JPS6114557A - 電気泳動用媒体材料 - Google Patents
電気泳動用媒体材料Info
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- JPS6114557A JPS6114557A JP59136247A JP13624784A JPS6114557A JP S6114557 A JPS6114557 A JP S6114557A JP 59136247 A JP59136247 A JP 59136247A JP 13624784 A JP13624784 A JP 13624784A JP S6114557 A JPS6114557 A JP S6114557A
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- material according
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44747—Composition of gel or of carrier mixture
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- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［発明の分野］
本発明は、電気泳動用媒体材料に関するものであり、さ
らに詳しくは、特にＤＮＡの塩基配列決定操作に用いる
のに適した電気泳動用媒体材料に関するものである。
らに詳しくは、特にＤＮＡの塩基配列決定操作に用いる
のに適した電気泳動用媒体材料に関するものである。
［発明の背景］
ポストラベル法に基づ＜ＤＮＡやＲＮＡの塩基配列決定
法においては、ポリアクリルアミドゲル膜を用いたスラ
ブ電気泳動操作が必須の操作となっている。特に近年に
おいて遺伝子関連の研究が進むにつれて、ＤＮＡ塩基配
列決定の操作の迅速化が急務となっている。
法においては、ポリアクリルアミドゲル膜を用いたスラ
ブ電気泳動操作が必須の操作となっている。特に近年に
おいて遺伝子関連の研究が進むにつれて、ＤＮＡ塩基配
列決定の操作の迅速化が急務となっている。
ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミドのような
単量体を触媒の存在下にてＮ、Ｎ’−メチレンビスアク
リルアミドのような二官能性の架橋剤を用い架橋重合さ
せることにより得られる。
単量体を触媒の存在下にてＮ、Ｎ’−メチレンビスアク
リルアミドのような二官能性の架橋剤を用い架橋重合さ
せることにより得られる。
なお、このポリアクリルアミドゲル膜の形成に際して通
常は、尿素あるいはホルムアミドのような変性剤を含有
させる。
常は、尿素あるいはホルムアミドのような変性剤を含有
させる。
」−記の重合反応はラジカル架橋重合であり、酸素の影
響により反応が阻害されるため、ポリアクリルアミドゲ
ル膜は酸素を遮断した状態で作成する必要がある。この
理由から、現在では一般に、ポリアクリルアミドゲル膜
は２枚のガラス板で形成されたセル（一定の空間、たと
えば約０．３〜１ｍｍを有する）の中にゲル形成液を注
入させ、酸素を遮断した状態で架橋重合させてゲル膜を
形成させている。
響により反応が阻害されるため、ポリアクリルアミドゲ
ル膜は酸素を遮断した状態で作成する必要がある。この
理由から、現在では一般に、ポリアクリルアミドゲル膜
は２枚のガラス板で形成されたセル（一定の空間、たと
えば約０．３〜１ｍｍを有する）の中にゲル形成液を注
入させ、酸素を遮断した状態で架橋重合させてゲル膜を
形成させている。
この方法は二枚のガラス板の間でゲル膜を形成するため
に、取り扱い性が悪く、かつゲル膜の量産化が困難であ
るといった大きな欠点を有している。
に、取り扱い性が悪く、かつゲル膜の量産化が困難であ
るといった大きな欠点を有している。
以上のようにして形成したポリアクリルアミドゲル膜を
用いる電気泳動操作は、たとえば、次のようにして実施
される。
用いる電気泳動操作は、たとえば、次のようにして実施
される。
ポリアクリルアミドゲル膜はガラス板に挟んだままの状
態で垂直に立てられ、前電気泳動を行なったのち、ゲル
膜上端部に設けられたサンプルスロットに試料（たとえ
ば、マキサム・ギルバート分解した３２Ｆラベル化ＤＮ
Ａ）を一定量注入し、次いで電気泳動を行なう。そして
一定時間（例、約６時間〜１２時間）の電気泳動を行な
った後。
態で垂直に立てられ、前電気泳動を行なったのち、ゲル
膜上端部に設けられたサンプルスロットに試料（たとえ
ば、マキサム・ギルバート分解した３２Ｆラベル化ＤＮ
Ａ）を一定量注入し、次いで電気泳動を行なう。そして
一定時間（例、約６時間〜１２時間）の電気泳動を行な
った後。
片面のガラス板を注意深く除去し、その露出面をポリ塩
化ビニリデンフィルムなどの合成樹脂製フィルムでゲル
膜を覆い、これを用いてオートラジオグラフィー処理を
行なう。
化ビニリデンフィルムなどの合成樹脂製フィルムでゲル
膜を覆い、これを用いてオートラジオグラフィー処理を
行なう。
すなわち、ボリアクリルアミードゲル膜を被覆している
フィルムの上にＸ線フィルム、増感スクリーンを順次の
せて、低温（たとえば、−８０°Ｃ）で一定時間（たと
えば、約１０〜２０時間）露光を行なう。そして露光終
了後、Ｘ線フィルムを現像し、ＤＮＡの分離泳動パター
ンを読みとることからなるオートラジオグラフィー処理
により、ＤＮＡの塩基配列を決定することができる。
フィルムの上にＸ線フィルム、増感スクリーンを順次の
せて、低温（たとえば、−８０°Ｃ）で一定時間（たと
えば、約１０〜２０時間）露光を行なう。そして露光終
了後、Ｘ線フィルムを現像し、ＤＮＡの分離泳動パター
ンを読みとることからなるオートラジオグラフィー処理
により、ＤＮＡの塩基配列を決定することができる。
オートラジオグラフィー処理は以上のように長持間を必
要とするため、その迅速化が望まれ、更に読みとりの高
分解能化も望まれている。
要とするため、その迅速化が望まれ、更に読みとりの高
分解能化も望まれている。
従来のアクリルアミドゲル膜を用いた電気泳動媒体材料
は上記のようにガラス板を用いるために取り扱い性に問
題があり、しばしばガラ・スを割ったりして実験を失敗
することがある。更に、オートラジオグラフィーに際し
、上記のように片面のガラスを除く必要があり、この時
にゲル膜を破損したりする事もあり、この操作は非常に
熟練を必要とする。したがって、この様な欠点を改良し
た取り扱い性の良好なポリアクリルアミドゲル膜の開発
が熱望されている。
は上記のようにガラス板を用いるために取り扱い性に問
題があり、しばしばガラ・スを割ったりして実験を失敗
することがある。更に、オートラジオグラフィーに際し
、上記のように片面のガラスを除く必要があり、この時
にゲル膜を破損したりする事もあり、この操作は非常に
熟練を必要とする。したがって、この様な欠点を改良し
た取り扱い性の良好なポリアクリルアミドゲル膜の開発
が熱望されている。
［発明の要旨］
本発明の目的は、ガラス板の代りにプラスチックフィル
ム（あるいはシート）を支持体として用い かつ支持体
と電気泳動用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜）との
間の接着性が向上した電気泳動媒体材料を提供すること
にある。
ム（あるいはシート）を支持体として用い かつ支持体
と電気泳動用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜）との
間の接着性が向上した電気泳動媒体材料を提供すること
にある。
本発明の他の目的は、高分解能な分離性能を示す電気泳
動媒体材料を提供することにある。
動媒体材料を提供することにある。
本発明の第一の態様は、下記の各層が順次積層されてな
る電気泳動用媒体材料： ［Ｉ］ プラスチック製支持体層； ［ＩＩ］無機酸化物とバインダーとを含有する接着層； ［１１［］アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存在
