JPS5835678B2 - 微生物菌体の製造方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規な細菌によって細菌菌体を製造する方法に
関する。

さらに詳しくはシュードモナスメタノミガスに属し、メ
タノールを資化しうる細菌をメタノールを主たる炭素源
とする培地に培養し、培養液から細菌の菌体を分離する
ことを特徴とする細菌菌体を製造する方法に関する。

従来、微生物菌体の製造原料としては糖蜜、亜硫酸パル
プ廃液およびｎ−パラフィンなどが使用されてきた。

しかしながら、これらの物質は醗酵原料としては供給量
および価格の点で問題がある。

さらにｎ−パラフィンは水に難溶性乃至不溶性であるこ
と、および微生物の生産に多量の酸素が必要とされる点
などで培養上問題が多い。

一方、メタノールは化学工業により大量に得られ、かつ
比較的安価であり、しかも水溶性が犬であることなどか
ら、醗酵原料として好ましい物質である。

もしもメタノールを強力に資化する微生物を発見するこ
とができれば微生物菌体の製造は容易に行なうことがで
きる。

本発明者らはメタノールを主炭素源としてこれを強力に
資化する細菌を広く自然界より求めたところ、メタノー
ルを強力に資化し、なおかつ、たん白金量の高い細菌を
得ることができた。

すなわち、本発明における細菌（以下本細菌と記す）は
、糖などの他の炭素源の不存在下でもメタノールを唯一
の炭素源として資化し、短時間で増殖し、約８０係のた
ん白質を含有する極めて特異的な細菌である。

本細菌は、その菌学的性質によればシュードモナス属に
属するものとみられる。

しかしながらシュードモナス属に属する公知の菌種と比
較した場合に種々の点で相違があり、新菌種と断定して
これをシュードモナス メタノミガス （Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｅｔｈａｎｏｍｉｇａｓ
ｎｏｖ、 ｓｐ、 ）と命名し、本細菌を用いて本発
明を完成した。

すなわち、本発明はシュードモナス メタノミガスに属
し、メタノールを資化しつる菌株をメタノールを主炭素
源として含有する培地中で培養して菌体を増殖させ、該
菌体を採取することを特徴とする細菌の菌体を製造する
方法である。

本菌種のうち代表的な菌株であるシュードモナス メタ
ノミガス ５ｕ−１８（微工研菌寄第２１８２号）、シ
ュードモナス メタノミガスＢＣ−１４５（微工研菌寄
第２１８．３号）シュードモナス メタノミガス Ｂ−
６１６（微工研菌寄第２１８４号）およびシュードモナ
ス メタノミガス ＢＮＭ−７８（微工研菌寄第２１８
５号）のそれぞれの菌学的性質を示す。

