JPS60239658A - 電気泳動用媒体材料 - Google Patents
電気泳動用媒体材料Info
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- JPS60239658A JPS60239658A JP59096152A JP9615284A JPS60239658A JP S60239658 A JPS60239658 A JP S60239658A JP 59096152 A JP59096152 A JP 59096152A JP 9615284 A JP9615284 A JP 9615284A JP S60239658 A JPS60239658 A JP S60239658A
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
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- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［発明の分野］
本発明は、電気泳動用媒体材料に関するものであり、さ
らに詳しくは、特にＤＮＡの塩基配列決定操作に用いる
のに適した電気泳動用媒体材料に関するものである。
らに詳しくは、特にＤＮＡの塩基配列決定操作に用いる
のに適した電気泳動用媒体材料に関するものである。
［発明の背景］
ボストラベル法に基づ＜ＤＮＡやＲＮＡの塩基配列決定
法においては、ポリアクリルアミドゲルＩＩ！Ｊ４用い
たスラブ電気泳動操作が必須の操作となっている。特に
近年において遺伝子関連の研究が進むにつれて、ＤＮＡ
塩基配列決定の操作の迅速化が急務となっている。
法においては、ポリアクリルアミドゲルＩＩ！Ｊ４用い
たスラブ電気泳動操作が必須の操作となっている。特に
近年において遺伝子関連の研究が進むにつれて、ＤＮＡ
塩基配列決定の操作の迅速化が急務となっている。
ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミドのような
単量体を触媒の存在下にてＮ、Ｎ“−メチレンビスアク
リルアミドのような二官能性の架橋剤を用い架橋重合さ
せることにより得られる。
単量体を触媒の存在下にてＮ、Ｎ“−メチレンビスアク
リルアミドのような二官能性の架橋剤を用い架橋重合さ
せることにより得られる。
なお、このポリアクリルアミドゲル膜の形成に際して通
常は、尿素あるいはホルムアミドのような変性剤を含有
させる。
常は、尿素あるいはホルムアミドのような変性剤を含有
させる。
上記の重合反応はラジカル架橋重合であり、酸素の影響
により反応が阻害されるため、ポリアクリルアミドゲル
膜は酸素を遮断した状態で作成する必要がある。この理
由から、現在では一般に、ポリアクリルアミドゲル膜は
２枚のガラス板で形成されたセル（一定の空間、たとえ
ば約０．３〜１ｍｍを有する）の中にゲル形成液を注入
させ、酸素を遮断した状態で架橋重合させてゲル膜を形
成させている。
により反応が阻害されるため、ポリアクリルアミドゲル
膜は酸素を遮断した状態で作成する必要がある。この理
由から、現在では一般に、ポリアクリルアミドゲル膜は
２枚のガラス板で形成されたセル（一定の空間、たとえ
ば約０．３〜１ｍｍを有する）の中にゲル形成液を注入
させ、酸素を遮断した状態で架橋重合させてゲル膜を形
成させている。
この方法は二枚のガラス板の間でゲル膜を形成するため
に、取り扱い性が悪く、かつゲＡｔ膜の量産化が困難で
あるといった大きな欠点を有している。
に、取り扱い性が悪く、かつゲＡｔ膜の量産化が困難で
あるといった大きな欠点を有している。
以上のようにして形成したポリアクリルアミドゲル膜を
用いる電気泳動操作は、たとえば、次のようにして実施
される。
用いる電気泳動操作は、たとえば、次のようにして実施
される。
ポリアクリルアミドゲル膜はガラス板に挟んだままの状
態で垂直に立てられ、前電気泳動を行なったのち、ゲル
膜上端部に設けられたサンプルスロットに試料（たとえ
ば、マキサム・ギルバート分解した３２Ｆラベル化ＤＮ
Ａ）を一定量注入し、次いで電気泳動を行なう。そして
一定時間（例、約６時間゛〜１２時間）の電気泳動を行
なった後、片面のガラス板を注意深く除去し、その露出
面をポリ塩化ビニリデンフィルムなどの合成樹脂製フィ
ルムでゲル膜を覆い、これを用いてオートラジオグラフ
ィー処理を行なう。
態で垂直に立てられ、前電気泳動を行なったのち、ゲル
膜上端部に設けられたサンプルスロットに試料（たとえ
ば、マキサム・ギルバート分解した３２Ｆラベル化ＤＮ
Ａ）を一定量注入し、次いで電気泳動を行なう。そして
一定時間（例、約６時間゛〜１２時間）の電気泳動を行
なった後、片面のガラス板を注意深く除去し、その露出
面をポリ塩化ビニリデンフィルムなどの合成樹脂製フィ
ルムでゲル膜を覆い、これを用いてオートラジオグラフ
ィー処理を行なう。
すなわち、ポリアクリルアミドゲル膜を被覆しているフ
ィルムの上にＸ線フィルム、増感スクリーンを順次のせ
て、低温（たとえば、−８０°Ｃ）で一定時間（たとえ
ば、約１０〜２０時間）露光を行なう。そして露光終了
後、Ｘ線フィルムを現像し、ＤＮＡの分離泳動パターン
を読みとることからなるオートラジオグラフィー処理に
より、ＤＮＡ（７）塩基配列を決定することができる。
ィルムの上にＸ線フィルム、増感スクリーンを順次のせ
て、低温（たとえば、−８０°Ｃ）で一定時間（たとえ
ば、約１０〜２０時間）露光を行なう。そして露光終了
後、Ｘ線フィルムを現像し、ＤＮＡの分離泳動パターン
を読みとることからなるオートラジオグラフィー処理に
より、ＤＮＡ（７）塩基配列を決定することができる。
オートラジオグラフィー処理は以上のように長時間を必
要とするため、その迅速化が望まれ、更に読みとりの高
分解能化も望まれている。
要とするため、その迅速化が望まれ、更に読みとりの高
分解能化も望まれている。
従来のアクリルアミドゲル膜を用いた電気泳動媒体材料
は上記のようにガラス板を用いるために取り扱い性に問
