JPS6017515B2 - 抗生物質ａ−７４１３およびその製法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は抗生物質Ａ−７４１３およびその製法更に詳し
くは、成分Ａ、Ｂ、ＣおよびＤから成る抗生物質混合物
Ａ−７４１３およびアクチノプラネス（Ａｃｔｉｎｏｐ
ｌａｎｅｓ）属に属する新規菌を好気的深部培養条件下
に培養し、抗生物質を分離してその因子Ａ、Ｂ、Ｃおよ
びＤを単離して抗生物質Ａ−７４１３を得る方法に関す
る。

また、本発明は抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、Ｂおよび
ＣのＣ，〜Ｃ４アルキルェステル類、Ｃ，〜Ｃ５アシル
ェステル類およびチオール（Ｃ２〜Ｃ４）カルボン酸誘
導体ならびに抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣ
、そのＣ，〜Ｃ５アシルェステル類およびそのチオール
（Ｃ２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体に関する。

本発明の抗生物質Ａ−７４１３混合物およびＡ−７４１
針ヒ合物は有用な抗微生物剤であって、また動物の生長
促進剤としてたとえば動物の飼料利用効率を増大せしめ
るために使用することができる。

また本発明の抗生物質は歯科カリエスおよびニキビを抑
制するために有用である。本発明のＡ一７４１３抗生物
質は硫黄を含有するチオストレプトン系列に属する新規
抗生物質である。

この系列に属する抗生物質は本発明のＡ−７４１３穴生
物質の外にシオマィシン、タイトマィシン、チオストレ
プトンおよびチオベプチンＢなどを包含する。硫黄を含
有する本発明の抗生物質の一群をＡ−７４１３穴生物質
として命名する。

本発明の目的は抗生物質Ａ一７４１２昆合物、Ａ−７４
１３因子Ａ、Ｂ、ＣおよびＤ、Ａ−７４１３因子Ａ、Ｂ
およびＣのＣ，〜Ｃ４アルキルヱステル類、Ｃ，〜Ｃ５
ァシルェステル類およびチオールに２〜Ｃ４）カルボン
酸誘導体ならびにＡ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣ、そ
のＣ，〜Ｃ５アシルェステル類およびそのチオール（Ｃ
２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体の生理学的に許容される塩
を提供することにある。

また本発明の目的はアクチノプラネス属に属する新規微
生物（たとえばアクチノプラネス（Ａｃｔｉｎｏｐｌａ
ｎｅｓ）ｓｐ．ＮＲＲＬ８１２２）を培養して培養液か
ら抗生物質Ａ−７４１３昆合物を分離し、これからＡ一
７４１３因子Ａ、Ｂ、ＣおよびＤを単離し、Ａ−７４１
３因子Ａ、Ｂ、ＣおよびＤのＣ，〜Ｃ４アルキルェステ
ル類、Ｃ，〜Ｃｓアシルェステル類およびチオール（Ｃ
２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体ならびにＡ一７４１３因子
Ａ、Ｂ、ＣおよびＤ、そのＣ，〜Ｃ５アシルェステル類
およびそのチオールに２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体の生
理学的に許容される塩を得ることにより抗生物質Ａ一７
４１２昆合物の製造法を提供するにある。

本発明は因子Ａ、Ｂ、ＣおよびＤから成る抗生物質Ａ−
７４１２良合物：Ａ−７４１３因子Ａ、Ａ−７４１３因
子Ｂ、Ａ−７４１３因子ＣおよびＡ−７４１３因子Ｄ；
因子Ａ、ＢおよびＣのＣ，〜Ｃ４アルキルェステル類、
Ｃ，〜Ｃ５アシルェステル類およびチオール（Ｃ２〜Ｃ
４）カルポン酸誘導体；因子Ａ、ＢおよびＣ、そのＣ，
〜Ｃ５アシルェステル類およびそのＣ２〜Ｃ４カルポン
酸誘導体の生理学的に許容される塩を提供するものであ
る。

また本発明は下記ｔａ｝、‘ｂ｝、‘ｃ｝、【ｄ｝、｛
ｅ｝を要件とする因子Ａ、Ｂ、ＣおよびＤから成る抗生
物質Ａ一７４１３混合物：Ａ−７４１３因子Ａ、Ａ−７
４１３因子Ｂ、Ａ−７４１３因子ＣまたはＡ−７４１３
因子Ｄ；因子Ａ、ＢまたはＣのＣ，〜Ｃ４アルカリェス
テル類、Ｃ，〜Ｃ５アシルェステル類またはチオール（
Ｃ２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体：あるいは因子Ａ、Ｂま
たはＣ、それらのＣ，〜Ｃ５アシルェステル類もしくは
それらのチオール（Ｃ２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体の生
理学的に許容される塩類の製法を提供するものである：
【ａ｝ 同化し得る炭水化物源、窒素源および無機塩を
含む培地中、好気的深部発酵条件下に抗生物質が実質的
量で生産されるまでアクチノプラネス属に属する菌（た
とえばＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓｓｐ．ＮＲＲＬ８１２
２またはそのＡ−７４１３を生産する突然変異体）を培
養し、【ｂ’ この培養液から抗生物質Ａ−７４１群尾
合物を分離し、【ｃ｝ 要すれば該抗生物質Ａ−７４１
２昆合物から因子Ｏ Ａ、Ｂ、ＣまたはＤを単離し、ｔ
ｄー 要すれば該Ａ−７４１３因子Ａ、ＢまたはＣのＣ
，〜Ｃ４アルキルェステル類、Ｃ，〜Ｃ５アシルェステ
ル類もしくはチオール（Ｃ２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体
を製し、｛ｅ｝ 要すれば談Ａ−７４１３因子Ａ、Ｂま
たはＣ、それらのＣ，〜Ｃ５アシルェステル類もしくは
チオール（Ｃ２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体の生理学的に
許容される塩類を製する。

また本発明は担体および活性成分として、抗生物質Ａ−
７４１２尾合物、Ａ−７４１３因子Ａ、Ａ一７４１３因
子Ｂ、Ａ−７４１３因子ＣまたはＡ−７４１３因子Ｄ：
Ａ−７４１３因子Ａ、ＢまたはＣのＣ，〜Ｃ４アルキル
ェステル類、Ｃ，〜Ｃ５アシルェステル類もしくはチオ
ール（Ｃ２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体；あるいはＡ−７
４１３因子Ａ、ＢまたはＣの生理学的に許容される塩あ
るいはＡ−７４１３因子Ａ、ＢまたはＣのＣ，〜Ｃ５ア
シルェステル類もしくはチオール（Ｃ２〜Ｃ４）カルボ
ン酸誘導体の生理学的に許容される塩を含有して成る発
達した第一胃機能を有する反饗動物における飼料利用効
率を増大せしめるための組成物を提供するものである。

また本発明はプロピオン酸塩を増大せしめる量の因子Ａ
、Ｂ、ＣおよびＤから成る抗生物質Ａ−７４１２昆合物
：Ａ−７４１３因子Ａ、Ａ−７４１３因子Ｂ、Ａ−７４
１３因子ＣまたはＡ−７４１３因子Ｄ：Ａ−７４１３因
子Ａ、ＢまたはＣのＣ，〜Ｃ４アルキルェステル類、Ｃ
，〜Ｃ５アシルェステル類もしくはチオール（Ｃ２〜Ｃ
４）カルボン酸議導体；あるいはＡ−７４１３因子Ａ、
ＢまたはＣの生理学的に許容される塩あるいはＡ−７４
１３因子Ａ、ＢまたはＣのＣ，〜Ｃ５アシルエステルも
しくはチオール（Ｃ２〜Ｃ４）力ルボン酸誘導体の生理
学的に許容される塩の１種またはそれ以上を、発達した
第一胃機能を有する反郷動物に経口投与することから成
る反饗動物における飼料利用効率を増大せしめる方法を
提供するものである。本明細書に添付の図面はＡ−７４
１３穴生物質因子Ａ、ＢおよびＣそれぞれの臭化カリウ
ム錠中における赤外吸収スペクトルであって、第１図は
Ａ−７４１３因子Ａ、第２図はＡ−７４１３因子Ｂ、第
３図はＡ−７４１３因子Ｃのそれである。

図中、縦軸は透過率（％）、横軸（上）および（下）は
それぞれ波長（ミクロン）および（肌‐１）を表わす。

本発明の抗生物質Ａ−７４１３について以下更に詳細に
説明する。本発明の因子Ａ、Ｂ、ＣおよびＤから成るＡ
−７４１２昆合物はアクチノプラネス属に属する菌（た
とえば新規Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ ｓｐ．ＮＲＲＬ
８１２２菌株）を、調節された条件下に培養することに
より得ることができる。

抗生物質を生産するための培養を行なったとき、多くの
場合がそうであるように、アクチノプラネス（Ａｃｔｉ
ｎｏｐｌａｎｅｓ）ｓｐ．ＮＲＲＬ８１２２のＡ−７４
１３産生菌株を発酵させることにより種々の抗生物質を
産生する。

抗生物質Ａ−７４１３因子Ａがこの培養により得られる
主要成分であって、因子Ｂ、ＣおよびＤは主要成分に次
ぐ３因子である。これら以外の成分も極く少量存在し、
これらは比較的不安定である。抗生物質Ａ−７４１３因
子Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは発酵処理の間に共に産生され、
これらは抗生物質Ａ−７４１２尾合物として得られる。

この抗生物質混合物中に産生される個々の因子の比は発
酵条件に依存して変化し、これら個々の抗生物質因子は
下記のような個々の化合物として単離することができる
。Ａ−７４１３因子Ａ Ａ−７４１３因子Ａは白色ないし淡黄色結晶性物質であ
って、融点２０５〜２１２０（分解）である。

Ａ−７４１３因子Ａはエタノール、クロロホルム：エタ
ノールおよびジメチルホルムアミド；アセトンから結晶
化することができる。Ａ−７４１３因子Ａはメタノール
、クロロホルム、ジメチルホルムアミド、ジクロロェタ
ンおよびジメチルスルホキシドーこそれぞれ可溶、エタ
ノールおよびエタノール水溶液に僅かに可溶であるが、
アセトン、ベンゼン、四塩化炭素、ジクロロメタン、メ
チルィソブチルケトン、酢酸エチル、ジェチルェーテル
および水に不溶である。