シュードモナス メタノミガス ５ｕ−１８株の菌学的
性質 １、顕微鏡的形態 メタノール含有液体培地、メタノール含有寒天培地で３
７℃、３日間培養した。

■ 細胞の形および大きさ 直桿状、長さ０．３〜０，５μ×１．０〜３．０μ。

また細胞の多形性はみられない。■ 集団 単細胞或は
双細胞になる。

■ 運動性あり。

極鞭毛を有する。■ 胞子の有無 生産されず。

■ クラム染色、クラム陰性。

■抗酸性陰性 ■ 細胞外粘着物 生産されることがある。

２ 次の各培地における生育状態 ■ 肉汁寒天平板培養 ３７℃、３日間培養生育しない
かまたは生育は非常に悪い。

■ メタノール含有寒天平板培養、３７℃、３日培養 旺盛な生育を示す。

コロニーの形状：外形は円形、大きさは２〜３間、隆起
は半球形、構造は均質、表面は桶、辺縁は平滑、色は白
色で光沢あり、透明度は不透明、硬度は脂状。

■ 肉汁寒天斜面培養 ３７℃、３日培養接種線に一様
に生育する。

ただし生育は非常に悪い。

■ メタノール含有寒天斜面培養 ３７℃、３日培養 接種線に一様に旺盛に生育する。

隆起は中程度、表面は平滑、辺縁は平滑、色は白色、透
明度は不透明、硬度は高い粘稠性を示す。

■ 肉汁液体培養 ３７℃、７日培養 生育しない。

■ ペプトン水液体培養 ３７℃、７日培養生育しない
。

■ メタノール含有液体培養 ３７℃、３日培養 全体に旺盛に生育し、にごる。

沈澱あり、表面の生育があり、菌膜を形成する、菌膜は
振とうによりこわれ沈降する。

培養液の色はほぼ白色となる。

■ 肉汁穿刺培養 ３７℃、７日培養 生育しない。

■ メタノール含有穿刺培養 ３７℃、３日培養 小乳頭状に一様に生育する。

７〜８ｍｍぐらいの表面の生育あり。

［相］ 肉汁ゼラチン穿刺培養 ２０℃で４週間培養 生育しない。

■ リドマス・ミルク ３７℃で４週間培養生育しない
。

３ 生理学的性質 ■ 硝酸塩の還元 硝酸塩を亜硝酸塩に還元する。

■ ＭＲテスト 陰性 ■ ＶＰテスト 陰性 ■ インドールの生成 陰性 ■ 硫化水素の生成 陰性 ■ デンプンの加水分解 陰性 ■ クエン酸の利用（Ｋｏｓｅｒの培地、Ｃｈｒｉｓｔ
ｅｎｓｅｎの培地）陰性 ■ 無機窒素源の利用 アンモニウム塩および硝酸塩を
それぞれ利用する。

■ 色素の生成 はとんど生成しない。

しかし液体培養で高い菌体濃度に達した場合に、黄色の
水溶性色素を非常にわずかに生成する。

［相］ ウレアーゼ 陽性 ０ カタラーゼ 陽性 ０ アンモニアの生成 陰性 ０ 色素の還元 メチレンブルーを還元する。

０ 脱窒反応 陰性 ［相］ オキシダーゼ 陽性 ［相］ Ｏ−Ｆテスト 陰性 ０ リジン分解 陰性 ［相］ 生育の範囲 ｐＨ５〜９の範囲で生育する。

６〜８が好ましい。

温度５〜４１℃で生育する。

２５〜４０℃が好ましい。

［相］ 酸素に対する態度 好気性 ［相］ 糖類の資化性および酸、ガスの生成下記の糖類
を資化しない。

また下記の糖から酸およびガスを生成しない。

Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グルコース、
Ｄ−マンノース、Ｄ−フラクトース、Ｄ−ガラクトース
、麦芽糖、ショ糖、乳糖、トレハロース、Ｄ−ソルビッ
ト、Ｄマンニット、イノジット、グリセリン、デンプン ０ 糖類以外の炭素源の資化性 Ｏ各種有機物質による生育阻害 酵母エキス、麦芽エキス等の有機物添加により、生育は
阻害される。