題があり、しばしばガラスを割ったりして実験を失敗す
ることがある。更に、オートラジオグラフィーに際し、
上記のように片面のガラスを除く必要があり、この時に
ゲル膜を破損したりする事もあり、この操作は非常に熟
練を必要とする。したがって、この様な欠点を改良した
取り扱い性の良好なポリアクリルアミドゲル膜の開発が
熱望されている。
は上記のようにガラス板を用いるために取り扱い性に問
題があり、しばしばガラスを割ったりして実験を失敗す
ることがある。更に、オートラジオグラフィーに際し、
上記のように片面のガラスを除く必要があり、この時に
ゲル膜を破損したりする事もあり、この操作は非常に熟
練を必要とする。したがって、この様な欠点を改良した
取り扱い性の良好なポリアクリルアミドゲル膜の開発が
熱望されている。
［発明の要旨］
本発明の目的は、ガラス板の代りにプラスチックフィル
ム（あるいはシート）を支持体として用い、かつ支持体
と電気泳動用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜）との
間の接着性が向上した電気泳動媒体材料を提供すること
にある。
ム（あるいはシート）を支持体として用い、かつ支持体
と電気泳動用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜）との
間の接着性が向上した電気泳動媒体材料を提供すること
にある。
本発明は、下記の各層が順次積層されてなる三層構造を
含む電気泳動用媒体材料からなるものである： ［Ｉ］ プラスチック支持体層： ［Ｉ［］セルロース誘導体を含有する接着層；および、 ［１１１］アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存在
下で架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲルで
、変性剤として少なくとも１個のカルバモイル基をもつ
化合物を含む電気泳動用媒体層。
含む電気泳動用媒体材料からなるものである： ［Ｉ］ プラスチック支持体層： ［Ｉ［］セルロース誘導体を含有する接着層；および、 ［１１１］アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存在
下で架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲルで
、変性剤として少なくとも１個のカルバモイル基をもつ
化合物を含む電気泳動用媒体層。
本発明の電気泳動用媒体材料は、上記のように支持体層
と電気泳動用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜）とを
セルロース誘導体を含む接着層により接合してなる三層
構造を含むものであり、前述の電気泳動後の電気泳動用
媒体層の乾燥工程における各種の操作によってもその三
層構造が分離しにくいため、電気泳動用媒体層の破損が
発生することは殆どなく、従って癌紙などの補助支持具
を使用する必要がないとの利点がある。
と電気泳動用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜）とを
セルロース誘導体を含む接着層により接合してなる三層
構造を含むものであり、前述の電気泳動後の電気泳動用
媒体層の乾燥工程における各種の操作によってもその三
層構造が分離しにくいため、電気泳動用媒体層の破損が
発生することは殆どなく、従って癌紙などの補助支持具
を使用する必要がないとの利点がある。
さらに、本発明の電気泳動用媒体材料は、水平に置いた
支持体の」二にセルロース誘導体を含む接“着層を形成
し、次いで電気泳動用媒体層をその上に形成する方法に
よっても製造することが可能であるため、電気泳動用媒
体材料の量産化にも大きく寄与するものである。
支持体の」二にセルロース誘導体を含む接“着層を形成
し、次いで電気泳動用媒体層をその上に形成する方法に
よっても製造することが可能であるため、電気泳動用媒
体材料の量産化にも大きく寄与するものである。
［発明の詳細な記述］
本発明の電気泳動用媒体材料の支持体は、プラスチック
シート（あ、るいはフィルム）を用いることが好ましい
。このプラスチック製シートとしては、任意のプラスチ
ックから形成したものを用いることができる。好ましい
プラスチックシートの例としては、親水性ポリマーまた
は公知の表面処理により表面を親水化したポリマー（例
、ポリエチレンテレフタレート、ビスフェノールＡのポ
リカルボネート、ポリ塩化ビニル、塩化ビニリデン・塩
化ビニルコポリマー、ポリメチルメタアクリレート、ホ
リエチレン、ポリプロピレン、セルロースアセテート類
、セルロースアセテートプロピオネート等）のフィルム
、板またはシート等の成形物をあげることができる。特
にポリエチレンテレフタフタレートから形成されたシー
トを用いることが好ましい。
シート（あ、るいはフィルム）を用いることが好ましい
。このプラスチック製シートとしては、任意のプラスチ
ックから形成したものを用いることができる。好ましい
プラスチックシートの例としては、親水性ポリマーまた
は公知の表面処理により表面を親水化したポリマー（例
、ポリエチレンテレフタレート、ビスフェノールＡのポ
リカルボネート、ポリ塩化ビニル、塩化ビニリデン・塩
化ビニルコポリマー、ポリメチルメタアクリレート、ホ
リエチレン、ポリプロピレン、セルロースアセテート類
、セルロースアセテートプロピオネート等）のフィルム
、板またはシート等の成形物をあげることができる。特
にポリエチレンテレフタフタレートから形成されたシー
トを用いることが好ましい。
これらのポリマー成形物の表面を親水化するための処理
のためには、紫外線照射、グロー放電処理１．コロナ放
電処理、火焔処理、電子線照射、ケミカルエツチング、
電解工・ンチング等の公知の方法を適用することができ
る。
のためには、紫外線照射、グロー放電処理１．コロナ放
電処理、火焔処理、電子線照射、ケミカルエツチング、
電解工・ンチング等の公知の方法を適用することができ
