JPS59118093A - Ｌ−カルニチンの製法およびそれに用いる化学中間体 - Google Patents
Ｌ−カルニチンの製法およびそれに用いる化学中間体Info
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- JPS59118093A JPS59118093A JP58230449A JP23044983A JPS59118093A JP S59118093 A JPS59118093 A JP S59118093A JP 58230449 A JP58230449 A JP 58230449A JP 23044983 A JP23044983 A JP 23044983A JP S59118093 A JPS59118093 A JP S59118093A
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- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
らに詳しくは、本発明はγ一置換アセト酢酸のエステル
またはアミドを微生物学的に還元して対応するＬ−β−
ヒドロキシーγ一置換酪酸誘導体とする製法に関する。
またはアミドを微生物学的に還元して対応するＬ−β−
ヒドロキシーγ一置換酪酸誘導体とする製法に関する。
かかるＬ−β−ヒドロキシーｒ−置換酪酸誘導体は容易
にＬ一カルニチンクロリドに変換されつる。本発明は才
たかかる方法に用いる新規な化学中間体に関する。
にＬ一カルニチンクロリドに変換されつる。本発明は才
たかかる方法に用いる新規な化学中間体に関する。
すでによく知られているように、カルニチン（β−ヒド
ロキシ−γ−トリメチルアミノ酪酸）は不斉中心を有し
ており、それゆえカルニチンには２つの立体異性体であ
る９体およびＬ体か存在する。
ロキシ−γ−トリメチルアミノ酪酸）は不斉中心を有し
ており、それゆえカルニチンには２つの立体異性体であ
る９体およびＬ体か存在する。
Ｌ−カルニチンは通常生体に伴在し、そコテ活性化され
た長鎖の遊離脂肪酸をミトコンドリア膜を通過させて運
ぶ働きをしている。アシル０ｏＡＢ’％導体はミトコン
ドリア膜を透過しえないため、長鎖脂肪酸はＬ−カルニ
チンでエステル化されたばあいのみミトコンドリア内番
こ入り−うる。Ｌ−カルニチンのかかる干ヤリャ砲能は
活性長鎖脂肪酸をその住合成部位から運ぶ際に発揮され
る。たとえば、ミクロソーム（ｍｉｏｒｏｓｏｍｅ）を
ぞの酸化部位刀１らミトコンドリアへ運ぶ際、あるいは
アセチルＯｏＡをその形成部位であるミトコンドリアか
ら長鎖脂肪酸か合成されるミトコンドリア外部位（ｅｘ
ｔｒａｍｉｔｏｃｈｏｎａｒｉａｌ ５ｉｔｅ）へ運ぶ
際に発揮される。たとえばミクロソーム内でアセチルＯ
ｏＡはコレステロールおよび脂肪酸の合成に利用されう
る。
た長鎖の遊離脂肪酸をミトコンドリア膜を通過させて運
ぶ働きをしている。アシル０ｏＡＢ’％導体はミトコン
ドリア膜を透過しえないため、長鎖脂肪酸はＬ−カルニ
チンでエステル化されたばあいのみミトコンドリア内番
こ入り−うる。Ｌ−カルニチンのかかる干ヤリャ砲能は
活性長鎖脂肪酸をその住合成部位から運ぶ際に発揮され
る。たとえば、ミクロソーム（ｍｉｏｒｏｓｏｍｅ）を
ぞの酸化部位刀１らミトコンドリアへ運ぶ際、あるいは
アセチルＯｏＡをその形成部位であるミトコンドリアか
ら長鎖脂肪酸か合成されるミトコンドリア外部位（ｅｘ
ｔｒａｍｉｔｏｃｈｏｎａｒｉａｌ ５ｉｔｅ）へ運ぶ
際に発揮される。たとえばミクロソーム内でアセチルＯ
ｏＡはコレステロールおよび脂肪酸の合成に利用されう
る。
生体内にはもっばら左旋性の異性体（Ｌ−力ルニチン）
が存在する（哺乳動物の組織に関する限り、Ｄ−カルニ
チンは未だかつて検出されたことがない）ことが確立さ
れた一方で、ラセミ体のり、Ｌ−カルニチンが長年の間
様々な目的で使われてきている。たとえば、ヨーロッパ
ではり、Ｌ−カルニチンは食欲促進剤として売られてお
り、また子供の成長速度に効果があることが報告されて
いる（たとえば、ボルニシェ（Ｂｏ−ｒｎｉｃｈｅ）ら
： ０１ｉｎｉＯ＆Ｏ，ｈｅｍｉｃａ Ａｃｔａ、 ５
．１７１〜１７６（１９６０）およびアレクサンダーら
＝「生体液中のタンパク質（Ｐｒｏｔｉｄｅｓ ｉｎ
ｔｈｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｆｌｕｉｄす」、第６
回ブルジェ協議（Ｏｏｌｌｏｑｕｉｍ Ｂｒｕｇｅｓ）
、３０６〜３１０（１９５８）を膠照）。またアメリカ
特許第３，８３０，９３１号にはうつ血性心不全（ｃｏ
ｎｇｅｓｔｉｖｅ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ）にお
ける心筋の収縮（ｒｒｆｏｃａｒｄｉａｌ ｏｏｎｔｒ
ａａｔｉｌｉｔｙ）および収縮期のリズム（ｓｙｓｔｏ
ｌｉｃ ｒｈｙｔｈｍ）かしばしはり、Ｌ−カルニチン
の投与によって改善されることが記載されている。また
アメリカ特許！ ３，９６８，２４１号には心臓性の不
整脈（ｃａｒａｉａｃ ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ）の治
療、同第３．８１０，９９４号には肥満症（ｏｂｅｓｉ
ｔｙ）の治療にそれぞれり、Ｌ−カルニチンを用いるこ
とが開示されている。
が存在する（哺乳動物の組織に関する限り、Ｄ−カルニ
チンは未だかつて検出されたことがない）ことが確立さ
れた一方で、ラセミ体のり、Ｌ−カルニチンが長年の間
様々な目的で使われてきている。たとえば、ヨーロッパ
ではり、Ｌ−カルニチンは食欲促進剤として売られてお
り、また子供の成長速度に効果があることが報告されて
いる（たとえば、ボルニシェ（Ｂｏ−ｒｎｉｃｈｅ）ら
： ０１ｉｎｉＯ＆Ｏ，ｈｅｍｉｃａ Ａｃｔａ、 ５
．１７１〜１７６（１９６０）およびアレクサンダーら
＝「生体液中のタンパク質（Ｐｒｏｔｉｄｅｓ ｉｎ
ｔｈｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｆｌｕｉｄす」、第６
回ブルジェ協議（Ｏｏｌｌｏｑｕｉｍ Ｂｒｕｇｅｓ）
、３０６〜３１０（１９５８）を膠照）。またアメリカ
特許第３，８３０，９３１号にはうつ血性心不全（ｃｏ
ｎｇｅｓｔｉｖｅ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ）にお
ける心筋の収縮（ｒｒｆｏｃａｒｄｉａｌ ｏｏｎｔｒ
ａａｔｉｌｉｔｙ）および収縮期のリズム（ｓｙｓｔｏ
ｌｉｃ ｒｈｙｔｈｍ）かしばしはり、Ｌ−カルニチン
の投与によって改善されることが記載されている。また
アメリカ特許！ ３，９６８，２４１号には心臓性の不
整脈（ｃａｒａｉａｃ ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ）の治
療、同第３．８１０，９９４号には肥満症（ｏｂｅｓｉ
ｔｙ）の治療にそれぞれり、Ｌ−カルニチンを用いるこ
とが開示されている。
しかしながら、最近ではもっばらカルニチンの左旋性異
性体を何らかの治療用途に用いることの重要性が増加し
てきている。事実、Ｄ−カルニチンはカルニチン−結合
酵素、たとえばカルニチンアセチルトランスフェラーゼ
（ＯＡＴ）およびカルニチンバルミチルトランスフエラ
ーゼ（ＰＩ’Ｏ）の拮抗的阻害剤である。さらに、最近
ではＤ−カルニチンが心臓組織のＬ−カルニチンを枯渇
させることが明確になった。したがって、心臓疾患の治
療または血中の脂肪を低下させる治療を受けている患者
に対してはＬ−カルニチンのみを投与することが必須で
ある。
性体を何らかの治療用途に用いることの重要性が増加し
てきている。事実、Ｄ−カルニチンはカルニチン−結合
酵素、たとえばカルニチンアセチルトランスフェラーゼ
（ＯＡＴ）およびカルニチンバルミチルトランスフエラ
ーゼ（ＰＩ’Ｏ）の拮抗的阻害剤である。さらに、最近
ではＤ−カルニチンが心臓組織のＬ−カルニチンを枯渇
させることが明確になった。したがって、心臓疾患の治
療または血中の脂肪を低下させる治療を受けている患者
に対してはＬ−カルニチンのみを投与することが必須で
ある。
カルニチンを工業生産するいくつかの方法が知られてい
る。しかしながら化学的にカルニチンを合成すると、Ｄ
およびＬ異性体のラセミ痙金物が生成することは避けら
れない。そのためラセミ体からそれぞれの光学対掌体を
つるには分割を行なわなければならないが、かかる分割
方法はめんどうでありかつ高価である。
る。しかしながら化学的にカルニチンを合成すると、Ｄ
およびＬ異性体のラセミ痙金物が生成することは避けら
れない。そのためラセミ体からそれぞれの光学対掌体を
つるには分割を行なわなければならないが、かかる分割
方法はめんどうでありかつ高価である。
本発明の目的は、微生物学的および化学的方法の組合せ
により高収率にＬ−カルニチンを生産することである。
により高収率にＬ−カルニチンを生産することである。
本発明のいまひとつの目的は、容易に利用可能な並の価
格の原料からＬ−カルニチンを合成するための改良法を
提供することである。
格の原料からＬ−カルニチンを合成するための改良法を
提供することである。
本発明のいまひとつの目的は、Ｌ−カルニチンおよびそ
の塩またはエステルの合成に用いる新規で有用な光学活
性中間体の製造ご開示することである。
の塩またはエステルの合成に用いる新規で有用な光学活
性中間体の製造ご開示することである。
本発明のいまひとつの目的は、４−ノ＼ロー６（８）−
ヒドロキシブチレートのハロゲン基のトリメチルアミン
置換を経てＬ−カルニチンを製造する方法を提供するこ
とである。
ヒドロキシブチレートのハロゲン基のトリメチルアミン
置換を経てＬ−カルニチンを製造する方法を提供するこ
とである。
さらに、本発明のいまひとつの目的は、４−クロロ−３
碩）−ヒドロキシブチレートから４−ヨードもしくは４
−ブロモ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレートを製造する
方法を提供することである。
碩）−ヒドロキシブチレートから４−ヨードもしくは４
−ブロモ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレートを製造する
方法を提供することである。
