JPS6043392A - Ｌ−トリプトフアンの製造法 - Google Patents
Ｌ−トリプトフアンの製造法Info
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- JPS6043392A JPS6043392A JP15095483A JP15095483A JPS6043392A JP S6043392 A JPS6043392 A JP S6043392A JP 15095483 A JP15095483 A JP 15095483A JP 15095483 A JP15095483 A JP 15095483A JP S6043392 A JPS6043392 A JP S6043392A
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- Japan
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- tryptophan
- bacterium
- anthranilic acid
- acid
- bacillus
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
枝ｊじ汀り
本発明は、アントラニル酸に耐性を有し口つＩ。
−トリプトファン生産能を有する菌を用いる１，−トリ
プトファンの製造法に関し、更に詳しくは、アンＩ・ラ
ニル酸耐性菌由来のＤＮＡを供ｉｊ体Ｔ）Ｎ（１） Ａとし、アントラニル酸耐性度か低い１，トリプトファ
ン るごとによって得られた形質転換菌を用いろ１，−トリ
プトファンの製造法に関する。
プトファンの製造法に関し、更に詳しくは、アンＩ・ラ
ニル酸耐性菌由来のＤＮＡを供ｉｊ体Ｔ）Ｎ（１） Ａとし、アントラニル酸耐性度か低い１，トリプトファ
ン るごとによって得られた形質転換菌を用いろ１，−トリ
プトファンの製造法に関する。
従迷」苅籟
Ｌ−トリプトファン
な化合物であり、特に栄養ｙ的に不足しやすい物質であ
るため、その経済的な製箔法の開発が・１・１［＜望ま
れＣいる。かかる観点からｔｊ（： ＡＧ種〕７の化学
的又は微生物学的合成〃、か提唱されていぼ１。
るため、その経済的な製箔法の開発が・１・１［＜望ま
れＣいる。かかる観点からｔｊ（： ＡＧ種〕７の化学
的又は微生物学的合成〃、か提唱されていぼ１。
しかしながら、これらの６法は反ｊ，１−、ｌ’ｉ匁＋
選択１１１に問題があり、必ずしもｌｒＹｉ足出来るも
のではなかった。近年、醗酵法に，ＬるＬ−トリブ１ソ
アンのｒｔＡ造においては、経済的な観ｊ：．ｊからア
ン１−ラニル酸を前駆物質とする方性か開発され実用に
（」（されているが、比較的多口のアン１−ラニル酸又
はその塩を培養物中に添加すると１，−トリプトファン
の生合成が阻害されるノコめ高濃度の１．−ｌリグトフ
ァン含有培養液を得ることば口」難であり、より高い生
産性を目指すうえでのＩｌｊｔ害、となってい〕、。か
（２） かる現状から、近年、アントラニル酸耐性を有する微生
物を利用して微生物学的方法でアントラニル酸又はその
塩からＬ−ｌ・リプトファンを製造する方θ局（提唱さ
れている（例えば、特開昭５６−２９９９８号公報参照
）。
選択１１１に問題があり、必ずしもｌｒＹｉ足出来るも
のではなかった。近年、醗酵法に，ＬるＬ−トリブ１ソ
アンのｒｔＡ造においては、経済的な観ｊ：．ｊからア
ン１−ラニル酸を前駆物質とする方性か開発され実用に
（」（されているが、比較的多口のアン１−ラニル酸又
はその塩を培養物中に添加すると１，−トリプトファン
の生合成が阻害されるノコめ高濃度の１．−ｌリグトフ
ァン含有培養液を得ることば口」難であり、より高い生
産性を目指すうえでのＩｌｊｔ害、となってい〕、。か
（２） かる現状から、近年、アントラニル酸耐性を有する微生
物を利用して微生物学的方法でアントラニル酸又はその
塩からＬ−ｌ・リプトファンを製造する方θ局（提唱さ
れている（例えば、特開昭５６−２９９９８号公報参照
）。
介１１！７ｉ−Ｑ−目的玖（ド横夕１！一本発明者等も
醗−ＩＶ法によって高い濃度のアン１フニル酸又はその
塩を含む培地においてＬ−１−リゾ１フアン培養液を製
造する方法について鋭意研究を進めた結果、アントラニ
ル酸に面１性を有しロー月７−１−リプトソアン生産能
を有する菌をアントラニル酸又はその塩を含む培地で培
浄して培養物中に１．−トリプｌ、ファンを生成・ＩＬ
め、これを採１１Ｗ ’３−ることから成る１７−トリ
プトファンの製造法が１２？供され、前記菌としては、
アントラニル酸耐性菌由来の１）Ｎ八を供」う９体１）
Ｎ Ａとし、アントラニル酸嗣１１１度の１１（い１
．−１− ＩＪブトファン生産性菌を受容菌として形質
転換−ＩＬめることによって得られ）こ形質転換菌、特
にバチルス５ｌｌ−４１を使用するごとにより所期の］
」的を達成しｆＵることを（３） 見出した。
醗−ＩＶ法によって高い濃度のアン１フニル酸又はその
塩を含む培地においてＬ−１−リゾ１フアン培養液を製
造する方法について鋭意研究を進めた結果、アントラニ
ル酸に面１性を有しロー月７−１−リプトソアン生産能
を有する菌をアントラニル酸又はその塩を含む培地で培
浄して培養物中に１．−トリプｌ、ファンを生成・ＩＬ
め、これを採１１Ｗ ’３−ることから成る１７−トリ
プトファンの製造法が１２？供され、前記菌としては、
アントラニル酸耐性菌由来の１）Ｎ八を供」う９体１）
Ｎ Ａとし、アントラニル酸嗣１１１度の１１（い１
