JPS5978695A - 抗生物質ｍ９０２６ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、任意に抗生物質Ｍ　９０２６種合体と称され
る抗生物質の群、及び抗生物質Ｍ９０２６種合体から分
離される抗生物質Ｍ９０２６第１因子、第２因子及び第
３因子と称される純粋な両分、これらの抗生物質を生産
するだめの発酵法、並びに複合体の単一画分への分ｎα
、法に関する。

それ故に、本発明の１つの目的は、分類学的にはミクｏ
モノスポラ（Ｍｉｃｒｏｍｏｎ、ｏｓｐｏｒａ　）属の
種として特徴づけられ且つ本発明の更なる目的を表わす
ＩＩシ来記述いれてない藺ｆ−，？！酊培デ（すること
ｋｔ−よつ′ｔ１：Ｉられる抗生物質Ｍ９０２６１７合
体に関する。

Ｈａｎｇαｌ（インド両〕て集められたこの１い！１の
培養は、１９８２年７月３０日のブタペスト協定の規定
により、Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ
。

Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃ’ｏｌｌｅｃｔｉｏｎ　（ＮＲｌ？
Ｌ　）　（１８１５Ｎ、　Ｌ）ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　　
　５ｔｒｅｅｔ−ｐｅｏｒｉａ、　　　ｌ１ｌｉｎｏｉ
ｓ６１６０１　、　／／　Ｓ　Ａ　）に、受は入れ番号
Ａ冒？　／＜　１１５、１１８省と【７て角ｄＬされて
いる。

本発明の池の目的は、ミクロモノスポラ培養の発酵肉汁
及び／又は機側体かりバｌｊされる抗生物質ｋｌ　９　
（１２６の第１．２及び３因子に関する。

記述を簡単化するだめに及び抗生物質Ａｆ９０２６複合
体、抗生物質ｉＩｆ　９０２６第２因子及び抗生物質Ａ
ｉ　９０２６第３因子の類似の有用性を考えて、以下の
記述においては、活性又は製造及び精製法を１及する場
合、（’３１９０２６化合物」又は「Ｍ９０２６抗生物
質」は抗生物質Ａｆ　９０２６複合体、抗生物質Ｍ９０
２６第２因子及び抗生物質Ａｌ９０２６第３因子から選
択される化合物を慧味するものとする。

試験管内においてＡ（９０２６化会物は、ある種の病原
菌バクテリア、特にダラム陽性菌の生長を禁止し、まだ
試験管内培養及び補乳動物での生体内実験においてｌｌ
Ｉ￥１瘍細胞の生細胞禁止するのに；作動であることが
わかった。

菌種ミクロモノスポラ種ＮＲＩＩＬ　１５，１１８番の
特徴を次の節に記述する。

形態： ミクロモノスＨ？うに属する菌株ＮＲＲＬ１５．Ｌ１８
番は種々の栄養寒天培地」二で良く生長する。

オートミルの寒天において、コロニーは２〜３ｒ＋ｍの
直径で隆起し、正常の外形と硬い表面を示す。

空気性機側（Ａｅｒｉａｌ　　ｍｙｃｅｌｉｕｒｎ　）
は常に存在【２ない。顕微鏡の検査では、機側は長く、
枝分れ【２、直径（０，６−μｍ）が規則的であるよう
に見える。卵形ない（７球形の胞子が直径０．７〜１．
０μｔルを有（２て多く生産される。この無茎の胞子は
機側から直接隆起］７、主にシンポダイアリー（ｓｉｍ
、ｐｏ−ｄｉａｌｌｙ　）に枝分れした胞子体上に生産
される。

胞子及び胞子体の観察は１．ｕｅｄｅｍ、ａｎｎによる
振とり肉汁培養で行なった（　Ｉｎｔｅｒｎ、　　Ｊ　
、　　５ｙｓｔ　。

Ｂａｃｔ、２１，２４０〜２４７．１９７１）。

培養特性： 第１表は、５ｈｉｒ　ｌ　ｉｔＬｇ及びＧｏｔｔｔｉｅ
ｂ（Ｉｎｔｅｒ、　／、　５ｙｓｔ、　Ｂａｃｔ、±６
，３１３〜３４０．１９６６）によって提案されている
如き種々の標準的培養基及び’Ｆ’ａ、ｋｓｍａｎ（Ｔ
ｈｅ　、４ｃｔｉｎｏ−ｍｙｃｅｔｅｓ、第■巻、　ｔ
ｈ、ｅ　Ｗｉｌｌｉａｍ　ａｎｄ　ＩＩ）ｉ　ｌ　ｋ　
１ｎｓＣｏ、１９６１）　　によって推奨されている他
の培養基で培養したミクロモノスポラ１１ＮＪ？　ＲＬ
　１５゜１１８号の培＊特性を報告する。こｉｔらのｌ
時性ｔよ３ｏ’ｔ；に７〜１４日間保１晶１．た後ｅこ
決定した。

第１表 ミクロモノスポラ４′！ＩｊＮノ？／［，１５１１８番
の」＠養特性 （イーーー人ト１耳４　ｔｉｊｌ出物−モルト寒天） 面１２Ｅ８ 培ｆ基第４番　　　　　　剌富々生長、粗く頃イ包（大
＝１＊、　ｌｊ’ｍ　　＝　屏史４分カ、天　）　　　
　　１１　Ｊ゛１１パラギン尽ノ°（） 出物−Ｐ、寒天）　　　　　　９ 培養基凋′ルア用７　　　　　　　　　　１４勺りシ：
ｌ七Ｊく、　−甲」旦、　・了り（シロンン寒天）　　
　　明 オートミル寒天　　　　　県富彦生長、粗い、橙湿気 ／／　ｉ　ｃ　ｋ　ｅ　ｙ及びＴｒｅｓｎｅｒ　　豊畠
′な生長、１．わがあの寒天　　　　　　　　　Ｚｌ、
ｉ′Ｆ、ニー色がかる　、（、’　ｚ　ａ　ｐ　ｅ　ｃ
　ｋグルコース　　生長力し寒天 グルコース・アス・９ラ　　貧弱な生長、平坦、４７タ
ギン寒天　　　　　　　　明ない１７明橙色表向、湿気 寒天　　　　　　　　　　明 寒天　　　　　　　　　　ある、橙色１１Ｇ８橙色、褐
色がかった表 面 ジャガイモ・プラグ　　　生長な［７ （Ｐｌｕａ　） 色の決定けＭａｅｒｚ及びＪ’ａｕｌの方法で行なった
（、４１Ｍａｅｒｚ、及びＭ、　Ｒｅｇ、　Ｐａｒｔ、
ｌ著、Ａ　Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ　ｏｆ　Ｃｏ１ｏｒｓ
、第２版、ＭｃＧｒｏｗ−Ｈｉｌｌ　ＪＪｏｏｋ　Ｃｏ
、Ｉｎｃ、　Ｎｅｔｏ　Ｙｏｒｋ。