る。
支持体は一般に厚さが、約５０ＪＬｍ〜約５００ｇｍ、
好ましくは約７０ｇｍ〜約３００ｐＬｍのものが用いら
れる。
好ましくは約７０ｇｍ〜約３００ｐＬｍのものが用いら
れる。
本発明において支持体の上にはセルロース誘導体を含有
する接着層が設けられる。セルロース誘導体としては、
ジアセチルセルロース、トリアセチルセルロース、ニト
ロセルロースなどが好ましいが、他のセルロース誘導体
も膜形成性である限り用いることが可能である。これら
のセルロース誘導体は単独で使用しても、併用してもよ
い。また、層形成成分の５０重量％以内である限り他の
高分子物質や添加剤を含むことができる。このような高
分子物質および添加剤の例としては、ゼラチン、デキス
トラン、ポリメチルメタクリレート、ポリアクリルアミ
ド、ポリアクリル酸、ポリビニルアルコール、ｐ−クロ
ロフェノール、シソ／ｌ／シン、グリセリン、エチレン
グリコール等を挙げることができる。
する接着層が設けられる。セルロース誘導体としては、
ジアセチルセルロース、トリアセチルセルロース、ニト
ロセルロースなどが好ましいが、他のセルロース誘導体
も膜形成性である限り用いることが可能である。これら
のセルロース誘導体は単独で使用しても、併用してもよ
い。また、層形成成分の５０重量％以内である限り他の
高分子物質や添加剤を含むことができる。このような高
分子物質および添加剤の例としては、ゼラチン、デキス
トラン、ポリメチルメタクリレート、ポリアクリルアミ
ド、ポリアクリル酸、ポリビニルアルコール、ｐ−クロ
ロフェノール、シソ／ｌ／シン、グリセリン、エチレン
グリコール等を挙げることができる。
セルロース誘導体を含有する接着層はセルロース誘導体
を８０重量％以上含むことが望ましく。
を８０重量％以上含むことが望ましく。
特に実質的にセルロース誘導体のみからなる層であるこ
とが望ましい。また、この接着層は単一層であっても複
合層であってもよく、複合層の場合には、そのセルロー
ス誘導体を含む層重外は他の重合体層であってもよい。
とが望ましい。また、この接着層は単一層であっても複
合層であってもよく、複合層の場合には、そのセルロー
ス誘導体を含む層重外は他の重合体層であってもよい。
そのような他の重合体層の例としては、ゼラチン、ポリ
メチルメタクリレート、ポリアクリルアミド、ポリビニ
ルアルコール、ポリ塩化ビニリデンなどからなる層を挙
げることができ、これらの重合体層はセルロース誘導体
を含む層の下側に設けることができる。
メチルメタクリレート、ポリアクリルアミド、ポリビニ
ルアルコール、ポリ塩化ビニリデンなどからなる層を挙
げることができ、これらの重合体層はセルロース誘導体
を含む層の下側に設けることができる。
次に電気泳動用媒体層（以下において、ケル媒体層、ポ
リアクリルアミドゲル膜あるいは弔にケル膜ともいう）
について説明する。
リアクリルアミドゲル膜あるいは弔にケル膜ともいう）
について説明する。
ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミド系化合物
と架橋剤とを、水溶液または水分散液として水中に溶解
または分散させてゲル形成液を調製したのち、液中で両
者を架橋重合させて架橋重合した水性ゲル膜として形成
することにより得ることができる。本明細書においては
、特にことわらない限り、（水中に）溶解と（水中に）
分散の両者を含めて単に（水中に）溶解といい、水溶液
と水分散液の両者を含めて単に水溶液という。また、溶
媒または分散媒として、所望により加えられる有機溶媒
と水の混合物をも包含する。
と架橋剤とを、水溶液または水分散液として水中に溶解
または分散させてゲル形成液を調製したのち、液中で両
者を架橋重合させて架橋重合した水性ゲル膜として形成
することにより得ることができる。本明細書においては
、特にことわらない限り、（水中に）溶解と（水中に）
分散の両者を含めて単に（水中に）溶解といい、水溶液
と水分散液の両者を含めて単に水溶液という。また、溶
媒または分散媒として、所望により加えられる有機溶媒
と水の混合物をも包含する。
ポリアクリルアミドゲル膜の形成に用いることができる
アクリルアミド系化合物として・は、アクリルアミド、
Ｎ−メチルアクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリル
アミド、Ｎ−（ヒドロキシメチル）アクリルアミド、ジ
アセトンアクリルアミド等のアクリルアミド系化合物や
メタクリルアミドの様なメタクリルアミド系化合物が挙
げられ。
アクリルアミド系化合物として・は、アクリルアミド、
Ｎ−メチルアクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリル
アミド、Ｎ−（ヒドロキシメチル）アクリルアミド、ジ
アセトンアクリルアミド等のアクリルアミド系化合物や
メタクリルアミドの様なメタクリルアミド系化合物が挙
げられ。
これらの化合物は単独で、あるいは二種以上を併用して
用いることができる。これらのアクリルアミド系化合物
のうちではアクリルアミドが最も好ましく、またアクリ
ルアミドと他のアクリルアミド系化合物、メタクリルア
ミド系化合物の一種以上の併用も好ましい。
用いることができる。これらのアクリルアミド系化合物
のうちではアクリルアミドが最も好ましく、またアクリ
ルアミドと他のアクリルアミド系化合物、メタクリルア
ミド系化合物の一種以上の併用も好ましい。
架橋剤としてはｒ ＥｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓＪ
１９８１．’２Ｌ２２０−２２８等に記載の公知の化
合物（一種または二種以上の組合せ）を用いることがで
きる。架橋剤の具体例としては、Ｎ、Ｎ”−メチレンビ
スアクリルアミド（ＢＩＳ）；Ｎ、Ｎ″−プロピレンビ
スアクリルアミド（ＰＢＡ）；ジ（アクリルアミドジメ
チル）エーテル（ＤＡＥ）、１．２−ジアクリルアミド
エチレングリコール（ＤＥＣ）、エチレンウレアビスア
クリルアミド（ＥＵＢ）；エチレンジアクリレート（Ｅ
