JPS60183558A - ジゴキシン定量用試薬 - Google Patents
ジゴキシン定量用試薬Info
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- JPS60183558A JPS60183558A JP3926384A JP3926384A JPS60183558A JP S60183558 A JPS60183558 A JP S60183558A JP 3926384 A JP3926384 A JP 3926384A JP 3926384 A JP3926384 A JP 3926384A JP S60183558 A JPS60183558 A JP S60183558A
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- JP
- Japan
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- digoxin
- hapten
- reagent
- water
- latex
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- Pending
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/94—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving narcotics or drugs or pharmaceuticals, neurotransmitters or associated receptors
- G01N33/9453—Cardioregulators, e.g. antihypotensives, antiarrhythmics
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は生体液（例えば血清、血漿など）中のジゴキシ
ンを食度を測定するための試薬に関する。
ンを食度を測定するための試薬に関する。
更に詳しくは免疫化学的凝集阻止反応に基づく試薬であ
って、少なくとも下記式ＣＩ）で表わされるハブテンを
化学的に結合させた水不溶性微粒子担体（以下「ハブテ
ン−徹粒子担体結合物」という）と抗ジゴキシン血清か
らなるジゴキシン定量用試薬に関する。
って、少なくとも下記式ＣＩ）で表わされるハブテンを
化学的に結合させた水不溶性微粒子担体（以下「ハブテ
ン−徹粒子担体結合物」という）と抗ジゴキシン血清か
らなるジゴキシン定量用試薬に関する。
Ｈ
（式中、礼Ｉは前記と同し）
ジゴキシンは強心配糖体の一種で、古くよりうっ血性心
不全等の心疾患の治１ｉｔＤとして用いられ外２ 往々にして毒性を発現する血中濃度域（２ｑｐｊＪ−／
ｍ６以上）に達する危険性がある。特に高齢者、腎機
能障害患者等においては中毒症状を起しやすいほか、中
指症状が本薬剤の過剰投与によるものか、或は本来の心
疾辺に起因するものか区別し硅いため、適切な投与が非
常に難しい。従ってジゴキシンの面中？桑度を正６＋Ｉ
Ｘｋこ把握しながら府者毎に投与ｉ？七をコントロール
することが望まれている。このジゴキシン血中（Ｊ：（
推測定法としてＧｊ、放射免うシ測定法（Ｒ，Ｉ Ａ
）やｈ′ｆ素免疫測定法（）ｉｉＡ）袷が用いられてい
る。しかしこれらの方法の多く ＋ｔ Ｂ／Ｆ分ｇＥ＜
を必要とするほか、ＲＩ Ａにおいては放射性化合物の
使用、廃果か大きな問題となっている。これらに代わる
方法上しては、免役化学的凝集ｌ５１１止反応にＪ、←
づく方法がある。この方法＋；ｊ ＲＩＡやＪＩＩＡに
匹敵する感／ｉを有する他、１１．１ ＡやＥ Ｉ Ａ