１９５０）。培養基の番号は示されている場合には５ｈ
ｉｒｌ　ｉｎｇ及びＧｏｔｔｌｉｅｂ（Ｉｎｔｅｔｒｎ
、、）。

５ｙｓｔ、Ｂａｃｔ、↓６，３１３〜３４０．１９６６
）によって記述されたものによる。

第９表はＬｕｅｄｅｍａｎｎ（Ｉｎｔｅｒ、　　Ｊ、　
　５ｙｓｔ。

１３ａｃｔ、２１，２４０〜２４７．１９７１）によっ
て記述された培養基で決定ｌまた炭素源の利用を報告し
、第ｍ表は菌種ミクロモノス、＋５う種Ｎ　ＲＲＩ。

１５．１１８番の生理学的特性を報告する。

第１表 炭素源の利用 炭素源　　　　　　　　　　　　１１１用アラビノース
　　　　　　　　　　＋ キシロース　　　　　　　　　　ト グルコース　　　　　　　　　　　　＋フルクトース　
　　　　　　　　　士 マンノース　　　　　　　　　　＋ マンニトール　　　　　　　　　− イノシトール　　　　　　　　　− ラムノース　　　　　　　　　　　− スクロース　　　　　　　　　　　＋ ラクトース　　　　　　　　　　＋ ラフィノース　　　　　　　　　　＋ セルロース　　　　　　　　　　　− サリシン　　　　　　　　　　　　　−メリビオース　
　　　　　　　　　） ガラクトース　　　　　　　　　　ト リデース　　　　　　　　　　　　　−ダルントール　
　　　　　　　　　− グリセロール　　　　　　　　　− 七口ビオース　　　　　　　　　　」・トレアロース　
　　　　　　　　　＋ 可溶性殿粉　　　　　　　　　　　１ ＋　利用、　士　貧弱な利用、 −利用せず 第ｍ表 生理学的特性 殿ね加水分解　　　　　　　　　　　正Ｂ２５生成　　
　　　　　　　　　　　正メラニン生産　　　　　　　
　　　　負チロシナーゼ反応　　　　　　　　　負カゼ
イン加水分ｍ　　　　　　　　　　、：Ｆマレイン酸カ
ルシウム加水分解　　　負硝酸塩還元　　　　　　　　
　　　　正リドマス・ミルク　　　　　　　　　　凝集
ゼラチン液ｆ［；　　　　　　　　　　　　　１他の有
機体のように、Ｍ−９０２６生産菌種、ミクロモノスポ
ラ種ＮＲＲＬ　Ｉ　５．１１８番の特性は変形に供せら
れる。例えば該菌種の人工的変種及び突然変異体は、種
々の公知の変異誘発素、例えばＵＶ、心、Ｘ線、高周波
、放射線、及び化学品例えば亜硝酸、Ｎ−メチル−Ｎ′
　−ニトロ−Ｎ−ニトロノギナソンなどでの処置によっ
て得ることができる。ミクロモノスボ２（・べの棟にこ
（ソ（する及び抗生物ＩＩＡ７９０２６を生産するすべ
ての天然及び人工の変、１重及び突然変異体は、１真種
ミクロモノスポラ種ＮＲｐＬ１５．１１　ａ４ｊ〒に同
等であると見なされ、本発明の範囲に包含されるものと
する。

Ｍ　９０２６抗生物質を生産するために、菌種ミクロモ
ノスポラ種Ａ’Ｒ／？、Ｚ、１５，１１８番又はその同
等の突然変異体は、炭素、窒素及び無機ｊＭの同化（７
うる源を含む水性栄養培地中において、深部好気性争件
下に培養される。該培養基は発酵技術において普通に開
用される多くの培養基のいずれか１つであってよいが、
ある培養基は好適である。

即ち例えば好適な炭素源はグ四コース、殿粉、マルトー
ス、スクロース、ガラクトース、セロビオース、ラフィ
ノース、フルクトース、デギストリン、糖蜜などである
。他の有用な炭素源ｔｉｔ、南東豆油、トウ上１ｌ−ｆ
ｆシ油、ダイズ油、魚油などをｒニーむ。

好適在≧１゛一体源はイースト抽出物、アミノ］１敷カ
ゼイン加水分Ｆｊ”Ｆ　’吻、牛肉抽出物、ダイズ粉、
ｌａ白質などである。他の有用な窒素源はオートミール
、南東ζ７ミール、ダ・ｆズブリット（ｇｒｉｔ　）、
綿実ミールなどを含む。

培養基に混入［２うる無機塩基には、ナトＩＪウム、カ
リウム、鉄、亜鉛、コバルト、マンガン、カルシウム、
アンモニウム、クロライド、カーボネート、サルフェー
ト、ナイトレート、ポス７エートなどのイオンを生成１
７うる通常の可溶性塩がある。

有機体の生長及び発育に必要な必須痕跡清元累も培養基
に混入すべきである。そのような痕跡−隈元素は、通常
培養基の他の成分の不純物として、有機体の生長に必要
とする十分な１４：で存在する。大規模な発酵で泡立ち
が問題となる場合には、消泡剤例ｔばづ？リプロピレン
グリコール又ケ」シリコーン誘導体を少量（例えば０．
２１ｎｅ／　ｌ　）で添加することが必要である。

通常抗生物質を生産する［■種を振とりフラスコ中で予
備培養ｔ／、次いでこの培養物を、Ｍ９０２６抗生物質
を実質的な量で生産するためにツヤー形発酵器に接種す
るだめに使用する。予備培養で用いる培養基は大規模で
の発Ｃ１Ｙに用いるものと同一であってよいが、他の培
８％も使用できる。

ｆｉｔ　９０２６を生産する菌種は２５〜３７℃、好ま
［７くは２６〜３０℃の高度で生長することができる。

発酵物体のｐ、ＩＪを、一般には６０〜８５に保つ。ジ
ャー形発酵器を用いる好気性の注部培養法における常法
のように、無菌の空気を培養基中へ吹へ込む。有械体を
十分に生長させるために、生産タンク中でグＩ適に使用
される空気の容量は溶存酸素濃度を２０％以上に維持す
るのに十分な肝である。

発酵中、抗生物質の生産に続いて、肉汁の試ｔ１及び／
又は機側体の抽出物を抗生物質活性に関して試験する。

Ｍ９０２６抗生物質に敏感であることが知られている有
機体はこの目的に有用である。

特に有用な分析用の有機体は黄色ブドウ球菌である。他
の有用な試験有機体は該抗生物質の細胞母性活性に敏感
であることが公知の、前側である。生分析は寒天板上で
の寒天拡散法に二より又は７’　Ｌ　Ｃ自ｊＱＩＩ生分
析により容易に行なわれる。最大抗生物質活性は、上に
概述した発酵条件において、一般に接腫から約４８〜７
２時間で見られる。

この深部好気性発０条件下での生産にいて、Ｍ　９０２
６抗生物質は、例えば溶媒での抽出、向流抽出、非溶媒
での沈殿、カラムクロ１トゲラフイー、薄層クロマトグ
ラフィーなどを含めて、発酵技術に使用される方法によ
って発酵培養基から回収でき、溶媒からの結晶化、散体
クロマトグラフィー、高速液体クロマトクランイー（Ｉ
ＩＰＬｃ）、逆相Ｂ　ｐ　Ｌ　Ｃなどのような技術によ
って更に精製することができる。

ｉｌ（９０２６を生産する壱戦体の発酵中に生産される
抗生物質は培養肉汁中及び／又は徴用体中に見出される
。それ故にＪ／　９０２　Ｇ抗生物質を回収するための
好適な方法は、濾過［７だ発酵肉汁の及び微１）ｉ（体
の別々の抽出によるものである。即ち機側体ケークを濾
過によって分ｐ・ＩＩシた後、３Ｆｉｌ当な治機溶媒で
の抽出によってＰ液から抗生物質！Ｉｆ９０２６を回収
する。この抽出は一般にＰ液のｐ　１１を３．５〜８５
、好ま［２くは６．０〜７５、最も好ま１２〈は約７に
調節（７だ後に行なわれる。適当な重機溶媒はＡｉ　９
０２６抗生物質をｒ’Ｂ　ｓｑするが、汁に不溶な溶媒
である。代表例ではあるが、限定するものではない溶媒
は、低級アルカノール例えｔ２１゛メタノール、エタノ
ール、フロノソノールナと、低級ハロアルカン例えばク
ロロホルム、塩化メチレン、クロルエタンなど：低級ア
ルキルエステル例エバ酢酸エチル、酢酸メチル、酢酸プ
ロピル、プロピオン酸エチル、酪酸エチルなど；及びケ
トン例えばメチルエチルケトンなどである。次いで挿出
ｌ吻を小容瞬まで瀝縮１２、沈殿した固体を−１７−’
過によって回収する。沈殿は抗生物質Ａｉ　９０２６が
ＭＭＬない第２の有機溶媒、例えば石油エーテル、エチ
ルエーテルなどを添加【２て達成される。