Ｏビタミンによる生育阻害 ｐ−アミノ安息香酸５■／ｍｌ添加で生育は阻害される
。

シュードモナス メタノミガス ＢＣ＋１４５の菌学的
性質 シュードモナス メタノミガス ５ｕ−１８との差異を
以下に示す。

２ 次の各培地における生育状態 ■ メタノール含有寒天平板培養 ３７℃、３日培養 旺盛な生育を示す。

コロニーの形状：外形は円形、大きさは２〜３朋、隆起
は半球形、構造は均質、表面は平滑、辺縁は平滑、色は
白色で光沢あり、透明度は不透明、硬度は粘稠。

■ メタノール含有寒天斜面培養 ３７℃、３日培養 接種線に一様に生育する。

隆起は中程度、表面は平滑でしめっている。

辺縁は平滑、色は白色で光沢あり、透明度は不透明、硬
度は粘稠。

■ メタノール含有液体培養 ３７℃、３日培養 全体に旺盛に生育しにとる。

沈澱あり、表面の生育があり、菌膜を形成する、菌膜は
振とうによりこわれ沈降する。

培養液の色は赤みをおびただいだい色となる。

３ 生理学的性質 ■ 色素の生成 はとんど生成しない。

しかし液体培養で高い菌体濃度に達した場合に赤みをお
びただいだい色の水溶性色素を生成する。

Ｏ糖類以外の炭素源の資化性 シュードモナス メタノミガス Ｂ−６１６の菌学的性
質 シュードモナス メタノミガス ５ｕ−１８（！：の差
異を以下に示す。

２ 次の各培地における生育状態 ■ メタノール含有寒天平板培養 ３７℃、３日培養 旺盛な生育を示す。

コロニーの形状：外形は円形、大きさは２〜３Ｉｔ１１
１．隆起は半球形、構造は均質、表面は平滑、辺縁は平
滑、色は白色で光沢あり、透明度は不透明、硬度は粘稠
。

■ メタノール含有寒天平板培養 ３７℃、３日培養 接種線に一様に生育する。

隆起は中程度、表面は平滑でしめっている。

辺縁は平滑、色は白色で光沢あり、透明度は不透明、硬
度は粘稠。

３ 生理学的性質 ■ 硝酸塩の還元 硝酸塩を亜硝酸塩に還元しない。

［相］ 各種有機物質による生育阻害 酵母エキス、麦芽エキス等の有機物質添加により生育は
阻害される。

特にフラクトース、リボースの少量（１ｗｔ％以−〇添
加により生育は阻害され、場合によって生育は停止する
こともある。

シュードモナス メタノミガス ＢＮＭ−７８の菌学的
性質 シュードモナス、メタノミガス ５ｕ−１８との差異を
以下に示す。

２ 各培地における生育状態 ■ メタノール含有寒天平板培養 ３７℃、３日培養 生育旺盛。

コロニー：外形は円形、大きさは２〜３＋＾隆起は半球
形、構造は均質、表面は平滑、辺縁は平滑、色は白色で
光沢あり、透明度は不透明、硬度は脂状。

■ メタノール含有寒天斜面培養 ３７℃、３日培養 生育旺盛。

接種線に一様に生育する。

隆起は中程度、表面は平滑、辺縁は平滑で金縁、色は白
色で光沢あり、透明度は不透明、硬度は粘稠。

３ 生理学的性質 ■ 硝酸塩の還元 硝酸塩を亜硝酸塩に還元しない。

［相］ 生育の範囲 ｐＨ５〜９の範囲で生育する。

６〜８が好ましい。

温度５〜４５℃で生育する。

２５〜４２°Ｃが好ましい。

バージイス マニュアル オブ デターミネイティブバ
クテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌｏｆ
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏ
ｇｙ）−７版１〔編集者ブリード（Ｂｒｅｅｄ）、ハレ
ー（Ｈｕｒｒａｙ）及びスミス（Ｓｍｉｔｈ）、ウィリ
アム アンド ゥイルキンス社（Ｗｉ ｌ ｌ ｉａｍ
ｓ ａｎｄ Ｗｉ １ｋｉｎｓ）バルチモア（Ｂａｌｔ
ｉｍｏｒｅ）） １９５７年によれば、これらの菌株は
微生物学的特徴によりシュードモナス属に属するもので
ある。

この属に属する種の分類上の鍵となる性質をバージイス
マニュアルでたどってみると、上記した性質を有する
種は見あたらない。

。「ジャーナル オブバクテリオロジ（Ｊｏｕｒ−ｎａ
ｌ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）第７２巻、第６
４６〜６５９頁（１９５６）Ｊにはメタノールを資化す
る細菌としてシュードモナス メタニカ（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ ｍｅｔｈａｎｉｃａ ）が発表されている
。

しかし本菌種とシュードモナス メタニカ（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ ｍｅｔｈａｎｉｃ４ ）とは、細胞の大
きさ、メタンの資化性、３７℃での生育、生育最適温度
、生育ｐＨおよび生育最適ｐＨなどが異なる。

両者の相違を下の表に示す。従って、シュードモナス属
に属するこれらの菌株は新菌種に属するものと結論され
る。

実験方法は、上記のバージイス マニュアルおよび医科
学研究所学友合線「細菌学実習提要」（１９５８）に従
った。

またメタノール含有寒天平板培地、メタノール含有斜面
培地、メタノール含有穿刺培地として次の組成をもちい
た。

すなわち、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４３，９、ＫＨ２ＰＯ４
４，！ｉ’％ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，１゜ＣａＣｌ２
・２Ｈ２０５１！、Ｆｅ５０． ・７Ｈ２０２０ｍ９、
Ｚｎ Ｓ ０４ ・７Ｈ２０５１ｖ、、ＭｎＣ１２・４
Ｈ２０２即、ＣｕＳＯ４＃ ５Ｈ２００，２１％Ｉ 、
ＮａＣｌ ０．５ ｇ、および寒天２０ｇを純水Ｉ
Ｉ！に溶解しｐＨを６．８に調整して１２０℃で２０分
間殺菌した後、メタノール１０ｖを無菌的に添加した。