Ａ−７４１３因子Ａの元素分析による百分率組成（平均
値）はおよそ次のとおりである；Ｃ、５１．９２％；日
、５．２５％；Ｎ、９．８５％；○、２２．６３％；Ｓ
、９．６６％。

Ａ−７４１３因子に対して提案し得るおよその実験式は
Ｃ７２日８７Ｎ，２０２３Ｓ５である。滴定法により決
定されるＡ−７４１３因子Ａの見掛けの分子量はおよそ
１３０８である。Ａ−７４１３因子Ａの臭化カリウム錠
中おける赤外吸収スペクトルを添付の第１図に示す。

その観察された極大吸収は次のとおりである：２．９３
（肩）、２．９８（中）、３．２４（弱）、３．３８（
肩）、３．４４（中）、３．５３（弱）、５．７８（弱
）、６．０３（強）、６．５６（強）、６．７９（中）
、７．０８（中）、７．２７（弱）、７．４９（弱）、
７．６５（弱）、８．０８（中）、８．４１（弱）、８
．６２（弱）、８．８１（中）、９．０３（弱）、９．
３５（中）、９．６０（中）、９．９２（弱）、１０．
２０（弱）、１２．０５（弱）、１２．６６（弱）、１
３．５１（弱）ミクロン。Ａ−７４１３因子Ａの紫外吸
収スペクトルにおける極大吸収を次に示す：ｔａ）中性
９５％エタノール水溶液中、２１５ｎの（Ｅ珍＝４８５
）、２６ｍの（肩、Ｅ滋＝２４０）、３０ｍの（肩、Ｅ
機＝１７０）、３５籾の（肩、Ｅ珍＝１１２．５）、‘
ｂ｝ 酸性ェタノール中、２１７肌（Ｅ珍＝４４０）、
２６５肌（Ｅ珍＝２２７‐５）、２９乳机（Ｅ滋＝２１
０）・３胸机（Ｅ滋＝９５）、【Ｃ｝塩基性メタノール
中、２胸肌（肩、Ｅ滋＝２５５）・４０紬凧（Ｂ珍＝８
ｏ）。

８０％ジメチルホルムアミド水溶液中、Ａ−７４１３因
子Ａの電気滴定法によりｐＫａ値７．９として滴定し得
る基の存在を認めた。

Ａ−７４１３因子Ａの酸加水分解後のアミノ酸を分析し
た結果、アンモニア（１．０３ムモル／柵）、グリシン
（０．３３仏モル／の９）、スレオニン（０．４０ムモ
ル／ｍ９）、アスパラギン酸（０．１仏モル／の夕）、
未確定アミノ酸（約０．４ムモル／の９）の存在を認め
た。

Ａ−７４１３因子の比旋光度［Ｑ ］客：５４．５ｏ（
ｃ２．０、ＣＨＣ１３）。

クロロホルム：エタノールから結晶化したＡ−７４１３
因子Ａの特性的Ｘ線粉末回折パターン（Ｃｕ＋＋放射、
１．５４０５入、ニッケルフィルター、ｄ＝格子間隔（
オングストーム））を次に示す。

Ａ‐７４１３因子Ｂは白色ないし淡黄色無定形物質であ
る。融点約３００ｏｏ。Ａ−７４１３因子Ｂはメタノー
ル、クロロホルム・ジメチルホルムアミド、ジクロロエ
タン、ジメチルスルホキシド‘こ可溶、エタノールおよ
びエタノール水溶液に僅かに可溶であるが、アセトン、
ベンゼン、四塩化炭素、ジクロロメタン、メチルィソプ
チルケトン、酢酸エチル、ジェチルェーテルおよび水に
それぞれ不溶である。

Ａ−７４１３因子Ｂの元素分析による百分率組成はおよ
そ次のとおりである：Ｃ、６６．３４％；日、８．７３
％：Ｎ、２．９８％：○、１９．３９％：Ｓ、２．８３
％。

Ａ−７４１３因子Ｂの臭化カリウム錠中における赤外吸
収スペクトルを添付の第２図に示す。その観察された極
大吸収は次のとおりである：２．９７（強）、３．３８
（強）、３．４２（強）、３．５０（強）、５．７８（
肩）、５．９９（中）、６．５０（中）、６．８０（中
）、６．９０（肩）、７．００（肩）、７．２２（中）
、７．２７（肩）、７．４２（弱）、７．５８（弱）、
７．７８（肩）、７．９７（中）、８．３３（肩）、８
．５３（中）、９．００（肩）、９．２６（強）、９．
７１（強）、１１．１１（弱）、１１．７９（弱）、１
２．３５（弱）、１３・２５（弱）ミクロン。Ａ−７４
１３因子Ｂの紫外吸収スペクトルにおける極大吸収を次
に示す。

｛ａ｝ 中性９５％エタノール水溶液中、２６紬肌（Ｅ
滋＝ｌｏ４．３）、３５７肌（肩、Ｅ擬＝３０）、｛ｂ
｝ 酸性ヱタノール中、２６離れ（Ｅ滋コ１０８・５）
・３５７肌（肩、Ｅ珍＝３５）、（Ｃ｝ 塩基性ェタ／
ール中、２胸の（肩、Ｅ珍＝１７８．６）。

Ａ−７４１３因子Ｂの比旋光度［Ｑ］膚：−２６．２ｏ
（ｃ７．ふＤＭＳＯ）。

Ａ−７４１３因子Ｂの酸加水分解後のアミノ酸を分析し
た結果、アンモニア（０．４６ムモルノの９）、グリシ
ン（０．１一モル／の９）、スレオニン（０．１ムモル
／雌）、アスパラギン酸（０．０２仏モル／ｍ９）、未
確定アミノ酸（約０．１１山モル／の９）の存在を認め
た。

Ａ−７４１３因子Ｃ Ａ−７４１３因子Ｃは白色ないし淡黄色無定形物質であ
る。

融点約２５０℃。Ａ−７４１３因子Ｃはメタノール、ク
ロロホルム、ジメチルホルム・アミド、ジクロロエタン
、ジメチルスルホキシドに可溶、エタノールおよびェタ
ノール水溶液に僅かに可溶であるが、アセトン、ベンゼ
ン、四塩化炭素、ジク′ロロメタン、メチルィソブチル
ケトン、酢酸エチル、ジェチルェーテルおよび水にそれ
ぞれ不溶である。

Ａ−７４１３因子Ｃの元素分析による百分率組成はおよ
そ次のとおりである：Ｃ、６９．３８％；日、９．９２
％；Ｎ、２．３４％：○、１６．５８％；Ｓ、１．７３
％。Ａ−７４１３因子Ｃの臭化カリウム錠中における赤
外吸収スペクトルを添付の第３図に示す。その観察され
た極大吸収は次のとおりである：３．００（中）、３．
３８（肩）、３．４２（強）、３．５１（強）、５．７
３（中）、６．０２（中）、６．１４（肩）、６．５２
（弱）、６．５６（弱）、６．７７（中）、６．８０（
肩）、６．９７（弱）、７．２０（暮富）、８‐２５（
享暮）、８‐３３（裏亭）、８‐４０（富責）、８‐８
６（弱）、９．３９（弱）、１０．０５（弱）、１０．
５３（弱）、１０‐７０（弱）、１１‐７７（弱）、１
３．６６（弱）ミクロン。Ａ−７４１３因子Ｃの酸加水
分解後のアミノ酸を分析した結果、アンモニア（０．２
４仏モル／収）、グリシン（０．０５仏モルノの９）、
スレオニン（０．０４〃モル／の９）、アスパラギン酸
（０．０１ムモル／の９）およびフェニルアラニン（０
．０５ムモル／の９）の存在を認めた。Ａ−７４１３因
子Ｃの紫外吸収スペクトルにおける極大吸収を次に示す
：【ａー 中性９５％エタノール水溶液中、２０別凧（
Ｅ滋＝３５６）、２３５肌（肩、Ｅ滋＝１８０）、２６
仇の（肩、Ｅ；孫：１２７）、２９仇の（肩、Ｅ毅＝１
０４）、｛ｂ’酸性ェタノール中、２胸の（Ｅ珍＝３５
６）、２３５肌（肩、Ｅ珍＝１８０）、２６ｍｍ（肩、
Ｅ滋＝１２７）、２９仇の（肩、Ｅ珍＝１０３）、３５
取舵（肩、Ｅ手多：４ｏ）‘Ｃ）塩基性ェタノール中、
２６仇の（肩、Ｅ珍＝２６８）、３２５肌（肩、Ｅ機＝
１８９）。

検出微生物として枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓゆｔｉｌ
ｉｓＡＴＣＣ６６３３）を使用する種々のペーパークロ
マトグラフイ系におけるＡ−７４１３因子Ａ、Ｂ、Ｃお
よびＤのＲｆ値を第１表に示す。第１表 更に、検出微生物として枯草菌（Ｂ．ｓ肋ｓｔｉｌｉｓ
ＡＴＣＣ６６３３）を使用するシリカゲル上の薄層クロ
マトグラフイ系２系列（あらかじめ被覆したプレート（
ダルムシユタット在Ｅ．Ｍｅｒｃｋ社製Ｆ−２５４層の
厚さ０．２軌の）を使用）におけるＡ−７４１３因子Ａ
、Ｂ、ＣおよびＤのＲｒを第ロ表に示す。

第□表 Ａ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣはそれぞれその塩およ
びェステルを形成する酸としての機能を有する。

Ａ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣ、それらのＣ，〜Ｃ５
アシルエステルおよびチオール（Ｃ２〜Ｃ４）カルボン
酸誘導体は塩を形成することができる。

