JPS6041495A - α−ヒドロキシカルボン酸を相応する光学活性のα−アミノカルボン酸に連続的に酵素的に変換する方法 - Google Patents
α−ヒドロキシカルボン酸を相応する光学活性のα−アミノカルボン酸に連続的に酵素的に変換する方法Info
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- JPS6041495A JPS6041495A JP59036348A JP3634884A JPS6041495A JP S6041495 A JPS6041495 A JP S6041495A JP 59036348 A JP59036348 A JP 59036348A JP 3634884 A JP3634884 A JP 3634884A JP S6041495 A JPS6041495 A JP S6041495A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
不発り１は、酵素反応器中で、水溶性高分子物質に結合
する事により分子量を増大させたニコチンアミｌさ・ア
デニン・ジヌクレオチド（ＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ） 、使
用されるα−ヒドロキシカルづ？ン酸に対し特異性のデ
ヒドロゲナーゼ、形成すべきα−アミノカルボン酸に対
し特異性のデヒ）ロゲナーゼおよびアンモニウムイオン
の存在で、α−ヒドロギンカルボン酸を相当する光学活
性のα−アミノカルボン酸へ連続的に酵素的に変換する
方法に関する。
する事により分子量を増大させたニコチンアミｌさ・ア
デニン・ジヌクレオチド（ＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ） 、使
用されるα−ヒドロキシカルづ？ン酸に対し特異性のデ
ヒドロゲナーゼ、形成すべきα−アミノカルボン酸に対
し特異性のデヒ）ロゲナーゼおよびアンモニウムイオン
の存在で、α−ヒドロギンカルボン酸を相当する光学活
性のα−アミノカルボン酸へ連続的に酵素的に変換する
方法に関する。
既に、酵素反応器中で水溶性デキストランに結合する事
により分子量を増大させたニコチンアミＰ・アデニン・
ジヌクレオチドゞ（ＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ）、乳酸デヒド
ロゲナーゼ、アラニン デヒドロゲナーゼおよびアンモ
ニウム・ｆオンノ４在でピルビン酸塩からアラニンを連
続的に製造・する方法は公知である（ Ｋ、 Ｍｏ５ｂ
ａｃｈ およびＰ、−０，Ｌａｒｓｓｏｎ ｉｎ Ｅｎ
ｚｙｍｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｂ Ｉｌｌ、第２
９１〜２９８ページ）。しかしながら実験によシ、この
公知方法は、アラニンへの変換率が既に比較的短時間後
に著しく低下し、結局反応が完全に停止し、そもそもア
ラニンがもはや形成しなくなるので、長期にわたって連
続的に実施できない事が判明した。
により分子量を増大させたニコチンアミＰ・アデニン・
ジヌクレオチドゞ（ＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ）、乳酸デヒド
ロゲナーゼ、アラニン デヒドロゲナーゼおよびアンモ
ニウム・ｆオンノ４在でピルビン酸塩からアラニンを連
続的に製造・する方法は公知である（ Ｋ、 Ｍｏ５ｂ
ａｃｈ およびＰ、−０，Ｌａｒｓｓｏｎ ｉｎ Ｅｎ
ｚｙｍｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｂ Ｉｌｌ、第２
９１〜２９８ページ）。しかしながら実験によシ、この
公知方法は、アラニンへの変換率が既に比較的短時間後
に著しく低下し、結局反応が完全に停止し、そもそもア
ラニンがもはや形成しなくなるので、長期にわたって連
続的に実施できない事が判明した。
本発明による方法は、５００〜５００００の平均分子量
を有するポリエチレングリコールに結合して存在するＮ
ＡＤ”／ＮＡＤＨＱ、１〜１０ミリモル／ｌ を有する
、使用されるα−ヒドロギンカルボン酸に対し特異性の
デヒドロゲナーゼおよび形成すべきα−アミノカルボン
酸に対し特異性のデヒドロゲナーゼの水溶液を含有する
２０００〜５００００の公称除去限界を有する限外濾過
膜を備えた膜反応器に連続的に、反応ずべきα−ヒ１：
′ロキシカルダン酸を最高溶解量の２５〜１００％に相
当する濃度でおよびα−ヒ１：′ロキシカルＨ？ン酸に
相当するα−ケトカルボン酸を使用されるアミノヵルゼ
ン酸デヒドロゲナーゼに対し１〜１０嬌の濃度でかつ反
応すべきα−ヒ１きロキシカルゼン酸の量に少すくとも
等モルのアンモニウムイオンを含有する水溶液を供給し
、膜の両側で０１〜１５パールの差圧を維持し、膜の後
方で連続的に形成したα−アミノカルボン酸を含有する
濾液流を取り出す事を特徴とする。
を有するポリエチレングリコールに結合して存在するＮ
ＡＤ”／ＮＡＤＨＱ、１〜１０ミリモル／ｌ を有する
、使用されるα−ヒドロギンカルボン酸に対し特異性の
デヒドロゲナーゼおよび形成すべきα−アミノカルボン
酸に対し特異性のデヒドロゲナーゼの水溶液を含有する
２０００〜５００００の公称除去限界を有する限外濾過
膜を備えた膜反応器に連続的に、反応ずべきα−ヒ１：
′ロキシカルダン酸を最高溶解量の２５〜１００％に相
当する濃度でおよびα−ヒ１：′ロキシカルＨ？ン酸に
相当するα−ケトカルボン酸を使用されるアミノヵルゼ
ン酸デヒドロゲナーゼに対し１〜１０嬌の濃度でかつ反
応すべきα−ヒ１きロキシカルゼン酸の量に少すくとも
等モルのアンモニウムイオンを含有する水溶液を供給し
、膜の両側で０１〜１５パールの差圧を維持し、膜の後
方で連続的に形成したα−アミノカルボン酸を含有する
濾液流を取り出す事を特徴とする。
本発明方法によりはじめて、α−ヒドロギンカルボン酸
をより長期にわたり連続的に相応する光学活性のα−ア
ミノカルボン酸に変換する事が出来る。このだめの重要
な手段は、ＩＩＱ反応器に連続的に反応すべきα−ヒＩ
