JPS61152280A - 抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形質転換細胞及びその製造法並びにその使用方法 - Google Patents
抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形質転換細胞及びその製造法並びにその使用方法Info
- Publication number
- JPS61152280A JPS61152280A JP59273155A JP27315584A JPS61152280A JP S61152280 A JPS61152280 A JP S61152280A JP 59273155 A JP59273155 A JP 59273155A JP 27315584 A JP27315584 A JP 27315584A JP S61152280 A JPS61152280 A JP S61152280A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- pseudomonas aeruginosa
- human
- cells
- antibody
- transformed
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（イ）産業上の利用分野
本発明は、抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形質転換細胞と
その製造法、並びにその使用方法に関する。その目的と
するところは、緑膿菌感染症の診断及び治療等に役立つ
ところの抗緑膿菌ヒト抗体を産生ずる、形質転換細胞を
提供することにある。
その製造法、並びにその使用方法に関する。その目的と
するところは、緑膿菌感染症の診断及び治療等に役立つ
ところの抗緑膿菌ヒト抗体を産生ずる、形質転換細胞を
提供することにある。
（０）従来の技術
緑膿菌（シュードモナス・エルギノーザ、Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）は本来病原性の
低い菌であるが、最近は、抗生物質の投与による菌交代
性増殖の結果、薬剤耐性緑膿菌による感染症が増え、し
ばしば免疫不全、とりわけシスティック ファイブロー
シス（のう飽性線維症）、熱傷、ガン等の患者に発症し
重篤な症状を呈するようになっている。この感染症にお
いては、緑膿菌が薬剤耐性をもっていることが多いため
、又患者の免疫力が弱まっている等のため、抗生物質に
よる治療が必ずしも十分な威力を発揮しないという問題
がある。
ｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）は本来病原性の
低い菌であるが、最近は、抗生物質の投与による菌交代
性増殖の結果、薬剤耐性緑膿菌による感染症が増え、し
ばしば免疫不全、とりわけシスティック ファイブロー
シス（のう飽性線維症）、熱傷、ガン等の患者に発症し
重篤な症状を呈するようになっている。この感染症にお
いては、緑膿菌が薬剤耐性をもっていることが多いため
、又患者の免疫力が弱まっている等のため、抗生物質に
よる治療が必ずしも十分な威力を発揮しないという問題
がある。
従って、抗緑膿菌抗体によるいわゆる免疫療法が考えら
れ研究されつつあるが、未だ臨床に供されるに至ってい
ない。また、緑膿菌感染症の治療を適格に行なうために
は、その早期診断が必要であるが、従来の抗血清を用い
る方法は満足すべき状況にないという問題がある。これ
らの問題点を解決するためには、抗緑膿菌モノクローナ
ル抗体が必要である。
れ研究されつつあるが、未だ臨床に供されるに至ってい
ない。また、緑膿菌感染症の治療を適格に行なうために
は、その早期診断が必要であるが、従来の抗血清を用い
る方法は満足すべき状況にないという問題がある。これ
らの問題点を解決するためには、抗緑膿菌モノクローナ
ル抗体が必要である。
一方、緑膿菌の表面抗原としては、リボ多糖（＋、−Ｐ
Ｓ）、外層蛋白（ｏｕｔｅｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒ
ｏｔｅｉｎ。
Ｓ）、外層蛋白（ｏｕｔｅｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒ
ｏｔｅｉｎ。
ＯＭＰ）、ペン毛、スライム由来の多糖等が知られてい
る。このうちＬ Ｐ Ｓは緑膿菌の血清型を決定する〇
−多糖側鎖を有し、今まで１から１６までの１６種類の
血清型（Ｈｏｍｍａの分類による）が知られている。Ｌ
Ｐ Ｓは〇−多糖側鎖の他にコアーリージョン、リビ
ドＡを有し、リビドＡが緑膿菌の外層（ｏｕｔｅｒ
ｍｅｍｂｒａｎｅ ）にうずもれ、これより２−ケト−
３−デオキシオフトン酸を介しコアーリージョンが外層
外に伸び、コアーリージョンから〇−多糖側鎖が更に外
側に伸展している。Ｌ ＰＳに対する抗体は、ヒトや動
物において作られやすく、感染防御−的に働く事が知ら
れている。抗１−ＰＳ抗体は緑膿菌のＬＰＳと結合し、
この抗原抗体複合体に神体が結合し、免疫溶菌を受ける
か、もしくは多形核白血球などの食細胞により処即され
、生体が緑膿菌感染症から免がれる事ができると言われ
ている。緑膿菌の感染が成立している患者では、緑膿菌
抗原が多く、抗緑膿菌抗体が不足になりがちである。こ
れを防ぎ治療するために、従来からヒトの血液から調製
したＩｇＧ製剤が使われてきたが、その製剤に含まれて
いる緑膿菌の抗体価は極めて少なく、感染治療上十分で
はなかった。
る。このうちＬ Ｐ Ｓは緑膿菌の血清型を決定する〇
−多糖側鎖を有し、今まで１から１６までの１６種類の
血清型（Ｈｏｍｍａの分類による）が知られている。Ｌ
Ｐ Ｓは〇−多糖側鎖の他にコアーリージョン、リビ
ドＡを有し、リビドＡが緑膿菌の外層（ｏｕｔｅｒ
ｍｅｍｂｒａｎｅ ）にうずもれ、これより２−ケト−
３−デオキシオフトン酸を介しコアーリージョンが外層
外に伸び、コアーリージョンから〇−多糖側鎖が更に外
側に伸展している。Ｌ ＰＳに対する抗体は、ヒトや動
物において作られやすく、感染防御−的に働く事が知ら
れている。抗１−ＰＳ抗体は緑膿菌のＬＰＳと結合し、
この抗原抗体複合体に神体が結合し、免疫溶菌を受ける
か、もしくは多形核白血球などの食細胞により処即され
、生体が緑膿菌感染症から免がれる事ができると言われ
ている。緑膿菌の感染が成立している患者では、緑膿菌
抗原が多く、抗緑膿菌抗体が不足になりがちである。こ
れを防ぎ治療するために、従来からヒトの血液から調製
したＩｇＧ製剤が使われてきたが、その製剤に含まれて
いる緑膿菌の抗体価は極めて少なく、感染治療上十分で
はなかった。
ところで、特異的な抗体を産生ずるがやがては死滅する
運命にあるリンパ球又はＢ細胞（抗体産生細胞）を、エ
プスタイン・バー・ウィルス（Ｅ ｐｓｔｅｉｎ−Ｂ
ａｒｒ Ｖ １ｒｕｓ、以下Ｅ−Ｂウィルスと略称する
）で形質転換させ、モノクローナル抗体を永続的に産生
分泌する形質転換細胞株を樹立させる方法は公知である
（例えば、３ｔｅｉｎｉｎＯ。
運命にあるリンパ球又はＢ細胞（抗体産生細胞）を、エ
プスタイン・バー・ウィルス（Ｅ ｐｓｔｅｉｎ−Ｂ
ａｒｒ Ｖ １ｒｕｓ、以下Ｅ−Ｂウィルスと略称する
）で形質転換させ、モノクローナル抗体を永続的に産生
分泌する形質転換細胞株を樹立させる方法は公知である
（例えば、３ｔｅｉｎｉｎＯ。
Ｎａｔｕｒｅ Ｖｏｌ、２６９．４２０−４２２．１９
７７、） 、そして、モノクローナルな抗緑膿菌抗体を
得ようとする場合には、抗緑膿菌抗体産生細胞にＥ−Ｂ
ウィルスを感染させ形質転換させ、クローニングによっ
て抗緑膿菌抗体産生性の形質転換細胞を得ればよいこと
は一般論としては知られている。
７７、） 、そして、モノクローナルな抗緑膿菌抗体を
得ようとする場合には、抗緑膿菌抗体産生細胞にＥ−Ｂ
ウィルスを感染させ形質転換させ、クローニングによっ
て抗緑膿菌抗体産生性の形質転換細胞を得ればよいこと
は一般論としては知られている。
（ハ）発明が解決しようとする問題点
しかしながら、ヒトの抗体産生細胞をＥ−Ｂウィルスで
形質転換させた、抗緑膿菌ヒト抗体を永続的に産生ずる
形質転換細胞株は、適切な抗体産生細胞の採取・調整が
困難であるといった問題答のため、未だ明確には確立さ
