JPS59147267A - 免疫学的自動分析方法およびこれに用いる反応容器 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は免役学的自動分析方法およびこれに用いる反応
容器に関するものである。

近年、医療の進歩に伴ない極微量の生体成分の分析が可
能となり、各柚疾患の早期診断等に役立っている。例え
ば、α−フェトプロティン、癌胎児性抗原等で代表され
る急性腫瘍、インシュリン、サイロキシン等で代表され
るホルモンの兵′濱分泌迭患、免役グロブリン等で代表
される免役疾患等の難病とされていた各棟疾患のｅ町が
早期にできるだけでなく、それら疾患の治療後のモニタ
、あるいは最近では薬物等の低分子のハブテン（不完全
抗原）も測定可能となり薬物の投与計画作成にも役立っ
ている。

これらの生体成分の多くは抗原抗体反応を利用した免疫
化学的な方法で分析され、このような免疫化学的反応を
利用した分析方法として、従来種々の方法が提案されて
いる。例えば、抗原抗体反応の結果化じる抗原抗体複合
物の凝集塊等の有無を、凝集法、沈降法、比濁法等によ
って検出してＱ’ｒ望の生体成分を分析する方法がある
。しかし、これらの分析方法は多量の抗原抗体複合物を
必要とし、感度的に劣るため、専ら定性分析あるいは半
定量分析に採用されている。また、このような分析方法
の欠点を補うために、抗体または抗原を炭素粒子や合成
樹脂等の微粒子に結合させて被検物質との抗原抗体反Ｊ
Ｊ６を行なわせて凝集法あるいは比濁法により扱検物′
Ｒを分析する方法や、抗体または抗原に放射性同位元素
、螢光性物質、発光性物質あるいは酵素等の検知感度の
高いマーカをｍＷした徐脈抗体または抗原を用いて抗原
抗体複合物を高感度で検出して被検物質を分析する方法
も提案されている。しかし、前者の微粒子を用いる方法
は後者のマーカを用いる方法に比べ感度的に劣るため、
最近では後者の検知感度の高いマーカを用いる分析方法
が主流になっている。

このようなマーカを用いる分析方法としては、マーカと
して放射性同位元素を用いる放射性免役分析法、螢光性
物質を用いる螢光免疫分桁法、酵素を用いる酵素免役分
析法等が知られているが、なかでも酵素免疫分析法は特
殊な設備や測定技術を必要とせず、一般に背反している
比色計を用いて容易に行なうことができるので、最近特
に注目を集めている。この酵素免疫分析法は、免疫化学
的反応の有無により標蛾さｎている酵素の活性の変化量
を直接求めて被検物質を定量するホモジニアス（Ｈｏｍ
ｏｇｅｎｅｏｕｓ　）　酵素免疫分析法と、抗原または
抗体と反応した酵素橡脈ｆｊｃ体または酵素橡祿１７Ｌ
原と未反応のそれとを洗浄操作によりＢ−Ｆ分離し、こ
のＢ−Ｆ分離後の標識酵素の活性量を求めて被検’＊質
を定量するヘテロジニアス（Ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕ
ｓ　）酵素免疫分析法との２つの方法に分類される。し
かし、前者のホモジニアス酵素免疫分析法は、単純な操
作で行なうことができるが、薬物等の低分子のハブテン
しか分析できず、高分子である生体成分の分析ができな
い欠点がある。これに対し、後者のへテロジニアス酵素
免疫分析法はＢ−Ｆ分離を行なうための洗浄操作を必要
とするが、被検物質が低分子であっても高分子であって
も適正に分析でき、その分析対象が極めて広範囲である
ところから一般化されつつある。

かかるヘテロジニアス酵素免疫分析法としては、競合法
、サンドインチ法等が知られている。競合法は、第１図
に示すように、例えはプラスチック等の合成樹脂やカラ
スより成る不溶性のビーズ１にサンプル中の被検物質と
抗原抗体反応を起す抗体または抗原を予め固定化し、こ
のビーズ１とサンプルおよびその被検物質２と同一物質
に酔素榛縁した標識試薬８とを反応容器内に収容して抗
原抗体反応を行なわせ、その後洗浄を行なって抗原抗体
反応によりビーズ１に競合して結合した被検物質２およ
びｇＡ識試桑８と、結合していないそれらとをＢ−Ｆ分
離してから、ビーズ１を収容する反応容器内に標識試薬
δ中の標識酵素と反応する発色試薬を加えて反応させた
後その反応液を比色測定して標識酵素の酵素活性を求め
て被検物質２を定量するものである。また、サンドイン
チ法は、第２図に示すように、競合法と同様にサンプル
中の被検物質と抗原抗体反応を起す抗体または抗原を予
め固定化した不溶性のビーズ５を用い、先ずこのビーズ
５とサンプルとを反応容器内に収容して抗原抗体反応を
行なわせてサンプル中の被検物質６をビーズ５に結合さ
せ、次に洗浄を行なってＢ−Ｆ分離した後、そのビーズ
５を収容する反応容器内に被検物質６と抗原抗体反応を
起す物質を酵素で標識した標識試薬７を収容して抗原抗
体反応を行なわせ、その後再び洗浄を行なってＢ−Ｆ分
離してから標線試薬７中の標識酵素と反応する晃色試薬
を加えて反応させた後、その反応液を比色測定して標ｈ
ｅ素の酵素活性を求めて被検物質６を定量するものであ
る。

上述したヘテロジニアス酵素免疫分析法は従来用手法で
行なわれているが、最近ではその自動化が進められてい
る。この自動化にあたっては、抗原抗体反応を行なわせ
る反応容器を株返し便用する方式と、これを使い捨てと
する方式とが考えられるが、第１図および第２図におい
ては抗゛体または抗原をビーズに固定化しているため、
前者の方式を採用する場合にはこのビーズを反応ライン
中の反応容器内に投入する装置が必要になると共に、分
析終了後に反応容器内に残存するビーズを取出して廃棄
する装置が必要となり、分析装置全体が大形かつ構成が
複雑高価になる不具合がある。また、後者の方式を採用
する場合には分析終了後ビーズおよび反応容器を廃棄す
るため１サンプルあたりのランニングコストが高くなる
不具合があると共に、前者の場合と同様分Ｖ］に先立っ
て反応ライン中の反応容器内にビーズを投入するための
装置か必要となるため、分析装置全体が大形かつ構成が
飯維、高価になる不具合がある。このような不具合は、
マーカを用いる上述した放射免役分析法、螢光免疫分析
法等を自動化する場合でも同様に生じるものである。