．−１− ＩＪブトファン生産性菌を受容菌として形質
転換−ＩＬめることによって得られ）こ形質転換菌、特
にバチルス５ｌｌ−４１を使用するごとにより所期の］
」的を達成しｆＵることを（３） 見出した。
灸■！す１に玖μ卆逮。の」、俸的哉泗−以下、本発明
に係る１、、 −トリプトファン法について更に詳細に
説明する。
に係る１、、 −トリプトファン法について更に詳細に
説明する。
本発明方法に於て使用するバチルス・ズブチルスＳＤ−
４ １は以下のようにして得た。
４ １は以下のようにして得た。
Ｖ乙乙し乞ミ火醇耐法菌−Φ夕濁１
本発明者等はアントラニル酸銅性菌のＥ安として比較的
高濃度のアントラニル酸を含有する培地にて■、−トリ
プトファンを生成蓄積する能力を有する菌を以下のよう
にして選抜した。即し、東京都大田区多摩川の土壌１ｇ
を生理食塩水［Ｏｍｌに懸濁し、この懸濁液を８０℃で
２０分間加熱し、適当に希釈した希釈液０．１ｍｌを肉
ン１寒天培地に塗布し、３０℃で４８時間培養し、菌株
を純粋分離した。これらの菌株のうち、グラム陽性を有
し、澱粉を加水分解し、酸素に対して好気性を示し且つ
胞子形成能を有する菌を選択し、アントラニル酸１ ０
０ ０ ｐｐｍを含有するスピザイゼン培地にて培養
してＩ２−１−リプトファン生産能を有する菌を得（４
） た。
高濃度のアントラニル酸を含有する培地にて■、−トリ
プトファンを生成蓄積する能力を有する菌を以下のよう
にして選抜した。即し、東京都大田区多摩川の土壌１ｇ
を生理食塩水［Ｏｍｌに懸濁し、この懸濁液を８０℃で
２０分間加熱し、適当に希釈した希釈液０．１ｍｌを肉
ン１寒天培地に塗布し、３０℃で４８時間培養し、菌株
を純粋分離した。これらの菌株のうち、グラム陽性を有
し、澱粉を加水分解し、酸素に対して好気性を示し且つ
胞子形成能を有する菌を選択し、アントラニル酸１ ０
０ ０ ｐｐｍを含有するスピザイゼン培地にて培養
してＩ２−１−リプトファン生産能を有する菌を得（４
） た。
このようにして１７られノこ原株のＬ−トリプトファン
生産１１ヒを高めるため、原株を更に常法に従ってＮ−
メーｆールーＮ′−二ｌ− １：Ｊ − ｐＪ−二トロ
ソグアニジン（ＮＴＣ）を用いて人工突然変異誘発処理
し、ごの変５■処理株を５−フルオロトリプトファン（
５−１に「゛）を添加した培地で仕青さ・Ｕ、数百のコ
ｌに一についてそれぞれＬ−トリプトファンの生産性を
調べ、この中がらＬ−トリプトファン生産能の高い５
− Ｆ ＴｉＪ性株ＳＤ−４ ０を選抜しノこ。
生産１１ヒを高めるため、原株を更に常法に従ってＮ−
メーｆールーＮ′−二ｌ− １：Ｊ − ｐＪ−二トロ
ソグアニジン（ＮＴＣ）を用いて人工突然変異誘発処理
し、ごの変５■処理株を５−フルオロトリプトファン（
５−１に「゛）を添加した培地で仕青さ・Ｕ、数百のコ
ｌに一についてそれぞれＬ−トリプトファンの生産性を
調べ、この中がらＬ−トリプトファン生産能の高い５
− Ｆ ＴｉＪ性株ＳＤ−４ ０を選抜しノこ。
尚、培養は各種濃度アントラニル酸を含むスピーリ・イ
セン培１１ｎ５ｍｌを試験管（１８Ｘ１８０＋＋＋＋ｎ
）に入れ、種菌を接種後３７℃、１６時間振盪で行い、
培地中の生成１，−トリプトファン （スピリ′イゼン培池） （ＮＩ＋７１）２Ｓ（１４ ２ ｇ − Ｋｚｌｌｒ’
０４ １ ４ ｇ１ＫｌｌｚＰＯ４６■、クエン酸すト
リウム・２１１λｏ Ｉｇ、及び蒸留水 ８００ｍｌ これに次のものを別々に滅菌して加える。
セン培１１ｎ５ｍｌを試験管（１８Ｘ１８０＋＋＋＋ｎ
）に入れ、種菌を接種後３７℃、１６時間振盪で行い、
培地中の生成１，−トリプトファン （スピリ′イゼン培池） （ＮＩ＋７１）２Ｓ（１４ ２ ｇ − Ｋｚｌｌｒ’
０４ １ ４ ｇ１ＫｌｌｚＰＯ４６■、クエン酸すト
リウム・２１１λｏ Ｉｇ、及び蒸留水 ８００ｍｌ これに次のものを別々に滅菌して加える。
（５）
ＭｇＳＯ４ ’ ７ １１２０ ０． ２ ｇ 蒸留水
１００＋ｎｌブ１：つ糖 ５ｇ 蒸留水 １００ｍｌ
このようにして得られ六二Ｓｌ）４０は、以下に述べる
ような菌学的（’ｌ質をイ１し、バージニーＣズ・マニ
ュアル・オブ・ディタミネイうーイゾ°ハクラーリオロ
シー第８版によｔ′）バチルス・ズブチルスに属する菌
であると同定された。
１００＋ｎｌブ１：つ糖 ５ｇ 蒸留水 １００ｍｌ
このようにして得られ六二Ｓｌ）４０は、以下に述べる
ような菌学的（’ｌ質をイ１し、バージニーＣズ・マニ
ュアル・オブ・ディタミネイうーイゾ°ハクラーリオロ
シー第８版によｔ′）バチルス・ズブチルスに属する菌
であると同定された。
以下余白
（６）
５ｌ−）−ニー−４−Ｑ−の洋ｉ−９’「白１１１．司
ダラム染色：陽（’１ 形 態 ：桿菌 大きさ ；０．７〜ｎ、 ８ ｔｔ ｘ、 ２．０〜３
． Ｏｐ多形性 ：なし 運動性 ：あり 鞭 ［Ｌ ： Ｌ’７１ ’Ｖｆ１１ 胞 了 ：形成する。０．９〜１．０μ×１．０〜１、
５ ｔｌ、卵型 抗酸性 ：なＬ７ 集合形態、 ＩＪ’ｊ−又り、１連鎖状、（？−りりＩ
」所−レξ 肉ン１１人Ｖ１７１及：ηイＩ良好、灰白色不透明コロ
ニーを形成、黄褐色の色素を生成 肉汁寒天斜面、 ＺＬ育良好 肉ン１液体 ： 〜 、表■１に膜形成、液かすかに濁
る 肉汁セラチン穿４・す：液・化する りＩ・マスミルク：アルカリ性を示す、凝固−１ず（７
） 一す］」」ＩＩ倶℃Ｗ 硝酸塩の還元 ：１− 脱窒反応 ニー ＭＲテスト ニー ■Ｐテスト ；＋ インドールの生成ニー 硫化水素の生成（酢酸鉛）ニー デンプンの加水分解ニー１ クエン酸の利用（コーザー培ＩＩ！り：１硝酸塩の利用