叙上のごとき本発明の目的を以下の詳細な説明により明
らかにする。
らかにする。
本発明の利点は以下に述べる詳細な説明から当該分野の
熟練者にとって門らかである。
熟練者にとって門らかである。
γ−置換アセト酢酸誘導体の３位のβ−ケト基は白金／
炭素（ｐｔ／り上で水素添加することにより］英元され
ることが知られている（たとえは、アメリカ特許＄ ３
，９６９，４０６号）。しかしながら、かかる方法でえ
られるヒドロキシ化合物はラセミ体である。それに対し
、本発明の方法による微生物の発酵作用を用いれは、３
位のオキソ基への水素添加が立体選択的におこり、光学
活性γ−直換β−ヒドロキシ酪酸誘棉体かえられる。
炭素（ｐｔ／り上で水素添加することにより］英元され
ることが知られている（たとえは、アメリカ特許＄ ３
，９６９，４０６号）。しかしながら、かかる方法でえ
られるヒドロキシ化合物はラセミ体である。それに対し
、本発明の方法による微生物の発酵作用を用いれは、３
位のオキソ基への水素添加が立体選択的におこり、光学
活性γ−直換β−ヒドロキシ酪酸誘棉体かえられる。
とくに、本発明の方法において微生物の発酵作用に供す
る基質を適当に選択すれは、３但）またはＬ−エピメリ
立体配置のものかえられる。
る基質を適当に選択すれは、３但）またはＬ−エピメリ
立体配置のものかえられる。
かかる立体配置が天然り一カルニチンへの変換に必要で
ある。
ある。
大まかにいえば、本発明は微生物の還元酵素、Ｌ−β−
ヒドロキシアシルＯｏＡデヒドロゲナーゼ［Ｅａ １．
１．１．３５ ］を用いて以下に述べるようにγ−置換
アセト酢酸誘導体の立体選択的水素添加を触媒する乙と
からなる。
ヒドロキシアシルＯｏＡデヒドロゲナーゼ［Ｅａ １．
１．１．３５ ］を用いて以下に述べるようにγ−置換
アセト酢酸誘導体の立体選択的水素添加を触媒する乙と
からなる。
それゆえ本発明は最も広く解釈すれば、対応するγ−置
換アセト酢酸のエステルまたはアミＦをＬ−β−ヒドロ
キシアシルＯｏＡデヒドロゲナーゼ（、ｘａ １．１，
１．６５）を産生ずる微生物の発酵酵素作用（ｆｅｒｍ
ｅｎｔａｔｉｖｓ ｅＢｙｍａｔｉｃ ａｃｔｉｏｎ）
に供し、目的とする式（■）： （式中、Ｘは塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子または水
酸基であり、 Ｒは、炭素数１〜１５のアルコキシ基；炭素数５〜１５
のアル牛ルアミノ基；炭素数５〜１２の１シクロアルコ
キシ基またはシクロアルキルアミノ基；＃Ａ 紫数７〜
１４のフェノキシ基またはフェニルア子、炭Ｘｋｉ１〜
８のアルキル基、フェニルｉｔたけベンジル基であり、
Ａは水素原子、塩素原子、臭素原子またはメチル基であ
る）で示されるフェニルアミ７基またはフェニルアルキ
ルアミノ基よりなる群から選はれた＠鎖、分岐鎖またけ
環状構造２有する基である）で示される光学活性γ−置
換β−ヒドロキシ酪酸誘導体を採取してなる化合物（Ｉ
Ｉ）の製法に関する。
換アセト酢酸のエステルまたはアミＦをＬ−β−ヒドロ
キシアシルＯｏＡデヒドロゲナーゼ（、ｘａ １．１，
１．６５）を産生ずる微生物の発酵酵素作用（ｆｅｒｍ
ｅｎｔａｔｉｖｓ ｅＢｙｍａｔｉｃ ａｃｔｉｏｎ）
に供し、目的とする式（■）： （式中、Ｘは塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子または水
酸基であり、 Ｒは、炭素数１〜１５のアルコキシ基；炭素数５〜１５
のアル牛ルアミノ基；炭素数５〜１２の１シクロアルコ
キシ基またはシクロアルキルアミノ基；＃Ａ 紫数７〜
１４のフェノキシ基またはフェニルア子、炭Ｘｋｉ１〜
８のアルキル基、フェニルｉｔたけベンジル基であり、
Ａは水素原子、塩素原子、臭素原子またはメチル基であ
る）で示されるフェニルアミ７基またはフェニルアルキ
ルアミノ基よりなる群から選はれた＠鎖、分岐鎖またけ
環状構造２有する基である）で示される光学活性γ−置
換β−ヒドロキシ酪酸誘導体を採取してなる化合物（Ｉ
Ｉ）の製法に関する。
とくに式（Ｉａ） ：
（式中、Ｘは前記と同じ、Ｒ１はｍＪ記Ｒと同じであり
、たたしアルコキシ基のはあいは炭素数５〜１５のアル
コキシ基である）で示される光学活性γ−置換６但）−
ヒドロキシ酪酸誘導体を製造するには、式； （式中、Ｘおよび１は前記と同じ）で示される化合物を
Ｌ−β−ヒドロキシアシルＯｏＡデヒドロゲナーゼ［Ｅ
Ｏ１，１，１，３５］を産生ずる微生物の発酵酵素作用
に供し、ついで目的とする式（１ａ）の光学活性γ−匝
換３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸誘導体を発酵反応混合物か
ら採取する。
、たたしアルコキシ基のはあいは炭素数５〜１５のアル
コキシ基である）で示される光学活性γ−置換６但）−
ヒドロキシ酪酸誘導体を製造するには、式； （式中、Ｘおよび１は前記と同じ）で示される化合物を
Ｌ−β−ヒドロキシアシルＯｏＡデヒドロゲナーゼ［Ｅ
Ｏ１，１，１，３５］を産生ずる微生物の発酵酵素作用
に供し、ついで目的とする式（１ａ）の光学活性γ−匝
換３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸誘導体を発酵反応混合物か
ら採取する。
目的とする酵素を産生ずる微生物はすべて立体選択的還
元を触媒する機能を有することかわかった。なかでも好
ましい微生物としては、たとえばアスコミセテス（Ａｓ
ｏｏｇｃｅｔｅｅ）綱、エンドミセタレス（Ｅｎｄｏｍ
ｙｃｅｔａｌθｓ）、ムコラレス（Ｍｕｃｏｒａｌｅｓ
）、モニリアレス（Ｍｏｎｉｌｉａｌθ８）またはニー
ロシアレス（Ｌｌ’ｕｒｏｔｉａｌｅｓ）目、およびサ
ツカロミセス（Ｓａｏｃｈａｒｏ−ｍｙａｅｓ） ＠に
属する微生物があげられ、とく番こ好ましくは、サツカ
ロミセス・セレビシェ（Ｓａｏｃｈａ−ｒｏｍｙｃｅｓ
ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）である。
元を触媒する機能を有することかわかった。なかでも好
ましい微生物としては、たとえばアスコミセテス（Ａｓ
ｏｏｇｃｅｔｅｅ）綱、エンドミセタレス（Ｅｎｄｏｍ
ｙｃｅｔａｌθｓ）、ムコラレス（Ｍｕｃｏｒａｌｅｓ
）、モニリアレス（Ｍｏｎｉｌｉａｌθ８）またはニー
ロシアレス（Ｌｌ’ｕｒｏｔｉａｌｅｓ）目、およびサ
ツカロミセス（Ｓａｏｃｈａｒｏ−ｍｙａｅｓ） ＠に
属する微生物があげられ、とく番こ好ましくは、サツカ
ロミセス・セレビシェ（Ｓａｏｃｈａ−ｒｏｍｙｃｅｓ
ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）である。
光学活性４−置換３（Ｒ）−ヒドロキシブチレートノ炭
素＠１〜４のエステルを製造するには、無傷の（ｉｎｔ
ａｃｔ）微生物が対立する（ｏｐｐｏｓｉｎｇ）立体配
置のオキシド−リダクターゼを妨害するので、精製され
たＬ−β−ヒドロキシアシル００Ａキ≠デヒドロゲナー
ゼ［ＦＣ１，１゜ １．３５］、たとえばブタ心臓由来のものを用いる必要
かある。したがって、たとえば４−クロロ−アセト酢酸
の炭素数１〜４のエステルを微生物を用いて還元すると
４−クロロ−６−ヒドロキシブチレートの意に反する方
の光学活性純品（ｐｕｒｉｔｉｅｓ）かえられる。
素＠１〜４のエステルを製造するには、無傷の（ｉｎｔ
ａｃｔ）微生物が対立する（ｏｐｐｏｓｉｎｇ）立体配
置のオキシド−リダクターゼを妨害するので、精製され
たＬ−β−ヒドロキシアシル００Ａキ≠デヒドロゲナー
ゼ［ＦＣ１，１゜ １．３５］、たとえばブタ心臓由来のものを用いる必要
かある。したがって、たとえば４−クロロ−アセト酢酸
の炭素数１〜４のエステルを微生物を用いて還元すると
４−クロロ−６−ヒドロキシブチレートの意に反する方
の光学活性純品（ｐｕｒｉｔｉｅｓ）かえられる。
それゆえ本発明はまた、式：
（式中、Ｘは前“記と同じ、Ｒ２は炭素数１〜４のアル
コキシ基である）で示される化合物に精製されたＬ−β
−ヒドロキシアシルＧｏＡデヒドロゲナーゼ［ＥＣ＋
１．１．１．３５３を作用させ、ついで目的とする式（
Ｉｂ） ： （式中、Ｘは前記と同じ、Ｒ２は炭素数゛１〜４のアル
コキシ基である）で示される光学活性γ−置換３（Ｒ）
ヒドロキシ酪酸誘導体を酵素反応混合物から採取してな
る化合物（１１））の製造法に関する。
コキシ基である）で示される化合物に精製されたＬ−β
−ヒドロキシアシルＧｏＡデヒドロゲナーゼ［ＥＣ＋
１．１．１．３５３を作用させ、ついで目的とする式（
Ｉｂ） ： （式中、Ｘは前記と同じ、Ｒ２は炭素数゛１〜４のアル
コキシ基である）で示される光学活性γ−置換３（Ｒ）
ヒドロキシ酪酸誘導体を酵素反応混合物から採取してな
る化合物（１１））の製造法に関する。
したかつて本発明は式“（Ｉ）：
（式中、ＸおよびＲは前記と同じ）で示され、叙上のご
とき３（Ｒ）立体配置を有する化合物に関する。
とき３（Ｒ）立体配置を有する化合物に関する。
光学活性γ−置換−Ｌ−β−ヒドロキシ酪酸誘ノ４体を
トリメチルアミンと反応させて対応するγ−トリメチル
アンモニウムーＬ−β−ヒドロキシ酪酸誘導体とし、か
かる誘導体を水性の酸で処理することにより容易ｌこＬ
−カルニチンかえられる。かかる反応の過程を以下に図
示する。
トリメチルアミンと反応させて対応するγ−トリメチル
アンモニウムーＬ−β−ヒドロキシ酪酸誘導体とし、か
かる誘導体を水性の酸で処理することにより容易ｌこＬ
−カルニチンかえられる。かかる反応の過程を以下に図
示する。
（Ｖ） （荀り一カルニチ
ン 前記（［１０−（Ｉ）の反応は、ＸかＯｅのはあいより
容易に進行する。しかしながら、つづく（１）→（Ｖ）
の反応ではＸがヨウ素または臭素原子のはあいに収率が
制いので、まず最初に０４誘導体を製造し、ついで対応
する工またはＢｒ誘導体に変換するのが好ましい。
ン 前記（［１０−（Ｉ）の反応は、ＸかＯｅのはあいより
容易に進行する。しかしながら、つづく（１）→（Ｖ）
の反応ではＸがヨウ素または臭素原子のはあいに収率が
制いので、まず最初に０４誘導体を製造し、ついで対応
する工またはＢｒ誘導体に変換するのが好ましい。
本発明はまた４−クロロ−６（Ｒ）−ヒドロキシブチレ
ートエステルを対応する４ｒヨードまたは４−ブロモ−
３（Ｒ；−ヒドロキシブチレートに変換することからな
る改良製造法に関する。つぎにかかる製造法の反応経路