本発明の目的は上述した不具合を解決し、小形で、構成
が簡単かつ安価な分析装置によって実施でき、しかもラ
ンニングコストを安価にできる免疫学的自動分析方法を
提供しようとするものである。

本発明は、内壁の少く共一部に所定の抗体または抗原を
固定化した反応容器と、所定の抗体または抗原を所定の
物質で標識した標識試薬とを用い、反Ｆ６容器内で抗原
抗体反応を行なわせてサンプル中の被検物質を免疫学的
に自動的に分析するにあたり、前記反応容器を反応ライ
ンに連続的に供給して該反応ライン中で所要の抗原抗体
反応を行なわせ、所定の免疫学的分街が終了した反応容
器を反応ラインから連続的に排出することを特徴とする
ものである。

このように、反応容器として内壁の少く共一部に所定の
抗体または抗原を固定化したものを用い、これを使い捨
てにすれは、ランニングコストを安価にできると共に、
上述したようなビーズの投入装置や取出し装置が不要と
なるから、従来生化学分析に使用されているような小形
で、構成が簡単かつ安価な分析装置によって実施できる
。また、反応容器の内壁に抗体または抗原を固定化する
ものであるから、比較的多くの抗体または抗原を固定化
でき、したがって分析精度も向上させることができる。

一方、上述したヘテロジニアス酵素免疫分析法において
は、１つの被検物質の分析中に競合法においては１回、
サンドインチ法においては２回のＢ−Ｆ分離が必要とな
る。これはビーズの代わりに、上記のように内壁の少く
共一部に抗体または抗原を固定化した反応容器を用いる
場合でも同様である。本発明においては、このように抗
体または抗原を内壁の少く共一部に固定化した反応容器
を用い、これを反応ラインに連続面に供給して分析を行
なうものであるが、この場合、反応ラインに供給された
反応容器を分析開始に先立って洗浄するのが好適である
。このようにすると、更に１回の洗浄工程が加算され、
上述した酵素免疫分ＩＴ法においては１つの被検物質の
分析にＢ−Ｆ分離を含む少く共２回の洗浄工程が必要と
なる。この場合、各洗浄工程毎に専用の洗浄装置を配置
することも考えられるが、このようにすると装置が大形
かつ複雑、高価になる不具合がある。このような不具合
は、マーカを用いる上述した放射免疫分析法、螢光免疫
分析法等を自動化する場合でも同様に生じるものである
。

このような不具合を解決する方法として、反応ラインを
エンドレス状に構成すると共にこの反応ライン中に洗浄
装置を設け、反応ラインに供給された反応容器を洗浄装
置に循環搬送してＢ−Ｆ分離を含む少く共２回の洗浄を
行なうようにすることが考えられる。また、かかる方法
を実施する装置としては、例えばターンテーブルの円周
上に反応容器を順次供細し、各反応容器についてターン
チーフルが３回または４回回転することによって分析を
行なうように構成することができる。しかし、このよう
な自動分析装置においては、ターンテーブルが一周して
所定の個数の反応容器が供和され、その各反応容器にサ
ンプルを分注した後、ターンテーブルかさらに２回また
は３回回転するまでは次の反応容器の供給およびサンプ
ルの分注を行なうことができず、反応容器の供給および
サンプル分注が不規則となり、反応容器供給装置および
サンプル分注器の駆動タイミング制御が面倒となるだけ
でなくＩＤの制御、分析結果の処理なども面倒となる不
具合かある。また、このように反応容器の供給およびサ
ンプル分注か連続して行なうことかできないと、サンプ
ル処理能率が低下する不具合もある。

本発明の目的はこのような不具合をも解決し、各サンプ
ルの分析中同じ洗浄装置に反応容器を循環させて通過さ
せて洗浄を行ない、しかも反応容器の供給およびサンプ
ルの分注を連続的に行なうことができるようにした免役
学的自動分析方法を提供しようとするものである。

本発明は、内壁の少く共一部に所定の抗体または抗原を
固定化した反応容器と、所定の抗体または抗原をＨ「定
の物質で標酸した標識試薬とを用い、反応容器内で抗原
抗体反応を行なわせてサンプル中の被検物質全免佼学的
に自動的に分析するにあたり、ＭｉＪ記反応容器をエン
ドレス状に構成した反応ラインに連続的に供給し、この
反応ラインに供給された反応容器を反応ライン中に設け
た洗浄装置に循環搬送しながら反応容器にサンプルおよ
び標識試薬を連続的に分注して所要の抗原抗体反応を行
なわせると共に、反応容器に結合した抗体または抗原と
、反応容器に結合していない抗体または抗原とを分離す
るＢ−Ｆ分析を含む少く共２回の洗浄を行ない、所定の
免役学的分析の終了した反応容器を反応ラインから連続
的に排出することを特徴とするものである。

更に本発明の目的は、上述した免疫学的自動分析方法に
用いるに好適な反応容器を提供しようとするものである
。

本発明の反応容器は、上部に開口を有し、かつ内壁の少
く共一部に内定化した所定の抗体または抗原を具えるこ
とを特徴とするものである。

以下図面を参照して本発明の詳細な説明する。

第８図は本発明の方法を実施する酵素免役自動分桁装置
の一例の構成を示す線図であり、第２図に就き説明した
サンドインチ法を採用するものである。ターンテーブル
１１はその周縁に内壁の少く共一部に所定の抗体または
抗原を固定化した３７個の反応容器（以下キュベツトと
呼ぶ）１２を同一円周上に等間隔に着脱自在に保持し得
るキュヘットホルタ１８を具え、このホルダ１３に保持
されたキュベツト１２を水平面内で矢印で示す方向に所
定のピッチ（例えは１５秒）で間欠的に回動する。この
ターンテーブル１１の間欠的回動によるキュベツトホル
ダ１３のキュベツト保持部の停止位置を符号８０〜ｓ８
７で示す。本例では停止位１ｆｆＳ１において、キュベ
ツト供給装置１５によりキュベツトホルダ１ａに所定の
ピッチでキュベツト１２を連続的に供給して保持させる
。次の停止位置Ｓ２においては、キュベツト１２がある
か否かを図示しない検出手段により検出し、キュベツト
１２か保持されていることが検出されたら洗浄装置１６
によりイオン交換水、免疫分析用緩愉液、生理食塩水等
の洗浄液を注入排出してＢ−Ｆ分離やキュベツト１２の
洗浄を行なう。