のような使用面でのしζ雑件あるいはＲＩ Ａのような
旙菓上の問題等がない点Ｇこおいて優れた定量方法であ
る。この方法に係る先行技術としては、 （１）ジゴキシン結合トランスフェリンで彼但したラテ
ックスとジゴキシン抗体を被ヒしたラテックスを用いる
方法（特開昭５３−１０４７２６号）。
不全等の心疾患の治１ｉｔＤとして用いられ外２ 往々にして毒性を発現する血中濃度域（２ｑｐｊＪ−／
ｍ６以上）に達する危険性がある。特に高齢者、腎機
能障害患者等においては中毒症状を起しやすいほか、中
指症状が本薬剤の過剰投与によるものか、或は本来の心
疾辺に起因するものか区別し硅いため、適切な投与が非
常に難しい。従ってジゴキシンの面中？桑度を正６＋Ｉ
Ｘｋこ把握しながら府者毎に投与ｉ？七をコントロール
することが望まれている。このジゴキシン血中（Ｊ：（
推測定法としてＧｊ、放射免うシ測定法（Ｒ，Ｉ Ａ
）やｈ′ｆ素免疫測定法（）ｉｉＡ）袷が用いられてい
る。しかしこれらの方法の多く ＋ｔ Ｂ／Ｆ分ｇＥ＜
を必要とするほか、ＲＩ Ａにおいては放射性化合物の
使用、廃果か大きな問題となっている。これらに代わる
方法上しては、免役化学的凝集ｌ５１１止反応にＪ、←
づく方法がある。この方法＋；ｊ ＲＩＡやＪＩＩＡに
匹敵する感／ｉを有する他、１１．１ ＡやＥ Ｉ Ａ
のような使用面でのしζ雑件あるいはＲＩ Ａのような
旙菓上の問題等がない点Ｇこおいて優れた定量方法であ
る。この方法に係る先行技術としては、 （１）ジゴキシン結合トランスフェリンで彼但したラテ
ックスとジゴキシン抗体を被ヒしたラテックスを用いる
方法（特開昭５３−１０４７２６号）。
（２）ジゴキシン−ウシ血清アルブミン結合物を結合し
たラテックスとジゴキシン抗体およびリューマチ因子を
利用する方法（Ｄａｎｉｅｌ Ｃｏｌ ｌｅｔ −０ａ
ｓｓａｒｔＦ５ 、Ｃ１１ｎ、Ｏｂｅｍ、２７，１２０
５．１９８１） 。
たラテックスとジゴキシン抗体およびリューマチ因子を
利用する方法（Ｄａｎｉｅｌ Ｃｏｌ ｌｅｔ −０ａ
ｓｓａｒｔＦ５ 、Ｃ１１ｎ、Ｏｂｅｍ、２７，１２０
５．１９８１） 。
（３）ジゴキシン−ヒトｌ１１［ｉ’ＩＩＪアルブミン
結合物を結合したラテックスとジゴキシン抗体結合ラテ
ックスを用いる方法（ＣＩ ｉｎ、 Ｏｂｃｍ。２８．
１９８２ 。
結合物を結合したラテックスとジゴキシン抗体結合ラテ
ックスを用いる方法（ＣＩ ｉｎ、 Ｏｂｃｍ。２８．
１９８２ 。
Ａ、 Ａ ＣＣ池５４４）。
等が存在する。しかし、これらの方法において用いられ
ているジゴキシン結合ラテックスは、いずれもジゴキシ
ン末端のジギトキソースを過ヨウ素醒す） ＩＪウムで
開裂した後、その部分に蛋白を結合させ（Ｂｉｏｃｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ ９巻（２） １９７０年３３１〜３３７
頁参照）、次いでこの蛋白をラテックスに結合するとい
う煩雑な操作を経て製造されている。この様な煩雑な操
作４ま、得られる最終生成物、即ちジゴキシン結合ラテ
ックスにおけるジゴキシンの程合量を制？１１＋＋する
ことを困難にする。また上記（１）と（３）の先行技術
に示される方法は、２１１釈抗血丘“ｊを使用する方法
に比べ、抗体結合（或いは晟鐘）ラテックスを製造する
操作が会費と／、Ｃす、加えて当該ラテックスを豹蹟す
る除に、実際に衣県反ｂｂに関与−ｊるよりはるかに多
貝の抗ヤ４・が会友となるほか、当庭ラテックスを書規
性よく作る１１することが％ｌｉ ＬいといったＩｊｕ
ｋｓ’Ａ点がある。また上記（２）の方法（とおいて
はジゴキシン結合ラテックスと希釈抗体による２Ｍ Ｊ
ｉＳでは血中ジゴキシン嬢度を１：ｉｌ定するための十
分なｔｅ度をイυることかできないことがら、リューマ