ＤＡ）；Ｎ、Ｎ’−ジアリルタータルジアミド（Ｎ、Ｎ
’−ｄｉａｌｌｙｌｔａｒｔａｒｄｉａｍｉｄｅ ：
ＤＡＴＤ） ；およびＮ、Ｎ’−ビスアクリリルシスタ
ミン（Ｎ、Ｎ’−ｂｉｓａｃｒｙｌｙｌｃｙｓｔａｍｉ
ｎｅ。
１９８１．’２Ｌ２２０−２２８等に記載の公知の化
合物（一種または二種以上の組合せ）を用いることがで
きる。架橋剤の具体例としては、Ｎ、Ｎ”−メチレンビ
スアクリルアミド（ＢＩＳ）；Ｎ、Ｎ″−プロピレンビ
スアクリルアミド（ＰＢＡ）；ジ（アクリルアミドジメ
チル）エーテル（ＤＡＥ）、１．２−ジアクリルアミド
エチレングリコール（ＤＥＣ）、エチレンウレアビスア
クリルアミド（ＥＵＢ）；エチレンジアクリレート（Ｅ
ＤＡ）；Ｎ、Ｎ’−ジアリルタータルジアミド（Ｎ、Ｎ
’−ｄｉａｌｌｙｌｔａｒｔａｒｄｉａｍｉｄｅ ：
ＤＡＴＤ） ；およびＮ、Ｎ’−ビスアクリリルシスタ
ミン（Ｎ、Ｎ’−ｂｉｓａｃｒｙｌｙｌｃｙｓｔａｍｉ
ｎｅ。
ＢＡＣ）等の二官能性化合物が挙げられる。
架橋剤の量は、単量体と架橋剤の総重量に対して約２ｗ
ｔ％から約３０ｗｔ％、好ましくは約３ｗｔ％から約１
０ｗｔ％の範囲で用いることができる。
ｔ％から約３０ｗｔ％、好ましくは約３ｗｔ％から約１
０ｗｔ％の範囲で用いることができる。
ゲル濃度としては、Ｓ、 Ｈｊｅｒｔｅｎ： ｒ Ａｒ
ｃｈ。
ｃｈ。
Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｂｉｏｐｈｙｓ、 Ｊ １ （５ｕ
ｐｐ１． ）、 １４７（１９６２）に記載の定義に従
って表示して、中量体、架橋剤および水からなるゲル膜
の容積に対して、単量体と架橋剤の量が約３ ｗ ／
ｖ％から約３０ ｗ ／ ｖ％の範囲で好ましく用いら
れる。
ｐｐ１． ）、 １４７（１９６２）に記載の定義に従
って表示して、中量体、架橋剤および水からなるゲル膜
の容積に対して、単量体と架橋剤の量が約３ ｗ ／
ｖ％から約３０ ｗ ／ ｖ％の範囲で好ましく用いら
れる。
ポリアクリルアミドゲル膜に含有させる変性剤としては
、少なくとも１個のカルバモイル基を持つ化合物を挙げ
ることができ、その具体例としては、尿素、ホルムアミ
ド等が挙げられる。これらのうちで尿素が特に好ましく
用いられる。変性剤の量は単量体と架橋剤とを含む水性
ゲルの容積に対し、約４０ ｗ ｔ ／ ｖ％から約６
０ ｗ ｔ ／ ｖ％の範囲で用いられる。尿素を用い
る場合には、単量体と架橋剤とを含む水性ゲル１見に対
し約６モル（約３６０ ｇ）から飽和溶解量まで、好ま
しくは約７モル（約４２０ｇ）から飽和溶解量までの範
囲で用いることができる。
、少なくとも１個のカルバモイル基を持つ化合物を挙げ
ることができ、その具体例としては、尿素、ホルムアミ
ド等が挙げられる。これらのうちで尿素が特に好ましく
用いられる。変性剤の量は単量体と架橋剤とを含む水性
ゲルの容積に対し、約４０ ｗ ｔ ／ ｖ％から約６
０ ｗ ｔ ／ ｖ％の範囲で用いられる。尿素を用い
る場合には、単量体と架橋剤とを含む水性ゲル１見に対
し約６モル（約３６０ ｇ）から飽和溶解量まで、好ま
しくは約７モル（約４２０ｇ）から飽和溶解量までの範
囲で用いることができる。
ポリアクリルアミドゲル膜には水溶性ポリマーを含有さ
せることができる。
せることができる。
水溶性ポリマーとしては、付加重合型または縮重合型の
水溶性ポリマーを用いることができる。
水溶性ポリマーを用いることができる。
付加重合型ポリマーの具体例としては、ポリビニルアル
コール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド等
の非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。縮重合型ポ
リマーの具体例としてポリエチレングリコール、ポリプ
ロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポリアルキレ
ンゲリコールが挙げられる。水溶性ポリマーの分子量は
、約１万から約１００万の範囲のものが好ましい、これ
らの水溶性ポリマーのうちでは、ポリエチレングリコー
ル、ポリアクリルアミドが特に好ましい。
コール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド等
の非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。縮重合型ポ
リマーの具体例としてポリエチレングリコール、ポリプ
ロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポリアルキレ
ンゲリコールが挙げられる。水溶性ポリマーの分子量は
、約１万から約１００万の範囲のものが好ましい、これ
らの水溶性ポリマーのうちでは、ポリエチレングリコー
ル、ポリアクリルアミドが特に好ましい。
水溶性ポリマーは、単量体と架橋剤の合計重量に対して
約２ｗｔ％から約１００ｗｔ％の範囲、好ましくは約５
ｗｔ％から約５０ｗｔ％の範囲で用いられる。水溶性ポ
リマーを添加することにより、ポリアクリルアミドゲル
膜は可塑性を有するようになるため、裁断加工時に壊れ
ることがなくなり、またゲル膜は乾燥時にも可塑性を有
するようになり、もろさが改良され壊れにくくなるとの
利点がある。また、水溶性ポリマーの分子量および添加
量を選択することにより、ゲル膜の粘度をコントロール
することもできる。
約２ｗｔ％から約１００ｗｔ％の範囲、好ましくは約５
ｗｔ％から約５０ｗｔ％の範囲で用いられる。水溶性ポ
リマーを添加することにより、ポリアクリルアミドゲル
膜は可塑性を有するようになるため、裁断加工時に壊れ
ることがなくなり、またゲル膜は乾燥時にも可塑性を有
するようになり、もろさが改良され壊れにくくなるとの
利点がある。また、水溶性ポリマーの分子量および添加
量を選択することにより、ゲル膜の粘度をコントロール
することもできる。
ポリアクリルアミドゲル膜にはアガロースを含有させる
ことができる。アガロースは公知のアガロースであれば
特に制限はなく、低電気浸透性。