またメタノール含有液体培地としては、上記の培地から
寒天を除いたものを使用した。

本細菌の培養に使用される培地はメタノールを主炭素源
として含有していることを要し、さらに窒素源、無機質
、ビタミン、その他生長促進物質などの適量を含有する
培地ならば合成培地または天然培地のいずれでもよい。

培養液中のメタノールの濃度は６重量係以下が好ましく
、菌の生育および増殖の良好さからは３重量係以下であ
ることが特に好ましい。

窒素源としては、たとえばアンモニウム塩、硝酸塩など
の無機窒素化合物、および／またはたとえば尿素、コー
ン・ステイープ・リカー、ガゼイン、ペプトン、酵母エ
キス、肉エキスなどの有機窒素含有物が用いられる。

その他、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、
リン酸塩、マンガン塩、亜鉛塩、鉄塩、銅塩などの無機
塩、および必要に応じてビタミン類、アミノ酸などの生
育に必ず要求される物質あるいは生長促進物質が添加さ
れる。

培養条件は、温度２０〜４５℃、好ましくは２５〜４２
℃である。

たゾし５ｕ−１８、ＢＣ１４５、およびＢ−６１６につ
いては２０〜４１℃、好ましくは２５〜４０℃である。

またｐＨは５〜９、好ましくは６〜８である。

このような条件で好意的培養を行なう。

また培養方式は回分培養または連続培養のいずれでもよ
い。

窒素源としてアンモニウム塩を利用する場合は、培養期
間中にアンモニアが菌体生成のため消費されて培養液の
ｐＨが低下するのでｐＨを一定に保つためアンモニア、
カセイカリまたはカセイソーダのアルカリを添加する。

これらのうちアンモニアを添加することが好ましい。

このようにして細菌を培養した後、菌体を培養液より分
解する。

分離の方法としては、培養液そのままを遠心分離する方
法、培養液中に、本発明の細菌より比較的細胞の大きい
他の微生物をろ過動剤として加えたり、あるいはプレコ
ートすることにより培養液から菌体をろ過分離する方法
、培養液中に種々の凝集剤を加え菌体を凝集させ、ろ過
あるいは遠心分離により培養液から菌体を分離する方法
、培養液のｐＨを５以下にすることにより、あるいはｐ
Ｈを５以下にし、さらに５０〜１００℃で加熱すること
により菌体を凝集させ、ろ過あるいは遠心分離により菌
体を分離する方法などがある。

分離された菌体は必要ならば、各種の有機溶媒あるいは
水で洗浄され、湿潤菌体を得る。

湿潤菌体は乾燥され、そのままあるいはさらに種々の処
理をほどこされた後、飼料などとして利用される。

また得られた菌体からさらに核酸、ビタミン類、補酵素
、たん白質または脂質などの菌体含有物質が純粋な物質
としてまたは相互の混合物として抽出され飼料、食品、
医薬品および工業原料などに使用される。

本発明によって、工業生産によって容易に入手しうる物
質を原料として使用することが出来、しかも高収率でた
ん白金量の高い菌体を得ることが出来、かつ、原料物質
は水溶性であるため培養が容易であり、簡単な後処理で
清浄な菌体を得ることが出来、工業上極めて有利な方法
である。

以下実施例によってさらに詳しく説明する。

実施例 １ 純水１１あたり（ＮＨ４） ２ＨＰ ０４３ ｇ、ＫＨ
２ＰＯ４４ｇ、Ｍｇ５Ｏ，−７Ｈ２００，ｉ％ＣａＣｌ
□−２Ｈ２０５’ｆｉ’、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２０２０■
、Ｚｎ５Ｏ，−’ｉ Ｈ２Ｏ５ｖｔｙ、ＭｎＣｌ２・４
Ｈ２０２■、ＣｕＳＯ４・５ Ｈ２Ｏ０，２１ｎ９、Ｎ
ａＣｌ ０．５．９゜および消泡剤としてシリコーン
Ｏ，１，！９を溶解し、ｐＨが７．２に調整された培地
５００ｍＡ’を１１容ミニ・ジャーに入れ１２０℃で２
０分間殺菌した後、メタノール５ｇを無菌的に添加し、
これに上記と同様な培地（メタノール含有）で３７℃で
１２時間前培養したシュードモナス メタノミガス５ｕ
−ｉｓの菌体を含む前培養液を２ｖｏ１％となるように
接種し、培養期間中の培養液のｐＨが７．２に維持され
るようにアンモニア水を添加しながら３８℃で通気攪拌
培養を行なった。