れていない。ヒトの病気の診断や治療のためには、同種
タンパクである抗緑膿菌ヒト抗体の方が有用でかつ安全
であり、そのためには、ヒトの抗体産生細胞を用いて形
質転換細胞株を樹立する必要がある。
形質転換させた、抗緑膿菌ヒト抗体を永続的に産生ずる
形質転換細胞株は、適切な抗体産生細胞の採取・調整が
困難であるといった問題答のため、未だ明確には確立さ
れていない。ヒトの病気の診断や治療のためには、同種
タンパクである抗緑膿菌ヒト抗体の方が有用でかつ安全
であり、そのためには、ヒトの抗体産生細胞を用いて形
質転換細胞株を樹立する必要がある。
（ニ）問題点を解決するための手段
本発明者らは、抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形質転換細
胞を得ることを目的として鋭意研究を行なった結果、ま
ず、抗緑膿菌抗体を産生ずるヒトの細胞を多く含む組織
を選別し、この組織の細胞にＥ−Ｂウィルスを感染され
るという方法によって、抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形
質転換細胞を得ることができた。
胞を得ることを目的として鋭意研究を行なった結果、ま
ず、抗緑膿菌抗体を産生ずるヒトの細胞を多く含む組織
を選別し、この組織の細胞にＥ−Ｂウィルスを感染され
るという方法によって、抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形
質転換細胞を得ることができた。
本発明においてヒトの抗体産生細胞とは、ヒトのリンパ
球（又はＢ細胞）であって、抗体を分泌している又は分
泌する能力を持った細胞をいう。
球（又はＢ細胞）であって、抗体を分泌している又は分
泌する能力を持った細胞をいう。
これは牌臓、リンパ節、末梢血、骨髄、扁桃、アデノイ
ド等の細胞の中に含まれている。本発明の目的のために
は、いかなるソースのリンパ球でも用いることができる
が、好ましいのは扁桃又はアデノイドから採取されたも
のである。
ド等の細胞の中に含まれている。本発明の目的のために
は、いかなるソースのリンパ球でも用いることができる
が、好ましいのは扁桃又はアデノイドから採取されたも
のである。
Ｅ−Ｂウィルスは、バーキットリンパ腫や鼻咽頭ガンの
原因ウィルスとされている、ヘルペスウィルス群に属す
るウィルスである。
原因ウィルスとされている、ヘルペスウィルス群に属す
るウィルスである。
本発明においては、まず、抗原１例えば特定のＬ Ｐ
Ｓを有する緑膿菌を選ぶ。次にヒトのリンパ球を扁桃腺
、リンパ節、牌臓及び末梢血等の組織からモノヌクリア
ーセル（単核細胞）として調製する。モノヌクリアーセ
ルを５日〜７日、ポークライードマイトジェン等のマイ
ト−ジエンの添加もしくは無添加の条件下で、５％ＣＯ
２インキエベーターで培養し、その培養上清液中の抗体
を、緑膿菌を固定したプレートで酵素抗体法により測定
し、望ましいモノヌクリアーセルを含む組織を選ぶ。こ
の組織の細胞をＥ−Ｂウィルスに感染させ、約２〜３週
間５％ＣＯ２インキュベーターで培養し、多くの異質集
落から成る形質転換細胞（トランスフＡ−ムドセル）を
形成させる。次に、この形質転換細胞から、緑膿菌Ｌ
Ｐ Ｓに対し特異的なヒトモノクローナル抗体を分泌す
るものだ（プを選別する。この選別工程は、異なる形質
転換細胞Ｊ：り産生されたヒトモノクローナル抗体を、
目的とする血清型を有する緑膿菌又は緑膿菌ＬＰＳを固
定したプレートを用いて、酵素抗体法を用いて行う事が
できる。全ての緑膿菌の血清型に反応するヒトモノクロ
ーナル抗体を得る為には、睨在知られでいる１６種類（
Ｈ６ｍ１ｕａの分類）の異なる血清型の緑膿菌を使用し
なくてはならない。これらの緑膿菌は、アメリカンタイ
プカルチャーコレクション（ΔＴＣＣ＞の様な菌株保存
機関より入手できる。目的とする緑膿菌に対しモノクロ
ーナル抗体を分泌する形質転換細胞は、次にクローニン
グによりクローン化細胞にしなくてはならない。
Ｓを有する緑膿菌を選ぶ。次にヒトのリンパ球を扁桃腺
、リンパ節、牌臓及び末梢血等の組織からモノヌクリア
ーセル（単核細胞）として調製する。モノヌクリアーセ