を図示する。
ートエステルを対応する４ｒヨードまたは４−ブロモ−
３（Ｒ；−ヒドロキシブチレートに変換することからな
る改良製造法に関する。つぎにかかる製造法の反応経路
を図示する。
Ｑ
リ冒 ヨードヒドリン（■）は室温でスムーズにトリメチルア
ミンと反応して化合物（■）になり、このものは前記反
応経路にしたかつて容易にＬ−カルニチンに変換される
。
リ冒 ヨードヒドリン（■）は室温でスムーズにトリメチルア
ミンと反応して化合物（■）になり、このものは前記反
応経路にしたかつて容易にＬ−カルニチンに変換される
。
反応式で例示した前記方法には種々の変形法が可能であ
る。どの方法を用いるかには関係なく、出発物質のエス
テルはヨウ化ナトリウムと適当な溶媒、たとえば２−ブ
タノン、アセトン、ブタノールなどの中で反応させる。
る。どの方法を用いるかには関係なく、出発物質のエス
テルはヨウ化ナトリウムと適当な溶媒、たとえば２−ブ
タノン、アセトン、ブタノールなどの中で反応させる。
ヨウ化ナトリウムとの反応においてこの時点で要求され
る主たる反応は置換反応であり、かかる直換反応によれ
ば隣接する炭素原子上の掌性中心（ｃｈｉｒａｌｃｅｎ
ｔｅ、ｒ）を妨害することなくヨードヒドリン（■）が
形成される。該反応には、少なくとも化合物（■）から
すべてのクロリドを置換するのに充分な量のヨウ化ナト
リウムが必要である。一般的には、少量過剰のヨウ化ナ
トリウムか用いられる。
る主たる反応は置換反応であり、かかる直換反応によれ
ば隣接する炭素原子上の掌性中心（ｃｈｉｒａｌｃｅｎ
ｔｅ、ｒ）を妨害することなくヨードヒドリン（■）が
形成される。該反応には、少なくとも化合物（■）から
すべてのクロリドを置換するのに充分な量のヨウ化ナト
リウムが必要である。一般的には、少量過剰のヨウ化ナ
トリウムか用いられる。
化合物（■）とトリメチルアミンとの反応は中程度の温
度（たとえば２５°０）で（Ｓ、Ｇ、ブーツおよびＭ、
Ｒ，ブーツ（Ｓ、 Ｇ、 Ｂｏｏｔｓ ａｎｄ Ｍ、
Ｒ，Ｂｏｏｔｓ） ：Ｊ、 Ｆｈａｒｍ、Ｓｃｉ、、μ
、１２６２ （１９７５）を参照）、種々の溶媒中、た
とえば過剰のトリメチルアミンを含むメタノールまたは
エタノール中で行ないうる。アルコール性溶媒を用いた
ばあいに、エステル交換反応かおこることは注目すべき
点である。たとえは、メタノールを溶媒として用いたば
あいには、反応中にＬ−カルニチンメチルエステルかえ
られる。かかるエステル交換反応は、Ｌ−カルニチンメ
チルエステルをイオン交換カラム（ＯＨ−型）に通すこ
とにより直接遊１１ｉＩ塩基型のＬ−カルニチンかえら
れることがわかっているので有利な反応である（］１．
ストラックおよびＪ、ローレンツ（Ｋ、 ５ｔｒａａｋ
ａｎｄ １． Ｉ＋ｏｒｅｎｚ ：Ｊ、 Ｐｈｙｓｉ
ｏｌ、Ｏｈｅｍ、、３４４．２７６ （１９６６） ）
。
度（たとえば２５°０）で（Ｓ、Ｇ、ブーツおよびＭ、
Ｒ，ブーツ（Ｓ、 Ｇ、 Ｂｏｏｔｓ ａｎｄ Ｍ、
Ｒ，Ｂｏｏｔｓ） ：Ｊ、 Ｆｈａｒｍ、Ｓｃｉ、、μ
、１２６２ （１９７５）を参照）、種々の溶媒中、た
とえば過剰のトリメチルアミンを含むメタノールまたは
エタノール中で行ないうる。アルコール性溶媒を用いた
ばあいに、エステル交換反応かおこることは注目すべき
点である。たとえは、メタノールを溶媒として用いたば
あいには、反応中にＬ−カルニチンメチルエステルかえ
られる。かかるエステル交換反応は、Ｌ−カルニチンメ
チルエステルをイオン交換カラム（ＯＨ−型）に通すこ
とにより直接遊１１ｉＩ塩基型のＬ−カルニチンかえら
れることがわかっているので有利な反応である（］１．
ストラックおよびＪ、ローレンツ（Ｋ、 ５ｔｒａａｋ
ａｎｄ １． Ｉ＋ｏｒｅｎｚ ：Ｊ、 Ｐｈｙｓｉ
ｏｌ、Ｏｈｅｍ、、３４４．２７６ （１９６６） ）
。
叙上の反応の記載から、新ノリでかつきわめて有用な多
数の光学活性中間体が形成されることがわかる。その中
でもとくに有用なものは、４−ヨード−３追）−ヒドロ
キシ酪酸の炭素数６〜１０のアルキルエステルであり、
アルキルエステルとしてはオクチルエステルがきわめて
好ましい。
数の光学活性中間体が形成されることがわかる。その中
でもとくに有用なものは、４−ヨード−３追）−ヒドロ
キシ酪酸の炭素数６〜１０のアルキルエステルであり、
アルキルエステルとしてはオクチルエステルがきわめて
好ましい。
目的とするオキシド−リダクターゼ活性を有する微生物
は微生物の技術分野でよく知られているものであり、か
かる活性を有する微生物であればいかなるものも本発明
の方法の実施に用いつる（ Ｋ、牛−スリッヒ（Ｋ、
Ｋｉｅｓｌｉａｈ） ： ［非ステロイド環状化合物の
微生物的形質転換（Ｍｉｃｒｏ−ｂｉａｌ Ｔｒａｎｓ
ｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｎｏｎ−８ｔｅｒｏｉｄ
０ｙｏｌｉｃ Ｏｏｍｐｏｕｎｄｇ） Ｊ（ジョージ
・ティーム・パブリシャーズ（ＧｅｏｒｇｅＴｈｉｅｍ
ｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｅす、シュトウットガルト（１
９７６）’）。
は微生物の技術分野でよく知られているものであり、か
かる活性を有する微生物であればいかなるものも本発明
の方法の実施に用いつる（ Ｋ、牛−スリッヒ（Ｋ、
Ｋｉｅｓｌｉａｈ） ： ［非ステロイド環状化合物の
微生物的形質転換（Ｍｉｃｒｏ−ｂｉａｌ Ｔｒａｎｓ
ｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｎｏｎ−８ｔｅｒｏｉｄ
０ｙｏｌｉｃ Ｏｏｍｐｏｕｎｄｇ） Ｊ（ジョージ
・ティーム・パブリシャーズ（ＧｅｏｒｇｅＴｈｉｅｍ
ｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｅす、シュトウットガルト（１
９７６）’）。
ここでは、とくに適切な微生物の属に関して詳しく記載
する。容易に利用できかつ安価なサツカロミセス属の微
生物、たとえば醸造酵母（ｂｒｅｗｅｒ’ｓ ｙｅａｓ
ｔ）、パン酵母（ｂａｋｅｒ’ｓ ｙｅａｓｔ）および
ワイン酵母（ｗｉｎｅ ｍａｋｅｒ’ｓ ｙｅａｓｔ）
（サツカロミセス・ビニ（Ｓａｃｏｈａｒｏｍｙｃｅ
ｅ ｖｊ、ｎｉ） ）などがＬ−β−ヒドロキシアシル
ＯｏＡデヒドロゲナーゼ［ＫＯ１，１，１゜６５］を産
生ずることがわかっており、本発明の方法を行なうのに
極めて有利である。かかる酵素については、Ｓ、Ｊ、ワ
キシおよび］Ｄ、Ｍ、バーンズＪｒ 、 （Ｓ、 Ｊ、
Ｗａｋｉｌ ａｎｄ Ｅ、 Ｍ、 Ｂａｒｎｅｓ Ｊ
ｒ、）によりコンプレヘンシブ・バイオケミストリー（
ＯｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅＢｌｏｏｈｅｍｌ［１ｔ’
Ｌ７）、１８５巻、５７〜１０４頁（１９７１）に記載
されている。
する。容易に利用できかつ安価なサツカロミセス属の微
生物、たとえば醸造酵母（ｂｒｅｗｅｒ’ｓ ｙｅａｓ
ｔ）、パン酵母（ｂａｋｅｒ’ｓ ｙｅａｓｔ）および
ワイン酵母（ｗｉｎｅ ｍａｋｅｒ’ｓ ｙｅａｓｔ）
（サツカロミセス・ビニ（Ｓａｃｏｈａｒｏｍｙｃｅ
ｅ ｖｊ、ｎｉ） ）などがＬ−β−ヒドロキシアシル
ＯｏＡデヒドロゲナーゼ［ＫＯ１，１，１゜６５］を産
生ずることがわかっており、本発明の方法を行なうのに
極めて有利である。かかる酵素については、Ｓ、Ｊ、ワ
キシおよび］Ｄ、Ｍ、バーンズＪｒ 、 （Ｓ、 Ｊ、
Ｗａｋｉｌ ａｎｄ Ｅ、 Ｍ、 Ｂａｒｎｅｓ Ｊ
ｒ、）によりコンプレヘンシブ・バイオケミストリー（
ＯｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅＢｌｏｏｈｅｍｌ［１ｔ’
Ｌ７）、１８５巻、５７〜１０４頁（１９７１）に記載
されている。
斜上のごとき微生物を培養している標準組成の栄祥培地
に４−置換アセト酢酸基質を取りこませ、還元的トラン
スホーメーションを行なうには通常の発酵条件が用いら
れる。微生物の増殖中の培地（ｇｒｏｗｉ■０ｕｌｔｕ
ｒりから有用酵素をえるには、たとえは酵素を放出させ
るために菌体をリーシス（１戸１すするか、あるいは新
鮮な水性系（ａｑｕｅｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ）に静止期
（ｒｅｓｔｉｎｇ）の菌体を懸濁する。どちらの手法を
用いても、微生物により産生される活性な酵素か培地中
に存在する限り、β−ケト基が選択的に゛還元される。
に４−置換アセト酢酸基質を取りこませ、還元的トラン
スホーメーションを行なうには通常の発酵条件が用いら
れる。微生物の増殖中の培地（ｇｒｏｗｉ■０ｕｌｔｕ
ｒりから有用酵素をえるには、たとえは酵素を放出させ
るために菌体をリーシス（１戸１すするか、あるいは新
鮮な水性系（ａｑｕｅｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ）に静止期
（ｒｅｓｔｉｎｇ）の菌体を懸濁する。どちらの手法を
用いても、微生物により産生される活性な酵素か培地中
に存在する限り、β−ケト基が選択的に゛還元される。
もちろん、４−直換アセト酢酸誘導体と還元酵素との接
触を行なう際の温度、時間、圧力などの条件は当該技術
分野の熟練者にとって明らかなように相互依荏している
。たとえば、大気圧で穏やかに加熱するはあい還元的変
換に要する特開は大気圧、室温で行なうばあいより短が
い。もちろんのことながら、高温、高圧で長時間反応を
行なえは基質は解体してしまう。微生物の増殖中の培地
を用いるはあいには、微生物が反応を進めるのに充分な
加水分解酵素全産生する前に死んでしまわないように反
応条件は充分に穏やかでなけれはならない。したがって
、一般的には大気圧、約１０〜３５°０で約１２時間〜
１０日間反応を行なう。
触を行なう際の温度、時間、圧力などの条件は当該技術
分野の熟練者にとって明らかなように相互依荏している
。たとえば、大気圧で穏やかに加熱するはあい還元的変
換に要する特開は大気圧、室温で行なうばあいより短が
い。もちろんのことながら、高温、高圧で長時間反応を
行なえは基質は解体してしまう。微生物の増殖中の培地
を用いるはあいには、微生物が反応を進めるのに充分な
加水分解酵素全産生する前に死んでしまわないように反
応条件は充分に穏やかでなけれはならない。したがって
