JPS6123991B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なシユードモナスAK−２株に関
しより詳しくはメタノール、クエン酸、アラニ
ン、プロピオン酸及びジメチルリン酸に対し、酸
化分解能を有するシユードモナスAK−２株に関
するものである。

本菌株はジメチルリン酸（以下DMPと略称す
る。）を酸化分解能することを一つの特徴とする
が、従来有機リン系農薬工場等の廃水中に含有さ
れるDMPを純粋の微生物により酸化分解させる
ことは報告されていない。

そこで本発明者らはDMPに対し酸化分解能を
有する微生物を自然界より検索したところ、シユ
ードモナス属に属する一菌株がDMPに対し酸化
分解能を有することを認め、更に検討を加えた結
果、メタノール、クエン酸、アラニン、プロピオ
ン酸に対しても酸化分解能を示すことから従来の
いづれの種にも属さない新種であることが判明し
た。

本菌株はDMPに対し酸化分解能を有すること
からDMP含有廃水の処理において利用が期待で
きる。

以下、本菌のスクリーニング方法及び菌学的性
質を示す。

Γスクリーニング 下水溝の泥をコーンスチープリカーで培養して
まず活性汚泥を得た。次に、ジメチルジチオリン
酸（以下、DMDTPと略記する。）0.5ｇ／、グ
ルコース0.2ｇ／、酵母エキス0.2ｇ／より成
る合成廃水を用いて、回分法で活性汚泥を２週間
培養した。この際、液のPHを常に7.0になるよう
調節した。この活性汚泥をDMDTPを唯一のエネ
ルギー源および炭素源とする培地に数回植えつい
だ。そして、この培養液をDMPを唯一のエネル
ギー源および炭素源とする寒天固体培地上に移
し、分解菌を得た。

Γ本菌の菌学的性質 (a) 形態 細胞の形及び大きさ：桿菌、0.8〜1.0×1.5
〜2.5μｍ 細胞の多形性：無 運動性：有、極鞭毛を有する 胞子形成：無 グラム染色性：陰性 抗酸性：無 (b) 次の各培地における生育状態 リン酸緩衝液（PH6.8）を含む肉汁寒天平
板培地：生育普通。円形。中央部がわずかに
隆起。桃色。中央部のみ赤色。不透明。

メタノール寒天平板培地：生育普通。円
形。全縁。偏平。桃色。不透明。

リン酸緩衝液（PH6.8）を含む肉汁寒天斜
面培地：生育普通。桃色。不透明。

リン酸緩衝液（PH6.8）を含む肉汁寒天液
体培地：生育普通。液全体が白濁。

肉汁ゼラチン穿刺培養：液化せず。

リトマス・ミルク：変化せず。

(c) 生理学的性質 硝酸塩の還元：陽性 脱窒反応：陰性 MRテスト：陰性 VPテスト：陰性 インドール生成：陰性 硫化水素の生成：陰性 デンプンの加水分解：陰性 クエン酸の利用：コーサーの培地及びクリ
ステンセンの培地のいずれでも利用する。

無機窒素源：硝酸塩、アンモニウム塩とも
に利用する。

色素：水溶性色素は生成せず。

ウレアーゼ：陽性 オキシダーゼ：陽性 カタラーゼ：陽性 生育の範囲：PH５〜８。温度15〜37℃ 酸素に対する態度：好気性 Ｏ−Ｆテステ：糖分解能が弱くペプトンを
よく資化するため、PHの上昇が激しく判定で
きない。

糖類からの酸及びガスの生成：ガスは生成
しない。Ｄ−フラクトース、Ｄ−キシロー
ス、グリセリンからは酸を生成する。Ｌ−ア
ラビノース、Ｄ−グルコース、Ｄ−マンノー
ス、Ｄ−ガラクトース、麦芽糖、シヨ糖、乳
糖、トレハロース、Ｄ−ソルビツト、Ｄ−マ
ンニツト、イノシツト、澱粉からは酸を生成
しない。

栄養要求性：無 DNAのGC含量：69.6％ 菌体中の主たる脂肪酸：不飽和結合を１つ
有する炭素数18の脂肪酸 メタノールを資化する。

以上のような菌学的性質からバージイのマニユ
アル・オブ・デターミナテイブ・バクテリオロジ
ー第８版による検索によつてシユードモナス属に
属せしめるのが妥当であることは判明したが、本
属中のメタノール資化性菌については、その分類
法が確立しておらず、また、最も近似しているシ
ユードモナス・ロゼアとも、資化性において相違
がある。即ち、シユードモナス・ロゼアは、プロ
ピオン酸、クエン酸、アラニンを全く利用しない
が、本菌はこれらを大いに利用し良好な生育を示
す。よつて本菌は新種と認められ、シユードモナ
ス（Pseudomonas）AK−２（微工研菌寄第6581
号）として工業技術院微生物工業技術研究所に寄
託されている。

本菌は、DMPを唯一のエネルギー源および炭
素源として利用し、これを無機リン酸にまで分解
することが特徴である。

本菌の他の栄養源としては、通常使用されるリ
ン酸−カリウム、リン酸二ナトリウム、塩化アン
モニウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、
硫酸第一鉄などを含む無機培地が供される。本菌
は、温度15〜37℃で生育するが、より望ましくは
30℃付近で培養するのが良く、PHについては５〜
８で生育するが、より望ましくは6.5付近で培養
するのが良いが、培養中にDMPが分解されて無
機リン酸が生成され、PHが低下するので、水酸化
ナトリウム、アンモニア、炭酸ナトリウムなどの
アルカリ剤を適宜、培養液に加えるなどして調整
する必要がある。また培養に際しては通気、撹拌
を十分に行なうことが肝要である。

このように本菌は、シユードモナス属に属し、
DMPを効率的に無機リン酸にまで分解できるの
で、DMP含有廃水の分解処理に、その利用価値
は大である。

以下、実施例により本菌株の具体的利用を詳述
する。

実施例 DMP0.5％、リン酸一カリウム0.075％、リン酸
二ナトリウム0.225％、塩化アンモニウム0.03
％、硫酸マグネシウム0.02％、硫酸亜鉛0.004
％、塩化カルシウム0.001％、塩化マンガン0.001
％、硫酸第一鉄0.001％、PH7.0の組成を有する培
地100mlに予め同培地で25℃、２日間振盪培養し
て得られたシユードモナスAK−２（微工研菌寄
第6581号）の種培養液５mlを加え、これを30℃、
２日間振盪培養した。菌の生育により液が薄赤色
に濁つた。液中の無機リン酸量が増加し、全有機
性素量（菌体をフイルターで除去してから測定し
た。）が減少た。培養前および培養後の培養液を
２−プロパノール−28％アンモニア（３：１）系
溶媒を用いる薄層クロマトグラフイーにより展開
した後、Marcusらの方法（Report，EPA／
600／４−78／056，p.143（1978））により発色さ
せ比較したところ、培養前ではDMPと無機リン
酸に相当する部分のみ、培養後では無機リン酸に
相当する部分にのみ発色がみられた。

以上により加えたジメチルリン酸がシユードモ
ナスAK−２株により無機リン酸にまで酸化分解
されていることが確認された。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ メタノール、クエン酸、アラニン、プロピオ
   ン酸及びジメチルリン酸に対し酸化分解能を有す
   るシユードモナスAK−２株。