Ａ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣの生理学的に許容され
るアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩またはアミン塩
；Ａ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣのＣ，〜Ｃ５アシル
ェステル誘導体の生理学的に許容されるアルカリ金属塩
、アルカリ士類金属塩またはアミン塩；Ａ−７４１３因
子Ａ、ＢおよびＣのチオール（Ｃ２〜Ｃ４）カルボン酸
誘導体の生理学的に許容されるアルカリ金属塩、アルカ
リ士類金属塩またはァミン塩はそれぞれ本発明の一部を
構成する。生理学的に許容される塩は同様に薬理学的に
許容される塩であって、かかる塩はこれが全体として非
塩型化合物に比してその毒性を増大せしめないものでな
ければならない。適当かつ代表的アルカリ金属塩および
アルカリ士類金属塩の例として、ナトリウム塩、カリウ
ム塩、リチウム塩、セシウム塩、ルビジウム塩、バリウ
ム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等が挙げられる。
適当なアミン塩の例としてアンモニウム塩、プライマリ
、セカンダリおよびターシアリ（Ｃ，〜Ｃ４）アルキル
アンモニウム塩、ヒドロキシ（Ｃ２〜Ｃ４）アルキルア
ンモニゥム塩などが挙げられる。アミン塩について更に
説明を加えれば、これは水酸化アンモニウム、ｓｅｃー
ブチルアミン、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、
ジイソブロピルアミン、エタノールァミン、トリヱチル
アミンなどとの反応により得られるものを包含する。ァ
ルカＩＪ金属およびアルカリ士類金属カチオン塩はカチ
オン塩を形成せしめるため通常用いられる方法により得
ることができる。

たとえばＡ−７４１３因子Ａの遊離酸型化合物を適当な
溶媒（たとえばメ‐タノールまたはエタノール）に熔解
し、所望の無機塩基を化学量論的量で含有する溶液を上
記溶液に加える。ここに生成した塩を常法（たとえば炉
過または溶媒蒸発）に従って単離することにより所望の
塩を得ることができる。有機ァミン塩は同様の方法によ
り得ることができる。

たとえばＡ−７４１３因子Ａの適当溶媒（たとえばメタ
ノール）溶液にアミンを加え、溶媒および過剰のアミン
を蒸発させて除くことによりアミン塩を得ることができ
る。Ａ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣのＣ，〜Ｃ４アル
キルヱステル誘導体も本発明の一部を構成する。

これらのェステル誘導体は常法により得ることができる
。Ａ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣはそのアシルエステ
ル誘導体を形成し得る少なくとも１個のヒドロキシル基
を有する。

Ａ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣのＣ，〜Ｃ５アシルヱ
ステル誘導体は標準的方法により得ることができる。た
とえば適当な溶媒中、Ａ−７４１３因子Ａ遊離酸と適当
な酸無水物を適当な時間、反応させることにより所望の
Ａ−７４１３因子Ａのアシルェステル誘導体を得ること
ができる。またＡ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣはチオ
ールカルボン酸でその誘導体を形成せしめることができ
る。これらの誘導体は公知の操作（Ｍ．ェバタ（Ｅ舷ｔ
ａ）ら：ジヤーナル・オブ・アンチバイオテックス（Ｊ
．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）第２２巻（１０）４５１〜
４５６頁（１９６＄王）参照）により製せられる。これ
ら誘導体の特・曲ま未だ明確化されていないが、少なく
とも１個のヒドロキシル基を保持しており、その塩を形
成することができる。Ａ−７４１３因子Ａ、ＢおよびＣ
のチオール（Ｃ２〜Ｃ４）カルボン酸誘導体は本発明の
一部を構成し、この譲導体はたとえぱメルカプト酢酸（
チオグリコール酸）、２一メルカプトプロピオン酸（チ
オ乳酸）、３−メルカプトプロピオン酸、メルカプトコ
ハク酸（チオリンゴ酸）またはＬ−システィンから製せ
られる誘導体を包含する。従来文献に記載されていない
新規発見にかかる微生物であって本発明のＡ−７４１３
穴生物質複合体を生産する微生物はアクチノプラネス属
（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ）に属する種（ｓｐｅｃｉ
ｅｓ）の微生物として命名される特性を有する。

アクチノプラネス属はアクチノプラネス料（Ａｃｔｉｎ
ｏｐｌａ岬ｃｅａｅ）の中の１属である。

アクチノプラネス料は放線菌目（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅ
ｔａｌｅｓ）の微生物の中の１科である。（最初にコー
チ（Ｃｏｕｃｈ）により記載された文献（Ｊ．Ｅ１ｉｓ
ｈａＭｅｔｃｈｉＩＳｃｉ．Ｓｏｃ．第６９蓋３１５〜
３１８頁（１９４ｇ王）および第６鏡奪８７〜９２（１
９５０手）；Ｔｒａｎｓ．ＮｅｗＹｏｒｋＡｃａｄ．Ｓ
ｃｉ．第１６巻３１５〜３１８頁（１９５４年）：Ｊ．
Ｅ１ｉｓｈａＭＭｈｅｌＩＳｃｊＳｏｃ．第７１巻１４
８〜１５５頁および２６９頁（１９５５年）；バーギー
ズ（Ｂｅｒｇｅｙジマニユアル・オブ・デタミネーテブ
・バクテリオロジー第８版７０６〜７１１頁（１９７４
年）；Ｊ．Ｅ１ｉｓｈａＭｉｔｃｈｅｌＩＳｃｉ．Ｓｏ
ｃ．第７甥蓋５３〜７０頁（１９６３年））参照。

）本発明のＡ−７４１２生産菌の菌株は米国イリノイ州
６１６０４べオリアに住所を有する米国農務省アグリカ
ルチユラル・リサーチ・サービス、ザ・ノーザン・リジ
ヨナル・リサーチ’ラボラトリー（比ｅ Ｎｏｒ比
ｅｍ Ｒｅｇｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ以
ｂｏｒａｔｏひ）におけるパーマネント・カルチユア・
コレクション中、受理番号ＮＲＲＬ８１２２として記録
され、寄託されている。

またＡ−７４１３生産菌（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ
ｓｐ．ＮＲＲＬ８１２２）は千葉市稲毛東５丁目８番１
号に住所を有する工業技術院微生物工業技術研究所に受
託番号第３８９３号として寄託されている。

Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓｓｐ．ＮＲＲＬ８１２２の特
性を以下に記載する。ストレフ。トミセス属の微生物（
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐｅｃｉｅｓ）の特性を記
載するためのインターナショナル・ストレプトミセス・
プロジェクト（シヤーリング（Ｅ．Ｂ．Ｓｈｉｍｎｇ）
およびゴツトリーブ（Ｄ．■比ｌｅｉｂ）：ｌｎｔｅｍ
．Ｂ側．Ｓ＄ｔｅｍａｔｉｃＢａｃにｒｉｏｌ．第１６
巻３１３〜３４０頁（１９６６年）参照）において推奨
される試験法に若干の補足的試験を加えて記載する。

色名は１．Ｓ．Ｃ．Ｃ．−−Ｎ．Ｂ．Ｓ．法（ケーＪー
（Ｋ．Ｌ．Ｋｅｌｌｙ）およびジャド（Ｄ．Ｂ．Ｊｕｄ
ｄ）：ザ・ＩＳＣＣ一ＮＢＳメソッド・オブ・デジグネ
ーテング・カラーズ・アンド・ア・デクシヨナリー・オ
ブ・カラー・ネームス（ワシントンＤ．Ｃ．在米国商務
省サーキュラＮｏ．５５３）参照）に従って命名した。
括弧内にザ・メルツ・アンド・ポール・カラー・ブロツ
クス（メルツ（Ａ・Ｍａｅｒｚ）およびポール（Ｍ．Ｒ
・Ｐａｕｌ）：デクシヨナリー・オブ・カラー（Ｄｉｃ
ｔｉｏｎａひｏｆＣｏｌｏｒ；米国ニューヨーク州ニュ
ーヨーク市在マックグレイーヒル・ブック・カンパニー
（１９５０年）刊））番号を記載した。形態的特性： モミジバフゥ（北米産Ｌｉ劉ｊ舷ｍ氏ｒ属に属する植物
）の花粉上に広く栄養菌糸体および胞子嚢を形成する。

花粉を貫通する菌糸の存在は明らかでない。松属（Ｐｉ
ｎ瓜）の花粉上で胞子義を形成しない。胞子嚢の直径は
通常９〜１４仏であって、球状ないし不規則な亜球状を
示し、主として不規則な形状を呈する。

胞子は１．４〜１．７ｒであって鞭毛を有し、極く僅か
のものは遊動するようになる。培養物（３０００、２１
日後）の特性：酵母一麦芽（ｌＯＰＮｏ．２）上、発育
豊富、淡褐色（１２１８）、可溶性色素なし、胞子嚢を
作らない。

ッアベク（Ｃｚａｐｅｋ）の寒天上、発育豊富、温和な
オレンジ色（１１Ｊ８）、可溶性色素なし、胞子競を作
らない。

オートミール寒天（ＩＣＰＮｏ．３）上、発育順調、淡
黄緑色（１船１）、可溶性色素なし、胞子礎を作る。

無機塩−殿粉（ＩＣＰＮｏ．４）上、発育中程度、褐色
がかったオレンジ色（１３ＡＩＯ）、僅かに褐色がかっ
た可溶性色素あり、胞子義を作る。

グリセロールーアスパラギン（ＩＣＰＮｏ．５）上、発
育豊富、中位の赤がかったオレンジ色（１Ｍｌｏ）、可
溶性色素なし、胞子愛を作る。

べネット（氏ｎｎｅｔｔ）の培地上、発育順調、淡黄色
（１１ＣＩ）、可溶性色素、胞子愛を作らない。トマト
ペーストーオートミール上、発育希薄、可溶性色素およ
び胞子繁を作らない。チロシン寒天上、発育順調、黄が
かつた灰色（１２Ａ２）、可溶性色素も胞子義も生産し
ない。

酵母エキス寒天上、発育豊富、褐色がかったオレンジ色
（１班９）、可溶性色素も胞子嚢も生産しない。グルコ
ースーアスパラギン上、発育中程度、オレンジがかった
淡黄色（１１Ａ４）、可溶性色素も胞子愛も生産しない
。