、一般的には大気圧、約１０〜３５°０で約１２時間〜
１０日間反応を行なう。
つきに実施例をあげて本発明をさらに詳しく説明するが
、本発明はかかる実ｍ例にのみ限定されるものではない
。なお、実施例において微生物学的還元に供する基質で
あるγ−ハローアセト酢酸誘導体はつぎに示す方法によ
って製造したものである。すなわち、γ−クロローアセ
ト酢酸誘廊体は０．Ｄ、ハードおよびＨ，Ｌ、アバ−ネ
ジ−（０，Ｄ、 Ｈｕｒ６ ａｎｄ Ｈ，Ｌ、 Ａｂｅ
ｒｎｅｔｈｙ） （Ｊ、 Ａｍ、 Ｏｈｅｍ。
、本発明はかかる実ｍ例にのみ限定されるものではない
。なお、実施例において微生物学的還元に供する基質で
あるγ−ハローアセト酢酸誘導体はつぎに示す方法によ
って製造したものである。すなわち、γ−クロローアセ
ト酢酸誘廊体は０．Ｄ、ハードおよびＨ，Ｌ、アバ−ネ
ジ−（０，Ｄ、 Ｈｕｒ６ ａｎｄ Ｈ，Ｌ、 Ａｂｅ
ｒｎｅｔｈｙ） （Ｊ、 Ａｍ、 Ｏｈｅｍ。
５ｏａ０、且、１１４７ （１９４０） 、）１７）一
般的方法にしたがってジケテンから製造し、またγ−ブ
ロモーア七ト酢酸誘導体はＦ、チック、Ｎ、Ｔ、Ｍ、ウ
ィルスモア（Ｆ、 ０ｈｉｃｋ、 Ｎ、Ｔ、Ｍ、Ｗｉｌ
ｓｍｏｒｅ） （Ｊ、 Ｏｈｅｍ、 Ｓｏｃ、 １９７
８（１９１０） ）の方法にしたがってジケテンから製
造した。つぎにかかる反応の反応式を示す。
般的方法にしたがってジケテンから製造し、またγ−ブ
ロモーア七ト酢酸誘導体はＦ、チック、Ｎ、Ｔ、Ｍ、ウ
ィルスモア（Ｆ、 ０ｈｉｃｋ、 Ｎ、Ｔ、Ｍ、Ｗｉｌ
ｓｍｏｒｅ） （Ｊ、 Ｏｈｅｍ、 Ｓｏｃ、 １９７
８（１９１０） ）の方法にしたがってジケテンから製
造した。つぎにかかる反応の反応式を示す。
Ｘ＝ａｔまたはＢｒ
Ｙ＝Ｈまたはアルキル
Ｒ＝前記と同じ
また必要なら、γ−ハロ酢酸エステルから通常のグリニ
ヤール反応によってγ−ハローアセト酢酸誘導体を製造
することもできる。たとえば、γ−クロロオクチルエス
テルを２価のマグネシウムとエーテル中で４８時間還流
することによりγ−クロローアセト酢酸オクチルエステ
ルか容易にえられた。また溶媒を除去すればアセト酢！
ｉクチルエステルがおよそ７０％回収された。
ヤール反応によってγ−ハローアセト酢酸誘導体を製造
することもできる。たとえば、γ−クロロオクチルエス
テルを２価のマグネシウムとエーテル中で４８時間還流
することによりγ−クロローアセト酢酸オクチルエステ
ルか容易にえられた。また溶媒を除去すればアセト酢！
ｉクチルエステルがおよそ７０％回収された。
γ−ヒドロキレアセト酢酸誘導体は対応するγ−ブロモ
アセト酢酸誘導体をジオキサン：水（１： １ ） ０
）溶液中で０ａＯＯ３と２５８０で１２時間反応させる
ことにより製造した。
アセト酢酸誘導体をジオキサン：水（１： １ ） ０
）溶液中で０ａＯＯ３と２５８０で１２時間反応させる
ことにより製造した。
各実施例でえられた化合物の構造は核磁気共鳴（ＮＭＲ
） 、赤外線吸収スペクトル（工Ｒ）および薄層クロマ
トグラフィー（’Ｉ’ＬＯ）の移＠度により同定した。
） 、赤外線吸収スペクトル（工Ｒ）および薄層クロマ
トグラフィー（’Ｉ’ＬＯ）の移＠度により同定した。
実施例１（酵母）
［（ト）４−クロロ−３但）−ヒドロキシ酪酸エステル
の製法］ ｆ）発酵 下記の組成の寒天培地でカンジダ・ケフイル（Ｏａｎｄ
ｉｄｎ ｋｅｆｙｒ） ＮＲＲＬ Ｙ−３２９を培養し
た。
の製法］ ｆ）発酵 下記の組成の寒天培地でカンジダ・ケフイル（Ｏａｎｄ
ｉｄｎ ｋｅｆｙｒ） ＮＲＲＬ Ｙ−３２９を培養し
た。
（寒天培地）
寒天（ａｇａｒ）、 ２０
ｆグルコース １０ ｆ酵母
エキス ２．５ｆｉｃ ２ ｕ
ｐ Ｏ４１ｆ／ 蒸留水 全量１１（２０ｐ、ｓ
、ｉ、 （ｐｏｕｎｄ ｐｅｒ ５ｑｕａｒｅ １ｎｃ
ｈ）で１５分滅菌）１週間培養したのち、寒天斜面（ｓ
ｌａｎｔ）から表面の増殖部（ｓｕｒｆａｏｅ ｇｒｏ
ｗｔｈ）をとり、０．８５％生理食４水５ｍｌに懸濁し
た。かくして翫られた懸濁欣１ｍｌを下記の組成の培地
（フォーゲル培地（Ｖｏｇｅｌ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ）
） ５０ ｍ（Ｉを含む２５０ ｍＩ＆エルレンマイヤ
ーフラスコに接種した（Ｆ−１ステージ）。
ｆグルコース １０ ｆ酵母
エキス ２．５ｆｉｃ ２ ｕ
ｐ Ｏ４１ｆ／ 蒸留水 全量１１（２０ｐ、ｓ
、ｉ、 （ｐｏｕｎｄ ｐｅｒ ５ｑｕａｒｅ １ｎｃ
ｈ）で１５分滅菌）１週間培養したのち、寒天斜面（ｓ
ｌａｎｔ）から表面の増殖部（ｓｕｒｆａｏｅ ｇｒｏ
ｗｔｈ）をとり、０．８５％生理食４水５ｍｌに懸濁し
た。かくして翫られた懸濁欣１ｍｌを下記の組成の培地
（フォーゲル培地（Ｖｏｇｅｌ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ）
） ５０ ｍ（Ｉを含む２５０ ｍＩ＆エルレンマイヤ
ーフラスコに接種した（Ｆ−１ステージ）。
（培地組成）
酵母エキス ５ｇカザミノ酸（
Ｏａｓａｍｉｎｏ ａｃｉａ） ら ｇデ
キストロース ４０ ｆＮａ
−シトレート−５隆Ｈ２０３ｇＫＨ２Ｆ０．
５ １１ＮＨ１４Ｎｏ３
２ １１ ０＆０１２−２Ｈ２００，１ｇ Ｍ、１９０４・７Ｈ２００，２ｆ 微量成分溶液 ０．１ｍｎ蒸留水
全量１１ｐＨ５，６ （３Ｑ ｐ、ｓ、ｉ、で１５分滅菌） （微量成分溶液） ９／１００
ｍ１クエン酸−ＩＨ３０５ ＺｎＳＯ，−７Ｈ２０７ Ｆｔ、（１１，）２（Ｓｏ、）２−６Ｈ２０ｉＣ！ｕｓ
ｏ４’ ５Ｈ２００ｒ ２５ ’ｂＡｒ＞ ＳＯ４・ｌＨ２Ｏ０，０５Ｈ，ＢＯ３０，
０５ ＮａＨ２ＭＯ′・、−２Ｈ２００，０５ついで前記フラ
スコを２５°Ｃでロータリーシェーカー（ｒｏｔａｒｙ
５ｈａｌｃｓｒ） （２５０サイクル／分−２＃ラジ
アス（ｒａｄｉｕｓ）上で２４時間インキュベートした
のち、体積にして１０％分の該培養液を前記フォーゲル
の培地５０ｍ／を含む別の２５０ｍｚエルレンマイヤー
フラスコに移した（Ｆ−２ステージ）。ロータリーシェ
ーカーで２４時間インキュベーションしたのち、γ−ク
ロ四ア七ト酢酸オクチルエステル１５０ｍ、を含む０．
１ｍｊの１０％トウイーン８０を加えた。？−２ステー
ジのフラスコをＦ−１ステージのばあいと同じ条件の下
でさらに２４時間インキュベートした。
Ｏａｓａｍｉｎｏ ａｃｉａ） ら ｇデ
キストロース ４０ ｆＮａ
−シトレート−５隆Ｈ２０３ｇＫＨ２Ｆ０．
５ １１ＮＨ１４Ｎｏ３
２ １１ ０＆０１２−２Ｈ２００，１ｇ Ｍ、１９０４・７Ｈ２００，２ｆ 微量成分溶液 ０．１ｍｎ蒸留水
全量１１ｐＨ５，６ （３Ｑ ｐ、ｓ、ｉ、で１５分滅菌） （微量成分溶液） ９／１００
ｍ１クエン酸−ＩＨ３０５ ＺｎＳＯ，−７Ｈ２０７ Ｆｔ、（１１，）２（Ｓｏ、）２−６Ｈ２０ｉＣ！ｕｓ
ｏ４’ ５Ｈ２００ｒ ２５ ’ｂＡｒ＞ ＳＯ４・ｌＨ２Ｏ０，０５Ｈ，ＢＯ３０，
０５ ＮａＨ２ＭＯ′・、−２Ｈ２００，０５ついで前記フラ
スコを２５°Ｃでロータリーシェーカー（ｒｏｔａｒｙ
５ｈａｌｃｓｒ） （２５０サイクル／分−２＃ラジ
アス（ｒａｄｉｕｓ）上で２４時間インキュベートした
のち、体積にして１０％分の該培養液を前記フォーゲル
の培地５０ｍ／を含む別の２５０ｍｚエルレンマイヤー
フラスコに移した（Ｆ−２ステージ）。ロータリーシェ
ーカーで２４時間インキュベーションしたのち、γ−ク
ロ四ア七ト酢酸オクチルエステル１５０ｍ、を含む０．
１ｍｊの１０％トウイーン８０を加えた。？−２ステー
ジのフラスコをＦ−１ステージのばあいと同じ条件の下
でさらに２４時間インキュベートした。
（Ｂλ単 離
γ−クロロアセト酢酸オクチルエステルの添加後２４時
間に菌体を遠心分離により除去した。上清を酢酸エチル
５０ｍ４で６回、充分に抽出し、酢酸エチル層をＮａ２
ｓｏ、上で乾燥し、ついで蒸発させて油状残渣１８６
ｍ ｐをえた。えられた残液を流動層（ｍｏｂｉｌｅ
ｐｈａＩｌｌｅ） ０．５ｍｊに溶解し、？リカゲル（
ＭＮ−キーゼルゲル６０）のカラム（Ｉ Ｘ ２５ｏｍ
）にのせ、スカリーソルブＢ （Ｓｋｅｌｌｙｓｏｌｖ
ｅ Ｂ） ：酢酸エチル＝８：１の溶媒で溶出し、溶出
画分１４ｍ１を集めた。
間に菌体を遠心分離により除去した。上清を酢酸エチル
５０ｍ４で６回、充分に抽出し、酢酸エチル層をＮａ２
ｓｏ、上で乾燥し、ついで蒸発させて油状残渣１８６
ｍ ｐをえた。えられた残液を流動層（ｍｏｂｉｌｅ
ｐｈａＩｌｌｅ） ０．５ｍｊに溶解し、？リカゲル（
ＭＮ−キーゼルゲル６０）のカラム（Ｉ Ｘ ２５ｏｍ
）にのせ、スカリーソルブＢ （Ｓｋｅｌｌｙｓｏｌｖ
ｅ Ｂ） ：酢酸エチル＝８：１の溶媒で溶出し、溶出
画分１４ｍ１を集めた。
目的物質を含有するフラクション６および７をとり、濃
縮乾固して１２０ｍ、の結晶をえた。酢酸エチル−ヘキ
サンがら再結晶して４−りａ 四−３（Ｒ）−ヒドロキ
シ酪酸オクチルエステル１０７ｍ９をえた。
縮乾固して１２０ｍ、の結晶をえた。酢酸エチル−ヘキ
サンがら再結晶して４−りａ 四−３（Ｒ）−ヒドロキ
シ酪酸オクチルエステル１０７ｍ９をえた。
〔α〕２３＋１６．６°（０，４，４５） （ａａａｚ
３）ＮＲ（ＣＤＣｌ３中）：δ（ｐｐｍ） ０．８８（ｉ、ｔｒ、ディスト−節ナル、０Ｈ３−（Ｏ
Ｈ２）１１１−）、１．２８ （１０Ｈ，ｓ、−（ＯＨ
２）５−）、１．６５ （２Ｈ，ｍ、 −０Ｈ２−ａＨ
２，−ＯＨ，０−０−）、１ ２．６２（２Ｈ１ｄＳ、Ｔ、＝６進、−囲一〜−００Ｏ
Ｒ）、Ｉ ＯＨ ５，２２（ＩＨ，ｂｒ、 −ＯＨ）、 元累分析：０□、Ｈ２３０３Ｃｌ 理論値部）： （！５７．４７ Ｈ９，２５実１Ｓｔ
ｌｉ値叫）： ０５７．５２ １（９，［１７ＴＬＯ＜
ブリンクマン（Ｂｒｉｎｋｍｍ）シリカゲル板、０．２
５ｃｍ１ｌ；Ｍ ；展開溶媒：スカリーソルブＢ：酢酸
エチル＝５１） Ｒ０値：０．５ 実施例２ （ｉ’ｆ）止（ｒｅｓｔｉｎｇ）菌体）市販のフレッシ
ュのパン酵母、サツカロミセス１セレピシｘ （Ｓａｃ
ｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ） （レ
ッド・スター（Ｒｅｄ ５ｔａｒ） １００ｇを水、通
水（Ｔａｐ ｗａｔｅｒ） ２５０ｍ／に懸濁し、そこ
ヘシュークロース１０ｇとγ−クロロアセト酢酸オクチ
ルエステル６．６ｇを加えた０えられた反応混合物を四
−タリーシェーカー（２５０サイクル／分−２″ラジア
