記溶媒と相溶性であり、強鉱酸、強
有機酸および水素型強酸カチオン交換樹脂から選択され
る強酸の存在下に、そして（Ｃ）約２０℃〜約１００℃
の反応温度において、コントロールされた加水分解に付
すことを含んでなる抗生物質Ａ４０９２６アグリコンを
選択的に製造する方法である。

プロトン性溶媒を脂肪族酸およびアルファーハロゲン化
脂肪族酸から選択するとき、１〜５個の炭素原子の脂肪
族酸および２〜５個の炭素原子のアルファーハロゲン化
脂肪族酸はそれぞれ好ましいが、反応温度において、出
発物質を十分な量で溶解することのできる脂肪族酸およ
びアルファーハロゲン化脂肪族酸を有効に使用すること
ができる。

上の酸類の例は次の通りである：酢酸、プロピオン酸、
酪酸、イソ酪酸、バレリン酸、インバレリン酸、トリメ
チル酢酸、フルオロ酢酸、クロロ酢酸、ジフルオロ酢酸
、ジクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、
ペンタフルオロ酢酸、２．２，３，４，４．４−へキサ
フルオロ酪酸、ヘプタフルオロ酢酸など。

低級脂肪族酸、例えば、酢酸およびプロピオン酸または
低級アルファーハロゲン化脂肪族酸、例えば、クロロ酢
酸、ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸、ジフルオロ酢酸、
クロロジフルオロ酢酸、トリフルオロ酢酸およびペンタ
フルオロプロピオン酸は本発明の１つの実施態様に従う
好ましい反応溶媒である。これらの溶媒のうちで、高い
酸強度を有するものは溶媒として作用すると同時に、加
水分解反応を促進する強酸として作用し、こうして加水
分解反応を促進するために強酸をさらに添加する必要が
ない、この目的で、トリフルオロ酢酸は、７５％〜９５
％の濃度で６０℃〜９０℃の温度において０．５時間〜
８時間の反応時間の間使用するとき、とくに有用である
ことが明らかにされた。

最も好ましい実施態様に従い、５〜ｌＯ個の炭素原子の
第一および第二アルカノールおよび第ニジクロアルカノ
ールをこのコントロールされた酸加水分解の反応溶媒と
して有効に使用される。前記アルカノールの例は次の通
りである＝１−ペンタノール、２−ペンタノール、３−
ペンタノール、１−ヘキサノール、２−ヘキサノール、
３−ヘキサノール、３．３−ジメチル−１−ブタノール
、４−メチル−１−ペンタノール、３−メチル−１−ペ
ンタノール、２，２−ジメチル−３−ペンタノール、２
．４−ジメチル−３−ペンタノール、４，４−ジメチル
−２−ペンタノール、５−メチル−２−ヘキサ／−ル、
ｌ−へブタノール、２−ヘプタツール、５−メチル−１
−ヘキサノール、２−エチル−１−ヘキサノール、２−
メチル−３−ヘキサノルール、１−オクタツール、２−
オクタノール、シクロペンタノール、２−シクロペンチ
ルエタノール、３−シクロペンチル−ｉ−プロパツール
、３−シクロペンチル−１−プロパツール、シクロヘキ
サノール、シクロヘプタツール、シクロオクタツール、
２，３−ジメチルシクロヘキサノール、４−エチルシク
ロヘキサノール、シクロオクチルメタノール、６−メチ
ル−５−へブテン−２−オール、ｌ−ノナノール、２−
ノナノール、１−デカノール、２−デカノールおよび３
−デカノール。

フェニル置換低級アルカノールの例は次の通りである：
ベンジルアルコール、ｍ−クロロベンジルアルコール、
０−クロロベンジルアルコール、ｍ−フルオロベンジル
アルコール、ｐ−フルオロベンジルアルコール、ｍ−メ
チルベンジルアルコール、ｍ−メトキシベンジルアルコ
ール、０−エトキシベンジルアルコール、ｍ−ブトキシ
ベンジルアルコール、ｐ−ｔｅｒｔ−ブトキシベンジル
アルコール、ｐ−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルアルコール
、フェネチルアルコール、０−クロロフェネチルアルコ
ール、ｍ−クロロフェネチルアルコール、０−メトキシ
フェネチルアルコール、ｍ−メトキシフェネチルアルコ
ール、０−プロピルフェネチルアルコール、０−エトキ
シフェネチルアルコール、ｐ−フルオロフェネチルアル
コール、Ｐ−ブロモフェネチルアルコール、０−プロポ
キシフェネチルアルコール、０−ブトキシフェネチルア
ルコール、１−（ｐ−イソプロピルフェニル）エタノー
ル、３−フェニル−１−プロパツール、２−フェニル−
１−プロパツール、４−フェニル−１−ブタノールおよ
び３−フェニル−１−ブタノール。

有機プロトン性溶媒を反応温度において液体であるベー
ターポリハロゲン化低級アルカノールから選択するとき
、１〜４個の炭素原子のバータークロロ−および／また
はフルオロ−置換アルカノールは好ましい。前記ベータ
ーポリハロゲン化低級アルカノール例は次の通りである
ニジクロロエタノール、トリクロロエタノール、ジクロ
ロフルロロエタノール、ジフルオロクロロエタノール、
ジフルオロエタノール、トリフルオロエタノール、１，
１，１，３，３．３−ヘキサフルオロ−２−プロパツー
ル、　　２　、２．、３　、４　、４　、４−ヘキサフ
ルオロブタノールおよび２，２，３゜３．４，４．４−
へブタフルオロブタノール。

抗生物５ｊＡ４０９２６アグリコンの製造に好ましい加
水分解条件は、極性非プロト性溶媒と強い錫酸または有
機酸との混合物を使用し、限定された（０、ｉ〜１０％
Ｗ／Ｗ）の量の水の存在下の４０℃〜１００℃、好まし
くは６５℃〜９０℃の温度にける１時間〜４時間のコン
トロールされた加水分解である。

最も好ましくは、加水分解混合物は８：２〜９．５：０
．５のジメチルスルホキシドおよび３７％の塩酸との混
合物であり、温度は約８０℃であり、そして反応時間は
約３時間である。

萌述のように、これらの条件下に、また、抗生物質Ａ４
０９２６複合体（またはその単一因子または前記因子の
混合物）の糖部分の部分的加水分解生成物である、抗生
物質Ａ４０９２６マンノシルアグリコンおよび抗生物ｆ
ｉＡ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコ
ン（複合体ＡＢまたはその単一因子）は抗生物質Ａ４０
９２６アグリコンに転化される。

抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン複合体ＡＢおよび単一の因子Ａ、Ｂ、Ｂ、およ
びＢ、および抗生物質Ａ４０９２６アグリコンは、多数
の広く拡散された感染の原因であるグラム陽性バクテリ
アに対して活性である０通常の治療的処置に対してこれ
らの病原体は抵抗を増加しているので、新しい抗生物質
の要求はなお大きい。

一般に、抗生物質の処置について、抗生物質Ａ４０９２
６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン複合体ＡＢ
、その因子および／または抗生物質Ａ４０９２６アグリ
コンならびに無毒のそれらの製薬学的に許容されうる塩
類またはそれらの混合物は、局所的にまたは非経口的の
異なる投与の経路により投与することができる。非経口
的投与は、一般に、好ましい投与経路である。

注射用組成物は、油または水性ビヒクル中の懸濁液、溶
液、または乳濁液のような形態であることができ、そし
て懸濁剤、ｉｉ（溶化剤および／または分散剤のような
アジュバントを含有することができる。

あるいは、活性成分は、供給の時、適当なビヒクル、例
えば、無菌の水を添加する、再構成のための粉末の形態
であることができる。

投与の経路に依存して、これらの化合物は種々の投′ｊ
形態に配合することができる。

ある場合において、経口的投与のための賜陽性被覆され
た投与形態に配合することができ、これは既知の技術に
おいて知られているようにして調製することができる［
例えば、「レミントンの製薬科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ
’ｓ　　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　　５ｃｉｅｎ
ｃｅｓ）」、第１５版、マツグ・パブリジング・カンパ
ニー、米国ペンシルバニア州イーストン、１６１４ペー
ジ参照］。

これは腸内で抗バクテリア剤の吸収がとくに望ましくか
つ胃を未変化で通過させるとき、ことに有効であろう。

活性成分の量は、種々の因子、例えば、処置すべき患者
の大きさおよび状態、投与の経路および頻度、および含
まれる薬剤に依存する。

本発明の抗生物質、すなわち、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ
−アシルアミノグルクロニルアグリコンおよび抗生物質
Ａ４０９２６アグリコンおよびそれらの製薬学的に許容
されうる塩類は、約０．５〜５０　ｍ　ｇ　／　ｋ　ｇ
患者の活性成分の毎日の量で、必要に応じて１〜４回／
日に分割して投与したとき、一般に有効である。

とくに好ましい組成物は、約１００〜約５，０００ｍｇ
／単位を含有する投与単位で調製されたものである。

持続作用の配合物は、この分野において知られているよ
うに、異なる機構および方法の基づいて調製することが
できる。

抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコンまたは抗生物質Ａ４０９２６アグリコンを含有
する持続作用の配合物を調製する好ましい方法は、水性
または油性の媒質中に懸濁された。この抗生物質の水不
溶性の形態の使用を含む。

製薬学的組゛　の調 筋肉内注射のための投与単位形態は、８％のプロピレン
グリコールおよび５００ｍｇの抗生物質Ａ４０９２６Ｎ
−アシルアミノグルクロニルアグリコン複合体ＡＢの製
薬学的に許容されうる塩基付加塩を含有する無菌の懸濁
液ＵＳＰの５ｍｌを使用して調製される。

筋肉内注射のための投与単位形態は、８％のプロピレン
グリコールおよび５００ｍｇの抗生物質Ａ４０９２６Ｎ
−アシルアミノグルクロニルアグリコン複合体Ａの製薬
学的に許容されうる塩基付加塩を含有する無菌の懸濁液
ＵＳＰの５ｍｌを使用して調製される。

筋肉内注射のための投与単位形態は、８％のプロピレン
グリコールおよび５００　ｍ　ｇの抗生物質Ａ４０９２
６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン複合体Ｂの
製薬学的に許容されうる塩基付加塩を含有する無菌の懸
濁液ＵＳＦの５ｍｌを使用して調製される。

筋肉内注射のための投与単位形態は、５ｍｌの無菌の注
射用の水中に懸濁させたｌ　、０００ｍｇの水不溶性の
形態の抗生物質Ａ４０９２６アグリコンを使用して調製
される。

さらに、本発明の抗生物質は、腸内の色層大腸炎（ｐｓ
ｅｕｄｏｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ　　ｃｏｌｉ　ｔ　ｉ　
ｓ）の原因であるクロストリジウム・乏フィシレ（Ｃｌ
ｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　　ｄｉｆｆｉｃｆｌｅ）の生長を
抑制するために有用である。

これらの抗生物質は、色層大腸炎の処置において、製薬
学的に許容されうる投与形態に調製された、抗生物質ま
たは製薬学的に許容されうる塩の有効量を経口的に投与
することにより使用できるであろう。このような使用の
ため、抗生物質はゼラチンカプセル剤または液状懸濁液
の形態で投与することができる。

薬物としての活性のほかに、本発明の抗生物質Ａ４０９
２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン類および
抗生物質Ａ４０９２６アグリコンおよびそれらの製薬学
的に許容されうる塩類は、動物の成長促進剤として使用
することができる。

この目的に、本発明の化合物を適当な飼料中に混入して
経口的に投与する。使用する精確な濃度は、正常な飼料
が消費されるとき、成長促進に有効な量で活性剤を供給
するために必要な量である。

動物飼料中への本発明の活性化合物の添加は、好ましく
は、活性化合物を有効量で含有する適当な飼料予備混合
物を調製し、そしてこの予備混合物を完全な割合で混入
することによって達成される。活性成分を含有する中間
濃厚物または供給補助剤を飼料中に配合することができ
る。

このような飼料予備混合物および完全定量を調製しかつ
投与できる方法は、参考書に記載されている［例えば、
「アプライド・アニマル・ニュートリジ、ン（Ａｐｐｌ
　ｉｅｄ　　Ａｎｆｍａｌ　　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）Ｊ
、Ｗ、Ｈ，７リードマン・アンド争カンバー１−−（Ｆ
ｒｅｅｄｍａｎ　　ａｎｄＣＯ、）、米国、Ｓ、ｙラン
シスコ（Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ）、１９６９または「ライ
ブストック・フィーズ番アント骨フィーディング（Ｌｉ
ｖｅｓｔｏｃｋ　　Ｆｅｅｄｓ　　ａｎｄ　　Ｆｅｅｄ
ｉｎｇ）」０φアンド・ＢΦブックス、米国オレゴン州
コバリス、１９７７参照］そしてこれらをここに引用に
よって加える。

Ａ４０９２６出　物質の説明および調製抗生物質Ａ４０
９２６複合体、Ａ４０９２６因子Ａ、因子Ｂ、因子Ｂ０
、因子ＦＡまたは因子ＰＢの生産は、それを生産するこ
とのできる７−７±Ａ）種　ＡＴＣＣ３９７２７、また
はそのＡ４０９２６生産性突然変異体または変異型を、
好気的条件ドに炭素、窒素および無機塩類の同化源を含
有する水泳栄養培地中で培養することによって達成され
る。波高技術において通常使用されている栄再培地の多
くを使用することができるが、ある種の培地は好ましい
、好ましい炭素源は、グルコース、マンノース、ガラク
トース、澱粉、コーンミールなどである。好ましい炭素
源は、アンモニア、大豆粉末、ペプトン、肉エキス、酵
母エキス、トリプトン、アミン酸類などである。培養基
中に混入することができる無機塩類には、ナトリウム、
カリウム、鉄、亜鉛、コバルト、マグネシウムン、カル
シウムおよびアンモニウムのイオン、塩素イオン、炭酸
イオン、硫酸イオン、リン酸イオン、硝酸イオンなどの
イオンを生成することができる慣用の可溶性塩類が存在
する。

通常、抗生物質生産性菌株は、振盪フラスコ内で予備培
養され、次いでこの培養物を使用して実質的な量の抗生
物質を生産するためのびん発酵器に接種する。予備培養
に使用される培地はより大きい規模の発酵に使用される
ものと同一であることができるが、他の培地を使用する
こともできる。抗生物質Ａ４０９２６生産性菌株は、２
０〜４０℃、好ましくは２４〜３５℃の温度において生
長させることができる０発酵の間、抗生物質の生産はブ
イヨンまたは菌糸体の抽出物を抗生物質活性について、
例えば、バオイアッセイまたはＴＬＣまたはＨＰＬＣ手
順により監視することがこできる。

抗生物質Ａ４０９２６に感受性の微生物、例えｅｕｓ）
を試験有機体として使用することができる。バイオアッ
セイは寒天平板上の寒天拡散法により便利に実施される
。抗生物質活性の最大の生産は、発酵の第２日目〜第５
日目に起こる。

抗生物質Ａ４０９２６は、菌株アクチノマズラ（Ａｃｔ
　ｉｎｏｍａｄｕｒ４）種ＡＴＣＣ３９７２７またはそ
の抗生物質Ａ４０９２６生産性突然変異体または変異型
を培養することにより生産され、そしてｊ８養ブイヨン
中に主として存在する。

ゑ二 巨視的および微視的検− 栄養菌糸体は、波状および分岐した菌糸（直径０　、０
　ｇｍ）から構成され、ある培地上で、表工に星印で識
別するように、数日の生長後に、棒様要素に分解する傾
向があるが、一方ブルコースーアスパラギン培地上で、
それは球状要素に分解する。

この菌株の特性は、ある培地上で栄養菌糸体の赤茶褐色
である。

気中菌糸体はわずか、の培地に存在するだけである；と
くに表工に記載するもののうちで、それはオートミール
寒天およびソイル寒天（ｓｏｉｌａｇａｒ）中にのみ存
在する。これらの培地上で、気中菌糸体は白−グレイで
あり、そして約１０〜２０の胞子のかぎおよび短い螺線
で配置された芽胞柄を形成する。

胞子は円筒形であり、そして０．８Ｘ１．２μｍの平均
の大きさを有する。

支反立性ム抜亙 培養特性の検査のために、アクチノマズラ（Δｃｔｉｎ
ｏｍａｄｕｒ４）種ＡＴＣＣ３９７２７は、シャーリン
グ（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）およびゴツトリーブ（Ｇｏｔｔ
ｏｌｉｅｂ）　　［シャーリング　Ｅ、Ｇ、およびゴツ
トリーブ　Ｄ、、１９６ロ一ストレブトマイセス種の特
性づけ法（Ｍｅｔｈｏｄ　　ｆｏｒ　　ｃｈａｒａｃｔ
ｅｒｉｚａｔｉｏｎ　　ｏｆ　　５ｔｒｅ　　ｔｏｍｙ
ｃｅｓ　　５ｐｅｃｉｅｓ）−インターナショナル・ジ
ャーナル・オブ・システミック・バクテリオロジー（Ｉ
ｎ、　　Ｊ、　　５ｙｓｔ、　　Ｂａｃｔｅｒｉ。