リンゴ酸カルシウム上、発育中程度、明るい黄がかつた
ピンク色（１０Ａ２）、可溶性色素も胞子愛も生産しな
い。

栄養寒天上、発育希薄、可溶性色素も気生菌糸も作らな
い。

エマーソン（Ｅｍｅｒｓｏｎ）の寒天上、発育順調、明
るい褐色（１班８）、僅かに赤がかった褐色の色素あり
、胞子桑を作らない。

脱脂乳上、発育しない。

硝酸塩還元：陽・性。ゼラチン液化：２１日後反応なし
、ベプトン−鉄寒天（ＩＣＰＮｏ．６）上のメラニン産
生：陽・性。グリセロールーアスパラギン寒天上の所要
温度：２６〜３７ｏ０で発育良好、赤がかったオレンジ
色、２６００で発育が最も密、４３００で発育しない。
炭素利用性 利用性記号、十：利用する、（十）：利用する可能性あ
り、（一）：疑わしい、一：利用しない。

ラムノース：（十）、セロビオース：（一）、ｉーイノ
シトール：（一）、セルロース：一、メレチトース：一
、フルクトース：（十）、デキストロース：（十）、Ｄ
ーキシロース：（十）、Ｄーマンニトール：（十）、ラ
フイノース：一、シユクロース：＋、マルトース：（一
）、Ｌ−アラビノース：（一）、ラクトース：（十）、
マイナーカーボン：−。

他の微生物と同様、本発明のＡ−７４１３を産生するＡ
ｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓｓｐ．ＮＲＲＬ８１２２菌はそ
の特性を異にする変異が現われる。

たとえば種々の突然変異譲導原（例：紫外線、Ｘ線、高
周波、放射線、化学物質など）で処理することによりＮ
ＲＲＬ８１２２菌株の人工的変異および突然変異を得る
ことができる。本発明のＡ−７４１３抗生物質を産生す
るＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓｓｐ．ＮＲＲＬ８１２２に
属するすべての自然的および人工的変異はこれを本発明
において使用することができる。Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎ
ｅｓｓｐ．ＮＲＲＬ８１２２を発育させるために用いる
培地は種々の培地のいずれであっても用いることができ
る。

しかし本発明の抗生物質を経済的に生産し、最適収量を
与え、かつその生成物を容易に単離するためには特定の
培地を使用するのが好ましい。たとえば大規模発酵生産
における好ましい炭水化物源はデキストリンであるが、
グルコース、フルクトース、マルトース、シユクロース
なども用いることができる。発育のための必須成分では
ないが、トウモロコシ油のような油脂を用いると抗生物
質の収量を改良することができる。他の有用な炭素源の
例として落花生油、大豆油、魚油などが挙げられる。好
ましい窒素源は大豆粉であるが、荒ひき大豆、ベプトン
、オートミール、落下生粗粉、大豆組粉、棉実組粉、ア
ミノ酸なども有用である。培地中に配合することができ
る無機塩としては、就中、ナトリウム、カリウム、鉄、
亜鉛、コバルト、マグネシウム、カルシウムイオンおよ
びアンモニウム、塩酸、炭酸、硫酸、硝酸イオンなどの
イオンを供給することができる通常の可溶性塩であって
よい。微生物の発育および増殖のために必要な必須徴量
元素を培地中に含有せしめなければならない。

しかし通常、かかる徴量元素は微生物の発育に必要な充
分量のものが培地中の他の成分に含まれる不純物として
存在する。発泡させることが課題となるのであれば、大
規模発酸培地にポリプロピレングリコールのごとき発泡
剤少量（たとえば０．２の‘／夕）の添加が必要なこと
もある。

Ａ−７４１３穴生物質を実質的量で生産するため、タン
ク中で好気的液中培養条件下に発酵させるのが好ましい
。

Ａ−７４１３穴生物質少量であれば振盤フラスコ培養に
より得ることができる。大型タンク中に接種して通常産
生される抗生物質の生産と微生物の胞子形成の間にタイ
ムラグがあるので、発育接種材料を使用するのが好まし
い。発育接種材料は培地少量に微生物の胞子または菌糸
体断片を接種することにより製せられ、これにより新鮮
にしてかつ発育盛んな微生物培養物を得ることができる
。この発育接種材料を大型タンクに移して発酵を行なう
。発育接種材料を得るための培地は大量発酵に用いるも
のと同一であってよいが、他の培地を用いてもよい。Ａ
−７４１３を産生する微生物は約２０〜３７０の温度で
発育させることができる。Ａ−７４１３産生のための最
適温度は約２５〜３０午０である。通常の好気的液中培
養法にあげる操作と同様、本発明の発酵法において靖地
に滅菌空気を吹込む。

微生物を効果的に発育させるため、タンク内生産におい
て吹込む空気量は、２０％以上の溶存酸素を飽和させて
保持するに足る量とするのが好ましい。未薮種培地の初
期ｐＨ‘ま使用する培地によって異なる。

一般に培地のｐＨは６．５〜７．５とすべきである。発
酵終期における培養物の班は通常、僅かに低く、６．０
〜７．０となる。発酵処理の間、抗生物質が生成したら
抗生物質活性を試験するため、発酵液または菌糸状固体
の抽出物試料を試験する。

この目的のために、Ａ−７４１３穴生物質に感受性を有
することで知られた微生物が有用である。特に有用な試
験用微生物は枯草菌（母ｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｊｌｊｓ
）ＡＴＣＣ６６３３である。この生物試験法は寒天平板
上ペーパーデスクアセィにより行なうのが好都合である
。一般に抗生物質活性は発酵から２日目で検出される。

通常、抗生物質の最高生産量は約３〜１０日目に与えら
れる。好気的液中発酵条件下に発酵させて生産した上記
のようなＡ−７４１３穴生物質を通常の発酵技術上で知
られた方法により発酸培地から回収することができる。

Ａ−７４１３主産菌を発酵させる間に産生される抗生物
質は主として菌糸体のかたまりの中に見出される。それ
故、ほぐした菌糸体を抽出する方法によりＡ−７４１３
穴生物質を回収するのが好ましい。菌糸体のかたまりを
抽出するにはメタノールを用いるが最もよいが、他の低
級アルコールおよびクロロホルムであってもよい。常法
によりこの抽出溶媒からＡ一７４１３抗生物質を回収す
ることによりＡ−７４１３穴生物質の混合物（すなわち
本発明のＡ−７４１２昆合物）を得ることができる。更
にこのＡ−７４１３尾合物を精製し、これを一般に認め
られた種々の方法、たとえば抽出、吸着などにより処理
して個々のＡ−７４１３因子を分離することができる。
吸着剤として、たとえばアルミナ、シリカゲル、イオン
交換樹脂、セルロース、セフアデツクス（Ｓｅｐｈａｄ
ｅｘ）などを使用するのが好都合である。たとえば因子
Ａ、Ｂ、ＣおよびＤを分離するため、シリカゲル上、ク
ロロホルム：メタノール（９：１）溶媒系を用いるプレ
バラティブ薄層クロマトグラフィにより、因子Ａ、Ｂ、
ＣおよびＤを分離し、それぞれの因子をメタノールで溶
出することにより個々の因子を得ることができる。各因
子を大規模に分離するためには力ラムクロマトグラフィ
が好ましい。カラムを用いる分離方法における好ましい
吸着剤はシリカゲル、好ましい溶媒系はクロロホルム：
メタノール（１９：１）である。主要成分である因子Ａ
はこの方法により容易に分離することができる。しかし
次いで次位の因子Ｂ、ＣおよびＤを分離、精製するため
には濃厚分画のカラムによる分離を必要とする。このた
め上記同様、吸着剤としてシリカゲル、溶媒系としてク
ロロホルム：メタノール（１９：１）を用いるのが好ま
しい。有用性に関する説明を簡単化するため、Ａ−７４
１３因子Ａ、ＢおよびＣ；Ａ−７４１３因子Ａ、Ｂおよ
びＣのアルキルエステル、アシルエステルおよびチオー
ルカルボン酸誘導体；因子Ａ、ＢおよびＣの生理学的に
許容される塩および因子Ａ、ＢおよびＣのアルキルエス
テル、アシルエステルおよびチオールカルボン酸議導体
の生理学的に許容される塩から選ばれる化合物を以下、
Ａ−７４１３化合物と呼称する。Ａ−７４１針ヒ合物は
抗微生物剤であって、特にグラム陽性菌に対し活性を有
する。

標準デスクープレート・スクリーニング・プロセジヤー
により、６．３５脚デスク上１の９／羽におけるＡ−７
４１３因子Ａ、ＢおよびＣの抗微生物活性試験を行なっ
た。試験結果を観察された抑制帯の直径（肋）として与
え、これを第ｍ表に示す。第 ｍ 表 Ａ−
７４１３の抗就微生物活性館巳 【ィ’Ｓｔａｐｈｙｌ
ｏｃｏｃｃｕｓ ａｍｅ雌、【ローＢａｃｍｕｓＳｕｂ
ｔｉ１ｉＳ、し一ＳａｒＣｉｎａ１ｕｔｅａ。更にＡ−
７４１３因子Ａはこれをマウスに対し皮下注射で投与す
るとき、生体内抗微生物活性を現わす。下記菌に感染せ
しめたマウスにＡ−７４１３因子Ａを２回投与して試験
を行なった。その抑制効果をＥＤ５。値（試験動物５０
％を保護するために有効な投与量：ウオレン・ウィック
（ＷａｒｒｅｎＷｉｃｋ）ら：Ｊ．舷ｃｔｅｒｉｏｌ．
第８１巻２３３〜２３５（１９６１年）参照）として測
定する。感染に対するＡ−７４１３因子ＡのＥＤ５。値
を第Ｗ表に示す。第Ｎ表注 ＊印：感染１時間後および
５時間後投与によ る 治 療 効 果 。

｛ィー Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｙ。ｇｅｎｅｓ
、【口｝ＤｉｐｌｏＣｏＣＣ瓜 ｐｎｅ山ｍｏｍａｅ。
本発明のＡ−７４１針ヒ合物の特にすぐれた点は他の抗
生物質に対して抵抗性を有する微生物を抑制する効果を
有することにある。Ａ−７４１３因子Ａの黄色ブドウ球
菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）菌株
に対する効力を試験するため、標準寒天−希釈試験（Ｉ
ＣＳ法による）を行なった結果を第Ｖ表に示す。試験結
果は該菌を抑制し得る最小抑制濃度（ＭＩＣ）として与
えられたものである。この試験において比較のため、公
知の抗生物質バンコマィシンの効力を試験した。第 Ｖ
表 Ａ‐７４１３腕雌腕性注 ＊印：ペニシ
リンＧに感受性あり、＊＊印：ペニシリンＧに抵抗性あ
り、メチシリンに感受性あり、＊＊＊印：ペニシリンＧ
およびメチシリンに抵抗性あり。