４時間の増殖誘導期間の後、対数増殖期となり、対数増
殖期では世代時間１．５時間で増殖し培養開始１５時間
後、培養液中のメタノール濃度は０．００１ ｗｔ％以
下となった。

この培養液を遠心分離して菌体を分離、回収し、８０℃
で２４時間乾燥して、培養液１１あたり３．８ｇの乾燥
菌体を得た。

得られた菌体の粗たん白質量は８４係であった。

実施例 ２ 純水ｌｌあたり（ＮＨ４） ２ＨＰＯ４３ｇ、ＫＨ２Ｐ
Ｏ４４ｇ、ＭｇＳＯ４−７Ｈ，ＯＯ，４ｇ、ＣａＣｌ２
・２Ｈ，０５１ｖ％ＦｅＳＯ４・７Ｈ２０２０ｒｖ。

Ｚｎ５Ｏ，−７Ｈ２Ｏ５ｉｎｇ、ＭｎＣｌ２・４Ｈ２０
２■、ＣｕＳＯ４−５Ｈ２００，２”？、ＮａＣ１Ｏ，
５ｇ、および消泡剤としてシリコーンＯ，ＩＪを溶解し
、ｐＨが７．０に調節された培地５００ｍＡ’を１１容
ミニ・ジャーに入れ１２０℃で２０分間殺菌した後、メ
タノール５ｇを無菌的に添加し、これに上記と同様な培
地（メタノール含有）で３７℃で１２時間前培養したシ
ュードモナス メタノミガス Ｂ−６１６の菌体を含む
前培養液を２ｖｏ１％となるように接種し、培養期間中
の培養液のｐＨが７．０に維持されるようにアンモニア
水を添加しながら３７℃で通気攪拌培養を行なった。

６時間の増殖誘導期間の後、対数増殖期となり、対数増
殖期では世代時間１．７時間で増殖し、培養開始２０時
間後培養液中のメタノール濃度は、０．００１ ｗｔ
％以下となった。

この培養液を遠心分離して菌体を分離、回収し８０℃で
２４時間乾燥して、培養液１１あたり４．０９の乾燥菌
体を得た。

得られた菌体の粗たん白金量は８３．２％であった。

実施例 ３ 純水ｌｌあたり（ＮＨ４） ２ＨＰＯ４３，９、曲２Ｐ
Ｏ４４ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，４，！９．ＣａＣ
１□２Ｈ２０５７Ｖ、ＦｅＳＯ４・７ Ｈ２Ｏ２０ｍ？
、ＺｎＳＯ４・７Ｈ２０５■、ＭｎＣ１２・４ Ｈ２０
２■、ＣｕＳＯ４” ５Ｈ２００，２７％’、ＮａＣ１
Ｏ，５＆、および消泡剤としてシリコン０．１ｇを溶解
し、ｐＨが６．８に調節された培地５００１ｒＬｌを１
１容ミニジヤーに入れ１２０℃で２０分間殺菌した後メ
タノール５ｇを無菌的に添加し、これに上記と同様な培
地（メタノール含有）で４０℃で１２時間前培養したシ
ュードモナス メタノミガス ＢＣ１４５の菌体を含む
前培養液を２ｖｏｌ％となるように接種し、培養期間中
の培養液のｐＨが６．８に維持されるようにアン手ニア
水を添加しながら４０℃で通気攪拌培養を行なった。

８時間の増殖誘導期間の後、対数増殖期となり対数増殖
期では世代時間２．３時間で増殖し、培養開始３０時間
後培養液中のメタノール濃度はｏ、ｏｏ１ｗｔ％となっ
た。

この培養液を遠心分離して菌体を分離、回収し、８０℃
で２４時間乾燥して培養液１１あたり３．４ｇの乾燥菌
体を得た。

得られた菌体の粗たん白金量はｓｔ２％であった。

実施例 ４ 純水ｉｚあたり（ＮＨ４）２Ｓ０． ３ 、！ｉ’、
ＫＨ２ＰＯ４４，９，Ｍｇ５０４−７Ｈ２０１ｇ、Ｃａ
Ｃ１□・２Ｈ２０１０■、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２０６０１
１１９、ＺｎＳ ０４ ・７ Ｈ２０１０７Ｑ、Ｍｎ５
Ｏ，−４Ｈ２０５ｍ？、Ｃｕ Ｓ ０４ ・５ Ｈ２０
０，５■、ＮａＣ１ＩＪ７．および消泡剤としてシリコ
ーン０．２．９を溶解し、ｐＨが６，５に調整された培
地１５１を３０１容ジヤーフアメンターに入れ１２０℃
で２０分間殺菌した。