ルを５日〜７日、ポークライードマイトジェン等のマイ
ト−ジエンの添加もしくは無添加の条件下で、５％ＣＯ
２インキエベーターで培養し、その培養上清液中の抗体
を、緑膿菌を固定したプレートで酵素抗体法により測定
し、望ましいモノヌクリアーセルを含む組織を選ぶ。こ
の組織の細胞をＥ−Ｂウィルスに感染させ、約２〜３週
間５％ＣＯ２インキュベーターで培養し、多くの異質集
落から成る形質転換細胞（トランスフＡ−ムドセル）を
形成させる。次に、この形質転換細胞から、緑膿菌Ｌ
Ｐ Ｓに対し特異的なヒトモノクローナル抗体を分泌す
るものだ（プを選別する。この選別工程は、異なる形質
転換細胞Ｊ：り産生されたヒトモノクローナル抗体を、
目的とする血清型を有する緑膿菌又は緑膿菌ＬＰＳを固
定したプレートを用いて、酵素抗体法を用いて行う事が
できる。全ての緑膿菌の血清型に反応するヒトモノクロ
ーナル抗体を得る為には、睨在知られでいる１６種類（
Ｈ６ｍ１ｕａの分類）の異なる血清型の緑膿菌を使用し
なくてはならない。これらの緑膿菌は、アメリカンタイ
プカルチャーコレクション（ΔＴＣＣ＞の様な菌株保存
機関より入手できる。目的とする緑膿菌に対しモノクロ
ーナル抗体を分泌する形質転換細胞は、次にクローニン
グによりクローン化細胞にしなくてはならない。
この工程は、具体的には、軟寒天法を用い行う事ができ
る。約２〜３週間後、軟寒天中で生育したコロニーを拾
い、再び酵素抗体法で緑膿菌に対する抗体活性を調べ選
別する。選別したＥ−８ウイルス形質転換細胞を培養し
て、例えば所望のＬＰＳ特異的ヒトモノクローナル抗体
を生成させる。
る。約２〜３週間後、軟寒天中で生育したコロニーを拾
い、再び酵素抗体法で緑膿菌に対する抗体活性を調べ選
別する。選別したＥ−８ウイルス形質転換細胞を培養し
て、例えば所望のＬＰＳ特異的ヒトモノクローナル抗体
を生成させる。
クローニングによって選択された、本発明の抗抗緑廃菌
ヒト抗体を産生ずる形質転換ヒ］〜細胞は、凍結して保
存することができ、また、これを適当な方法で大量に培
養することもできる。かかるセルライン（細胞株）又は
複製された細胞も本発明の範囲に含まれるものである。
ヒト抗体を産生ずる形質転換ヒ］〜細胞は、凍結して保
存することができ、また、これを適当な方法で大量に培
養することもできる。かかるセルライン（細胞株）又は
複製された細胞も本発明の範囲に含まれるものである。
また、クローン化された細胞と実質的に同一の抗緑膿菌
ヒト抗体を産生ずるに限り、その変異株等も本発明の範
囲に含まれる。
ヒト抗体を産生ずるに限り、その変異株等も本発明の範
囲に含まれる。
（ホ）発明の効果
本発明の形質転換ヒト細胞を、適当な方法で大量に培養
すると、培養上清から、例えば、緑膿菌のＬＰＳに特異
的に結合するモノクローナルな抗緑膿菌ヒト抗体を得る
ことができる。また、この細胞を動物に移植して肝癌化
し、その腹水や血清から抗緑膿菌ヒト抗体を得ることも
できる。抗緑朧菌ヒト抗体の精製は、モノクローナル抗
体を用いるアフィニテイクロマトグラフイー等の方法に
よって行なわれる。
すると、培養上清から、例えば、緑膿菌のＬＰＳに特異
的に結合するモノクローナルな抗緑膿菌ヒト抗体を得る
ことができる。また、この細胞を動物に移植して肝癌化
し、その腹水や血清から抗緑膿菌ヒト抗体を得ることも
できる。抗緑朧菌ヒト抗体の精製は、モノクローナル抗
体を用いるアフィニテイクロマトグラフイー等の方法に
よって行なわれる。
本発明の形質転換ヒト細胞は、例えば、緑膿菌のしＰＳ
に特異的に結合するヒトモノクローナル抗体を提供し、
かかる抗緑膿菌抗体は、緑膿菌感染症の患者に投与する
事により、血中１こ抗ＬＰＳ抗体の力価を有意に上背せ
しめ、治療を達成する事ができる。また、モノクローナ
ル抗体は、高い精度と信頼度をもつ緑膿菌の検査試薬や
標識試薬などに応用ができる。
に特異的に結合するヒトモノクローナル抗体を提供し、
かかる抗緑膿菌抗体は、緑膿菌感染症の患者に投与する
事により、血中１こ抗ＬＰＳ抗体の力価を有意に上背せ
しめ、治療を達成する事ができる。また、モノクローナ
ル抗体は、高い精度と信頼度をもつ緑膿菌の検査試薬や
標識試薬などに応用ができる。