二十 アンモニウム塩 ：→− ウレアーゼ：＋ オキシダーゼ二十 カタラーゼ二十 生育の範囲（ｐＨ） ： ５． Ｏ〜８．６（温度）；
２０℃〜４０℃ 酸素に対する態度：好気的 ＯＦテスト二〇 （８） −＜−４−）−糖↓ｎ−グーζψ醇１１ｔζ莢人介生苅
ｐ裏Ｉ岨化茸−１、’ｊ−−− 類 醇−新−ノ−司化
−１１Ｌグリセリン １−−− Ｌ−アラヒノース 」 ± Ｄ−；１−シ■−ス →−−十 １）−グルコース 十 −＋ Ｄ−マンノース ＋ −十 り−フラクト−ス ］−十 Ｄ−ガシクト−ス −）−−Ｉ マル１・−ス ＋ −＋ シュクロース ＋ −十 １〕−ラクト−ス −−→ １−レバに１−ス −ト − 」 Ｉ〕−ソルヒト−ル −−」− Ｄ−マニト−ル −１−−＋ イノシトール スターチ 。
ダラム染色：陽（’１ 形 態 ：桿菌 大きさ ；０．７〜ｎ、 ８ ｔｔ ｘ、 ２．０〜３
． Ｏｐ多形性 ：なし 運動性 ：あり 鞭 ［Ｌ ： Ｌ’７１ ’Ｖｆ１１ 胞 了 ：形成する。０．９〜１．０μ×１．０〜１、
５ ｔｌ、卵型 抗酸性 ：なＬ７ 集合形態、 ＩＪ’ｊ−又り、１連鎖状、（？−りりＩ
」所−レξ 肉ン１１人Ｖ１７１及：ηイＩ良好、灰白色不透明コロ
ニーを形成、黄褐色の色素を生成 肉汁寒天斜面、 ＺＬ育良好 肉ン１液体 ： 〜 、表■１に膜形成、液かすかに濁
る 肉汁セラチン穿４・す：液・化する りＩ・マスミルク：アルカリ性を示す、凝固−１ず（７
） 一す］」」ＩＩ倶℃Ｗ 硝酸塩の還元 ：１− 脱窒反応 ニー ＭＲテスト ニー ■Ｐテスト ；＋ インドールの生成ニー 硫化水素の生成（酢酸鉛）ニー デンプンの加水分解ニー１ クエン酸の利用（コーザー培ＩＩ！り：１硝酸塩の利用
二十 アンモニウム塩 ：→− ウレアーゼ：＋ オキシダーゼ二十 カタラーゼ二十 生育の範囲（ｐＨ） ： ５． Ｏ〜８．６（温度）；
２０℃〜４０℃ 酸素に対する態度：好気的 ＯＦテスト二〇 （８） −＜−４−）−糖↓ｎ−グーζψ醇１１ｔζ莢人介生苅
ｐ裏Ｉ岨化茸−１、’ｊ−−− 類 醇−新−ノ−司化
−１１Ｌグリセリン １−−− Ｌ−アラヒノース 」 ± Ｄ−；１−シ■−ス →−−十 １）−グルコース 十 −＋ Ｄ−マンノース ＋ −十 り−フラクト−ス ］−十 Ｄ−ガシクト−ス −）−−Ｉ マル１・−ス ＋ −＋ シュクロース ＋ −十 １〕−ラクト−ス −−→ １−レバに１−ス −ト − 」 Ｉ〕−ソルヒト−ル −−」− Ｄ−マニト−ル −１−−＋ イノシトール スターチ 。
（９）
超Ｊす１住」ト家工Ａｐ−１吐串分濤１［」二で得たバ
チルス・スフチルスＳｌ）４０をＰｅｎａｓｓａｙ培地
（米国デイフ：１社）５ｍ１中で一夜イ１イｉ′させ、
これをＰｅｎ ａｓｓａｙ培地１７！に接種し、６〔；
Ｏｎｍの吸光度が０．５になるまで４に育さｍｌた。培
養液を遠心分離し、細胞を望め、生理食塩水で洗浄した
。次に洗浄細胞を桜ｆ％行夜Ａ１５ｍｌ中に１−濁し、
リゾチーム（最終濃度１ ｍ＋＋／ ｍｌ）を添加し、
３７℃にて１貼間保持した。その後、１０％ラウリル硫
酸すトリウム水溶液３ｎ＋ｌを添加Ｉ〜、ｌＩＭ １＋
−＋後プロティナーゼＫ（西独メルクン１：） ｌ １
１１８を添加し、溶液を５０℃で１５分間保持後、等用
の飽和フェノール溶液を加え、混和した。この混合ｌｌ
シを８０００ ｒｐｍで１０分間遠心し、ｌ） Ｎ Ａ
を含む水層を回収しノコ（蛋白質を含む中間層は除去）
。ごの操１１を繰り返し、最終１） Ｎ Ａ ／８ ｌ
ｌ＊を−・夜桜ｉΦｉ ｌｌ＞八に透析し六−後、２倍
容■のエタノールを加え、−２ ４１℃に一夜保った。
チルス・スフチルスＳｌ）４０をＰｅｎａｓｓａｙ培地
（米国デイフ：１社）５ｍ１中で一夜イ１イｉ′させ、
これをＰｅｎ ａｓｓａｙ培地１７！に接種し、６〔；
Ｏｎｍの吸光度が０．５になるまで４に育さｍｌた。培
養液を遠心分離し、細胞を望め、生理食塩水で洗浄した
。次に洗浄細胞を桜ｆ％行夜Ａ１５ｍｌ中に１−濁し、
リゾチーム（最終濃度１ ｍ＋＋／ ｍｌ）を添加し、
３７℃にて１貼間保持した。その後、１０％ラウリル硫
酸すトリウム水溶液３ｎ＋ｌを添加Ｉ〜、ｌＩＭ １＋
−＋後プロティナーゼＫ（西独メルクン１：） ｌ １
１１８を添加し、溶液を５０℃で１５分間保持後、等用
の飽和フェノール溶液を加え、混和した。この混合ｌｌ
シを８０００ ｒｐｍで１０分間遠心し、ｌ） Ｎ Ａ
を含む水層を回収しノコ（蛋白質を含む中間層は除去）
。ごの操１１を繰り返し、最終１） Ｎ Ａ ／８ ｌ
ｌ＊を−・夜桜ｉΦｉ ｌｌ＞八に透析し六−後、２倍
容■のエタノールを加え、−２ ４１℃に一夜保った。
その後、このコータノール冷ｌｌｋを８ ０ ０ Ｏ
ｒｐｍで３０分間遠心して沈７４ｙ ＋′）Ｎ八を得た
。このＤＮＡば緩（（ｉン１１ｊＡにン容ＩＥして保存
し〕こ。
ｒｐｍで３０分間遠心して沈７４ｙ ＋′）Ｎ八を得た
。このＤＮＡば緩（（ｉン１１ｊＡにン容ＩＥして保存
し〕こ。
（１０）
１＋Ｕｆｌｉ？＋ｋ Ａ ： ５０ ｍＭＮａｃ＋及び
５０ｍＭＥＴ）ＴＡを含む５０ｍ旧・リス塩酸媛饅ｉ
ｌｌｋ、１＋ｌ１８．０ 劣形質−転携菌の７ＬＰ、？− １＝テｆ！７７：積！！、！Ｄ Ｎ Ａ （０，１〜ｌ
Ｉｔ ｇ ） ヲ、受容菌、例えば、バチルス・ズブ
チルスＧ１３１５３（米国オハイオ人パｖバチルス属菌
保存センター）、バチルス・スブチルス３１）−９（微
工研菌寄第１４８３１；ｊ、特開昭４９−、、２０３９
１号）バチルス・アミ１１リクイフアシコニンスＩＡＭ