チレ・１子を反応系に混在さゼることにより必要な感度
を確保している。しかし、−リューマチ因子という不反
定で入手しつこくいものを使用するということは、ジゴ
キシンの６ｉＪ定糸を確立する上で好ましい解決手段で
あるとはいい他りい。
ているジゴキシン結合ラテックスは、いずれもジゴキシ
ン末端のジギトキソースを過ヨウ素醒す） ＩＪウムで
開裂した後、その部分に蛋白を結合させ（Ｂｉｏｃｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ ９巻（２） １９７０年３３１〜３３７
頁参照）、次いでこの蛋白をラテックスに結合するとい
う煩雑な操作を経て製造されている。この様な煩雑な操
作４ま、得られる最終生成物、即ちジゴキシン結合ラテ
ックスにおけるジゴキシンの程合量を制？１１＋＋する
ことを困難にする。また上記（１）と（３）の先行技術
に示される方法は、２１１釈抗血丘“ｊを使用する方法
に比べ、抗体結合（或いは晟鐘）ラテックスを製造する
操作が会費と／、Ｃす、加えて当該ラテックスを豹蹟す
る除に、実際に衣県反ｂｂに関与−ｊるよりはるかに多
貝の抗ヤ４・が会友となるほか、当庭ラテックスを書規
性よく作る１１することが％ｌｉ ＬいといったＩｊｕ
ｋｓ’Ａ点がある。また上記（２）の方法（とおいて
はジゴキシン結合ラテックスと希釈抗体による２Ｍ Ｊ
ｉＳでは血中ジゴキシン嬢度を１：ｉｌ定するための十
分なｔｅ度をイυることかできないことがら、リューマ
チレ・１子を反応系に混在さゼることにより必要な感度
を確保している。しかし、−リューマチ因子という不反
定で入手しつこくいものを使用するということは、ジゴ
キシンの６ｉＪ定糸を確立する上で好ましい解決手段で
あるとはいい他りい。
本元明名らは、上述の如き付渥に技ソ１１の右する間組
点にη・五み、鋭意研究をｊｆ（ねる中で、前記式ＣＩ
）で表わされるハプテンが水手１’ｉ’ｊ−性依粒子担
体と化学的に容易に結合でき、かつこの様にして得られ
た化合物４１４体奈用いて生体液中のジゴキシンを定置
する場合、前述した先行技ｔ；カに見られるような＋：
ｓｔ題Ａ′−，（、Ｊ８Ｊぢ抗体結合（或いは被株゛）
ラテックスを用いることなく簡便に、或いはり−−マチ
囚子を用いることなく尚（ｇ度にジゴキシンの検出、定
量に使用しうるおいう知見を得、これに基づき本発明を
完成するに至った。
点にη・五み、鋭意研究をｊｆ（ねる中で、前記式ＣＩ
）で表わされるハプテンが水手１’ｉ’ｊ−性依粒子担
体と化学的に容易に結合でき、かつこの様にして得られ
た化合物４１４体奈用いて生体液中のジゴキシンを定置
する場合、前述した先行技ｔ；カに見られるような＋：
ｓｔ題Ａ′−，（、Ｊ８Ｊぢ抗体結合（或いは被株゛）
ラテックスを用いることなく簡便に、或いはり−−マチ
囚子を用いることなく尚（ｇ度にジゴキシンの検出、定
量に使用しうるおいう知見を得、これに基づき本発明を
完成するに至った。
即ち本発明は、
少なくとも■前記式ＣＩ）で示されるハプテンをアミド
結合を介して結合せしめた水不浴性微粒子担体と、■抗
ジゴキシン血清とからなるジゴギシン定ｎｔ用試蘂であ
る。
結合を介して結合せしめた水不浴性微粒子担体と、■抗
ジゴキシン血清とからなるジゴギシン定ｎｔ用試蘂であ
る。
本発明において用いられる式〔Ｉ〕のハプテンは公知化
合物であり、例えばドイツ特ｆｒ第２７０７２６４号に
示される方法によって製造しうる。式ＣＩ）のハプテン
を結合せしめた水不浴性微粒子担体を用いる免疫化学的
凝集ｉ５［１止反応により、生体りうる阪りにおいて、
この杼な帳告・文１め：等は見当らない。
合物であり、例えばドイツ特ｆｒ第２７０７２６４号に
示される方法によって製造しうる。式ＣＩ）のハプテン