下で架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲル、
および変性剤として少なくとも１個のカルバモイル基を
もつ化合物を含む電気泳動用媒体層；および ［ＩＶ］ プラスチック製カバーフィルム層；からなる
。
る電気泳動用媒体材料： ［Ｉ］ プラスチック製支持体層； ［ＩＩ］無機酸化物とバインダーとを含有する接着層； ［１１［］アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存在
下で架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲル、
および変性剤として少なくとも１個のカルバモイル基を
もつ化合物を含む電気泳動用媒体層；および ［ＩＶ］ プラスチック製カバーフィルム層；からなる
。
ただし、本発明においては、上記の無機酸化物とバイン
ダーとを含有する接着層は、支持体層と電気泳動用媒体
層との間の代りに電気泳動用媒体層とカバーフィルム層
との間にあってもよく（本発明の第二の態様）、あるい
は支持体層と電気泳動用媒体層との間および電気泳動用
媒体層とカバーフィルム層との間の双方に設けられてい
てもよい（本発明の第三の態様）。
ダーとを含有する接着層は、支持体層と電気泳動用媒体
層との間の代りに電気泳動用媒体層とカバーフィルム層
との間にあってもよく（本発明の第二の態様）、あるい
は支持体層と電気泳動用媒体層との間および電気泳動用
媒体層とカバーフィルム層との間の双方に設けられてい
てもよい（本発明の第三の態様）。
本発明が提供する電気泳動用媒体材料は前述の電気泳動
後の電気泳動用媒体層の乾燥工程における各種の操作に
よってもその複合層構造が分離しにくいため、電気泳動
用媒体層の破損が発生することは殆どないとの利点があ
る。
後の電気泳動用媒体層の乾燥工程における各種の操作に
よってもその複合層構造が分離しにくいため、電気泳動
用媒体層の破損が発生することは殆どないとの利点があ
る。
さらに、本発明の電気泳動用媒体材料は、水平に置いた
プラスチック製の支持体またはカバーフィルムの上に接
着層を形成し、次いで電気泳動用媒体層をその上に形成
し、さらに電気泳動用媒体層の上に、所望により同様の
接着層を設けたのち、カバーフィルムまたは支持体を付
設する方法によって製造することが可能であるため、電
気泳動用媒体材料の量産化にも大きく寄与するものであ
る。
プラスチック製の支持体またはカバーフィルムの上に接
着層を形成し、次いで電気泳動用媒体層をその上に形成
し、さらに電気泳動用媒体層の上に、所望により同様の
接着層を設けたのち、カバーフィルムまたは支持体を付
設する方法によって製造することが可能であるため、電
気泳動用媒体材料の量産化にも大きく寄与するものであ
る。
［発明の詳細な記述コ
まず、本発明の第一の態様および第三の態様について説
明する。
明する。
本発明の電気泳動用媒体材料の支持体は、プラスチック
製シート（あるいはフィルム）である。
製シート（あるいはフィルム）である。
このプラス、チー・り酸シートとしては任意のプラスチ
ックから形成したものを用いることができる。
ックから形成したものを用いることができる。
好ましいプラスチックシートの例としては、親木性ポリ
マーまたは公知の表面処理により表面を親水化したポリ
マー（例、ポリエチレンテレフタレート、ビスフェノー
ルＡのポリカルボネート、ポリ塩化ビニル、塩化ビニリ
デン・塩化ビニルコポリマー、ポリメチルメタアクリレ
ート、ポリヘチレン、ポリプロピレン、セルロースアセ
テート類、セルロースアセテートプロピオネート等）の
フィルム、板またはシート等の成形物をあげることがで
きる。特にポリエチレンテレフタレートから形成された
シートを用いることが好ましい。
マーまたは公知の表面処理により表面を親水化したポリ
マー（例、ポリエチレンテレフタレート、ビスフェノー
ルＡのポリカルボネート、ポリ塩化ビニル、塩化ビニリ
デン・塩化ビニルコポリマー、ポリメチルメタアクリレ
ート、ポリヘチレン、ポリプロピレン、セルロースアセ
テート類、セルロースアセテートプロピオネート等）の
フィルム、板またはシート等の成形物をあげることがで
きる。特にポリエチレンテレフタレートから形成された
シートを用いることが好ましい。
これらのポリマー成形物の表面を親水化するための処理
のためには、紫外線照射、グロー放電処理、コロナ放電
処理、火焔処理、電子線照射、ケミカルエツチング、電
解エツチング等の公知の方法を適用することができる。
のためには、紫外線照射、グロー放電処理、コロナ放電
処理、火焔処理、電子線照射、ケミカルエツチング、電
解エツチング等の公知の方法を適用することができる。
支持体は一般に厚さが、約５０ｐＬｍ〜約５００ｐｍ、
好ましくは約７０ｐＬｍ〜約３００ｇｍ（７）ものが用
いらＲ６゜ 本発明においてプラスチック製支持体の上には無機酸化
物とバインダーとを含有する接着層が設けられる。
好ましくは約７０ｐＬｍ〜約３００ｇｍ（７）ものが用
いらＲ６゜ 本発明においてプラスチック製支持体の上には無機酸化
物とバインダーとを含有する接着層が設けられる。
本発明において用いられる接着層は無機酸化物とバイン
ダーとを含有する接層層である。無機酸化物の例として
は、二酸化ケイ素（ＳｉＯｚ）、たとえば、結晶性の二
酸化ケイ素、コロイダルシリカ、メタノールシリカなど
の各種の二酸化ケイ素、およびＳ ｎ０２、ＴｉＯ２、
ＺｎＯ，ＭｇＯを挙げることができる。無機酸化物は通
常は粒子状のものが用いられる。この無機酸化物粒子の
粒径について特に制限はないが、一般には平均粒径的１
０ｎｍから約２０ｐｍのものが用いられる。
ダーとを含有する接層層である。無機酸化物の例として
は、二酸化ケイ素（ＳｉＯｚ）、たとえば、結晶性の二
酸化ケイ素、コロイダルシリカ、メタノールシリカなど
の各種の二酸化ケイ素、およびＳ ｎ０２、ＴｉＯ２、
ＺｎＯ，ＭｇＯを挙げることができる。無機酸化物は通
常は粒子状のものが用いられる。この無機酸化物粒子の
粒径について特に制限はないが、一般には平均粒径的１
０ｎｍから約２０ｐｍのものが用いられる。
接着層にはバインダーが含まれており、このバインダー
は無機酸化物を層状に形成し、かつ無機酸化物と共にプ
ラスチック製支持体と後述の電気泳動用媒体層との接着
を高める作用を示す。
は無機酸化物を層状に形成し、かつ無機酸化物と共にプ
ラスチック製支持体と後述の電気泳動用媒体層との接着
を高める作用を示す。
バインダーとしては層形成作用を有するポリマーを用い
ることが好ましい。ポリマーとしては、特に制限はなく
、水溶性のポリマーあるいは水不溶性のポリマーを用い
ることができる。好ましく用いられるポリマーの例とし
ては、セルロースおよびニトロセルロース、二酢酸セル
ロース、三酢酸セルロースなどのセルロース誘導体、デ
キストラン、アガロース、ポリアクリルアミド、ポリビ
ニルアルコールエステル（例、ポリ酢酸ビニル）、ポリ
アクリル酸エステル（例、ポリ（ヒドロキシエチルアク
リレート））、プルラン、およびプルラン誘導体等を挙
げることができる。
ることが好ましい。ポリマーとしては、特に制限はなく
、水溶性のポリマーあるいは水不溶性のポリマーを用い
ることができる。好ましく用いられるポリマーの例とし
ては、セルロースおよびニトロセルロース、二酢酸セル
ロース、三酢酸セルロースなどのセルロース誘導体、デ
キストラン、アガロース、ポリアクリルアミド、ポリビ
ニルアルコールエステル（例、ポリ酢酸ビニル）、ポリ
アクリル酸エステル（例、ポリ（ヒドロキシエチルアク
リレート））、プルラン、およびプルラン誘導体等を挙
げることができる。
上記の接着層に含有される無機酸化物とバインダーとの
重量比率は、通常は約１＝５〜１５：１の範囲内にあり
、好ましくは、約１：３〜１０：１の範囲内にある。
重量比率は、通常は約１＝５〜１５：１の範囲内にあり
、好ましくは、約１：３〜１０：１の範囲内にある。
上記接着層の厚さは約０．１〜３０ｐｍ、好ましくは約
０．２〜１５ｐｍの範囲である。
０．２〜１５ｐｍの範囲である。
上記の接着層の下側（支持体側）には更にポリマ一層を
設けることができる。ポリマ一層としては上記接着層の