ス）上で２５８０で２４時間インキユベートシたのち、
シュークロース１０．をさらに添加し、さらに２４時間
反応を進めた。ついでセライトのパッド（ｐａｔｉ ｏ
ｆ ｃｅｌｌｔｅ）で沖過して菌体を除去した。菌体を
水および酢酸エチルで洗浄し、洗液をｒ液と合わせ、酢
酸エチルで充分に抽出した。酢酸エチル層をＭｇＳＯ４
上で乾燥し、蒸発させて油状の残液をえた。かくしてえ
られた残液をシリカゲルカラムのクロマトグラフィーに
供し、低融点の固体として４−クロロ−３（Ｒ）−ヒド
ロキシ酪酸オクチルエステル２．５２．をえた。
３）ＮＲ（ＣＤＣｌ３中）：δ（ｐｐｍ） ０．８８（ｉ、ｔｒ、ディスト−節ナル、０Ｈ３−（Ｏ
Ｈ２）１１１−）、１．２８ （１０Ｈ，ｓ、−（ＯＨ
２）５−）、１．６５ （２Ｈ，ｍ、 −０Ｈ２−ａＨ
２，−ＯＨ，０−０−）、１ ２．６２（２Ｈ１ｄＳ、Ｔ、＝６進、−囲一〜−００Ｏ
Ｒ）、Ｉ ＯＨ ５，２２（ＩＨ，ｂｒ、 −ＯＨ）、 元累分析：０□、Ｈ２３０３Ｃｌ 理論値部）： （！５７．４７ Ｈ９，２５実１Ｓｔ
ｌｉ値叫）： ０５７．５２ １（９，［１７ＴＬＯ＜
ブリンクマン（Ｂｒｉｎｋｍｍ）シリカゲル板、０．２
５ｃｍ１ｌ；Ｍ ；展開溶媒：スカリーソルブＢ：酢酸
エチル＝５１） Ｒ０値：０．５ 実施例２ （ｉ’ｆ）止（ｒｅｓｔｉｎｇ）菌体）市販のフレッシ
ュのパン酵母、サツカロミセス１セレピシｘ （Ｓａｃ
ｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ） （レ
ッド・スター（Ｒｅｄ ５ｔａｒ） １００ｇを水、通
水（Ｔａｐ ｗａｔｅｒ） ２５０ｍ／に懸濁し、そこ
ヘシュークロース１０ｇとγ−クロロアセト酢酸オクチ
ルエステル６．６ｇを加えた０えられた反応混合物を四
−タリーシェーカー（２５０サイクル／分−２″ラジア
ス）上で２５８０で２４時間インキユベートシたのち、
シュークロース１０．をさらに添加し、さらに２４時間
反応を進めた。ついでセライトのパッド（ｐａｔｉ ｏ
ｆ ｃｅｌｌｔｅ）で沖過して菌体を除去した。菌体を
水および酢酸エチルで洗浄し、洗液をｒ液と合わせ、酢
酸エチルで充分に抽出した。酢酸エチル層をＭｇＳＯ４
上で乾燥し、蒸発させて油状の残液をえた。かくしてえ
られた残液をシリカゲルカラムのクロマトグラフィーに
供し、低融点の固体として４−クロロ−３（Ｒ）−ヒド
ロキシ酪酸オクチルエステル２．５２．をえた。
〔α）”３＋１３．２°（０，４，０，０ＨＣ１３）実
施例６ 〔（ト）４−クリロー３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸ベンジ
ルエステルの製造〕（式中、φはベンゼン環を示す） （Ａ）発酵 一ト記の組成の寒天培地でグリコクラジウム・ビＬ／
ンス（ＧｉｉｃｏｃｌａｃＬｉｕｍ ｖｉｒｅｎｓ）Ａ
ＴＯＣ！ １５６６２を培養した０ （寒天培地） モルト（Ｍａｌｔ） ｘキス ２０９
グルコース ２０９５２
．２ １ｇ寒天
２０゜ 蒸留水 全量１ノ（２０ｐ
、ｓ、ｉ、で１５分滅菌） １週間培養したのち、寒天斜面から表面の増殖部をとり
、０．８５％生理食塩水５ｒＨｔに懸濁した。
施例６ 〔（ト）４−クリロー３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸ベンジ
ルエステルの製造〕（式中、φはベンゼン環を示す） （Ａ）発酵 一ト記の組成の寒天培地でグリコクラジウム・ビＬ／
ンス（ＧｉｉｃｏｃｌａｃＬｉｕｍ ｖｉｒｅｎｓ）Ａ
ＴＯＣ！ １５６６２を培養した０ （寒天培地） モルト（Ｍａｌｔ） ｘキス ２０９
グルコース ２０９５２
．２ １ｇ寒天
２０゜ 蒸留水 全量１ノ（２０ｐ
、ｓ、ｉ、で１５分滅菌） １週間培養したのち、寒天斜面から表面の増殖部をとり
、０．８５％生理食塩水５ｒＨｔに懸濁した。
かくしてえられた懸濁液１ｍｔを下記の組成の培地（ダ
イズデキスト四−ス（Ｓｏｙｂｅａｎ ｄｅｘｔｒｏｓ
ｅ）培地）５０ｍｌヲ含ム２５０ｍ１エルレンマイヤー
フラスコに接種した（Ｆ−１ステージ）。
イズデキスト四−ス（Ｓｏｙｂｅａｎ ｄｅｘｔｒｏｓ
ｅ）培地）５０ｍｌヲ含ム２５０ｍ１エルレンマイヤー
フラスコに接種した（Ｆ−１ステージ）。
（培地組成）
ダイズミール（Ｓｏｙｂｅａｎ ｍｅａｊ）
５ｇデキストロース ２
０゜Ｎａｏｔ ５ｇＫ
Ｈ２Ｐ０． ５９醇 母
５゜水
１ｔｐＨ７，０ （１５ｐ、ｓ、ｉ、で１５分間オートクレーブ）ついで
前記フラスコを四−タリーシェーカー（２５０サイクル
／分−２〃ラジアス）上で２５°Ｃで２４時間インキュ
ベートしたのち、体積にして１０％分の該培養液を前記
ダイズデキストロース培地５ａｍｔ ヲ含ｂ 別の２５
０ｍｚエルレンマイヤーフラスコに移した（Ｆ−２ステ
ージ）。ロータリーシェーカーで２４時間インキュベー
トしたのち、γ−りｐロアセト酢酸ベンジルエステル１
５０ｍｇを含む０、ｉｍｌの１０％トウィーン８０を加
えた。ト２ステージのフラスコをト１ステージのばあい
と同じ条件下でさらに２４時間インキュベートした。
５ｇデキストロース ２
０゜Ｎａｏｔ ５ｇＫ
Ｈ２Ｐ０． ５９醇 母
５゜水
１ｔｐＨ７，０ （１５ｐ、ｓ、ｉ、で１５分間オートクレーブ）ついで
前記フラスコを四−タリーシェーカー（２５０サイクル
／分−２〃ラジアス）上で２５°Ｃで２４時間インキュ
ベートしたのち、体積にして１０％分の該培養液を前記
ダイズデキストロース培地５ａｍｔ ヲ含ｂ 別の２５
０ｍｚエルレンマイヤーフラスコに移した（Ｆ−２ステ
ージ）。ロータリーシェーカーで２４時間インキュベー
トしたのち、γ−りｐロアセト酢酸ベンジルエステル１
５０ｍｇを含む０、ｉｍｌの１０％トウィーン８０を加
えた。ト２ステージのフラスコをト１ステージのばあい
と同じ条件下でさらに２４時間インキュベートした。
（Ｂ）単 離
γ−り００アセト酢酸ベンジルエステルの添加壁２４時
間に菌体を沖去した。炉液を酢酸エチル５Ｑｍ４で６回
、充分に抽出し、酢酸エチル層をＭｇＳＯ４上で乾燥し
、ついで真空濃縮して残渣１６０ｍｐをえた。かくして
えられた残液をシリカゲル（ＭＮ−キーゼルゲル６０）
のカラム（Ｉ Ｘ ２５ａｍ）を用いたりｐマドグラフ
ィーに供し、スヵリーソルプＢ＝酢酸エチル＝１０：１
の溶媒で溶出し、溶出画分１２ｍ１を隼めた。目的物質
を含む７ラクシヨン１１〜１６をとり、蒸発乾固して４
−クロロ−５（Ｒ） −ヒドロキシ酢酸ベンジルエステ
ル１１５ｍｇをえた。
間に菌体を沖去した。炉液を酢酸エチル５Ｑｍ４で６回
、充分に抽出し、酢酸エチル層をＭｇＳＯ４上で乾燥し
、ついで真空濃縮して残渣１６０ｍｐをえた。かくして
えられた残液をシリカゲル（ＭＮ−キーゼルゲル６０）
のカラム（Ｉ Ｘ ２５ａｍ）を用いたりｐマドグラフ
ィーに供し、スヵリーソルプＢ＝酢酸エチル＝１０：１
の溶媒で溶出し、溶出画分１２ｍ１を隼めた。目的物質
を含む７ラクシヨン１１〜１６をとり、蒸発乾固して４
−クロロ−５（Ｒ） −ヒドロキシ酢酸ベンジルエステ
ル１１５ｍｇをえた。
［α］ ＋８．７°（０％ ５．２６ ｉ ＧＨＯＪ
３）ＰＭＲ：δ（ｐ陣） ２−６５ （２Ｈ，ｄ、 、Ｔ ＝６Ｈｚ、 −０Ｈ−
ＯＨ２００ＯＲ）、Ｈ ３，２０（ＩＨ，ｂｒ、 −０Ｈ）、 ５．５４ （２ＨＳａＳ：ｒ＝＝ｓＨｚ： ａｔ−ａａ
＝ａａ）、Ｈ ４，２０（ＩＨ，ｍ、 −０Ｈ２−〇Ｈ−ＣＩＨ２−）
、− Ｈ ５，１２（２Ｈ１日、−ａ −ｏ −０％ ０６Ｈ５）
、１ ７．６１ （５Ｈ，ｓ、ア四マチックプロトン）元素分
析： Ｏｌ、Ｈよ、０３Ｃ！ 理論値し）：ａ５７．７７ ｕ５．７Ｂ実測値（％）
： ａ ５７．６４ Ｒ５，６７ＴＩＩＯ（実施例
１と同じ条件） Ｒ８値： ０．４５ 実施例４〜２６ 第１表に示す微生物１〜２０をそれぞれ用い、基質とし
てγ−クロロアセト酢酸オクチルエステルを１ｍ９７ｍ
１の濃度で加えたほがは実施例１と同様にして目的とす
る（ト）４−クロロ−３体）−ヒドロキシ酪酸オクチル
エステルをえた。また該実施例の方法は酵母の培地に基
質を連続的に加えてくり返し行なった。基質と酵母の菌
体の重量比が約１ ： １．５のばあいに目的物質への
変換率が優れていた。
３）ＰＭＲ：δ（ｐ陣） ２−６５ （２Ｈ，ｄ、 、Ｔ ＝６Ｈｚ、 −０Ｈ−
ＯＨ２００ＯＲ）、Ｈ ３，２０（ＩＨ，ｂｒ、 −０Ｈ）、 ５．５４ （２ＨＳａＳ：ｒ＝＝ｓＨｚ： ａｔ−ａａ
＝ａａ）、Ｈ ４，２０（ＩＨ，ｍ、 −０Ｈ２−〇Ｈ−ＣＩＨ２−）
、− Ｈ ５，１２（２Ｈ１日、−ａ −ｏ −０％ ０６Ｈ５）
、１ ７．６１ （５Ｈ，ｓ、ア四マチックプロトン）元素分
析： Ｏｌ、Ｈよ、０３Ｃ！ 理論値し）：ａ５７．７７ ｕ５．７Ｂ実測値（％）
： ａ ５７．６４ Ｒ５，６７ＴＩＩＯ（実施例
１と同じ条件） Ｒ８値： ０．４５ 実施例４〜２６ 第１表に示す微生物１〜２０をそれぞれ用い、基質とし
てγ−クロロアセト酢酸オクチルエステルを１ｍ９７ｍ
１の濃度で加えたほがは実施例１と同様にして目的とす
る（ト）４−クロロ−３体）−ヒドロキシ酪酸オクチル
エステルをえた。また該実施例の方法は酵母の培地に基
質を連続的に加えてくり返し行なった。基質と酵母の菌
体の重量比が約１ ： １．５のばあいに目的物質への
変換率が優れていた。
実施例２４〜４８
第２表に示す微生物１〜２５をそれぞれ用い、基質とし
てγ−りｏｎアセト酢酸オクチルエステルを１ｍｇ／ｍ
ｌの濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目的とす
る（ト）４−り四ロー３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オクチ
ルエステルをえた。
てγ−りｏｎアセト酢酸オクチルエステルを１ｍｇ／ｍ
ｌの濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目的とす
る（ト）４−り四ロー３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オクチ
ルエステルをえた。
実施例４９〜６８
第１表に示す微生物１〜２ｏをそれぞれ用い、基質とし
てγ−りｎｏアセト酢酸ベンジルエステルをｌ ｍｙ
／ ｍｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目
的とする（ト）４−り四ロー６（ト））−ヒト四キシ酪
酸ベンジルエステルをえた。各実施例でえられた化合物