Ｓロキー／カル４？ン酸だけでなく、これと比較して著
しく少量の相応するα−ケトカルｙ＋”ン酸も供給する
事から成る。この手段を用いると、使用されるα−ヒド
ロギンカルボン酸を連続的にかつ高い空時収率で相応す
る光学活性のα−アミノカルｄ２ン酸に変換し、こうし
てこのα−アミノカルボン酸を妥当な価格で製造する事
が可能である。
をより長期にわたり連続的に相応する光学活性のα−ア
ミノカルボン酸に変換する事が出来る。このだめの重要
な手段は、ＩＩＱ反応器に連続的に反応すべきα−ヒＩ
Ｓロキー／カル４？ン酸だけでなく、これと比較して著
しく少量の相応するα−ケトカルｙ＋”ン酸も供給する
事から成る。この手段を用いると、使用されるα−ヒド
ロギンカルボン酸を連続的にかつ高い空時収率で相応す
る光学活性のα−アミノカルｄ２ン酸に変換し、こうし
てこのα−アミノカルボン酸を妥当な価格で製造する事
が可能である。
反応容器としては、その膜が、使用した酵素および反応
に必要な補酵素は反応器中に保留するが、低分子の生成
物および未反応の基質は透過させるのに役立つ限外濾過
膜を備えだ膜反応器が使用される。膜反応器はいわゆる
乎形膜反応器（Ｆｌａｃｈｍｅｍｂｒａｎｒｅａｃｔｏ
ｒ ）として構成されていてもよい。このタイプの反応
器はたとえば平たい筒形で、それに０−リングにより密
封された蓋が装着されている容器であってもよい。
に必要な補酵素は反応器中に保留するが、低分子の生成
物および未反応の基質は透過させるのに役立つ限外濾過
膜を備えだ膜反応器が使用される。膜反応器はいわゆる
乎形膜反応器（Ｆｌａｃｈｍｅｍｂｒａｎｒｅａｃｔｏ
ｒ ）として構成されていてもよい。このタイプの反応
器はたとえば平たい筒形で、それに０−リングにより密
封された蓋が装着されている容器であってもよい。
０−リングと一緒に、平面的に相対的に拡張された平ら
な膜が取り付けられている。基質流は、配）１ｉポンプ
によって膜の下に存在する、望甘しくＶ、かくはん装置
、たとえば磁気かくはん機をイ１ｉｉｉえている反応室
に供給される。生成物を含有する（）・ｊ−・液流は、
反応室から膜お」＝びその機械的外部応力を避けるだめ
にその上方に配置されたイＪ孔板を通って流出し、蓋か
ら排出される。平形中−′・が限外濾過膜として中空繊
維束、いわゆる中空繊維群に代えられているいわゆる中
空繊維−膜反応器は幾何学的配置に基づき１１ｑに対し
平行な流体の高いレイノルズ数およびそれにより酵素タ
ンパク質による膜のわずかな被覆が達成されるので有利
である。このタイプの反応器は、たとえば反応容器、循
環ボ／ノ゛および中空繊維群から成るループ形反応器（
５ｃｈｌａｕｆｅｎｒｅｋＬｏｒ）である。この中で、
反応混合物ば７］？ンゾで循環し、この」易合酵素タン
パク質による中空繊維１１．ｉｌｉの被覆をできるだけ
わずかに保つだめに、循環流は基質流と比較して少なく
とも約１００：１である。生成物を含有する濾液流は、
中空繊維膜を通過し、膜の後方で集められ、排出される
。
な膜が取り付けられている。基質流は、配）１ｉポンプ
によって膜の下に存在する、望甘しくＶ、かくはん装置
、たとえば磁気かくはん機をイ１ｉｉｉえている反応室
に供給される。生成物を含有する（）・ｊ−・液流は、
反応室から膜お」＝びその機械的外部応力を避けるだめ
にその上方に配置されたイＪ孔板を通って流出し、蓋か
ら排出される。平形中−′・が限外濾過膜として中空繊
維束、いわゆる中空繊維群に代えられているいわゆる中
空繊維−膜反応器は幾何学的配置に基づき１１ｑに対し
平行な流体の高いレイノルズ数およびそれにより酵素タ
ンパク質による膜のわずかな被覆が達成されるので有利
である。このタイプの反応器は、たとえば反応容器、循
環ボ／ノ゛および中空繊維群から成るループ形反応器（
５ｃｈｌａｕｆｅｎｒｅｋＬｏｒ）である。この中で、
反応混合物ば７］？ンゾで循環し、この」易合酵素タン
パク質による中空繊維１１．ｉｌｉの被覆をできるだけ
わずかに保つだめに、循環流は基質流と比較して少なく
とも約１００：１である。生成物を含有する濾液流は、
中空繊維膜を通過し、膜の後方で集められ、排出される
。
本発明による方法には、２０００〜５００００公称除去
限界を有する膜が使用される。股に適した材料は、たと
えばアセチルセル［ｌ−ス、ポリアミド、ポリスルホン
まだは変性７１？リビ−ルアルコールである。
限界を有する膜が使用される。股に適した材料は、たと
えばアセチルセル［ｌ−ス、ポリアミド、ポリスルホン
まだは変性７１？リビ−ルアルコールである。
膜反応器は平均分子量５００−５００００、特に１５０
０〜２００００を有するボＩＪ 工（−レンゲリコール
に結合して存在するＮＡＩ）ト／ＮＡＩ）ｆｌＯ０１〜
１０ミリ１００１ル１０６９ ロギンカル４８ノ酸に対し特異性のデヒ１？Ｖ】ゲナー
ゼ、および形成すべきα−アミノカル；１ミン酸ニ対し
特異性のデヒドロゲナーゼの水溶液を菖゛有する。
０〜２００００を有するボＩＪ 工（−レンゲリコール
に結合して存在するＮＡＩ）ト／ＮＡＩ）ｆｌＯ０１〜
１０ミリ１００１ル１０６９ ロギンカル４８ノ酸に対し特異性のデヒ１？Ｖ】ゲナー
ゼ、および形成すべきα−アミノカル；１ミン酸ニ対し
特異性のデヒドロゲナーゼの水溶液を菖゛有する。
本発明による方法において補酵素として必９２な、ポリ
エチレングリコールに結合する事により分子量を増大さ
せたＮＡＤ″７ＮＡｒｎＩＩＪＪ／Ｊ質な接触反応を許
容するためになお水溶性でなければならないが、他面で
は使用された酵素と一緒に膜により確実に保留されねば
ならない。分子量を増大させたＮＡＤ＋／ＮＡＤＨの製
造は、たとえば西ドイツ国特許第２８４１４１４号明細
書に詳細に記載されている。
エチレングリコールに結合する事により分子量を増大さ
せたＮＡＤ″７ＮＡｒｎＩＩＪＪ／Ｊ質な接触反応を許
容するためになお水溶性でなければならないが、他面で
は使用された酵素と一緒に膜により確実に保留されねば
ならない。分子量を増大させたＮＡＤ＋／ＮＡＤＨの製
造は、たとえば西ドイツ国特許第２８４１４１４号明細
書に詳細に記載されている。
この目的のために、たとえば補酵素をその酸化された形
で捷ずエチレンイミンと反応させてＮ（／り一アミノー