１、）、１６．３１３−３４０］により示唆される種々
の標準培地上でワクスマン（Ｗａｋｓｍａｎ）　　［ワ
クスマｙ、Ｓ、Ａ、、１９６１−ジ・アクチノマイセテ
ス（Ｔｈｅ　　Ａｃｔ　ｉ　ｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）−ｆ
Ｏウィリアムス拳アンド・ウイルキンス・カンパニー・
バルチモア（ＴｈｅＷｔｌｌｉａｍｓ　　ａｎｄ　　Ｗ
ｉｏｌｋｉｎｓ　　Ｃ。

、）；Ｖｏ　ｌ　、２．３２８−３３４］が推奨するい
くつかの培地を添加して培養した。

色の決定は、必要なときはいつでも、マエルズ（Ｍａｅ
ｒｚ）およびパウル（Ｐａｕｌ）［マエルズ　Ａ、およ
びＭ、レア争パウル、１９５０−色（７）　ＩＧ象（Ａ
　　Ｄｉｃｔ　ｉ　ｏｎａｒｙ　　ｏｆ　　ＣＯ　ｌ　
ｏ　ｒ）　−ｍ２版　　マクグロー−ヒル壷ブック・カ
ンパニー・インコーボレーテット、ニューヨーク］の方
法により実施した。

有機体の種々の炭素源を利用する能力は、シャーリング
およびゴツトリーブが記載する方法により研究した。

表工における読みは、２８℃において２週のインキュベ
ーション後に実施した。

火工 菌株アクチノマズラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄ　ｕ　ｒ　４
）種ＡＴＣＣ３９７２７の培養特性 ・欠り培地　　　　　　　　特性 培地Ｎ０９２　豊富な生長、外皮のある表面、（酵１５
Ｌエキス　８／Ｌ／８．＠量の琥珀色−ピン麦芽寒天）
　　り色の可溶性顔料 Ｊ８地Ｎ０、３　　豊富な生長、平滑な表面、バイオ（
オートミー　レット、５５／Ｅ／４　、気中菌糸ル寒天
）　　　体、非常に不十分なグレイ、可溶性顔料、バイ
オレット、５５／Ｈ 培地Ｎ０、４　　中程度のな生長、平滑な薄い表（無機
塩類−面、クリーム色、１０／Ｄ／２澱粉寒天） 培地Ｎ０１５　中程度のな生長、平滑な薄い表（グリセ
ロ−面、アプリコツト、１０７Ｂ／ルーアスパラ　２ ギン寒天） 培地Ｎ００６　中程度のな生長、わずかの外皮の本（ペ
プトン　ある表面、琥珀色、ｌ　２／Ｄ／９−酵母エキ
ス 鉄寒天） 培地Ｎ００７　豊富な生長、平滑な薄い表面、琥（トリ
プシン　珀色−褐色、１３／に／１２寒天） オートミール　豊富な生長、平滑な表面、赤茶褐寒天本
　　　　色、８／Ｌ／７　、気中菌糸体、中程度の淡黄
色−グレイ、４４７Ｇ ヒラキイ（ＨＢ富な生長、しわのある表面、琥１ｃｋｅ
ｙ）　　珀色−褐色、１３／に／１２およびトレス ナー（Ｔｒｅ ｓｎｎｅｒ） の寒天本 ツアベックグ　中程度の生長、平滑な表面、淡黄ルコー
ス寒天　色、９／Ｉ／３ グルコース　　不十分な生長、クリーム状表面、アスパ
ラギン　麦わら一黄色、９／Ｅ／１寒天末 栄養寒天　　　ツ富な成長、しわのある表面、淡色−オ
レンジ、１１／Ｃ／７ ジヤガイモ寒　豊富な生長、しわのある表面、赤天木　
　　　　茶褐色、８／Ｌ／９ ベネツ）　（Ｂ　　豊富な生長、外皮のある表面、赤ｅ
ｎｎｅｔ　　茶褐色、８／Ｌ／８、可溶性顔ｔ）の寒天
＊　料、深い琥珀色ばら色５／Ｊ／１リンゴ酸カル　中
程度の生長、平滑な表面、アブシウム寒天　　リコット
色、１０／Ｂ／３スキルミルク　豊富な生長、わずかに
しわのある寒天　　　　　表面、オレンジ色、９７Ｂ／
３ツアペツクの　豊富な生長、平滑な表面、アプリスク
ロース基　コツト色、１０／Ｂ／８天 卵アルブミン　豊富な生長、平滑な表面、バラ寒天　　
　　　色、５２／Ｂ／３、微量の可溶性顔料、バラ色、
５２／Ｂ／３ サブロー寒天　生長なし ンイル（ｓｏ　　不十分ＮＡ生長、無色、白−グｉｔ）
寒天　　レーの気中菌糸体 デキストロ−中程度の生長、平滑な薄い表面、ストリプ
トン　雨水路−黄色、１０／Ｇ／２寒天本 ジャガイモの　豊富な生長、オレンジ−褐色、微プラグ
（ｐｉｆｌの白−グレーの気中菌糸体ｕｇ） 生理学的特性 友二 生理学的特性 試験　　　　　　　　　　結果 Ｈ２Ｓの生成　　　　培地Ｎ００６について陰性酢酸鉛
のストリップで陽性 トリプシン反応　　　　　　　　　陽性カゼインの加水
分解　　　　　　　陽性リンゴ醜カリシウムの加水分解
　　陰性ゼラチンの液化　　　　　　　　　陽性凝固　
　　　　　陰性 炭素源の利用 ■ 炭素の利用 炭素源　　　　　　　　　生長 アラビノース　　　　　　　　　　　　＋キシロース　
　　　　　　　　　　　　　＋マンノース　　　　　　
　　　　　　　　＋フルクトース　　　　　　　　　　
　　　　＋ラフィノース　　　　　　　　　　　　＋ラ
ムノース　　　　　　　　　　　　　＋グルコース　　
　　　　　　　　　　　　＋ラクトース　　　　　　　
　　　　　　＋ガラクトース　　　　　　　　　　　　
＋イノシトール　　　　　　　　　　　　−スクロース
　　　　　　　　　　　　　　＋セル−ロース　　　　
　　　　　　　　　　−サリシン　　　　　　　　　　
　　　　＋マンニｉ・−ル　　　　　　　　　　　　＋
リポース　　　　　　　　　　　　　　−＋−生長 一＝生長せず 化学的分類学の特性 細胞壁の分析： 細胞壁中に存在するアミノ酸類の分析は、ベラカー（Ｂ
ｅｃｋｅｒ）も、「全細胞加水分解物のペーパークロマ
トグラフィーによるノカルジアとストレプトマイセスと
の間の迅速分別（Ｒａｐｔｄ　　ｄｉｆｆｅｒｅｔａｔ
ｉｏｎ　　ｂｅｔｗｅｅｎ　　Ｎｏｃａｒｄｉａ　　ａ
ｎｄ　　５ｔｒｅｐｔ。

ｍｙｃｅｓ　　ｂｙ　　ｐａｐｅｒ　　ｃｈｒｏｍａｔ
ｏｇｒａｐｈｙ　　ｏｆ　　ｗｈｏｌｅ　　ｃｅｌｌｈ
ｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ）」、アプライド・マイクロバ
イオロジー（Ａｐｐｌ、　　Ｍｉｃｒｏｂｉ　ｏ　ｌ　
、）旦、４２１−４２３　（１９６４）の論文中に記載
されている方法により実施した。

全細胞の分析は、ｌヱージアミノビメリン酸の存在を明
らかにした。

カワモトら［１，カワモト、Ｔ、才力およびＴ、ナラ、
「マイクロモノスポラ・オリポアステロスポラ（Ｍｉｃ
ｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ　　ｏｆｉｖｏａｓｔｅｒｏｓ
ｐｏｒ４）、マイクロモノスポラ会すガミエンシス（Ｍ
ｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ　　ｓａｇａｍｉｅｎｓｉ
ｓ）および関連有機体の細胞壁の組成」　、ジャーナル
参オブ・バクテリオロジー（Ｊ、　　ｏｆ　　Ｂａｃｔ
ｅｒｉ。

１、）、ｌｊ匹、　５２７−５３４　、１９８１］の方
法により得られた。純粋な細胞壁の分析は、グリシンの
不存在を示した。

糖の分析： 糖分の分析は、Ｍ、Ｐ、レヘバリアー（Ｌｅｃｈｅｖａ
ｌｉｅｒ）、ｒ臨床的に重要な好気的アクチノミセテス
の同定（Ｉ　ｄｅｎｔ　ｉ　ｆ　ｉ　ｃａｔｉｏｎ　　
ｏｆ　　ａｅｒｏｂｉｃ　　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ
ｓ　　ｏｆ　　ｃｌｉｎｉｃａｌ　　ｉｍｐｏｒｔａｎ
ｃｅ）Ｊ　、ジャーナル・オブ・ラボラトリ−拳アンド
・クリニカル・メディシン（Ｊ。

Ｌａｂ、　　Ｃｌ１ｎ、　　Ｍｅｄ、）７１，９３４−
９４４　（１９６８）の方法により、Ｊ、Ｌ、スタネッ
ク（Ｓｔａｎｅｃｋ）およびＧ、Ｄ、ロパーツ（Ｒｏｂ
ｅｒｔｓ）、ｒ薄層クロマトグラフィーにより好気的ア
クチノミセテスの同定対する簡素化されたアプローチ（
Ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ　　ａｐｐｒｏｃｈ　　ｔｏ　　
１ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　　ｏｆ　　ａｅｒｏｂ
ｉｃ　　ａｃｔｉｎｏｍｉｃｅｔｅｓ　　ｂｙ　　ｔｈ
ｉｎ−１ａｙｅｒｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、２
８，２２６−２３１　（１９７４）に記載されている薄
層クロマトグラフィーのセルロースシートを使用して、
次の溶媒系を用いて実施した：酢酸エチルーピリジンー
水（１００：　３５　：　２５、容量）。

得られた結果は主にグルコースおよびリポースの存在を
示したが、より少量のガラクトース、マンノースおよび
マズロース（３−０−メチル−Ｄ−ガラクトース）も検
出された。

ミコール酸類： ミコール酸類の存在を検出するアッセイは、ミンニキン
（Ｍｉｎｎｉｋｉｎ）ら［Ｄ　、　Ｅ　、ミンニキン、
Ｌ、アルシャマオニイ（Ａｌｓｈａｍａｏｎｙ）および
Ｍ、グツド−ｙｘコロ−Ｇ　ｏ　ｏ　ｄ　ｆｅｌｌｏｗ
）、ｒ全有機体のメタノール分解物の薄層クロマトグラ
フィー分析によるマイコバクテリウム、ノカルジアおよ
び関連タクサの分別（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
　　ｏｆ　　Ｍｙｃ。

ｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｎｏｃａｒｄｉａ　　ａｎｄｒｅ
ｌａｔｅｄ　　ｔａｘａ　　ｂｙ　　ｔｈｉｎｌａｙｅ
ｒ　　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　　ａｎａｌｙｓ
ｉｓ　　ｏｆ　　ｗｈｏｌｅ　　ｏｒｇａｎｉｓｍ　ｍ
ｅｔｈａｎｏｌｙｓａｔｅｓ）Ｊ、ジャーナＪし番オブ
・ジェネラル番マイクロバイオロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ
　　ｏｆ　　Ｍｉｃｒｏｂｉ。

１ｏｇｙ）　８８，２００−２０４．１９７５］ノ方法
により実施した。

菌株の同定： この菌株は、メソ−ジアミノピメリン酸およびマズロー
スの存在、イブトドグリカン中のプリジンの欠乏、ミコ
ール酸類の欠乏および適度に長い胞子鎖をもつ気中菌糸
体の形成のために、アクチノミセテス（Ａｃｔ　ｉｎｏ
ｍｙｃｅｔｅｓ）のアクチノマズラ（Ａｃｔ　ｉ　ｎｏ
ｍａｄｕｒ４）属に帰属される。

他の微生物を使用するときのように、抗生物質Ａ４０９
２６生産性菌株の特性は変更される０例えば、菌株の人
工的変異型および突然変異体は種々の既知の突然変異原
、例えば、紫外線、Ｘ線、高周波、放射線、および化学
物質、例えば、そして硝酸、Ｎ−メチル−Ｎ′−二トロ
ーＮ−ニトロソグアニジン、および多くの他のもので処
理することにより得ることができる。アクチノマズラ（
Ａｃｔ　ｉ　ｎｏｍａｃｉｕｒ４）属の種の属しかつ抗
生物質Ａ４０９２６を生産するすべての自然おと同等で
あると見なされ、そして本発明の範囲内に入ると考えら
れる。

抗生物質生産性有機体の発酵ブイヨンからの本発明の抗
生物質の回収は、それ自体既知の技術に従って実施され
、そしてこれらの技術は、溶媒による抽出、非溶媒の添
加または溶液のｐＨの変化による沈殿、分配クロマトグ
ラフィー、逆相クロマトグラフィー、イオン交換クロマ
トグラフィー、親和クロマトグラフィーなどを包含する
。

好ましい手順は、固定化したＤ−７ラニルーＤ−７ラン
ニンを使用するクロマトグラフィー、引続く逆相カラム
クロマトグラフィーを包含する。

本発明の回収法に適する固定化されたＤ−７ラニルーＤ
−アランニンマトリックスは、欧州特許出願第８３１１
２５５５号に開示されている。この方法に好ましいマト
リックスは、調節された孔をもつ架橋されたポリデキス
トランと結合したＤ−アラニル−Ｄ−アランニンである
。

発酵ブイヨンは、−通抜または予備精製手順後、親和ク
ロマトグラフィーに直接かけられる。

予備精製手順は、発酵塊全体を塩基性とし、好ましくは
ｐＨ８，５〜１Ｏ６５にして菌糸体へ吸着された抗生物
質を可溶化し、次いで濾過することを包含する。この透
明濾液をｐＨ２，５〜４．５にし、再び濾過助剤の存在
下に濾過する。濾液を廃棄し、一方回収された濾過ケー
クを水中に懸濁させ、塩基性とし、好ましくはｐＨ８〜
９とし。

そして濾過する。濾過ケークを再び同一手順に付し、一
本抗生物賀Ａ４０９２６を含有する濾液をプールする。

次いで、これらの濾液または濾過した発酵ブイヨンを、
カラムまたはバッチ式で、固定化されあり一７ラニルー
Ｄ−アランニンを使用する親和クロマトグラフィーにか
ける。

親和マトリックスへの抗生物質の結合は、好ましくはｐ
Ｈ７，０〜８．０において実施し、モして溶離はより塩
基性のｐＨ値（好ましくは９．０〜１０　、５）におい
て水性塩基により実施する。

この水性塩ノ、（は、必要に応じて、下に定義するよう
な極性有機溶媒、例えば、極性水混和性溶媒の存在ドに
、アンモニア、揮発性アミン、アルカリまたはアルカリ
金属水酸化物または塩基性緩衝液であることができる。

カラムを、必要に応じて、塩類、尿素および／または水
混和性溶媒を含有する水性緩衝液ｐＨ４〜９で洗浄する
ことにより不純物を除去した後。

Ａ４０９２６を上の溶離混合物で溶離する０次いで、抗
生物質は、好ましくは、水と最小共沸混合物を形成する
ことのできる有機溶媒との共沸蒸留により、プールした
抗生物質含有分画から水を除去し、次いで非溶媒を添加
して所望生成物溶液を沈殿させることによって回収する
。

水と最小共沸混合物を形成することのできる溶媒の代表
例は、ｎ−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ブチルエ
ーテル、四塩化炭素、クロロホルム、シクロヘキサン、
２．４−ジエチルフラン。

ヘキサンおよびｍ−キシレンである。好ましくは、溶媒
はｎ−ブタノールである。

非溶媒の例は、石油エーテル、低級アルキルエーテル、
例えば、エチルエーテル、プロプルエーテルおよびブチ
ルエーテル、および低級アルキルケトン、例えば、アセ
トンである。

あるいは、プールした抗生物質含有分画を、好ましくは
、上に定義した有機溶媒との共沸蒸留により、小さい体
積に濃縮し、そして得られた水溶液を凍結乾燥する。

溶離に使用する水性塩基が非揮発性であるとき、それを
中和し、濃縮物を脱塩した後、沈殿または凍結乾燥を実
施することが必要であろう。

便利な脱塩法は、抗生含有水溶液をシラン化シリカゲル
のカラムに適用し、蒸留水で洗浄し、そして極性水混和
性溶媒と水との混合物で溶離することを包含する。

極性水混和性溶媒の代表例は、水溶性アルコール（例え
ば、メタノール、エタノール、インプロパツール、ｎ−
ブタノール）、アセトン、アセト二トル、低級アルキル
アルラノエート（例えば、酢酸エチル）、テトラヒドロ
フラン、ジキサンおよびジメチルホルムアミドおよびそ
れらの混合物である。好ましい極性水混和性溶媒はアセ
トニトリルである。