バインダーポリマーからなる薄膜層（厚さ０．１〜３ｇ
ｍ）が好ましい。
設けることができる。ポリマ一層としては上記接着層の
バインダーポリマーからなる薄膜層（厚さ０．１〜３ｇ
ｍ）が好ましい。
次に電気泳動用媒体層（以下において、ゲル媒体層、ポ
リアクリルアミドゲル膜あるいは単にゲル膜ともいう）
について説明する。
リアクリルアミドゲル膜あるいは単にゲル膜ともいう）
について説明する。
ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミド系化合物
と架橋剤とを、水溶液または水分散液として水中に溶解
または分散させてゲル形成液を調製したのち、液中で両
者を架橋重合させて架橋重合した水性ゲル膜として形成
することにより得ることができる。本明細書においては
、特にことわらない限り、（水中に）溶解と（水中に）
分散の両者を含めて単に（水中に）溶解といい、水溶液
と水分散液の両者を含めて単に水溶液という。また、溶
媒または分散媒として、所望により加えられる有機溶媒
と水の混合物をも包含する。
と架橋剤とを、水溶液または水分散液として水中に溶解
または分散させてゲル形成液を調製したのち、液中で両
者を架橋重合させて架橋重合した水性ゲル膜として形成
することにより得ることができる。本明細書においては
、特にことわらない限り、（水中に）溶解と（水中に）
分散の両者を含めて単に（水中に）溶解といい、水溶液
と水分散液の両者を含めて単に水溶液という。また、溶
媒または分散媒として、所望により加えられる有機溶媒
と水の混合物をも包含する。
ポリアクリルアミドゲル膜の形成に用いることができる
アクリルアミド系化合物としては、アクリルアミド、Ｎ
−メチルアクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリルア
ミド、Ｎ−（ヒドロキシメチル）アクリルアミド、ジア
セトンアクリルアミド等のアクリルアミド系化合物やメ
タクリルアミドの様なメタクリルアミド系化合物が挙げ
られ、これらの化合物は単独で、あるいは二種以上を併
用して用いることができる。これらのアクリルアミド系
化合物のうちではアクリルアミドが最も好ましく、また
アクリルアミドと他のアクリルアミド系化合物あるいは
メタクリルアミド系化合物の一種以上の併用も好ましい
。
アクリルアミド系化合物としては、アクリルアミド、Ｎ
−メチルアクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリルア
ミド、Ｎ−（ヒドロキシメチル）アクリルアミド、ジア
セトンアクリルアミド等のアクリルアミド系化合物やメ
タクリルアミドの様なメタクリルアミド系化合物が挙げ
られ、これらの化合物は単独で、あるいは二種以上を併
用して用いることができる。これらのアクリルアミド系
化合物のうちではアクリルアミドが最も好ましく、また
アクリルアミドと他のアクリルアミド系化合物あるいは
メタクリルアミド系化合物の一種以上の併用も好ましい
。
架橋剤としてはｒ ＥｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓＪ
１９８１．２Ｌ２２０−２２８等に記載の公知の化合
物（一種または二種以上の組合せ）を用いることができ
る。架橋剤の例としては、二官能性化合物および三官能
性化合物を挙げることができる。二官能性化合物の例と
しては、Ｎ、Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド（ＢＩ
Ｓ）、Ｎ、Ｎ’−プロピレンビスアクリルアミド（ＰＢ
Ａ）、ジ（アクリルアミドジメチル）エーテル（ＤＡＥ
）、ｌ 、２−ジアクリルアミドエチレングリコール（
ＤＥＧ）；エチレンウレアビスアクリルアミド（ＥＵＢ
）；エチレンジアクリレート（ＥＤＡ）、Ｎ 、Ｎ″−
ジアリルタータルジアミド（Ｎ、Ｎ’−ｄｉａｌｌｙｌ
ｔａｒｔａｒｄｉａｍｉｄｅ：ＤＡＴＤ）；およびＮ、
Ｎ’−ビスアクリリルシスタミン（Ｎ、Ｎ’−ｂｉｓａ
ｃｒｙｌｙｌｃ７ｓｔａｍｉｎｅ、 Ｂ Ａ Ｃ）等を
挙げることができる。三官能性架橋剤の例としては、１
，３，５．−トリアクリロイルへキサヒドロ−５−）リ
アジン、トリアリルシアヌレート、トリアリルイソシア
ヌレート等を挙げることができる。なかでも、三官能性
等架橋剤を用いた場合には特に電気泳動用媒体層と接着
層との間の高い接着が実現される。
１９８１．２Ｌ２２０−２２８等に記載の公知の化合
物（一種または二種以上の組合せ）を用いることができ
る。架橋剤の例としては、二官能性化合物および三官能
性化合物を挙げることができる。二官能性化合物の例と
しては、Ｎ、Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド（ＢＩ
Ｓ）、Ｎ、Ｎ’−プロピレンビスアクリルアミド（ＰＢ
Ａ）、ジ（アクリルアミドジメチル）エーテル（ＤＡＥ
）、ｌ 、２−ジアクリルアミドエチレングリコール（
ＤＥＧ）；エチレンウレアビスアクリルアミド（ＥＵＢ
）；エチレンジアクリレート（ＥＤＡ）、Ｎ 、Ｎ″−
ジアリルタータルジアミド（Ｎ、Ｎ’−ｄｉａｌｌｙｌ
ｔａｒｔａｒｄｉａｍｉｄｅ：ＤＡＴＤ）；およびＮ、
Ｎ’−ビスアクリリルシスタミン（Ｎ、Ｎ’−ｂｉｓａ
ｃｒｙｌｙｌｃ７ｓｔａｍｉｎｅ、 Ｂ Ａ Ｃ）等を
挙げることができる。三官能性架橋剤の例としては、１
，３，５．−トリアクリロイルへキサヒドロ−５−）リ
アジン、トリアリルシアヌレート、トリアリルイソシア
ヌレート等を挙げることができる。なかでも、三官能性
等架橋剤を用いた場合には特に電気泳動用媒体層と接着
層との間の高い接着が実現される。
架橋剤の量は、単量体と架橋剤の総重量に対して約０．
１ｗｔ％から約３０ｗｔ％、好ましくは約１ｗｔ％から
約１０ｗｔ％の範囲で用いることができる。
１ｗｔ％から約３０ｗｔ％、好ましくは約１ｗｔ％から
約１０ｗｔ％の範囲で用いることができる。
ゲル濃度としては、Ｓ、 Ｈｊｅｒｔｅｎ： ｒ Ａ
ｒｃｈ。
ｒｃｈ。
Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｂｉｏｐｈｙｓ、 Ｊ Ｉ （５ｕ
ｐｐ１． ）、 １４７（１９Ｂ２）に記載の定義に従
って表示して、単量体、架橋剤および水からなるゲル膜
の容積に対して、単量体と架橋剤の量が約３ ｗ ／
ｖ％から約３０ ｗ ／ ｖ％の範囲で好ましく用いら
れる。
ｐｐ１． ）、 １４７（１９Ｂ２）に記載の定義に従
って表示して、単量体、架橋剤および水からなるゲル膜
の容積に対して、単量体と架橋剤の量が約３ ｗ ／
ｖ％から約３０ ｗ ／ ｖ％の範囲で好ましく用いら
れる。
ポリアクリルアミドゲル膜に含有させる変性剤としでは
、少なくとも１個のカルバモイル基を持つ化合物を挙げ
ることができ、その具体例としては、尿素、ホルムアミ
ド等が挙げられる。これらのうちで尿素が特に好ましく
用いられる。変性剤の量は単量体と架橋剤とを含む水性
ゲルの容積に対し、約４０ ｗ ｔ ／ ｖ％から約６
０ ｗ ｔ ／ ｖ％の範囲で用いら虹る。尿素を用い
る場合には、単量体と架橋剤とを含む水性ゲル１文に対
し約６モル（約３６０ｇ）から飽和溶解量まで、好まし
くは約７モル（約４２０ｇ）から飽和溶解量までの範囲
で用いることができる。
、少なくとも１個のカルバモイル基を持つ化合物を挙げ
ることができ、その具体例としては、尿素、ホルムアミ
ド等が挙げられる。これらのうちで尿素が特に好ましく
用いられる。変性剤の量は単量体と架橋剤とを含む水性
ゲルの容積に対し、約４０ ｗ ｔ ／ ｖ％から約６
０ ｗ ｔ ／ ｖ％の範囲で用いら虹る。尿素を用い
る場合には、単量体と架橋剤とを含む水性ゲル１文に対
し約６モル（約３６０ｇ）から飽和溶解量まで、好まし
くは約７モル（約４２０ｇ）から飽和溶解量までの範囲
で用いることができる。
ポリアクリルアミドゲル膜には水溶性ポリマーを含有さ
せることができる。
せることができる。
水溶性ポリマーとしては、付加重合型または縮重合型の
水溶性ポリマーを用いることができる。
水溶性ポリマーを用いることができる。
付加重合型ポリマーの具体例としては、ポリビニルアル