エチル誘導体にし、次いでこれ自体をカルボジイミド法
（ ＣｕａＬｒｅｃａｎａｓ。
で捷ずエチレンイミンと反応させてＮ（／り一アミノー
エチル誘導体にし、次いでこれ自体をカルボジイミド法
（ ＣｕａＬｒｅｃａｎａｓ。
Ｊ， Ｂｉｏｌ． Ｃｈｃｍ． 、 ２ ４ ５巻、３
０５９頁（１９７０年））を用いて、そのポリオキシエ
チレン鎖が平均分子量５００−５００００、特に１５０
０〜２００００を有するカルボキシル化されたポリエチ
レングリコールに結合する。次いで、得られた結合生成
物を、相応するＮ Ａ Ｄ Ｈ−誘導体に還元し、ツム
ロー転位（ Ｄｉｍｒｏｔｈ −［Ｊｍｌａｇｅｌ ｌ
’ＬＩｎｇ ） によりＮ（６）−ｉｉ１導体に変換し
、場合により古び相応するＮＡＤ＋−誘導体に酸化する
。分子量を増大させだ補酵素はＮＡＤ＋／Ｎ Ａ Ｄ
Ｈ の濃度が０．１−１０ｍモル／ ｌ 、特に１〜７
ｍモル／ｌであるような量で使用される。
０５９頁（１９７０年））を用いて、そのポリオキシエ
チレン鎖が平均分子量５００−５００００、特に１５０
０〜２００００を有するカルボキシル化されたポリエチ
レングリコールに結合する。次いで、得られた結合生成
物を、相応するＮ Ａ Ｄ Ｈ−誘導体に還元し、ツム
ロー転位（ Ｄｉｍｒｏｔｈ −［Ｊｍｌａｇｅｌ ｌ
’ＬＩｎｇ ） によりＮ（６）−ｉｉ１導体に変換し
、場合により古び相応するＮＡＤ＋−誘導体に酸化する
。分子量を増大させだ補酵素はＮＡＤ＋／Ｎ Ａ Ｄ
Ｈ の濃度が０．１−１０ｍモル／ ｌ 、特に１〜７
ｍモル／ｌであるような量で使用される。
１１、’４反応器に連続的に、反応すべきαーヒドロギ
ンカル月？ン酸の水溶液を、最大溶解量の２５〜１００
％に相当する濃度で供給する。エナ。
ンカル月？ン酸の水溶液を、最大溶解量の２５〜１００
％に相当する濃度で供給する。エナ。
チオマーの純α−ヒドロキシカルづ？ン酸、つ寸りＬ−
形またはＤ−形を使用し、膜反応器中に使用されるエナ
ンチオマーに対し特異性のデヒドロゲナーゼを装入する
事も原則的にはもちろん可能である。
形またはＤ−形を使用し、膜反応器中に使用されるエナ
ンチオマーに対し特異性のデヒドロゲナーゼを装入する
事も原則的にはもちろん可能である。
しかしながら、α−ヒドロキシカル＋１８ン酸をラセミ
体として使用するのがはるかに有利である。この場合、
使用すべきデヒドロゲナーゼに関して３つの方法がある
。一方のエナノヂ剌−７−に対してのみ特異性であるデ
ヒドロゲナーゼを使用する事が出来る。この場合には、
そのつど他のエナンチオマーは不変のま丑であり、膜反
応器から濾液流とともに流出し、該濾液流から回収する
事が出来る。あるいは、Ｌ−エナンチオマーに対し特異
性のデヒドロゲナーゼとＩ〕−エナンチオマーに対し特
異性のデヒドロゲナーゼとから成る混合物が使用される
。この場合には、次いで双方のエナンチオマーは最後に
所望のα−アミノカルダン酸に変換される。■，−エナ
ノテオマ− ｉ タＩｔ’ｉ Ｄ＝エナンチオマーに対
し特異性のデヒ１：″ロゲナーゼのみを使用するが、膜
反応器中に側線的に使用されるα−ヒ１０キ７カルポン
酸に対し特異性のラセマーゼを装入しても同じ目的に到
達する。
体として使用するのがはるかに有利である。この場合、
使用すべきデヒドロゲナーゼに関して３つの方法がある
。一方のエナノヂ剌−７−に対してのみ特異性であるデ
ヒドロゲナーゼを使用する事が出来る。この場合には、
そのつど他のエナンチオマーは不変のま丑であり、膜反
応器から濾液流とともに流出し、該濾液流から回収する
事が出来る。あるいは、Ｌ−エナンチオマーに対し特異
性のデヒドロゲナーゼとＩ〕−エナンチオマーに対し特
異性のデヒドロゲナーゼとから成る混合物が使用される
。この場合には、次いで双方のエナンチオマーは最後に
所望のα−アミノカルダン酸に変換される。■，−エナ
ノテオマ− ｉ タＩｔ’ｉ Ｄ＝エナンチオマーに対
し特異性のデヒ１：″ロゲナーゼのみを使用するが、膜
反応器中に側線的に使用されるα−ヒ１０キ７カルポン
酸に対し特異性のラセマーゼを装入しても同じ目的に到
達する。
さらに、膜反応器に連続的に、反応すべきα−ヒドロキ
シカルボン酸に相応するα−ケトカルボン酸を、その反
応器濃度が、使用されるアミノカル７１？ン酸デヒドロ
ゲナーゼニ対して１〜１０娩であるような量で供給する
。ここでＩｒｅは、使用される、形成すべきα−アミノ
カルボン酸に対し特異性のデヒドロゲナーゼに関して、
α−ケトカルボン酸の吸着平衡定数の逆数をあられず。
シカルボン酸に相応するα−ケトカルボン酸を、その反
応器濃度が、使用されるアミノカル７１？ン酸デヒドロ
ゲナーゼニ対して１〜１０娩であるような量で供給する
。ここでＩｒｅは、使用される、形成すべきα−アミノ
カルボン酸に対し特異性のデヒドロゲナーゼに関して、
α−ケトカルボン酸の吸着平衡定数の逆数をあられず。
α−ケトカルボン酸は、反応すべきα−ヒドロギンカル
Ｈ？ン酸の水溶液に添加するか、または水溶液の形で別
個に配量する事が出来、このことは事情によっては、こ
の場合配量を独立に制御できるので有利である。
Ｈ？ン酸の水溶液に添加するか、または水溶液の形で別
個に配量する事が出来、このことは事情によっては、こ
の場合配量を独立に制御できるので有利である。
さらに、膜反応器に、連続的にアンモニウムイオンを、
α−ヒドロキシカルケソン酸の反応すべき量に少なくと
も等モル量で供給する。しかし３倍のモル過剰までのア
ンモニウム塩刈／も反応を妨げない。アンモニウムイオ
ンの１１１．給し１、望ましくは反応すべきα−ヒドロ
キシカルゼン酸の水溶液に適当なアンモニウム塩、たと
えばギ酸アンモニウムを所望の鼠で添加する事により行
なわれる。
α−ヒドロキシカルケソン酸の反応すべき量に少なくと
も等モル量で供給する。しかし３倍のモル過剰までのア
ンモニウム塩刈／も反応を妨げない。アンモニウムイオ
ンの１１１．給し１、望ましくは反応すべきα−ヒドロ
キシカルゼン酸の水溶液に適当なアンモニウム塩、たと
えばギ酸アンモニウムを所望の鼠で添加する事により行
なわれる。
反応すべきα−ヒＦロキンカルボン酸に対し特異性のデ
ヒドロゲナーぜは望ましくれ」１、″Ｉ４衡状態におい