を結合せしめた水不浴性微粒子担体を用いる免疫化学的
凝集ｉ５［１止反応により、生体りうる阪りにおいて、
この杼な帳告・文１め：等は見当らない。
本発明におけるハプテン−＜Ｈ；７．粒子担体結合セＪ
は式〔■〕のハプテンのカルボキシル＾ｉｓとホ不ｆ＋
：４ 性Ｑ；。
は式〔■〕のハプテンのカルボキシル＾ｉｓとホ不ｆ＋
：４ 性Ｑ；。
粒子担体のアミ７基とをアミド結合により結合させるこ
とにより製造することかでき、たとえはｒｉｌ、■５式
（ｌ［］のハプテンをジメチルポルムアミドあるいはジ
オギツンのような非プロトン性の温媒中で、Ｎ−ヒドロ
キシツクシンイミドあるいは】−ヒドロキシベンゾトリ
アゾールのようなエステル化剤およびカルボジイミド類
のような縮合剤と反応させて前記式（Ｉ）の化合物の活
性エステルを生成させ、これに別途アミノ基を有する水
不溶性（ｔ＆ ４：：ｌ子担体を懸濁させて蘭整した液
を加え、反応させることにより製造される。また前記式
〔Ｉ〕のノ・ブテンを適当な有機７ｆ＋ Ｄ￥に（ａ
Ｍさせ、次いでカルボジイミド類の如さ゛Ｋｄ合剤を加
え、これにアミノ基を有する水工浴性微粒子抗体懸濁液
を加えて反応させることによっても製造される。また前
記式ＣＩ）のハプテンのカルボキシル基を用いてアミ７
基を有する誘専体を作６・すし、これとカルボキシル基
を有する水工俗性微粒子担体とを］「す様な反応に処す
ることによっても製造することができる。この様な反応
はいずれもアミド結合をル成させる方法として既知のも
のである。
とにより製造することかでき、たとえはｒｉｌ、■５式
（ｌ［］のハプテンをジメチルポルムアミドあるいはジ
オギツンのような非プロトン性の温媒中で、Ｎ−ヒドロ
キシツクシンイミドあるいは】−ヒドロキシベンゾトリ
アゾールのようなエステル化剤およびカルボジイミド類
のような縮合剤と反応させて前記式（Ｉ）の化合物の活
性エステルを生成させ、これに別途アミノ基を有する水
不溶性（ｔ＆ ４：：ｌ子担体を懸濁させて蘭整した液
を加え、反応させることにより製造される。また前記式
〔Ｉ〕のノ・ブテンを適当な有機７ｆ＋ Ｄ￥に（ａ
Ｍさせ、次いでカルボジイミド類の如さ゛Ｋｄ合剤を加
え、これにアミノ基を有する水工浴性微粒子抗体懸濁液
を加えて反応させることによっても製造される。また前
記式ＣＩ）のハプテンのカルボキシル基を用いてアミ７
基を有する誘専体を作６・すし、これとカルボキシル基
を有する水工俗性微粒子担体とを］「す様な反応に処す
ることによっても製造することができる。この様な反応
はいずれもアミド結合をル成させる方法として既知のも
のである。
本発明におけろ水不活性微粒子担体としては市販のアミ
／ラテックス（例えば、コバレント・テクノロジー・コ
ーポレーション社製「コバスフイアーズＦＸ粒子」）、
カルボキシラテックス（例えば、ダウケミカル社”Ａ
ｒ Ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ ＭｏｄｉｆｉｅｄＰａｒ
ｔｉｃｌｅｓ Ｊ ） 、Ｆｉいは当該カルボキシラテ
ックスのカルボキシル基に公知の方法によりアミノ基を
導入したもの（Ｊ、 Ｃｅ１ｌ Ｂｉｏｌ。６４８７５
〜８８頁１９７５年、参照）等がその代表例として挙げ
られるが、他にリポソーム、赤血球、マイクロカプセル
等も同様にして使用しうる。
／ラテックス（例えば、コバレント・テクノロジー・コ
ーポレーション社製「コバスフイアーズＦＸ粒子」）、
カルボキシラテックス（例えば、ダウケミカル社”Ａ
ｒ Ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ ＭｏｄｉｆｉｅｄＰａｒ
ｔｉｃｌｅｓ Ｊ ） 、Ｆｉいは当該カルボキシラテ
ックスのカルボキシル基に公知の方法によりアミノ基を