また、停止位置Ｓ４においては第１試薬分注装置１７に
より第１試薬１８を、停止位１ｔｆｓ５においては第８
試薬分注装置１９により第３試薬２゜を、停止位置Ｓ６
においては第２試薬分注装置２１により第２試薬２２を
、停止位置Ｓ７においてはサンプル分注装置２３により
サンプラ２４の所定のサンプル吸引位置にあるサンプル
カップ２５からサンプルを、そして停止位ｊ＆　８２．
においては第４試薬分注装置２６により第４試桑２７を
それぞれ所定のピッチで連続的に分注する。ここで、第
１試薬１８としては緩衝液を、第２試薬２２としではサ
ンプル中の被検物質に応じた師素標脈臥薬を、第３試薬
２０としては徐訟酵素と反応して党色する発色試薬を、
そして第４試桑２７としては上記徐詠酔累と発色試薬と
の反応を停止させる反１心停止試薬をそれぞれ用いる。

また、サンプラ２４は任意の形式のものを用いることが
できるが、本例では各々が１０個のサンプルカップ２５
を保持する多数のラック２４ａを並べて保持し、左側の
列のランクは第８図に２６いて下方へ順次移動させてサ
ンプル分注位置へ漬込し、公社を終ったサンプルカップ
を保持する右側の列のラックは上方へ移動させる。サン
プル分注位置にあるラックはターンテーブル１１の回動
と同期して矢印Ｓの方向へ間欠的に移動させる。このラ
ックに保持した総てのサンプルの分注が終了したらこの
ラックは右側のラック列の下側に送られ、圧側の列の一
番下側にあるラックが次にサンプル分注位置に送られる
。このようにして順次のサンプルを所定のピッチで連続
的にサンプル分注位置に送ることができる。

更に、停止位置５１１２においては、第４試薬２７が公
社された最終検液を比色装置２８により比色測定し、こ
の比色測定の終了したキュベラ）１２を停止位置Ｓ　に
おいてキュベツト排出装置２９５ によりキュベツトホルダ１８がち脱落させる。なお、本
例では比色装置２８により検液をキュベツト１２を通し
てダイレクトＩＩ光し、キュベツト排出装置２９におい
てはキュベツトホルダ１８がら脱落させたキュベラ）１
２を検液と分離してそれぞれ廃菓用容器に収容する。

次に、第３図に示す酵素免疫自動分析装置の動作を第４
図および第５図をも参照しながら説明する。

本例ではサンドインチ法により分析を行なうものであり
、各キュベツト１２についてターンテーブル１１をはけ
３回転させて、分析に先立つ１回の洗浄と、分析中の２
回のＢ・ＦＯ離とを行なって谷サンプルを分析する。こ
のため、サンプルの分注、第１．第２．第３．第４の試
薬の分注、キュベツト１２の供給、排出、比色測定など
はターンテーブル１１が３ピツチ移動する間に１回動作
するようになっている。たたし、洗浄は上述したように
各キュベツト１２について３回行なうのでターンテーブ
ル１１の各移動ピッチ毎に行なうようになっており、こ
のため停止位置Ｓ２にはキュベうに動作させるためには
キュベツトホルダ１３に装填し得るキュベツト１２の個
数はｎを１，２゜８、・・・・・とするとき８ｎ＋１ま
たは３ｎ＋２とする必要がある。本例ではｎ−１２とし
てキュベツトホルダー３に３７個のキュベツト１２を装
填し得るようにしている。

ターンテーブル１１の１回転目においては、先ず停止位
ＷＳ工において第４図に不すようにキュベツト供給装置
１５がら内壁の少く共一部に所定の抗体または抗原を固
定化したキュベラ）１２がキュヘットボルダ１３に供給
保持され、このキュベツト１２は次の停止位置ｓ２にお
いて図示しない検出手段により検出されて洗浄装置１６
により分析に先立って洗浄される。キュベツト１２が停
止位置Ｓ　で供柑されて８ピツチ込られた停止位１Ｓ、
において、第１試楽分仕装隠１７により緩衝液より成る
第１試薬１８が所定型分注され、史に８ピッチ送られた
停止位置ｓ７においてサンプル分注装置２３によりサン
プルが所定緘分比されて第１回目の抗原抗体反応が開始
される。第５図においては当なキュベツトに対して行な
われる動作タイミングを左下がりの斜線で示しである。

次にターンテープ１１は２回転目に入いって停正位置Ｓ
２において洗浄装置１６による洗浄、すなわち第１回目
のＢ−Ｆ分離が行なわれた後、停止位置Ｓ６に到達し、
ここで当該キュベツト１２内に第２試薬分注装置２１に
より酵素標識試薬である第２試薬２２が所定量分注され
て第２回目の抗原抗体反応が開始される。

更に、ターンテーブル１１ば３回転目に太いって停止位
置Ｓ２において洗浄装置１６による洗浄、すなわち第２
回目のＢ−Ｆ分離が行なわれた後、停止位置Ｓ、に到達
し、ここで当該キュベラ）１２内に第８試薬分圧装置１
９により発色試薬である第３試薬２０が所定量分注され
て発色反応が開始される。次に、当該キュベツト１２は
停止位置Ｓ２゜に剣達し、ここで第４試薬分注装置２６
により反応停止数である第４試薬２７が所定量分注され
て発色反応が停止され、更に８ピッチ送られた停止位置
Ｓ８２において、当該キュベツト１２に収容されている
検液が比色装置２８によりキュベツト１２を通してダイ
レクト測光される。このキュベラ）　１２　ハ更に８ピ
ッチ送られたターンテーブル１１の第８回目の最後の停
止位置”８５においてキュベツト排出装置２９によりキ
ュベツトホルダ１３から排出され、キュベツト１２と検
液とが分離されてそれぞれの廃棄用容器に収容される。