Ａ−７４１３因子Ａのストレブトコツカス属に属する微
生物（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｓｐｅｃｉｅｓ）に
対する効力を試験するため、寒天−希釈試験を行なった
結果を第の表に示す。

トリプチカーゼ−大豆寒天に０．３％寒天中、血液１０
‐２希釈液を一夜培養した培養液を加え、この培地に寒
天表面７．５助平方当り約５０００の菌を接種材料とし
て接種し、試験を行なった。比較のため、バンコマイシ
ンの効力を試験した結果を同時に第の表に示す。試験に
用いた藤株はすべてペニシリンＧに抵抗性を有し、０群
の連鎖球菌株である。第の表 またＡ一７４１３因子Ａは髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｌ
ａｍｅｎｉｎｇｊｔｊｄｅｓ）に対して効力を有する。

トリプチカーゼ−大豆寒天に５％ウサギ血液と１％ィソ
ビタレックスおよび接種材料として一夜培養した培養物
の１：１０畔希釈液を加えたものを用い寒天−希釈試験
法によりＡ−７４１３因子ＡのＭＩＣ値を試験し、次の
結果を得た。髄膜炎菌 ＭＩＣ（ｍｃｇ′
の‘）オス（戊） ４．
０サブダーリン（Ｓａｍｅｒｌｉｎ）
２．０Ａ−７４１針ヒ合物は比較的非毒性である。

たとえばＡ−７４１３因子Ａをマウスに腹腔内注射によ
り投与したときの急性毒性（ＬＤ５ｏ）は４００の９／
ｋ９であった。Ａ−７４１３頃合体およびＡ−７４１針
ヒ合物が保持する上記以外のすぐれた特性はニキビの病
原体であるプロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏ
ｐｉｏｎｉｂａｃにｒｉｍｍａｃｎｅｓ）を抑制する効
力を有することにある。

次に示す方法により、代表的Ａ−７４１３因子ＡのＰ．
ａｃｎｅｓに対する効力の試験を行なった：アクチノミ
セス培養液（バルチモア・バイオロジカル・ラボラトリ
ース製）中、試験化合物の２倍希釈液を製する。１の‘
当り１ぴの微生物を含有するように各試験管にＰ．ａｃ
ｎｅｓを姿種する。

３７００で４日間培養した後、試験管を観察する。

菌の発育を阻止する試験化合物の最低濃度を最小抑制濃
度（ＭＩＣ）として記録した。その結果を第肌表に示す
。鯛表 Ａ‐７４１３蹄Ａ轍蹄願（ＭＩＣ）またＡ−７
４１２昆合物およびＡ−７４１針ヒ合物は歯根膜病を高
進させる原因となる微生物の発育を抑制する。

代表的口腔内菌に対するＡ−７４１３因子Ａの活性を第
肌表に示す。この試験において標準寒天−希釈法により
試験し、接種４錨時間後の最小抑制濃度（ＭＩＣ）を記
録した。第皿表 Ａ−７４１３因子Ａの最ソ」お胴濃
度注 ＊印：亜テルル酸塩およびチオグリコール酸を添
加したミティス・サリバリゥス（ＭｉｔｉｓＳａｌｉｖ
ａｒｉｕｓ）寒天上。

＊＊印：ブレン・／・ート・インフユージヨン・アガー
（ＢｒａｉｎＨｅａｎＩｎｆｕｓｉｏｎＡｇａｒ）上。

加うるにストレプトコツカス・ムタンスの人工プラグ系
を用いる試験において、Ａ−７４１３尾合物およびＡ一
７４１３因子Ａは０．０１％のような低い濃度でプラク
形成を抑制する。Ａ−７４１２昆合物およびＡ−７４１
針ヒ合物の上記以外の重要な性質は動物の飼料利用効率
を改善する効果を有することにある。

たとえばＡ−７４１２先生物質は発達した第一胃機能を
有する反毅動物における飼料利用効率を改善する効果を
有する。従来、動物の第一胃消化系を刺激する処理を行
なってアセテート化合物またはブチレート化合物よりむ
しろプロピオネート化合物を生成させることにより、反
饗動物の炭水化物利用効率を増大せしめ得ることが知ら
れている（チャーチ（Ｃｈｕｒｃｈ）ら：ダイジエステ
ブ・フイジオ。

ジイ・アンド・ニュートリシヨン・オブ・ルミナンツ（
Ｄｉ袋ｓｔｉｖｅ Ｐｈｙｓｉｏｌｏ鋤 ａｎｄ Ｎｕ
Ｕｉｔｉｏｎ ｏｆＲｍｍｉＭｎｔｓ）第２巻（１９７
１年）６２２および６２５頁に詳細に記載されている。
）。ラウンの方法により第一胃中のプロピオネート化合
物の生成およびその濃度を観察することにより飼料効果
を監視することができる（ラウン（ふｔｈｕｒＰ．Ｒａ
肌）：米国特許第３７９４７３２号（特にイグザンプル
５）参照）。この試験結果として揮発性脂肪酸（ＶＦＡ
）のＡ−７４１３因子Ａ処理フラスコ中における濃度と
対照フラスコ中における濃度の比を第戊表に示す。第Ｋ
表 処理区の対照区に対するＶＦＡ濃度（モル％）
の比更に反郷動物の第一胃の内容物を取出すため第一胃
にろう管を装着し、炭水化物利用効率を測定するための
動物生体内実験を行なった。

牛に対する実験は前記ラウンの操作により行なった（ラ
ゥン：米国特許第３７９４７３２号（ィグザソプル７）
参照）。

Ａ−７４１３因子Ａに関する試験結果を第Ｘ表に示す。

第一胃内におけるプロピオン酸濃度比の増大は１４日処
理を１期間とする６回実験の平均値を算出した。第Ｘ表
プロピオン酸の槍切口（牛）同様にろ・う
管を装着した去勢羊を供試し、Ａ−７４１３昆合物の飼
料利用効率を増大せしめる効果について実験を行なった
。

その結果を第幻表に示す。第虹表 プロピォネート
の増加（羊）在 全１７日の処理期間中、６日間試料採
取した。

Ａ−７４１２昆合物およびＡ−７４１針ヒ合物はプロピ
オネートを増大させることにおいて典型的効果を有し、
それ故にこれを約０．０５〜１０の９／ｋ９／日の量で
反郷動物に経口的に投与するとき、飼料利用効率を増大
せしめる効果を有する。

投与量を約１０の９／ｋ９／日の割合で投与することに
より最も好都合な結果を与える。Ａ−７４１３混合物ま
たはＡ−７４１乳ヒ合物はこれを動物飼料に混合して投
与するのが最も好ましいが、他の方法、たとえば活性物
質を錠剤、．飲薬、丸薬またはカプセル剤に製剤して投
与することができる。かかる投与剤型は獣医薬学的によ
く知られた方法により製剤することができる。各投与単
位剤型は処置すべき動物の１日当り適当な量に直接関連
を有する量のＡ一７４１針ヒ合物または混合物を含有す
るように製剤すべきである。Ａ−７４１３昆合物および
Ａ−７４１針ヒ合物が家畜の発育を増進する性質を有す
る例が見出された。

肥育用ひよこを床面のある囲いに入れ、飼料中にトン当
り１０夕のＡ−７４１３因子Ａを飼料中に加えて試験を
行なった結果、ひよこの体重と飼料利用効率を著しく改
善した。Ａ一７４１３混合物およびＡ−７４１針ヒ合物
はこれを動物飼料トン当り０．５〜５０夕の割合で動物
の飼料に配合するとき、家畜の発育を促進することにお
いて典型的効果を有する。Ａ−７４１３混合物または化
合物を動物飼料トン当り２．５〜１０夕の割合で投与す
るとき最も良好な結果が得られる。培地成分と菌糸体を
含む培養固形物を抽出または分離処理することなく（し
かし好ましくは脱水した後）これをＡ−７４１２尾合物
源として使用することができる。

たとえば活性を有するＡ−７４１３穴生物質を生成せし
めた後、培養液を凍結乾燥により乾燥し、これを飼料プ
レミックスに直接混合することができる。次に実施例を
挙げて本発明の抗生物質の具体的製造法について詳述す
る。

実施例 １ Ａ 振鰹フラスコ中におけるＡ一７４１３の発酵：−寒
天斜面培地の成分：シュクロース３０夕、ベプトン５夕
、リン酸水素二カリウム１夕、ッアベックのミネラル混
合溶液＊５の‘、寒天２５夕、脱イオン水を加えて全量
１〆。

（＊印：塩化カリウム１００夕、硫酸マグネシウム・７
水和物１００夕、硫酸鉄・７水和物２夕、脱イオン水を
加えて全量１０００の‘。）上記成分から１８×１５仇
岬寒天斜面塔地を製し 、こ の斜面培地にＡｃｔｉｎ
ｏｐｌａｎｅｓ ｓｐＮＲＲＬ８１２２を接種してこれ
を２５℃で１０〜１４日間培養し、Ａｃｔｉｎｏｐｌａ
ｎｅｓｓｐ．ＮＲＲＬ８１２２の培養物を製する。培養
後の斜面培地に水を加え、滅菌ループで掻き回して菌糸
体をほぐし、切断し、かつ胞子愛から胞子を遊出させて
懸濁液を製する。液体発育培地の成分： グルコース１０夕、デキストリン２０夕、大豆粉２５夕
、酵母エキス２．５夕、炭酸カルシウム２．５夕、脱イ
オン水を加えて全量１０００舷。

この液体発育塔地５０の‘を２５０の‘ェルレンマィャ
ーフラスコに入れて上記懸濁液の１／ａ量を接種し、２
５比ｐｍで直径２インチの弧を画きながら回転させて２
５ｏｏで７独特間振濠培養する。