導入したもの（Ｊ、 Ｃｅ１ｌ Ｂｉｏｌ。６４８７５
〜８８頁１９７５年、参照）等がその代表例として挙げ
られるが、他にリポソーム、赤血球、マイクロカプセル
等も同様にして使用しうる。
次に式ＣＤのハブテンの代表例としてジゴキシン−１６
′−β−Ｄ−グルクロンｒ良を用い、また水工６・１性
徴粒子押体としてカルボキシラテックスを用いて、実施
例によって本発明を更に田、細に説明する。
′−β−Ｄ−グルクロンｒ良を用い、また水工６・１性
徴粒子押体としてカルボキシラテックスを用いて、実施
例によって本発明を更に田、細に説明する。
実施例１゜
（１）デスラノシド５００ Ｉｎ９にジオキサン５．９
ｍｅと精製水５．９ ｍｌを加えて俗解した。これに
新たにル１′Ａ整したアダムズ触媒５３０ ｍｉｄを加
え、４５〜５０℃の水浴中で８〜９時間醋素ガスを通し
ながら酸化反応に付した。この反応は１％Ｎａｆ（００
３を用いて反応液のｐｉｔを中性〜弱アルカリ性に保ち
ながら行なった。反応終了後触媒を除去し、反応液を減
圧濃縮して得た残留物に少量のメタノールを加えて沿解
したのち、クロロホルム：メタノール：水（６４：３１
：５）を展しＩｊｆｄ媚としだ分取用薄ｊばクロマトグ
ラフィ（ｐｒｅｐＸＩｒａｔｉｖｅ １ａｙｅｒ ｃｈ
ｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ）うに付した。次いで目的物を
含む部分を取りクロロホルム：メタノール（１：１）に
て浴出した。溶媒を減圧下留夫してジゴキシン−１６′
−β−Ｄ−グルクロン饅のナトリウム塩（白色固体）２
７０〜を得た。これをエタノール：精と】す水（１：１
）に浴解し、陽イオン交換樹脂（ダウケミカル社製「ダ
ウエックス５０ＷＸ８Ｊ）カラムにかけたのち溶媒を減
圧下留夫してジゴキシン−１６′−β−Ｄ−グルクロン
酸（白色固体） ２５ Ｑ ｍｒｒを得た。
ｍｅと精製水５．９ ｍｌを加えて俗解した。これに
新たにル１′Ａ整したアダムズ触媒５３０ ｍｉｄを加
え、４５〜５０℃の水浴中で８〜９時間醋素ガスを通し
ながら酸化反応に付した。この反応は１％Ｎａｆ（００
３を用いて反応液のｐｉｔを中性〜弱アルカリ性に保ち
ながら行なった。反応終了後触媒を除去し、反応液を減
圧濃縮して得た残留物に少量のメタノールを加えて沿解
したのち、クロロホルム：メタノール：水（６４：３１
：５）を展しＩｊｆｄ媚としだ分取用薄ｊばクロマトグ
ラフィ（ｐｒｅｐＸＩｒａｔｉｖｅ １ａｙｅｒ ｃｈ
ｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ）うに付した。次いで目的物を
含む部分を取りクロロホルム：メタノール（１：１）に
て浴出した。溶媒を減圧下留夫してジゴキシン−１６′
−β−Ｄ−グルクロン饅のナトリウム塩（白色固体）２
７０〜を得た。これをエタノール：精と】す水（１：１
）に浴解し、陽イオン交換樹脂（ダウケミカル社製「ダ
ウエックス５０ＷＸ８Ｊ）カラムにかけたのち溶媒を減
圧下留夫してジゴキシン−１６′−β−Ｄ−グルクロン
酸（白色固体） ２５ Ｑ ｍｒｒを得た。
（２）文献Ｊ、 Ｃｅ１ｌ Ｂｉｏｌ。６４巻７７〜８
８貝（１９７５年）に記載の方法に従いカルボキシラテ
ックス社濁液（ダウケミカル社’Ａ 「０ａｒｂｏｘｙ
ｌａｔｅ Ｍｏｄｉｆｉｄｃ Ｐａｒｔｉ−ｃｌｅｓＪ
Ｏ，４５５μｍ ） １＋１ｆｆ（１００＋Ｉｉｇ）
にジアミノへブタン水沼液５０μｍｏｌ ／ ５７．’
ｒ、ｌ 、１−上手ルー３−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）カルボジイミド塩ｒ伎鳴水面液５０μｍｏρ／
１ ｍｌを加え積製氷で最終容斌を１０ｒｒｔｌとして
４℃で一夜攪拌下反応させた。反応終了後、ＩＩ ８．