このようにして停止位置Ｓ、、においてキュベツト１２
が排出されたキュベツト保持部は、更に３ピッチ送られ
て停止位置Ｓ工に判達し、ごこでキュベツト供給装置１
５から新たなキュベツトの供給を受ける。この新たなキ
ュベツトに対する動作タイミングは第５図において右下
がりの斜線で示しである。

上述したようにして１個のキュベツトについての分梳動
作はターンテーブル１１がはは８回転することにより終
了するが、本例ではサンプル分注、第１．第２．第８．
第４の試薬分圧、キュベツトの供給、排出、比色測定は
ターンテープ／ｌ／１１が３ピツチ移動して１回動作す
ると共にターンテープ／ｌ’　ｌ　１には３７個（ａｘ
１２＋ｌのキュベツト１２を等間隔に装着できるので、
例えば停止位置Ｓ７においてサンプル分注装置２８が動
作するときに位置するキュベツトはターンテーブル１１
の１回転毎に１個づつずれることになる。このような事
態は３ピツチについて１回動作するすべての動作につい
て云えるので、サンプル分注は８ピツチに１回の割合で
連続的に行なうことができる。

したがってサンプルのＩＤ制御や、分析結果の処理など
も一定の周期で行なうことができるようになり、各棟の
制御が容易となる。さらに反応ラインをエンドレスとし
、反応ライン中に設けた１つの洗浄装置１６に、キュベ
ツト１２を循環搬送してＢ−Ｆ分離を含む洗浄を繰返し
行なうようにしたから、装置全体の構成を小形かつ間車
とすることができ、しかも安価にできる。また、キュベ
ツト１２の内壁の少〈共一部に抗体または抗原を固定化
したから、反応容器とは別に第１図、第２図に示したよ
うに抗体または抗原を固定化したビーズを用いるものに
比ベランニングコストを安（ｄｊにできる。

第６−ｉ１２！Ｊは本発明の分析方法を実施する酵素免
役自動分析装置の他の例の構成を示す線図であり、第３
図に示す構成要素と同じものには同一符号を付けて示し
である。本例では第１図に就き説明した競合法を採用す
るものであり、この場合には所定の抗原または抗体を結
合させたキュベツトにサンプルと酵素標識試薬とを加え
て抗原抗体反応を行なわせた後Ｂ−Ｆ分離を行ない、次
に酵素発色試薬を加えた後比色測定を行なうものである
から、分析に先立つキュベツトの洗浄を含めて２回の洗
浄を行なうことになる。したがって、第６図に示す例に
おいてはキュベツト１２をターンテーブル１１のキュベ
ツトホルダ１８に２ｎ＋１個装填し得るようにし、サン
プル分圧、試薬分注、キュベツトの惧絽排出、比色測定
などはターンテープ／ｌ’ｌｉが２ピツチ移動する毎に
１回動作させるようにすれ、ば、サンプルの分注を連続
的に、すなわち２ピツチ毎に行なうことができる。

第６図においては、停止位置Ｓ工においてキュベツト供
給装置１５により内壁の少く共一部に所定の抗体または
抗原を固定化したキュベラ）１２を供給し、停止位置Ｓ
８においてはキュベット１２の有無を検出して洗浄装置
１６により供給されたキュベツト１２の洗浄やＢ−Ｆ分
離を行なう。

また、停止位ＷＳ５においては第１試薬分注装置２１に
より酵素標識試薬である第１試薬２２を所定量分注する
と共に、サンプル分注装Ｍ２８によりサンプルを所定量
分注する。不例でもサンプルは複数のサンプルカップ２
５を保持する複数のラック２４ａを有するサンプラ２４
から順次にサンプル分注位置に供給するようにする。更
に、停止位置Ｓ６においては第２試薬分注装ｗ１９によ
り発色試薬である第２試薬２０を所定量分証し、停止位
置Ｓ８２においては第３試薬分注装置２６により反応停
止液である第８試第２７を所定量分注する。更にまた、
停止位置Ｓ８４においては比色装置２８により最終検液
をキュベラ）１２を通し士ダイレクト測光し、また停止
位置”８６においてはキュベツト排出装置２９により比
色淘」定の終了したキュベツト１２をキュベツトホルダ
１８から脱落させて、キュベラ）１２および検液とを分
離してそれぞれの廃棄用容器内に収容する。

第６図に示す自動分析装置の動作タイミングを第７図に
示す。停止位置Ｓ０において供給された成るキュベツト
１２についての分析動作について見ると、先ず２ピッチ
送られた停止位置Ｓ８において洗浄装置１６により分析
に先立つ洗浄が行なわれ、その後２ピッチ送られた停止
位１ｔｓ５において第１試薬分注装置２１およびサンプ
ル分圧装置２８によりそれぞれ酵素標識試薬である第１
試薬２２およびサンプルが分注されて抗原抗体反応が行
なわれる。次に２回転目に入いつ、停止位置Ｓ８におい
て図示しない検出手段によりキュベツトが検出されて洗
浄ｄＡｔＥｆｆｉ１６によって洗浄、すなわちＢ−Ｆ分
院が行なわれた後、停止位置Ｓ６において第２試奈分注
装重１９により発色試薬である第２試薬２０・が分注さ
れて発色反応が行なわれる。

この発色反応は停止位置Ｓ８２において第８試薬分注装
置２６により反応停止液である第８試薬２７が分注され
ることにより停止し、このキュベツト１２が停止位置”
８４に到達して検液がキュベツト１２を辿して比色装置
２８により比色測定される。

その後２ピッチ送られた停止位１ｉｉｓ８６において、
キュベツト１２はキュベツト排出装ｗ２９によりキュベ
ツトホルダ１３から排出される。第７図には、当該キュ
ベツトに対して行なわれる動作タイミングを左下がりの
斜線で示し、また当該キュベツトの排出後にそのキュベ
ツト抹持部に新たに供給されるキュベツトに対して行な
われる動作タイミングを右下がりの斜線で示しである。