て中間生成物として相応するα−クトカルｙｌ？ン酸に
関し達成可能な平衡変換率の少なくとも５０％が得られ
るような量で使用される。必要な酵素濃度は、滞留時間
およびα−ヒドロキシカルづミン酸の出発濃度に左右さ
れる。
ヒドロゲナーぜは望ましくれ」１、″Ｉ４衡状態におい
て中間生成物として相応するα−クトカルｙｌ？ン酸に
関し達成可能な平衡変換率の少なくとも５０％が得られ
るような量で使用される。必要な酵素濃度は、滞留時間
およびα−ヒドロキシカルづミン酸の出発濃度に左右さ
れる。
１時間の滞留時間および１００ミリモル／ｌの基質濃度
では、一般に１０ Ｕ／ｍｉ のα−ヒトロキ／カルゼ
ン酸−デヒト８０ゲナーゼ活性が十分である。
では、一般に１０ Ｕ／ｍｉ のα−ヒトロキ／カルゼ
ン酸−デヒト８０ゲナーゼ活性が十分である。
場合により付加的に使用される、反応すべきα−ヒドロ
キシカル前ン酸に対し特異性のラセマーゼは望寸しくけ
、ラセミ化反応が十分な速度で進行し、全反応の速度決
定工程ではＡいよつな量で使用される。一般に、このノ
ζめには、再び１時間の滞留時間および１００ ミＩＪ
モル／ｌの基質濃度から出発する場合、１０ ｕ／ｍｔ
、のラセマーゼ−活性が十分である。
キシカル前ン酸に対し特異性のラセマーゼは望寸しくけ
、ラセミ化反応が十分な速度で進行し、全反応の速度決
定工程ではＡいよつな量で使用される。一般に、このノ
ζめには、再び１時間の滞留時間および１００ ミＩＪ
モル／ｌの基質濃度から出発する場合、１０ ｕ／ｍｔ
、のラセマーゼ−活性が十分である。
ｉυ後に、形成すべきα−アミノカルＨ？ン酸に対し特
異性のデヒドロゲナーゼは、望ましくは、平衡状態で成
立するＮＡＤ＋対ＮＡＤＨの比が少なくとも５＝１であ
るような量で使用される。
異性のデヒドロゲナーゼは、望ましくは、平衡状態で成
立するＮＡＤ＋対ＮＡＤＨの比が少なくとも５＝１であ
るような量で使用される。
このために、１時間の滞留時間および１００ミリモル／
ｌの基質濃度で、結合された反応系で熱力学的に可能で
ある平衡状態の少なくとも９０％を調節するために、ア
ミノカル７１？ン酸デヒドロゲナーゼ１００Ｕ／ｒｎ１
．までが使用される。
ｌの基質濃度で、結合された反応系で熱力学的に可能で
ある平衡状態の少なくとも９０％を調節するために、ア
ミノカル７１？ン酸デヒドロゲナーゼ１００Ｕ／ｒｎ１
．までが使用される。
反応の間、膜を介して０１〜１５パール、特に０．２〜
３パールの差圧を維持しなければならず、これは供給す
べき基質溶液の相応に寸法定めされだ配量ポンプを使用
する事および場合に」ニジ膜の後方で濾液流中の絞り弁
によって達成される。差圧は、認液流が所望の速度で膜
を１ｉｒＩ過する作用をする。膜の圧力側の絶対圧は望
すしくけ、激しい乱流をつくるためおよびそれとともに
酵素まだは分子量を増大させだ補酵素による膜の被覆を
さけるために反応室中で膜の［）１１方で強力にかくは
んするかまたはポンプて循環さぜる場合にどこでも圧力
が十分に低下して、圧力側で反応混合物の脱ガスが生じ
ることのないように、調節すべきである。
３パールの差圧を維持しなければならず、これは供給す
べき基質溶液の相応に寸法定めされだ配量ポンプを使用
する事および場合に」ニジ膜の後方で濾液流中の絞り弁
によって達成される。差圧は、認液流が所望の速度で膜
を１ｉｒＩ過する作用をする。膜の圧力側の絶対圧は望
すしくけ、激しい乱流をつくるためおよびそれとともに
酵素まだは分子量を増大させだ補酵素による膜の被覆を
さけるために反応室中で膜の［）１１方で強力にかくは
んするかまたはポンプて循環さぜる場合にどこでも圧力
が十分に低下して、圧力側で反応混合物の脱ガスが生じ
ることのないように、調節すべきである。
膜反応器は、酵素反応に通常の温度２５〜・５０℃に保
たれる。反応混合物のｐＨｉｉ：、反１，１４、の間望
ましくは８〜９．５の範囲に保たれる。
たれる。反応混合物のｐＨｉｉ：、反１，１４、の間望
ましくは８〜９．５の範囲に保たれる。
実地では現在、本発明の方法により、Ｄ−アミノ酸デヒ
ドロゲナーゼはこれまで利用されなかったので、Ｌ−α
−アミノカルどン酸のみが製造できる。しかし、本発明
による方法は非常に多方面に使用可能である。たとえば
、酵素系Ｌ−またはＤ−もしくはＬ−およびＩ〕−乳酸
デヒドロゲナーぜ＋Ｌ−アラニンーデヒドロゲナーゼあ
るいはＬ−またはＤ−乳酸デヒドロゲナーゼ」−乳酸ラ
セマーゼ（Ｅ、 Ｃ，５，１，２，１） ＋■、−アラ
二ノ−アノ−デヒドロゲナーゼて乳酸をＬ−アラニンに
変換する事ができる。酵素系Ｉ、−１だｉｔ Ｄ−もし
くはＬ −オヨびＤ−２−ヒドロキシ−４−−メチルペ
ンタン酸デヒドロゲナーゼ」−■、−ロインンデヒドロ
ゲナーゼを用いて、２−ヒ１″ロキ／−４〜−メチルメ
ルヵゾ）Ｍ酸をＬ−ノチオニンに、２−ヒトゝロキンー
δ−メチル酩ＨをＬ−バリンに、２−ヒドロキシ−４−
メチルペンタン酸をＬ−ロインンにもしくは２−ヒドロ
キシ−３−メチルペンタン酸ヲＬ −イノロインンにそ
れぞれ変換する事ができる。
ドロゲナーゼはこれまで利用されなかったので、Ｌ−α
−アミノカルどン酸のみが製造できる。しかし、本発明
による方法は非常に多方面に使用可能である。たとえば
、酵素系Ｌ−またはＤ−もしくはＬ−およびＩ〕−乳酸
デヒドロゲナーぜ＋Ｌ−アラニンーデヒドロゲナーゼあ
るいはＬ−またはＤ−乳酸デヒドロゲナーゼ」−乳酸ラ
セマーゼ（Ｅ、 Ｃ，５，１，２，１） ＋■、−アラ
二ノ−アノ−デヒドロゲナーゼて乳酸をＬ−アラニンに
変換する事ができる。酵素系Ｉ、−１だｉｔ Ｄ−もし
くはＬ −オヨびＤ−２−ヒドロキシ−４−−メチルペ
ンタン酸デヒドロゲナーゼ」−■、−ロインンデヒドロ
ゲナーゼを用いて、２−ヒ１″ロキ／−４〜−メチルメ
ルヵゾ）Ｍ酸をＬ−ノチオニンに、２−ヒトゝロキンー
δ−メチル酩ＨをＬ−バリンに、２−ヒドロキシ−４−
メチルペンタン酸をＬ−ロインンにもしくは２−ヒドロ
キシ−３−メチルペンタン酸ヲＬ −イノロインンにそ
れぞれ変換する事ができる。
酵素系■、−まだはＤ−もしくはＬ−およびＤ−乳酸テ
ヒドロゲナーゼ＋Ｌ−フェニルアラニンデヒドロゲナー
ゼを用い、フェニル乳酸をＬ−フェニルアラニンに変換