この発育培地の培養物を第２段階の発育培地に直接接種
して使用ができるが、好ましくはこれを液体窒素の蒸気
相中に保持して後日使用のため保存してもよい。保存培
地は多数小ビン中に各小ビン当り上記発育塔地の培養物
２の‘とグリセロール２０％、ラクトース１０％および
脱イオン水７０％から成るグリセロールーラクトン溶液
２の‘を入れて製せられる。この懸濁液を液体窒素の蒸
気相中に保存する。この保存懸濁液１の上を発育培地用
として記載した前記の組成を有する第１段階の発育培地
５０の‘に接種する。

これを２５０私広口ェルレンマィャーフラスコに入れ、
２５仇ｐｍで直径２インチの弧を画きながら回転させて
２５ｑ０で７幼時間振糧培養する。Ｂ Ａ−７４１３の
タンク発酵：一 大容量接種材料を得るため、上記のように培養した発育
培地４０机上を第１段階の発育培地と同様の組成を有す
る第２段階の発育培地４００の‘に接種する。

この第２段階の発育培地を２〆フラスコ中、２５仇ｐｍ
で直径２インチの弧を画きながら回転させて２５００で
約４報時間振糧培養する。製造用減菌培地の成分：大豆
粉３５夕、トウモロコシ油４０夕、硫酸マグネシウム、
・７水和物２夕、炭酸カルシウム２夕、塩化第一鉄・４
水和物０．０６夕、脱イオン水で全量１０００の上。

上記塔地を１２０ｑｏで３０分間加熱して滅菌する。

滅菌後の培地ｐＨは７．０であった。この製造用滅菌塔
地１００夕に上記第２段階の発育接種材料１夕を接種す
る。接種した製造用培地を１６５〆発酵タンク中、２５
ｑ０で約７日間発酵させる。この発酵培地に培地容量当
り毎分約０．５〜１．０容量の滅菌空気を送って通気す
る。培地を通常の鷹梓機（２５仇ｐｍ）で蝿拝する。実
施例 ２ 下記組成を有する斜面培地を製し、これを使用して最初
の接種材料用胞子および菌糸体を得、実施例１と同様の
操作を行なってＡ−７４１３抗生物質を得た。

斜面培地の成分： チオ硫酸ナトリウム０．５夕、酵母エキス２．０夕、炭
酸カルシウム３．０夕、野菜ジュース＊２００叫、脱イ
オン水８００肌、水酸化ナトリウムを加えてｐＨ７．２
に調節（＊印：米国０８１０１ニュージャージー州カム
デン市在カンベル・スープ・カンパニー（Ｃａｍｐｂｅ
ｌｌＳｏｕｐＣｏ．）製Ｖ−８ジュース）。

実施例 ３下記組成を有する発育塔地および第２段階の
発育培地を用い、実施例１と同様の操作を行なってＡ一
７４１３穴生物質を得た。

発育塔地の成分： グルコース１０．０夕、デキストリン２０．０夕、大豆
粉１５．０２、酵母エキス２．５夕、大豆油（再精製）
５．０夕、炭酸カルシウム２．５夕、脱イオン水を加え
て全量１０００の‘。

実施例 ４ Ａ−７４１３昆合物の分離：− 実施例１で製せられた全発酵液２００そに希硫酸を加え
てｐＨ３．５に調節する。

この酸性発酵液に炉過助剤（ジョンズーマンビル・プロ
ダクッ社（（ｌｏｈ船−ｍａｎｖｉｌｌｅ Ｐｒｏｄｕ
ｃｔｓ Ｃｏｒｐ．）製達藻±：／・ィフロ・スーパー
セル）を添加して炉過する。炉過した菌糸体ケーキにメ
タノール１００そを加え、このメタノール懸濁液を３０
分間蝿拝した後、炉適する。分離した菌糸体に更にメタ
ノール１００〆を加えて３び分間蝿梓後、炉適する。２
回のメタノール抽出物を減圧下に濃縮してメタノールを
除き、水性濃縮物１０．５Ｚを得る。

これを５℃で２独時間冷やし、生成した油性上層を分離
して捨てる。水性下層２そに希硫酸を加えてｐＨ４．３
に調節する。この溶液をクロロホルム：メタノール（４
：１）溶液１／２客で２回抽出する。２回の抽出物を合
し、減圧下に蒸発乾溜する。

得られた残留物をクロロホルム１５０私に溶解し、溶液
をｎーベンタン１５００机に加える。生成した沈殿を遠
Ｄ分離して減圧下に乾燥し、Ａ−７４１群尾合物１５．
８夕を褐色粉末として得た。実施例 ５ 各Ａ−７４１３因子の分離：− 実施例４で製せられたＡ−７４１３混合物２６．４夕を
クロロホルム：メタノール（１９：１）溶液２００泌に
溶解する。

クロロホルム：メタノールを用いてシリカゲル（マセソ
ン・グレード６２（５％水で平衡））カラム（５．８×
９４．０肌）を装置し、これに上記溶液を通し、カラム
をクロロホルム：メタノール（１９：１）で展開し、各
１５０叫分画を集める。各分画の黄色ブドウ球菌（Ｓｔ
ａｐｈｙＩＭｏｃｃｕｓａｍｅ雌）、枯草菌（Ｂａｄｌ
ｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）およびサルシナ・ルテァ（Ｓ
ａｒｃｉｎａｌｕｔｅａ）に対する活性試験ならびにサ
ルシナ・ルテアを検出微生物とする薄層クロマトグラム
上バイオオートグラフイにより、カラムの溶出を監視す
る。成分含有量および検出された活性に基づいて各分画
を合する。合した分画をそれぞれ減圧下に蒸発乾溜する
。得られた各残留物をクロロホルム５０私に溶解し、各
クロロホルム溶液をｎ−ペンタン５００の‘に加えて所
望の因子を沈殿させる。分離結果を第刈表に示す。第皿
表 分離されたＡ−７４１３因子 上記不純物を含む各分画は更にこれを上記と同様のシリ
カゲルカラム上クロマトグラフィに付し、それぞれ因子
Ａ（精製したものは純品と合する。

）、因子ＢおよびＣの純品として得た。実施例 ６Ａ−
７４１３因子Ａの結晶化：− 実施例５で製せられた因子Ａ純品１夕をクロロホルム１
０の‘に溶解し、無水エタノール１０の【（無水ェタ／
−ルは０．５％ベンゼンを含む。

）を加える。この溶液を室温で２時間放置した後、５℃
に一夜冷やす。生成した結晶を遠○分離し、エタノール
で洗って乾燥し、結晶性Ａ−７４１３因子Ａ５１３のｐ
を得た。下記溶媒系を用い、上記同様の操作によりそれ
ぞれＡ−７４１３因子Ａを結晶化した。

クロロホルム：ｓｅｃーブタノール、クロロホルム：ｎ
ープｏ／ゞノール、クロロホルム：イソプロ／ゞノール
、ジメチルホルムアミド：アセトン、アセトン：エタノ
ール、水性エタノールｏ実施例 ７Ａ−７４１３因子Ａ
・アンモニウム塩の製造：−実施例６で製せられたＡ一
７４１３因子Ａ２００の９を０．０１Ｎ水酸化アンモニ
ウム１０の‘に加え、この懸濁液をブアーチス（Ｖｉｒ
ｔｊｓ）混合機で２０分間燈梓する。

不溶解物を遠心分離して捨てる。上燈溶液を凍結乾燥し
、黄色水溶性粉末としてＡ−７４１３因子Ａ、アンモニ
ウム塩１５８．７の９を得た。実施例 ８Ａ−７４１３
因子Ａ・カリウム塩の製造：−実施例６で製せられたＡ
−７４１３因子Ａ３夕を水１５０の【に懸濁する（懸濁
液のｐＨは４．３である。

）。これに０．０州水酸化カリウム４１叫を加えてＰＨ
９．４５に調節する。蝿梓機を用いてこの溶液を３び分
間渡洋する。不溶解物を遠０分離して上燈溶液を凍結乾
燥し、黄色水綾性粉末としてＡ−７４１３因子Ａ・カリ
ウム塩２．６１夕を得た。この粉末状カリウム塩２００
の９をメタ／ール８Ｍに溶解し、不溶性不純物を遠０分
離し、分離された上燈溶液にジェチルヱーテルを加えて
３日間５℃に冷やす。

生成した結晶を遠心分離し、乾燥して結晶性Ａ−７４１
３因子Ａ・カリウム塩１４１．８ｍ９を得た。実施例
９ Ａ−７４１３因子Ａ・カルシウム塩の製造：・‐実施例
６で製せられたＡ−７４１３因子Ａ２００雌をメタノー
ル２０の‘に溶解し、メタノール溶液を縄拝しながらＰ
Ｈ９．１になるまでこの溶液に０．１Ｎ水酸化カルシウ
ムを加える。

得られた溶液にジヱチルェーテル６客を加えて塩を沈殿
させる。沈殿を遠０分離し、乾燥してＡ一７４１３因子
Ａ・カルシウム塩８０．１の９を得た。原子吸収分析法
で分析した結果、この生成物のカルシウム含量は１．８
１％であった。実施例 １０Ａ−７４１３因子Ａ・トリ
ェチルアミン塩の製造：０．０１Ｎトリヱチルアミンを
用い、Ａ一７４１３因子Ａ２００の９を実施例７と同様
に処理してＡ−７４１３因子Ａのトリェチルアミン塩１
２２．２の９を得た。

実施例 １１Ａ−７４１３因子Ａ・ジナトリウム塩の製
造：−０．０１Ｎ水酸化ナトリウム３０の【を用い、Ａ
−７４１３因子Ａ３００の９を実施例７と同機に処理し
、黄色水溶性化合物としてＡ−７４１３因子Ａのジナト
リウム塩２６０の９を得た。

原子吸収分析による生成物のナトリウム含量２．６７％
。実施例 １２ Ａ−７４１３因子Ａ・モノナトリウム塩の製造：−実施
例９の処理におけるＡ−７４１３因子Ａ２００雌の溶液
を０．１Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ８．６に調節し、同
様の処理を行ない、水溶性化合物としてＡ−７４１３因
子Ａのモノナトリウム塩１５１．６の夕を得た。

原子吸収分析による生成物のナトリウム含量１．４３％
。実施例 １３〜１８ （１３）Ａ−７４１３因子Ｂおよび０．０１Ｎ水酸化ナ
トリウムを用い、実施例８と同様に処理してＡ−７４１
３因子Ｂ・ジナトリウム塩を得た。