１５２１の５Ｆ Ｔ １ｌｌｉＪ性菌、その４ｆｉｌ供
Ｉｊ体１） Ｎ Ａと相同性を有し１１つアンＩ・ラニ
ル１１１Ｑｌｌ］旧牛度が（氏いＬ−１−リフブトファ
ン生産閑に、公知の形質転換の方法（例えば、Ｃｏｍｐ
ｅ １．ｅｎ １． Ｉｃｅ ｌ ｌ法： Ｊ、１ｌａ
ｃｔｅｒｉ＋ｉｌ 倶１４（（１９６１）又４；Ｉ Ｐ
ｒｏＬｏ−ｐｌ＋ｉｓｔ法； Ｍｏ１ｅｃ、にｅｎ、Ｇ
ｅｎｅＬ、 １７９５８９（１４））＋０）など）によ
ってｒ＆り込ませる。尚、形質転換にあたり、その転換
の有無をＭｒ認するノこめ予め受容菌を公知の方法、例
えばＮＴＧによる突然変Ｗ誘発処理後ペニシリンスクリ
ーニング法等によりｉ巽抜してｌ、−１−リプトファン
要求性変異株（Ｔ ｒ ｐ−）に変換することが行われ
る。（１１シ、これは転換の有無を確認するための処理
−（あって６（１゜認法としては必ずしもこの方法にの
み限られるものではない。形質転換により１１］られた
菌の中からアン１ラニル酸を含むスピザイセン培地中で
生育−υ゛しめ親株より生成トリプトファンＩｉＪ度が
高いＹｖｌを選択することによって高濃度アン１−フニ
ル酸又はその塩の存在下において１、−１リプトソアン
１ｒｌｉ蓄積性を示す、所謂アン１−フニル酸耐性菌を
選１友することができる。
５０ｍＭＥＴ）ＴＡを含む５０ｍ旧・リス塩酸媛饅ｉ
ｌｌｋ、１＋ｌ１８．０ 劣形質−転携菌の７ＬＰ、？− １＝テｆ！７７：積！！、！Ｄ Ｎ Ａ （０，１〜ｌ
Ｉｔ ｇ ） ヲ、受容菌、例えば、バチルス・ズブ
チルスＧ１３１５３（米国オハイオ人パｖバチルス属菌
保存センター）、バチルス・スブチルス３１）−９（微
工研菌寄第１４８３１；ｊ、特開昭４９−、、２０３９
１号）バチルス・アミ１１リクイフアシコニンスＩＡＭ
１５２１の５Ｆ Ｔ １ｌｌｉＪ性菌、その４ｆｉｌ供
Ｉｊ体１） Ｎ Ａと相同性を有し１１つアンＩ・ラニ
ル１１１Ｑｌｌ］旧牛度が（氏いＬ−１−リフブトファ
ン生産閑に、公知の形質転換の方法（例えば、Ｃｏｍｐ
ｅ １．ｅｎ １． Ｉｃｅ ｌ ｌ法： Ｊ、１ｌａ
ｃｔｅｒｉ＋ｉｌ 倶１４（（１９６１）又４；Ｉ Ｐ
ｒｏＬｏ−ｐｌ＋ｉｓｔ法； Ｍｏ１ｅｃ、にｅｎ、Ｇ
ｅｎｅＬ、 １７９５８９（１４））＋０）など）によ
ってｒ＆り込ませる。尚、形質転換にあたり、その転換
の有無をＭｒ認するノこめ予め受容菌を公知の方法、例
えばＮＴＧによる突然変Ｗ誘発処理後ペニシリンスクリ
ーニング法等によりｉ巽抜してｌ、−１−リプトファン
要求性変異株（Ｔ ｒ ｐ−）に変換することが行われ
る。（１１シ、これは転換の有無を確認するための処理
−（あって６（１゜認法としては必ずしもこの方法にの
み限られるものではない。形質転換により１１］られた
菌の中からアン１ラニル酸を含むスピザイセン培地中で
生育−υ゛しめ親株より生成トリプトファンＩｉＪ度が
高いＹｖｌを選択することによって高濃度アン１−フニ
ル酸又はその塩の存在下において１、−１リプトソアン
１ｒｌｉ蓄積性を示す、所謂アン１−フニル酸耐性菌を
選１友することができる。
上記方法に従って、Ｓ １）−ｎ ｊ、すｆｊ７ノこト
リプＩ・ファン要求性（Ｔｒｐ−″）変Ｗ株を受容菌と
して、前記Ｓ Ｄ −４（ｌより得た染色体ＩＩ） Ｎ
Ａを供１」１体１）ＮＡとして形質転換しζ、アン１
〜ラニル酸耐性を有し且つｒ、 −＋−リプトファン高
生産性のトリプトファン 株はバチルスＳＤ−４ １と命名し、昭和５８年７月４
日工業技術院敞η−物工業技術研究ｒｉＪｉに一１ｆ託
（微］−研菌寄第７ １ ３ ５ ’；シ）した。
リプＩ・ファン要求性（Ｔｒｐ−″）変Ｗ株を受容菌と
して、前記Ｓ Ｄ −４（ｌより得た染色体ＩＩ） Ｎ
Ａを供１」１体１）ＮＡとして形質転換しζ、アン１
〜ラニル酸耐性を有し且つｒ、 −＋−リプトファン高
生産性のトリプトファン 株はバチルスＳＤ−４ １と命名し、昭和５８年７月４
日工業技術院敞η−物工業技術研究ｒｉＪｉに一１ｆ託
（微］−研菌寄第７ １ ３ ５ ’；シ）した。
旦エーニＡ↓の一菌慣的性一質−
−く↓ｐｊｊ４ｒ−貨り条ｒＢ ＜−合−重％Ｑｑ−）
Ｑすｊソ１↓↓−グラム染色：陽牲 形 態 ：桿菌 大きさ ： ０． ７〜０． ８ １１ Ｘ ２． ０
〜３． ０ １１多形性 ：なし 運動性 二あり 鞭 毛 ：周鞭毛 胞 了 ：形成する。０．９〜１．０μ×１．０〜］．
５ ｐ、卵型 抗酸性 ：なし 集合形態， 、ｉ−１′ｉ−又は連鎖状］−り一１ｆ５
．養所見− 肉汁寒天平板：生育良好、灰白色不透明なコロニーを形
成、黄褐色の色素を生 成 肉ン１寒入斜面：牛育良好 肉汁液体 ：〃、表面に膜形成、液が ずかに濁る 肉汁ゼラチン穿刺：液化する りｌ・マスミルク：アルカリ性を示す、凝固・ｌず（Ｉ
３） （３）生理学的性質 硝酸塩の還元 ：→ 脱窒反応 ニー ＭＲテスト ニー ＶＰテスト 二十 インドールの生成ニー 硫化水素の生成（酢酸鉛）ニー デンプンの加水分解：１ クエン酸の利用（コーザー培地）二重 硝酸塩の利用 二十 アンモニウム塩 ：＋ ウレアーゼ：＋ オキシダーゼ８十 カタラーゼ：＋ 生育の範囲（ｐＨ） ： ５． ０〜８．６（温度）：
２０℃〜４０℃ 酸素に対する態度：好気的 ＯＦテスト 二〇 （１４） （４）糖類などの酸化とガス発生並びに資化能グリセリ
ン 士 −− Ｌ−アラビノース 士 ± Ｄ−キシ１」−ス 十 −→− １）−グルコース ＋ （ ■）−ン ンノ −ス ＋ −−ト １〕−ソラク１−ス ト − ＋ （）−ガラクトース 」−−→− マルトース 十 −十 シュク１」−ス ← −＋ １）−ラクト−ス − −＋ トレハｒ、Ｉ−ス ＋ ＋ １〕−ソルビトール −−］− Ｄ＝７二 ト −ル ＋ −−−ト イフシ１−ル ＋ ＋ スターチ 、１ この菌株と、親株Ｓ １１−９とのＬ −トリプトファ