する事ができる。酵素系り一寸たはＤ−もしくはＬ−お
よびＤ−インドリル酢酸 デヒドロゲナーぜ＋Ｌ−フェ
ニルアラニンーデヒ＋ｙロゲナーゼを用い、インドリル
乳酸をＬ ＋ ｌ−ＩＪブトフランに変換する事がで本
発明による方法を次側により詳述する。
ヒドロゲナーゼ＋Ｌ−フェニルアラニンデヒドロゲナー
ゼを用い、フェニル乳酸をＬ−フェニルアラニンに変換
する事ができる。酵素系り一寸たはＤ−もしくはＬ−お
よびＤ−インドリル酢酸 デヒドロゲナーぜ＋Ｌ−フェ
ニルアラニンーデヒ＋ｙロゲナーゼを用い、インドリル
乳酸をＬ ＋ ｌ−ＩＪブトフランに変換する事がで本
発明による方法を次側により詳述する。
例 ■
磁気かくはん機および５０００の公称除去限界を有する
直径６２，１１１１の限外濾過膜（ＷｉＬＬｃｎ在Ｌｉ
ｅｆｅｒｆｉｒｍａ社のＡｍ１ｃｏｎ、 ＹＭ５型）を
備えたｌ １．３ ｍｔの容積を有する、２５℃の温度
に保たれた平形膜反応器を、滅菌のだめｆｏ、時］］３
？ｄの送り出し速度に調節されだ配量ｆンブを用いて約
５時間７０％のエタノール水溶液で洗った。引続き、さ
らに約５時間アルコール水溶液を蒸留水により置換した
。その後、毎時９．３ ｍｌの送り出し速度で約５時間
すトリウム塩の形のＤＬ−乳酸２４３ミリモル／ｌ お
よびギ酸アンモニウム４８６ミリモル／ｌ を含有し、
力性ソーダ溶液でｐＨ９に調節された、滅菌フィルター
（０，２μｍ）を通して濾過されたＪ、ｌ”ｉ’↓浴液
を供給した。同時に、第２の配量ポンプで同し滅菌フィ
ルターを通して毎時２ ｍｌの送り出し速度で約５時間
ナトリウム塩の形の熱性ブドウ酸１１３ ミｌ）モル／
ｌ を含有し、力性ソーダ溶液でｐ＋−ｒ ９に調節さ
れたピルビン酸塩溶液を供給した。それにより、反応が
反応器中でまだ開始されない限り、ＤＬ−乳酸塩２００
ミｌ）モル／７！、ギ酸アンモニウム４００ミリモル
／ｌ およびピルピノ酸塩２ミリモル／ｌ の反応器中
の出発濃度が生じた。その後、酵素／補酵素−混合物を
滅菌フィルターの前方で隔膜を介して基質配量液中へ注
入して、反応器中で２００００の平均分子量を有するポ
リエチレングリコールに結合したＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ１
，３２ミ リモル／ｌ の濃度ならびに６０．５ Ｕ／
、、ｆｆｌ のし−乳酸デヒドロゲナーゼ活性（ＤＩ、
−乳酸０．２モル／ｌ、 ＮＡＤ＋２ミリモル／ｌ、２
５°Ｃ，ｐＨ９でｆｉｌｌｌ定）、ならびにｌ ７８．
６ Ｕ／ｍＡ のＬ−アラニン−デヒドロゲナーゼ活性
（Ｌ″ルピン酸塩２ミリモル／ｌ、ＮＡＤＨ２ミリモル
／１１ ギ酸アンモニウム４００ミリモル／ｌ、２５°
Ｃ，ｐＨ９で測定）を生じるようにしだ。
直径６２，１１１１の限外濾過膜（ＷｉＬＬｃｎ在Ｌｉ
ｅｆｅｒｆｉｒｍａ社のＡｍ１ｃｏｎ、 ＹＭ５型）を
備えたｌ １．３ ｍｔの容積を有する、２５℃の温度
に保たれた平形膜反応器を、滅菌のだめｆｏ、時］］３
？ｄの送り出し速度に調節されだ配量ｆンブを用いて約
５時間７０％のエタノール水溶液で洗った。引続き、さ
らに約５時間アルコール水溶液を蒸留水により置換した
。その後、毎時９．３ ｍｌの送り出し速度で約５時間
すトリウム塩の形のＤＬ−乳酸２４３ミリモル／ｌ お
よびギ酸アンモニウム４８６ミリモル／ｌ を含有し、
力性ソーダ溶液でｐＨ９に調節された、滅菌フィルター
（０，２μｍ）を通して濾過されたＪ、ｌ”ｉ’↓浴液
を供給した。同時に、第２の配量ポンプで同し滅菌フィ
ルターを通して毎時２ ｍｌの送り出し速度で約５時間
ナトリウム塩の形の熱性ブドウ酸１１３ ミｌ）モル／
ｌ を含有し、力性ソーダ溶液でｐ＋−ｒ ９に調節さ
れたピルビン酸塩溶液を供給した。それにより、反応が
反応器中でまだ開始されない限り、ＤＬ−乳酸塩２００
ミｌ）モル／７！、ギ酸アンモニウム４００ミリモル
／ｌ およびピルピノ酸塩２ミリモル／ｌ の反応器中
の出発濃度が生じた。その後、酵素／補酵素−混合物を
滅菌フィルターの前方で隔膜を介して基質配量液中へ注
入して、反応器中で２００００の平均分子量を有するポ
リエチレングリコールに結合したＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ１
，３２ミ リモル／ｌ の濃度ならびに６０．５ Ｕ／
、、ｆｆｌ のし−乳酸デヒドロゲナーゼ活性（ＤＩ、
−乳酸０．２モル／ｌ、 ＮＡＤ＋２ミリモル／ｌ、２
５°Ｃ，ｐＨ９でｆｉｌｌｌ定）、ならびにｌ ７８．
６ Ｕ／ｍＡ のＬ−アラニン−デヒドロゲナーゼ活性
（Ｌ″ルピン酸塩２ミリモル／ｌ、ＮＡＤＨ２ミリモル
／１１ ギ酸アンモニウム４００ミリモル／ｌ、２５°
Ｃ，ｐＨ９で測定）を生じるようにしだ。
反応器け２５°Ｃ，ｐＨ９で６０分の滞留時間で連続的
に６日にわたって操作した。全操作ＩＲｊ間の間、膜に
よる差圧は約１７パールであった。最高の初期変換率は
８０％であり、６１−１間の経過中に６０％に低下した
（変換率は基ｔ′↓「１費りＬ−エナンチオマーに対し
て）。最高の空時収率は１．９２モル／（ｚｘｄ）Ｉい
しは１７１ ！ＪＡＺＸｄ）であった。６日の操作時間
内に、■、−アラニンｌ Ｏ，ｌ ｇ々いしは１１３ミ
リモル／ｆ を得た。酵素活性の補酵素濃度は、６１−
１の経過中に１．３２ミＩＪ モル／ｌ から０．４９
ミ！Ｊ モル／ｌに低下した。
に６日にわたって操作した。全操作ＩＲｊ間の間、膜に
よる差圧は約１７パールであった。最高の初期変換率は
８０％であり、６１−１間の経過中に６０％に低下した
（変換率は基ｔ′↓「１費りＬ−エナンチオマーに対し
て）。最高の空時収率は１．９２モル／（ｚｘｄ）Ｉい
しは１７１ ！ＪＡＺＸｄ）であった。６日の操作時間
内に、■、−アラニンｌ Ｏ，ｌ ｇ々いしは１１３ミ
リモル／ｆ を得た。酵素活性の補酵素濃度は、６１−
１の経過中に１．３２ミＩＪ モル／ｌ から０．４９
ミ！Ｊ モル／ｌに低下した。
補酵素（使用した）１モルにつき、生成物１２０００モ
ルが形成した。こ、！′１は生成物１ム９あたりＮＡＤ
” （原生） ６ ］−５ｍ９の必要量に相■＋する。
ルが形成した。こ、！′１は生成物１ム９あたりＮＡＤ