このようにして各キュベツトについてターンテーブル１
１をほぼ２回転させることにより各サンプルの所定の分
析を行なうことができる。また、本例ではターンテーブ
ル１１のキュベツトホルダ１３に８７個のキュベツト１
２を装損し得るようにし、サンプル分圧、試薬分注、キ
ュベツトの供慣、排出、比色測定を２ピツチ毎に１回行
なうようにしたため順次のサンプルを２ピツチの周期で
連続的に分注することができる。ただし、洗浄装置１６
はターンテーブル１１が１回転した後は各ピッチ毎に動
作しなければならない。

以下、第８図および第６図に示した実施例の各部の具体
的構成について説明する。

第８図Ａ−０はキュベツト１２の一例の構成を示すもの
で、第８１ｆｆｌＡは斜視図を、第８図Ｂは第８１ＪＡ
のＩ−Ｉ線断面図を、第８図Ｃは同じく■−■線断面図
を示す。本例ではキュベツト１２は透明な合成樹脂の成
形品であり、全体として偏平な箱状をしており、上部に
は開口１２ａが形成されていると共に、内壁の少く共一
部には所定の抗体または抗原が固定化されている。一方
の主表面１２ｂにはＴ字状の突条１２Ｃを一体に形成し
、後述するようにこの突条１２０の弾性復元力を利用し
てキュベツト１２をキュベツトホルダ１８に保持スるよ
うにする。キュベツト１２の側壁１２ｄおよび１２８は
測光光軸に対して垂直に配置され、これら側壁の下方を
幾分凹ませて入射窓１２ｆおよび出射窓１２ｇを形成す
る。このように入射式および出射窓を側壁から凹ませて
設けることにより、この部分を手で汚したり１傷付けた
りすることがなくなると共に周囲からの迷光が入射する
ことも少なくなる。また第８図Ｃに明瞭に示すようにキ
ュベツト１２の下方は半円柱状となっているから、この
部分に抗体または抗原を固定化すれば少量の検液によっ
て有効に測光ができる。なお、かかる合成樹脂より成る
キュベツト１２への抗体または抗原の固定化は、物理的
吸着法あるいは化学的結合法によって行なうことができ
る。また、キュベツト１２は合成樹脂に限らず、ガラス
製とすることができ、この場合には共有結合法等の化学
的結合法によって抗体または抗原を固定化することがで
きる。更に、抗体または抗原の固定部位は、この抗体ま
たは抗原、あるいはこれに結合する抗原または抗体や標
識酵素等の蛋白質が測定光に影響を与える場合には、入
射窓１２ｆおよび出射窓１２ｇの部分を除くようにすれ
ばよい。

第９図は第８図に示したキュベツト１２を用いる比色装
置ｔ２８の構成の一例を示すものである。

本例では、光源ランプ２８ａからの元をレンズ２８ｂに
より集光し、絞り２８０を経てキュベツト１２の入射窓
１２ｆに入射させる。と共に、出射窓１２ｇから出射す
る光を絞り２８ｄおよび光学フィルタ２８ｅを経てディ
テクタ２８ｆに入射させる。なお、キュベツト１２はキ
ュベツトホルダ１３の周縁に形成した切欠き１３ａ内に
弾性的に嵌合されて保持されている。

第１０図は上述したキュベツト１２を多数配列して収納
するマガジンの一例の構成を示す斜視図である。このマ
ガジン８０内へのキュベツト１２の収納は使用者が行な
うものではなく、使用者はキュベラ）１２の収納された
マガジンを入手するようにすることができ、これにより
キュベツト１２の損傷や指紋の付着をより確実に防止で
きる。マガジン３０は合成樹脂の成形品または金属製と
することができ、本例ではその中に矢印Ａで示す横方向
に１０個、これと垂直な矢印Ｂで示す縦方向にも１０個
、合計で１００個のキュベツト１２を配列収納しである
。マガジン８０の一方（７）　側１１３１　ａの一端に
キュベツト１２の厚さにほぼ等しい幅を有する出口３１
ｂを形成する。キュベツト１２がこ１７）ｌｉ口３１ｂ
から正しい姿勢で排出されるように幅の狭い前側壁８１
０の出口３１ｂと瞬接する部分に弾力性を有する突片３
１０を形成する。マガジン３０にはさらに上壁８１ｄか
ら後側壁ａｌｅまで延在する３本の溝８１ｆを形成する
。さらにキュベツト配列体と後側壁３１ｅとの間には押
板３２を介在させ、後述するようにこの押板８２を矢印
Ｂ方向に移送させることによりキュベツト配列体をＢ方
向へ同時に移動できるようになっている。さらに起が切
欠き８１ｇに嵌合するようにして１逆挿入を防止する。

第１１図および第１２図は上述したマガジン３０内に収
納したキュベツト１２を一個づつキュベツトホルダ１３
の切欠き（キュベツト保持部）　１３ａ’に装填するた
めのキュベツト供給装置１５の一例の構成を示すもので
あり、第１１図は平面図、第１２図は断面図である。タ
ーンテーブル１１は矢印で示す方向に所定のピンチで回
動するものであり、その周縁をこけ等間隔に形成した多
数の切欠き１３ａを有するキュベツトホルダ１８が設け
られている。

キュベツト供給袋ｆｉ１５は基板４０を具え、第１２図
に示すようにこの基板の底面Ｑこはマガジン収納部４１
が固着されている。マガジン収納部４１内にはマガジン
受け４２を上下方向に移動自在に配置し、このマガジン
受け４２はプーリー４８に掛は渡したワイヤ４４の一端
を固着し、このワイヤの他端は円筒状ガイド４１５内に
移動自在に配置した錘り４６に固着する。ガイド４５に
はリニアベアリング４７を介してマガジン受け４２を支
持きせる。したがってマガジン受け４２は常に上方に偏
倚されること（こなる。マガジン収納部４１１内には第
１２図に示すように多数のキュベツト１２を収納したマ
ガジン３０を複数個装填することができる。