コール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド等
の非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。縮重合型ポ
リマーの具体例としてポリエチレングリコール、ポリプ
ロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポリアルキレ
ングリコールが挙げられる。水溶性ポリマーの分子量は
、約１万から約ｌＯＯ万の範囲のものが好ましい。これ
らの水溶性ポリマーのうちでは、ポリエチレングリコー
ル、ポリアクリルアミドが特に好ましい。
コール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド等
の非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。縮重合型ポ
リマーの具体例としてポリエチレングリコール、ポリプ
ロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポリアルキレ
ングリコールが挙げられる。水溶性ポリマーの分子量は
、約１万から約ｌＯＯ万の範囲のものが好ましい。これ
らの水溶性ポリマーのうちでは、ポリエチレングリコー
ル、ポリアクリルアミドが特に好ましい。
水溶性ポリマーは、単量体と架橋剤の合計重量に対して
約２ｗｔ％から約１００ｗｔ％の範囲、好ましくは約５
ｗｔ％から約５０ｗｔ％の範囲で用いられる。水溶性ポ
リマーを添加することにより、ポリアクリルアミドゲル
膜は可塑性を有するようになるため、裁断加工時に壊れ
ることがなくなり、またゲル膜は乾燥時にも可塑性を有
するようになり、もろさが改良され壊れにくくなるとの
利点がある。また、水溶性ポリマーの分子量および添加
量を選択することにより、ゲル膜の粘度をコントロール
することもできる。
約２ｗｔ％から約１００ｗｔ％の範囲、好ましくは約５
ｗｔ％から約５０ｗｔ％の範囲で用いられる。水溶性ポ
リマーを添加することにより、ポリアクリルアミドゲル
膜は可塑性を有するようになるため、裁断加工時に壊れ
ることがなくなり、またゲル膜は乾燥時にも可塑性を有
するようになり、もろさが改良され壊れにくくなるとの
利点がある。また、水溶性ポリマーの分子量および添加
量を選択することにより、ゲル膜の粘度をコントロール
することもできる。
ポリアクリルアミドゲル膜にはアガロースを含有させる
ことができる。アガロースは公知の７ガロースであれば
特に制限はなく、低電気浸透性、中電気浸透性、高電気
浸透性アガロースのいずれをも用いることができる。用
いることのできるアガロースの例としては特開昭５５−
５７３０号、特開昭５５−１１０９４６号、特表昭５７
−５０２０９８号等の公報に開示されているアガロース
等がある。
ことができる。アガロースは公知の７ガロースであれば
特に制限はなく、低電気浸透性、中電気浸透性、高電気
浸透性アガロースのいずれをも用いることができる。用
いることのできるアガロースの例としては特開昭５５−
５７３０号、特開昭５５−１１０９４６号、特表昭５７
−５０２０９８号等の公報に開示されているアガロース
等がある。
アガロースの添加量は、単量体と架橋剤とを含むゲル組
成液の容積に対して約０．１ｗ／ｖ％から約２ ｗ ／
ｖ％、好ましくは約０．３ｗ／ｖ％から約１．．２ｗ
／ｖ％の割合で用いられる。ゲル膜にアガロースを添加
することにより、ゲル形成用溶液温度を変化させること
により、適当な溶液粘度にコントロールすることが可能
となり、その流動性を止めることができ、またゲル膜を
成形する時には成形しやすくなるとの利点がある。
成液の容積に対して約０．１ｗ／ｖ％から約２ ｗ ／
ｖ％、好ましくは約０．３ｗ／ｖ％から約１．．２ｗ
／ｖ％の割合で用いられる。ゲル膜にアガロースを添加
することにより、ゲル形成用溶液温度を変化させること
により、適当な溶液粘度にコントロールすることが可能
となり、その流動性を止めることができ、またゲル膜を
成形する時には成形しやすくなるとの利点がある。
ポリアクリルアミドゲル膜にはＰＨ緩衝剤を含有させる
ことができる。緩衝剤としては、ｐＨ８，０から１０．
０、好ましくはｐＨ８，０から９．０の範囲内のｐＨ値
に緩衝できる緩衝剤であれば、いずれをも用いることが
できる。用いうるＮａ剤としては、日本化学合繊「化学
便覧 基礎編」 （東京、丸蓋■１９６６年発行） １
３１２−１３２０頁：［１ａｔａ ｆｏｒ Ｂｉｏ
ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ ｊ （Ｒ
，Ｍ、Ｃ。
ことができる。緩衝剤としては、ｐＨ８，０から１０．
０、好ましくはｐＨ８，０から９．０の範囲内のｐＨ値
に緩衝できる緩衝剤であれば、いずれをも用いることが
できる。用いうるＮａ剤としては、日本化学合繊「化学
便覧 基礎編」 （東京、丸蓋■１９６６年発行） １
３１２−１３２０頁：［１ａｔａ ｆｏｒ Ｂｉｏ
ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ ｊ （Ｒ
，Ｍ、Ｃ。
Ｄａｗｓｏｎ ｅｔ ａ１編 第２版、 ０ｘｆｏｒ
ｄ ａｔ ｔｈｓ Ｃ１ａｒｅｎｄｏｎ Ｐｒｅｓｓ、
１９８９年発行） ４７Ｂ−５０８ベージ；Ｆ Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｊ 、５４Ｂ？（１９８Ｂ
） ；ＦＡｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ ｊ １０４３００−３１０（１９８０）等
の刊行物に記載の緩衝剤があげられる。そして、その具
体例としてはトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
（Ｔｒｉｓ） ［ＣＡＳ Ｒｅｇｉｓｔｒｙ Ｎ。
ｄ ａｔ ｔｈｓ Ｃ１ａｒｅｎｄｏｎ Ｐｒｅｓｓ、
１９８９年発行） ４７Ｂ−５０８ベージ；Ｆ Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｊ 、５４Ｂ？（１９８Ｂ
） ；ＦＡｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ ｊ １０４３００−３１０（１９８０）等
の刊行物に記載の緩衝剤があげられる。そして、その具
体例としてはトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
（Ｔｒｉｓ） ［ＣＡＳ Ｒｅｇｉｓｔｒｙ Ｎ。
７７−Ｈ−１］ 、 Ｎ 、 Ｎ−ビス（２−ヒドロ
キシエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ） 、 Ｎ −２
−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ”−２−ヒドロキシ
プロパン−３−スルホン酸のＮａ塩またはに塩等、Ｎ−
２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ゛−３−プロパン
スルホン酸のＮａ塩またはに塩等、Ｎ〜［トリス（ヒド
ロキシメチル）メチル］−３−アミノプロパンスルホン
酸のＮａ塩またはに塩および、これらのいずれかと必要
により組合せられる酸、アルカリまたは塩等をあげるこ
とができる。
キシエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ） 、 Ｎ −２
−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ”−２−ヒドロキシ
プロパン−３−スルホン酸のＮａ塩またはに塩等、Ｎ−
２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ゛−３−プロパン
スルホン酸のＮａ塩またはに塩等、Ｎ〜［トリス（ヒド
ロキシメチル）メチル］−３−アミノプロパンスルホン
酸のＮａ塩またはに塩および、これらのいずれかと必要
により組合せられる酸、アルカリまたは塩等をあげるこ
とができる。
特に好ましい緩衝剤の例としてはＴｒｉｓ、ホウ酸およ