の特性値は実施例１のそれと一致した。
てγ−りｎｏアセト酢酸ベンジルエステルをｌ ｍｙ
／ ｍｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目
的とする（ト）４−り四ロー６（ト））−ヒト四キシ酪
酸ベンジルエステルをえた。各実施例でえられた化合物
の特性値は実施例１のそれと一致した。
実施例６９〜９６
第２表に示す微生物１〜２５をそれぞれ用い、Ｉｎにし
て目的とする…４−り四ロー３（Ｒ）−ヒト四キシ醋酸
ベンジルエステルをえた。各実施例でえられた化合物の
特性値は実施例６のそれと一致した。
て目的とする…４−り四ロー３（Ｒ）−ヒト四キシ醋酸
ベンジルエステルをえた。各実施例でえられた化合物の
特性値は実施例６のそれと一致した。
実施例９４
〔（ト）４−り四ロー祷）−ヒドロキシ酪酸アニリドの
製法〕基質として４−クロ四アセドア貴リドを１！ｎｇ
／ｍｌの濃度で用いたほかは実施例２と同様にして目的
とする（ト）４−クロロ−６（ト））−ヒドロキシ酪酸
アニリドをえた。
製法〕基質として４−クロ四アセドア貴リドを１！ｎｇ
／ｍｌの濃度で用いたほかは実施例２と同様にして目的
とする（ト）４−クロロ−６（ト））−ヒドロキシ酪酸
アニリドをえた。
ｍｐ ： １１０〜１１１°Ｃ
〔α） ＋１７．５°（ｏ、５．０、ＯＨＯ／３）１
ＦＭＲ（ＣＤ３００ Ｄ３中）：δ（ｐ戸）２．６７
（２Ｈ，ａ、 、Ｔ＝６Ｈ２，−Ｈ０ＨＯ！！２−０Ｏ
Ｎ［（Ｒ）、３．６６（２Ｈ１ａＳ、Ｔ＝６七、＋ＭＯ
Ｈ２０ＨＯＨ−Ｒ）、４．４：５ （ＩＨｌｍ １−
％ −０旦ＯＨ−ＯＨａ −）、７．０６〜７．４４
（１、ｍ、アロマチックブ四トン、メタおよびパラ）、 ７．６９（２Ｈ，ｅＬ、 Ｊ＝６）ＩＺ、 アａｖチ
ックプロトン、オルト）、９．２４ （ＩＨ，ｂｒ、−
０−Ｎ−φ）１ 元素分析：Ｃ工。Ｈ工、Ｎｏ２０１ 理論値部）： ０５６．２１ Ｒ５，６６実測値快）
’ ０５６．１７ Ｒ５，４７実施例９５〜１１４ 第１表に示す微生物１〜２０をそれぞれ用い、基質とし
てγ−クロｐアセトアセトアニリドを１＋ｒ＋ｓ＋ ／
ｍ ｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目
的とする（ト）４−りｏｎ−５（ト））−ヒドロキシ酪
酸アニリドをえた。
（２Ｈ，ａ、 、Ｔ＝６Ｈ２，−Ｈ０ＨＯ！！２−０Ｏ
Ｎ［（Ｒ）、３．６６（２Ｈ１ａＳ、Ｔ＝６七、＋ＭＯ
Ｈ２０ＨＯＨ−Ｒ）、４．４：５ （ＩＨｌｍ １−
％ −０旦ＯＨ−ＯＨａ −）、７．０６〜７．４４
（１、ｍ、アロマチックブ四トン、メタおよびパラ）、 ７．６９（２Ｈ，ｅＬ、 Ｊ＝６）ＩＺ、 アａｖチ
ックプロトン、オルト）、９．２４ （ＩＨ，ｂｒ、−
０−Ｎ−φ）１ 元素分析：Ｃ工。Ｈ工、Ｎｏ２０１ 理論値部）： ０５６．２１ Ｒ５，６６実測値快）
’ ０５６．１７ Ｒ５，４７実施例９５〜１１４ 第１表に示す微生物１〜２０をそれぞれ用い、基質とし
てγ−クロｐアセトアセトアニリドを１＋ｒ＋ｓ＋ ／
ｍ ｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目
的とする（ト）４−りｏｎ−５（ト））−ヒドロキシ酪
酸アニリドをえた。
実施例１１５〜１６９
第２表に示す微生物１〜２５をそれぞれ用い、基質とし
てγ−クロロアセトアセトアニリドをｉｍｇ／ｍｔの濃
度で用いたほかは実施例６と同様にして目的とする（ト
）４−クロロ−紗）−ヒドロキシ酪酸アニリドをえた。
てγ−クロロアセトアセトアニリドをｉｍｇ／ｍｔの濃
度で用いたほかは実施例６と同様にして目的とする（ト
）４−クロロ−紗）−ヒドロキシ酪酸アニリドをえた。
実施例１４０〜１５９
第１表に示す微生物１〜２ｏをそれぞれ用い、基質とし
てγ−ブ四モアセト酢酸オクチルエステルを１ ｍ ｇ
／ｍ ｔの濃度で用いたけがは実施例１と同様にして目
的とする（ト）４−ブロモ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸
オクチルエステルをえた。
てγ−ブ四モアセト酢酸オクチルエステルを１ ｍ ｇ
／ｍ ｔの濃度で用いたけがは実施例１と同様にして目
的とする（ト）４−ブロモ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸
オクチルエステルをえた。
実施例１６０〜１８４
第２表に示す微生物１〜２５をそれぞれ用い、基質とし
てγ−ブｐモアセト酢酸オクチルエステルを１ｍ ｐ／
ｍ ｌの濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目的
とする（ト）４−プルモー６（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オ
クチルエステルをえた。
てγ−ブｐモアセト酢酸オクチルエステルを１ｍ ｐ／
ｍ ｌの濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目的
とする（ト）４−プルモー６（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オ
クチルエステルをえた。
実施例１８５〜２０４
第１表に示す微生物１〜２０をそれぞれ用い、基質トし
てγ−ブ四モアセト酢酸ベンジルエステルを１ ｍ ｇ
／ｍ ｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目
的とする（ト）４−ブロモ−６（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸
ベンジルエステルをエタ。
てγ−ブ四モアセト酢酸ベンジルエステルを１ ｍ ｇ
／ｍ ｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目
的とする（ト）４−ブロモ−６（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸
ベンジルエステルをエタ。
実施例２０５〜２２９
第２表に示す微生物１〜２５をそれぞれ用い、基質とし
てγ−ブ四モアセト酢酸ベンジルエステルを１ ｍ ９
７ｍ ｌの濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目
的とする（ト）４−プロモー６仇）−ヒドロキシ酪酸ベ
ンジルエステルをえた。
てγ−ブ四モアセト酢酸ベンジルエステルを１ ｍ ９
７ｍ ｌの濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目
的とする（ト）４−プロモー６仇）−ヒドロキシ酪酸ベ
ンジルエステルをえた。
実施例２６０〜２４９
第１表に示す微生物１〜２０をそれぞれ用い、基質とし
てｒ−ブロモアセトアニリドをｊｍｇ／ｍｌの濃度で用
いたほかは実施例１と同様にして目的とする（ト）４−
ブシモー６（８）−ヒドロキシ酪酸アニリドをえた。
てｒ−ブロモアセトアニリドをｊｍｇ／ｍｌの濃度で用
いたほかは実施例１と同様にして目的とする（ト）４−
ブシモー６（８）−ヒドロキシ酪酸アニリドをえた。
実施例２５０〜２７４
第２表に示す微生物１〜２５をそれぞれ用い、基質とし
てγ−ブ四モアセトアセトアニリドをＩｍｐ／ｍｌの濃
度で用いたほかは実施例３と同様にして目的とする（ト
）４−ブ四モー６（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸アニリドをえ
た。
てγ−ブ四モアセトアセトアニリドをＩｍｐ／ｍｌの濃
度で用いたほかは実施例３と同様にして目的とする（ト
）４−ブ四モー６（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸アニリドをえ
た。
実施例２７５〜２９４
第１表に示す微生物１〜２ｏをそれぞれ用い、基質とし
てｒ−ヒトルキシアセト酢酸オクチルエステルを１ ｍ
ｇ／ｍｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目
的とする４−ヒドロキシ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オ
クチルエステルをえた。
てｒ−ヒトルキシアセト酢酸オクチルエステルを１ ｍ
ｇ／ｍｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目
的とする４−ヒドロキシ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オ
クチルエステルをえた。
実施例２９５〜６１９
第２表に示す微生物１〜２５をそれぞれ用い、基質とし
てｒ−ヒドロキシアセト酢酸オクチルエステルを１ ｍ
ｇ７ｍｌの濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目
的とする４−ヒドロキシ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オ
クチルエステルをえた。
てｒ−ヒドロキシアセト酢酸オクチルエステルを１ ｍ
ｇ７ｍｌの濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目
的とする４−ヒドロキシ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オ
クチルエステルをえた。
実施例６２０〜３６９
第１表に示す微生物１〜２０をそれぞれ用い、基質とし
てγ−ヒドロキシアセトアセトアニリドを１ ｒｎｙ／
ｍｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目的と
する４−ヒドロキシ−６（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸アニリ
ドをえた。
てγ−ヒドロキシアセトアセトアニリドを１ ｒｎｙ／
ｍｌの濃度で用いたほかは実施例１と同様にして目的と
する４−ヒドロキシ−６（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸アニリ
ドをえた。
実施例３４０〜３６４
第２表に示す微生物１〜２５をそれぞれ用い、基質とし