ことができる。アガロースは公知のアガロースであれば
特に制限はなく、低電気浸透性。
中電気浸透性、高電気浸透性アガロースのいずれをも用
いることができる。用いることのできるアガロースの例
としては特開昭５５−５７３０号、特開昭５５−１１０
９４６号、特表昭５７−５０２０９８号等の公報に開示
されているアガロース等がある。
いることができる。用いることのできるアガロースの例
としては特開昭５５−５７３０号、特開昭５５−１１０
９４６号、特表昭５７−５０２０９８号等の公報に開示
されているアガロース等がある。
アガロースの添加量は、単量体と架橋剤とを含むゲル組
成液の容積に対して約０．２＃／ｖ％から約２ ｗ ／
ｖ％、好ましくは約０ 、３ ｗ ／ ｖ％から約１
．２ｗ／ｖ％の割合で用いられる。ゲル膜に７ガロース
を添加することにより、ゲル形成用溶液温度を変化させ
ることにより、適当な溶液粘度にコントロールすること
が可能となり、その流動性を止めることができ、またゲ
ル膜を成形する時には成形しやすくなるとの利点がある
。
成液の容積に対して約０．２＃／ｖ％から約２ ｗ ／
ｖ％、好ましくは約０ 、３ ｗ ／ ｖ％から約１
．２ｗ／ｖ％の割合で用いられる。ゲル膜に７ガロース
を添加することにより、ゲル形成用溶液温度を変化させ
ることにより、適当な溶液粘度にコントロールすること
が可能となり、その流動性を止めることができ、またゲ
ル膜を成形する時には成形しやすくなるとの利点がある
。
ポリアクリルアミドゲル膜にはｐＨ緩衝剤を含有させる
ことができる。緩衝剤としては、ｐＨ８，０から１０．
０、好ましくはＰＨ８，０から９．０の範囲内のｐＨ値
に緩衝できる緩衝剤であれば、いずれをも用いることが
できる。用いうる緩衝剤としては１日本化学会！ａｆ化
学便覧 基礎編」 （東京、丸蓋■１８６６年発行）
１３１２−１３２０頁；ｆｆＤａｔａ ｆｏｒ Ｂｉｏ
ｃｈｅｉｉｃａｌ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ ｊ （Ｒ，Ｍ、
Ｃ。
ことができる。緩衝剤としては、ｐＨ８，０から１０．
０、好ましくはＰＨ８，０から９．０の範囲内のｐＨ値
に緩衝できる緩衝剤であれば、いずれをも用いることが
できる。用いうる緩衝剤としては１日本化学会！ａｆ化
学便覧 基礎編」 （東京、丸蓋■１８６６年発行）
１３１２−１３２０頁；ｆｆＤａｔａ ｆｏｒ Ｂｉｏ
ｃｈｅｉｉｃａｌ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ ｊ （Ｒ，Ｍ、
Ｃ。
Ｄａｗｓｏｎ ｅｔ ａ１編、第２版、 ０ｘｆｏｒｄ
ａｔ ｔｈｅ Ｃ１ａｒｅｎｄｏｎ Ｐｒｅｓｓ、１
９６９年発行） ４７Ｂ−５０８ページ；Ｗ Ｂｉｏｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ ｊ 、５４８７（１９８Ｂ） ；１
ｒＡｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
ｊ １０４３００−３１０（１９８０）等の刊行物に記
載の緩衝剤があげられる。そして、その具体例としては
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）
［ＣＡＳ Ｒｅｇｉｓｔｒｙ Ｎ。
ａｔ ｔｈｅ Ｃ１ａｒｅｎｄｏｎ Ｐｒｅｓｓ、１
９６９年発行） ４７Ｂ−５０８ページ；Ｗ Ｂｉｏｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ ｊ 、５４８７（１９８Ｂ） ；１
ｒＡｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
ｊ １０４３００−３１０（１９８０）等の刊行物に記
載の緩衝剤があげられる。そして、その具体例としては
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）
［ＣＡＳ Ｒｅｇｉｓｔｒｙ Ｎ。
７？−８８−１］ 、 Ｎ 、 Ｎ−ビス（２−ヒドロ
キシエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ） 、 Ｎ −２
−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ′−２−ヒドロキシ
プロパン−３−スルホン酸のＮａ塩またはに塩等、Ｎ−
２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−３−プロパン
スルホン酸のＮａ塩またはに塩等、Ｎ−［トリス（ヒド
ロキシメチル）メチル］−３−７ミノプロパンスルホン
酸のＮａ塩またはに塩および、これらのいずれかと必要
により組合せられる酸、アルカリまたは塩等をあげるこ
とができる。
キシエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ） 、 Ｎ −２
−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ′−２−ヒドロキシ
プロパン−３−スルホン酸のＮａ塩またはに塩等、Ｎ−
２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−３−プロパン
スルホン酸のＮａ塩またはに塩等、Ｎ−［トリス（ヒド
ロキシメチル）メチル］−３−７ミノプロパンスルホン
酸のＮａ塩またはに塩および、これらのいずれかと必要
により組合せられる酸、アルカリまたは塩等をあげるこ
とができる。
特に好ましい緩衝剤の例としてはＴｒｉｓ、ホウ酸およ
びＥＤＴＡ−２Ｎａ塩の組合せ（ｐＨ８，３）がある。
びＥＤＴＡ−２Ｎａ塩の組合せ（ｐＨ８，３）がある。
本発明においてポリアクリルアミドゲル膜はアクリルア
ミドに代表される単量体、二官能性のアリル（ａｌｌｙ
ｌ ）化合物またはアクリル化合物（架橋剤）、水溶性
ポリマー、およびアガロースを実質的に均一に溶解させ
た水溶液中で単量体と架橋剤とをラジカル架橋重合させ