びＥＤＴＡ・２Ｎａ塩の組合せ（ｐＨ８，３）がある。
びＥＤＴＡ・２Ｎａ塩の組合せ（ｐＨ８，３）がある。
ポリアクリルアミドゲル膜には、必要に応じて抗酸化剤
などの他の添加剤を含有させることができる。抗酸化剤
としては、ゲル膜に配合しうることが知られている種々
の化合物を用いることができる。抗酸化剤の具体例とし
てはジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールが
挙げられる。
などの他の添加剤を含有させることができる。抗酸化剤
としては、ゲル膜に配合しうることが知られている種々
の化合物を用いることができる。抗酸化剤の具体例とし
てはジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールが
挙げられる。
本発明においてポリアクリルアミドゲル膜はアクリルア
ミドに代表される単量体、二官能性のアリル（ａｌｌｙ
ｌ ）化合物またはアクリル化合物（架橋剤）、水溶性
ポリマー、およびアガロースを実質的に均一に溶解させ
た水溶液中で単量体と架橋剤とをラジカル架橋重合させ
て得られるものであり、単量体と架橋剤から形成された
三次元架橋重合体に水溶性ポリマーとアガロースが実質
的に分散されて、後二者のポリマー鎖が三次元架橋重合
体とからみあっている構造を有すると推定され、この構
造が特徴をなすゲル媒体である。
ミドに代表される単量体、二官能性のアリル（ａｌｌｙ
ｌ ）化合物またはアクリル化合物（架橋剤）、水溶性
ポリマー、およびアガロースを実質的に均一に溶解させ
た水溶液中で単量体と架橋剤とをラジカル架橋重合させ
て得られるものであり、単量体と架橋剤から形成された
三次元架橋重合体に水溶性ポリマーとアガロースが実質
的に分散されて、後二者のポリマー鎖が三次元架橋重合
体とからみあっている構造を有すると推定され、この構
造が特徴をなすゲル媒体である。
」−記のラジカル架橋重合反応は、分子状酸素の不存在
下で過酸化物の存在および／または紫外線照射等の公知
の方法により発生させることができる。この反応を加熱
および紫外線照射により加速することもできる。
下で過酸化物の存在および／または紫外線照射等の公知
の方法により発生させることができる。この反応を加熱
および紫外線照射により加速することもできる。
ラジカル架橋重合用触媒としては、ｒ Ｅｌｅｃｔｒ。
Ｐｈｏｒｅｓ：ｓＪ １９８１．２Ｌ２１３−２１９．
同１９８１． Ｌ ２２０−２２８；青米、永井編「最
新電気泳動法Ｊ （１９７３年発行）等に記載の公知
の低温ラジカル重合開始剤のうちから適宜選択して用い
ることができる。好ましいラジカル重合開始剤の具体例
としては、β−ジメチルアミノプロピオニトリル（ＤＭ
ＡＰＮ）−ペルオクソニ硫酸アンモニウム混合物、Ｎ、
Ｎ、Ｎ’ 、Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（Ｔ
ＥＭＥＤ）−ベルオクソニ硫酸アンモニウム混合物、Ｔ
ＥＭＥＤ−リボフラビン混合物、ＴＥＭＥＤ−リボフラ
ビン−過酸化水素混合物と紫外線照射の組合せ等が挙げ
られる。ラジカル重合開始剤の含有量は、単量体と架橋
剤の合計重量に対して約０．３重量％から約５重量％、
そして好ましくは約０．５重量％から約３重量％の範囲
である。
同１９８１． Ｌ ２２０−２２８；青米、永井編「最
新電気泳動法Ｊ （１９７３年発行）等に記載の公知
の低温ラジカル重合開始剤のうちから適宜選択して用い
ることができる。好ましいラジカル重合開始剤の具体例
としては、β−ジメチルアミノプロピオニトリル（ＤＭ
ＡＰＮ）−ペルオクソニ硫酸アンモニウム混合物、Ｎ、
Ｎ、Ｎ’ 、Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（Ｔ
ＥＭＥＤ）−ベルオクソニ硫酸アンモニウム混合物、Ｔ
ＥＭＥＤ−リボフラビン混合物、ＴＥＭＥＤ−リボフラ
ビン−過酸化水素混合物と紫外線照射の組合せ等が挙げ
られる。ラジカル重合開始剤の含有量は、単量体と架橋
剤の合計重量に対して約０．３重量％から約５重量％、
そして好ましくは約０．５重量％から約３重量％の範囲
である。
ポリアクリルアミドゲル膜には、必要に応じて抗酸化剤
などの他の添加剤を含有させることができる。抗酸化剤
としては、ゲル膜に配合しうることが知られている種々
の化合物を用いることができる。抗酸化剤の具体例とし
てはジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールが
挙げられる。
などの他の添加剤を含有させることができる。抗酸化剤
としては、ゲル膜に配合しうることが知られている種々
の化合物を用いることができる。抗酸化剤の具体例とし
てはジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールが
挙げられる。
その他の添加剤としては湿潤剤があり、ポリアクリルア
ミドゲル膜にはグリセリン、エチレングリコール等のポ
リオール化合物を含有させることもできる。ポリオール
化合物の含有量は、ゲル膜の容積に対して約５ ｗ ／
ｖ％から約４０ ｗ ／ ｖ％の範囲から選ばれる。
ミドゲル膜にはグリセリン、エチレングリコール等のポ
リオール化合物を含有させることもできる。ポリオール
化合物の含有量は、ゲル膜の容積に対して約５ ｗ ／
ｖ％から約４０ ｗ ／ ｖ％の範囲から選ばれる。
ポリオール化合物のうちではグリセリンが特に好ましい
。湿潤剤を配合することによりゲル膜の保存時の極端な
水分の蒸発による乾燥を防ぐことが可能となり、また極
端な乾燥に起因するもろさを防ぎ、ひびわれを防ぐ等の
ゲル膜の物性が改善されるとの利点がある。
。湿潤剤を配合することによりゲル膜の保存時の極端な
水分の蒸発による乾燥を防ぐことが可能となり、また極
端な乾燥に起因するもろさを防ぎ、ひびわれを防ぐ等の
ゲル膜の物性が改善されるとの利点がある。
ゲル媒体層は、平滑表面を有する支持体に設けられた前
述の接着層の上にゲル形成液を公知の方法により塗布し
たのち、ゲル形成液を架橋重合させることにより、層状
に成形することができる。
述の接着層の上にゲル形成液を公知の方法により塗布し
たのち、ゲル形成液を架橋重合させることにより、層状
に成形することができる。
支持体表面に塗布されたゲル形成液は、そのまま、ある
いはゲル形成液塗布層をプラスチック製カバーフィルム
（シート、板状物も含む）で覆ったのち架橋重合させる
。この目的に使用されるプラスチック製カバーフィルム
としては前記のプラスチック製支持体と同様のものを用
いることができる。このプラスチック製カバーフィルム
の厚さは３００ ｐｍ以下であり、実用的に好ましい範
囲としては約４〜２００Ｂｍである。
いはゲル形成液塗布層をプラスチック製カバーフィルム
（シート、板状物も含む）で覆ったのち架橋重合させる
。この目的に使用されるプラスチック製カバーフィルム
としては前記のプラスチック製支持体と同様のものを用
いることができる。このプラスチック製カバーフィルム
の厚さは３００ ｐｍ以下であり、実用的に好ましい範
囲としては約４〜２００Ｂｍである。
以上のようにして、プラスチック製支持体層、無機酸化
物とバインダーとを含有する接着層、電気泳動媒体層、
およびプラスチック製カバーフィルム層の四層を含む電
気泳動媒体材料を製造することができる。
物とバインダーとを含有する接着層、電気泳動媒体層、
およびプラスチック製カバーフィルム層の四層を含む電
気泳動媒体材料を製造することができる。
なお、上記のプラスチック製カバーフィルムと電気泳動
媒体層との間には、上記と同様な無ｍ酸化物とバインダ
ーとを含有する接着層を設けることができる。その接着
層は、たとえば、プラスチック製カバーフィルムの片面
（電気泳動媒体層に接触させる側の面）に予め接着層を
、前記の支持体への接着層の付設と同様な方法で付設し
ておき、これを電気泳動媒体層の表面に重ねる方法など
により形成することができる。
媒体層との間には、上記と同様な無ｍ酸化物とバインダ
ーとを含有する接着層を設けることができる。その接着
層は、たとえば、プラスチック製カバーフィルムの片面
（電気泳動媒体層に接触させる側の面）に予め接着層を