０のホウ酸鞍ろ・ｆ液で十分に洗７銖し、アミノ基を３
ｊ３人しブこラテックスを懸濁液として得た。
８貝（１９７５年）に記載の方法に従いカルボキシラテ
ックス社濁液（ダウケミカル社’Ａ 「０ａｒｂｏｘｙ
ｌａｔｅ Ｍｏｄｉｆｉｄｃ Ｐａｒｔｉ−ｃｌｅｓＪ
Ｏ，４５５μｍ ） １＋１ｆｆ（１００＋Ｉｉｇ）
にジアミノへブタン水沼液５０μｍｏｌ ／ ５７．’
ｒ、ｌ 、１−上手ルー３−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）カルボジイミド塩ｒ伎鳴水面液５０μｍｏρ／
１ ｍｌを加え積製氷で最終容斌を１０ｒｒｔｌとして
４℃で一夜攪拌下反応させた。反応終了後、ＩＩ ８．
０のホウ酸鞍ろ・ｆ液で十分に洗７銖し、アミノ基を３
ｊ３人しブこラテックスを懸濁液として得た。
（３）」二ｉ尼（１）で得たジゴキシン−１６′−β−
Ｄ−グルクロン削′をジメチルホルムアミド俗液に清）
；７し９０μｍｏ馴ｍｅとした。これに１−エチル−３
−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩ｒ
、ｌ塩のジメヂルホルムアミド浴ｅ ９０μｍｏｂ／１
、５ ｔｖｅを加え２０分間打Ｉ拌下反応さぜた。次い
で上記（２）で作製したアミ／基を有するラテックスの
懸汽液９０ Ｔｎｑ ／ ６．５ ｒＪを加え、氷冷下
３詩間攪拌反応さぜたのち￥渦でさらに一夜４Ｎ拌下反
応させた。反応終了後、界面活性剤を含む洗篩液で十分
に洗４γし、ジゴキシン−１６′−β−Ｄ−グルクロン
らりとラテックスのアミド結合体懸濁液を得た。
Ｄ−グルクロン削′をジメチルホルムアミド俗液に清）
；７し９０μｍｏ馴ｍｅとした。これに１−エチル−３
−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩ｒ
、ｌ塩のジメヂルホルムアミド浴ｅ ９０μｍｏｂ／１
、５ ｔｖｅを加え２０分間打Ｉ拌下反応さぜた。次い
で上記（２）で作製したアミ／基を有するラテックスの
懸汽液９０ Ｔｎｑ ／ ６．５ ｒＪを加え、氷冷下
３詩間攪拌反応さぜたのち￥渦でさらに一夜４Ｎ拌下反
応させた。反応終了後、界面活性剤を含む洗篩液で十分
に洗４γし、ジゴキシン−１６′−β−Ｄ−グルクロン
らりとラテックスのアミド結合体懸濁液を得た。
実施例２゜
ラテックス凝集１壜止反応によるジゴキシンの４１１ｊ
定 ジゴキシン濃度が正確に０．５．１．０，２．０，３．
０ 。
定 ジゴキシン濃度が正確に０．５．１．０，２．０，３．
０ 。
５、 Ｏｎ？ ／ ｍｅのジゴキシンをη帛血清をそれ
ぞれ】００μλずつ用意し、これらに５％トリクロル酢
酪４００７１λを加え激しく橙拌したのち遠沈し、上清
５０μ℃ずつを採取してサンプルとした。次いで各サン
プルに０９０５％ツイーン２０ （Ｔｗｅｅｎ２０）
、 ０．０５％アジ化ナトリウムおよび０．１５ Ｍ塩
化ナトリウムを含む０．１ Ｍグリシン−１’１ａ０１
１緩ｒｇ ン（ｆ、 （Ｉ” ９．５ ）３００μμと
０．２５％ヒト血清アルブミンで希釈した抗ジゴキシン
血清５０μ℃を加えて混和し、室温で３０分間反応させ
た後、実施例１（３）で作製したラテックス懸濁液１０
０μ込を加え、混和し、室温で１時間反応させた。反応
終了後、反応液の散乱光強＆をレーザーネフエロメータ
ーｒ；−ｐＩＴ四（日本分光工業株式会社製）を用いて
４１す定した。
ぞれ】００μλずつ用意し、これらに５％トリクロル酢
酪４００７１λを加え激しく橙拌したのち遠沈し、上清
５０μ℃ずつを採取してサンプルとした。次いで各サン
プルに０９０５％ツイーン２０ （Ｔｗｅｅｎ２０）
、 ０．０５％アジ化ナトリウムおよび０．１５ Ｍ塩
化ナトリウムを含む０．１ Ｍグリシン−１’１ａ０１