ン る。尚、培養はＰ−５と同じ（但し１２時間）。
Ｑすｊソ１↓↓−グラム染色：陽牲 形 態 ：桿菌 大きさ ： ０． ７〜０． ８ １１ Ｘ ２． ０
〜３． ０ １１多形性 ：なし 運動性 二あり 鞭 毛 ：周鞭毛 胞 了 ：形成する。０．９〜１．０μ×１．０〜］．
５ ｐ、卵型 抗酸性 ：なし 集合形態， 、ｉ−１′ｉ−又は連鎖状］−り一１ｆ５
．養所見− 肉汁寒天平板：生育良好、灰白色不透明なコロニーを形
成、黄褐色の色素を生 成 肉ン１寒入斜面：牛育良好 肉汁液体 ：〃、表面に膜形成、液が ずかに濁る 肉汁ゼラチン穿刺：液化する りｌ・マスミルク：アルカリ性を示す、凝固・ｌず（Ｉ
３） （３）生理学的性質 硝酸塩の還元 ：→ 脱窒反応 ニー ＭＲテスト ニー ＶＰテスト 二十 インドールの生成ニー 硫化水素の生成（酢酸鉛）ニー デンプンの加水分解：１ クエン酸の利用（コーザー培地）二重 硝酸塩の利用 二十 アンモニウム塩 ：＋ ウレアーゼ：＋ オキシダーゼ８十 カタラーゼ：＋ 生育の範囲（ｐＨ） ： ５． ０〜８．６（温度）：
２０℃〜４０℃ 酸素に対する態度：好気的 ＯＦテスト 二〇 （１４） （４）糖類などの酸化とガス発生並びに資化能グリセリ
ン 士 −− Ｌ−アラビノース 士 ± Ｄ−キシ１」−ス 十 −→− １）−グルコース ＋ （ ■）−ン ンノ −ス ＋ −−ト １〕−ソラク１−ス ト − ＋ （）−ガラクトース 」−−→− マルトース 十 −十 シュク１」−ス ← −＋ １）−ラクト−ス − −＋ トレハｒ、Ｉ−ス ＋ ＋ １〕−ソルビトール −−］− Ｄ＝７二 ト −ル ＋ −−−ト イフシ１−ル ＋ ＋ スターチ 、１ この菌株と、親株Ｓ １１−９とのＬ −トリプトファ
ン る。尚、培養はＰ−５と同じ（但し１２時間）。
紅
初発アントラ し−トリプトファン蓄積濃度ρｐｍニル
酸濃度ｐμｍ 圏）氾二」」− 菌〉−レニｐ−８０
１３ ８７ １６０ １６７ １０３ ２４０ ２４４ ８８ ３２０ ３１２ ９５ 本発明方法に従えば、バチルスＳｔ）−４１を一ｌント
ラニル酸又はその塩を含む栄養培地で培養することによ
りｌ、−トリプトファンを生成せしめることができる。
酸濃度ｐμｍ 圏）氾二」」− 菌〉−レニｐ−８０
１３ ８７ １６０ １６７ １０３ ２４０ ２４４ ８８ ３２０ ３１２ ９５ 本発明方法に従えば、バチルスＳｔ）−４１を一ｌント
ラニル酸又はその塩を含む栄養培地で培養することによ
りｌ、−トリプトファンを生成せしめることができる。
栄養培地中のアントラニル酸又はその塩の濃度には特に
限定はないが目的し一トリプトファンの収量、培養条件
及び経済的観点から一般には０． １ − ３ ０ ０
０ ｍｇ／ １、好ましくは１００ 〜Ｉ Ｏ ０
０ｍｇ／ｅの濃度とする。
限定はないが目的し一トリプトファンの収量、培養条件
及び経済的観点から一般には０． １ − ３ ０ ０
０ ｍｇ／ １、好ましくは１００ 〜Ｉ Ｏ ０
０ｍｇ／ｅの濃度とする。
本発明方法において使用することのできる培地としては
、前記微生物が培養により増殖し得るものであれば任意
のものでよく、例えば、炭素源としては、ブドウ糖、糖
蜜、蔗糖、澱粉、澱粉糖化液、セルロース分ＩＷ物等の
糖類、酢酸、エチルアルコール、グリセリンなど、窒素
源としては、アンモニア、硫安、塩安、硝安、燐安など
のアンモニウム塩や尿素、硝酸塩等が適宜使用される。
、前記微生物が培養により増殖し得るものであれば任意
のものでよく、例えば、炭素源としては、ブドウ糖、糖
蜜、蔗糖、澱粉、澱粉糖化液、セルロース分ＩＷ物等の
糖類、酢酸、エチルアルコール、グリセリンなど、窒素
源としては、アンモニア、硫安、塩安、硝安、燐安など
のアンモニウム塩や尿素、硝酸塩等が適宜使用される。
無機塩としては３Ａ酸、カリウム、マグネシウム、マン
ガン等の塩類、例えば燐酸アンモニウム、燐酸カリウム
、燐酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄、硫
酸マンガン、苛性カリ等の工業的薬品で良く、他に微量
元素としてカルシウム、亜鉛、硼素、銅、コバルト、モ
リブデン等の塩類を添加してもよく、また微匿有機栄養
素としてビタミン、アミノ酸、核酸関連物質等は菌の生
育上特に必要ではないが、これらを添加したり、肉エキ
ス、酵母エキス、コーンステイープリカー、ペプトン等
の有機物を添加してもよい。アントラニル酸はナトリウ
ム塩、カリウム塩、アンモニウム塩等の水溶液や遊離酸
のエタノール又はメタノール溶液として添力１目゛れば
良い。
ガン等の塩類、例えば燐酸アンモニウム、燐酸カリウム
、燐酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄、硫
酸マンガン、苛性カリ等の工業的薬品で良く、他に微量
元素としてカルシウム、亜鉛、硼素、銅、コバルト、モ
リブデン等の塩類を添加してもよく、また微匿有機栄養
素としてビタミン、アミノ酸、核酸関連物質等は菌の生
育上特に必要ではないが、これらを添加したり、肉エキ
ス、酵母エキス、コーンステイープリカー、ペプトン等
の有機物を添加してもよい。アントラニル酸はナトリウ
ム塩、カリウム塩、アンモニウム塩等の水溶液や遊離酸