あるいは、脱塩は抗生物質含有溶液を上に定義した親和
カラムに適用し、蒸留水で洗浄し、そして親和クロマト
グラフィーの溶離について前述した揮発性水性塩基で溶
離することにより実施することができる。そのようにし
て得られる生成物は、抗生物１ｆ！ｌＡ４０９２６の複
合体である。必要に応じて、それらのざらの精製するか
、あるいは因子Ａ、Ｂ、Ｂ、、ＦＡおよびＦＢに分割す
ることができる。

純粋な抗生物質Ａ４０９２６複合体を得るための便利な
手順は、上のようにして得られる複合体を親和クロマト
グラフィーのカラムによりさらに精製することにより代
表される。上と同一の静止相（固定化されたＤ−アラニ
ル−Ｄ−７ランニン）が一般に使用され、そして所望の
抗生物質は前述の固定化されたＤ−アラニル−Ｄ−アラ
ンニンを使用する親和クロマトグラフィー手順に従うこ
とにより溶離される。好ましい固定化されたＤ−アシエ
ル−Ｄ−アランニンハ、セファロース（Ｓｅｐｈａｒｏ
ｓｅ）−ｅ−アミノカプロイル−Ｄ−７ラニルーＤ−ア
ランニンであり、好ましい平衡化混合物はｐＨ７〜８に
調節された２モルのＮａＣ１を含有する０、１６％（Ｗ
／Ｖ）のアンモニアであり、好ましい洗浄溶媒はｐＨ８
〜９．５に調節された２モルのＮａＣ１を含有する０、
１６％（Ｗ／Ｖ）のアンモニアであり、好ましい溶離混
合物はｐＨ１０，５〜１２に調節された２モルのＮａＣ
１を含有する０、１６％（Ｗ／Ｖ）のアンモニアであり
、最も好ましい混合物はＰＨ１１，５に調節された上の
混合物である。

抗生物質Ａ４０９２６の因子、すなわち、抗生物質Ａ４
０９２６因子Ａ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ、抗生物
質Ａ４０９２６因子Ｂ０、抗生物質Ａ４０９２６囚ｆＰ
Ａおよび抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＢは、抗生物質Ａ
４０９２６複合体の溶液からカラムクロマトグラフィー
により、好ましくは逆相クロマトグラフィーにより単離
される。逆相カラムクロマトグラフィーの場合において
、好ましい静止相はシラン化シリカゲルである。しかし
ながら、すぐれた結果は、また、非官能化ポリスチレン
およびアクリル樹脂、例えば、商品名、アンバーライト
（Ａｍｂｅ　ｒ　ｌ　ｉ　ｔ　ｅ）ＸＡＤ−２、ＸＡＤ
−４、ＸＡＤ−７およびＸＡＤ−８（ローム拳アンド・
ハース）またはジアイオす（Ｄｉａｉｏｎ）ＨＰ２０（
ミツビシ）のカラムクロマトグラフィーを使用して得る
ことができる。逆相精製工程を静止相としてシラン化シ
リカゲルにより達成する場合において、カラムは好まし
くは緩衝化水溶液でｐＨ４〜９、好ましくは５．５〜６
．５において予備平衡化し、次いで同一緩衝化水溶液で
中において極性水混和性溶媒の直線勾配で溶離する。極
性水混和性溶媒の代表例は、水溶性アルコール（例えば
、メタノール、エタノール、インプロパツール、ｎ−ブ
タノール）、アセトン、アセトニトリル、テトラヒドロ
フラン、ジオキサンおよびジメチルホルムアミドおよび
それらの混合物である。好ましい水混和性溶媒はアセト
ニトリルデアル。

溶離された分画をその抗生物質含量について、感受性微
生物についての通常のアッセイ、例えば、紙ディスクま
たは寒天拡散アッセイによりアッセイする。感受性有機
体の例は、バシルスΦクロマトグラフィーは、また、Ｔ
ＬＣまたはＨＰＬＣの技術により便利に監視される。

好ましいＨＰＬＣ技術は、シラン化シリカゲルの多孔質
および球形の粒子を使用する、抗生物質Ａ４０９２６の
分析についてのＨＰＬＣ手順を取扱うとき前述した方法
に従う逆相ＨＰＬＣにより代表される。

同様な抗生物質含量を有する分画を、プールシ、そして
前述のように脱塩して、本質的に純粋な抗生物質Ａ４０
９２６因子Ａ、因子Ｂ、因子Ｂ０、因子ＦＡおよび因子
ＦＢを得る。

木質的に純粋な抗生物質Ａ４０９２６因子Ａおよび抗生
物質Ａ４０９２６因子Ｂ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ
０、抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＡおよび抗生物質Ａ４
０９２６因子ＦＢは、それらを含有する分画から、既知
の技術により、例えば、凍結乾燥、非溶媒による沈殿ま
たは水溶液のｐＨの変化による沈殿により得られる。

便利な手順は、木と共沸混合物を形成することのできる
溶媒を添加し、水を共清蒸留により除去し、次いで前述
したような非溶媒の添加後書られる沈殿を濾過すること
を包含する。

抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＡおよび抗生物質Ａ４０９
２６因子ＦＢは、少なくともある発酵条件下において、
抗生物質Ａ４０９２６生産性微生物の主要な抗生物質の
生成物である。

抗生物質Ａ４０９２６因子ＡおよびＢは、それぞれ抗生
物質Ａ４０９２６因子ＦＡおよび抗生物質Ａ４０９２６
因子ＦＢの主な転化生成物であり、そしてしばしば発酵
ブイヨン中にすでに存在する。

塩基性条件下に、抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＡは抗生
物質Ａ４０９２６因子Ａに転化することができ、そして
抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＢは抗生物質Ａ４０９２６
因子Ｂに転化することができるという事実が発見された
。例えば、抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＡおよび抗生物
質Ａ４０９２６因子ＦＢは、０．５〜１０％の水性アン
モニアまたは他の真核性塩基、例えば、有機アミンで室
温において８〜２４時間処理することにより、それぞれ
抗生物質Ａ４０９２６因子Ａおよび抗生物質Ａ４０９２
６因子Ｂに転化される。

結局、発酵ブイヨン、または抗生物質Ａ４０９２６含有
抽出物またはその濃縮物をある時間塩基性条件下に（例
えば、真核性塩基の水溶液、ｐＨ〉９、−夜）放置する
と、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａおよび抗生物質Ａ４０
９２６因子Ｂに富んだ抗生物質Ａ４０９２６複合体が得
られるであろう。発酵ブイヨン、抽出物またはその濃縮
物を塩、］；（性環境に暴露する時間が短いと、抗生物
質Ａ４０９２６因子ＦＡおよび抗生物質Ａ４０９２６因
’／−Ｐ　Ｒに富んだ抗生物質Ａ４０９２６複合体が得
られる。

因子Ａおよび因子Ｂに富んだ抗生物質Ａ４０９２６複合
体を得るために好ましい手順は、それゆえ抗生物質Ａ４
０９２６複合体（主として抗生物質Ａ４０９２６因子Ｆ
Ａおよび抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＢを含有する）を
室温において８〜１２時間水性真核性塩基、例えば、水
性アンモニア、中に放置し、次いで所望の抗生物質の複
合体を前述のようにして単離することを包含する。

抗生物質Ａ４０９２６含有溶液の例は、発酵ブイヨン、
抽出物および親和クロマトグラフィーの溶離分画である
。

純粋な抗生物質Ａ４０９２６は、粗製複合体を親和クロ
マトグラフィーにより前述のようにさらに精製すること
によって得ることができる。

そのようにして得られる生成物は、その純粋な因子から
誘導されうる生物学的および物理化学的性質を有し、実
施例において抗生物質Ａ４０９２６複合体ＡＢと呼ぶこ
とにする。

抗生物質Ａ４０９２６複合体を因子ＦＡおよび因子ＦＢ
について濃縮する好ましい手順は、親和クロマトグラフ
ィー溶離分画を酸、好ましくは鉱酸、例えば、硫酸また
は塩酸で急速に中和することを含む。

この複合体から純粋な抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＡお
よびＦＢを単離することは、上に報告した手順のうつの
１つに従い達成することができる。

好ましい手順は、中圧（５〜５０バール）または高圧（
１００〜２００バール）の下に、好ましくはステンレス
のカラム中の、逆相液体クロマトグラフィーを含む。固
相は２〜１８個の炭素原子（最も好ましくは０１８）の
炭化水素相またはフェニル基ヲモつシラン化シリカゲル
であることができ、モして溶離剤は上に定義した極性水
混和性溶媒と樹脂と適合性のｐＨ（好ましくはｐＨ４＝
８）の水性緩衝液との混合物である。

溶離は通常のように監視し、均質な抗生物質含浸を有す
る分画をプールし、次いで前述のように処理して、下に
報告する特性を有する純粋な成分を巾はする。

高性能ＨＰＬＣにより、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂは
実際には因子Ｂ、および因子Ｂ１と命名される２種類の
因子の混合物せあることが示された。

抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂのほぼ９０％を湿る抗生物
質Ａ４０９２６因子ＢＯは、因子Ｂの物理化学的特性の
点りにおいて後述する系においてティコプラニンＡ２成
分２に戸して１．２２のＲｔを有する因子であり、一方
抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂのほぼ１０％を占める因子
Ｂ、は同一系において１．２７の相対的Ｒｔを有する因
子である。

純粋な抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ０は、抗生物質Ａ４
０９２６因子Ｂを１例えば、その単離に使用して逆相ク
ロマトグラフィー手順を反復することによりさらに精製
して得られる。抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂｏの物理化
学的および生物学的性質は抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ
のそれらと実質的に同一であるが、ただし上に引用した
ものに類似する系におけるＨＰＬＣ分析において、それ
は１つのみのピーク（記載するＨＰＬＣ系においてティ
コプラニンＡ２成分２に関してＲｔ＝１゜２２）をもつ
。

この説明および特許請求の範囲における抗生物質Ａ４０
９２６因子Ｂと抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂｏとの間の
上に概説した類似性のため、抗生物質Ａ４０９２６因子
Ｂの生物学的性質についての、：及は、抗生物質Ａ４０
９２６因子Ｂの主要成分（約９０％）でありかつ主とし
てその生物学的性質に寄与する抗生物質Ａ４０９２６因
子Ｂ０をも１ｒ及するものとして理解されたい。

したがって、本発明の抗生物質は発酵ブイヨンから単離
することができ、あるいは官能化されたポリスチレン、
アクリルまたはポリデキストリンのマトリックスを包含
する強いあるいは弱いアニオン樹脂によりさらに精製す
ることができる０弱アニオン交換樹脂は、次の商品名で
販売されているものである二ドウウエックス（Ｄｏｗｅ
ｘ）ＭＷＡ−１またはＷＧＲ（ダウφケミカル）、アン
バーライトＩＲＡ−７３（ローム・アンド・ハース）、
ＤＥＡＴ−セフ７デツクス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）（ファ
ーマシア）０本発明に従い使用することのできる強アニ
オン交換樹脂の例は、次の商品名で販売されているもの
を包含する：ドウウエックスＭＳＡ−１，５ＢＲ，５Ｄ
Ｒ−Ｐ　（ダウ・ケミカル）、アンバーライ）　ＩＲ−
９０４（ローム・アンド・ハース）およびＱＡＥ−セフ
ァデックス（ファーマシア）。

これらの樹脂からの本発明の抗生物質の溶離は、水また
は水と有機水混和性溶媒１例えば、低級アルコール（例
えば、Ｃ＋−Ｃ４）アルカノール）または低級アルキル
ケトン（例えば、アセトン）との混合物中の、電解質、
例えば、ナトリウムまたはカリウムのハイドロクロライ
ドの水溶液の直線勾配混合物により実施される。

抗生物質Ａ４０９２６マンノシルアグリコン、　は、因
子Ａおよび因子Ｂに富んだ抗生物質Ａ４０９２Ｂ＃ｉ合
体、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａ、因子Ｂ、因子Ｂ０ま
たはそれらの混合物をコントロールされた酸性条件下に
加水分解することによって調製される。

これらのコントロールされた酸性条件は、必要に応じて
非プロトン線有機溶媒の存在下の、強い鉱酸または有機
酸の濃水溶液により代表される。

強鉱酸の好ましい例は硫酸およびリン酸である。

好ましい強有機酸はトリフルオロ酢酸である。

好ましい非プロトン性有機溶媒は、脂環族または環族の
アルキルエーテル、例えば、ジオキサおンおよびテトラ
ヒドロフラン、低級アルキルスルホキシド、例えば、ジ
メチルスルホキシドおよび低級アルキルアミド、例えば
、ジメチルホルムアミドである。

反応温度は一般に０℃と反応混合物の還流温度との間に
保持される。多くの場合において、それは１５℃〜７５
化合物であるが、好ましい温度は２０″Ｃ〜５５化合物
でり、そして最も好ましい温度は室温である。

反応時間は特定の反応パラメーターに依存し、そして反
応過程はＴＬＣまたはＨＰＬＣにより追跡できるので、
当業者は反応過程を監視し、そして反応が完結したと考
えることのできる時を決定することができる。

この方法の１つの好ましい実施態様は、抗生物質Ａ４０
９２６複合体またはその純粋な因子を水性８０〜９５％
のトリフルオロ酢酸の存在下に室温においてコントロー
ルされた加水分解に付して抗生物質Ａ４０９２６マンノ
シルアグリコンを得ることによって代表される。

この方法の他の好ましい実施態様は、水性１〜２Ｎの［
８およびジオキサンの混合物２二１〜ｌ：２の存在下の
抗生物質Ａ４０９２６マンノシルアグリコンのコントロ
ールされた加水分解によって代表される。

加水分解工程の終りにおいて回収された粗製の抗生物［
Ａ４０９２６マンノシルアグリコンの精製は、それ自体
既知の技術、例えば、非溶媒の添加による沈殿、溶媒を
使用する抽出およびクロマトグラフィーにより達成する
ことができる。

好ましいクロマトグラフィーの手順はカラムクロマトグ
ラフィーを包含し、そして最も好ましいクロマトグラフ
ィーの手順は逆相カラムクロマトグラフィーである。

適当な逆相液体クロマトグラフィー手順は、中圧（５〜
５０バール）または高圧（１００〜２００バール）の下
に、好ましくはステンレスのカラムのカラムを使用する
。固相は２〜１８個の炭素原子（最も好ましくはＣｌ８
）の炭化水素相またはフェニル基をもつシラン化シリカ
ゲルであることができ、モして溶離剤は極性水混和性溶
媒と樹脂と適合性のｐＨ（好ましくはｐＨ３−８）の水
性緩衝液との混合物である。

極性水混和性溶媒の代表例は、水溶性アルコール（例え
ば、メタノール、エタノール、インプロパツール、ｎ−
ブタノール）、アセトン、アセトニトリル、低級アルキ
ルアルラノエート（例えば、Ｍ−酸エチル）、テトラヒ
ドロフラン、ジキサンおよびジメチルホルムアミドおよ
びそれらの混合物である。好ましい極性水混和性溶媒は
アセトニトリルである。

溶離された分画をその、抗生物質含量について。

感受性微生物についての通常のアッセ仁例えば、紙ディ
スクまたは寒天拡散アッセイによりアッセイする。感受
性有機体の例は、バシルス・（Ｓ、　　ａｕｒｅｕｓ）
である。

精製ならびに反応は、また、ＴＬＣまたはＨＰＬＣの技
術により便利に監視される。

好ましいＨＰＬＣ技術は、好ましくは５ｐｍの直径を有
するＣ−１８アルキル基で官能化されたシラン化シリカ
ゲルの多孔質および球形の粒子のカラム［例えば、５ｐ
ｍのウルトラスフェア−（Ｕｌｔｒａｓｈｐｅｒｅ・）
ｏＤＳアルテックス（Ａｌｔｅｘ）；ベックマン争カン
パニー］、Ｃ−１８アルキル基デ官能化されたシリカゲ
ルである予備カラム［例えば、ＲＰ　　１８　　ブラウ
ンリー・ラプス（Ｇｒａｗｎｌｅｅ　　Ｌａｂｓ）］お
よび水性緩衝化溶液中の極性水混和性溶媒、例えば、前
述の１種の直線勾配混合物である溶離剤を使用する逆相
ＨＰＬＣにより代表される。