元に戻って機側体は水で洗浄し、Ａ／　９０２６抗生物
質を抽出するのに適当な−Ｆ述の溶媒の１つに懸濁させ
る。ナＶ拌後、混合物を沖過Ｉ２、有イ幾溶媒をろ液か
ら除去する。残存する水性混合物の７１　、／１を３５
〜８．５、好ま１．　＜は６〜７に調節１２、発酵肉汁
に対１．てすでに記述しブこように抽出する。

得られた抗生物ｔグ、Ｍ（９０２Ｇは公知の精製法によ
り、好ｔ　Ｌ　＜　ｉｔ分取用薄層クロマトグラフィー
又はカラムクロマトグラフィーを用いて更に１Ｍするこ
とができる。吸着質ＩＩ　Ｉｆｌｌえケ」、アルミナ、
・ンリカケ゛ル、イオン交換樹脂例えばυｏｗｅ　Ｚ■
樹脂、セルロース１．５ｅｐｈａｒｉｅｘ”）ｉとが有
オリに使用できる。

ヰ発明の好適な具体例は、ンリカグルヵラムのカラムク
ロマトグラフィーを用い月、っ極性ｔ４媒例えは低級ア
ルカノール、ハロ低級アルカン例えばクロロホルム、及
び塩基性メ１す例えはアンモニアハイドレートの混合物
で流出させることにょるＭ９０２６複合体の精製である
。

更なる好適な１体例によれは、クロロホルム：メタノー
ル：アンモニア＝　６３　：　３０　：　４　（７）１
Ｍｕ物を流出混合物として使用する。上述の生分析試験
において抗微生物活性を示す流出画分を集め、上述の技
法の１つによって抗生物質Ｍ　９０２６複合体を回収す
る。抗生物質Ｍ９０２６第２因子及び第３因子の分離は
、本質的にクロマトグラフィー法を含む種々の認められ
ている方法によって達成される。溶媒での抽出、溶媒に
よる沈殿、向流抽出なども使用できる。

他の好適な具体例によれば、カラムクロマトグラフィー
が使用される。好適な吸着剤はシリカゲルであり、好適
な流出混合物は極性溶媒例えば低級アルカノール及び低
極性溶媒例えばハロ低級アルカンを含んでなる。更に好
適な流出混合物は９：ｌの比のクロロホルム及びメタノ
ールである。

流出画分を集め、上述の生分析に従って試験ｌ２、その
結果に対応【２て集積する。次いで抗生物質Ｍ９０２６
第２因子及び抗生物質Ｍ９０２６第３因子を、それらを
含有する集めた画分から、上述した、抽出混合物からＭ
　９０２６　？、Ｍ合体を回収するための方法に従って
回収する。

ヌジョールでの赤外吸収スペクトルを第１図に示す。次
の吸収ピーク（Ｃｒｎ−’）が観察される＝３２６０（
ブロード）、３０６０．２７３０　。

１７３５．１７２０（肩）、１６５０，１６３０゜１５
４５．１５１５，１４９５，１３００゜１２６０．１２
１０．１１？０，１０９０゜１０３０．９８０．９４０
．８３０．７６０　。

７２０．７００゜ ＵＶスペク）Ａはメタノール中において約２１５ｎｍに
末端吸収を示す。これを第２図に報告する。

抗生物質Ｍ　９０２６第１［Ｆｔ、Ｊ：融点的２３５”
Ｃの結晶固体である。これはクロロボルム、メタノール
に可溶、アセトン、炭化水素（ｈ、ｙｄｒｏｃａｒ−ｂ
ｉｄｅ　）にｈＩＬ溶、水に不溶である。

元素分析では次の凡その組成・ξ−セントが得られる：
炭紫６８８３九；水素８７０％；窒素５．５６９６：酸
素（差よシ）１６．９１　％。

ヌジョールでの赤外吸収スペクトルを第３図に示す。ヌ
ジョール法で次の吸収ピーク（ＣＴｌ＋−’）が観察さ
れる： ３６７０．３５５０．３４６０．３３２０　。

３１００．３０８０，３０４０，２７４０゜１？２０，
１６６０，１６３０，１５４５゜１５００．１２６０，
１２４５，１２２０゜１１９０．１１４０，１０９０，
１０４０゜９８５．９５０，８９５，７５０，７２５゜
′７００ 紫外吸収スペクトルはメタノール中において約２１５ｒ
Ｌｗに末端吸収を示す。本質的に第２［ン１゜Ｎ　＃　
Ｒスペクトルを第４図に報告する。これは次の主ピーク
を示す。

δｎ、７０−０．７３（２ｄ、ＧＪＩ、Ｊ＝６．５）。

０、８３　（ｃｌ　、　６　／／　、　Ｊ　＝　７　）
　、　１．　（１−２，０（ｍ　。

４１１）、１．０６（ｍ、１／／）、１．２４（ｃ７，
３．７／。

、／＝６．５）、１．５−２．０（ｍ、２１１）、１．
６６（’　Ｓｅ７”　＋　１１１＋Ｊ＝７．５　）　＋
　１．”Ｊ８（ｄｔｌｒｉ。

２／／、ノー７、５−７．５−１　）　；　２．４９　
（ｄ　ｄ　ｄ　。

Ｉ　ＩＩ　、　１．１１　、　Ｊ　＝　７−１０　；　
２．５　）、　３．００　（ｄ　。

２１１　ｉ　Ｊ＝７．５　）　、　３．９１　（σｄｄ
ｄ、１１１゜Ｊ＝９　ｉ８　；　２．５−９．５　）　
、　４．０８Ｃｄｄ　、　１１１）。

４．３２（ｄｄｑ、ＩＨ；Ｊ＝＝２．５−１’０）。

４．５７（ｄｔ　、１．７７；）＝８）、５．６９（ｄ
ｔ。

１　／／　、　、／　＝　１５　）　、　６．１５　（
ｄ　、　１１／　）　、　６．２２（ｔｉ、１ｔｔ）、
６．ｔ３＜ｄｔ、ｌｎ）、ｔｉ８（？？＋、、ｓ、＃）
。

頁量スＲクトルを第５図に示す。主にピークを１次の通
υである（最初の数けη＋、／ｚ値、第２の括弧内の数
は相対弾度、ｅ−セント）： ４８６（３５）；９１（１８）；１１１（８１）Ｈ１２
０（３７）：２１６（１８）；２１７（１９）；２３０
（７０）；２３１（３４）ｉ２５Ｂ（１００）ｉ３４４
（４８）；３７２（８，３）；３９５（３，５）ｉ　４
８６　（２，６）　ｉ　４７１　（１，１）。

抗生物質Ａｉ　９０２６第２因子 抗生物質Ｊ／９０２６第２因子は２　ｓ　ｏ　゛ｃ、以
上の融点を有する白灰色の粉末である。これはメタノー
ル、エタノール、アセトン、１“’ｉ’ｌ；　ｆｌｉｔ
エチル、クロロホルムに可溶；アセトニトリルに殆んど
不溶；水、石油エーテル、エチルエーテルに不溶である
。

元素分析において次の凡その組成・ぞ−セント（数回の
分析の平均として）が得られる：炭素６８８２％；水素
９．０４％；窒素５．７０％；酸素ヌソヨールでの赤外
吸収スペクトルを第６＃図に示す。次の吸収ピーク（ｃ
ｒｎ−’）が観察される：３３４０．３２９５．３０？
０．２７３０　。

１７２０．１６７０，１６５５，１６３０゜１５４０．
１５００，１２７０，１２４０゜１２１５．１１９０，
１１４０，１０９０゜１０４０．９８０，９４５，７６
０，７２０゜０００ ＵＶスペクトルはメタノール中において約２１５ｎｍに
末端吸収を示す（本質的に第２図と同一）。