、前記の支持体への接着層の付設と同様な方法で付設し
ておき、これを電気泳動媒体層の表面に重ねる方法など
により形成することができる。
また、本発明の第二の態様は、プラスチック製支持体層
、電気泳動媒体層、無機酸化物とバインダーとを含有す
る接着層、およびプラスチック製カバーフィルム層の四
層を含む電気泳動媒体材料からなるものである。この四
層構造は、たとえば、前記の第一の態様の電気泳動媒体
材料の製造法において、支持体層をカバーフィルム層に
、そしてカバーフィルム層を支持体層に置き換えた方法
、すなわち、まずカバーフィルム層に無機酸化物とバイ
ンダーとを含有する接着層を形成したのち、その上にゲ
ル形成液を塗布し、次いでゲル化後にその上に支持体を
付設する方法により製造することができる。
、電気泳動媒体層、無機酸化物とバインダーとを含有す
る接着層、およびプラスチック製カバーフィルム層の四
層を含む電気泳動媒体材料からなるものである。この四
層構造は、たとえば、前記の第一の態様の電気泳動媒体
材料の製造法において、支持体層をカバーフィルム層に
、そしてカバーフィルム層を支持体層に置き換えた方法
、すなわち、まずカバーフィルム層に無機酸化物とバイ
ンダーとを含有する接着層を形成したのち、その上にゲ
ル形成液を塗布し、次いでゲル化後にその上に支持体を
付設する方法により製造することができる。
あるいは、本発明の第二の態様の電気泳動用媒体材料は
、まず支持体の表面に直接、あるいは所望により本発明
で規定した接着層以外の接着層を付設したのち、ゲル形
成液を塗布し、次いでゲル化後にその上に無機酸化物と
バインダーとを含有する接着層を有するカバーフィルム
を付設する方法によっても製造することができる。
、まず支持体の表面に直接、あるいは所望により本発明
で規定した接着層以外の接着層を付設したのち、ゲル形
成液を塗布し、次いでゲル化後にその上に無機酸化物と
バインダーとを含有する接着層を有するカバーフィルム
を付設する方法によっても製造することができる。
本発明の電気泳動用媒体材料は、前述の諸文献等に記載
の公知の方法に従って、水平型および垂直型平板電気泳
動法、ディスク電気泳動泳動法等のいずれにも用いるこ
とができる。
の公知の方法に従って、水平型および垂直型平板電気泳
動法、ディスク電気泳動泳動法等のいずれにも用いるこ
とができる。
本発明の電気泳動媒体材料は、特にプラスチック製シー
ト（支持体あるいはカバーフィルム）と電気泳動用媒体
層との間の接着に顕著な有効性を示す特定の接着層を付
設したため、その製造工程、あるいは電気泳動工程およ
びそれに附随する工程において、そして乾燥時および湿
潤時のいずれの時でも、各層の分離が発生しにくいとの
顕著な利点がある。またその接着層が高い接着性を示す
ことから、各層間の密着性も向−ヒし、このため電気泳
動の分解能も向上する。
ト（支持体あるいはカバーフィルム）と電気泳動用媒体
層との間の接着に顕著な有効性を示す特定の接着層を付
設したため、その製造工程、あるいは電気泳動工程およ
びそれに附随する工程において、そして乾燥時および湿
潤時のいずれの時でも、各層の分離が発生しにくいとの
顕著な利点がある。またその接着層が高い接着性を示す
ことから、各層間の密着性も向−ヒし、このため電気泳
動の分解能も向上する。
以下に本発明の実施例を記載するが、これらは本発明の
範囲を限定するものではない。
範囲を限定するものではない。
［実施例１］
紫外線照射処理により表面を親水性にした厚さ１８０
ｐｍのポリエチレンテレフタレー１−（ＰＥＴ）シート
（支持体）上に約０．５ｇｍの厚み（固形分）になるよ
うに、第１表記載の接着層形成用塗布液を塗布し、約１
１０℃で乾燥して無機酸化物とバインダーとを含む接着
層を形成した。
ｐｍのポリエチレンテレフタレー１−（ＰＥＴ）シート
（支持体）上に約０．５ｇｍの厚み（固形分）になるよ
うに、第１表記載の接着層形成用塗布液を塗布し、約１
１０℃で乾燥して無機酸化物とバインダーとを含む接着
層を形成した。
第１表 接着層形成用塗布液の組成
試料番号 １２３４５
コロイダルシリカ（ｇ） ５ ａｏ ａｏ
−ｇ。
−ｇ。
二酸化チタン（ｇ） −−−ｅｏ −ポリア
クリルアミド（ｇ） −１０−−−ニトロセルロース
（ｇ） １０ − １０ １０ −アセチルアルロ
ース（ｇ） −−−−＋。
クリルアミド（ｇ） −１０−−−ニトロセルロース
（ｇ） １０ − １０ １０ −アセチルアルロ
ース（ｇ） −−−−＋。
メタノール（文） ｉ、１０．１１１１．１
１．１ ＋、１水（文） ０．７０．９０
．７０．７０．７第１表において、コロイダルシリカは
日産化学■製スノーテックスＣ（商品名、コロイダルシ
リカの平均粒径１０〜２０ｎｍ）であり、数値は固形分
換算の添加量である。二酸化チタンは表面処理なしの平
均結晶径０．２５〜０．４０ｐｍのルチル型微粒子であ
る。
１．１ ＋、１水（文） ０．７０．９０
．７０．７０．７第１表において、コロイダルシリカは
日産化学■製スノーテックスＣ（商品名、コロイダルシ
リカの平均粒径１０〜２０ｎｍ）であり、数値は固形分
換算の添加量である。二酸化チタンは表面処理なしの平
均結晶径０．２５〜０．４０ｐｍのルチル型微粒子であ
る。
支持体上に設けられた各接着層の上に、アクリルアミド
１１．８７ｇ、ＢＩ５６３０ｍｇ、尿素４２ｇ、トリス
（ヒドロキシメチル）アミノメタン［ＣＡ Ｓ Ｒｅ
ｇｉｓｔｒｙ Ｎｏ７？−８８−１］ １ 、０８ｇ
、ホウ酸０．５５ｇおよびＥＤＴＡａ２Ｎａ塩９３ｍｇ
を含有する１００ｍＭの溶液に重合開始剤としてベルオ
クソニ硫酸アンモニウム（５重量％）１．３ｍＭ、ＴＥ
ＭＥＤ３３ｕ、Ｍを加えたものを０．５ｍｍの厚みで成
形し、ポリアクリルアミドゲル膜を得た。
１１．８７ｇ、ＢＩ５６３０ｍｇ、尿素４２ｇ、トリス
（ヒドロキシメチル）アミノメタン［ＣＡ Ｓ Ｒｅ
ｇｉｓｔｒｙ Ｎｏ７？−８８−１］ １ 、０８ｇ
、ホウ酸０．５５ｇおよびＥＤＴＡａ２Ｎａ塩９３ｍｇ
を含有する１００ｍＭの溶液に重合開始剤としてベルオ
クソニ硫酸アンモニウム（５重量％）１．３ｍＭ、ＴＥ
ＭＥＤ３３ｕ、Ｍを加えたものを０．５ｍｍの厚みで成
形し、ポリアクリルアミドゲル膜を得た。
また、ＰＥＴシート上に接着層を付設しなかった以外は
同様にしてゲル膜を形成して比較試料とした。。
同様にしてゲル膜を形成して比較試料とした。。
得られたゲル膜を指でおさえ、ゲル膜と支持体間のｍ着
性を評価した。試料番号１〜５（本発明に従う試料）に
おける支持体とゲル膜との間の接着性は優れていたが、
一方、比較試料についてはその接着性が劣っていた。
性を評価した。試料番号１〜５（本発明に従う試料）に
おける支持体とゲル膜との間の接着性は優れていたが、
一方、比較試料についてはその接着性が劣っていた。
［実施例２］
実施例１の第１表と同じ塗布液を用いて接着層付きＰＥ
Ｔシート（支持体）を製造し、この接着層の上にアクリ
ルアミド１１．８７ｇ、ＢＩ３６３０ｍｇ、アガロース
（低電気浸透性、ゲル化温度３６℃）０．３ｇ、ポリア
クリルアミド２．５ｇ、トリス（ヒドロキシメチル）ア
ミノメタン１．０８ｇ、ホウ酸０．５５ｇ、およびＥＤ
ＴＡ・２Ｎａ塩９３ ｍ ｇからなる１００ｍＭの溶液
に重合開始剤としてベルオクソニ硫酸アンモニウム（５
重量％）１．３ｍ、Ｑ、ＴＥＭＥＤ３３ＰＩを加えたも
のを０．５ｍｍの厚みで成形し、ポリアクリルアミドゲ
ル膜を得た。
Ｔシート（支持体）を製造し、この接着層の上にアクリ
ルアミド１１．８７ｇ、ＢＩ３６３０ｍｇ、アガロース
（低電気浸透性、ゲル化温度３６℃）０．３ｇ、ポリア
クリルアミド２．５ｇ、トリス（ヒドロキシメチル）ア
ミノメタン１．０８ｇ、ホウ酸０．５５ｇ、およびＥＤ
ＴＡ・２Ｎａ塩９３ ｍ ｇからなる１００ｍＭの溶液
に重合開始剤としてベルオクソニ硫酸アンモニウム（５
重量％）１．３ｍ、Ｑ、ＴＥＭＥＤ３３ＰＩを加えたも
のを０．５ｍｍの厚みで成形し、ポリアクリルアミドゲ
ル膜を得た。
また、ＰＥＴシート上に接着層を付設しなかった以外は
同様にしてゲル膜を形成して比較試料とした。
同様にしてゲル膜を形成して比較試料とした。
得られたゲル膜を指でおさえ、ゲル膜と支持体間の接着
性を評価した。試料番号１〜５（本発明に従う試＃４）