て得られるものであり、単量体と架橋剤から形成された
三次元架橋重合体に水溶性ポリマーとアガロースが実質
的に分散されて、後二者のポリマー鎖が三次元架橋重合
体とからみあっている構造を有すると推定され、この構
造が特徴をなすゲル媒体である。
ミドに代表される単量体、二官能性のアリル（ａｌｌｙ
ｌ ）化合物またはアクリル化合物（架橋剤）、水溶性
ポリマー、およびアガロースを実質的に均一に溶解させ
た水溶液中で単量体と架橋剤とをラジカル架橋重合させ
て得られるものであり、単量体と架橋剤から形成された
三次元架橋重合体に水溶性ポリマーとアガロースが実質
的に分散されて、後二者のポリマー鎖が三次元架橋重合
体とからみあっている構造を有すると推定され、この構
造が特徴をなすゲル媒体である。
上記のラジカル架橋重合反応は、分子状酸素の不存在下
で過酸化物の存在および／または紫外線照射等の公知の
方法により発生させることができる。この反応を加熱お
よび紫外線照射により加速することもできる。
で過酸化物の存在および／または紫外線照射等の公知の
方法により発生させることができる。この反応を加熱お
よび紫外線照射により加速することもできる。
ラジカル架橋重合用触媒としては、ｒ Ｅｌｅｃｔｒ。
ｐｈｏｒｅｓｉｓ Ｊ １９Ｂ１．２Ｌ２１３−２１９
．同１９８１．２．２２０−２２８ 、青米、永井編「
最新電気泳動法Ｊ （１８７３年発行）等に記載の公知
の低温ラジカル重合開始剤のうちから適宜選択して用い
ることができる。
．同１９８１．２．２２０−２２８ 、青米、永井編「
最新電気泳動法Ｊ （１８７３年発行）等に記載の公知
の低温ラジカル重合開始剤のうちから適宜選択して用い
ることができる。
好ましいラジカル重合開始剤の具体例としては、β−ジ
メチルアミノプロピオニトリル（ＤＭＡＰＮ）−ペルオ
クソニ硫酸アンモニウム混合物、Ｎ、Ｎ、Ｎ’ 、Ｎ’
−テトラメチルエチレンジアミン（ＴＥＭＥＤ）−ペル
オクンニ硫酸アンモニウム混合物、ＴＥＭＥＤ−リボフ
ラビン混合物、ＴＥＭＥＤ−リボフラビン−過酸化水素
混合物と紫外線照射の組合せ等が挙げられる。ラジカル
重合開始剤の含有量は、単量体と架橋剤の合計重量に対
して約０．３重量％から約５重量％、そして好ましくは
約０．５重量％から約３重量％の範囲である。
メチルアミノプロピオニトリル（ＤＭＡＰＮ）−ペルオ
クソニ硫酸アンモニウム混合物、Ｎ、Ｎ、Ｎ’ 、Ｎ’
−テトラメチルエチレンジアミン（ＴＥＭＥＤ）−ペル
オクンニ硫酸アンモニウム混合物、ＴＥＭＥＤ−リボフ
ラビン混合物、ＴＥＭＥＤ−リボフラビン−過酸化水素
混合物と紫外線照射の組合せ等が挙げられる。ラジカル
重合開始剤の含有量は、単量体と架橋剤の合計重量に対
して約０．３重量％から約５重量％、そして好ましくは
約０．５重量％から約３重量％の範囲である。
ゲル媒体層は、平滑表面を有する支持体の上に設けられ
た前述の接着層の上にゲル形成液を公知の方法により塗
布して設けたのち、ゲル形成液を架橋重合させることに
より、層状に成形することができる。
た前述の接着層の上にゲル形成液を公知の方法により塗
布して設けたのち、ゲル形成液を架橋重合させることに
より、層状に成形することができる。
ゲル形成液を支持体の表面で架橋重合させる場合には、
ゲル形成液の上をさらにカバーフィルム、シートまたは
板などの被覆材料でおおうことができる。この目的に使
用されるカバーフィルム、シート、または板とじては前
記支持体と同様な素材からなるものを用いることができ
る。この被覆材料の厚さは３００ｐｍ以下であり、実用
的に好ましい範囲としては約４７１ｍ〜約２００ｐｍ、
特に好ましい範囲としては約４ＪＬｍ〜約１００ｇｍで
ある。
ゲル形成液の上をさらにカバーフィルム、シートまたは
板などの被覆材料でおおうことができる。この目的に使
用されるカバーフィルム、シート、または板とじては前
記支持体と同様な素材からなるものを用いることができ
る。この被覆材料の厚さは３００ｐｍ以下であり、実用
的に好ましい範囲としては約４７１ｍ〜約２００ｐｍ、
特に好ましい範囲としては約４ＪＬｍ〜約１００ｇｍで
ある。
ポリアクリルアミドゲル膜には、必要に応じて抗酸化剤
などの他の添加剤を含有させることができる６抗酩化剤
としては、ゲル膜に配合しうることが知られている種々
の化合物を用いることができる。抗酸化剤の具体例とし
てはジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールを
挙げることができる。
などの他の添加剤を含有させることができる６抗酩化剤
としては、ゲル膜に配合しうることが知られている種々
の化合物を用いることができる。抗酸化剤の具体例とし
てはジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールを
挙げることができる。
その他の添加剤としては湿潤剤があり、ポリアクリルア
ミドゲル膜にはグリセリン、エチレングリコール等のポ
リオール化合物を含有させることもできる。ポリオール
化合物の含有量は、ゲル膜の容積に対して約５ ｗ ／
ｖ％から約４０ ｗ ／ ｖ％の範囲から選ばれる。
ミドゲル膜にはグリセリン、エチレングリコール等のポ
リオール化合物を含有させることもできる。ポリオール
化合物の含有量は、ゲル膜の容積に対して約５ ｗ ／
ｖ％から約４０ ｗ ／ ｖ％の範囲から選ばれる。
ポリオール化合物のうちではグリセリンが特に好ましい
。湿潤剤を配合することによりゲル膜の保存時の極端な
水分の蒸発による乾燥を防ぐことが可能となり、また極
端な乾燥に起因するもろさを防ぎ、ひびわれを防ぐ等の
ゲル膜の物性が改善されるとの利点がある。
。湿潤剤を配合することによりゲル膜の保存時の極端な
水分の蒸発による乾燥を防ぐことが可能となり、また極
端な乾燥に起因するもろさを防ぎ、ひびわれを防ぐ等の
ゲル膜の物性が改善されるとの利点がある。
本発明の電気泳動用媒体材料は、前述の諸文献等に記載
の公知の方法に従って、水平型および垂直型平板電気泳
動法、ディスク電気泳動泳動法等のいずれにも用いるこ
とができる。