” （原生） ６ ］−５ｍ９の必要量に相■＋する。
例 ２
磁気かくはん機および５０００の公称除去限界を有する
、直径６２馴の限外ｄＶ過膜（Ｗｉｔｔｃｎ在Ｌｉｅｆ
ｅｒｆｉｒｍａ ： Ａｍ１ｃｏｎ 、Ｔｙｐ ＹＭ
５型）をイ１１１］えた、２５℃の温度に保たれた平形
膜反応器を、滅ｌ′Ｉｌのために毎時２０ηＪの送り出
し速度に調節された配ｈ１．ポンプを用いて約２時間０
．０５％の過酢酸水溶液て洗った。引続き、さらに約１
０１１、’ｊ間滅閉溶液を蒸留水により置換した。その
後、４Ｕ： ’、＋ｌｌＯｍｌの送り出し速度で牛時間
滅菌膜（Ｑ、 ２ ７１ｍ ）を通して、Ｄ Ｌ −２
−ヒ１：′ロギノー４−メチルノルカゾト酪酸（“Ｄ
Ｌ−ヒＩＳロキ／ノチオニン” ） ４−００ ｍモル
／ｌ、ギ酸アンモニウムａｏｏｍモル／ｌおよび２−ケ
ト−４−メチルノルカゾト醋酸１ｍモル／ｌを含有し、
力性ソーダ溶液でｐＨ８に調節した基質溶液を供給した
。
、直径６２馴の限外ｄＶ過膜（Ｗｉｔｔｃｎ在Ｌｉｅｆ
ｅｒｆｉｒｍａ ： Ａｍ１ｃｏｎ 、Ｔｙｐ ＹＭ
５型）をイ１１１］えた、２５℃の温度に保たれた平形
膜反応器を、滅ｌ′Ｉｌのために毎時２０ηＪの送り出
し速度に調節された配ｈ１．ポンプを用いて約２時間０
．０５％の過酢酸水溶液て洗った。引続き、さらに約１
０１１、’ｊ間滅閉溶液を蒸留水により置換した。その
後、４Ｕ： ’、＋ｌｌＯｍｌの送り出し速度で牛時間
滅菌膜（Ｑ、 ２ ７１ｍ ）を通して、Ｄ Ｌ −２
−ヒ１：′ロギノー４−メチルノルカゾト酪酸（“Ｄ
Ｌ−ヒＩＳロキ／ノチオニン” ） ４−００ ｍモル
／ｌ、ギ酸アンモニウムａｏｏｍモル／ｌおよび２−ケ
ト−４−メチルノルカゾト醋酸１ｍモル／ｌを含有し、
力性ソーダ溶液でｐＨ８に調節した基質溶液を供給した
。
別個の組反応器（ビーカー）中で、酵素Ｌ −［Ｊイシ
ンーデヒ１：′ロゲナーゼおよｏ：Ｌ−２−ヒドロキシ
−手一メチルペンタン′酸デヒドロゲプ−−ゼならびに
補酵素としてポリエチレングリコール（分子量２０００
０）に結合したＮ Ａ Ｄ Ｉ−Ｉを含イＪする同濃度
の基質溶液２５ηＬｅを２４時間にわたって反応させた
。この場合、２４時間の経過中に少なくとも、あとで連
続的試験で目指すような変換率が得られるような酵素−
および補酵素濃度を使用した。
ンーデヒ１：′ロゲナーゼおよｏ：Ｌ−２−ヒドロキシ
−手一メチルペンタン′酸デヒドロゲプ−−ゼならびに
補酵素としてポリエチレングリコール（分子量２０００
０）に結合したＮ Ａ Ｄ Ｉ−Ｉを含イＪする同濃度
の基質溶液２５ηＬｅを２４時間にわたって反応させた
。この場合、２４時間の経過中に少なくとも、あとで連
続的試験で目指すような変換率が得られるような酵素−
および補酵素濃度を使用した。
この溶液は、毎時２．７ ｒｕｔの送り出し２速度て゛
１′形膜反応器中へ配量した。その後、同じ送り出し速
度で上述の基質溶液をさらに配）ｉ（シた。
１′形膜反応器中へ配量した。その後、同じ送り出し速
度で上述の基質溶液をさらに配）ｉ（シた。
酵素および補酵素は反応器の前夫て滅菌フィルターを通
過しうるが、反応器装置自体・の限外フィルターを通過
する事は出来ないので、反応器中に、１．４２ミ！Ｊモ
ル／ｌの補酵素濃度、ならびに４゜Ｑ Ｕ／ｍｌの １
，２−ヒドロ−ｒ ／′−４−−メチル被ンタン酸 デ
ヒｌ゛ロゲナーゼ活１’ｋ （ｒ）■。
過しうるが、反応器装置自体・の限外フィルターを通過
する事は出来ないので、反応器中に、１．４２ミ！Ｊモ
ル／ｌの補酵素濃度、ならびに４゜Ｑ Ｕ／ｍｌの １
，２−ヒドロ−ｒ ／′−４−−メチル被ンタン酸 デ
ヒｌ゛ロゲナーゼ活１’ｋ （ｒ）■。
−２−ヒドロキシ−４−メチルメルノノフパ１・酪酸０
４モル／１１ ト リ ス緩衝液０１モル／ｌ 、ＮＡ
Ｉ）”１ミリモル／′ｌ、２５°Ｃ，ＩＩＨ８で測定）
および８６、３ Ｕ／ｍｔのＬ−ロイゾンーデヒ１−Ｓ
ロゲナーービ活性（２−ケトー牛−メチルメルカゾト酪
酸２ミリモル／ｌ 、ＮＡＤＨ１ミリモル／１１ギ酸ア
ンモニウム８００ミリモル／ｌ、 ２５℃、 ｐＨ８で
測定）が生じた。
４モル／１１ ト リ ス緩衝液０１モル／ｌ 、ＮＡ
Ｉ）”１ミリモル／′ｌ、２５°Ｃ，ＩＩＨ８で測定）
および８６、３ Ｕ／ｍｔのＬ−ロイゾンーデヒ１−Ｓ
ロゲナーービ活性（２−ケトー牛−メチルメルカゾト酪
酸２ミリモル／ｌ 、ＮＡＤＨ１ミリモル／１１ギ酸ア
ンモニウム８００ミリモル／ｌ、 ２５℃、 ｐＨ８で
測定）が生じた。
反応器ｉｆ、２５℃でｐＨ８ｆ３．７時間ノＷｆ？ Ｉ
Ｙｆ時間で上述の条件下に連続的に約４．５日間縁作し
／。。この操作時間の間、膜の両側での最高差圧は約３
・６−ルであった。試験時間中に、３８゜４％の最高変
換率が得られ、これは２．６日の経過中に３６．４−％
に低下した（変換率は基質中のＬ−エナンチオマーに対
して）。
Ｙｆ時間で上述の条件下に連続的に約４．５日間縁作し
／。。この操作時間の間、膜の両側での最高差圧は約３
・６−ルであった。試験時間中に、３８゜４％の最高変
換率が得られ、これは２．６日の経過中に３６．４−％
に低下した（変換率は基質中のＬ−エナンチオマーに対
して）。
４．３４日の操作時間内に、Ｌ−エナンチオマー３’ｌ
ないしは２０ミリモルが得られた。酵素活性の補酵素濃
度は、牛、３４日の経過中に１４２ミリモル／ｌから１
２５ミリモル／ｌに低下した。。
ないしは２０ミリモルが得られた。酵素活性の補酵素濃
度は、牛、３４日の経過中に１４２ミリモル／ｌから１
２５ミリモル／ｌに低下した。。
補酵素（使用された）１モルにつき、生成物１１８００
モルが形成した。これは、ＮＡＤ→−（原生）３７８ｍ
９／生成物Ｉｃｇの消費に相当する代理人 弁理士 矢
野 敏 雄（ほか１名）第１頁の続き ０発 明 者 クリスチャン・ヴアン トイトライ シ
ュ の発 明 者 マリアーレギーナ・り ドイラ ニー 〇出 願 人 ゲゼルシャフト・ツユ ドイア・ヒ゛オ
デヒノロキッ ム・ ソエ・フオルンユン ク・ミツト・ヘノユレ ンクテルφハフッンク （ケー・ベー・エフ） ソ連邦共和国ユーリツヒ・ヴオルフスホーフエナー・ト
ラーセ １３９ ソ連邦共和国ヴオルフエンビュツテル・フォルストウ゛