好ましくは、この溶液はｐＨ５〜７に調節される。最も
好ましい溶離剤は、溶離剤Ａ中の溶離剤Ｂの５〜６０％
の直線勾配により代表され、ここで溶媒Ａはアセトニト
ル／水性緩衝液の、ｐＨ５〜７．１０：９０．の混合物
であり、そして溶媒Ｂはアセトニトル／木性緩衝液の、
ｐＨ５〜７．７０　：　３０、の混合物である。この分
野において知られているように、多くの物質を内部標準
として使用することができる。非常に便利なものは、こ
の場合において、このＨＰＬＣ系において本発明の化合
物に近接した保持時間を有する抗生物質Ｌ１７０５４で
ある。この標準物質は既知であり、そして欧州特許出願
公告第０１１９５７５号に記・１配されている。

本発明のこの化合物の抗バクテリア活性は、異なる微生
物培養物についての標準の希釈試験により生体外で立証
することができる。

Ｊ”　　物−Ａ４０９２６因子Ａ６’）　　　化学ｔｌ
’Ｊ特Ａ）　次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル
（添付図面の第１１図中に示す）： λｍａｘ （ｎｍ） ４）　　０．１ＮのＨＣｌ　　　　　２８１ｂ）　リン
酸塩緩衝液ｐＨ７，２８１（肩 ） ｃ）　　０　、　Ｉ　ＮのＮ　ａＯＨまた　３００はＫ
ＯＨ ｄ）　メタノール　　　　　　　２８２ｅ）　リン酸塩
緩衝液ｐＨ９．４２８ ２３１０（肩） Ｂ）　次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ−
’）（添付図面の第１２図中に示す）： ３７００−３１００；３１００−２８００（ｎｕｊ　ｏ
　Ｉ）；　　１６５５；　　１６２０−１５６０．１５
１０．１４８０−１４１０（ｎｕｊｏｌ）；１３７５　
　（ｎｕｊｏｌ）、１３２０−１２５０．１２５０−１
１９ｏ；　　１１００−９５０；８４５；８１０；７２
０　　（ｎｕ　ｊ　ｏ　１） Ｃ）　　ＤＭＳＯｄ６　（ヘキサデユーテロジメチルス
ルホキシド）中で記録した２７０ＭＨ２において次の信
号群（ｐｐｍ）を示すｌ　Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内部
標準ＴＭＳ（０，００ｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）（添付
図面の第１３図中に示す）： ６０．８６（ｔ、６Ｈ）、１．２１（約Ｉ１Ｈ）；１．
４３　（２Ｈ）；２．２１−２．３４　（３Ｈ）；４−
６．２　（約１６Ｈ）；６．２−８（約２３Ｈ）、８．
４４．９．２２．９．６６　（広い帯；移動性プロトン
） ２．４−４：Ｈ２Ｏのピークからの干渉Ｄ）　次の条件
下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、ティコプラニンＡ２
成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１．１２の保持時
間（Ｒｔ）ニ カラム：　ウルトラスフェア−（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒ
ｅ）ＯＤＳ　（５ｇ ｍ）アルテクス（Ａ　１　ｔ　ｅ　ｘ）［ベックマン（
Ｂｅｃｋｍａ ｎ）］４．６ｍｍ（内径）×２ ０ｍｍ 予備カラム：　ブラウンリー・ラプス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　＆　　ｂ ｓ）ＲＰ１８　（５ｇｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　１０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４”　Ｈ２０９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２，５
ｇ／　１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ３０％ ｐＨ６，０に調節 溶離：　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線
の勾配、４０分 流速：　　１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２５４ｎｍ 内部標準：　ティコプラニンＡ２成分２［グルツボ・レ
ペチット社 （Ｇｒｕｐｐｏ　　Ｌ、ｅｐｅｔ ｉｔ　　Ｓ、ｐ、Ａ、］ 同一条件下で、テステステロン［ロウセル・ラフラフ（
Ｒｏｕｓｓｅｌ　　Ｕ　ｃ　１　ａｆ）］に関する保持
時間は０．６０であるＥ）　試料を不活性雰囲気（ΔＷ
　４．６％）のもとて約１４０℃において前もって乾燥
した後、元素分析は次の近似百分率組成（平均）を示す
： 炭素５５．８２％；水素５．１７％：窒素６．３１％；
塩素（合計）４．２４％；塩素（イオン性）０．３７％ 空気中で９００℃における無機残留物：１．２％ Ｆ）　過剰のＨＣｌの添加後にＫＯＨで滴定すると、２
−メトキシエタノール（ＭＣ５）：水、４：１、中の酸
−塩基の滴定のプロフィルは、次のｐｋ　　　　を有す
る４つのＭＣＳ イオン化機能を示す：４．６．５．６．７．２．９．２ Ｇ）　次のクロマトグラフィー系における０、２４のＲ
ｆおよび０．７０のティコプラニンＡ２成分２に関する
Ｒｆ値： ５％（ｗ／ｖ）の水性 Ｎａ２ＳＯ４７０ アセトニトリル　　　　　　　　３０ シラン化シリカゲル６０Ｆ２ｓ４メルク（Ｍｅｒｃｋ）
板（層の厚さ０．２５ｍｍ）を使用する 可視化ニ ー　　ＵＶ光 −パウリ試薬（Ｐａｕｌｙ　　Ｒｅａｇｅｎｔ）、すな
わち、ジアゾ化スルファ ニル酸［ジャーナルｅオブ・クローｙ）グラフ４−　（
Ｊ　、　　Ｃｈｒｏｍａｔ　。

ｇ、）２０，１７１　（１９６５）、 Ｚ、　　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　　Ｃｈｅｍ。

２９２．９９　、（１９５３）］　を使用する黄色 −Ｂ、　　５ｕｂｔｉｌｉｓ　　ＡＴＣＣ６６３３を使
用する最少ディビス（Ｄ ａｖｉｓ）培地上のバイオオートラジ オグラフィー Ｈ）　　　ｌ　７１７ニＭ＋Ｈ’Ｅ’ピークを示すＦＡ
Ｂ−ＭＳスペクトルからデジューム（ｄｅｓｕｍｅ）し
た約１７１６の分子量。

抗生物　Ａ４０９２６因子Ｂの物理化学的時−Ａ）　次
の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル（添付図面の第
１４図中に示す）： λｍａｘ （ｎｍ） ４）　　０　、　１Ｎ（７）ＨＣｌ　　　　　２８２ｂ
）　リン酸塩緩衝液ｐＨ７，２８１ （肩） ｃ）　　０　、　Ｉ　Ｎ（７）Ｎ　ａＯＨまた　３００
はＫＯＨ ｄ）　　リン酸塩緩衝液ｐＨ９，２８３（肩） ｅ）　メタノール　　　　　　　２８２Ｂ）　次の吸収
最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ”−’）（添付図
面の第１５図中に示す）： ３７００−３０８０．３０８０−２７００（ｎｕ　ｊｏ
　１）；　１７２０−１６２５；　１６２５−１５６０
．１５０５；　１４６０（ｎｕ　ｊ　ｏ　ｌ）　；　１
３７５　（ｎｕ　ｊ　ｏ　１）、１２９５．１２３０；
１２１０．１１５０；　１１００−１０４０．１０３０
；１０１５　；　９７０　；　８９０　、８４０　；　
８１０　；７２０　（ｎｕ　ｊｏ　１） ｃ）　　ＤＭＳＯｄｓ　　（ヘキサデユーテロジメチル
スルホキシド）中で記録した２７０ＭＨ２において次の
信号群（ｐｐｍ）を示すＩ　Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内
部標＊ＴＭＳ（０，００ｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）（添
付図面の第１６図中に示す）： ６０．８５（ｄ、イソプロピルのＣＨ３）；１．１５（
約１３Ｈ）；　１．４４　（約２Ｈ）、２．０２　（２
Ｈ）；２．３２−２゜３５　（３Ｈ）；　４−６．１　
（約１６Ｈ）；６．１−８（約２３Ｈ）、８．５２．９
゜３０．９．６８（広い帯；移動性プロトン） ２．４−４：Ｈ２０のピークカラノ干渉Ｄ）　次の条件
下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、ティコプラニンＡ２
成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１．２２および１
．２７の保持時間（Ｒｔ）： カラム：　ウルトラスフェア−（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒ
ｅ）ＯＤＳ　（５７ｚ ｍ）アルテクス（Ａ　ｌ　ｔ　ｅ　ｘ）［ベック−７７
（Ｂ　ｅ　ｃ　ｋｍａ ｎ）］　４４．６ｍｍ（内径）×２ ５０ｍｍ ｐ備カラム：　ブラウンリー・ラプス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　ａ　　ｂ ｓ）　ＲＰ　１８　（５７ｉｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　１０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４＃Ｈ２０９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ３０％ ｐＨ６，０に調節 溶離：　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線
の勾配、４０分 流速：　　１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２５４ｎｍ 内部標憎：　ティコプラニンＡ２成分２［グルツボ中レ
ペチット社 （Ｇｒｕｐｐｏ　　　Ｌｅｐｅｔ ｉｔ　　Ｓ、ｐ、Ａ、コ Ｅ）　試料を不活性雰囲気（ΔＷ　９．６％）のもとで
約１４０℃において前もって乾燥した後、元素分析は次
の近似百分率組成（平均）を示す： 炭素５４．０９％−水素５．１３％；窒素６．３４％；
塩素（合計）４．１２％；塩素（イオン性）０．３９％ 空気中で９００℃における無機残留物：５％ Ｆ）　過剰のＨＣｌの添加後にＫＯＨで滴定すると、２
−メトキシエタノール（ＭＣ５）：水、４：１、中の酸
−塩基の滴定のプロフィルは１次のｐｋ　　　　を有す
る４つのＭＣＳ イオン化機能を示す：４．５．５．６．７．２、９．２ Ｇ）　次のクロマトグラフィー系における０、２１のＲ
ｆおよび０．５３のティコプラニンＡ２成分２に関する
Ｒｆ値： ５％（Ｗ／Ｖ）の水性 Ｎａ２ＳＯ４７０ アセトニトリル　　　　　　　　３０ シラン化シリカゲル６０Ｆ２Ｓ４メルク（Ｍｅｒｃｋ）
板（層の厚さ０．２５ｍｍ）を使用する 可視化ニ ー　ＵＶ光 −パウリ試薬（Ｐａｕｌｙ　　Ｒｅａｇｅｎｔ）、すな
わち、ジアゾ化スルファ ニル酸［ジャーナルｅオブ・クロマト グラフ４−　（Ｊ　、　　Ｃｈｒｏｍａｔ　。

ｇ、）旦、１７１　（１９６５）、 Ｚ、　　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　　Ｃｈｅｍ。

１旦２，９９．（１９５３）］　を使 用する黄色 −Ｂ、　　５ｕｂｔｆｌｉｓ　　ＡＴＣＣ６６３３を使
用する最少ディビス（Ｄ ａｖｉｓ）培地上のバイオオートラジ オグラフィー Ｈ）　　　１７３１にＭ＋Ｈ”ピークラ示ｔ　Ｆ　Ａ　
Ｂ　−ＭＳスペクトルからデジューム（ｄｅｓｕｍ　ｅ
　）した約１７３０の分子量。

抗生物　Ａ４０９２６因子Ｂｏの物理化学的特性 Ａ）　次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル（添付
図面の第１４図中に示す）： λｍａＸ （ｎｍ） ４）　　０．１ＮのＨＣｌ　　　　　２８２ｂ）　　リ
ン酸塩緩衝液ｐＨ７，２８１（ｋｌ） ｃ）　　０．１ＮのＮａＯＨまた　３００はＫＯＨ ｄ）　リン酸ｋＩ５緩衝液ｐＨ９，２８３（肩） ｅ）　メタノール　　　　　　　２８２Ｂ）　次の吸収
最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ−’）（添付図面
の第１５図中に示す）： ３７００−３０８０．３０８０−２７００（ｎｕｊ　ｏ
　１）；　１７２０−１６２５；　１６２５−１５６０
．１５０５；　１４６０（ｎｕ　ｊ　ｏ　１）　；　１
３７５　（ｎｕ　ｊ　ｏ　ｌ）；　１２９５；　１２３
０；　１２１０；　１１５ｏ；　１１００−１０４０；
　１０３０；　１０１５；９７０；８９０；８４０；８
１０；７２０　　（ｎｕ　ｊ　ｏ　１） Ｃ）　　ＤＭＳＯｄｓ　　（ヘキサデユーテロジメチル
スルホキシド）中で記録した２７０ＭＨ２において次の
信号群（ｐｐｍ）を示すＩ　Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内
部標準ＴＭＳ（０，００ｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）（添
付図面の第１６図中に示す）： ６０．８５（ｄ、イソプロピルのＣＨ３）；１．１５（
約１３Ｈ）、１．４４（約２Ｈ）；２．０２　（２Ｈ）
；２．３２−２゜３５　（３Ｈ）；４−６．１　（約１
６Ｈ）；６．１−８（約２３Ｈ）、８．５２．９゜３０
．９．６８（広い帯：移動性プロトン） ２．４−４：Ｈ２Ｏのピークからの干渉Ｄ）　次の条件
下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、ティコプラニンＡ２
成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１．２２および１
．２７の保持時間（Ｒｔ）： カラム：　ウルトラスフェア−（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒ
ｅ）ＯＤＳ　（５ｐ ｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ） ［ベツクマｙ（Ｂｅｃｋｍａ ｎ）１４．６ｍｍ（内径）×２ ０ｍｍ 予備カラム：　ブラウンリー・ラプス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　ａ　　ｂ ｓ）　ＲＰ　１８　（５８Ｌｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　１０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２、５
ｇ／　ｌ）　Ｎａ Ｈ２ＰＯ４＠Ｈ２０３０％ ｐ）１６．０に調節 溶離：　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線
の勾配、４０分 流速：　　１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２５４ｎｍ 内部標準：　ティコプラニンＡ２成分２［グルーしボ拳
レペチット社 （Ｇｒｕｐｐｏ　　Ｌｅｐｅｔ ｉｔ　　Ｓ、ｐ、Ａ、］ Ｅ）　試料を不活性雰囲気（ΔＷ　９．６％）のもとで
約１４０℃において前もって乾燥した後、元素分析は次
の近似百分率組成（平均）を示す： 炭素５４．０９％−水素５．１３％；窒素６．３４％；
塩素（合計）４．１２％；塩素（イオン性）０．３９％ 空気中で９００℃における無機残留物＝５％ Ｆ）　過剰のＨＣｌの添加後にＫＯＨで滴定すると、２
−メトキシエタノール（ＭＣ５）：水、４：ｌ、中の酸
−１１１１’：の滴定のプロフィルは、次のＰｋ　　　
　を有する４つのＭＣＳ イオン化機能を示す：４．５．５６６．７．２．９．２ Ｇ）　次のクロマトグラフィー系における０、２１のＲ
ｆおよび０．５３のティコプラニンＡ２成分２に関する
Ｒｆ値： ５％（Ｗ／Ｖ）の水性 Ｎａ２ＳＯ４７０ アセトニトリル　　　　　　　　３０ シラン化シリカゲル６０Ｆ２５４メルク（Ｍｅｒｃｋ）
板（層の厚さ０．２５ｍｍ）を使用する 可視化ニ ー　　ＵＶ光 −パウリ試１（Ｐａｕｌｙ　　Ｒｅａｇｅｎｔ）、すな
わち、ジアゾ化スルファ ニル酸［ジャーナル・オブ・クロマト グラフィー　（Ｊ　、　　Ｃｈｒｏｍａｔ　。

ｇ、）旦、１７１　　（１９６５）、 Ｚ、　　Ｐｈｙｓｆｏｌ、　　Ｃｈｅｍ。

１且ヱ、９９．（１９５３）］　を使 用する黄色 −Ｂ、　　５ｕｂｔｉｌｉｓ　　ＡＴＣＣ６６３３を使
用する最少ディビス（Ｄ ａｖｆｓ）培地上のバイオオートラジ オグラフィー Ｈ）　　　１７３１４．：、Ｍ＋Ｈｅビークを示ｔＦＡ
Ｂ−ＭＳスペクトルからデジューム（ｄｅｓｕｍ　ｅ　
）した約１７３０の分子量。

抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＡの物理化学的特性 Ａ）　次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル（添付
図面の第１７図中に示す）： λｍａｘ （ｎｍ） ４）　　０　、　１Ｎ（７）ＨＣ１２８２ｂ）　　０．
１Ｎ（７）ＫＯＨ３００ ｃ）　　ｌＪ７酸ｎ１緩衝液ｐＨ７．４２８２３１０（
肩） ｄ）　リン酸塩緩衝液ｐ、Ｈ９，２８３（肩） Ｂ）　次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ　
　’）　　（添付図面の第１８図中に示す）二 ３７００−３１００．３０００−２８００（ｎｕｊｏｌ
）；１７６０−１７１０；１６５５．１６２０−１５５
０．１５０５゜１４６０　　（ｎｕ　ｊ　ｏ　ｌ）；　
　１３７５　　（ｎｕｊｏ　ｌ）；　　１２６０；　　
１２５０−９５０；８４５　；　８０５　；　７２０　
　（ｎｕ　ｊ　ｏ　１）Ｃ）　　ＤＭＳＯｄｓ　　（ヘ
キサデユーテロジメチルスルホキシド）中で記録した２
７０ＭＨ２において次の信号群（ｐｐｍ）を示すＩ　Ｈ
−ＮＭＲスペクトル、内部標準ＴＭＳ（０，ＯＯｐｐｍ
）、（δ＝ｐｐｍ）（添付図面の第１９図中に示す）： ０．８６　４（ＣＨ３）；１．１５−１゜２２　　ｍ（
ＣＨ２）ｎ；１．４１　　ｍ（ＣＨ２）；２．０１　　
ｓ　（ＣＨ３）；２．０１　　ｍ　（ＣＨ３）　　；　
２　、０１　　ｍ　　（ＣＨ２）；２．２８　　ｍ（Ｃ
Ｈ２）；２．２８ｓ　（Ｎ−ＣＨ３）；　４．２６−５
．９６ｂｒ（ペプチドおよび芳香族のＣ）（）。

６．３３−７．７３　　ｂｒ（芳香族のＣＨおよびペプ
チドのＮＨ） ｂｒ＝広い ｄ　＝三重線 ｄｄ＝二重線の二重線 ｍ　＝多重線 Ｓ　＝一重線 ｔ　＝三重線 Ｄ）　次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、ティ
コプラニンＡ２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１
．１５の保持時間（ＲＥ）： カラム：　ウルトラスフェア−（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒ
ｅ）００Ｓ（５ｇ ｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ） ［ベックマン（Ｂｅｃｋｍａ ｎ）１４．６ｍｍ　（内径）×２ ０ｍｍ 予備カラム：　ブラウンリー・ラプス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　ａ　　ｂ ｓ）ＲＰ１８　（５，ｃｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　１０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２Ｐ０４＋ｌＨ２Ｏ９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ｐｏａ　＃Ｈ２０３０％ ｐＨｓ　、０にｙＪＷｌ 溶離：　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線
の勾配、４０分 流速：　　１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２５４ｎｍ 内部標準：　ティコプラニンＡ２成分２［グルツボ会し
ペチット社 （Ｇｒｕｐｐｏ　　Ｌｅｐｅｔ ｉｔ　　Ｓ、ｐ、Ａ、］ Ｅ）　次のクロマトグラフィー系における０、６２のテ
ィコプラニンＡ２成分２に関するＲｆイ１ｒ１　： ５％（Ｗ／Ｖ）の水性 Ｎａ２ＳＯ４７０ アセトニトリル　　　　　　　　３０ シラン化シリカゲル６０Ｆ２Ｓ４メルク（Ｍｅｒｃｋ）
板（層の厚さ０．２５ｍｍ）を使用する 可視化ニ ー　　ＵＶ光 −パウリ試薬（Ｐａｕｌｙ　　Ｒｅａｇｅｎｔ）、すな
わち、ジアゾ化スルファ ニル酸［ジャーナル・オブ・クロマト グラフ４−（Ｊ、　　Ｃｈｒｏｍａｔ。

ｇ、）且、１７１　（１９６５）、 Ｚ、　　Ｐｈｙｓｊｏｌ、　　Ｃｈｅｍ。

且旦ヱ、９９．（１９５３）］　を使 用する黄色 −Ｂ、　　５ｕｂｔｉｌｉｓ　　ＡＴＣＣ６６３３を使
用する最少ディビス（Ｄ ａｖｉｓ）培地上のバイオオートラジ オグラフィー Ｆ）　　　１７６１に最も強いピークを有するピークの
集団を示すＦＡＢ−ＭＳスペクトルからデジュームした
約１７５８の分子１．ＦＡＢ−ＭＳ分析の操作条件は次
の通りであった： 計器：　　ＦＡＢガンφイオン・チク（ｇｕｎ　　Ｉｏ
ｎ　　Ｔｅｃｈ）を装備し たＶＧ　　Ｍｏｄ　　ＺＡＢ　　ＳＥ 条件： ポジティブ（ＰｏＳｉｔｅｖｅ） ＦＡＢ、Ｘｅ 加速電圧、８ＫＶ マトリックス：チオグリセロール −グリセロール　１／１（ｖ／ Ｖ）。

抗生物７ｊＡ４０９２６因子ＦＢの物理化学的特性 Ａ）　次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル（添付
図面の第２０図中に示す）： λｍａｘ （ｎｍ） ４）　　０　、　１Ｎ（７）ＨＣ１２８２ｂ）　　０．
１Ｎ（７）ＫＯＨ３００ Ｃ）　リン酸塩緩衝液ｐＨ７．４２８ ２３１０（肩） ｄ）　リン酸塩緩衝液ｐＨ９．４２８ ２３１０（肩） Ｂ）　次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（Ｃｍ　
　’）　　（添付図面の第２１図中に示す）： ３７００−３１００．３０００−２８００（ｎｕｊｏｌ
）；１７６０−１７１０；１６５５．１６２０−１５５
０．１６０５゜１４８０−１４２０　（ｎｕｊｏｌ）；
１３７５　（ｎｕｊ　ｏ　ｌ）；　１３２０−１２７０
．１２３０−１１９０，１１５０；１１２０−９２０　
；　８４５　；　８１０　；　７２０　（ｎｕｊｏｌ） Ｃ，ＤＭＳＯｄ６　（へキサデューテロジメチ１）　ル
スルホキシド）中で記録した２７０ＭＨ２において次の
信号群（ｐｐｍ）を示すＩ　Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内
部標準ＴＭＳ（０，００ｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）多重
度；　（帰属）（添付図面の第２２図中に示す）： ０．８４　　ｄ（イソプロピルのＣＨ３）；１．１７　
　ｍ（ＣＨ２）ｎ；１．４３　　ｍ（ＣＨ２）　　；　
　１　、９９　　　ｓ　　（ＣＨ３）　　；２．０１　
　　ｍ（ＣＨ３）；２．０１　　　ｍ（ＣＨ２）；２．
３１　　５（Ｎ−ＣＨ３）；４．０６−６．０２　　ｂ
ｒ　（ペプチドおよび芳香族のＣＨ）；６．４５−７．
７４ｂｒ（芳香族のＣＨおよびペプチドのＮＨ）　　；
ａ、１９−９．９９　　ｂｒ　（ペブイチドのＮＨおよ
びペプチドの０Ｈ） Ｃ、ＤＭＳＯｄ６　＋ｃＦ３　Ｃ００Ｄ中テ記録２）　
した２７０ＭＨｚにおいて次の信号群（ｐｐｍ）を示す
　’　Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内部標準ＴＭＳ　（０，
ＯＯｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）多重度；　（帰属）（添
付図面の第２３図中に示す）： ０．８４　　ｄ（インプロピルのＣＨ３）。

１．１３　　ｍ（ＣＨ２）ｎ；１．４０　　ｍ（ＣＨ２
）；　１．９８　　ｓ　　（ＣＨ３）；２．００　　ｍ
（ＣＨ２）；２．９２　　　ｄｄ（Ｃ−Ｈ）；　３．２
９−３．７１　（糖のＣ−Ｈ）；４．０７−６．０９、
Ｓおよびｍ（ペプチドおよび芳香族のＣＨ）；６．４５
−７．８３ｓおよびｍ（芳香族のＣＨおよびペプチドの
ＮＨ）、８．１７−１０．３８（ベプイチドのＮＨおよ
びペプチドの０Ｈ） Ｄ）　次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、ティ
コプラニンＡ２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１
．２７および１．３２の保持時間（Ｒｔ）： カラム：　ウルトラスフェア−（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒ
ｅ）ＯＤＳ　（５ｐ ｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ） ［ベックマｙ（Ｂｅｃｋｍａ ｎ）１４．６ｍｍ（内径）Ｘ２ ０ｍｍ 予備カラム：　ブラウンリーψラプス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　ａ　　ｂ ｓ）　ＲＰ　１８　（５ｇｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　１０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４＠Ｈ２０３０％ ｐＨ６，０に調節 溶離：　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線
の勾配、４０分 流速：　　１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２５４ｎｍ 内部標準：　ティコプラニンＡ２成分２［グルツボ・レ
ベチット社 （Ｇｒｕｐｐｏ　　Ｌｅｐｅｔ ｉｔ　　Ｓ、ｐ、Ａ、］ Ｅ）　次のクロマトグラフィー系における０、５３のテ
ィコプラニンＡ２成分２に関するＲｆ値： ５％（Ｗ／Ｖ）の水性 Ｎａ２ＳＯ４７０ アセトニトリル　　　　　　　　３０ シラン化シリカゲル６０Ｆ２ｓ４メルク（Ｍｅｒｃｋ）
板（層の厚さ０．２５ｍｍ）を使用する 可視化ニ ー　　ＵＶ光 −パウリ試薬（Ｐａｕｌｙ　　Ｒｅａｇｅｎｔ）、すな
わち、ジアゾ化スルファ ニル酸［ジャーナルｅオブ・りロマト グラフ４−　（Ｊ　、　　Ｃｈｒｏｍａｔ　。

ｇ、）２旦、１７１　（１９６５）、 Ｚ、　　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　　Ｃｈｅｍ。

２９２．９９　、（１９５３）］　を使川する黄色 −Ｂ、　　５ｕｂｔｉｌｉｓ　　ＡＴＣＣ６６３３を使
用する最少ディビス（Ｄ ａｖｉｓ）培地上のバイオオートラジ オグラフィー Ｆ）　　　１７７６に最も強いピークを有するピークの
集団Ｗ示すＦＡＢ−ＭＳスペクトルからデジュームした
約１７７２の分子ｆｉ、ＦＡＢ−ＭＳ分析の操作条件は
次の通りであった： 計器：　　ＦＡＢガン・イオン拳チク（ｇｕｎ　　Ｉｏ
ｎ　　Ｔｅｃｈ）を装備し たＶＧ　　Ｍｏｄ　　ＺＡＢ　　ＳＥ 条件：　ポジティブ（Ｐａ　ｓ　ｉ　ｔ　ｅｖｅ）ＦＡ
Ｂ、Ｘｅ 加速電圧、８ＫＶ マトリックス：チオグリセロール 一グリセロール　ｌ／１　　（ｖ／ ｖ）。

Ａ）　次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル（添付
図面の第２４図中に示す）： λｍａｘ （ｎｍ） ４）　　０．１Ｎ（７）ＨＣｌ　　　　　２８０ｂ）　
リン酸ｋＭｆＪｉ衝液ｐＨ７，２８０（肩） ｃ）　　０．１ＮのＫＯＨ２９８ ｄ）　リン酸塩緩衝液ｐＨ９．４２８ ２３１０（肩） Ｂ）　次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（Ｃｍ−
１）（添付図面の第２５図中に示す）： ３７００−３１００．３０００−２８００（ｎｕｊｏｌ
）；　　１６５５；　　１６２０−１５４０；　　１５
０５；　　１４６０　　（ｎｕｊ。

１）；　　１３７５　　（ｎｕｊ　ｏ　ｌ）；　　１３
５０−１２５０．１２１０．１１５０．１０２０．９７
０，８５０．８１０ Ｃ）　　ＤＭＳＯｄ６　　（へキサデユーテロジメチル
スルホキシド）＋ＣＦ３　Ｃ０ＯＨ中で記録した２７０
ＭＨｚにおいて次の信号群（ｐｐｍ）を示す　Ｉ　Ｈ−
ＮＭＲスペクトル、内部標準ＴＭＳ　（０，ＯＯｐｐｍ
）、（δ＝ｐｐｍ）（添付図面の第２６図中に示す）： ２．５１　（ＤＭＳＯｄ５）；２．５０　５（ＮＣＨ３
）；２．８８　　ｍ　　（Ｚ２）；３．３０　　ｍ（Ｚ
’２）；４．０８　　ｍ（Ｘ６）；４．４４　　ｍ（Ｘ
５）；４．４９　　ｄ　（Ｘ７）；４．８３　　ｍ（Ｘ
２）；５．０２　　ｓ　　（４Ｆ）；５．０８　　ｓ　
　（Ｚ６）　；５．３１　　ｓ　（マンノースのアノマ
ーノブロト７）；　５．５３　　ｄ　（Ｘ４）；５．７
８　　ｓ　（４Ｂ）；６．０８　　ｄ　（Ｘ３）；７．
７０　　ｓ　（６Ｂ）；６４．４４−８．５２（芳香族
およびペプチドのＮＨ） ｄ　＝二重線 ｍ　＝多重線 Ｓ　＝一重線 Ｄ）　次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、抗生
物質Ｌ１７０５４　（Ｔａ２−１）（Ｒｆ＝８．７８分
）に関して１．１８の保持時間（Ｒｔ）： カラム：　ウルトラスフェア−（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒ
ｅ）ＯＤＳ　（５ｐ ｍ）アルテクス（Ａ　ｌ　ｔ　ｅ　ｘ）［ベックマン（
Ｂｅｃｋｍａ ｎ）］４．６ｍｍ（内径）×２ ０ｍｍ ｔ備カラム：　ブラウンリー拳ラプス（Ｂｒｏｗｎｌｅ
ｅ　　Ｌ　　ａ　　ｂ ｓ）ＲＰ１８　（５ｇｍ） 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　１０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ９０％ ｐＨ６，０に調節 溶離剤Ａ　　ＣＨ３ＣＮ　　　　　　　７０％（２，５
ｇ／１）Ｎａ Ｈ２ＰＯ４＆Ｈ２０３０％ ｐＨ６，０に調節 溶＃：　溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線
の勾配、４０分 流速＋　　１．６ｍｌ／分 ＵＶ検出器　２２５−４ｎ 内部標準：　抗生物１１！ＩＬ１７０５４（Ｔａ２−１
）［グルツボ・レペ チット社（Ｇ　ｒ　ｕ　ｐ　ｐ　。

Ｌｅｐｅｔｉｔ　　Ｓ、ｐ。

Ａ、］ Ｅ）　次のクロマトグラフィー系における０、６２のテ
ィコプラニンＡ２成分２に関するＲｔ値： ５ｇ／１（７）ＮａＨ２ＰＯａ ・Ｈ２０ｅＨ２０を含有す　　　７０ る１モルのＮａＣ１ アセトニトリル　　　　　　　　３０ ｐＨ６，０に調節、シラン化シリカゲル６０Ｆ２Ｓ４メ
ルク（Ｍｅｒｃｋ）板（層の厚さ０　、２５　ｍｍ）を
使用する 可視化ニ ー　　ＵＶ光 −パウリ試薬（Ｐａｕｌｙ　　Ｒｅａｇｅｎｔ）、すな
わち、ジアゾ化スルファ ニル酸［ジャーナル・オブ・クロマト グラフ４−（Ｊ、　　Ｃｈｒｏｍａｔ。

ｇ、）旦、１７１　　（１９６５）、 Ｚ、　　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　　Ｃｈｅｍ。

Ａ旦ヱ、９９．（１９５３）］　を使 用する黄色 −Ｂ、　　５ｕｂｔｉｌｉｓ　　ＡＴＣＣ６６３３を使
用する最少ディビス（Ｄ ａｖｉｓ）１９地上のバイオオートラジオグラフィー Ｆ）　約１３７４におけるＭ＋ＨΦを使用する急速原子
衝突（ＦＡ）Ｂ質量スペクトル。

次の実施例により本発明をさらに説明するが、こらの実
施例は本発明の範囲を限定するもと解釈すべきではない
。

実施例１ 抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン複合体ＡＢおよび抗生物質Ａ４０９２６アグリ
コンの製造 ４）抗生物質Ａ４０９２６複合体ＡＢ（実質的に製造手
順３に従い製造した）（７５０ｍｇ）を、１５０ｍ１の
混合物ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）７３７％（ｗ
／ｗ）（７）塩酸（ＨＣｌ）９　：　１　（ｖ／ｖ）の
中に溶解し、そしてこの反応混合物を約６５℃に加熱す
る０反応過程をＨＰＬＣにより監視しそして、出発物質
が完全に反応したとき（約５時間）、反応混合物を冷水
（６００ｍｌ）で急冷し、そして得られる混合物のＰＨ
を約７．５に調節する。この混合物は表題化合物の混合
物を含有し、これを次の手順に従う親和クロマトグラフ
ィーによりその２つの主要成分に分割する： ｂ）製造８に記載するようにして帛備したセファロース
−Ｄ−７ラニルーＤ−７ランニンのクロマトグラフィー
のカラム（１０ミリモルのトリス・ＨＣｌ、ｐＨ７，５
、緩衝液中で膨潤した樹脂の１００ｍ１；床高さｌＯｃ
ｍ）に、上で得もえた水性混合物（７５０ｍ　ｌ）を適
用する。２モルのＮａＣ１を含有する０、０５モルのＮ
Ｈ４０Ｈ＠ＨＣ１，ｐＨ７，５（２００ｍｌ）（緩衝液
Ｂ）をこの方ラムに通過させる０次いで、２モルのＮａ
ｃｌを含有する０、０５モルのＮＨ４ＯＨ−ＭＣ１，ｐ
Ｈ９，５（１５００ｍｌ）（１衝液Ｃ）で溶離すること
により、カラムからＡ４０９２６アグリコンを選択的に
除去する０次いで、Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグ
リコン複合体ＡＢを０．１モルの水性アンモニア（緩衝
液Ｄ）で溶離する０次いで、溶離された分画をそれらの
抗生物質含量に従ってプールし、ＰＨ約７．５に調節し
、そして各抗生物質含有溶液をセファロース−Ｄ−７ラ
ニルーＤ−アランニンのカラム（１０ミリモルのトリス
−ＨＣｌ、ｐＨ７，５、緩衝液中で膨潤した樹脂の１０
０ｍ１；床高さ１０ｃｍ）のクロマトグラフィーにかけ
る。無機塩類が洗浄除去されてしまうまで、この方ラム
に蒸留水を通過させる０次いで、抗生物質を０．１Ｎの
水性アンモニアで溶離する。これらの溶離された分画を
、それらの抗生物質含量に従ってプールし、減圧下にｎ
−プロパツールとの共沸蒸留により小さい体積に濃縮し
、そして凍結乾燥すると、それぞれ２０１ｍｇのＮ−ア
シルアミノグルクロニルアグリコン複合体ＡＢおよび２
３６ｍｇのアグリコンが得られる。