マガジン収納部４１の上方の基板４０＆こけマガジンが
通過する第１の開口４０ａを形成する。基板４０の上面
にはこの第１開口４０ａを挾むように一対のＬ字状のレ
バー４８および４９をそれぞれ軸４８ａおよび４９ａを
中心として回動自在に設ける。

これらレバー４８および４９にはリング状のストッパ５
０および５１をそれぞれ軸５０ａおよび５１ａにより取
付けると共に後述するようにこれらし／＜−を回動させ
るためのローラ５２および５３を軸５２ａおよび５３．
ａにより取付ける。さらにこれらレバー４８および４９
の遊端には係合突片４８ｂおよび４９ｂを形成する。基
板４０の第１開口４０ａの側方にはさらにＬ字状の支柱
５４および５５を設け、これら支柱の先端にストッパ５
４ａおよび５５ａを取付ける。

基板４０にはざらにマガジンが通過する第２の開口４０
ｂを形成する。この第２開口４０ｂの側方には一対のマ
ガジン受はレバー５６および５７をそれぞれ軸５６ａお
よび５７ａを中心として回動するように設ける。これら
のレバー５６および５７の遊端近傍にはビン５６ｂおよ
び５７ｂをそれぞれ植設し、これらのビンを前記レバー
４８および４９の係合突片４８ｂおよび４９ｂと係合さ
せる。レバー５６および５７にはさらにビン５６０およ
び５７０を植設し、これらのビンを、第１１１］の平面
に平行に延在する軸５８ａおよび５９ａを中心として回
動する押しレバー５８および５９の突片と係合させる−
これらのレバー４８．　４９．５６．５７．５８および
５９にはそれぞればねを取付け、実線で示す位置になる
ように偏倚する。押しレバー５８および５９は、レバー
５６および５７が仮想線で示すように変位するとき、第
１１図に示す平面に対して垂直な面内で回動するもので
ある。

基板４０には第１および第２の開口４０ａおよび４０ｂ
の上方を延在する２本のガイド軸６０ａおよび６０ｂを
脚部６］ａおよび６１ｂを介して固着する。

これら一対のガイド軸６０ａおよび６０ｂには第１のス
ライダ６２をリニアベアリングを介して摺動自在に設け
１この第１スライダ６２にはワイヤ６８の一端を固着し
、このワイヤを脚部６１．ａに取付けたプーリ６４、モ
ータ６５の駆動軸Ｑこ取付けたプーリ６６および脚部６
１ｂに取付けたプーリ６７に掛は渡し、他端を同じくス
ライダ６２に固着する。

したがってモータ６５を可逆回転させることによってス
ライダ６２をガイド軸６０ａおよび６０ｂに沿ってＢ方
向に往復移動できるようになっている。

この移動は、第１の開口４０ａの上方に位置するマガジ
ン３０を第２の開口４０ｂの上方の装填位置まで移動さ
せると共にマガジン３０内のキュベツト２１をＢ方向に
送るためのものである。このため、第１２図に示すよう
にスライダ６２の下方にはマガジン３０に形成した溝８
１ｆ内に侵入し得る８本のアーム６２ａを取付ける。

基板４０にはざらに、第２の開口４０ｂの側縁に沿い、
ガイド軸６０ａおよび６０ｂに対して直交する方向に延
在する一対のガイド軸６８ａおよび６８ｂを脚部６９ａ
および６９ｂを介して取付ける。この方イド軸には第２
のスライダ７０を摺動自在に設け、ワイヤ７１の一端を
このスライダ７０に固着すると共にこのワイヤ７１を脚
部６９ａに設けたブー　１，１７２　、モータ７３の駆
動軸に取付けたプーリＶ　４および脚部６９ｂに取付け
たプーリ７５に掛は渡し、他端をスライダ７ｏに固着す
る。したがっＴモータ７８を正逆転させることによりス
ライダ７０をガイド軸６８ａ、　　６８ｂに沿ってへ方
向に移動させることができ、これによりマガジン８０内
からキュベラｈ１２を１個づつキュベツトホルダ１３の
切欠き１８ａ内に装填することができる。

このためにスライダ７０にはビン７０ａを設け、その先
端に押し爪７００を固着し、ビン７０ａにはコイルバネ
７０ｂを挿入し、この押し爪７０ｂによって一番端のキ
ュベツト１２の側壁を押すことができるようにする。

在となっているため、ガイド軸６８ａ、　　６８ｂは第
１１図の平面において左方へ偏倚される。また第１２図
に示すようにスライダ７０はガイド軸６８ａにはリニア
ベアリングを介して摺動自在に挿入されているが、カイ
ト軸６８ｂ＆こはコイルバネ７７およびボール７８によ
り摩擦係合している。したがってスライダ７０とガイド
軸６８’ｉ）とはある範聞に亘っては一緒に移動するよ
うになっている。このガイド軸６８ｂの他端にはＬ字状
のレール受け７９を固着し、このレール受けにはキュベ
゛ント１２の厚みにほぼ等しい幅の凹所を有するガイド
レール８０を固着する。このガイドレールはガイドロー
ラ８１ａ〜８１ｄにより案内され、Ａ方向に僅かに往復
動する。ガイドレール８０の先端付近にＧ′ｉ先端にあ
るキュベツトを押える押えｌくネ８２を取付ける。

次にかかるキュベツト供給装置１５の動作を説明する。

今説明の便宜上マガジン収納部４１内には数個のマガジ
ン８０が装填されており、最上位置にあるマガジンの上
面は実線位置にあるし／＜−４８、４９に取付けたスト
ッパ５０および５１と係合しているものとする。また第
２開口４０ｂの上方にはマガジン８０が位置しており、
実線位置にあるレバー５６および５７により支えられ下
方には落下しないようになっている。すなわちこのマガ
ジン８０はキュベツト装填位Ｗにあり、その内に収納し
たキュベツト１２を順次にキュベラ）１３の切欠き１３
ａ内に挿入できるようになっている。