り １５ ソ連邦共和国ブラウンシュヴアイク・シュチックハイマ
ッシ丁ローター・ウェーク １
モルが形成した。これは、ＮＡＤ→−（原生）３７８ｍ
９／生成物Ｉｃｇの消費に相当する代理人 弁理士 矢
野 敏 雄（ほか１名）第１頁の続き ０発 明 者 クリスチャン・ヴアン トイトライ シ
ュ の発 明 者 マリアーレギーナ・り ドイラ ニー 〇出 願 人 ゲゼルシャフト・ツユ ドイア・ヒ゛オ
デヒノロキッ ム・ ソエ・フオルンユン ク・ミツト・ヘノユレ ンクテルφハフッンク （ケー・ベー・エフ） ソ連邦共和国ユーリツヒ・ヴオルフスホーフエナー・ト
ラーセ １３９ ソ連邦共和国ヴオルフエンビュツテル・フォルストウ゛
り １５ ソ連邦共和国ブラウンシュヴアイク・シュチックハイマ
ッシ丁ローター・ウェーク １
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 工、酵素反応器中で、水溶性高分子物質に結合する小に
より分子量を増大さぜたニコチンアミ１″・アデニン・
ノヌクレオチド（ＮＡＤ ／ＮＡＤＨ）、使用されるα
−ヒドロキシカルボン酸に対し特異性のデヒドロゲナー
ゼ、形成すべきα−アミノカル＋ｌＦン酸に対し特異性
のデヒドロゲナーゼおよびアンモニウムイオンの存在で
α−ヒドロキシカルボン酸を相応する光学活性のα−ア
ミノカルボン酸に連続的に酵素的に変換する方法におい
て、５００〜 ５００００の平均分子量を有するポリエチレングリコー
ルに結合して存在するＮＡＤ”／ＮＡＤＨの０．１〜ｌ
Ｏｍモル／ｌを有する、使用されるヒドロゲナーゼおよ
び形成すべきα−アミノカルダン酸に対し特異性のデヒ
ドロゲナーゼの水溶液を含有する２０００〜５００００
の公称除去限界を有する限外濾過膜を備える膜反応器に
連続的に、反応すべきα−ヒドロギ／カルＪξン酸を最
高溶解量の２５〜１００％に相当する濃度でα−ヒドロ
キシカルＪさン酸に相応するα−ケトカルゼン酸をアミ
ノヵルゼン酸デヒドロゲナーゼに対し１〜１０１珈の濃
度でかつ少なくとも当モル量のα−ヒ１−″ロキシカル
ボン酸の反応すべき量に対し少なくとも等モル量のアン
モニウムイオンを含有する水溶液を供給し、膜において
０１〜１５バールの差圧を維持し、膜の後方で連続的に
形成されたα−アミノカルダン酸を含有する濾液流を排
出する事を特徴とする、α−ヒ１゛ロキシカルボン酸を
相応する光学活性のα−アミノカルダン酸に連続的に酵
素的に変換する方法。 セミ体として使用し、Ｌ−エナンチオマーに対し特異性
のデヒドロゲナーゼとＤ−エナンチオマーに対し！ｆ？
異性のデヒドロゲナーゼとの混合物を特徴する特許８青
求の範囲第１項記載の方法。 ３ 反応ずべきα−ヒドロキシカルボン＋’Ｊ２ｆラセ
ミ体として使用し、Ｌ−エナンチオマーまたはＤ−エナ
ンチオマーに対し特異性のデヒ＋ｆｉ ｏゲナーゼを使
用するが、反応をα−ヒト「Ｊギンカルボン酸に対し特
異性のラセマーゼを同時ンこ存在させて行なう、特許請
求の範囲第１項記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3307094.6 | 1983-03-01 | ||
| DE19833307094 DE3307094A1 (de) | 1983-03-01 | 1983-03-01 | Verfahren zur kontinuierlichen enzymatischen umwandlung von (alpha)-hydroxycarbonsaeuren in entsprechende optisch aktive (alpha)-aminocarbonsaeuren |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6041495A true JPS6041495A (ja) | 1985-03-05 |
Family
ID=6192135
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59036348A Pending JPS6041495A (ja) | 1983-03-01 | 1984-02-29 | α−ヒドロキシカルボン酸を相応する光学活性のα−アミノカルボン酸に連続的に酵素的に変換する方法 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4782020A (ja) |
| EP (1) | EP0121074B1 (ja) |
| JP (1) | JPS6041495A (ja) |
| CA (1) | CA1210354A (ja) |
| DE (2) | DE3307094A1 (ja) |
| DK (1) | DK159329C (ja) |
| ES (1) | ES530155A0 (ja) |
| HU (1) | HU199560B (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63174740U (ja) * | 1987-02-28 | 1988-11-14 | ||
| WO2016006521A1 (ja) * | 2014-07-11 | 2016-01-14 | 住友化学株式会社 | 酸化酵素、それをコードするポリヌクレオチド、及びそれらの利用 |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3446304A1 (de) * | 1984-12-19 | 1986-07-10 | Degussa Ag, 6000 Frankfurt | Verfahren zur gewinnung von phenylalanin-dehydrogenase enthaltenden mikroorganismen, mikroorganismen, die in ihnen enthaltene phenylalanin-dehydrogenase und deren verwendung zur herstellung von l-(alpha)-aminosaeuren |