のエタノール又はメタノール溶液として添力１目゛れば
良い。
（１７）
本発明方法における培養ば好気的条件下に、例えば通気
攪拌や往復振嚇方法によって培養することができる。培
養条件は、特に限定はないが、一般的に言えば、温度３
０〜４５℃、ｐｌ＋６．０〜８．０及び１５〜６０時間
程度の条件で実施する。
攪拌や往復振嚇方法によって培養することができる。培
養条件は、特に限定はないが、一般的に言えば、温度３
０〜４５℃、ｐｌ＋６．０〜８．０及び１５〜６０時間
程度の条件で実施する。
培養液又は培養物からの目的の■７ー１リプトファンの
採取方法は慣用方法に従って行・うごとができる。例え
ば、培養液を遠心分離し、その−に清からイオン交換樹
脂処理法、活性炭処理法などの操作を適宜組み合せてＬ
− １−リプトファンを単離することができる。
採取方法は慣用方法に従って行・うごとができる。例え
ば、培養液を遠心分離し、その−に清からイオン交換樹
脂処理法、活性炭処理法などの操作を適宜組み合せてＬ
− １−リプトファンを単離することができる。
実」缶−肘
以下に本発明の詳細な説明するが、本発明の範囲をこれ
らの実施例に限定するものでないことはいうまでもない
。
らの実施例に限定するものでないことはいうまでもない
。
例」−
グルコース５％、硫安０．２％、Ｋ２１１回４ １．４
％、Ｋｌ１２ＰＯ４ ０． ６％、クエン酸ナトリウム
・２１１ｚＯＩｇ， ＭｇＳＯ４ ・７ Ｈ２Ｌ０ ０
．０ ２％、ＦｅＳＯ４ ・７ ＩＩＪ ｌ！１１）ｍ
及びＭｎＳＯ４ １ ｐＩ）Ｉｎを含む液体培地（ ｐ
Ｈ７、 ０ ）（１８） ２１を５１ジャーファーメンタ−に入れアントラニル酸
すトリウム５００ ｐｐｍを添加し、常法により滅菌処
理後バチルス５Ｄ−４１を接種し、３５℃で１ｆｆｌ気
攪１１！培養した。培養中、アントラニル酸濃度が１１
００ｐｐ以下まで減少した時点でアントラニル酸すｉ・
リウムを１＆地中のアントラニル酸濃度が約１ （１０
０ｐｐ＋ｎになるよう適宜追加添加し、また培＃途中で
グルコースを１００ｇ追加し、更にアンモニア水の添加
により培地のｐｌ＋を７．０±０゜２に保ら乍ら３０時
間培養した。
％、Ｋｌ１２ＰＯ４ ０． ６％、クエン酸ナトリウム
・２１１ｚＯＩｇ， ＭｇＳＯ４ ・７ Ｈ２Ｌ０ ０
．０ ２％、ＦｅＳＯ４ ・７ ＩＩＪ ｌ！１１）ｍ
及びＭｎＳＯ４ １ ｐＩ）Ｉｎを含む液体培地（ ｐ
Ｈ７、 ０ ）（１８） ２１を５１ジャーファーメンタ−に入れアントラニル酸
すトリウム５００ ｐｐｍを添加し、常法により滅菌処
理後バチルス５Ｄ−４１を接種し、３５℃で１ｆｆｌ気
攪１１！培養した。培養中、アントラニル酸濃度が１１
００ｐｐ以下まで減少した時点でアントラニル酸すｉ・
リウムを１＆地中のアントラニル酸濃度が約１ （１０
０ｐｐ＋ｎになるよう適宜追加添加し、また培＃途中で
グルコースを１００ｇ追加し、更にアンモニア水の添加
により培地のｐｌ＋を７．０±０゜２に保ら乍ら３０時
間培養した。
Ｌ、 −１リプトファンの蓄積濃度は２３．５ ｇ ／
ｊ！、対アントラニル酸のモル収率は９８％であった
。
ｊ！、対アントラニル酸のモル収率は９８％であった
。
バチルスＳＤ−／ＩＩに代えてバチルス・ズブチルスＳ
ｌ） −９を用いた他は全て同様にして培養した結果
、Ｌ−１−リプＩ・ファンの蓄積濃度は８．９ｇ／ｐ１
対アン：・ラニル酸のモル収率ば９３％であっ人二。
ｌ） −９を用いた他は全て同様にして培養した結果
、Ｌ−１−リプＩ・ファンの蓄積濃度は８．９ｇ／ｐ１
対アン：・ラニル酸のモル収率ば９３％であっ人二。
一方、バチルス・ズブチルスｓｒ＋−４０を用いた他は
全てｉｉＩ記と同様にして培養した結果、Ｌ−トリプト
ファン トラニル酸のモル収率は７０％であった。
全てｉｉＩ記と同様にして培養した結果、Ｌ−トリプト
ファン トラニル酸のモル収率は７０％であった。
例↓
アントシェル酸の初発濃度を５ （ｌ ｐｐｍ 謁し、
培地中のアントラニルＭ１度が５ ０ ｐｐｍ以下にな
った時点で培地の了ントラニル酸濃度がｌ Ｏ Ｏ ｐ
ｐｍ以下になるよう培地中にアントシェル酸を適宜添加
して培養を実施した以外は、例１の方法に従って３０時
間培養せしめたとごろ、Ｌ−トリプ１ファンノ蓄積濃度
は１９。Ｏｇ／１４、対アントシェル酸のモル収率ば９
６％であっ）ご。
培地中のアントラニルＭ１度が５ ０ ｐｐｍ以下にな
った時点で培地の了ントラニル酸濃度がｌ Ｏ Ｏ ｐ
ｐｍ以下になるよう培地中にアントシェル酸を適宜添加
して培養を実施した以外は、例１の方法に従って３０時
間培養せしめたとごろ、Ｌ−トリプ１ファンノ蓄積濃度
は１９。Ｏｇ／１４、対アントシェル酸のモル収率ば９
６％であっ）ご。
手続補正書（自発）
昭和５８年１０月３日
特許庁長官 若杉 和夫殿
１、事件の表示
昭和５８年 特許願第１５０９５４号
２、発明の名称
Ｉ７−トリプトファンの製造法
３、補正をする者
事件との関係 特許出願人
名称（２０（１）昭和電工株式会社
４、代理人
住所 東京都港区虎ノ門−丁目８番１０号静光虎ノ門ビ
ル 〒１０５ 電話（５０４−）０７２１ ５、補正の対象 明細書の［発明の詳細な説明−１の欄 ６、補正の内容 明細書第１２頁第２０行〜第１５頁最下行スターチ ＋
」 を削除し、以下の記載を加入する。
ル 〒１０５ 電話（５０４−）０７２１ ５、補正の対象 明細書の［発明の詳細な説明−１の欄 ６、補正の内容 明細書第１２頁第２０行〜第１５頁最下行スターチ ＋
」 を削除し、以下の記載を加入する。
ｒ本発明において使用するバチルスＳＤ−４１と、バチ