ＮＭＲスペクトルを第７図に報告する。これは次の主ピ
ークを示す： δ０．７８（ｄ、６Ｈｉ７＝７）ｉｏ、８７−０．９０
（２ａ！、６ＲＨＪ＝６．５）；１．４−２．０（ｙｙ
ｈ。

８Ｈ）；１．２４（ｄ＋３ＨＨＪ＝６．５）Ｈｌ、２７
Ｃｄ、３Ｈ，Ｊ＝’ｌ）；１．９２（ｄｄｄ、２Ｊｉ。

／　＝　７．５−７．５−１　）　；　２．６０　（ｄ
　ｄｄ　、　１　／／　。

Ｊ＝２．５−７−１１　）　；　３．２７　（ｄ　ｑ　
、　ｌ　Ｈ；Ｊ＝９）、４．０８（ｄｄｄｄ、ＩＩＩ、
Ｊ＝９　。

９−９−２　）　；　４．１４　（ｄ　ｄ　、　Ｉ　Ｉ
Ｉ　）　ｉ　４．３８（ｄｄｑ、１＃、Ｊ＝２−１１）
；４．５４（ｄｄ。

ｌ　ＩＩ、Ｊ＝８）　　；５．６２（ｄ　ｔ　、　　１
７）　＋−’＝ｔｓ）；　６．１３　（ｒｉ　、　１１
１　）　；　６．６０　（ｄ　ｔ　、　１　、／Ｊ’　
）　；７、２３　（ηｒ、　、　５　／、／　）　；　
７．２７　（ｄ　、　Ｉ　ＩＩ　）。

質量スペクトルを第８図に示す。主なピークは次の血り
である（最初のムはｍ　／　ｚ値、第２の括弧内の数は
相対強度パーセント）： ５００（９）；１０５（２ｇ）Ｈ１ｌ１０５（２；１３
４（４０）；２３０（１２）ｉ２３１（２０）；２４４
（８２）；２４５（３４）；２７２（１００）；３５８
（４２）；３８６（１Ｂ）；３９５（３４）；４８２（
６）；４８５（３）。

Ｍ　ｅ　ｒ　ｃ　ｋプレート６０Ｆ２５４でのシリカケ
゛ルア’　Ｌ　Ｃは、展開液混合物と１〜て塩化メチレ
ン：メタノール＝９５；ｌを用いる場合０，５４及び塩
化メチレン：メタノール−９−１を用いる場合ｏ、７６
の、／イｆ値を示す。

抗生物質Ｍ９０２６第３因子： 抗生物質Ａｆ　９０２６第３因子は約１１０°Ｃの融点
を有する白色の結晶物質である（人ｏｆｌｅｒ）。

元素分析において、次の凡その組成パーセントが得られ
る：炭素６７．　Ｏ１５５ｉ水素９．２４先；屋素５．
５２タロ；ｔ＊素（差より）ｌ　（１，３３％。

ＣＩ）Ｃ１１中での赤外吸収スペクトルを第９図に示す
。次の吸収ピークが観桜される： ３７００．３６１０，３４２０，３３００゜３０４０．
２９６０．２９３５，２８８０゜１？３０，１６６５，
１６３５，１６００゜１５００、．１４５５，１４３５
，１３７０゜１２７５．１２３５，１２００，１１７０
゜ＵＶスペクトルはメタノール中において約２１５ｎｍ
に末端吸収を示す（本質的Ｖｒ、第２図と同一）。

Ｎ　Ａｆ　、Ｒスペクトルを第１０図に示す。これは次
の主ピークを示す： δ０．８８（ｄ、６Ｈ；Ｊ＝７）：０．９１−０．９４
（２ｄ、６１／、／−ｊ）；１．４−２．０（ηｔ、８
１１）。

１．１６（ｄ、３１１；Ｊ＝（ｉ、５）、１．３１（ｄ
。

３１１、Ｊ＝７）、１．９９（！ｄｄ、２１１．．Ｉ＝
７−７−１）；２．４９（ｄｄｄ、　ＩＮ、Ｊ＝２．５
；？−１１）；３．０７（ｂ、１／７）；３．３４（ｄ
ｑ。

１７／；Ｊ＝８）＋３−６８（ｓ＋３Ｚ／）；：１．７
０（ｍ　、　Ｉ　ＩＩ　）　；　３．７５　（ｄ　ｃｌ
　、　Ｉ　Ｉｆ　、　Ｊ　＝　１０　）　；３．８８（
ｂ、１１１）；４．０１（ｄｄｄｄ、Ｊ−９゜Ｊ＝２−
１１）；４．５４（ｄｄ、　ＩＢ、、Ｉ＝９）。

５．６２（ｄｉ、１１１．Ｊ＝１５）：６１６（ｄ。

Ｉ　Ｉｆ　）　ｉ　６．５２　（ｄｔ　Ｉ　Ｈ）　ｉ　
６．６５　（ｄｔ　。

１　Ｂ　）　；　７．２７　（ｍ　、　５　／７　）。

質量スペクトルを第８ａ図（Ｃ示ず。主なピークは次の
通りである（最初の４′ｌはｍ、　／　ｚ値、第２の括
弧内の数は相対強朋〕ξ−セント）：５３２（０，６）
Ｂ１０５（２８）；１１１（７６）Ｂ１３４（４０）；
２３０（１２）Ｂ２３１（２０）；２４４（８２）；２
４５（３４）；２７２（１００）Ｂ３５８（４０）Ｂ３
８６（６）Ｂ３９５（５）Ｈ４２７（７）；４８２（２
）；５００（１，２）。

７’Ｌ　Ｃｋｆｅｒｃｋ　プレート、ノリカケ゛ル６０
Ｆ２５４は、展開液混合物とし、て塩化メチレン：メタ
ノール＝９５：ｌを用いる。暢合（１，４１及び塩化メ
チレン：メタノール−９：ｌｉ用いる場合（１，６４の
ＲＪ値を示す。

抗生物１Ａ（９０２６検合体及びその第１．２及び３因
子は、試験管内において抗微生物活性、行にグラム陽性
バクテリヤに対【、、て活性を有する。

次の第■表において、抗生物質Ａ（９０２６検合体のＭ
ＩＣを報告する。単一の抗生物質ｈｆ　９０２６第２因
子及び第３因子からも密接に関連ｌまた結果が得られる
。

菌ｆ４　　　　　　　　　　　　　　ＭＩＣｔｙ／ｒｎ
／黄色ブドウ球菌　、４ＴＣＣ６５３Ｂ　　　　　０．
　ＩＴｏｕｒ） の血清） 溶血性連句球菌　Ｃ２０３０２ 肺炎双菌球　ＵＣ４１Ｏ，４ ウエルチ酌　ノＳ、５　３０５４３　　　　　１２．５
尋常変形閑Ｘ１９　　　　　　　　）１００ＡＴＣＣ８
８１ 緑１１ｎ菌　ＡＴＣＣ１０１４５）１００鵞町蒼カンジ
ダ　５ＫＦ２２’１０　　　１００毛ｊ５白４ｍ丙　５
ＫＦ１７ｔｈｏ　　　　　）　１ｏ　。

結核ｆ４　　／／　３　’ｌＲｖ　　　　　　　　　　
１２．５ＡＴＣＣ９３６０ ／／２１　　　　　、・Ｃ，Ｚ、Ｂ。

膣トリコモナス　　　　　　　　　　〉１００抗生物質
Ｍ　９０２６検合体及び抗生物質Ｍ９０２６第２因子及
び第３因子は、試験管内において細胞毒性活性を並び生
体内実験において抗腫瘍活性を有する。