（へ）実施例
以下、実施例により本発明を詳述する。
実施例１
健常人より丁Ｏｄのヘパリン加静脈血を入手した。
これから、フィコールパック液で処理し、リンパ球画分
を含むモノヌクリアーセルを単離した。このモノヌクリ
アーセル５×１０６個ニ、Ｂ９５−８株（７）培養上清
中に含まれるＥ−Ｂウィルス（トランスフォーメーショ
ンドース５０ＴＤ印、１０５／ｄ）を、ｍ、ｏ、ｉ、（
感染の多重性）を０．１として感染させた。
を含むモノヌクリアーセルを単離した。このモノヌクリ
アーセル５×１０６個ニ、Ｂ９５−８株（７）培養上清
中に含まれるＥ−Ｂウィルス（トランスフォーメーショ
ンドース５０ＴＤ印、１０５／ｄ）を、ｍ、ｏ、ｉ、（
感染の多重性）を０．１として感染させた。
次いで、２Ｘ１０５／ｄになる様に、２０％ＦＣ８ＲＰ
ＭＩ培地で希釈を行い、その１００μρづつを９６穴平
底プレートに入れ、約２週間ＣＯ２インキュベーターで
培養を行った。生育した形質転換細胞の培養上清液を、
緑膿菌をコーティングしたプレートでＥＬＩＳＡ法によ
りアッセイした結果、ｌ−１１−１ｏ標準面清型１．４
．５のそれぞれの菌株に対応する上清液を産生ずる形質
転換細胞を選別することができた。軟寒天培養でこれら
の細胞をクローニングし、第１表のような、抗緑膿菌ヒ
トモノクローナル抗体を産生ずる形質転換ヒト細胞株を
樹立した。
ＭＩ培地で希釈を行い、その１００μρづつを９６穴平
底プレートに入れ、約２週間ＣＯ２インキュベーターで
培養を行った。生育した形質転換細胞の培養上清液を、
緑膿菌をコーティングしたプレートでＥＬＩＳＡ法によ
りアッセイした結果、ｌ−１１−１ｏ標準面清型１．４
．５のそれぞれの菌株に対応する上清液を産生ずる形質
転換細胞を選別することができた。軟寒天培養でこれら
の細胞をクローニングし、第１表のような、抗緑膿菌ヒ
トモノクローナル抗体を産生ずる形質転換ヒト細胞株を
樹立した。
第１表
＊単離精製したＬＰＳを拮抗阻害物として用い、インヒ
ビジョンテストで決定した。
ビジョンテストで決定した。
１１ 一
実施例２
実施例１とは異る健常人よりへ！（１ノンカ■静１１ｆ
ｔ血を入手した。実施例１と同じ方法で、抗緑膿菌ヒト
モノクローナル抗体を産生ずるＥ−Ｂウィルレス形質転
換ヒト細胞をクローニングした。その結果を第２表に示
した。
ｔ血を入手した。実施例１と同じ方法で、抗緑膿菌ヒト
モノクローナル抗体を産生ずるＥ−Ｂウィルレス形質転
換ヒト細胞をクローニングした。その結果を第２表に示
した。
〈以下余白）
Ｈｏｍｍａ標準血清型６型、１０型のそれぞれの菌株に
反応するモノクローナル抗体を産生ずる形質転換ヒト細
胞株が樹立できた。また、５Ｅ１１株は、２型、７型、
１３型のいずれにも反応するというブロードな性質を示
した。
反応するモノクローナル抗体を産生ずる形質転換ヒト細
胞株が樹立できた。また、５Ｅ１１株は、２型、７型、
１３型のいずれにも反応するというブロードな性質を示
した。
実施例３
異る健常人よりヘパリン加面静脈面を入手した。
実施例１と同じ方法で、抗緑膿菌ヒトモノクローナル抗
体を産生ずるＥ−Ｂウィルス形質転換細胞をクローニン
グした。そのクローニング細胞株の性状を第３表に示し
た。
体を産生ずるＥ−Ｂウィルス形質転換細胞をクローニン
グした。そのクローニング細胞株の性状を第３表に示し
た。
第３表
１５一
実施例４
扁桃腺細胞をヒト扁桃腺より調製し、実施例１と同じ方
法で、抗緑膿菌ヒトモノクローナル抗体を産生ずるＥ−
Ｂウィルス形質転換細胞４−３Ｄ８をクローニングした
。４−３Ｄ８はＩ（ＩＭで、＠ ｏｍｍａ標準血清型ｔ
ＶＩ）ｅ ５とのみ反応した。
法で、抗緑膿菌ヒトモノクローナル抗体を産生ずるＥ−
Ｂウィルス形質転換細胞４−３Ｄ８をクローニングした
。４−３Ｄ８はＩ（ＩＭで、＠ ｏｍｍａ標準血清型ｔ
ＶＩ）ｅ ５とのみ反応した。
次に、血清型がｔｌ／Ｉ）ｅ ５に属する緑膿菌８株と
の結合特異性を調べたところ、第４表に示したように、
８株中８株に反応した。
の結合特異性を調べたところ、第４表に示したように、
８株中８株に反応した。
（以下余白）
１６一
実施例５
緑膿菌０−６４株（Ｈｏｍｍａ ｔｙｐｅ６ ）をＴ