（１４）Ａ−７４１３因子Ｂを用い、実施例７と同機に
処理してＡ−７４１３因子Ｂ・アンモニウム塩を得た。
（１５）Ａ−７４１３因子Ｂおよび０．１Ｎ水酸化バリ
ウムを用い、実施例９と同様に処理してＡ一７４１３因
子Ｂ・バリウム塩を得た。（１６）Ａ−７４１３因子Ｃ
および０．１Ｎ水酸化ナトリウムを用い、実施例９と同
機に処理してＡ−７４１３因子Ｃ・モノナトリウム塩を
得た。（１７）Ａ−７４１３因子Ｃおよび０．０１Ｎィ
ソプロピルアミンを用い、実施例１０と同様に処理して
Ａ−７４１３因子Ｃ・ィソプロピルアミン塩を得た。（
１８）Ａ−７４１３因子Ｃおよび０．１Ｎ水酸化マグネ
シウムを用い、実施例９と同様処理してＡ−７４１３因
子Ｃ・マグネシウム塩を得た。実施例 １９ Ａ一７４１３因子Ａ・アセチルェステル譲導体の製造：
−Ａ一７４１３因子Ａ５００の２をジメチルスルホキシ
ド２０泌に溶解し、この溶液に無水酢酸８秋を加え、混
合物を室温で２幼時間放置する。

混合物を減圧下に濃縮して約１５肌‘客にする。この濃
縮物にメタノール１５の‘を加え、混合物をジェチルェ
ーテル２４０の‘に加える。生成した沈殿を炉別してこ
れを減圧下に乾燥し、Ａ−７４１３因子Ａのアセチルェ
ステル誘導体２１６の９を得た。実施例 ２０ Ａ−７４１３因子Ａ・アセチルェステル誘導体の製造：
−Ａ−７４１３因子Ａ５００雌をピリジン２０似に溶解
し、この溶液に無水酢酸８の【を加え、混合物を室温で
２幼時間放置する。

混合物を減圧下に蒸発乾固し、残留物をクロロホルム４
の【に溶解し、溶液をｎ−ペンタン６０の‘に加える。
生成した沈殿を遠心分離してこれを減圧下に乾燥し、Ａ
−７４１３因子Ａのアセチルェステル誘導体４２１雌を
得た。実施例 ２１〜２５（２１）無水プロピオン酸を
用い、実施例２０と同様に処理してＡ一７４１３因子Ａ
・プロピオニルェステル誘導体を得た。

（２２）Ａ−７４１３因子Ｂおよび無水ｎ−酪酸を用い
、実施例２０と同様に処理してＡ−７４１３因子Ｂ・ｎ
ープチリルェステル誘導体を得た。（２３）Ａ−７４１
３因子Ｃおよび無水ｎ−吉草酸を用い、実施例２０と同
様に処理してＡ一７４１３因子Ｃ・ｎ−バレリルェステ
ル誘導体を得た。（２４）無水コハク酸を用い、実施例
２０と同様に処理してＡ−７４１３因子Ａ・スクシニル
ェステル誘導体を得た。（２５）Ａ−７４１３因子Ｂお
よびアセチルホルミルオキシドを用い、実施例２０と同
様に処理してＡ−７４１３因子Ｂ・ホルミルェステル誘
導体を得た。実施例 ２６ Ａ一７４１３因子Ａ・メチルェステルの製造：−Ａ−７
４１３因子ＡＩＯＯの９をメタ／ール５肌とクロロホル
ム０．６の‘の溶液に溶解し、この溶液にジアゾメタン
４Ｍのエーテル性溶液を加える。

該溶液を３０分間鷹拝し、室温で４．５時間放置する。
この溶液を減圧下に蒸発乾溜し、残留物をメタノール４
の‘に溶解し、溶液を減圧下に蒸留乾洞する。残留物を
クロロホルム３の‘に溶解し、クロロホルム溶液をｎー
ベンタン３０の‘に加える。生成した沈殿を遠心分離し
、これを乾燥してＡ一７４１乳童子Ａ・メチルェステル
８７の９を得た。実施例 ２７〜２９ （２７）Ａ−７４１３因子Ｂおよびジアゾェタンを用い
、実施例２６と同機に処理してＡ−７４１乳裏子Ｂ・エ
チルェステルを得た。

（２８）Ａ−７４１３因子Ｃおよびジアゾ−２−プロパ
ンを用い、実施例２６と同様に処理してＡ一７４１３因
子Ｃ・２ープロピルエステルを得た。（２９）脱水剤と
してジシクロヘキシルカルボジィミドを用い、標準的方
法に従ってＡ−７４１３因子Ａとｎーブタノールを反応
させてＡ−７４１３因子Ａ・ｎ−プチルェステルを得た
。実施例 ３０Ａ−７４１３因子Ａ・ビス（メルカプト
酢酸）誘導体の製造：−Ａ−７４１３因子Ａ（遊離酸）
２００の９をＮ・Ｎ−ジメチルホルムアミド２．８のり
こ溶解し、この溶液にメルカプト酢酸２００の９を加え
る。

この溶液に窒素ガスを通して３０分間発泡させることに
よりガスを飽和させ、室温で２岬時間放置する。溶液を
少容量に濃縮し、濃縮溶液をジェチルェーテル（２既客
）に加える。生成した沈殿を炉取し、乾燥してＡ−７４
１３因子Ａのビス（メルカプト酢酸）誘導体を得た。実
施例 ３１〜３５ （３１）Ａ−７４１３因子Ｂおよび２−メルカプトプロ
ピオン酸を用い、実施例３０と同様に処理してＡ−７４
１３因子Ｂ・ピス（２−メルカプトプロピオン酸）誘導
体を得た。

（３２）Ａ−７４１３因子Ｃおよび３一メルカプトプロ
ピオン酸を用い、実施例３０と同様に処理してＡ−７４
１３因子Ｃ・ビス（３一メルカプトプロピオソ酸）誘導
体を得た。（３３）メルカプトコハク酸を用い、実施例
３０と同様に処理してＡ−７４１３因子Ａ・ビス（メル
カプトコハク酸）誘導体を得た。（３４）上記実施例３
３の処理における溶液を６時間だけ放置し、同様に処理
してＡ−７４１３因子Ａ・モノメルカプトコハク酸誘導
体を得た。（３５）Ｌ−システィンを用い、実施例３０
と同様に処理し、生成物をクロマトグラフィで精製し、
Ａ一７４１３因子Ａ・Ｌ−システィン誘導体を得た。

【図面の簡単な説明】

第１，２図および３図はそれぞれ本発明抗生物質Ａ−７
４１３因子Ａ、ＢおよびＣの臭化カリウム錠中における
赤外吸収スペクトルである。 ＦＩＧ．１ ＦＩＧ２ ＦＩＧ３