試験管内実１検： １１　Ｌ　６０細胞の懸濁液を、２０％胎生の血清、抗
生物質（ケ０ンタマイシン）、２ｍＭ　　Ｌ−グルタミ
ンを補充したＲｐＡｆ１１６４０培養基（参寵、Ｓ、／
、ＣＣｏ１１ｉｎ　　ら、Ｎａｔ？ｂｒｅ、　　２７０
　。

３４７〜３４９（１９７７））中において、５％二酸化
炭素を含む湿気のある雰囲気下に３７°゛Ｃに維持した
。試験すべき化合物ＱＩ０．９にメタノールに溶解【２
、次いで無菌の食塩水中で１０００μ２／　ｍｅの峡終
（過度まで希釈ｌまた。抗生物質Ｍ９０２６腹合体のＩ
Ｃ６ｏ値（即ち対照物と比べて細胞の生長を５０％禁止
させるのに必要とされる濃度）は０、１〜０．２５　／
４９　／　ｒｙｌ　′ｃあった。同一の条件において、
抗生物’ｌ’ｉｉ＃９０２６第２因子に対するＩＣ１゜
値ｉｒＪ、５〜０．５μＳ’／ｍｅＴあり、Ａ１９０２
６第３因子に対するＩＣ７゜値は約０．０５μｒ／Ｐ／
であった。

この場合＼　３Ｈ−チミソン導入の禁止を細胞生長禁止
の１つの尺度として用いた。アクチノマイシンｌ）及び
シクロエキシミドを正の対照物として用いた。これらは
それぞれ」二連の条件下に約０．０５μ？／Ｔｎ１及び
約０．２５μｆ　／　ｍｌのＩＣ，。値を示［。

た。

本発明の化合物の抗腫瘍活性の予備的選別をＰ８，８の
腫（１５を有するマウスで行なった。実験は本質的にＮ
ａｔｉｏｎａｌ　　Ｃａｎｃｅｒ　　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔ
ｅの手法に従って行なった（　Ｇｅｒａｎら、Ｃａｎｒ
、ｅｒＣｈｅｍ、　Ｒｅｐ、、　ｉｎｍ部、３．１７（
１９７２））。

この評価では１０６昭の１ｌｉｉ　’Ａ＆　Ｉ叱１１ｗ
をＣ７７Ｆ’、、　−ｙウスに腹腔内移植しンｙ。試験
′物質をカルボキシメチルセルロース中に野濁させ、呻
ｌ鵠の移植から２４時間に始めて、１日〜５日の毎日の
処置でこれを腹腔内νこ注射した。対照のマウスには化
合物を投与しなかった。処置マウスと対照マウスの生存
期間を記（−１この実験で得られた結果を、対照の生存
期間のパーセントと（７て表現［、々、：１００よりも
大きい値は、処置群の、対照群に比べての中位生存期間
の増加を示す。

この試験で得られる結果の評価のためにＭＣＩて行なわ
れている基準によれは、１“／′Ｃ値か〉１２５の場汗
には、史に研究を進めるｌｊ　ｌ尼があると思われる。

ｓ　ｎｙ　／　ｋｇの検力にお・いて、抗生物質９０２
６礪合体に対するＴ／（、値は１５３であり、抗生物Ｖ
ｊ／ｌ／９０２６第３　因子ニ対すルア’／ｃ’値は１
６８であった。５−フルオルウラ・／ルを正の対照物と
して用いた場合、６０　ｒｔｖｙ　／　ｉ＋ｇの投桑田
。

において、それはｒ／　Ｃ’　＝　１６８９１；を示し
た。

上述したように４・発明の化合’ｈは抗做生物及び抗り
φ喝活性をイｊする。それ故にこれらの化ば物は製菓学
的活性剤として開用される。この１吏用のために、本化
合物は好ま【７くは必要な患者に経口又は非経口投与す
るのに適当な公知の製薬掌的組成ζ吻中Ｖこ混入される
。

経口処方物は、粉末剤、カブヒル剤、錠剤、シロップ剤
などの形であってよく、常法に従い１つ技術的に十分公
知の助剤及び担体を用いて製造される。

現在好適な投与法である非経口投与に対１７ては１、本
発明の化合物は、表面活性剤及び他の製薬学的に許容し
うる助剤の有無下に、無菌の液体例えば水及び／′又は
油であってよい生理学的に許容しうる担体中の、本化合
物の溶液又は懸濁液の注射しうる調合剤と１．て投与す
ることができる。これらの調合に開用しうる油の例は、
石油、動物又は合成起源のもの、例えば南東豆油、ダイ
ズ油、ゴマ油、及び鉱油である。一般に２回蒸留１７た
病原菌を含まない水、食塩水、水性デキストロース及び
関連する糖溶液、エタノール及びグリコール例えばプロ
ピレン又はポリエチレングリコールは注射しつる溶液の
ための液体４．ｃ４体と（７て使用できる。

これらの調合剤は、即用性の溶液の形で或いは好ましく
は使用直前に溶媒と一緒にされる乾燥ｌまた可溶性生成
物の形で使用することができる。後者の場合、活性物質
は一般に凍結乾燥する。

非経口投−りの場合、１日当りの治療に有効な間は０５
〜２０．、！９／体重ｋｇである。本化合物は毎日に、
：’ｆ＋返［７の投与が望−ｊＬいが、これは患者の状
態及び投与法に従って変化する。

本化合物は、活性化合物を持続［２て放射するような具
合に処方されていてよいデポッ）　（ｄｅｐｏｔ）注射
又は埋め込みのための調合剤の形で投−リ１．てもよい
。活性成分は錠剤又は小さいシリンダー形に圧縮成形で
き、これを皮下に又は筋肉内にデポット注射又は埋め込
みとして投与１．でもよい。埋め込みは不活性な物質、
例えば生物分解しうる重合体又は合成シリコーン、例え
はＩｉｏｗ　Ｃｏｒｎ、ｉｎｇＣａｒｐ、　製の５ｉｌ
ａｓｔｉｃ、　シリ：’１ンゴムを使用１、てもよい。

それ故に本発明は、本発明の化合物を製薬学的に許容し
うる担体と混合１２て含有する治療学的組成物を提供す
る。

次の実施例は、四楯者が本発明を実施できる方法を例示
するか、これは・ド、）１−明の全・１ζ１Ｌ囲にいず
ｉ＋の制限を課するものてもな１ハ。

に　ｒ−′７　ｏｒ　７児ヌペクトルはＰｅｒｋｉｎ−
Ｅ１ｍｅｒ３２０　Ｕ　Ｖ　１Ｖｉｓ　型分光九度ａ１
を用いてｉ己ｇｔした。ｈ”ｌｊ’、　７　／クトルば
１１　ｉ　ｔ　ｏ　ｃノ百−Ｐｅｒｌｃｉｎ−Ｅｌｉｎ
ｅｒ　　Ｉ？ｉＪＵ　−６１４ＱｌｊＪｉ−分）Ｙ二重
を用いて記録した。またＡ’Ｍ　Ｒス浸りトルは、Ｉノ
ｒｕｋｅｒ　　ＨＰ−ＪＪ−２７０分光釧を２７　ＯＡ
Ｉ　Ｈｚで用いることにより、Ｔ　Ｍ　Ｓを内部標準と
（７てＣ１）Ｃ’１３中で記釘し７だ。

実施例１： 菌種ミクロモノスポラ種＃　ＲＲＬ　１５．１１８　；
介の発ｔ”ｉ￥　ミクロモア　スボｙ神Ｎ　７＜　Ｒ７
，Ｉ　Ｓ、　］　１８揖を、次の組成： イースト抽出９勿　　　　　　　５２ 牛肉抽出物　　　　　　　　３ｆ トリプトン　　　　　　　　　　４ｆ デキストロース　　　　　　　１り 殿粉　　　　　　　　　　２４７ ＣａＣ０，４ｉｉ’ 水道水　　　　　　　１０００　ｍｌ　ｉ　ｆを有する
捩とうフラスコ培養器中で１備培養］７て菌種を生育さ
せた。

フラスコを４８時間３０’Ｃに保ち、予備培養物を用い
、−ｔ　、ｈ、それ次の培養基：・イースト抽り１吻　
　　　　　　　２２力ゼイン加水分解物　　　　　４２ 牛肉抽出物　　　　　　　　　２２ デキストロース　　　　　　　１０ｆ’殿粉　　　　　
２ｏり ＣａＣＯ３３Ｓ’ 水道水　　　　　　　　１ｏｏｏがまで１１を含むジャ
ー形発酵器に接種１また。この発酵パッチを深部好気性
条件下に培養１２．２６〜３０”Ｃｆ　４１拌［７だ。

７）　Ｈを６．０〜ｌ＋、　５に保った。ある間隔で、
・異色ブドウ球菌をＨ・ｌ；　Ｈ（、’、何＋：５（本
と１７で用いる仰天拡散法により抗生物質活十′４を微
生物的に評価（、テこ。７２時間後に最高活性ｊて建［
２だ。

実施例２： 抗生物質ｔＩｆ　９０２６複合体の回収す施例ｊＮＣ記
述１．たよりにｉｌＷ　５＋、’ｉ　ｌ、た発酵肉汁を
ｐＪ尚；７た。７１＝＋液をｐＨ７に調Ｌ・ｉ’ｉｊ、
、同容叫の酢酸エチルで２回仙出［、た。有ｊＩ什り出
１勿を集め、元の容華の約１　／　１１１０まで４縮［
、た。沈殿１７た沈殿を＋、　Ｆ　ｉＩ′、つによって
回収した。

母故にエチルエーテルをが≦加することにより、更なる
量の同一の生成′吻を得た。諷過後、回収１７た固体を
室Ｔ晶で配字下に乾燥［７、粗抗生物質Ｍ９０２６複合
体をイＭた。

実施例３： 抗生物質＃９０２６第１因子の回収 発酵肉汁の濾過によって得られる機側、体を水洗し、ｐ
Ｈを約７．０に調節１２、混合物を２０分間攪拌しなが
らメタノール中に＠濁させた。次いで混合物を沖過［７
、炉液からメタノールを除去した。

得られた水性層をｐ　Ｈ７，０に調節し、発酵肉汁に対
して上述したように酢酸エチルで抽出［２だ。得られた
抗生物質Ｍ　９０２６第１因子はＡ１９０２６第２因子
及び第３因子に対して記述するようにして精製できた（
参照、実施例４）。この物理化学的性質は上述した通り
である。

上述の工程において、酢酸エチルをクロロホルム又はメ
チルエチルケトンで代替【２ても同様の結果が得られた
。

実施例４： 抗生物質Ｍ９０２６複合体のｎ製 粉複合体（実施例１に従って得たもの）　１．５　ｒを
下記の流出混合物ｌＯｍｅ　Ｋ　（’ｉｌ解（７、Ｍｅ
ｒｃｋ社の人−ｉｅｓｅｌｇｅｌ　　６０　（７０〜２
３０　）Ｌ　ッシュＡｓＴＭ）（１２ｏｙ　）の、りｏ
ロボルム：メタノール：アンモニア−６６：３０：４で
調製シタシリカケ°ルのクロマトグラフィー　カラムに
適用した。このカラムをクロロホルム：メタノール：ア
ンモニア混合物（６０：３０：４）ｆ展１；、１１．．
１５ｒｎ１′ずつ画分を集めた。各両分を、１ｌＬ６ｏ
細胞或いｉ−１黄色ブドウ球菌又は枯草菌に対［、て評
価することにより、また芭色ブドウ球閃を検知有機体と
して用いる薄層クロマトグラフィー自励生物分析機によ
シ監視（７だ。示された活性によって各両分を集めた。

集めた両分を（溝棒Ｉ７、これにエチルエーテルを添加
して精製された抗生物質Ａ１９Ｑ２６複合体を沈殿させ
た。この最後の工程では、イソプロピルエーテル又は石
油エルチルも使用することができた。この生成物の物理
化学的性質は上述の通りである。

実施例５： 抗生物質Ｊｆ　９　（＋　２６第２因子及び第３因子の
分離実施例４に記述した如く得たオ′ｎ製されたノ１ｆ
９０２６複合体（３４（１９）を塩化メナレン：メタノ
ールー、９＝１の５ｍｌに７γ浦工した。得られ７モ溶
液を、ｆｉｆｅｒｃｋ社ｊ３ＪＫｉｅｓｅ１ｇｅｌ　Ｃ
，７０〜２３０メツシユ、（ＳＴＭ）の、塩化メチレン
：メタノール＝９：１中で準備したシリカフ９ルのクロ
マトグラフィーのカラム（３ｏｙ）に供した。同一のイ
昆合（１グ１を用いてカラ１、を展開Ｌ／、１５　ｒｎ
ｅずつ画分を集めた。カラムの流出物を、黄色ブドウ球
１′Ｉ４又は枯草菌１１１６０細胞に対して評価するこ
とにより、或いは黄色ブドウ球菌又は枯草ｌを検知有機
体とし１用いる７’　Ｌ　Ｃ又はＴＬＣ自動生物分析櫨
により監視した。因子の含量及び示された活性に応じて
両分を集めた。それぞれ集めた画分を濃縮した。

各ｉ溝棒物をエチルエーテルに添加し、所望の因子を沈
殿させた。この工程に従い、３つの主な因子を結果と１
７で分子准し、これをそれぞれ第２因子及び第３因子と
命名［２だ。

これらの物理化学的特性ｄ、上述した通りである。

【図面の簡単な説明】

第１及び２図はそれぞれ抗生物質Ａ／　９０２６４図合
体の赤外吸収スペクトル及びＵＶスペクトルを示し；第
３，４及び５図はそれぞれ抗生物質Ａｆ　９０２６第１
因子の赤外吸収スペクトル、ＮＡｉＢスペクトル及び質
量スペクトルを示し：第６＃、７及び８図はそれぞれ抗
生物質Ｍ９０２６第２因子の赤外吸収スペクトル、　Ｎ
　Ａｆ　Ｒス（クトル及ヒ質量スペクトルを示し；そし
て第ｓ　ａ＋　９及び１゜図はそれぞれ抗生物質Ｊ／９
０２６第３因子の質量スペクトル、赤外吸収スペクトル
及び＃　、４／　Ｒス４クトルを示す。 第１頁の続き ＠発明者　　マヌエラ・パテルノステルイタリー国ミラ
ノ・メダ・ビア ツアラ１０　　シー ＠発明者　　ジョルジョ・クモー二 イタリー国ミラノ・ビアーレレ ジョニロマーネ２１ ０発　明　者　ジョバンニ・カツサー二イタリー国パビ
ーア・ビアロー マ１４ 手続補正書（力剤 昭和５８年１１月　７１日 特許庁ｊ−軸　シＴ　杉　オＩ）　　大　　　　殿１、
事件の表示 ’ＦｊＦ＃１１′ｌ′ＣＪ５８−１５５１７０＋５２、
発明の名称 （シＬ生゛ト）＋１′＋　１１１９　０　２　６３補正
をする者 事例との関係　　特許出願人 住　　所　　イタツー１ムｊミラハヒア口ベルトレ−５
−ｙブト８４代　理　人〒１０７

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　ミクロモノス１９うに属する菌株Ｎ　ＲＩ？　Ｌ
   ｌ　５、１１８番又はその同等の突然変異株を、炭素、
   窒素及び無機塩の同化しうる源を含有する水性栄養培養
   基において、深部好気性発酵条件下に培養し、そ［、て
   それ自体公知の手順により、次の特性値： 赤外線吸収ビーク（ｃｒｎ−’）： ３２６０（ブロード）、３０６０．２７３０　。 １７３５．１７２０（肩）　、’１６５０　、１６３０
   ．１５４５．１５１５．１４９５’、１３００．１２６
   ０．１２１０．１１？０，１０９０，１０３０゜９８０
   ．９４０，８３０，７６０，７２０゜０００ 約２１５ｎ７７１に紫外線末端吸収（メタノール）、を
   有する抗生物質を回収することによって得られる抗生物
   質Ａｌ　９　Ｑ　２６ドｑ台体。 ２　ミクロモノスポラに属する閑（未Ｎ　ＲＲＬｌ５．
   １１８届又はその同等の突然変異株を、深部好気性発酵
   条件下に、２６〜３０°（二、ｐ　／／　６．０〜８５
   において、実質的なμの抗生物％活性が生ずるまで培養
   １２、ぞ１．て発酵肉汁を低級アルカノール、ハロ低級
   アルカン、ｌ１ｔ４’＆アルキルニス’−７／Ｌ、及び
   低級アルキルケトンから選択される有機溶媒で抽出（２
   て回収することにより得られる、次のＩ特性値： 赤外線吸収ビーク（ｃｒｎ−’）： ３２６０（）ゝロード）、３０６０．２７３０　。 １７３５．１７２０（Ｎ）、１６５０，１６３０゜１５
   ４５．１５１５，１４９５．１３００゜１２６０．１２
   １０，１１７０，１０９０゜１０３０．９８０，９４０
   ，８３０，７６０゜７２０　　、　７００、 約２１５　ｎ、　ｍＶｃ紫外線末ｉシｉＭ　’Ｊ＆　収
   （メタ／　−ル）、を有する抗生物質ｌｌ／　９０２６
   複合体。 ３　α）　約２３５°Ｃの融点、 ｌ′）　　クロロホルＡ　、メタノールへの良好な７合
   角丁性、アセトン、炭化水素への殆ん、ど不溶性　７．
   にへの不＋１ｆ性、 Ｃ）　凡その元素分析パーセント組成：炭素６８８３％
   ；水素８７０％；窒素５５６９ＩＩ；ｌ？素（差より）
   １６．９１％、 ｄ）　ヌソヨールでの赤外線吸収ピーク（、ｎ−’）、
   ３６７０．３５５０，３４６０，３３２０゜３１００．
   ３０８０，３０４０，２７４０゜１７２０．１６６０，
   １６３０，１５４５゜１５００．１２６０，１２４５，
   １２２０゜１１９０．１１４０，１０９０，１０４０゜
   ９８５　．９５０　．８９５　．７５０　．７２５　　
   。 ００ ｅ）　紫タ１糺！吸収スペクトル：メタノール中におい
   て約２１５ｎｍに末ｉ＋ｊＭ吸収、 ｆ）　　ＮＭＲ（１７）主なピーク（δ＝　ｐ　ｐｔａ
   　；　Ｊ＝ＩＪ　ｚ　）　：δ０．７０−０．７３　（
   ２ｄ　、　６１１　、　、に６５）。 ０．８３（ｄ、６／／、Ｊ＝＝７）、１．０−７！、０
   （ｔ′ｎ、４／／）、１．０６（ｍ、ｌ／／）、１．２
   ４（ｄ、３１１．Ｊコロ、　５　）　＋　１．５−２．
   ０　（ｔｒｙ、　。 ’２１１　）　、　１．６６（ｔ　　５ｅｐｔ　、　１
   １１．　Ｊ＝７．５　）。 １．９８（ｄｄｄ、２１／、Ｊ−７，５−７，５−１）
   Ｈ２，４９（ｄｄｄ、１／／、　ＩＩＩ、Ｊ＝７−１０
   ７２．５）、３．００（ｄ、２＃ＨＪ＝７．５）。 ３．９１（ｄｄｄｄ、Ｉｌｌ、Ｊ＝９；８；２．５−９
   ．５　）　、　４．０’８　（ｄｄ、　ｔｌ／　）　、
   　４．３°″２（ｃｉｒｉｑ。 １１１；Ｊ＝２．５−１０）、４５７（ｄｔ、１１１；
   ）＝＃）＋５．６９（ｄｔ、１ｊ′ｌ、Ｊ＝１５）。 ６、１５　（ｄ　、　ｔ　１１　）　、　６．２２　（
   ｄ　、　１／／　）　。 ６’、　　７　３　　（ｄ　ｔ　　、　　Ｉ　　Ｉｆ　
   　）　　、　　７．　１　８　　（ｍ　、　　５　　／
   ）　）ｇ）　　質Ｆｉスくクトルの主なフラグメントピ
   ーク（ｎＬ／’Ｚ） ４８６（３５）；９１（１８）ｉｌｌｌ（８１）ｉ１２
   ０（３７）ｉ２１６（１８）；２１？（１９）ｉ２３０
   （７０）；２３１（３４）；２５８（１００）Ｈ３４４
   （４８）；３７２（８，３）；３９５（３，５）Ｈ４８
   ６（Ｚ６）；４７１　（１，ｔ　） を特赦とする結晶固体である抗生物質Ａ（９０２６第１
   因子。 ４、　α）２８０’ｆｉ以上の融点、 ６）　メタノール、エタノール、アセトン、ｉ’ｌ！エ
   チル、クロロホルムへの良好な溶解性；アセトニトリル
   への殆んど不溶性；水、石油エーテル、エチルエーテル
   への不溶性、 Ｃ）　凡その元素分析・ぐ−セント組成：炭素６８８２
   ％；水素９．０４％；窒素５７０　＞６　ｉ酸素（差よ
   り）１７．ｏ９９＋ｓ、 ｄ）　ヌジョールでの赤外線吸収ぎ−ク（Ｃｒｎ−Ｉ）
   ：３３４０．３２９５．３０７０．２７３０　。 １７２０．１６７０，１６５５，１６３０゜１５４０．
   １５００，１２７０，１２４０゜１２１５．１１９０，
   １１４０，１０９０゜１０４０．９８０，９４５，７６
   ０，７２０゜７００、 ｅ）　ＵＶス４クトル：メタノール中において約２１５
   ｎｍに末端吸収（第２図）、 ｆ）　　ＨＡ（Ｒ（７１）主なピーク（δ−ｐｐｍ；Ｊ
   ＝Ｈｚ）”。 δ０．７８（ｄ、６Ｊ７；Ｊ＝７）；０．８７−０．９
   ０（２ｄ　、　６ＨＨＪ＝ｆｉ、５　）　；　１．４−
   ２．０　（ｍ。 ８Ｈ）Ｈｌ、２４（ｄ、３Ｈ；Ｊ＝６．５）；１．２７
   （ｄ、、３Ｈ，Ｊ＝７）Ｈｌ、９２（ｄｄｄ、２／７゜
   ／＝７．５−７．５−１　）ｉ２．６０（ｄｄｄ、１／
   ／。 Ｊ＝７．．５−７−１’１）Ｈ３，２７（ｄｑ、　ｔ＃
   ：Ｊ＝９）；４．０８（ｄｄｄｄ、ＩＮ、Ｊ＝９；９−
   ９−２　）　ｉ　４．１４　（ｄ　ｄ　、　１１１　）
   　；　４．３８（ｄｒ／ｑ、１／／、／−２−１１）；
   ４．５４（ｄｄ、ｌＨ，ノー８）；５．６２（ｄｔ、Ｉ
   Ｂ。 ／＝１５）；６．１３（ｄ、１１１）：６．６０（ｄｔ
   　、　ＩＩＩ）ｉ７．２３（ηＬ、　５／／　）　；　
   ７．２７（ｄ、１１１） ｇ）　質量スペクトルの主なフラグメントビーク（ｍ／
   ｚ）（相対％）： ５００（９）；１０５（２８）；１１１（７８）ｉ１３
   ４（４０）；２３０（１２）ｉ２３１（２０）；２４４
   （８２）；２４５（３４）ｉ２７２（１００）；３５８
   （４２）ｉ３８６（１Ｂ）；３９５（３４）Ｈ４８２（
   ６）；４８５（３） ／１．）７°Ｌ（、”　　Ｍｅｒｃｋプレート６０　Ｆ
   　２５４におけるＲ　ｆ値：塩化メチレン：メタノール
   ＝９５：１で０５４及び塩化メチレン：メタノール−９
   ：ｌで０７６、 を重機とする白灰色の粉末である抗生物質Ｍ９’。 ２６第２因子。 ５　α）　約１１０°（ユの融点（Ｋｏｆｌｅｒ）、ｂ
   ）　元素分析の凡そのパーセント組成：炭素６７０１％
   ；水素９２４　％　；窒素５５２螢；酸素（差より）　
   １８．３３νに、 ｃ）　　（、’１）Ｃ１３中での赤外線吸収ビーク（、
   、、−’）：３７００．３６１０，３４２０，３３００
   ゜３０４０．２９６０，２９３５．２８Ｂ０゜１７３０
   ．１６６５，１６３５，１６００゜１５００．１４５５
   ，１４３５，１３７０゜１２７５．１２３５．１２’０
   ０，１１７０ｄ）ＵＶスペクトル：メタノール中におい
   て約２１５フｔ　ｍに末端吸収（第２図）、ｅ）　　Ｎ
   ｈｆＢの、ｌなビーク（δ＝ｐｐｍＨδ＝Ｉｌ　ｚ　）
   　：δ０．８８　（・ｄ　、　６１１　；　Ｊ　＝７　
   ）　；　０．９１−１１．９４（２ｄ　、　６Ｂ、　／
   　＝７　）　；　１．４−２．０　（ｍ。 ８Ｈ）、１．１６　（ｄ　、　３１１　ｉ　／＝（ｉ、
   ５３　、１．３１（ｄ　　、　　３　］Ｉ、Ｊ＝’ｌ）
   、１．９９（ｄｄｄ、２１１゜Ｊ＝　７−７−１　）　
   ：　２．４９　（ｄ　ｄ　ｔｉ　、　１　／／　。 Ｊ　＝２．５；７−１１　　）　；３、　ｏ　　７　　
   （ｂ　　、　　１　　／／　　）　；３．３４（ｄｑ、
   １＃Ｈ／＝８）、３．６８（ｓ。 ３Ｈ）；３．７０（惧、　ｌＨ）　；３．７５（ｄｄ。 ｘＪｌ、Ｊ＝１０）７３．８８（ｂ、１１１）Ｈ４，０
   １（ｄｄｄｄ、Ｊ＝９．Ｊ＝２−１１）；４．５４（ｄ
   ｄ、Ｌ）ｊ、Ｊ＝９）、５．６２（ｄｔ、ｌ＃。 ／　＝　１５　）　；　６．１６　（ｃｌ　、　ｌ　／
   ／　）　：　６．５２（ｃｌ　、　１１１　）　Ｈ６，
   ６５（ｄｌ　、　１７１　）　；７．２７（ｍ　、　５
   　Ｊｉ　）。 ｆ）　質量スペクトルの主なフラグメントビーク（ηＬ
   ／ｚ、相対９ｈ）： ５３２（０，６）ｉ１０５（２８）；１１　１（７６）
   　　；　　１３４　（４ｔＪ　）　　；　２３０　（１
   ２）　　；２　：（１（、２０：ｌ　　；　２４４　（
   ８２）　　；　２４５（３４）；２７２（１００）　；
   ３５ｇ（４０）ｉ：（８Ｇ　　（６）　　；　　３　９
   　５　　（！ｉ　　、）　　；　　４　　’！　　’／
   　　（７ン　；４８２（２）−；　５００（１，２）、
   ｇ　）　　１’ＬＣＭｅｒｃｋプＬ／−）６０Ｆ２５４
   における／＜ｆ値：ム■化メチレン：メタノール−９５
   ：工で（１，４１及び塩化メチレン：メタノール−９＝
   １で０６３、 を特徴とする日９のｈ吉晶でＺ）る抗生物質ノｌｆ　９
   ０２６第３因子。 Ｇ　ミクロモノス４うに橘する菌株ｌＩ’　Ｊ？　）？
   　ＬＬ　５．１１８番又はその同等の欠然変異株笛、同
   化しうる炭素源、同化しうる窒素源及び無機塩を含有す
   るＡ（性栄菅培養基において、深部好気性発１’ｉ’？
   条件下に、実質的な量の抗生物Ｔ１活性が生ずるまで培
   養（７、そ１２て抗生物質をそれ自体公知の手段により
   回収（７計つ随時抗生物質Ａｉ　９０２６第１因子、第
   ２因子及び第３因子と命名される主な両分を分離するこ
   とを特徴とする該抗生物質Ｍ９０２６複合体の製造法。 ７　発酵を２６〜３０’Ｃのｌ？Ａ度で行なう特許請求
   の範囲第６項記載の方法。 ８、　発酵を６．０〜８．５のｐ　１１で行なう特許請
   求の範囲第６項記載の方法。 ９、　発ｒ１１′肉汁を、低級アルカノール、ハロ低級
   アルカン、低級アルキルエステル及び低級アルキルクト
   ンから選択される有様溶媒で抽出することによって抗生
   物質活性を発酵の終りに回収する特許請求の範囲第６項
   記載の方法。 １０、　　発酵肉汁を沖液のｐＢを３．５〜８５に調節
   した後低級アルカノール、ハロ低級フルカン、低級プル
   キルエステル、及び低級アルキルヶ１ンから選択される
   有機溶媒で］１１１出することにょっ又抗生物質活性を
   発酵の終りに回収する特許請求の範囲第６項記載の方法
   。 １１　発酵肉；′１を、ｔ’液ノア７　／／を６．０〜
   ７．５に調節１７た後低級アルカノール、ハロ低級アル
   カン、低級アルキルエステル、及び低級アルキルケトン
   から選択される有ｔ！ａＷで抽出することによって抗生
   物質活性を発酵の終りに回収する特許請求の範囲第６項
   記載の方法。 １２　発酵の終りに発酵肉１１をへ′［酸エチルで抽出
   することによって抗生物質活性を回収する特許請求の範
   囲第６項記載の方法。 １３、　　抗生物質Ａｌ　９０２６第２因子及び第３因
   子を普通のクロマトグラフィー技法によって別々に分〃
   ｔするｑ￥許請求の範囲第６項記載の方法。 １４　抗生物質Ａ／９０２６第２因子又は第３因子を、
   シリカケ゛ルのカジノ、を用い且つ塩化メチレン：メタ
   ノール−９：１の混合物で流出させるカラムクロマトグ
   ラフィーによって分離する特許請求の範囲第６項記載の
   方法。 １５　微生物ミクロモノスポラ種ＮＲＲＬ１５、１１８
   番。 １６、　　炭素、窒素及び無機塩の同化しつる源を含有
   する水性栄養培養基中で好気性発酵した時に抗生物質Ｍ
   　９０２６を回収しうる量で生産することのできる微生
   物ミクロモノスポラ種ＮＲＲＬｔｓ、ｘｘ８ｉｔ又はそ
   の同等の突然変異体の生物学的に純粋な培養物。 １７、　　任意の割合で一緒にした、それぞれ特許請求
   の範囲第４及び５項に定義【７た如き抗生物質Ｍ９　Ｑ
   　２６第２因子及び第３因子。 １８、　　抗ｌ１ｇ瘍剤として用いるだめの、抗生物質
   Ｍ９０２６復合体、抗生物質Ｍ９０２６第２因子、及び
   第３因子、或いはこれらの混合物から選択される化合物
   。 １９、抗生物質Ｍ　９０２６種合体、抗生物質Ｍ９０２
   ６第２因子、及び抗生物質Ｍ９０２６第３因子から選択
   される少くとも１種の化合物を、製薬学的に許容しうる
   担体と混合して含んでなる製薬学的組成物。