JPS59182340A - 分光螢光光度計 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 イ　産業上の利用分野 本発明は分光蛍光光度計における感度設定装置に関する
。

口　従来技術 吸光分析において吸光度は試料への入射光と試料透過光
の強度の比率であるから光の強さの如何とは関係なく一
定の数値であり、透過率或は吸光度の記録に当っては感
度設定の必要はない。しかし蛍光分析では蛍光の強さを
測定するので、透過率のように０％から１００％と云う
ように記録スケールの範囲は決まっていない。このため
蛍光分析では記録装置の感度設定が問題となる。通常感
度設定は、濃度既知の試料の蛍光のスペクトルを適当な
スケールで記録し１同じ感度で任意試料の蛍光スペクト
ルを記録するようにしている。このようにすると任意試
料の蛍光の強さから直ちにその試料の濃度を知ることが
できる。従来分光蛍光測定で上述した感度を設定する番
こは、既知試料について蛍光測定を行ってこれが適宜ス
ケールで記録されるように感度を設定していたが、これ
では溶媒とか試料セルの影響が除去されていないので、
任意試料の蛍光を同じ感度で測定記録しても、記録され
た蛍光強度の比率から直ちに濃度を知ると云うことがで
きなかった。

溶媒とか試料セルの影響を除くには試料セルに溶媒のみ
を入れたもの即ちブランク試料について蛍光測定を行っ
て、既知試料及び任意試料の蛍光測定値から引算した残
りについて比較する必要がある。ブランク試料の影響を
除くため、セクターミラーを用いて励起光を２光束に分
割し、ブランク試料と任意試料とを交互に照射し、両者
の蛍光を時分割的に交互に測定して両者の差を算出し記
録すると云う方法も用いられる力へセクターミラーを回
転させるので装置が複雑高価となり、また信号処理回路
も複雑となる。

ハ目的 本発明はセクターミラーのような運動機構を用きる分光
蛍光光度計を提供しようとするものである〇 二構成 本発明分光蛍光光度計はスペクトルが記憶できるメモリ
ファイルを少くとも一つ備え、一つのデータとこのメモ
リファイル内のデータとの間で引算演算する機能と、こ
の引算結果の最大値を検出する機能と、この最大値を記
録計上で指定された１直で表示させる場合の倍率を算出
する機能と、任意信号【ここの１音率を掛けて記録計に
記録する機能を有し、ブランク試料に対する蛍光スペク
トルを上記メモリファイノ困こ記憶させておき、標準試
料について蛍光スペクトルを測定し、その測定出力から
上記記憶されたブランク試料の蛍光の値を引算し、この
引算結果から最大値を検出すると、この最大値は標準試
料の蛍光の正味の最大値であるから、これが記録計上で
指定した高さで記録されるように記録の倍率を算定し、
この倍率を記憶しテ、任意試料９こついて蛍光を測定し
、メモリファイル内のフランク試料の蛍光直を引算した
結果に−１ 上記ｊ台率を掛算して記録間に記録させることシこよっ
て標準試料に対する任意試料の蛍光の強度比を記録上に
直読的に記録し得る所に特徴を有する。

ホ　実施例 第１図は本発明の一実施例を示す。１は制御用コンピュ
ータであり、２が分光蛍光光度計の光学系及び測光係即
ち分光蛍光光度計の主体部である。

Ｍ　１　、　Ｍ　２　、　Ｍ　３は第１．第２．第３の
メモリファイル、３は記録計である。本発明の要部は上
記制御用コンピューター、メモリファイルＭ１〜Ｍ３及
び記録計３よりなる制御回路である。制御用コンピュー
タ（ＣＰＵと略記）は分光蛍光光度計の波長走査の制御
、測光出力のサンプリング及びＡ／Ｄ変換、このＡ／Ｄ
変換値のレジスタへの取込ミ、種々の演算、データのメ
モリファイルＭ１〜Ｍ３への格納、Ｍ１〜Ｍ３からのデ
ータの読出し、記録計へのデータの出力、記録計％の動
作の制御等を行っている。

第２図はＣＰＵ１の動作中本発明に関する部分の動作の
７０−チャートである。第２図を参照してＣＰＵ１の機
能を説明する。第２図Ａｔこ示すよう番こ、ブランク試
料をセットして蛍光スペクトルの測定を開始させる（ｆ
）。ブランク試料の蛍光の測定値をメモリファイルＭ１
にファイルする（口）。ブランク試料の蛍光測定が終っ
たら標準試料をセット口、標準試料の蛍光スペクトルの
測定を行う（ハ）。

標準試料の蛍光の測定値をメモリファイルＭ２にファイ
ルするに）。標準試料の測定が終了したらメモリファイ
ルＭｌ、Ｍ２から同一波長に対する測定データＭｌ、Ｍ
２を読出しく標準試料の蛍光）−（ブランク試料の蛍光
）の演算を行い（ホ）結果をメモリファイルＭ３に入れ
る（へ）。測定波長の全域について上の演算動作が終つ
１こら、メモリファイルＭ　３のデータを順次読出し最
大値を検出する（ト）。