てγ−ヒドロキシアセトアセトアニリドを１ ｍ９７ｍ
１の濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目的とす
る４−ヒドロキシ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸アニリド
をえた。
てγ−ヒドロキシアセトアセトアニリドを１ ｍ９７ｍ
１の濃度で用いたほかは実施例６と同様にして目的とす
る４−ヒドロキシ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸アニリド
をえた。
実施例６６５
〔メチル−４−クロロ−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレー
ト（Ｘ）の製造）（■） （Ｘ） メチル−４−りａロアセトアセテート（ＩＸ）の１００
ｍｇをブタ心臓由来のβ−ヒドロキシアシルＧｏＡデ
ヒドロゲナーゼ（ｘａｌ、１．１．３５） （ジグＹ
（Ｓｉｇｍａ）社製、Ｈ４６２６）の２９ユニツト（ｕ
ｎｉｔ ）とＮＡＤＨ（シグマ社製、９０％）の１．５
６ｇを含む０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６，
５） ＆Ｏｍｌ中、２５°０で６０時間インキュベート
した。ついで反応混合物を酢酸エチル６０ｒｎｌで４回
抽出し、有機層をＨａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下に蒸
発乾固した。えられた残渣（９０ｍｇ）をシリカゲル（
１２ｇ）のカラム（１，３Ｘ！Ｊａｎ）上のクリマドグ
ラフィーに供し、スカリーソルプＢ：酢酸エチル−８：
１の溶媒系で溶出し、溶出画分２０ｍ１を集めた。各７
ラクシヨンをＴＬＯによる分析に供し、目的とするメチ
ル−４−クロロ−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレート（３
）を含む７ラクシヨン９〜１１（〔α）２３＋２３．５
°（０，５，２，０ＨＯＩ３） ） をプールした。
ト（Ｘ）の製造）（■） （Ｘ） メチル−４−りａロアセトアセテート（ＩＸ）の１００
ｍｇをブタ心臓由来のβ−ヒドロキシアシルＧｏＡデ
ヒドロゲナーゼ（ｘａｌ、１．１．３５） （ジグＹ
（Ｓｉｇｍａ）社製、Ｈ４６２６）の２９ユニツト（ｕ
ｎｉｔ ）とＮＡＤＨ（シグマ社製、９０％）の１．５
６ｇを含む０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６，
５） ＆Ｏｍｌ中、２５°０で６０時間インキュベート
した。ついで反応混合物を酢酸エチル６０ｒｎｌで４回
抽出し、有機層をＨａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下に蒸
発乾固した。えられた残渣（９０ｍｇ）をシリカゲル（
１２ｇ）のカラム（１，３Ｘ！Ｊａｎ）上のクリマドグ
ラフィーに供し、スカリーソルプＢ：酢酸エチル−８：
１の溶媒系で溶出し、溶出画分２０ｍ１を集めた。各７
ラクシヨンをＴＬＯによる分析に供し、目的とするメチ
ル−４−クロロ−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレート（３
）を含む７ラクシヨン９〜１１（〔α）２３＋２３．５
°（０，５，２，０ＨＯＩ３） ） をプールした。
実施例６６６
基質としてエチル−４−りｐロア七トアセテートを用い
たほかは実施例３６５と同様に゛して目的とスルエチル
−４−クロロ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえた
。〔α遭＋２２．７°（０，４，７，０ＨＯｊ３）実施
例６６７ 基質としてｎ−プ四ピルー４−クロロアセトアセテート
を用いたほかは実施例６６５と同様にして目的トスるｎ
−プロピル−４−クロロ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレ
ートをえた。〔α遭＋２１．５°（Ｏ１５，０、ｏＨＯ
１３）実施例６６８ 基質としてｎ−ブチル−４−り四ロアセトアセテートを
用いたほかは実施例３６５と同様にして目的とするｎ−
ブチル−４−クロｔ、−ｇ（Ｒ）−ヒドロキシブチレー
トをえた。〔α〕瞥＋２０．１°（０，３，１、ｏＨａ
１３）〔４−ハロー３（旬−ヒド四キシ酪酸のエステル
またはアミドのＬ−カルニチンへの変換〕 実施例６６９ ４−クロロ−５（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オクチルエステ
ル１．５ｇ、エタノール６ｍｔおよびトリメチルアミン
（２５重量％溶液）の混合物を水５ｍｊ中、８０〜９０
°０で約２時間加熱した。溶媒抗よび過剰のトリメチル
アミンを真空下に蒸発乾固して粗生成物１．８ｇをえた
。
たほかは実施例３６５と同様に゛して目的とスルエチル
−４−クロロ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえた
。〔α遭＋２２．７°（０，４，７，０ＨＯｊ３）実施
例６６７ 基質としてｎ−プ四ピルー４−クロロアセトアセテート
を用いたほかは実施例６６５と同様にして目的トスるｎ
−プロピル−４−クロロ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレ
ートをえた。〔α遭＋２１．５°（Ｏ１５，０、ｏＨＯ
１３）実施例６６８ 基質としてｎ−ブチル−４−り四ロアセトアセテートを
用いたほかは実施例３６５と同様にして目的とするｎ−
ブチル−４−クロｔ、−ｇ（Ｒ）−ヒドロキシブチレー
トをえた。〔α〕瞥＋２０．１°（０，３，１、ｏＨａ
１３）〔４−ハロー３（旬−ヒド四キシ酪酸のエステル
またはアミドのＬ−カルニチンへの変換〕 実施例６６９ ４−クロロ−５（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸オクチルエステ
ル１．５ｇ、エタノール６ｍｔおよびトリメチルアミン
（２５重量％溶液）の混合物を水５ｍｊ中、８０〜９０
°０で約２時間加熱した。溶媒抗よび過剰のトリメチル
アミンを真空下に蒸発乾固して粗生成物１．８ｇをえた
。
かくしてえられた粗生成物の１ｇを１０％Ｈ（Ｍ溶液７
ｍｌ中、８０〜９０°０で１．５時間加熱した。
ｍｌ中、８０〜９０°０で１．５時間加熱した。
減圧下に溶媒を蒸発させ、粗生成物を無水エタノールＩ
ｏｎ／で２回抽出し、エタノールを真空下に蒸発させた
。えられた結晶残渣を少量のエタノールに溶解し、エー
テルを加えることによってＬ−カルニチンクロリドを高
収率で（５２０ｍｇ）えた。
ｏｎ／で２回抽出し、エタノールを真空下に蒸発させた
。えられた結晶残渣を少量のエタノールに溶解し、エー
テルを加えることによってＬ−カルニチンクロリドを高
収率で（５２０ｍｇ）えた。
ｍｐ：１４２° （分解）
（α）−２ｉＳ、７°（ａ、４．５、Ｈ２０）えられた
Ｌ−カルニチンクシリドは通常のイオン交換法を用いる
ことによって医薬として好ましいＬ−カルニチンの分子
内塩（１ｎｎｅｒ ５ａｌｔ ）に容易に変換されつる
。
Ｌ−カルニチンクシリドは通常のイオン交換法を用いる
ことによって医薬として好ましいＬ−カルニチンの分子
内塩（１ｎｎｅｒ ５ａｌｔ ）に容易に変換されつる
。
実施例３７０
〔オクチル−４−ヨード−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレ
ートの製造〕（Ｍ） （ＸＩ）
オクチル−４−クロロ−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレー
ト（Ｗ）１．４２６９と無水ヨウ化ナトリウム１．２ｇ
を含むメチルエチルケトン１５ ｍｌとの混合物を２４
時間還流した。反応混合物を四−ターエバボレーターで
蒸発させ、エーテル１００ｍ１および水５０ｍｊと反応
させた。有機層を分離し、１０％チオ硫酸ナトリウム溶
液１５０ｍ１および塩水（ｂｒｉｎｅ ） １５０
ｍｌで洗浄し、ついで無水Ｎａ２５ｏ４上で乾燥した。
ートの製造〕（Ｍ） （ＸＩ）
オクチル−４−クロロ−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレー
ト（Ｗ）１．４２６９と無水ヨウ化ナトリウム１．２ｇ
を含むメチルエチルケトン１５ ｍｌとの混合物を２４
時間還流した。反応混合物を四−ターエバボレーターで
蒸発させ、エーテル１００ｍ１および水５０ｍｊと反応
させた。有機層を分離し、１０％チオ硫酸ナトリウム溶
液１５０ｍ１および塩水（ｂｒｉｎｅ ） １５０
ｍｌで洗浄し、ついで無水Ｎａ２５ｏ４上で乾燥した。
減圧下に溶媒を蒸発させることにより目的とする淡黄色
、油状のオクチル−４−ヨード−６（Ｒ）−ヒドロキシ
ブチレート（至）１．７６２９をえた。
、油状のオクチル−４−ヨード−６（Ｒ）−ヒドロキシ
ブチレート（至）１．７６２９をえた。
工Ｒ（薄膜）
３４６０ａｍ １（ＯＨ）、１７５０ｃｍ １（エステ
ル ｏ−ｏ）ＰＭＲ（Ｏ渾、中）：δ （ｐｐｍ） ３．９５〜４．２７ （ｍ、６Ｈ）、６．１７ （（１
，２Ｈ）、２．５０ （ｄ。
ル ｏ−ｏ）ＰＭＲ（Ｏ渾、中）：δ （ｐｐｍ） ３．９５〜４．２７ （ｍ、６Ｈ）、６．１７ （（１
，２Ｈ）、２．５０ （ｄ。
２Ｈ）、１．５０〜１．８７ （ｍ、 ２Ｈ）、１．３
０（ｂｓ、１２Ｈ）、０．９６（ｍ、 ５Ｈ） 〔オクチル−４−ヨード−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレ
ート（至）のＬ−カルニチンへの変換〕 （ＸＩ） （ＸＩ）↓ Ｌ−力ルニチン 化合物（３）１．６９５９を含むメタノール溶液１５Ｉ
ｒＩｌに２５％トリメチルアミン水溶液Ｆ３ｒｎｌを加
えた。反応混合物を２７°Ｏで２０時間攪拌し、溶媒お
よび過剰のトリメチルアミンを減圧下に留去して半結晶
状固体の（至）をえた。かくしてえられた残渣を少量の
エーテルで洗浄してオクタツールを除き、ついで水に溶
かし、Ｄｏｗｅｘ １−ｘ’ （ｏ「型、５０〜１００
メツシユ、カラム容量 （２，５Ｘ２５ ｃｍ） ）の
カラムに通した。カラムを蒸留水で洗浄し、最初の２０
０ｍ１の溶出液から真空下に溶媒を除去することにより
白色結晶としてＬ−カルニチン４９０ｍｇ（収率６５％