前述と同一の実験を反復するが、混合物ＤＭＳＯ７３７
％のＨＣｌ、９５：５、を約４０℃において５日間使用
すると、Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン複合
体ＡＢの収率は約１５％に増加し、一方アグリコンの収
率はそれに応じて減少する。

これらの実験を抗生物質Ａ４０９２６複合体、抗生物質
Ａ４０９２６因子Ａ、抗生物質Ａ４０９２６囚／−Ｂ、
抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ０、抗生物質Ａ４０９２６
因子ＰＡおよび抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＢから出発
して反復すると、実質的に同一の結果が得られる（すわ
わち、収率は±５％の範囲内で変化する）。

とくに、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａまたは抗生物質Ａ
４０９２６因子ＦＡから出発すると、得られる生成物は
抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン因子Ａであり、一方抗生物質Ａ４０９２６因子
ＰＢまたは抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ０から出発する
と、得られる生成物は抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシル
アミノグルクロニルアグリコン因子Ｂｏである。抗生物
質Ａ４０９２６因子Ｂから出発すると、抗生物質Ａ４０
９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂ
ｏおよび抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルク
ロニルアグリコン因子Ｂ１の混合物が得られ、これはＨ
ＰＬＣにより分割することができる。

実施例２ 抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコン因子Ａ、ＢｏおよびＢ、の分割 ２０ｍｇの抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
クロニルアグリコン複合体ＡＢを、１０％のアセトニト
リルを含有する１８ミリモルのリン酸ナトリウム緩衝液
ｐＨ６，０の１ｍｌの中に溶解する。この溶液を粒子大
きさが７マイクロメードルのＨＰＬＣ調製用カラム（内
径７　ｍｍＸｍｍＸ２５Ｏリクロソーブ（Ｌｉｃｈｒｏ
ｓｏｒｂ）ＲＰ１８シラン化シリカシリカゲルク・カン
パニー）の中に注入した。

この方ラムを、１０％〜５５％の相Ａの直線の勾配で、
５ｍｌ／分の相ＡおよびＢの流速で５５分間溶離する。

相Ａ：　１８ミリモルのリン酸ナトリウム／ＣＨ３ＣＨ
３０／７０、ＮａＯＨでｐ Ｈ６，０に調節した。

相Ｂ：　　１８ミリモルのリン酸ナトリウム／ＣＨ３Ｃ
Ｈ９０／　１０　、　Ｎ　ａ　ＯＨテｐＨ６，０に調節
した。

カラムの溶離液の２５４ｎｍにおけるＵＶ吸収を記録し
、均質の成分を有する溶離分画を集め、溶離液を３つの
群に分割すると、それぞれ抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−ア
シルアミノグルクロニルアグリコン因子Ａ、Ｂ、および
Ｂ、が得られる。

１１回の引続くクロマトグラフィーの実施からの精製さ
れた抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニ
ルアグリコン因子類を含有する溶離液をプールし、そし
てそれらを５ｍｌのＷ潤した一１！７７０−スーＤ−Ａ
　ｌ　ａ−Ｄ−Ａ　ｌ　ａ　（製造８を参照）のカラム
に装入することによって通常のように脱塩する。１０ｍ
１の１ミリモルのＨＣｌで、次いで５Ｘ　１０ｍ　ｌの
蒸留水で塩類を除去した後、抗生物質を５Ｘ１０ｍｌの
１％Ｗ／′Ｖの水性アンモニアで溶離する０次いで、ア
ンモニアの溶離液を別々に集め、そして凍結乾燥すると
、１５ｍｇの抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグ
ルクロニルアグリコン因子Ａ、５１ｍｇの抗生物ＪＡ４
０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子
ＢＯおよび抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
クロニルアグリコン因子Ｂ、が得られ、それらの物理化
学的決定および化学式は上に報告した通りである。

ＸＡ倒旦 抗生物質Ａ４０９２６アグリコンの選択的製造４）抗生
物質Ａ４０９２６複合体ＡＢから抗生物質Ａ４０９２６
複合体ＡＢ（製造３の手順に実質的に従い製造した）を
、１５０　ｍ　ｌの混合物ジメチルスルホキシド（ＤＭ
ＳＯ）７３７％（ｗ／ｗ）（７）塩酸（ＨＣｌ）、９　
；　１　（ｖ／ｖ）の中に溶解し、そしてこの反応混合
物を約８０℃に加熱する。反応過程をＨＰＬＣにより監
視しそして、出発物質が完全に反応したとき（約３時間
）、反応混合物を冷水（６００ｍ　ｌ）で急冷し、そし
て得られる混合物のＰＨを約７．５に調節する。この混
合物は抗生物質Ａ４０９２６アグリコンを含有し、これ
を製造８に記載するようにして準備したセファロース−
Ｄ−アラニル−Ｄ−アランニンのクロマトグラフィーの
カラム（１０ミリモルのトリス・ＨＣｌ、ｐＨ７，５、
緩衝液中でｌｌ５１潤した樹脂の１００ｍ１；床高さｌ
Ｏｃｍ）により分離する。２モルのＮａＣ１を含有する
０、０５モルのＮＨ４０ＨＩ１ＨＣ１，ｐ）１７　。

５　（２’００ｍ１）（緩衝液Ｂ）をこの方ラムに通過
させる。次いで、２モルのＮａＣ１を含有する０、０５
モルのＮＨ４ＮＨ４０Ｈ−、ｐＨ９，５（１５００ｍｌ
）（緩衝液Ｃ）で溶離することにより、カラムからＡ４
０９２６アグリコンを選択的に除去する。次いで、溶離
された分画をそれらの抗生物質含量に従ってプールし、
ｐＨ約７．５に調節し、そしてセファ０−スーＤ−７ラ
ニルーＤ−アランニンのカラム（１０ミリモルのトリス
・ＨＣｌ、ｐＨ７，５、緩衝液中で膨潤した樹脂の１０
０ｍ１；床高さ１０ｃｍ）のクロマトグラフィーにかけ
る。無機塩類が洗浄除去されてしまうまで、このカラム
に蒸留水を通過させる。次いで、Ａ４０９２６アグリコ
ンを０．１Ｎの水性アンモニアで溶離する。これらの溶
離された分画を減圧下にｎ−プロパツールとの共沸蒸留
により小さい体積に濃縮すると、５３０ｍｇのＡ４０９
２６アグリコンが得られる。

種ＡＴＣＣ３９７２７の発酵 抗生物質Ａ４０９２６生産性菌株［アクチノマｉ５　（
Ａｃｔ　ｉ　ｎｏｍａｄｕｒ４）種ＡＴＣＣ３９７２７
］の培養物をオートミル寒天傾斜培地上で２８℃におい
て２〜３週間生長させ、そして０５％の肉エキス、０．
５％の自動溶解酵母、０゜５％のペプトン、０．３％の
カゼイン加水分解物、２％のグ、、１ｚコース、　　０
　、１５％のＮａＣｌから構成された１００ｍ１の培地
（滅菌前ｐＨ７。

５）を含有する５００ｍ１容のエルレンマイヤーフラス
コに接種するために使用する。

このフラスコを２８℃において回転振盪機で２００ｒｐ
ｍで約７時間インキュベーションし、次いでこの培養物
を４文の上の培地を含有する発酵器に移す、この培養物
を、２８℃において約７２時間約２Ｊ１／分の空気を流
しかつ９０００ｒｐｍで攪拌しながら生長させる０次い
で、それを使用して同一培地の２００２の発酵器を接種
する。この発酵器を約２８℃において１ｏＯＪｌ／分の
空気で通気しかつ２５０ｒｐｍで攪拌する。抗生物質を
紙ディスクの寒天拡散法によりバシルスーＸ２ｆ旦ＸＣ
Ｂ、　　５ｕｂｔｉｌｉｓ）を最少培地上に試験有機体
として使用して監視する。最高活性は７２〜９６時間後
に得られる。

製造ヱ二 抗生物質Ａ４０９２６の回収 Ａ）発酵ブイヨンを４℃に冷却し、ｐＨ９，５にしかつ
攪拌する。約１時間後、濾液をＰＨ約３．５に水性鉱酸
で調節する。この混合物を３０分間４℃で攪拌し、次い
で濾過助剤（Ｈｙｆｌ。

−ＦｌｏＭＡ＠）を使用して濾過する。透明濾液を排出
し、濾過ケークを脱イオン水中に懸濁させ、ｐＨ役８．
５に調節し、次いで濾過する０回収されたケークを同一
手順にかける。プールした濾液は抗生物質Ａ４０９２６
を含有する。

Ｂ）膨潤したＤ−Ａ　ｌ　ａ−Ｄ−Ａ　ｌ　ａ　−ε−
７ミノカブロイルーセフアロース変性マトリツクス（２
Ｍ）を、製造１に従って得られた発酵ブイヨン（それを
濾過し、そして透明溶液を約８．５のｐＨにした後）、
あるいは上の製造２Ａに従って得られたプールした濾液
に添加する。室温において一夜攪拌した後、この樹脂を
濾過により回収し、そして５％（Ｗ／Ｙ）のＮａＣ１を
含有する約２Ｘ１０Ｊ１の０．４５ミリモルのＨＣｌ−
ＴＲｌ５緩衝液ｐＨ７，５（ＴＲＩＳ＝２−アミノー２
−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール）で洗
？’ｌｌ　Ｌ、次いで蒸留水（４Ｘ２０党）で洗浄する
。

抗生物質Ａ４０９２６を樹脂から１％ＣＷ／Ｖ）のアン
モニア水和物（２Ｘ２０Ｍ）で溶離する。溶離液を室温
において一夜放置し、次いで小さい体積（約２．！ｌ）
に′Ｃ縮する。水をｎ−ブタノールとの共沸蒸留により
排除する０次いで、石油エーテルを添加し、３．４ｇの
粗製抗生物質Ａ４０９２６複合体を沈殿させる。

置皿ユニ 抗生物質Ａ４０９２６複合体ＡＢの精製上の製造２の手
順に本質的に従って得られた粗製抗生物質Ａ４０９２６
複合体（７５０ｍｇＨＰＨＬＣ力価７０％）を４００ｍ
１（７）水中に溶解し、ｐＨ７，５に調節し、濾過する
０次いで、濾液をＤ−Ａ　ｌ　ａ−Ｄ−Ａ　ｌ　ａ−ε
−アミノカプロイル−セファロース（５０ｍｌの膨潤樹
脂；床の高さ＝５ｃｍ）の親和クロマトグラフィーにか
ける。この方ラムをｐＨ７，５にＨＣｌで調節した２　
％）Ｌｙ（１）　Ｎ　ａ　Ｃｌを含有する０、１６％（
Ｗ／Ｖ）のアンモニアと平衡化し、次の３種類の緩衝液
で順次に展開する： 緩衝液Ａ：　　ＨＣｌでｐＨ７，５に調節した２モルの
ＡａＣｌを含有する０、１６％ （Ｗ／Ｖ）のアンモニア（２，６力 ラム体積）； 緩衝液Ｂ：　　ＨＣｌでｐＨ９，５に調節した２モルの
ＡａＣｌを含有する０、１６％ （Ｗ／Ｖ）のアンモニア（１６力ラ ム体積）： 緩衝液Ｃ：　１％（Ｗ／Ｖ）の水性アンモニアｐＨ１１
，４（２，６力ラム体８１）； 緩衝液Ｃは単一の分画で抗生物質Ａ４０９２６複合体Ａ
Ｂを溶離する。この溶離された分画をｐＨ７，０に調節
し、そして１０ミリモルのトリス−ＭＣＩ　　ｐＨ７，
０で緩衝化した同一の親和カラムに再び適用する。この
方ラムを脱塩が完了するまで蒸留水で洗浄する。

次いで、抗生物質を２力ラム体積の０．３９％（Ｗ／Ｖ
）の水性アンモニアｐＨ１１，０で溶離する。

溶離された分画を小さい水性混合物に濃縮し、次いで凍
結乾燥する。純粋な抗生物ｆｉＡ４０９２６複合体ＡＢ
　（３７４ｍｇ）が得られる。

置皿Ａ二 抗生物質Ａ４０９２６因子ＡおよびＢの単離Ａ）製造２
に従って得られた抗生物質Ａ４０９２６複合体（３、３
ｇ）または製造３に従って得られた抗生物質Ａ４０９２
６複合体ＡＢ　（２、３ｇ）を０．！ｌの水中に懸濁さ
せ、攪拌し、次いで濾過する。透明な濾液をシラン化シ
リカゲルのカラム（２００ｇ、床高さ１８ｃｍ；シラン
化シリカゲル６０；メルク・インコーホレーテッド）［
これは溶液Ａ（０，２５％（Ｗ／Ｖ）のＮａＨ２ＰＯ４
＊Ｈ２０および２．５％（ｗ／ｖ）　（７）ＮａＣ１を
含有し、ＮａＯＨでｐＨ６，０に調節されている０、０
０１（ｗ／ｖ）モルの水性ナトリウムＥＤＴＡ）で予備
平衡化されている］に適用する。このカラムを溶液Ａ中
の０％〜４０％（Ｖ／Ｖ）のアセトニトリル直線勾配で
溶離し、合計の体積は約７見であり所要時間は約４８時
間である。約１５．５ｍｌの分画を集め、そしてとシル
ス参スブチリス（Ｂａｃｉ　ｌ　ｌｕｓ　　５ｕｂｔ　
ｉ　ｌ　ｉ　ｓ）についてのバイオアッセイによりアッ
セイし、そしてＨＰＬＣにより分析する。同様な抗生物
質含量を有する分画をプールしする０分画Ｎ０、３１０
〜３３０およびＮｏ　、３４８〜３６５は、それぞれＡ
４０９２６因子ＡおよびＡ４０９２６Ｂと明らかにされ
た抗生物質を含有した。

Ｂ）単一のＡ４０９２６因子ＡおよびＢを含有するプー
ルした分画を、減圧濃縮してアセトニトリルを除去し、
水（初期の溶液の約２倍の体積）で希釈し、そして前述
の型のシラン化シリカゲル（膨潤したマトリックスの体
積：５０ｍ１；床高さ１５ｃｍ）に適用する。この方ラ
ムを脱イオン水で脱塩が完γするまで洗浄し、ＩＷ後に
アセトニトリル／水６０　：　４０　（Ｖ／Ｖ）　で展
開する。

溶離された分画を減圧濃縮し、そして残留物を凍結乾燥
すると、溶離された分画の最初の群（上の分画３１０〜
３３０）から１３４ｍｇの抗生物質Ａ４０９２６Ａが得
られ、そして溶離された分画の第２＃（上の分画３４０
〜３６５）から２０６ｍｇの抗生物質Ａ４０９２６Ｂが
得られる。

離 製造２Ａの手順および製造２Ｂの手順の第１工程に本質
的に従うことにより、樹脂に結合した抗生物質を１％（
Ｗ／Ｖ）のアンモニア水和物（２Ｘ２０Ｍ）で溶離する
。溶離液をｐＨ７，８に硫酸で調節し、モしてｎ−ブタ
ノールとの共沸蒸留により小さい体積に減圧濃縮して水
性ｃｉ縮物を形成し、次いでこれを紙で濾過する０回収
された濾液は抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＡ、抗生物質
Ａ４０９２６因子ＦＢおよび少量の抗生物質Ａ４０９２
６因子ＡＢおよび抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂを含有す
る（ＨＰＬＣ）。