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ （ａ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂ、因子
   Ｃ、および因子Ｄからなる抗生物質Ａ−７４１３、（ｂ
   ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂ、因子Ｃおよび
   因子Ｄ、（ｃ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂお
   よび因子ＣのＣ＿１〜Ｃ＿４アルキルエステル、Ｃ＿１
   〜Ｃ＿５アシルエステルおよびチオール（Ｃ＿２〜Ｃ＿
   ４）カルボン酸誘導体、（ｄ）抗生物質Ａ−７４１３因
   子Ａ、因子Ｂ、因子Ｃ、およびそれらのＣ＿１〜Ｃ＿５
   アシルエステル並びにチオール（Ｃ＿２〜Ｃ＿４）カル
   ボン酸誘導体の生理学的に許容し得る塩、から選ばれる
   抗生物質Ａ−７４１３またはその関連化合物。 ［ただし、Ａ−７４１３因子Ａは白色ないし淡黄色結晶
   性物質であつて、融点２０５〜２１２℃（分解）であり
   、エタノール、クロロホルム：エタノールおよびジメチ
   ルホルムアミド９：アセトンから結晶化することができ
   、メタノール、クロロホルム、ジメチルホルムアミド、
   ジクロロエタンおよびジメチルスルホキシドにそれぞれ
   可溶、エタノールおよびエタノール水溶液に僅かに可溶
   であるが、アセトン、ベンゼン、四塩化炭素、ジクロロ
   メタン、メチルイソブチルケトン、酢酸エチル、ジエチ
   ルエーテルおよび水に不溶であり、元素分析による百分
   率組成（平均値）はおよそＣ、５１．９２％；Ｈ、５．
   ２５％；Ｎ、９．８５％；Ｏ、２２．６３％；Ｓ、９．
   ６６％であり、およその実験式はＣ＿７＿２Ｈ＿８＿７
   Ｎ＿１＿２Ｏ＿２＿３Ｓ＿５であり、滴定法により決定
   されるＡ−７４１３因子Ａの見掛けの分子量はおよそ１
   ３０８であり、臭化カリウム錠中における赤外吸収スペ
   クトルの極大吸収は２．９３（肩）、２．９８（中）、
   ３．２４（弱）、３．３８（肩）、３．４４（中）、３
   ．５３（弱）、５．７８（弱）、６．０３（強）、６．
   ５６（強）、６．７９（中）、７．０８（中）、７．２
   ７（弱）、７．４９（弱）、７．６５（弱）、８．１８
   （中）、８．４１（弱）、８．６２（弱）、８．８１（
   中）、９．０３（弱）、９．３５（中）、９．６０（中
   ）、９．９２（弱）、１０．２０（弱）、１２．０５（
   弱）、１２．６６（弱）、１３．５１（弱）ミクロンで
   あり、紫外吸収スペクトルにおける極大吸収は、（ａ）
   中性９５％エタノール水溶液中では２１５ｎｍ（Ｅ■＝
   ４８５）、２６０ｎｍ（肩、Ｅ■＝２４０）、３００ｎ
   ｍ（肩、Ｅ■＝１７０）、３５８ｎｍ（肩、Ｅ■＝１１
   ２．５）、（ｂ）酸性エタノール中では２１７ｎｍ（Ｅ
   ■＝４４０）、２６５ｎｍ（Ｅ■＝２２７．５）、２９
   ３ｎｍ（Ｅ■＝２１０）、３５８ｎｍ（Ｅ■＝９５）、
   （ｃ）塩基性メタノール中では２７８ｎｍ（肩、Ｅ■＝
   ２５５）、４０８ｎｍ（Ｅ■＝８０）であり、８０％ジ
   メチルホルムアミド水溶液中において、電気滴定法によ
   りｐＫａ値７．９として滴定し得る基が存在し、酸加水
   分解後のアミノ酸分析の結果、アンモニア（１．０３μ
   モル／ｍｇ）、グリシン（０．３３μモル／ｍｇ）、ス
   レオニン（０．４０μモル／ｍｇ）、アスパラギン酸（
   ０．１μモル／ｍｇ）、未確定アミノ酸（約０．４μモ
   ル／ｍｇ）の存在が認められ、比旋光度は［α］＾２＾
   ５＿Ｄ：５４．５°（ｃ２．０、ＣＨＣｌ＿３）であり
   、クロロホルム：エタノールから結晶化したＡ−７４１
   ３因子Ａの特性的Ｘ線粉末回折パターン（Ｃｕ＾＋＾＋
   放射、１．５４０５λ、ニツケルフイルター、ｄ＝格子
   間隔（オングストローム））は次の通りである：▲数式
   、化学式、表等があります▼ Ａ−７４１３因子Ｂは白色ないし淡黄色無定形物質で
   あつて融点約３００℃であり、メタノール、クロロホル
   ム、ジメチルホルムアミド、ジクロロエタン、ジメチル
   スルホキシドに可溶、エタノールおよびエタノール水溶
   液に僅かに可溶であるが、アセトン、ベンゼン、四塩化
   炭素、ジロロメタン、メチルイソブチルケトン、酢酸エ
   チル、ジエチルエーテルおよび水にそれぞれ不溶であり
   、元素分析による百分率組成はおよそＣ、６６．３４％
   ；Ｈ、８．７３％；Ｎ、２．９８％；Ｏ、１９．３９％
   ：Ｓ、２．８３％であり、臭化カリウム錠中における赤
   外吸収スペクトルの極大吸収は２．９７（強）、３．３
   ８（強）、３．４２（強）、３．５０（強）、５．７８
   （肩）、５．９９（中）、６．５０（中）、６．８０（
   中）、６．９０（肩）、７．００（肩）、７．２２（中
   ）、７．２７（肩）、７．４２（弱）、７．５８（弱）
   、７．７８（肩）、７．９７（中）、８．３３（肩）、
   ８．５３（中）、９．００（肩）、９．２６（強）、９
   ．７１（強）、１１．１１（弱）、１１．７９（弱）、
   １２．３５（弱）、１３．２５（弱）ミクロンであり、
   紫外吸収スペクトルにおける極大吸収は、（ａ）中性９
   ５％エタノール水溶液中では２６８ｎｍ（Ｅ■＝１０４
   ．３）、３５７ｎｍ（肩、Ｅ■＝３０）、（ｂ）酸性エ
   タノール中では２６８ｎｍ（Ｅ■＝１０８．５）、３５
   ７ｎｍ（肩、Ｅ■＝３５）、（ｃ）塩基性エタノール中
   では２６８ｎｍ（肩、Ｅ■＝１７８．６）であり、比旋
   光度は［α］＾Ｒ＾Ｔ＿Ｄ：−２６．２（ｃ７．５、Ｄ
   ＭＳＯ）であり、酸加水分解後のアミノ酸分析の結果、
   アンモニア（０．４６μモル／ｍｇ）、グリシン（０．
   １μモル／ｍｇ）、スレオニン（０．１μモル／ｍｇ）
   、アスパラギン酸（０．０２μモル／ｍｇ）、未確定ア
   ミノ酸（約０．１１μモル／ｍｇ）の存在が認められる
   。 Ａ−７４１３因子Ｃは白色ないし淡黄色無定形物質で
   あつて融点約２５０℃であり、メタノール、クロロホル
   ム、ジメチルホルムアミド、ジクロロエタン、ジメチル
   スルホキシドに可溶、エタノールおよびエタノール水溶
   液に僅かに可溶であるが、アセトン、ベンゼン、四塩化
   炭素、ジクロロメタン、メチルイソブチルケトン、酢酸
   エチル、ジエチルエーテルおよび水にそれぞれ不溶であ
   り、元素分析による百分率組成はおよそＣ、６９．３８
   ％；Ｈ、９．９２％；Ｎ、２．３４％：Ｏ、１６．５８
   ％：Ｓ、１．７３％であり、臭化カリウム錠中における
   赤外吸収スペクトルの極大吸収は３．００（中）、３．
   ３８（肩）、３．４２（強）、３．５１（強）、５．７
   ３（中）、６．０２（中）、６．１４（肩）、６．５２
   （弱）、６．５６（弱）、６．７７（中）６．８０（肩
   ）、６．９７（弱）、７．２０（弱）、８．２５（弱）
   、８．３３（弱）、８．４０（弱）、８．８６（弱）、
   ９．３９（弱）、１０．０５（弱）、１０．５３（弱）
   、１０．７０（弱）、１１．７７（弱）、１３．６６（
   弱）ミクロンであり、酸加水分解後のアミノ酸分析の結
   果、アンモニア（０．２４μモル／ｍｇ）、グリシン（
   ０．０５μモル／ｍｇ）、スレオニン（０．０４μモル
   ／ｍｇ）、アスパラギン酸（０．０１μモル／ｍｇ）お
   よびフエニルアラニン（０．０５μモル／ｍｇ）の存在
   が認められ、紫外吸収スペクトルにおける極大吸収は、
   （ａ）中性９５％エタノール水溶液中では２０５ｎｍ（
   Ｅ■＝３５６）、２３５ｎｍ（肩、Ｅ■＝１８０）、２
   ６０ｎｍ（肩、Ｅ■＝１２７）、２９０ｎｍ（肩、Ｅ■
   ＝１０４）、（ｂ）酸性エタノール中では２０５ｎｍ（
   Ｅ■＝３５６）、２３５ｎｍ（肩、Ｅ■＝１８０）、２
   ６０ｎｍ（肩、Ｅ■＝１２７）、２９０ｎｍ（肩、Ｅ■
   ＝１０３）、３５５ｎｍ（肩、Ｅ■＝４０）、（ｃ）塩
   基性エタノール中では２６０ｎｍ（肩、Ｅ■＝２６８）
   、３２５ｎｍ（肩、Ｅ■＝１８９）である。 検出微生物として枯草菌を使用する種々のペーパーク
   ロマトグラフイ系におけるＡ−７４１３因子Ａ、Ｂ、Ｃ
   およびＤのＲｆ値は以下の通りであり：▲数式、化学式
   、表等があります▼ 検出微生物として枯草菌を使用するシリカゲル上の薄
   層クロマトグラフイ系におけるＡ−７４１３因子Ａ、Ｂ
   、ＣおよびＤのＲｆ値は以下の通りである：▲数式、化
   学式、表等があります▼ ］。 ２ アクチノプラネス属に属する抗生物質Ａ−７４１３
   生産菌を培地に培養し、その培養液から抗生物質Ａ−７
   ４１３またはその構成因子を採取し、要すれば得られた
   抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、Ｂ、またはＣを常法によ
   りＣ＿１〜Ｃ＿４アルキルエステル、Ｃ＿１〜Ｃ＿５ア
   シルエステルまたはチオール（Ｃ＿２〜Ｃ＿４）カルボ
   ン酸誘導体に変換し、所望により、得られた生成物を生
   理学的に許容し得る塩に変換することを特徴とする、（
   ａ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂ、因子Ｃ、お
   よび因子Ｄからなる抗生物質Ａ−７４１３、（ｂ）抗生
   物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂ、因子Ｃおよび因子Ｄ
   、（ｃ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂおよび因
   子ＣのＣ＿１〜Ｃ＿４アルキルエステル、Ｃ＿１〜Ｃ＿
   ５アシルエステルおよびチオール（Ｃ＿２〜Ｃ＿４）カ
   ルボン酸誘導体、（ｄ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、
   因子Ｂ、因子Ｃ、およびそれらのＣ＿１〜Ｃ＿５アシル
   エステル並びにチオール（Ｃ＿２〜Ｃ＿４）カルボン酸
   誘導体の生理学的に許容し得る塩、から選ばれる抗生物
   質Ａ−７４１３またはその関連化合物の製法。 ３ （ａ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂ、因子
   Ｃ、および因子Ｄからなる抗生物質Ａ−７４１３、（ｂ
   ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂ、因子Ｃおよび
   因子Ｄ、（ｃ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂお
   よび因子ＣのＣ＿１〜Ｃ＿４アルキルエステル、Ｃ＿１
   〜Ｃ＿５アシルエステルおよびチオール（Ｃ＿２〜Ｃ＿
   ４）カルボン酸誘導体、（ｄ）抗生物質Ａ−７４１３因
   子Ａ、因子Ｂ、因子Ｃ、およびそれらのＣ＿１〜Ｃ＿５
   アシルエステル並びにチオール（Ｃ＿２〜Ｃ＿４）カル
   ボン酸誘導体の生理学的に許容し得る塩、から選ばれる
   抗生物質Ａ−７４１３またはその関連化合物を活性成分
   とする抗菌剤。 ４ （ａ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂ、因子
   Ｃ、および因子Ｄからなる抗生物質Ａ−７４１３、（ｂ
   ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂ、因子Ｃおよび
   因子Ｄ、（ｃ）抗生物質Ａ−７４１３因子Ａ、因子Ｂお
   よび因子ＣのＣ＿１〜Ｃ＿４アルキルエステル、Ｃ＿１
   〜Ｃ＿５アシルエステルおよびチオール（Ｃ＿２〜Ｃ＿
   ４）カルボン酸誘導体、（ｄ）抗生物質Ａ−７４１３因
   子Ａ、因子Ｂ、因子Ｃ、およびそれらのＣ＿１〜Ｃ＿５
   アシルエステル並びにチオール（Ｃ＿２〜Ｃ＿４）カル
   ボン酸誘導体の生理学的に許容し得る塩、から選ばれる
   抗生物質Ａ−７４１３またはその関連化合物を活性成分
   とする飼料利用効率改善剤。