これにメタノール３０ｇを無菌的に添加して培地とした
。

実施例１と同組成の培地（メタノール含有）で、３６℃
で１８時間前培養したシュードモナス メタノミガス
５ｕ−１８の菌体を含む前培養液を上記の培地に対して
５ｖｏｌ％となるように添加し３６℃で通気攪拌培養を
行なった。

アンモニア水め添加によってｐＨは自動的に６．５に維
持され、培養液中でのメタノール濃度が０．２〜０．３
重量幅を維持されるようにメタノールをその消費量に合
わせて連続的に添加した。

培養２５時間後にメタノール添加量は培養液ＩＩ！あた
り６０．９に達した。

なお、増殖中の世代時間は１．６時間であった。

培養を停止した遠心分離により集菌した。

この湿潤菌体を１２０℃で２４時間乾燥し、培養液１１
あたり２３９の乾燥菌体を得た。

得られた菌体の粗たん白金量は８３係であった。

実施例 ５ 純水１１あたり（ＮＨ４）２ＨＰＯ４：ｌ、ＫＨ２Ｐ０
゜４ｇ、Ｍｇ５Ｏ，−７Ｈ２００，４ｇ、ＣａＣｌ２・
２２Ｈ２Ｏ５１ｎ、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２０２０１１１？
、Ｚｎ Ｓ ０４ ・７ Ｈ２０５■、鳩Ｃｌ ２ ”
４Ｈ２０２”？、ＣｕＳ ０４ ” ５ Ｈ２００，
２■、ＮａＣＩ ０．５ ｇおよび消泡剤としてシリコ
ーン０．１ｇを溶解し、ｐＨが６．８に調整された培地
５００ｄをＩＡ容ミニ・ジャーに入れ１２０’Ｃで２０
分間殺菌した後、メタノール５ｇを無菌的に添加し、こ
れに上記と同様な培地（メタノール含有）で３７℃で１
２時間前培養したシュードモナス メタノミガス ＢＮ
Ｍ−７８の菌を含む前培養液を２ｖｏ％となるように接
種し、培養期間中の培養液のｐＨが６．８に維持される
ようにアンモニア水を添加しながら３７℃で通気攪拌培
養を行なった。

３時間の増殖誘導期間の後、対数増殖期となり、対数増
殖期では世代時間５５分で増殖し、培養開始１３時間後
、培養液中のメタノール濃度は０．００１ ｗｔ ％以
下となった。

この培養液を遠心分離して菌体を分離、回収し、８０℃
で２４時間乾燥して、培養液１７あたり３．７ｇの乾燥
菌体を得た。

得られた菌体の粗たん白金量は約８５係であった。

実施例 ６ 実施例１と同じ組成の培地（メタノールを含まない）５
００−を１１容ミニ・ジャーに入れ１２０℃で２０分間
殺菌した後、メタノール５ｇを無菌的に添加し、これに
上記と同様な培地（メタノール含有）で４２℃で１２時
間前培養したシュードモナス メタノミガス ＢＮＭ−
７８の菌体を含む前培養液を２ｖｏｌ ％となるように
接種し、培養期間中の培養液のｐＨが６．８に維持され
るようにアンモニア水を添加しながら４２℃で通気攪拌
培養を行なった。

６時間の増殖誘導期間の後、対数増殖期となり、対数増
殖期では世代時間１．３時間で増殖し、培養開始１８時
間後、培養液中のメタノール濃度は０．００１ｗｔ％以
下となった。

この培養液を遠心分離して菌体を分離、回収し、８０℃
で２４時間乾燥して、培養液ｌｌあたり３．５９の乾燥
菌体を得た。

得られた菌体の粗たん白金量は約８３％であった。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ シュードモナス メタノミガスに属し、メタノール
   を資化しつる細菌をメタノールを主たる炭素源とする培
   地に培養し、該培養液から細菌の菌体を分離することを
   特徴とする微生物菌体の製造方法。