約５０　ｍ　ｇ　／　ｍ　１の純粋な抗生物質Ａ４０９
２６複合体（ＨＰＬＣ分析）を５４ｍの孔大きさのフィ
ルター［アクロディスク（Ａｃｒｏｄｉｓｃ＠）、ケル
マン参サイエンスーインニーボレーテッド（Ｇｅｌｍａ
ｎ　　ａｓｃｉｅｎｃｅ　　ＩｎＣ９）］で濾過し、次
いで２０ｇのオクタデシルシリル逆相シリカゲルを含有
するステンレスのカラム（直径＝２ｃｍ）［リチリソー
プ（Ｌｉｃｈｒｉｓｏｒｂ）ＲＰ１８、メルク・インコ
ーホレーテッド；粒子サイズ１０ｐｍｌに適用する。

次いで、シキカゲルをクロマトスバグ・ポヅルブレプ（
Ｃｈｒｏｍａｔｏｓｐａｃ　　Ｍｏｄｕｌｐｒｅｐ）装
置［ヨウベンーイポン（Ｙ　ｏ　ｂ　ｅ　ｎＹｖｏｎ）
、　フランス］のステンレス鋼のカラムの中に適度の圧
力（公称約１４バール）下に詰め、アセトニトリルと１
８ミリモルののリン酸塩緩衝液ｐＨ６，０と（７）２７
　：　７５　（ｖ／　ｖ）混合物で暦衡化する。このモ
衡化に使用したのと同一の溶媒混合物を使用して約１０
．５ｍｌ／分の流速で溶離を実施する。溶離液をバシル
ス・Ｘ７’±ＩＪＸ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　　５ｕｂｔｉ
ｌｉｓ）についてバイオアッセイおよび）ＩＰＬＣによ
り監視する。

同様な抗生物質を含有する分画をプールし、そして５回
のクロマトグラフィーの実施の均質分画をＣ縮して有機
溶媒を蒸発させる。

得られた溶液を水性１モルの塩化ナトリウムでもとの体
積の２倍に希釈し、そして水で平衡化したシラン化シリ
カゲルのカラム（５０ｇ；床の高さ５ｃｍ；シラン化シ
リカゲル６０；メルク争インコーポレーテッド）に適用
する。

このカラムを脱塩が完結するまで脱イオン水で洗浄し、
（水性ＡｇＮＯ３の添加後、溶離液中にＡｇＣ１の沈殿
が形成しない）、次いでアセトニトリル：水１　：　１
　（ｖ／ｖ）で溶離する。同様な抗生物質含量（ＨＰＬ
Ｃ分析）を有する溶は液をグールレ　ｎ−ブタノールと
の強風津蒸留により小さい体積に濃縮すると水相が得ら
れ、次いでこれを凍結乾燥する。収量： 抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＡ：　　５５ｍｇ抗生物質
Ａ４０９２６因子ＰＢ：　　５１ｍｇ抗生物質Ａ４０９
２６因子Ａ　　二　３８ｍｇ抗生物質Ａ４０９２６因子
Ｂ、）：　　３３ｍｇ覧遺互 抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂを単離する別の方法 製造２（最後の工程）に従いつくられた２つの調製物の
プールした濃縮物を濾過し、モして濾液を水と予備平衡
化したシラン化シリカゲルのクロマトグラフィーのカラ
ム（４００ｇ；床高さ３００ｍ；シリカゲル６０．７０
〜２３０メツシユ、メルク争インコーボレーテッド）に
適用する。

このカラムを水（６文）で洗浄し、そして吸着された抗
生物質を次の順序に従いアセトニトリル／水で溶離する
： ２．７　文　の５％（ｖ　／　ｖ　）の水中アセトニト
リル １．６　　Ｑ　　（７）１０％（ｖ／ｖ）（７）水中ア
セトニトリル ２．９７文　の１５％（ｖ／ｖ）の水中アセトニトリル ３．１５文　の２０％（Ｖ／Ｖ）の水中アセトニトリル 約１８ｍ１の分画を集める。溶離された分画のついて紙
ディスクのバイオアッセイ決定ＨＰＬｃによる分析によ
り試験する。同様な抗生物質含量を有する分画（分画４
７２〜５２６）をプールし、減圧濃縮する。ｎ−ブタノ
ールをこの濃縮物に添加して、水を共沸蒸留により除去
する。残留するブタノール溶液を順次に小さい体積にｉ
ｅ縮して抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ（１，４ｇ）を沈
殿させる。この生成物を石油エーテルで攪拌しながら洗
浄し、そして濾過（３回）により集める。

減圧濃縮すると、７６０　ｍ　ｇの抗生物質Ａ４０９２
６因子Ｂが得られる。

抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂを上のカラムクロマトグラ
フィーに再びかけることにより、生成物（５４０ｍｇ）
の抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ。

が得られ、これは上の抗生物ｊＪＡ４０９２６因子Ｂに
ついて報告した同一の物理化学的特性を有するが、ただ
し１つのピークをＨＰＬＣ分析で示す、すなわち、ティ
コプラニンＡ２成分２に関して１．２２の保持時間をも
つピークを示す、他の化合物（これは引続いて溶離され
る）は上のＨＰＬＣ系において１．２７の保持時１に’
ｌを有し、そして抗生物ｆｉＡ４０９２６因子Ｂ１と命
名した。それは上のように操作することによＴって単離
される（収量＝１５ｍｇ）。

製造７： 抗生物質Ａ４０９２Ｂ因子ＦＡおよび抗生物質Ａ４０９
２６因子ＰＢのそれぞれ抗生物質Ａ４０９２６因子Ａお
よび抗生物質Ａ４０９２６囚ｒＢへの転化 抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＡおよび抗生物質Ａ４０９
２６因子ＰＢ　（５０ｍｇ）を別々に２゜５ｍ１（７）
水性１％（Ｗ／Ｖ）（７）ＮＨａ　ＯＨ中に溶解し、そ
して得られた溶液を２４時間攪拌しながら室温に保持す
る。

抗生物質Ａ４０９２６因子Ａは始め抗生物１Ａ４０９２
６因子ＦＡを含有する溶液から、そして抗生物質Ａ４０
９２６因子Ｂは始め抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＢを含
有する溶液から、ｎ−ブタノールとの共沸蒸留により水
を除去し、エチルエーテルで沈殿させ、そして沈殿をＩ
＋！過により集めることによって、それぞれ、ｆＩＩら
れる（収率的７５％）。

製造８： Ｄ−Ａ　ｌ　ａ−Ｄ−Ａ　１　ａ−セフ７０−スの調製
４）　　エビクロロヒドリンによるセファロースの活性
化 １文のセファロース（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ）４Ｂ［ファ
ーマシア・ファイ・ケミカルス（Ｐｈａｒｍａｃｉａ　
　Ｆｉｎｅ　　Ｃｈｅｍｉｃａｌ５）］を多孔質ガラス
フィルターで濾過し、脱イオン水で洗浄し、１．２１の
ＮａＯＨＮ／１におだやかに攪拌しながら室温において
添加する。

１０ｍ１のエビクロロヒドリンを添加した後、この塊を
冷水で外部冷却しながら約２０℃に２４時間維持する。

この懸濁液を濾過し、そして固体を脱イオン水（約５１
）で中性のｐＨに洗浄する。

ｂ）　セフ７０−スーε−ＡＣＡ−Ｄ−Ａ　ｌ　ａ−Ｄ
−Ａｌａの調製 ２０％のＮａＯＨでｐＨ１１にした２　００　ｍ　ｌの
水中の１７ｇ’（６２，２ミリモル）のε−ＡＣＡ−Ｄ
−Ａ　１　ａ−Ｄ−Ａ　ｌ　ａノ溶液に、エビクロロヒ
ドリンで誘導化した５００ｍ１のセファロース４Ｂ（合
、；１のエポキシド含Ｈ＞　１５　、５　ミリ名１１１
つを機械的攪拌下に添加する。