| NO174588C (no) * | 1992-01-22 | 1994-06-01 | Norske Meierier | Fremgangsmåte for kontinuerlig fremstilling av ulike biotekniske produktgrupper ved anvendelse av kontinuerlig membranreaktor |
| DE19926770A1 (de) | 1999-06-11 | 2000-12-14 | Basf Ag | Nukleinsäurefragment und Vektor, enthaltend eine Halogenase, sowie ein Verfahren zur Halogenierung chemischer Verbindungen |
| SG11201700101WA (en) | 2014-07-11 | 2017-02-27 | Sumitomo Chemical Co | Oxidase, polynucleotide that codes for same, and use thereof |
Citations (2)
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|---|---|---|---|---|
| JPS5664791A (en) * | 1979-07-25 | 1981-06-02 | Degussa | Continuous enzymatic conversion of water soluble alphaaketocarboxylic acid to corresponding alphaahydroxycarboxylic acid |
| JPS5664792A (en) * | 1979-07-25 | 1981-06-02 | Degussa | Continuous enzymatic conversion of water soluble alphaaketocarboxylic acid to corresponding to amino acid |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3183170A (en) * | 1961-10-03 | 1965-05-11 | Sanraku Ocean Kabushiki Kaisha | Method of l-amino acid manufacture |
| IT987278B (it) * | 1973-05-11 | 1975-02-20 | Snam Progetti | Procedimento per la preparazione di l carbamil ammino acidi e dei corrispondenti l amminoacidi |
| JPS51151391A (en) * | 1975-06-19 | 1976-12-25 | Ajinomoto Co Inc | Process for preparing l-sulfur- containing amino acids |
-
1983
- 1983-03-01 DE DE19833307094 patent/DE3307094A1/de not_active Withdrawn
-
1984
- 1984-02-20 DE DE8484101747T patent/DE3478614D1/de not_active Expired
- 1984-02-20 EP EP84101747A patent/EP0121074B1/de not_active Expired
- 1984-02-24 DK DK102184A patent/DK159329C/da not_active IP Right Cessation
- 1984-02-29 ES ES530155A patent/ES530155A0/es active Granted
- 1984-02-29 JP JP59036348A patent/JPS6041495A/ja active Pending
- 1984-02-29 CA CA000448546A patent/CA1210354A/en not_active Expired
- 1984-02-29 HU HU84823A patent/HU199560B/hu not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-08-10 US US07/083,882 patent/US4782020A/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
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|---|---|---|---|---|
| JPS5664791A (en) * | 1979-07-25 | 1981-06-02 | Degussa | Continuous enzymatic conversion of water soluble alphaaketocarboxylic acid to corresponding alphaahydroxycarboxylic acid |
| JPS5664792A (en) * | 1979-07-25 | 1981-06-02 | Degussa | Continuous enzymatic conversion of water soluble alphaaketocarboxylic acid to corresponding to amino acid |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| JPWO2016006521A1 (ja) * | 2014-07-11 | 2017-04-27 | 住友化学株式会社 | 酸化酵素、それをコードするポリヌクレオチド、及びそれらの利用 |
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