１緩ｒｇ ン（ｆ、 （Ｉ” ９．５ ）３００μμと
０．２５％ヒト血清アルブミンで希釈した抗ジゴキシン
血清５０μ℃を加えて混和し、室温で３０分間反応させ
た後、実施例１（３）で作製したラテックス懸濁液１０
０μ込を加え、混和し、室温で１時間反応させた。反応
終了後、反応液の散乱光強＆をレーザーネフエロメータ
ーｒ；−ｐＩＴ四（日本分光工業株式会社製）を用いて
４１す定した。
この結果を第１図に示した。この図から本発明の試薬が
ヒト血中のジゴキシン有効濃度をモニターするだめのジ
ゴキシン渓度定１−上用試シｈとして十分使用しうるち
のであることが明らかである。
ヒト血中のジゴキシン有効濃度をモニターするだめのジ
ゴキシン渓度定１−上用試シｈとして十分使用しうるち
のであることが明らかである。
＃ｉ） １図は、あらかじめ作製した既知６４度（各０
５゜１．０ 、２．０ 、３．０ 、５．Ｏｎ７／ ｍ
／りのジゴキシン含有ヒト血１１゛ｉに本発明のジゴキ
シン定Ｊ７１、用試薬を適用してその相対散乱光強Ｉコ
の今化をプロットしたものである。 出願人 中外製活科林式会社 第 １ ｌ
５゜１．０ 、２．０ 、３．０ 、５．Ｏｎ７／ ｍ
／りのジゴキシン含有ヒト血１１゛ｉに本発明のジゴキ
シン定Ｊ７１、用試薬を適用してその相対散乱光強Ｉコ
の今化をプロットしたものである。 出願人 中外製活科林式会社 第 １ ｌ
Claims (1)
- （１）少なくとも ０式〔Ｉ〕で示されるハブテンをアミド結合を介して結
合せしめた水不溶性微粒子担体と、■抗ジゴキシン血清
とからなることをＱ９ ？’ｌとするジゴキシン定量用
試薬。 （Ｊｌ−１ （式中、外は０乃至３の整数である。）
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3926384A JPS60183558A (ja) | 1984-03-01 | 1984-03-01 | ジゴキシン定量用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3926384A JPS60183558A (ja) | 1984-03-01 | 1984-03-01 | ジゴキシン定量用試薬 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60183558A true JPS60183558A (ja) | 1985-09-19 |
Family
ID=12548243
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3926384A Pending JPS60183558A (ja) | 1984-03-01 | 1984-03-01 | ジゴキシン定量用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60183558A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01272965A (ja) * | 1988-04-25 | 1989-10-31 | Nitto Denko Corp | 固定化ｐＨ指示薬 |
-
1984
- 1984-03-01 JP JP3926384A patent/JPS60183558A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01272965A (ja) * | 1988-04-25 | 1989-10-31 | Nitto Denko Corp | 固定化ｐＨ指示薬 |
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