の公知の方法に従って、水平型および垂直型平板電気泳
動法、ディスク電気泳動泳動法等のいずれにも用いるこ
とができる。
以下に本発明の実施例を記載するが、これらは本発明の
範囲を限定するものではない。
範囲を限定するものではない。
［実施例１］
紫外線照射処理により表面を親水性にした厚ざ１８０
ｇｍのポリエチレンテレフタレート （ＰＥＴ）シート
（支持体）上に約０．５ｐｍの厚み（固形分）になるよ
うに第１表記載のセルロース誘導体をアセトンに溶解し
て得た塗布液を塗布し、約１１０℃で乾燥してセルロー
ス誘導体接着層を形成した。
ｇｍのポリエチレンテレフタレート （ＰＥＴ）シート
（支持体）上に約０．５ｐｍの厚み（固形分）になるよ
うに第１表記載のセルロース誘導体をアセトンに溶解し
て得た塗布液を塗布し、約１１０℃で乾燥してセルロー
ス誘導体接着層を形成した。
第１表 接着層形成用塗布液の組成
試料 セルロース誘導体 塗布液濃度
番号 （、ｇ／１０ｈｌ溶剤）
ｌ ニトロセルロース ５ｇ
２ ジアセチルセルロース ５ｇ
３ ニトロセルロース ２．５ｇ
ジアセチルセルロース ２．５ｇ
まず、ＰＥＴシート（支持体）と接着層との間の接着性
をクロスカット法により評価した。その結果、試料１〜
３（本発明に従う試料）は接着性が良好であった。
をクロスカット法により評価した。その結果、試料１〜
３（本発明に従う試料）は接着性が良好であった。
支持体上に設けられた各接着層の上に、アクリルアミド
ｌ ｌ 、８７ｇ、ＢＩ３６３０ｍｇ、尿素４２ｇ、ト
リス（ヒドロキシメチル）アミノメタン［ＣＡ Ｓ Ｒ
ｅｇｉｓｔｒｙ Ｎｏ ７？−８８−１］ １ 、０８
ｇ、ホウ酸０．５５ｇ−１およびＥＤＴＡ−２Ｎａ塩９
３ｍｇを含有する１００ｍ文の溶液に重合開始剤として
ベルオクソニ硫酸アンモニウム（５重量％）１．３ｍｉ
、ＴＥＭＥＤ３３．ｉを加えたものをＯ，，５ｍｍの厚
みで成形し、ポリアクリルアミドゲル膜を形成させた。
ｌ ｌ 、８７ｇ、ＢＩ３６３０ｍｇ、尿素４２ｇ、ト
リス（ヒドロキシメチル）アミノメタン［ＣＡ Ｓ Ｒ
ｅｇｉｓｔｒｙ Ｎｏ ７？−８８−１］ １ 、０８
ｇ、ホウ酸０．５５ｇ−１およびＥＤＴＡ−２Ｎａ塩９
３ｍｇを含有する１００ｍ文の溶液に重合開始剤として
ベルオクソニ硫酸アンモニウム（５重量％）１．３ｍｉ
、ＴＥＭＥＤ３３．ｉを加えたものをＯ，，５ｍｍの厚
みで成形し、ポリアクリルアミドゲル膜を形成させた。
なお、別にセルロース誘導体接着層を設けなかった以外
は同様にしてＰＥＴシート上にポリアクリルアミドゲル
膜を形成させて比較試料を調製した。
は同様にしてＰＥＴシート上にポリアクリルアミドゲル
膜を形成させて比較試料を調製した。
得られたゲル膜を指でおさえ、ゲル膜と支持体間の接着
性を評価した。その結果、試料１〜３（本発明に従う試
料）を接着層としたものは接着性が優れていたが、比較
試料は接着性が劣っていた。
性を評価した。その結果、試料１〜３（本発明に従う試
料）を接着層としたものは接着性が優れていたが、比較
試料は接着性が劣っていた。
［実施例２］
実施例１の第１表と同じセルロース誘導体接着層がγ滅
されたＰＥＴシートを作成し、この接着層の上にアクリ
ルアミド１１．８７ｇ、ＢＩＳ６３０ｍｇ、アガロース
１６００ （和光紬薬■製）０．３ｇ、ポリアクリルア
ミド２，５ｇ、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタ
ン１．０８ｇ、ホウ酸０．５５ｇおよびＥＤＴＡ−２Ｎ
ａ塩９３ｍｇからなる１００ｍＪ１の溶液に重合開始剤
として過硫酸アンモニウム（５重量％）１．３ｍｌ、Ｔ
ＥＭＥＤ３３ＩＬｉを加えたものを０．５ｍｍの、厚み
で成形し、ポリアクリルアミドゲル膜を形成させて三種
類の試料（試料１〜３）を得た。
されたＰＥＴシートを作成し、この接着層の上にアクリ
ルアミド１１．８７ｇ、ＢＩＳ６３０ｍｇ、アガロース
１６００ （和光紬薬■製）０．３ｇ、ポリアクリルア
ミド２，５ｇ、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタ
ン１．０８ｇ、ホウ酸０．５５ｇおよびＥＤＴＡ−２Ｎ
ａ塩９３ｍｇからなる１００ｍＪ１の溶液に重合開始剤
として過硫酸アンモニウム（５重量％）１．３ｍｌ、Ｔ
ＥＭＥＤ３３ＩＬｉを加えたものを０．５ｍｍの、厚み
で成形し、ポリアクリルアミドゲル膜を形成させて三種
類の試料（試料１〜３）を得た。
また、ＰＥＴシートの上に直接上記のポリアクリルアミ
ドゲル膜を形成させることにより比較試料も調製した。
ドゲル膜を形成させることにより比較試料も調製した。
このゲル膜を使用して、３２Ｐ−ＤＮＡをマキサム・ギ
ルパート分解した試料について電気泳動にかけ、ＤＮＡ
塩基配列決定の実験を行なった。電気泳動後にゲル膜を
、脱尿素とＤＮＡ固定のために、１０％酢酸水溶液中に
１時間浸漬した。このゲル膜を乾燥し、次いでオートラ
ジオグラフィー処理を常法にしたがって行なった。
ルパート分解した試料について電気泳動にかけ、ＤＮＡ
塩基配列決定の実験を行なった。電気泳動後にゲル膜を
、脱尿素とＤＮＡ固定のために、１０％酢酸水溶液中に
１時間浸漬した。このゲル膜を乾燥し、次いでオートラ
ジオグラフィー処理を常法にしたがって行なった。
１０％酢酸水溶液中にゲル膜を浸漬した時の支持体とゲ
ル膜の接着状態を観察した。
ル膜の接着状態を観察した。
比較試料のゲル膜は支持体から完全に剥離した。
一方、試料１〜３（本発明に従う試料）のセルロース誘
導体を含む接着層の上に形成されたゲル膜は、いずれも
支持体上に完全に接着していた。
導体を含む接着層の上に形成されたゲル膜は、いずれも
支持体上に完全に接着していた。
更にゲル膜を乾燥させた後、それと支持体との間の接着
状態を観察したところ、これらの試料のゲル膜はいずれ
も支持体によく接着していた。またオートラジオグラフ
ィー処理した後も、接着性に問題はなく良好な結果を示
した。
状態を観察したところ、これらの試料のゲル膜はいずれ
も支持体によく接着していた。またオートラジオグラフ
ィー処理した後も、接着性に問題はなく良好な結果を示
した。