ＣＲｖウス（４週令、雄、一群５匹〉の腹腔に１ｘ１
０８個（３ＬＤｓｏ）感染後１時間して、実施例２で得
られた形質転換細胞Ｓ Ｅ、１０より粗精製（硫酸アン
モニウム沈澱）したモノクローナル抗体（ＭＣＡ−Ｓ
Ｅ １０）を投与し、感染防御が成立するかどうか調べ
た。５ＥＩＯの産生ずる抗体量は、シングルラディアル
イミュノディフユージョン法により算出した。コントロ
ールモノクローナル抗体として、実施例４０しｙｐｅ
５に反応する４−−３Ｄ８（ＭＣＡ４−−３Ｄ８（を用
いた。
ＣＲｖウス（４週令、雄、一群５匹〉の腹腔に１ｘ１
０８個（３ＬＤｓｏ）感染後１時間して、実施例２で得
られた形質転換細胞Ｓ Ｅ、１０より粗精製（硫酸アン
モニウム沈澱）したモノクローナル抗体（ＭＣＡ−Ｓ
Ｅ １０）を投与し、感染防御が成立するかどうか調べ
た。５ＥＩＯの産生ずる抗体量は、シングルラディアル
イミュノディフユージョン法により算出した。コントロ
ールモノクローナル抗体として、実施例４０しｙｐｅ
５に反応する４−−３Ｄ８（ＭＣＡ４−−３Ｄ８（を用
いた。
結果を第５表に示した。
第５表
＊マウスの生存率
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、ヒトの抗緑膿菌抗体産生細胞にエプスタイン・バー
・ウィルスを感染させて得られた、抗緑膿菌ヒト抗体を
産生する形質転換ヒト細胞及びそれに由来する細胞株。 ２、産生される抗緑膿菌ヒト抗体が緑膿菌のリポ多糖を
認識する抗体である、特許請求の範囲第１項記載の形質
転換ヒト細胞及びそれに由来する細胞株。 ３、産生される抗緑膿菌ヒト抗体が、リポ多糖のＯ−多
糖側鎖を認識する抗体である、特許請求の範囲第２項記
載の形質転換細胞及びそれに由来する細胞株。 ４、産生される抗緑膿菌ヒト抗体がＩｇＧ抗体又はＩｇ
Ｍ抗体である、特許請求の範囲第１項又は第２項記載の
形質転換ヒト細胞及びそれに由来する細胞株。 ５、ヒトの抗体産生細胞組織から抗緑膿菌抗体を産生す
る細胞を多く含む組織を選別し、該組織の細胞にエプス
タイン・バー・ウスルスを感染させて形質転換細胞を作
成し、次いで該形質転換細胞から抗緑膿菌ヒト抗体を産
生する細胞を選別することを特徴とする、抗緑膿菌ヒト
抗体を産生する形質転換ヒト細胞の製造法。 ６、増殖せしめた細胞から抗緑膿菌ヒト抗体を得るため
に、増殖用の細胞として、ヒトの抗緑膿菌抗体産生細胞
にエプスタイン・バー・ウィルスを感染させて得られた
、抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形質転換ヒト細胞及び／
又はそれに由来する細胞株を使用することを特徴とする
方法。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59273155A JPS61152280A (ja) | 1984-12-26 | 1984-12-26 | 抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形質転換細胞及びその製造法並びにその使用方法 |
| AU53093/86A AU597877B2 (en) | 1984-12-26 | 1985-12-20 | Anti-pseudomonas aeruginosa human monoclonal antibody |
| PCT/JP1985/000698 WO1986003754A1 (en) | 1984-12-26 | 1985-12-20 | Anti-pseudomonas aeruginosa human monoclonal antibody |
| AT86900258T ATE86634T1 (de) | 1984-12-26 | 1985-12-20 | Humaner monoklonaler antikoerper gegen pseudomonas aeruginosagegen pseudomonas aeruginosa produzierende hybridomen. |
| DE8686900258T DE3587178T2 (de) | 1984-12-26 | 1985-12-20 | Humaner monoklonaler antikoerper gegen pseudomonas aeruginosagegen pseudomonas aeruginosa produzierende hybridomen. |
| EP86900258A EP0233289B1 (en) | 1984-12-26 | 1985-12-20 | Hybridomas producing anti-pseudomonas aeruginosa human monoclonal antibody |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59273155A JPS61152280A (ja) | 1984-12-26 | 1984-12-26 | 抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形質転換細胞及びその製造法並びにその使用方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61152280A true JPS61152280A (ja) | 1986-07-10 |
Family
ID=17523873
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59273155A Pending JPS61152280A (ja) | 1984-12-26 | 1984-12-26 | 抗緑膿菌ヒト抗体を産生する形質転換細胞及びその製造法並びにその使用方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61152280A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61152281A (ja) * | 1984-12-26 | 1986-07-10 | Teijin Ltd | 抗緑膿菌ヒト抗体を産生するマウス−ヒトハイブリド−マ及びその製造法並びにその使用方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5929622A (ja) * | 1982-08-10 | 1984-02-16 | Meiji Seika Kaisha Ltd | モノクロ−ナル抗体、その製造法およびその用途 |
| JPS59137497A (ja) * | 1983-01-20 | 1984-08-07 | ザ・リ−ジエンツ・オブ・ザ・ユニバ−シテイ・オブ・カリフオルニア | 抗原特異的免疫グロブリン生産性ヒト／ヒトハイブリド−マ及びその生産する抗体 |
| JPS60248626A (ja) * | 1984-05-25 | 1985-12-09 | Mitsui Toatsu Chem Inc | 緑膿菌感染症の予防治療剤 |
| JPS6169796A (ja) * | 1984-05-25 | 1986-04-10 | ジエネテイク システムズ コ−ポレイシヨン | ヒトモノクロ−ナル抗体 |
-
1984
- 1984-12-26 JP JP59273155A patent/JPS61152280A/ja active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| JPS6169796A (ja) * | 1984-05-25 | 1986-04-10 | ジエネテイク システムズ コ−ポレイシヨン | ヒトモノクロ−ナル抗体 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61152281A (ja) * | 1984-12-26 | 1986-07-10 | Teijin Ltd | 抗緑膿菌ヒト抗体を産生するマウス−ヒトハイブリド−マ及びその製造法並びにその使用方法 |
| JPH0355106B2 (ja) * | 1984-12-26 | 1991-08-22 |
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