における支持体とゲル膜との間の接着性は優れていたが
、一方、比較試料についてはその接着性が劣っていた。
性を評価した。試料番号１〜５（本発明に従う試＃４）
における支持体とゲル膜との間の接着性は優れていたが
、一方、比較試料についてはその接着性が劣っていた。
［実施例３］
紫外線照射して表面を親水性にしたＰＥＴシート（支持
体）のその表面上に、アクリルアミド１１．８７ｇ、１
，３．５−１−リアクリロイル−へキサヒドロ−Ｓ−ト
リアジン６３０ｍｇ、アガロース０．３ｇ、ポリアクリ
ルアミド２．５ｇ、トリス（ヒドロキシメチル）アミノ
メタン１．０８ｇ、ホウ酸０．５５ｇおよびＥＤＴＡ２
Ｎａ塩９３ｍｇからなる１００ｍＪ１溶液に重合開始剤
としてベルオクソニ硫酸アンモニウム（５重量％）１．
３ｍ５Ｌ、ＴＥＭＥＤ３３ｐｉを加えたものを０．５ｍ
ｍの厚みで成形し、ポリアクリルアミドゲル膜を得た。
体）のその表面上に、アクリルアミド１１．８７ｇ、１
，３．５−１−リアクリロイル−へキサヒドロ−Ｓ−ト
リアジン６３０ｍｇ、アガロース０．３ｇ、ポリアクリ
ルアミド２．５ｇ、トリス（ヒドロキシメチル）アミノ
メタン１．０８ｇ、ホウ酸０．５５ｇおよびＥＤＴＡ２
Ｎａ塩９３ｍｇからなる１００ｍＪ１溶液に重合開始剤
としてベルオクソニ硫酸アンモニウム（５重量％）１．
３ｍ５Ｌ、ＴＥＭＥＤ３３ｐｉを加えたものを０．５ｍ
ｍの厚みで成形し、ポリアクリルアミドゲル膜を得た。
次いで、このゲル膜に常法によりサンプル注入用のスロ
ットを成形した。
ットを成形した。
別に実施例１の第１表と同じ塗布液を用いて接着層つき
ＰＥＴシート（カバーフィルム）を調製して、このカバ
ーフィルムで上記のゲル膜表面を被覆し、電気泳動媒体
材料を得た。
ＰＥＴシート（カバーフィルム）を調製して、このカバ
ーフィルムで上記のゲル膜表面を被覆し、電気泳動媒体
材料を得た。
この電気泳動媒体材料を使用し、３２Ｐ−ＤＮＡをマキ
サム・ギルバート分解して得た試料を電気泳動にかけ、
ＤＮＡ塩基配列決定の実験を行なった。
サム・ギルバート分解して得た試料を電気泳動にかけ、
ＤＮＡ塩基配列決定の実験を行なった。
電気泳動終了後、支持体ＰＥＴシートのみをゲル膜から
除いた。ゲル膜はいずれも力へ−フイルムによく接着し
ていた。このゲル膜を１０％酢酸水溶液に浸漬し、脱尿
素したのち、ろ紙にてカバーし、これを減圧下で乾燥し
た。なお、上記の酢酸水溶液浸漬時において、カバーフ
ィルムからゲル膜がはがれる一事がなかった。乾燥終了
後オートラジオグラフィー処理を常法に従って行なった
。
除いた。ゲル膜はいずれも力へ−フイルムによく接着し
ていた。このゲル膜を１０％酢酸水溶液に浸漬し、脱尿
素したのち、ろ紙にてカバーし、これを減圧下で乾燥し
た。なお、上記の酢酸水溶液浸漬時において、カバーフ
ィルムからゲル膜がはがれる一事がなかった。乾燥終了
後オートラジオグラフィー処理を常法に従って行なった
。
性能はいずれも良好だった。
比較試料として、接着層のないＰＥＴフィルムをカバー
フィルムとして用い電気泳動用媒体材料を得た。この比
較試料を用いて同様の実験を行なったが、この場合は支
持体ＰＥＴシートのみを除くことができず、以後な操作
は不可能であった。
フィルムとして用い電気泳動用媒体材料を得た。この比
較試料を用いて同様の実験を行なったが、この場合は支
持体ＰＥＴシートのみを除くことができず、以後な操作
は不可能であった。
［実施例４］
実施例１の第１表の試料番号ｌの塗布液を、紫外線照射
して表面を親水性にしたＰＥＴシート（支持体）の上に
塗布して接着層を形成した。
して表面を親水性にしたＰＥＴシート（支持体）の上に
塗布して接着層を形成した。
別に、カバーフィルムとして、実施例１の第１表の試料
番号５の塗布液をＰＥＴフィルムの上に塗布して接着層
を形成したものを準備した。
番号５の塗布液をＰＥＴフィルムの上に塗布して接着層
を形成したものを準備した。
上記の支持体の上に実施例３と同様にしてゲル膜を形成
し、スロットを形成し、このゲル膜の上に上記のカバー
フィルムを被覆した。実施例３と同様に電気泳動後、脱
尿素、乾燥を行なった。これらの操作は特に支障なく行
なわれ、このことからも明らかなように、上記カバーフ
ィルムはゲル膜に高い接着力で接着していた。また、こ
の試料を用いてオートラジオグラクイ−処理を行なった
ところ、良好な性能を示した。
し、スロットを形成し、このゲル膜の上に上記のカバー
フィルムを被覆した。実施例３と同様に電気泳動後、脱
尿素、乾燥を行なった。これらの操作は特に支障なく行
なわれ、このことからも明らかなように、上記カバーフ
ィルムはゲル膜に高い接着力で接着していた。また、こ
の試料を用いてオートラジオグラクイ−処理を行なった
ところ、良好な性能を示した。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、下記の各層が順次積層されてなる電気泳動用媒体材
料： ［ I ］プラスチック製支持体層； ［II］無機酸化物とバインダーとを含有する接着層； ［III］アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存在下
で架橋重合してなるポリアクリルア ミド系水性ゲル、および変性剤として少な くとも１個のカルバモイル基をもつ化合物 を含む電気泳動用媒体層；および ［IV］プラスチック製カバーフィルム層。 ２、電気泳動用媒体層がさらに水溶性ポリマーおよびア
ガロースを含むことを特徴とする特許請求の範囲第１項
記載の電気泳動用媒体材料。 ３、変性剤が尿素またはホルムアルデヒドであることを
特徴とする特許請求の範囲第１項もしくは第２項記載の
電気泳動用媒体材料。 ４、プラスチック製支持体層がポリエチレンテレフタレ
ートシートからなることを特徴とする特許請求の範囲第
１項もしくは第２項記載の電気泳動用媒体材料。 ５、接着層に含まれる無機酸化物がＳｉＯ＿２、ＳｎＯ
＿２、ＴｉＯ＿２、ＺｎＯ、およびＭｇＯからなる群よ
り選ばれるものであることを特徴とする特許請求の範囲
第１項もしくは第２項記載の電気泳動用媒体材料。 ６。接着層に含まれるバインダーが、セルロース誘導体
、デキストラン、アガロース、ポリアクリルアミド、ポ
リビニルアルコールエステル、ポリアクリル酸エステル
、プルラン、およびプルラン誘導体からなる群より選ば
れるものであることを特徴とする特許請求の範囲第１項
もしくは第２項記載の電気泳動用媒体材料。 ７、下記の各層が順次積層されてなる電気泳動用媒体材
料： ［ I ］プラスチック製支持体層； ［II］アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存在下で
架橋重合してなるポリアクリルア ミド系水性ゲル、および変性剤として少な くとも１個のカルバモイル基をもつ化合物 を含む電気泳動用媒体層； ［III］無機酸化物とバインダーとを含有する接着層；
および ［IV］プラスチック製カバーフィルム層。 ８、電気泳動用媒体層がさらに水溶性ポリマーおよびア
ガロースを含むことを特徴とする特許請求の範囲第７項
記載の電気泳動用媒体材料。 ９、変性剤が尿素またはホルムアルデヒドであることを
特徴とする特許請求の範囲第７項もしくは第８項記載の
電気泳動用媒体材料。 １０、プラスチック製支持体層がポリエチレンテレフタ
レートシートからなることを特徴とする特許請求の範囲
第７項もしくは第８項記載の電気泳動用媒体材料。 １１、接着層に含まれる無機酸化物がＳｉＯ＿２、Ｓｎ
Ｏ＿２、ＴｉＯ＿２、ＺｎＯ、およびＭｇＯからなる群
より選ばれるものであることを特徴とする特許請求の範
囲第７項もしくは第８項記載の電気泳動用媒体材料。 １２、接着層に含まれるバインダーが、セルロース誘導
体、デキストラン、アガロース、ポリアクリルアミド、
ポリビニルアルコールエステル、ポリアクリル酸エステ
ル、プルラン、およびプルラン誘導体からなる群より選
ばれるものであることを特徴とする特許請求の範囲第７
項もしくは第８項記載の電気泳動用媒体材料。 １３、下記の各層が順次積層されてなる電気泳動用媒体
材料： ［ I ］プラスチック製支持体層； ［II］無機酸化物とバインダーとを含有する接着層； ［III］アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存在下