Ｍ３の内容は標準試料の蛍光測定値からフランク試料の
蛍光測定値を引算したものであるから、標準試料の正味
の蛍光スペクトルの測光値である。

この測光値から最大値を選出したら、予めＣＰＵに入力
しである、記録計の記録紙上で標準試料の蛍光スペクト
ルの最大値をどの高さに記録するかと云うデータ（設定
値）と標準試料のスペクトルの最大値で割算して係数１
（を算出しくイ）、メモリに記憶しておき、メモリファ
イルＭ２．Ｍ３をクリヤして（す）係数にの決定動作を
終る。次に任意試料の測定の場合、第２図Ｂに示すよう
に任意試料をセットして蛍光測定を行い（！Ｊ５、測定
データをＭ２にファイルしくヌ）、測定が終ったらＭｌ
、Ｍ２から同一波長のデータを読出しＭ２−Ｍｌの引算
を行い（）０、結果をＭ３１こファイルする（３）。そ
の後Ｍ３のテークを読出し先に求めておいた係数ｋを掛
算しくワ）、記録計に入力して任意の試料の正味の蛍光
スペクトルを記録する。この記録は標準試料の蛍光の最
大値が所定の高さで記録されるよう蚤こ縦軸スケールが
設定されているから、この記録における最大値の読みと
標準試料の最大値の読みの比率取れることになる。

上の動作をグラフで示すと、第３図番こ示すよう（こメ
モリファイルＭ１のデータはブランク試料の蛍光スペク
トル（８）、Ｍ２のデータは標準試料の蛍光スペクトル
ＣＢ）でＭ３のデータは（Ｂ）−■であって、この（Ｂ
）−（Ａ）の最大値ｍを検出し、第４図に示すようにＭ
３のデータで最大値ｍが記録紙上でＹｍの高さに記録さ
れるようにＭ３のデータに掛ける係数ｋが決定される。

次に任意試料の蛍光測定値をＭ２１こ入れ、Ｍ２のデー
タからＭｌのデータを引算して係数ｋを掛けて記録計１
と入力すれば標準試料に対するのと同じ感度で蛍光スペ
クトルの記録がなされる。

なお上述実施例ではメモリファイＪしは三つあるが、Ｍ
３はなくてもよく、この場合第２図Ａの７０−チャート
で（へ）のステップはなくなり、（ホ）のステップでＭ
２Ｍｌを求め直接その最大値を検出するようになる。ま
た第２図Ｂのフローチャートでもステップ″ＱＯでＭ　
２−　Ｍｌを求め、結果に直ち１こ係数ｋを掛けて記録
計蚤こ入力する。尚さらにメモリファイルＭ２もなくて
もよい。この場合第２図Ａの７０−チャートでに）〜（
へ）のステップがなくなり、代りに標準試料の測定を行
いながら（ハ）、各波長毎に直接得られたデータからＭ
ｌのテークを引算ｌ／、この引算結果から直ちに最大値
を求め榊ζステップは（イ）へ行く。また第２図Ｂで（
ヌ）（ＪＯ（９）のステップがなくなり、各波長毎に任
意試料の蛍光測定値からＭｌのデータを引算し一′、ス
テップ（曹へ行く。

まｔう上述実施例では標準試料の蛍光測定データから単
純に最大値を検出して、これが所定の値て記録計の記録
紙上に記録されるようにしているか、必要に応じて蛍光
スペクトルから特定部分を除いた残りの部分或は特定部
分内だけから最大値を検出するようにしてもよいことは
云うまでもない。

へ効果 本発明分光蛍光光度計は上述したようにブランク試料の
蛍光スペクトルをメモリにファイルしておき、他の森料
の測定データから引算するので、単光束の装置でブラン
ク試料の影響のない試料の正味の蛍光強度が求まり、こ
の正味の蛍光強度に対して記録計上のスケールを設定で
きるので、試料の濃度が直読的に読取れる。

【図面の簡単な説明】

一チヤードで、Ａは記録計上の倍率設定動を示し、Ｂは
任意試料の測定時の７０チヤート、第３図は本発明装置
の機能を説明するグラス第４図は記録紙りの標準試料の
蛍光記録のグラフである。 １・・・制御用コンピュータ、２・・・分光蛍光光度計
の主体部、３・・・記録計、Ｍｌ、Ｍ２．　　λ１３・
・・メモリファイル。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. スペクトルが記憶できるメモリファイル内少くとも一つ
   備え、一つのデータとこのメモリファイル内のデータと
   の間で引算を行う機能、この引算結果において指定範囲
   内で最大値を検出する機能、この最大値が記録計上で所
   定位置に記録されるようにするため倍率を検出する機能
   、任意データに上記倍率を掛けて記録計に出力する機能
   を有する制御回路を設けたことを特徴とする分光蛍光光
   度計。