すなわち、モータ７８を正転させることによりワイヤ７
１は第１１図において反時計方向に動き、これに伴なっ
てスライダ７０は入方向に動く。このときガイド軸ａ８
ｂもＡ方向に動き、したがってレール受け７９およびガ
イドレール８０もＡ方向へ動く。この際キュベツト列（
第１１図において一番上方に水平方向に配列されている
キュベツト）も入方向へ動く。次にガイド軸６８ｂの左
端のナツト６８Ｃが脚部６９ａに当接するとガイド軸６
８ｂは最早や移動せず、スライダ７０のみが入方向に動
く。これによりキュベツト列はさらに入方向に押出され
、右端のキュベツトはガイトレー／Ｌ／８０から外れ、
キュベツトホルダ１３の切欠き１３ａ内に挿入される。

上述したようにキュベツト１２には弾性突条１２０が形
成されているため切欠き１８ａ内に弾性的に嵌合される
ことになる。次にモータ７３を逆転させると、スライダ
７０およびガイド軸６８ｂは共に反Ａ方向に戻り、レー
ル受け７９を脚部６９　ｂに当接させる。この間スライ
ダ７０の押し爪７００はキュベツトと当接したままであ
る。

以上の動作を所定のタイミングで繰返し行なって順次の
キュベツトをキュベツトホルダ１３の切欠き１８ａ内に
挿入することができる。一番上側のキュベツト列の挿入
が終了したら、モータ７３を逆転させ、スライダ７０を
左端位置へ戻す。次にモータ６５を所定量正転させ、ワ
イヤ６３を時計方向に回動させ、スライダ６２をＢ方向
へ所定ピッチ（キュベツトの厚さに等しい）だけ移動さ
せる。これによりマガジン８０内のキュベツトは押し板
８２により押され、第１１図において上方へ移動する。

次にモータ６５を正転させるとスライダ６２は第１１図
において上方へ移動し、レバー４８．　４９゜５６、　
５７．　５８および５９は実線の位置に復帰する。この
ようにして新たなマガジンをキュベツト装填位置（こ移
送することができる。

また、上述したキュベツト排出装置２９は、キュベツト
ホルダ１８の切欠き１３ａ内に弾性的に嵌合して保持さ
れているキュベラ）１２を、例えばツレ／イドを用いて
切欠き１３ａから排出し、この排出されたキュベツト１
２をメツシュより成る傾斜面を経て転がしながら落下さ
せることをこより、キュベツト１２と検液とを１分離し
てそれぞれの廃棄用容器内に収納するよう構成すること
ができる。

なお、本発明は上述した例にのみ限定されるものではな
く、幾多の変更または変形が可能である。

例えば、上述した実施例では酵素標識試薬を用いる酵素
免疫分析を行なっているが、マーカとして放射性同位元
素を用いる放射免疫分析、マーカとして螢光物質を用い
る螢光免疫分析などにも同様に適用することができる。

また、キュベツトは必らずしも円板状のターンテーブル
に保持する必要はなく、例えばスネークチェーンを用い
る搬送装置により所定の位置を経て移送することもでき
る。

さらに上述した例では最終的に得られる検液をキュベツ
トを通してのダイレクト測光方式により比色測定するよ
うＱこしたが、キュベツト内の検液を比色セルに導いて
比色測定を行なうこともできる。

この場合には、検液を比色セルＱこ導くことにより発色
反応が停止するから反応停止液の分注を除くことができ
る。また、上述した実施例においては洗浄装置を１個設
けたが複数個設けることもできる。例えば第３図に示す
実施例において、洗浄袋［１６と直径的にほぼ対向する
位置に第２の洗浄装置を設けることもできる。このよう
にしても洗浄装置を８個設けるものに比べれば装置は簡
単かつ小形になる効果は得られる。さらに上述した実施
例ではすべてのサンプルについて同一の測定項目の分析
を行なうようにしたが、測定項目に応じた抗体または抗
原を固定化したキュベツトの供給装置および標識試薬の
分注装置を多数設けて同時に多項目の分析を行なうよう
にすることもできる。

この場合、反応ラインは１ラインとすることもできるし
、測定項目数に応じたライン数とすることもできる。さ
らに、各種分注位置、キュベツトの供給、排出位置、比
色測定位置なども上述した実施例に限定されるものでは
なく、種々の変更が可能である。また、上述した例では
攪拌については何んら述べていないが、適当な攪拌機構
を適当な停止位置に設けることができる。さらに、上述
した例ではキュベツトを偏平な箱形としたが、他の形状
とすることもできる。また、反応ラインに供給されたキ
ュベツト内での反応を安定に行なわせるために、キュベ
ツトを反応ライン中において恒温槽に浸しながら搬送す
るよう構成することもできる。

以上説明したように本発明の免疫学的自動分析方法にお
いては、反応容器として内壁の少く共一部に所定の抗体
または抗原を固定化したものを用い、これを使い捨てと
したから、抗体または抗原を固定化したビーズを用いる
場合に比ベランニングコストを安価にできると共に、小
形で構成が簡単かつ安価な分析装置によって容易に実施
できる。

また、反応容器の内壁に抗体または抗原を固定化するも
のであるから、比較的多くの抗体または抗原を固定化で
き、したがって分析精度も向上させることができる。更
に、各反応容器に対する各サンプルの分析中、エンドレ
ス状に構成した反応ライン中に設けた洗浄装置に反応容
器を循環させて通すようにすると共にサンプルは連続的
に分注するようにしたから、自動分析装置全体の構成を
更に簡単かつ小形とすることができ、しかもサンプル分
注を含めた総ての機構の動作を共通のタイミングで制御
できるので制御が容易となる。したがってサンプルＩＤ
制御や分析結果の処理も容易となると云う効果が得られ
る。

【図面の簡単な説明】

第１図はビーズを用いる競合法による酵素免疫分析の過
程を示す線図、 第２図は同じくビーズを用いるサンドイツチ法による酵
素免疫分析の過程を示す線図、第３図は本発明による分
析方法を実施する自動分析装置の一例の構成を示す線図
、 第４図は同じくその順次の動作を示す図、第５図は同じ
くその各部の動作を示すタイミングチャート図、 第６図は本発明の分析方法を実施する自動分析装置の他
の例の構成を示す線図、 第７図は同じくその動作を説明するためのタイミングチ
ャート図、 第８図Ａ−０は本発明の分析方法に用いる反応容器の一
例の構成を示す線図、 第９図は比色装置の一例の構成を示す線図、第１０図は
第８図に示す反応容器を多数配列して収納するマガジン
の一例の構成を示す斜視図、第１１図および第１２図は
反応容器供給装置の一例の構成を示す平面図および断面
図である。 １１・・・ターンテーブル、１２川反応容器（キュベツ
トに１３・・・キュベツトホルダ、１５・・・キュベツ
ト供給装置、　　　　　　　　　　１６・・・洗浄装置
、１７、１９．２１．２６・・・試薬分注装置、２３・
・・サンフル分注装置、２４・・・サンプラ、２５・・
・サンプルカップ、２８・・・比色装置、２９・・・キ
ュベツト排出装置。 第８図 Ａ メ２ Ｂ　　　　　　ｃ 第９図 第１Ｏ図 Ｊβ　　、ｊｌｅ 手続補正書 昭和５８年　４１月　１９日 １、事件の表示 昭和５８年　特　許　願第２１．５５５　−号２・発明
の名称 免疫学的自動分析方法およびこれに用いる反応容器３、
補正をする者 事件との関係　特許出願人 （０３７）オリンパス光学工業株式会社電　話　（５８
１）　２２４１番（代表）６　補正の対象　明細書の特
許請求の範囲、発明の詳細な説明の欄１明細書第１頁第
４行〜第８頁第５行を次のとおりに訂正する。 「２特許請求の範囲 Ｌ　内壁の少く共一部に所定の抗体または抗原を固定化
した反応容器と、所定の抗体または抗原を所定の物質で
標識した標識試薬とを用い、反応容器内で抗原抗体反応
を行なわせてサンプル中の被検物質を免疫学的に自動的
に分析するにあたり、前記反応容器を反応ラインに連続
的に 供給して該反応ライン中で所要の抗原抗体反応を行なわ
せ、所定の免疫学的分析が終了した反応容器を反応ライ
ンから連続的に排出することを特徴とする免疫学的自動
分析方法。 λ　内壁の少く共一部に所定の抗体または抗原を固定化
した反応容器と、所定の抗体または抗原を所定の物質で
標識した標識試薬とを用い、反応容器内で抗原抗体反応
を行なわせてサンプル中の被検物質を免疫学的に自動的
に分析するにあたり、前記反応容器をエンドレス状に構
成しただ反応ラインに連続的に供給し、この反応ライン
に供給された反応容器を反応ライン中に設けた洗浄装置
に循環搬送しながら反応容器にサンプルおよび標識試薬
を連続的に分注して所要の抗原抗体反応を行なわせると
共に、反応容器に結合した抗体または抗原と、反応容器
に結合していない抗体または抗原とを分離する Ｂ、Ｆ分離を行ない、所定の免疫学的分析の終了した反
応容器を反応ラインから連続的に排出することを特徴と
する免疫学的自動分析方法。 ＆　固定化した所定の抗体または抗原と、所定の抗体ま
たは抗原を所定の物質で標識した標識試薬とを用い、反
応ラインに連続的に供給された反応容器内で所要の抗原
抗体反応を行なわせると共に、所定の免疫学的分析の終
了した反応容器を反応ラインから連続的に排出しながら
サンプル中の被検物質を免疫学的に自動的に分析する免
疫学的自動分析方法に用いる反応容器であって、 上部に開口を有し、かつ内壁の少く共 一部に前記固定化した抗体または抗原を具えることを特
徴とする反応容器。」 ２明細書第１１頁第１０行の「を含む少く共２回の洗浄
」を削除し、 同頁第１４行の「８回または４回」を「２回または８回
」に訂正し、 同頁第１９行の「２回または３回」を「１回または２回
」に訂正する。 ３同第１８頁第７〜８行の「含む少く共２回の洗浄を」
を削除する。 ４同第１６頁第１６〜１７行の「キュベ゛ンド」を「キ
ュベツト」に訂正する。 ５、同第８８頁第１０行の「また、」の次に「キュベツ
トは使い捨てであるから、分析に先立つ洗浄は必ずしも
必要でない。さらに」を加入する。 ＝３６：

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 Ｌ　内壁の少く共一部に所定の抗体または抗原を固定化
   した反応容器と、所定の抗体または抗原を所定の物質で
   標識した標識試薬とを用い、反応容器内で抗原抗体反応
   を行なわせてサンプル中の被検物質を免疫学的に自動的
   に分析するにあたり、 別記反応容器を反応ラインに連続的に供給して該反応ラ
   イン中で所要の抗原抗体反応を行なわせ、所定の免疫学
   的分析が終了した反Ｊ心谷器を反応ラインから連続的に
   排出することを特徴とする％！ｊ疫学的自動分析方法。 ム　内壁の少く共一部に所定の抗体または抗原を固定化
   した反応容器と、所定の抗体または抗原を９１定の？！
   ！ｌ質で標識した標識試薬とを用い、反応容器内で抗原
   抗体反応を行なわせてサンプル中の被検物質を免役学的
   に自動的に分析するにあたり、 前記反応容器をエンドレス状に構成した反応ラインに連
   続的に供給し、この反応ラインに供給された反応容器を
   反応ライン中に設けた洗浄装置に循環搬送しなから反応
   容器にサンプルおよび標識試薬を連続的に分注して所要
   の抗原抗体反応を行なわせると共に、反応容器に結合し
   た抗体または抗原と、反応容器に結合していない抗体ま
   たは抗原とを分離するＢ、Ｆ分離を含む少く共２同の洗
   Ｗを行ない、Ｈｒ定の免疫学的分析の終了した反応容器
   を反応ラインから１！！続的に排出することを特徴とす
   る免役学的自動分析方法。 ＆　固定化した所定の抗体または抗原と、所定の？ＪＬ
   体または抗ｊ象を所定の物質で標識した標識試薬とを用
   い、反応ラインに連続的に供給された反応容器内で所要
   の抗原抗体反応を行なわせると共に、所定の免疫学的分
   析の終了した反応容器を反応ライン中出連続的に排出し
   ながらサンプル中の被検物質を免役学的に自動的に分析
   する免疫学的自動分析方法に用いる反応容器であって、 上部に開口を有し、かつ内壁の少く共一部に前記固定化
   した抗体または抗原を具えること全特徴とする反応容器
   。