で架橋重合してなるポリアクリルア ミド系水性ゲル、および変性剤として少な くとも１個のカルバモイル基をもつ化合物 を含む電気泳動用媒体層； ［IV］無機酸化物とバインダーとを含有する接着層；お
よび ［Ｖ］プラスチック製カバーフィルム層。 １４、電気泳動用媒体層がさらに水溶性ポリマーおよび
アガロースを含むことを特徴とする特許請求の範囲第１
３項記載の電気泳動用媒体材料。 １５、変性剤が尿素またはホルムアルデヒドであること
を特徴とする特許請求の範囲第１３項もしくは第１４項
記載の電気泳動用媒体材料。 １６、プラスチック製支持体層がポリエチレンテレフタ
レートシートからなることを特徴とする特許請求の範囲
第１３項もしくは第１４項記載の電気泳動用媒体材料。 １７、接着層に含まれる無機酸化物がＳｉＯ＿２、Ｓｎ
Ｏ＿２、ＴｉＯ＿２、ＺｎＯ、およびＭｇＯからなる群
より選ばれるものであることを特徴とする特許請求の範
囲第１３項もしくは第１４項記載の電気泳動用媒体材料
。 １８、接着層に含まれるバインダーが、セルロース誘導
体、デキストラン、アガロース、ポリアクリルアミド、
ポリビニルアルコールエステル、ポリアクリル酸エステ
ル、プルラン、およびプルラン誘導体からなる群より選
ばれるものであることを特徴とする特許請求の範囲第１
３項もしくは第１４項記載の電気泳動用媒体材料。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59136247A JPS6114557A (ja) | 1984-06-30 | 1984-06-30 | 電気泳動用媒体材料 |
| EP85304668A EP0167373A3 (en) | 1984-06-30 | 1985-07-01 | Element for electrophoresis |
| US06/903,884 US4722777A (en) | 1984-06-30 | 1986-09-03 | Improvement of electrophoretic element using polyacrylamide gel |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59136247A JPS6114557A (ja) | 1984-06-30 | 1984-06-30 | 電気泳動用媒体材料 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6114557A true JPS6114557A (ja) | 1986-01-22 |
Family
ID=15170725
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59136247A Pending JPS6114557A (ja) | 1984-06-30 | 1984-06-30 | 電気泳動用媒体材料 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6114557A (ja) |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6391794A (ja) * | 1986-10-07 | 1988-04-22 | Hitachi Electronics Eng Co Ltd | 紙幣計数処理方式 |
| US6028951A (en) * | 1990-02-05 | 2000-02-22 | Cummins-Allison Corporation | Method and apparatus for currency discrimination and counting |
| US6256407B1 (en) | 1998-03-17 | 2001-07-03 | Cummins-Allison Corporation | Color scanhead and currency handling system employing the same |
| US6539104B1 (en) | 1990-02-05 | 2003-03-25 | Cummins-Allison Corp. | Method and apparatus for currency discrimination |
| US6721442B1 (en) | 1998-03-17 | 2004-04-13 | Cummins-Allison Corp. | Color scanhead and currency handling system employing the same |
| US6866134B2 (en) * | 1992-05-19 | 2005-03-15 | Cummins-Allison Corp. | Method and apparatus for document processing |
| US6868954B2 (en) * | 1990-02-05 | 2005-03-22 | Cummins-Allison Corp. | Method and apparatus for document processing |
| US6945173B2 (en) | 2001-11-16 | 2005-09-20 | Heidelberger Druckmascinen Ag | Method for automatically exchanging a printing plate as well as corresponding rotary press |
| US6955253B1 (en) * | 1995-12-15 | 2005-10-18 | Cummins-Allison Corp. | Apparatus with two or more pockets for document processing |
| US6957733B2 (en) * | 1995-12-15 | 2005-10-25 | Cummins-Allison Corp. | Method and apparatus for document processing |
| US6959800B1 (en) * | 1995-12-15 | 2005-11-01 | Cummins-Allison Corp. | Method for document processing |
| US8453820B2 (en) * | 2001-09-28 | 2013-06-04 | Cummins-Allison Corp. | Currency handling system having multiple output receptacles interfaced with one or more cash processing devices |
| US9818249B1 (en) | 2002-09-04 | 2017-11-14 | Copilot Ventures Fund Iii Llc | Authentication method and system |
-
1984
- 1984-06-30 JP JP59136247A patent/JPS6114557A/ja active Pending
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| JPH0511355B2 (ja) * | 1986-10-07 | 1993-02-15 | Hitachi Denshi Enjiniaringu Kk | |
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| US9818249B1 (en) | 2002-09-04 | 2017-11-14 | Copilot Ventures Fund Iii Llc | Authentication method and system |
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