［実施例３］
実施例１の第１表と同じセルロース誘導体接着層が形成
されたＰＥＴシートを作成し、この接着層の上に実施例
２と同様にしてポリアクリルアミドゲル膜を形成させて
三種類の試料（試料１〜３）を得た。
されたＰＥＴシートを作成し、この接着層の上に実施例
２と同様にしてポリアクリルアミドゲル膜を形成させて
三種類の試料（試料１〜３）を得た。
またＰＥＴシートの上に直接上記のポリアクリルアミド
ゲル膜を形成させることにより比較試料も調製した。
ゲル膜を形成させることにより比較試料も調製した。
このゲル膜を支持体ごと裁断加工したのち、ゲル膜の切
口を観察したところ、比較試料の接着層の上に形成され
たゲル膜についてはゲル膜の剥離が一部観察されたのに
対して、試料１〜３（本発明に従う試料）についてはい
ずれも裁断口の接着性は良好で、支持体ごと裁断加工で
きることがわかった。
口を観察したところ、比較試料の接着層の上に形成され
たゲル膜についてはゲル膜の剥離が一部観察されたのに
対して、試料１〜３（本発明に従う試料）についてはい
ずれも裁断口の接着性は良好で、支持体ごと裁断加工で
きることがわかった。
特許出願人 富士写真フィルム株式会社代理人 弁理士
柳川泰男
柳川泰男
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ｌ。下記の各層が順次積層されてなる三層構造を含む電
気泳動用媒体材料： ［Ｉ］ プラスチック支持体層； ［Ｉ［］セルロース誘導体を含有する接着層；および、 ［Ｉ［［］ アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存
在下で架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲル
で、変性剤として少なくとも１個のカルバモイル基をも
つ化合物を含む電気泳動用媒体層。 ２゜上記媒体層がさらに水溶性ポリマーおよびアガロー
スを含むことを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の
電気泳動用媒体材料。 ３゜上記変性剤が尿素またはホルムアミドである特許請
求の範囲第１項または第２項記載の電気泳動用媒体材料
。 ４゜支持体層がプラスチックシートからなることを特徴
とする特許請求の範囲第１項もしくは第２項記載の電気
泳動用媒体材料。 ５゜プラスチックシートがポリエチレンテレフタレート
からなることを特徴とする特許請求の範囲第４項記載の
電気泳動用媒体材料。 ６゜セルロース誘導体を含有する接着層が、実質的にセ
ルロース誘導体のみからなる層であること特徴とする特
許請求の範囲第１項記載の電気泳動用媒体材料。 ７゜セルロース誘導体が、ジアセチルセルロース、トリ
アセチルセルロースおよびニトロセルロースからなる群
より選ばれたものであることを特徴とする特許請求の範
囲第１項もしくは第６項記載の電気泳動用媒体材料。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59096152A JPS60239658A (ja) | 1984-05-14 | 1984-05-14 | 電気泳動用媒体材料 |
| DE8585303398T DE3581657D1 (de) | 1984-05-14 | 1985-05-14 | Elektrophoretischer bestandteil. |
| US06/734,036 US4737258A (en) | 1984-05-14 | 1985-05-14 | Element for electrophoresis containing polyacrylamide gel membrane |
| EP19850303398 EP0162657B1 (en) | 1984-05-14 | 1985-05-14 | Element for electrophoresis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59096152A JPS60239658A (ja) | 1984-05-14 | 1984-05-14 | 電気泳動用媒体材料 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60239658A true JPS60239658A (ja) | 1985-11-28 |
| JPH0471178B2 JPH0471178B2 (ja) | 1992-11-13 |
Family
ID=14157397
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59096152A Granted JPS60239658A (ja) | 1984-05-14 | 1984-05-14 | 電気泳動用媒体材料 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60239658A (ja) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5996153A (ja) * | 1982-11-25 | 1984-06-02 | Ube Ind Ltd | 塩化ビニル系樹脂成形材料 |
-
1984
- 1984-05-14 JP JP59096152A patent/JPS60239658A/ja active Granted
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5996153A (ja) * | 1982-11-25 | 1984-06-02 | Ube Ind Ltd | 塩化ビニル系樹脂成形材料 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0471178B2 (ja) | 1992-11-13 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |