JPS631963A

JPS631963A - 電気泳動用媒体材料

Info

Publication number: JPS631963A
Application number: JP61145479A
Authority: JP
Inventors: Naohiko Sugimoto; 杉本　直彦; Masashi Ogawa; 雅司小川; Takeshi Kato; 武史加藤
Original assignee: Fuji Photo Film Co Ltd
Current assignee: Fujifilm Holdings Corp
Priority date: 1986-06-20
Filing date: 1986-06-20
Publication date: 1988-01-06

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［発明の分野］本発明は、電気泳動用媒体材１に関するものであり、さ
らに詳しくは、特にＤＮＡ、ＲＮＡなとの核酸の塩基配
列決定操作に用いるのに適した′電気泳動用媒体材料に
関するものである。

し発明の背景］近年のＤＮＡやＲＮＡの塩基配列の決定法においては、
ポリアクリルアミドゲル膜を用いたスラブ電気泳動操作
が必須の操作となっている。特に近年において遺伝子関
連の研究が進むにつれて、ＤＮＡ塩基配列決定の操作の
迅速化が急務となっている。

ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミドのような
単量体を、触媒の存在下にてＮ、Ｎ’−メチレンビスア
クリルアミドのような二官能性の架橋剤を用いて架橋重
合させることにより得られる。なお、このポリアクリル
アミドゲル膜の形成に際して通常は、尿素あるいはホル
ムアミドのような変性剤を含有させる。

に記の重合反応はラジカル架橋重合であり、酸素の影響
により反応が阻害されるため、ポリアクリルアミドゲル
膜は酸素を遮断した状態で作成する必要がある。この、
理由から、現在では一般に、ポリアクリルアミドゲル膜
は２枚のガラス板〒形成されたセル（−定の空間、たと
えば約０．３〜１ｍｍを有する）の中にゲル形成液を注
入し、酸素を遮断した状態で架橋重合させてゲル膜を形
成させている。

この方法は二枚のガラス板の間でゲル膜を形成するため
に、取り扱い性が悪く、かつゲル膜の量産化が困難であ
るといった大きな欠点を有している。従って、ガラス板
の代りにポリエチレンテレフタレートなどのプラスチッ
クからなるシートあるいはフィルムを用いることが既に
提案されている。

以上のようにして形成したポリアクリルアミドゲル膜を
用いる電気泳動操作は、たとえば、次のようにして実施
される。

ポリアクリルアミドゲル膜はガラス板に挟んだままの状
態で垂直に立てられ、泳動溶媒（＃副液）の存在下に前
電気泳動を行なったのち、ゲル膜上端部に設けられたサ
ンプルスロットに試料（たとえば、マキサム・ギルバー
ト分解した３２　ｐラベル化ＤＮＡ分解物、サンガー法
により合成した３２　ｐラベル化ＤＮＡ断片）を−定量
注入し、次いで電気泳動を行なう。そして−定時間（例
、約６時間〜１２時間）の電気泳動を行なった後１片面
のガラス板を注意深く除去して、露出したゲル膜表面を
濾紙に載せ、次いでもう一方のガラス板を除去すること
によりゲル膜を濾紙上に移す。次に濾紙上に移されたゲ
ル膜の露出面をポリ塩化ビニリデンフィルムなどのプラ
スチックフィルムで覆い、この状態にてゲル膜を乾燥さ
せたのち、被覆フィルム面に写真フィルムなどの感光材
料を一定時間接触させることによりオートラジオグラフ
ィー処理を行なう。

なお、電気泳動終了後にゲル膜を酢酸水溶液に浸漬して
、尿素などの変性剤を溶出除去させたのち、ゲル膜を濾
紙に写し、これをプラスチックフィルムで覆い、減圧下
にゲル膜を乾燥させて乾燥膜とし、この乾燥膜について
オートラジオグラフィー処理を行なうこともある。

前記のオートラジオグラフィー処理は、たとえば、ゲル
膜を被覆しているフィルムの上にＸ線フィルム、増感ス
クリーンを順次のせて、室温あるいは低温で一定時間（
たとえば、約１０〜２０時間）露光を行ない、露光終了
後にＸ線フィルムを現像し、ＤＮＡの分離泳動パターン
を可視画像として得る方法により行なわれる。そして、
この可視化された分離泳動パターンに基づいてＤＮＡの
塩基配列を決定することができる。

前述のようにガラス板をゲル膜の支持体とじて用いるこ
とに起因する不都合を解決するために。

支持体としてプラスチックフィルム（シート）を用いる
ことは既に提案されている。特に、プラスチック製支持
体］二に形成されたポリアクリルアミドゲル膜と、その
ゲル膜表面を被覆するプラスチック製カバーフィルム層
からなる電気泳動用媒体材料は、そのカバーフィルム層
を薄くすることによって、カバーフィルム層をゲル膜か
ら除去することなく、その上にＸ線フィルムなどの感光
材料を載せてオートラジオグラフィー処理できるとの利
点がある。すなわち、従来のオートラジオグラフィー処
理では、前記のように電気泳動操作終了後に、ゲル膜を
覆っていたガラス板を薄いプラスチックフィルム（カバ
ーフィルム）に置き換える、必要があったが、上記の・
電気泳動用媒体材料を用い゛ることにより、カバーフィ
ルムの置き換え操作が不要になるとの利点がある。

しかしながら本発明者の検討によると、これまでに提案
されているプラスチック製支持体、ポリアクリルアミド
ゲル膜そしてプラスチック製カバ−フィルム層からなる
電気泳動用媒体材料では、ポリアクリルアミドゲル膜の
支持体への親和性が余り高くないため、支持体の表面状
態にむらなどがある場合には、ポリアクリルアミドゲル
膜が支持体表面に均質に密着せず、このため、ゲル膜と
支持体との分離の発生、あるいはゲル膜の解像力が低下
するなどの問題があった。

［発明の要旨］本発明は、支持体１−に形成された尿素などの変性剤を
含有するポリアクリルアミドゲル膜と、そのゲル膜表面
を被覆するカバーシート層からなる′電気泳動用媒体材
料で、解像力および実用りの取り扱い性が改良されたも
のを提供することを目的とする。

本発明は、［Ｉ］支持体層；［ｎｌアクリルアミド系化合物と架橋剤が木の存在下で
架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲルで、界
面活性剤および変性剤として少なくとも１個のカルバモ
イル基をもつ化合物を含む電気泳動用媒体層；および［ｍ１力バーシート層の各層が順次積層されてなる積層体を含む電気泳動用媒
体材料にある。

本発明の電気泳動用媒体材料では、ポリアクリルアミド
ゲル膜と支持体との間の密着、およびポリアクリルアミ
ドゲル膜とカバーシートとの間の密着が、それぞれ高度
に均一になるため、ゲル膜の表面が高度に均質になり、
高い解像力および優れた実用」−の取り扱い性を示す。

［発明の詳細な記述］本発明の電気泳動用媒体材料は、−般にプラスチックシ
ート（あるいはフィルム）を支持体として用いる。この
プラスチック製シートとしては、任意のプラスチック材
料から形成したものを用いることができる。好ましいプ
ラスチックシートの例としては、親木性ポリマーまたは
公知の表面処理により表面を親水化したポリマー（例、
ポリエチレンテレフタレート、ビスフェノールＡのポリ
カルボネート、ポリ塩化ビニル、塩化ビニリデン・塩化
ビニルコポリマー、ポリメチルメタクリレート、ポリエ
チレン、ポリプロピレン、セルロースアセテート類、セ
ルロースアセテートプロピオネート等）のフィルム、板
またはシート等の成形物をあげることができる。特にポ
リエチレンテレフタフタレートから形成されたシートを
用いることが好ましい、あるいは、ガラス製支持体でも
よい。

ポリマー成形物の表面を親水化するための処理のために
は、紫外線照射、グロー放電処理、コロナ放電処理、火
焔処理、電子線照射、ケミカルエツチング、電解エツチ
ング等の公知の方法を適用することができる。

支持体は一般に厚さが、約５０＃Ｌｍ〜約５００ｐｍ、
好ましくは約７０＃Ｌｍ〜約３００　＃Ｌｍのものが用
いられる。

次に電気泳動用媒体層（以ｆにおいて、ゲル媒体層、ポ
リアクリルアミドゲル膜あるいは単にゲル膜ともいう）
について説明する。

ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミド系化合物
と架橋剤とを、水溶液または水分散液として水中に溶解
または分散させてゲル形成液を調製したのち、液中で両
者を架橋重合させて架橋重合した水性ゲル膜として形成
することにより得ることができる。本明細書においては
、特にことわらない限り、（水中に）溶解と（水中に）
分散の両者を含めて単に（水中に）溶解といい、水溶液
と水分散液の両者を含めて単に水溶液という。また、溶
媒または分散媒として、所望により加えられる有機溶媒
と水の混合物をも包含する。

ポリアクリルアミドゲル膜の形成に用いることができる
アクリルアミド系化合物としては、アクリルアミド、Ｎ
−メチルアクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリルア
ミド、Ｎ−（ヒドロキシメチル）アクリルアミド、ジメ
チルアクリルアミド等のアクリルアミド系化合物やメタ
クリルアミドの様なメタクリルアミド系化合物が挙げら
れ、これらの化合物は単独で、あるいは二種具１−を併
用して用いることができる。これらのアクリルアミド系
化合物のうちではアクリルアミドが最も好ましく、また
アクリルアミドと他のアクリルアミド系化合物あるいは
メタクリルアミド系化合物の一種以上の併用も好ましい
。

架橋剤としてはｒ　ＥｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓＪ
　１９８１．２゜２２０−２２８等に記載の公知の化合
物（−種または二種以上の組合せ）を用いることができ
る。架橋剤の例としては、二官能性化合物および三官能
性化合物を開けることができる。二官能性化合物の例と
しては、Ｎ、Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド（ＢＩ
Ｓ）：Ｎ、Ｎ’−プロピレンビスアクリルアミド（ＰＢ
Ａ）；ジ（アクリルアミドジメチル）エーテル（ＤＡＥ
）；　１．２−ジアクリルアミドエチレングリコール（
ＤＥＧ）；エチレンウレアビスアクリルアミド（ＥＵＢ
）　　；エチレンジアクリレ−）　（ＥＤＡ）；Ｎ、Ｎ
’−ジアリルタータルジアミド（Ｎ、Ｎ’−ｄｉａｌｌ
ｙｌｔａｒｔａｒｄｉａｍｉｄｅ　：ＤＡＴＤ）；およ
びＮ、Ｎ”−ビスアクリリルシスタミ７　（Ｎ、Ｎ’−
ｂｉｓａｃｒｙｌｙｌｃｙｓｔａｓｉｎｅ、　Ｂ　Ａ　
Ｃ）等を挙げることができる。三官能性化合物の例とし
ては、１，３．５−１リアクリロイルへキサヒドロ−ｓ
−トリアジン、トリアリルシアヌレート、トリアリルイ
ソシアヌレート等を挙げることができる。

架橋剤の量は、単量体と架橋剤の総重量に対して約０．
１〜３０ｗｔ％、好ましくは約０．５〜１０ｗｔ％の範
囲で用いることができる。

ゲル濃度としては、Ｓ、　Ｈｊｅｒｔｅｎ：　　ｒ　Ａ
ｒｃｈ。

Ｂｉｏｃｈｅ＋ｗ、　　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　　Ｊ　　ｌ
　　（５ｕｐｐ１．　　）、　　１４７（１９６２）に
記載の定義に従って表示して、単量体、架橋剤および水
からなるゲル膜の容積に対して、単量体と架橋剤の量が
約３　ｗ　／　ｖ％から約３０　Ｗ　／　Ｖ％の範囲で
好ましく用いられる。

ポリアクリルアミドゲル膜に含有させる変性剤としては
、少なくとも１個のカルバモイル基を持つ化合物を挙げ
ることができ、その具体例としては、尿素、ホルムアミ
ド等が挙げられる。これらのうちで尿素が特に好ましく
用いられる。変性剤の量は単量体と架橋剤とを含む水性
ゲルの容積に対し、約４０　Ｗ　ｔ　／　Ｖ％から約６
０　ｗ　ｔ　／　ｖ％の範囲で用いられる。尿素を用い
る場合には、単量体と架橋剤とを含む水性ゲル１見に対
し約６モル（約３６０　ｇ）から飽和溶解量まで、好ま
しくは約７モル（約ａ２０ｇ）から飽和溶解量までの範
囲で用いることができる。

本発明の電気泳動媒体材料では、その電気泳動用媒体層
（ポリアクリルアミドゲル膜）に界面活性剤が含まれて
いることを特徴とする。

界面活性剤としては特に限定はないが、たとえば下記の
ような、非イオン界面活性剤、アニオン界面活性剤およ
び両性界面活性剤を使用することができる。

非イオン界面活性剤Ａ、アルキレンオキサイド誘導体（１）　Ｃａ　Ｆ１７Ｓ０２　Ｎ−＋ＣＨ、ＣＨ２ｏｉ
ｎ！ｔ（３）　ＣｔｓＨ，Ｏ＋ＣＨ２ＣＨ２０？−ｒｉｉ’Ｈ
（４）Ｃｓ　Ｆｓ７Ｓ０２　ＮゴＣＨ２ＣＨ２０ｈＨｔＢ、グリシドール誘導体Ｃ０スルホン酸塩誘導体（９）　Ｃａ　Ｆ　１？　Ｓ　Ｏｓ　ＫＤ、カルボン酸
塩系８すし界」酊活オし削１４ｅＭｅなお、Ｍｅはメチル基を、Ｅｔはエチル基を、Ｐｒはプ
ロピル基を、Ｂｕはブチル基を、ｒｅはペンチル基を表
す。

界面活性剤の量は電気泳動媒体層の体積当りのＦＪ＋−
−ｃ、Ｉ　Ｘ　１０−’　〜５Ｘ　Ｉ　Ｏ−’ｗ／　ｖ
％、好ましくはｌＸｌ０−３〜５Ｘ１０−２ｗ／ｖ％で
ある。なお、アニオン界面活性剤の場合には、Ｉ　Ｘ　
ｉ　Ｏ−４〜５Ｘ１０−２ｗ／ｖ％、好ましくは１ｘｌ
Ｏ−３〜５Ｘｌ（１”ｗ／ｖ％である。

ポリアクリルアミドゲル膜には水溶性ポリマーを含有さ
せることができる。

水溶性ポリマーとしては、付加重合型または縮重合型の
水溶性ポリマーを用いることができる。

付加重合型ポリマーの具体例としては、ポリビニルアル
コール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド等
の非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。縮重合型ポ
リマーの具体例としてポリエチレングリコール、ポリプ
ロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポリアルキレ
ングリコールが挙げられる。水溶性ポリマーの分子−量
は、約１万から約１００万の範囲のものが好ましい。こ
れらの水溶性ポリマーのうちでは、ポリエチレングリコ
ール、ポリアクリルアミドが特にに了ましし）。

水溶性ポリマーは、単量体と架橋剤の合訂重量に対して
約２ｗｔ％から約１００ｗｔ％の範囲、好ましくは約５
ｗｔ％から約５０ｗｔ％の範囲で用いられる。水溶性ポ
リマーを添加することにより、ポリアクリルアミドゲル
膜は可塑性を有するようになるため、裁断加に時に壊れ
ることがなくなり、またゲル膜は乾燥時にも可塑性を有
するようになり、もろさが改良され壊れにくくなるとの
利点がある。また、水溶性ポリマーの分子ｈ１および添
加量を選釈することにより、ゲル膜の粘度をコントロー
ルすることもできる。

ポリアクリルアミドゲル膜にはアガロースを含有させる
ことができる。アガロースは公知のアガ０−スであれば
特に制限はなく、低電気浸透性、中電気浸透性、高電気
浸透性アガロースのいずれをも用いることができる。用
いることのできるアガロースの例としては特開昭５５−
５７３０号、特開昭５５−１１０９４８号、特表昭５７
−５０２０９８号等の公報に開示されているアガロース
等がある。

アガロースの添加量は、単量体と架橋剤とを含むゲル組
成液の容積に対して約０．１ｗ／ｖ％から約２　ｗ　／
　ｖ％、好ましくは約０．３ｗ／ｖ％から約１．２ｗ／
ｖ％の割合で用いられる。ゲル膜にアガロースを添加す
ることにより、ゲル形成用溶液温度を変化させることに
より、適当な溶液粘度にコントロールすることが可能と
なり、その流動性を１■二めることができ、またゲル膜
を成形する時には成形しやすくなるとの利点がある。

ポリアクリルアミドゲル膜にはｐＨ緩衝剤を含有させる
ことができる。緩衝剤としては、ＰＨ８，０から１０．
０、好ましくはＰＨ８，０から９．０の範囲内のｐＨ値
に緩衝できる緩衝剤であれば、いずれをも用いることが
できる。用いうる緩衝剤としては、■本化学会−ｒ化学
便覧　基礎編１　（東京、九善■１９６６年発行）　１
３１２−１３２０頁；ｒＤａｔａ　ｆｏｒ　Ｂｉｏｃｈ
ｅｍｉｃａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｊ　（Ｒ，Ｍ、Ｃ。

Ｄａｗｓｏｎ　　ｅｔ　ａ１編　第２版、　０ｘｆｏｒ
ｄ　ａｔ　ｔｈｅ　Ｃ１ａｒｅｎｄｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、
１９６９年発行）　４７６−５０８ページ；ｒ　　Ｂｉ
ｏｃｈｅｉ＋１ｓｔｒｙ　　Ｊ　　、　　５，４６７（
１９６６）　　；ｒＡｎａｌｙｔｉｃａｌ　　Ｂｉｏｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ　　Ｊ　　Ｈ鼾４．３（１０−３１０
（１９８０）等の刊行物に記載の緩衝剤があげられる。

そして、その具体例としてはトリス（ヒドロキシメチル
）アミンメタン（Ｔｒｉｓ）　　［ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓ
ｔｒｙ　Ｎ。

７？−８６−１１、Ｎ　、　Ｎ−ビス（２−ヒドロキシ
エチル）グリシ７　（Ｂｉｃｉｎｅ）　、　Ｎ　−２−
ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−ヒドロキシプ
ロパン−３−スルホン酸のＮａｔｉｉまたはＫｔ１！等
、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ′−３−プ
ロパンスルホン酸のＮａ１ｉｉまたはに１′！！等、Ｎ
−［トリス（ヒドロキシメチル）メチルコー３−アミノ
プロパンスルホン酸のＮａ塩またはに塩および、これら
のいずれかと必要により組合せられる酸、アルカリまた
は塩等をあげることができる。

特に好ましい緩衝剤の例はＴｒｉｓ、ホウ酸とＥＤＴＡ
−２Ｎａｔｉｉｃ７）組合せ（ｐＨ８，３）がある。

本発明における代表的なポリアクリルアミドゲル膜は、
アクリルアミドに代表される単量体、二官能性のアリル
（ａｌｌｙｌ　）化合物またはアクリル化合物（架橋剤
）、水溶性ポリマー、およびアガロースを実質的に均一
に溶解ｙせた水溶液中で単量体と架橋剤とをラジカル架
橋重合させて得られるもの〒あり、単量体と架橋剤から
形成された三次元架橋重合体に水溶性ポリマーとアガロ
ースが実質的に分散されて、後二者のポリマー鎖が三次
元架橋重合体とからみあっている構造を有すると推定さ
れ、この構造が特徴をなすゲル媒体であるということが
できる。

上記のラジカル架橋重合反応は１分子状酸素の不存在下
で過酸化物の存在および／または紫外線照射等の公知の
方法により発生させることができる。この反応を加熱お
よび紫外線照射により加速することもできる。

ラジカル架橋重合用触媒としては、ｒ　Ｅｌｅｃｔｒ。

ｐｈｏｒｅａｉｓ　Ｊ　１９Ｂ１．２．２１３−２１９
．同１９Ｂ＋、　２．２２０−２２８　；青水、永井編
「最新電気泳動法Ｊ　　（１９７３年発行）等に記載の
公知の低温ラジカル重合開始剤のうちから適宜選択して
用いることができる。

好ましいラジカル重合開始剤の例としては、β−ジメチ
ルアミノプロピオニトリル（ＤＭＡＰＮ）−ペルオクソ
ニ硫酸アンモニウム程合物、Ｎ。

Ｎ、Ｎ’　、Ｎ”−テトラメチルエチレンジアミン（Ｔ
ＥＭＥＤ）−ベルオクソニ硫酸アンモニウム混合物、Ｔ
ＥＭＥＤ−リボフラビン（リボフラビンリン酸エステル
ナトリウム塩）混合物、ＴＥＭＥＤ−リボフラビン−過
酸化水素混合物と紫外線照射の組合せ等が挙げられる。

ラジカル重合開始剤の使用量は１通常単量体と架橋剤の
合計重量に対して約０．３重量％から約５重量％であり
、好ましくは約０，５重量％から約３重量％の範囲であ
る。

ラジカル重合の励起光としては光増感剤の励起に有効な
波長的２００〜９００ｎｍ（近紫外線から可視光の＠Ｉ
Ｉ）を含む光が一般に利用される。

励起光の光源の具体例としては、高圧水銀灯、超高圧水
銀灯、ハロゲンランプ、メタルハライドランプ、タング
ステンランプ、重水素ランプ、キセノン放電灯などが利
用できる。

ポリアクリルアミドゲル膜には、必要に応じて抗酸化剤
などの他の添加剤を含有させることができる。抗酸化剤
としては、ゲル膜に配合しうることか知られている種々
の化合物を用いることができる。抗酸化剤の具体例とし
てはジテオスレイトール、２−メルカプトエタノールを
挙げることができる。

その他の添加剤としては湿潤剤があり、ポリアクリルア
ミドゲル膜にはグリセリン、エチレングリコール等のポ
リオール化合物を含有させることもできる。ポリオール
化合物の含有量は、ゲル膜の容積に対して約５ｗ／ｙ％
から約４０ｗ／ｙ％の範囲から選ばれる。ポリオール化
合物のうちではグリセリンが特に好ましい、湿潤剤を配
合することによりゲル膜の保存時の極端な水分の蒸発に
よる乾燥を防ぐことが可能となり、また極端な乾燥に起
因するもろさを防ぎ、ひびわれを防ぐ等のゲル膜の物性
が改善されるとの利点がある。

ゲル媒体層は、平滑表面を有する支持体の上にゲル形成
液を公知の方法により塗布して設けたのち、ゲル形成液
を架橋重合させることにより、層状に成形することがで
きる。

ゲル形成液を支持体の表面で架橋重合させる場合には、
酸素を除去した不活性ガス（窒素ガスなど）の雰囲気下
で、あるいはゲル形成液の上をカバーシート、シートま
たは板などの被覆材料で覆った状態にて架橋重合を実施
する。

プラスチック製カバーシートは、前記のプラスチック製
支持体の記述において説明した各種の材料から製造する
ことができる。プラスチック製カバーシートとプラスチ
ック製支持体とは同一の材料からなっていてもよく、あ
るいは互いに異なった材料からなっていてもよい。

プラスチック製カバーシートの厚さは３００ＪＬｍ以下
であり、実用的に好ましい範囲としては約４ｇｍ〜約２
００１Ｌｍ、特に好ましい範囲としては約４１Ｌｍ〜約
１００ｇｍである。カバーシートは支持体よりもカいこ
とが望ましい。

カバーシートはガラス製であってもよい。

なおｌ−、記では支持体−［−にゲル膜を形１ｊ２．　
Ｌ、そのｌ−にカバーシートを付設する方法を例にして
本発明の電気泳動用媒体材料の製造υ：を説明したが、
前述のようにカバーシート１−にゲル膜を形成し、その
ｌ−に支持体を付設するような方法を利用して本発明の
電気泳動用媒体材料を製造することができることは勿論
である。

また、支持体、電気泳動操作層およびカバーシートのそ
れぞれの間には所望により下塗り層を設けてもよい。

本発明の電気泳動用媒体材料は、前述の諸文献等に記載
の公知の方法に従って、水ｆ型および垂直型平板電気泳
動法、ディスク電気泳動泳動法等のいずれにも用いるこ
とができる。

以下に本発明の実施例を記載するが、これらは本発明の
範囲を限定するものではない。

［実施例１に暮］特開昭６０−２０３８４７号公報記載のタイプの連続塗
布装置を用いて、厚さｌ　８０７ｇｍの長尺ポリエチレ
ンテレフタレートシート（支持体）１−に、アクリルア
ミド１１８．７ｇ、Ｎ’、Ｎ’−メチレンビスアクリル
アミド６．３ｇ、尿素４２０ｇ、トリス（ヒドロキシメ
チル）アミノメタン１０゜８ｇ、アガロース３．０ｇ、
ホウ酸５．５ｇ、ＥＤＴＡ−ＺＮａ塩９３０　ｍ　ｇお
よび前記（８）の７ニオン界面活性剤の２ｗｔ％水溶液
１０ｍＭを含有する１０００ｍＭの溶液にｔ合間始剤と
してベルオクソニ硫酸アンモニウム（５ｗｔ％）１３ｍ
ｌとＴＥＭＥＤ（２５ｗｔ％）３３０ｇＭおよびリボフ
ラビン（０，２５ｗｔ％）１０ｍｆＬを加えたものを０
．２ｍｍの厚みで成形し、窒素雰囲気ドでキセノン放電
灯（５００Ｗ）を利用して照射し架橋重合させ、ポリア
クリルアミドゲル膜を１！Ｉた。

上記のゲル膜の表面を観察したところ、その表面は高度
に均一で、かつ非常に平滑であることが確認された。

さらに、電気泳動操作における解像力を調べたところ満
足できるレベルにあった。

し比較例１］ゲル膜形成液に界面活性剤を入れなかった以外は実施例
１と同様にして、ポリアクリルアミドゲル膜を得た。

ｌ−記のゲル膜の表面を観察したところ、その表面の均
一性および平滑性は実施例１で得たものに劣り、ハジキ
などが発生していた。

さらに、電気泳動操作における解像力が実施例１で得た
ものに劣っていた。

［実施例？］ゲル膜形成液に入れる界面活性剤を前記（１）の非イオ
ン界面活性剤に変えた以外は実施例１と同様にして、ポ
リアクリルアミドゲル膜を得た。

４１記のゲル膜の表面を観察したところ、その表面は高
度に均一で、かつ非常に平滑であることが確認された。

［実施例３１支持体としてガラス板を用い、ゲル形成液にアガロース
を入れるなかった以外は実施例１と同様にして、ポリア
クリルアミドゲル膜を得た。

Claims

【特許請求の範囲】１、［ I ］支持体層；［II］アクリルアミド系化合物と架橋剤が氷の存在下で
架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲルで、界
面活性剤および変性剤として少なくとも１個のカルバモ
イル基をもつ化合物を含む電気泳動用媒体層；および［III］カバーシート層の各層が順次積層されてなる積層体を含む電気泳動用媒
体材料。２、電気泳動用媒体層がさらにアガロースを含むことを
特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動用媒体
材料。３、電気泳動用媒体層がさらに水溶性ポリマーおよびア
ガロースを含むことを特徴とする特許請求の範囲第１項
記載の電気泳動用媒体材料。４、変性剤が尿素またはホルムアミドであることを特許
請求の範囲第１項記載の電気泳動用媒体材料。５、界面活性剤が、非イオン界面活性剤および／または
アニオン界面活性剤であることを特徴とする特許請求の
範囲第１項記載の電気泳動用媒体材料。