ルス・アミロリクイファシェンスＩＡＭ１５２１の主な
菌学的性質は以下に示す通りである。
ルス・アミロリクイファシェンスＩＡＭ１５２１の主な
菌学的性質は以下に示す通りである。
ＩＡＭ−１５２１ ＳＩ）−４１
顕ｉ鏡所見
グラム染色 陽性 陽性
形態 桿菌 桿菌
大きさ ０．７〜０．８μ×０．７〜０．８μ×２、０
〜３．０μ ２．０〜３．０μ 多形性 なし なし 運動性 あり あり 鞭毛 周鞭毛 周鞭毛 （２） 胞子 形成する 形成する ０、８〜１．０μ×０．８〜１．０μ×１．３〜１．８
１１ １．３〜１．８μ抗酸性染色 なし なし 果合ＪＦＥ態 単−或いは連鎖状 同左ＪＡＭ−１５２
１３Ｄ−４１ 培養所見 肉汁寒天 生育良好、灰白色 生育良好、灰白色平板
コロニーを形成し コロニーを形成しコロニーの形状は
コロニーの形状は 円形、周縁、ば波状 円形、周縁は波状肉汁寒天 生育
良好、灰白色 生育良好、灰白色斜面 拡布状 拡布状 肉汁液体 表面膜状、液透明 表面膜状、液透明肉汁ゼ
ラ 層状に液化する 層状に液化するチン リドマス アルカリ性を示し アルカリ性を示しミルク
ペプトン化 ペプトン化 （３） 硝酸塩の還元 ＋ ＋ 脱窒反応 − ＭＲテスト − ｖｐテスト ＋ ＋ インドールの生成 −− 硫化水素の生成 士 士 デンプンの ＋ ＋ 加水分解 クエン酸の利用 ＋ 十 硝酸の利用 」−十 アンモニアの利用 士 十 色素の形成 褐色の菌体外 褐色の菌体外可溶性色素を
可溶性色素を わずかに生成 わずかに生成 ウレアーゼ ＋ 十 オキシターゼ 士 十 カタラーゼ ＋ 十 生育の範囲 ｐＨ５，０〜９．０ ５．Ｑ〜９．０ 温度 ５〜４０℃ ５〜４０”ｃ （４） 酸素に対する 好気的 好気的 態度 ＯＦテスト ｏ。
〜３．０μ ２．０〜３．０μ 多形性 なし なし 運動性 あり あり 鞭毛 周鞭毛 周鞭毛 （２） 胞子 形成する 形成する ０、８〜１．０μ×０．８〜１．０μ×１．３〜１．８
１１ １．３〜１．８μ抗酸性染色 なし なし 果合ＪＦＥ態 単−或いは連鎖状 同左ＪＡＭ−１５２
１３Ｄ−４１ 培養所見 肉汁寒天 生育良好、灰白色 生育良好、灰白色平板
コロニーを形成し コロニーを形成しコロニーの形状は
コロニーの形状は 円形、周縁、ば波状 円形、周縁は波状肉汁寒天 生育
良好、灰白色 生育良好、灰白色斜面 拡布状 拡布状 肉汁液体 表面膜状、液透明 表面膜状、液透明肉汁ゼ
ラ 層状に液化する 層状に液化するチン リドマス アルカリ性を示し アルカリ性を示しミルク
ペプトン化 ペプトン化 （３） 硝酸塩の還元 ＋ ＋ 脱窒反応 − ＭＲテスト − ｖｐテスト ＋ ＋ インドールの生成 −− 硫化水素の生成 士 士 デンプンの ＋ ＋ 加水分解 クエン酸の利用 ＋ 十 硝酸の利用 」−十 アンモニアの利用 士 十 色素の形成 褐色の菌体外 褐色の菌体外可溶性色素を
可溶性色素を わずかに生成 わずかに生成 ウレアーゼ ＋ 十 オキシターゼ 士 十 カタラーゼ ＋ 十 生育の範囲 ｐＨ５，０〜９．０ ５．Ｑ〜９．０ 温度 ５〜４０℃ ５〜４０”ｃ （４） 酸素に対する 好気的 好気的 態度 ＯＦテスト ｏ。
Ｌ−アラビノース ＋−十−
Ｄ−キシロース ± −→−〜± −
〇−グルコース 十 −十一
〇−マンノース ± −十 −
〇−フラクトース 十 −十一
〇−ガラクトース 十 −十−
麦芽糖 十 −士 −
蔗糖 十 −十−
乳糖 −
トレハロース 十 −± −
トソルビット 十 −＋−
Ｄ−マンニット 十 −十−
イノジット ＋−十一
（５）
グリセリン ＋−十−
デンプン 士−＋−
以 −ヒ
（６）
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、アントラニル酸耐性１４１山来のＤ Ｎ Ａを１１
’ｖ一体ＤＮＡとし、アントラニル酸１１１旧’１度
が１１（いＬ−）リプトファン生産性菌を受容菌として
形質転換せしめることによって得られた形質転換菌をア
ントラニル酸又はその塩を含む培地で１８促して培養物
中にＬ−１−リプトファンを生成−ｌしめ、これを１１
取することを特徴とするＬ−１、リプトフアンの製造法
。 ２、 ｉｉｉ記形質転換菌がハチルソ、Ｓｌ）４１であ
る特許請求の範囲第１項記載の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15095483A JPS6043392A (ja) | 1983-08-20 | 1983-08-20 | Ｌ−トリプトフアンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15095483A JPS6043392A (ja) | 1983-08-20 | 1983-08-20 | Ｌ−トリプトフアンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6043392A true JPS6043392A (ja) | 1985-03-07 |
| JPS6348519B2 JPS6348519B2 (ja) | 1988-09-29 |
Family
ID=15508057