この２ｇ　Ｈ液をｐＨ１１および室温において約２０間
（試験によりエポキシ含量が陰性になるまで）攪拌し、
絽過し、そして３００ｍ１の水で洗浄する。ｉ＋！過し
た樹脂を水（約３９．）で再び中性のｐＨまで洗浄する
と、４６０ｍ１のセファロース−ε−ＡＣＡ−Ｄ−Ａ　
１　ａ−Ｄ−Ａ　１　ａが得られる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
クロニルアグリコン複合体ＡＢのＵＶスペクトルである
。 第２図は、抗生物ｆｉＡ４０９２６Ｎ−アシルアミノグ
ルクロニルアグリコン複合体ＡＢのＩＲスペクトルであ
る・ 第３図は、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
クロニルアグリコン複合体ＡＢの　１Ｎ−ＮＭＲスペク
トルである。 第４図は、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
クロニルアグリコン因子ＡのＩＲスペクトルである。 第５図は、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
クロニルアグリコン因子Ａの　Ｉ　Ｎ−ＮＭＲスペクト
ルである。 第６図は、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
クロニルアグリコン因子ＢｏのＩＲスペクトルである。 第７図は、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
クロニルアグリコン因子ＢＯの　１Ｎ−ＮＭＲスペクト
ルである。 第８図は、抗生物質Ａ４０９２６アグリコンのＵＶスペ
クトルである。 第９図は、抗生物質Ａ４０９２６アグリコンのＩＲスペ
クトルである。 第１０図は、抗生物質Ａ４０９２６アグリコンの　Ｉ　
Ｎ−ＮＭＲスペクトルである。 第１１図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＡのＵＶスペク
トルである。 第１２図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＡのＩＲスペク
トルである。 第１３図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＡのＩ　Ｎ−Ｎ
ＭＲスペクトルである。 第１４図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＢのＵＶスペク
トルである。 第１５図は、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂの工Ｒスペク
トルである。 第１６図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＢのＩ　Ｎ−Ｎ
ＭＲスペクトルである。 第１７図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＡのＵＶスペ
クトルである。 第１８図は、抗生物質Ａ４０９２Ｂ因子ＦＡのＩＲスペ
クトルである。 第１９図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＡのＩ　Ｎ−
ＮＭＲスペクトルである。 第２０図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＢのＵＶスペ
クトルである。 第２１図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＢのＩＲスペ
クトルである。 第２２図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＢのＩ　Ｎ−
ＮＭＲスペクトルである。 第２３図は、抗生物質Ａ４０９２６因子ＦＢのＩ　Ｎ−
ＮＭＲスペクトルである。 第２４図は、抗生物質Ａ４０９２６マンノシルアグリコ
ンのＵＶスペクトルである。 第２５図は、抗生物質Ａ４０９２６マンノシルアグリコ
ンのＩＲスペクトルである。 第２６図は、抗生物質Ａ４０９２６マンノシルアグリコ
ンの　Ｉ　Ｎ−ＮＭＲスペクトルである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニ
   ルアグリコン複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−ア
   シルアミノグルクロニルアグリコン因子Ａ、抗生物質Ａ
   ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因
   子Ｂ＿０、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグル
   クロニルアグリコン因子Ｂ＿１、抗生物質Ａ４０９２６
   アグリコンおよびそれらの付加塩類から選択され、そし
   て次の特性： ￥抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニル
   アグリコン複合体ＡＢ￥（酸付加塩でない形態）： Ａ）次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル： 　　　　　　　　　　　　　　　λｍａｘ 　　　　　　　　　　　　　　　（ｎｍ） ａ）０．１ＮのＨＣｌ　　　　　２８２ ｂ）リン酸塩緩衝液ｐＨ７．４　２８２ 　　　　　　　　　　　　　　　３１０ 　　　　　　　　　　　　　　　（肩） ｃ）０．１ＮのＫＯＨ　　　　　３０２ Ｂ）次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ＾−
   ＾１）： ３７００−３１００；３０００−２８００（ｎｕｊｏｌ
   ）；１６５０；１６２０−１５５０；１５００；１４６
   ０（ｎｕｊｏｌ）；１３７５（ｎｕｊｏｌ）；１３００
   ；１２５０−１１８０；１１５０；１０６０；１０１０
   ；９７０；８４０；８２０ Ｃ）ＤＭＳＯｄ＿６（ヘキサデューテロジメチルスルホ
   キシド）＋ＣＦ＿３ＣＯＯＨ中で記録した２７０ＭＨｚ
   において次の信号群（ｐｐｍ）を示す＾１Ｈ−ＮＭＲス
   ペクトル、内部標準ＴＭＳ（０．００ｐｐｍ）、（δ＝
   ｐｐｍ）： ０．８４、ｄおよびｔ［イソプロピルのＣＨ＿３および
   末端のＣＨ＿３］：１．１４　ｍ［（ＣＨ＿２）ｎ］；
   １．４４　ｍ［−ＣＨ＿２−Ｃ−ＣＯおよびイソプロピ
   ルのＣＨ］：２．００　ｔ［−ＣＨ＿２−（ＣＯ）］：
   ２．５、ｓ（ＤＭＳＯｄ＿５）；２．５　ｓ（Ｎ−ＣＨ
   ＿３）：２．９３　ｍ［ＣＨ、（Ｚ２）］；３．３３　
   ｍ［ＣＨ、（Ｚ′２）］：３．２０−３．８０　ｍ［糖
   のＣＨ］；５．３４　ｄ［アシルアミノグルクロン酸の
   アノマーのプロトン］：４．１０　ｍ（Ｘ６）：４．３
   ３　ｄ（Ｘ５）；４．４３　ｄ（Ｘ７）：４．９　ｍ（
   Ｘ２）：５．１（４ＦおよびＺ６）：５．４　ｓ（Ｘ１
   ）：５．５８　ｄ（Ｘ４）：５．７　ｓ（４Ｂ）：６．
   ０６　ｄ（Ｘ３）；７．７３　ｓ（６Ｂ）；６．２６−
   ８．４２　ｓおよびｍ［芳香族のＣＨおよびペプチドの
   ＮＨ］；８．７０−１０．５　ｂｒ　ｓ［フェノールの
   ＯＨおよびＮＨ＿２＾＋］ ｂｒ＝広い ｄ＝二重線 ｍ＝多重線 ｓ＝一重線 ｔ＝四重線 Ｄ）次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、テイコ
   プラニンＡ＿２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１
   ．２０および１．３０の保持時間（Ｒｔ）： カラム：ウルトラスフェアー（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ
   ）ＯＤＳ（５μｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ）［ベック
   マン（Ｂｅｃｋｍａｎ）］４．６ｍｍ（内径）×２５０
   ｍｍ 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Ｂｒｏｗｎｌｅｅ
   　Ｌａｂｓ）ＲＰ１８（５μｍ）溶離剤Ａ　ＣＨ＿３Ｃ
   Ｎ　１０％（２．５ｇ／ｌ）Ｎａ Ｈ＿２ＰＯ＿４・Ｈ＿２Ｏ　９０％　ｐＨ６．０に調節 溶離剤Ａ　ＣＨ＿３ＣＮ　７０％（２．５ｇ／ｌ）Ｎａ Ｈ＿２ＰＯ＿４・Ｈ＿２Ｏ　３０％ｐＨ６．０に調節 溶離：溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線の
   勾配、４０分 流速：１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器２５４ｎｍ 内部標準：テイコプラニンＡ＿２成分２［グルッポ・レ
   ペチット社（Ｇｒｕｐｐｏ　Ｌｅｐｅｔｉｔ　Ｓ．ｐ．
   Ａ．］ Ｅ）塩類を形成できる酸機能 Ｆ）塩類を形成できるアミノ機能 Ｇ）中心部分に結合するマンノース単位をもたない ￥抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニル
   アグリコンＡ￥（酸付加塩でない形態）： Ａ）次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル： 　　　　　　　　　　　　　　　λｍａｘ 　　　　　　　　　　　　　　　（ｎｍ） ａ）０．１ＮのＨＣｌ　　　　　２８２ ｂ）リン酸塩緩衝液ｐＨ７．４　２８２ 　　　　　　　　　　　　　　　３１０ 　　　　　　　　　　　　　　　（肩） ｃ）０．１ＮのＫＯＨ　　　　　３０２ Ｂ）次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ＾−
   ＾１）： ３７００−３０００：３０００−２８００；１６５０：
   １５８５；１５０５；１４６０（ｎｕｊｏｌ）：１３７
   ５（ｎｕｊｏｌ）；１２９５；１２３０；１２１０；１
   １５０；１０７０；１０６０；８４５；８２０；７２０
   （ｎｕｊｏｌ） Ｃ）ＤＭＳＯｄ＿６（ヘキサデューテロジメチルスルホ
   キシド）中で記録した２７０ＭＨｚにおいて次の信号群
   （ｐｐｍ）を示す＾１Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内部標準
   ＴＭＳ（０．００ｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）： ０．８５　ｔ（末端のＣＨ＿３）；１．０−１．３（脂
   肪族のＣＨ＿２）；１．４２　ｍ（（ＯＣ−Ｃ）ＣＨ＿
   ２）；２．００　ｔ（（ＣＯ）ＣＨ＿２）：２．３５　
   ｓ（ＮＣＨ＿３）；２．４９　ｓ（ＤＭＳＯｄ＿５）；
   ２．８２　ｍ（Ｚ２）；２．８−３．８（糖のプロトン
   およびＺ′）：４．１２　ｍ（Ｘ６）；４．５６　ｓ（
   Ｘ１）；４．３４　ｄ（Ｘ５）：４．４１　ｄ（Ｘ７）
   ：４．９６　ｍ（Ｘ２）；５．０８−５．１２（４Ｆお
   よびＺ６）；５．４０　ｄ（アシルアミノグルクロン酸
   のアノマーのプロトン）；５．５８　ｄ（Ｘ４）；５．
   ７４　ｓ（４Ｂ）：６．０５　ｄ（Ｘ３）；７．７５　
   ｓ（６Ｂ）；６．２５−８．４０　ｓ、ｄおよびｍ（芳
   香族のＣＨおよびペプチドのＮＨ） Ｄ）次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、テイコ
   プラニンＡ＿２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１
   ．２０の保持時間（Ｒｔ）： カラム：ウルトラスフェアー（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ
   ）ＯＤＳ（５μｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ）［ベック
   マン（Ｂｅｃｋｍａｎ）］４．６ｍｍ（内径）×２５０
   ｍｍ 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Ｂｒｏｗｎｌｅｅ
   　Ｌａｂｓ）ＲＰ１８（５μｍ） 溶離剤Ａ　ＣＨ＿３ＣＮ　１０％（２．５ｇ／ｌ）Ｎａ Ｈ＿２ＰＯ＿４・Ｈ２＿Ｏ９０％ｐＨ６．０に調節 溶離剤Ａ　ＣＨ＿３ＣＮ　７０％（２．５ｇ／ｌ）Ｎａ Ｈ＿２ＰＯ＿４・Ｈ＿２Ｏ　３０％ｐＨ６．０に調節 溶離：溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線の
   勾配、４０分 流速：１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器２５４ｎｍ 内部標準：テイコプラニンＡ＿２成分２［グルッポ・レ
   ペチット社（Ｇｒｕｐｐｏ　Ｌｅｐｅｔｉｔ　Ｓ．ｐ．
   Ａ．］ Ｅ）ＦＡＢ−ＭＳにより決定した約１５５４の分子量 Ｆ）塩類を形成できる酸機能 Ｇ）塩類を形成できるアミノ機能 Ｈ）中心部分に結合するマンノース単位をもたない ￥抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニル
   アグリコンＢ＿０￥（酸付加塩でない形態）： Ａ）次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル： 　　　　　　　　　　　　　　　λｍａｘ 　　　　　　　　　　　　　　　（ｎｍ） ａ）０．１ＮのＨＣｌ　　　　　２８２ ｂ）リン酸塩緩衝液ｐＨ７．４　２８２ 　　　　　　　　　　　　　　　３１０ 　　　　　　　　　　　　　　　（肩） ｃ）０．１ＮのＫＯＨ　　　　　３０２ Ｂ）次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ＾−
   ＾１）： ３７００−３１００；３０００−２８００（ｎｕｊｏｌ
   ）；１６５０；１５８５；１５０５；１４６０（ｎｕｊ
   ｏｌ）；１３７５（ｎｕｊｏ１）；１２９５；１２３０
   ；１２１０；１１５０；１０６０；１０１０；９８０；
   ８４０；８２０；７２０（ｎｕｊｏｌ） Ｃ）ＤＭＳＯ　ｄ＿６（ヘキサデューテロジメチルスル
   ホキシド）中で記録した２７０ＭＨｚにおいて次の信号
   群（ｐｐｍ）を示す ＾１Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内部標準ＴＭＳ（０．００
   ｐｐｍ）、（δ＝ｐμｍ）： ０．８５　ｄ（イソプロピルの−ＣＨ）；１．０−１．
   ３（脂肪族のＣＨ＿２）；１．３−１．６（（ＯＣ−Ｃ
   ）−ＣＨ＿２およびイソプロピルのＣＨ＿３）；２．０
   ０　ｔ（（ＣＯ）ＣＨ＿２）；２．３２　ｓ（ＮＣＨ＿
   ３）；２．４９　ｓ（ＤＭＳＯｄ＿５）；２．８２　ｍ
   （Ｚ２）；２．９−３．８（糖のプロトン）；４．１２
   　ｍ（Ｘ６）；４．４４　ｓ（Ｘ１）；４．３３　ｄ（
   Ｘ５）；４．３７　ｍ（Ｘ７）；４．９５　ｍ（Ｘ２）
   ；５．０６−５．１０（４ＦおよびＺ６）：５．３８　
   ｄ（アシルアミノグルクロン酸のアノマーのプロトン）
   ；５．５９　ｄ（Ｘ４）：５．７２　ｓ（４Ｂ）；６．
   ０５　ｄ（Ｘ３）：７．７４　ｓ（６Ｂ）；６．２７−
   ８．５（芳香族およびペプチドのＮＨ） Ｄ）次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、テイコ
   プラニンＡ＿２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して１
   ．３０の保持時間（Ｒｔ）： カラム：ウルトラスフェアー（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ
   ）ＯＤＳ（５μｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ）［ベック
   マン（Ｂｅｃｋｍａｎ）］４．６ｍｍ（内径）×２５０
   ｍｍ 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Ｂｒｏｗｎｌｅｅ
   　Ｌａｂｓ）ＲＰ１８（５μｍ） 溶離剤Ａ　ＣＨ＿３ＣＮ１０％（２．５ｇ／ｌ）Ｎａ Ｈ＿２ＰＯ＿４・Ｈ＿２Ｏ９０％ｐＨ６．０に調節 溶離剤Ａ　ＣＨ＿３ＣＮ７０％（２．５ｇ／ｌ）Ｎａ Ｈ＿２ＰＯ＿４・Ｈ＿２Ｏ３０％ｐＨ６．０に調節 溶離：溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線の
   勾配、４０分 流速：１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器２５４ｎｍ 内部標準：テイコプラニンＡ＿２成分２［グルッポ・レ
   ペチット社（Ｇｒｕｐｐｏ　Ｌｅｐｅｔｉｔ　Ｓ．ｐ．
   Ａ．］ Ｅ）ＦＡＢ−ＭＳにより決定した約１５６８の分子量 Ｆ）塩類を形成できる酸機能 Ｇ）塩類を形成できるアミノ機能 Ｈ）中心部分に結合するマンノース単位をもたない ￥抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニル
   アグリコンＢ＿１￥（酸付加塩でない形態）：はＦＡＢ
   −ＭＳにより決定した約１５６８の分子量および抗生物
   質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコ
   ン因子Ｂ＿０について上に報告したのと実質的同一の物
   理化学的特性を有するが、ただし上に報告したＮＭＲ系
   においてｎ−プロピル機能のメチル基に起因する０．８
   ４δｐｐｍにおける三重線および上に報告した系におい
   て１．３２のテイコプラニンＡ＿２成分２に関する保持
   時間を有する 抗生物質Ａ４０９２６アグリコン（酸付加塩でない形態
   ）： Ａ）次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル： 　　　　　　　　　　　　　　　λｍａＸ 　　　　　　　　　　　　　　　（ｎｍ） ａ）０．１ＮのＨＣｌ　　　　　２８０ ｂ）リン酸塩緩衝液ｐＨ７．４　２８０ 　　　　　　　　　　　　　　　３１０ 　　　　　　　　　　　　　　　（肩） ｃ）０．１ＮのＫＯＨ　　　　　２９９ Ｂ）次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ｃｍ＾−
   ＾１）： ３７００−３１００；３０００−２８００（ｎｕｊｏｌ
   ）；１６５５；１６２０−１５５０；１５００；１４６
   ０（ｎｕｊｏｌ）；１３７５（ｎｕｊｏｌ）；１３００
   ；１２０５；１１４５；１０１０；９７０；９３０；８
   ４０ Ｃ）ＤＭＳＯｄ＿６（ヘキサデューテロジメチルスルホ
   キシド）中で記録した２７０ＭＨｚにおいて次の信号群
   （ｐｐｍ）を示す ＾１Ｈ−ＮＭＲスペクトル、内部標準ＴＭＳ（０．００
   ｐｐｍ）、（δ＝ｐｐｍ）： ２．５１　ｓ（ＤＭＳＯｄ＿５）；２．５０　ｓ（ＮＣ
   Ｈ＿３）；２．８８　ｍ（Ｚ２）；３．３３　ｍ（Ｚ′
   ２）；４．１０　ｍ（Ｘ６）：４．３４　ｄ（Ｘ５）：
   ４．４３　ｄ（Ｘ７）；４．９３　ｍ（Ｘ２）；５．０
   ４　ｓ（４Ｆ）：５．０９　ｓ（Ｚ６）；５．５４　ｄ
   （Ｘ４）；５．７５　ｓ（４Ｂ）；６．０５　ｄ（Ｘ３
   ）；７．７６　ｓ（６Ｂ）；６．３−８．４（芳香族お
   よびペプチドのＮＨ） Ｄ）次の条件下に逆相ＨＰＬＣで分析したとき、テイコ
   プラニンＡ＿２成分２（Ｒｔ＝２０．３分）に関して０
   ．５９の保持時間（Ｒｔ）： カラム：ウルトラスフェアー（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ
   ）ＯＤＳ（５μｍ）アルテクス（Ａｌｔｅｘ）［ベック
   マン（Ｂｅｃｋｍａｎ）］４．６ｍｍ（内径）×２５０
   ｍｍ 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Ｂｒｏｗｎｌｅｅ
   　Ｌａｂｓ）ＲＰ１８（５μｍ） 溶離剤Ａ　ＣＨ＿３ＣＮ１０％（２．５ｇ／ｌ）Ｎａ Ｈ＿２ＰＯ＿４・Ｈ＿２Ｏ９０％ｐＨ６．０に調整 溶離剤Ａ　ＣＨ＿３ＣＮ７０％（２．５ｇ／ｌ）Ｎａ Ｈ＿２ＰＯ＿４・Ｈ＿２Ｏ３０％ｐＨ６．０に調節 溶離：溶離剤Ａ中の５％から６０％の溶離剤Ｂの直線の
   勾配、４０分 流速：１．８ｍｌ／分 ＵＶ検出器２５４ｎｍ 内部標準：テイコプラニンＡ＿２成分２［グルッポ・レ
   ペチット社（Ｇｒｕｐｐｏ　Ｌｅｐｅｔｉｔ　Ｓ．ｐ．
   Ａ．］ 同一条件下で、抗生物質Ｌ１７０５４（グルッポ・レペ
   チット、欧州特許（ＥＰ−Ａ）１１９５７５）に関する
   保持時間は１．４２である Ｅ）ＦＡＢ−ＭＳにより決定した約１２１１の分子量 Ｆ）塩類を形成できる酸機能 Ｇ）塩類を形成できるアミノ機能 Ｈ）中心部分に結合するマンノース単位をもたない を有することを特徴とする抗生物質。 ２、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニ
   ルアグリコン複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−ア
   シルアミノグルクロニルアグリコン因子Ａ、抗生物質Ａ
   ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン因
   子Ｂ、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロ
   ニルアグリコン因子Ｂ＿０、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−
   アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂ＿１、抗生
   物質Ａ４０９２６アグリコンおよびそれらの付加塩類か
   ら選択され、そして次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、 Ａは水素またはＮ−（Ｃ＿１＿１−Ｃ＿１＿２）アシル
   アミノグルクロニルを表わし、そして Ｂは水素を表わす、 を有することを特徴とする抗生物質。 ３、Ａはウンデカノイルアミノグルクロニル、ドデカノ
   イルアミノグルクロニルおよびイソドデカノイルから選
   択される特許請求の範囲第２項記載の化合物。 ４、工程： ａ）抗生物質Ａ４０９２６複合体、抗生物質Ａ４０９２
   ６複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａ、抗生物質
   Ａ４０９２６因子 Ｂ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ＿０、抗生物質Ａ４０
   ９２６因子ＰＡ、抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＢを、適
   当な有機溶媒中で制限された（０．１〜１０％ｗ／ｗ）
   量の水の存在下に、強酸を使用するコントロールされた
   加水分解に付し、 ｂ）最終生成物の混合物が得られるとき、必要に応じて
   クロマトグラフィーによりそれらを分割する、 を含んでなることを特徴とする特許請求の範囲第１、２
   または３項記載の化合物またはそれらの混合物を製造す
   る方法。 ５、反応温度が４℃〜８０℃である特許請求の範囲第４
   項記載の方法。 ６、強酸はハロゲン化水素類、リン酸類、硫酸およびハ
   ロ酢酸類から選択される特許請求の範囲第４項記載の方
   法。 ７、強酸は濃塩酸である特許請求の範囲第４項記載の方
   法。 ８、有機溶媒は（Ｃ＿１−Ｃ＿４）アルキルスルホキシ
   ド、（Ｃ＿１−Ｃ＿４）アルキルホルムアミド、ジオキ
   サン、テトラヒドロフランなどから選択される特許請求
   の範囲第４項記載の方法。 ９、加水分解を８：２〜９．５：０．５のジメチルスル
   ホキシド／濃塩酸の混合物を使用して４０℃〜８０℃に
   おいて実施する特許請求の範囲第４項記載の方法。 １０、抗生物質Ａ４０９２６複合体、抗生物質Ａ４０９
   ２６複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａ、抗生物
   質Ａ４０９２６因子Ｂ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ＿
   ０、抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＡ、抗生物質Ａ４０９
   ２６因子ＰＢを、９：１〜９．５：０．５のジメチルス
   ルホキシド／３７％（ｗ／ｗ）の塩酸の混合物を使用し
   て約６５℃の温度において約５時間コントロールされた
   加水分解に付し、必要に応じて抗生物質Ａ４０９２６Ｎ
   −アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ａおよび抗
   生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグ
   リコン因子Ｂをクロマトグラフィーにより分割すること
   を含んでなる抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノグ
   ルクロニルアグリコン複合体ＡＢまたはその因子を製造
   する特許請求の範囲第４項記載の方法。 １１、抗生物質Ａ４０９２６複合体またはその単一の因
   子、抗生物質Ａ４０９２６複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０
   ９２６因子Ａ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ、抗生物質
   Ａ４０９２６因子ＰＡ、抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＢ
   、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ＿０、抗生物質Ａ４０９
   ２６マンノシルアグリコンおよび抗生物質Ａ４０９２６
   Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン（複合体ＡＢ
   および／またはそのの単一の因子）を、 （ａ）脂肪族酸およびアルファーハロゲン化脂肪族酸（
   これらは反応温度において液体である）、脂肪族アルカ
   ノールおよび環式脂肪族アルカノール（これらは反応温
   度において水とわずかに混合する液体である）、フェニ
   ル置換低級アルカノール（ここでフェニル部分は（Ｃ＿
   １−Ｃ＿４）アルキル、（Ｃ＿１−Ｃ＿４）アルコキシ
   またはハロ残基を有してもよい）（これは反応温度にお
   いて水とわずかに混合する液体である）、およびベータ
   ーハロゲン化低級アルカノール（これは反応温度におい
   て液体である）から選択される有機プロトン性溶媒の存
   在下に、 （ｂ）前記溶媒と相溶性であり、強鉱酸、強有機酸およ
   び水素型強酸カチオン交換樹脂から選択される強酸の存
   在下に、 （ｃ）約２０℃〜約１００℃の反応温度において、コン
   トロールされた加水分解に付すことを特徴とする抗生物
   質Ａ４０９２６アグリコンを製造する特許請求の範囲第
   ４項記載の方法。 １２、抗生物質Ａ４０９２６複合体、抗生物質Ａ４０９
   ２６複合体ＡＢ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ａ、抗生物
   質Ａ４０９２６因子Ｂ、抗生物質Ａ４０９２６因子Ｂ＿
   ０、抗生物質Ａ４０９２６因子ＰＡ、抗生物質Ａ４０９
   ２６因子ＰＢ、抗生物質Ａ４０９２６Ｎ−アシルアミノ
   グルクロニルアグリコン複合体ＡＢまたはその因子、お
   よび抗生物質Ａ４０９２６マンノ・シルアグリコンを、
   ８：２〜９．５：０．５のジメチルスルホキシド／３７
   ％（ｗ／ｗ）の塩酸の混合物を使用して約８０℃の温度
   においてコントロールされた加水分解に付す抗生物質Ａ
   ４０９２６アグリコンを製造する特許請求の範囲第４項
   記載の方法。 １３、薬剤として使用するための特許請求の範囲第１、
   ２または３項記載の化合物。 １４、抗生物質の治療のための薬物を調製するための特
   許請求の範囲第１、２または３項記載の化合物の使用。 １５、特許請求の範囲第１、２または３項記載の化合物
   と製薬学的に許容されうる坦体とを含んでなることを特
   徴とする製剤。