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15095483A Granted JPS6043392A (ja) | 1983-08-20 | 1983-08-20 | Ｌ−トリプトフアンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6043392A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62195294A (ja) * | 1986-02-19 | 1987-08-28 | Ajinomoto Co Inc | 発酵法によるｌ−トリプトフアンの製造法 |
| WO1992006207A1 (de) * | 1990-10-08 | 1992-04-16 | Basf Aktiengesellschaft | Mikroorganismus und verfahren zur gewinnung von anthranilsäure |
| EP2028254A2 (en) | 2007-02-09 | 2009-02-25 | FUJIFILM Corporation | Grease composition, viscous agent, and mechanical element |
| KR100949312B1 (ko) | 2007-12-20 | 2010-03-23 | 씨제이제일제당 (주) | 안스라닐산염에 대한 내성을 갖는 대장균 균주를 이용한ｌ-트립토판 제조 방법 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55131397A (en) * | 1979-04-02 | 1980-10-13 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-threonine by fermentation |
| JPS565099A (en) * | 1979-06-25 | 1981-01-20 | Ajinomoto Co Inc | Production of l-histidine through fermentation process and microorganism used therefor |
| JPS56160997A (en) * | 1980-05-16 | 1981-12-11 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-lysine by fermenaition method |
| JPS5780398A (en) * | 1980-11-05 | 1982-05-19 | Sanraku Inc | Plasmid produced by genetic manipulation, coliform bacillus having the same and preparation of tryptophan with said bacillus |
-
1983
- 1983-08-20 JP JP15095483A patent/JPS6043392A/ja active Granted
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55131397A (en) * | 1979-04-02 | 1980-10-13 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-threonine by fermentation |
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| JPS56160997A (en) * | 1980-05-16 | 1981-12-11 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-lysine by fermenaition method |
| JPS5780398A (en) * | 1980-11-05 | 1982-05-19 | Sanraku Inc | Plasmid produced by genetic manipulation, coliform bacillus having the same and preparation of tryptophan with said bacillus |
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| WO1992006207A1 (de) * | 1990-10-08 | 1992-04-16 | Basf Aktiengesellschaft | Mikroorganismus und verfahren zur gewinnung von anthranilsäure |
| EP2028254A2 (en) | 2007-02-09 | 2009-02-25 | FUJIFILM Corporation | Grease composition, viscous agent, and mechanical element |
| KR100949312B1 (ko) | 2007-12-20 | 2010-03-23 | 씨제이제일제당 (주) | 안스라닐산염에 대한 내성을 갖는 대장균 균주를 이용한ｌ-트립토판 제조 방법 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6348519B2 (ja) | 1988-09-29 |
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