）をえた。〔α）％”−２９，２°（Ｃ１６，５、Ｒ２
０）実施例６７１ ヘキシル−４−クロロ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレー
トを用いて実施例６７０と同様にしてヘキシル−４＝ヨ
ード−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、ついでＬ
−カルニチンに変換した。
０（ｂｓ、１２Ｈ）、０．９６（ｍ、 ５Ｈ） 〔オクチル−４−ヨード−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレ
ート（至）のＬ−カルニチンへの変換〕 （ＸＩ） （ＸＩ）↓ Ｌ−力ルニチン 化合物（３）１．６９５９を含むメタノール溶液１５Ｉ
ｒＩｌに２５％トリメチルアミン水溶液Ｆ３ｒｎｌを加
えた。反応混合物を２７°Ｏで２０時間攪拌し、溶媒お
よび過剰のトリメチルアミンを減圧下に留去して半結晶
状固体の（至）をえた。かくしてえられた残渣を少量の
エーテルで洗浄してオクタツールを除き、ついで水に溶
かし、Ｄｏｗｅｘ １−ｘ’ （ｏ「型、５０〜１００
メツシユ、カラム容量 （２，５Ｘ２５ ｃｍ） ）の
カラムに通した。カラムを蒸留水で洗浄し、最初の２０
０ｍ１の溶出液から真空下に溶媒を除去することにより
白色結晶としてＬ−カルニチン４９０ｍｇ（収率６５％
）をえた。〔α）％”−２９，２°（Ｃ１６，５、Ｒ２
０）実施例６７１ ヘキシル−４−クロロ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレー
トを用いて実施例６７０と同様にしてヘキシル−４＝ヨ
ード−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、ついでＬ
−カルニチンに変換した。
実施例６７２
ヘプチル−４−クロロ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレー
トを用いて実施例６７０と同様にしてヘプチル−４−ヨ
ード−６（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、ついでＬ
−カルニチンに変換した。
トを用いて実施例６７０と同様にしてヘプチル−４−ヨ
ード−６（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、ついでＬ
−カルニチンに変換した。
実施例３７６
デシル−４−クロロ−６（→−ヒドロキシブチレートを
用いて実施例６７０と同様にしてデシル−４−ヨード−
３（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、ついでＬ−カル
ニチンに変換した。
用いて実施例６７０と同様にしてデシル−４−ヨード−
３（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、ついでＬ−カル
ニチンに変換した。
実施例６７４
メチル−クロロ−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレート■ヲ
用いて゛実施例６７０と同様にしてメチル−４−ヨード
−３（Ｒ１−ヒドロキシブチレートヲエ、ついでＬ−カ
ルニチンに変換した。
用いて゛実施例６７０と同様にしてメチル−４−ヨード
−３（Ｒ１−ヒドロキシブチレートヲエ、ついでＬ−カ
ルニチンに変換した。
実施例６７５
エチル−４−クロロ−３（Ｒ）−ヒドロキシブチレート
を用いて実施例６７０と同様にしてエチル−４−ヨード
−６（旬−ヒドロキシブチレートをえ、ついでＬ−カル
ニチンに変換した。
を用いて実施例６７０と同様にしてエチル−４−ヨード
−６（旬−ヒドロキシブチレートをえ、ついでＬ−カル
ニチンに変換した。
実施例６７６
ｎ−プロピル−４−クロロ−６（Ｒ）−ヒドロキシブチ
レートを用いて実施例６７０と同様にしてｎ−プロピル
−４−ヨード−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、
ついでＬ−カルニチンに変換した。
レートを用いて実施例６７０と同様にしてｎ−プロピル
−４−ヨード−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、
ついでＬ−カルニチンに変換した。
実施例６７７
ｎ−ブチル−４−クロロ−５（川−ヒドロキシブチレー
トを用いて実施例６７０と同様にしてｎ−ブチル−４−
ヨード−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、ついで
Ｌ−カルニチンに変換した。
トを用いて実施例６７０と同様にしてｎ−ブチル−４−
ヨード−５（Ｒ）−ヒドロキシブチレートをえ、ついで
Ｌ−カルニチンに変換した。
実施例で用いた所望の酵素を産生ずる酵母（ｙｅａｓｔ
ｓ）の代表例を第１表に、また真菌（ｆｕｎｇｉ ）の
代表例を第２表に示す。なお、本発明で用いた微生物（
市販品を除く）はＮＲＲＬ （ＮｏｒｔｈｅｒｎＲｅｇ
ｉｏｎａｌ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ ＴＡＬｂｏ、所在地：
アメリカ合衆国、イリノイ、ベオリア）またはＡＴＯＯ
（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ ０ｕｌｔｕｒｅ００１
１θｏｔｉｏｎＪ在地：アメリカ合衆国、メリーランド
、ロックビル）に寄託されている。
ｓ）の代表例を第１表に、また真菌（ｆｕｎｇｉ ）の
代表例を第２表に示す。なお、本発明で用いた微生物（
市販品を除く）はＮＲＲＬ （ＮｏｒｔｈｅｒｎＲｅｇ
ｉｏｎａｌ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ ＴＡＬｂｏ、所在地：
アメリカ合衆国、イリノイ、ベオリア）またはＡＴＯＯ
（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ ０ｕｌｔｕｒｅ００１
１θｏｔｉｏｎＪ在地：アメリカ合衆国、メリーランド
、ロックビル）に寄託されている。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 式（Ｉ）： （式中、Ｘは塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子または水
酸基であり、 Ｒは、炭素数１〜１５のアルコキシ基；炭素数５〜１５
のアルキルアミノ基；炭素数５〜１２のシクロアルコキ
シ基またはシクロアルキルアミノ基；炭素数７〜１４の
フェノキシ基またはフェニルアルコキシ基；および式： ％式％ （式中、Ｙおよび２は水素原子、炭素数１〜８のアルキ
ル基、フェニル基またはベンジル基であり、Ａは水素原
子、塩素原子、臭素原子またはメチル基である）で示さ
れるフェニルアミノ基またはフェニルアルキルアミ７基
よりなる群から選ばれた直鎖、分岐鎖または環状構造を
有する基である）で示され、かかる６小）立体配置を有
する化合物。 ２ Ｒか炭素数１〜１０の直餉状アルコキシ基である特
許請求の範囲第１項記載の化合物。 ６ Ｒが００工。Ｈ２□である特許請求の範囲第２項記
載の化合物。 ４ ＲがＯＯｓＨよ、である特許請求の範囲第２項記載
の化合物。 ５ Ｒが００７Ｈよ、である特許請求の範囲第２項記載
の化合物。 ６ Ｒが００６Ｈよ、である特許請求の範囲第２項記載
の化合物。 ７ Ｒが炭素数１〜４の低級アルコキシ基である特許請
求の範囲第２項記載の化合物。 ８ Ｒか低級アルキル基、ハロゲン原子またはニトロ基
で置換されたフェノキシ基またはフェニルアルコキシ基
である特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ９ Ｒがベンジルオキシ基であり、Ｘか塩素原子または
臭素原子である特許請求の範囲第８項記載の化合物。 １０ Ｒがフェニルアミノ基であり、Ｘか塩素原子ま
たは臭素原子である特許請求の範囲第１項記載の化合物
。 １１ 対応するγ−置換アセト酢酸のエステルまたは
アミドをＬ−β−ヒドロキシアシルＧｏＡデヒドロゲナ
ーゼ［ｘａ’１．１．１．３５ ］を産生ずる微生物の
発酵酵素作用に供し、目的とする式（■）： ０ＨＯ （式中、Ｘは塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子または水
酸基であり、 Ｒは、炭素数１〜１５のアルコキシ基；炭素数５〜１５
のアルキルアミ７基；炭素数５〜１２のシクロアルコキ
シ基またはシクロアルキルアミ７基；炭素数７〜１４の
フェノキシ基またはフェニルアルコキシ基；および式： （式中、Ｙおよび２は水素原子、炭素数１〜８のアルキ
ル基、フェニル基またはベンジル基であり、Ａは水素原
子、塩素原子、臭素原子またはメチル基である）で示さ
れるフェニルアミノ基またはフェニルアルキルアミノ基
よりなる群から選ばれた直鎖、分岐鎖または環状構造を
有する基である）で示される光学活性ｒ−置換β−ヒド
ロキシ酪ＩＮ！誘導体を採取してなる式叩で示される光
学活性γ−置換Ｉ−ヒドロキシ酪酸誘導体の製法。 １２式： （式中、Ｘは前記と同じ Ｒ１は前記Ｒと同じであり、
たたしアルコキシ基であるばあいは炭素数５〜１５のア
ルコキシ基である）で示される化合物゛をＬ−β−ヒド
ロキシアシルＯｏＡデヒドロゲナーゼ［ＩＣＯ−１゛−
ｊ 、−１−；３５ ］を産生ずる微生物の発酵酵素作
用に供し、目的とする式（ＩＩＬ） ； （式中、ＸおよびＲ１は前記と同じ）で示される光学活
性４−置換３（８）−ヒドロキシ酪酸誘導体を発酵反応
混合物から採取してなる特許請求の範囲第１１項記載の
製造法。 １６ 微生物かアスコミセテス綱に属する特許請求の範
囲第１２項記載の方法。 １４微生物が工ンドミセタレス、ムコラレス、モニリア
レスまたはニーロシアレス目に属する特許請求の範囲ｖ
Ｊ１２項記載の方法。 １５ 微生物がサツカロミセス属に属する特許請求の範
囲第１２項記載の方法。 １６微生物がサツカロミセス・セレビシェである特許請
求の範囲第１２項記載の方法。 １７ 発酵酵素作用に供するｒ−置換アセト酢酸１１１
体がｒ−クロロ−アセト酢酸オクチルエステルである特
許請求の範囲第１２］Ｊｌ記載の方法。 １８ 発酵酵素作用に供するγ−置換アセト酢酸誘導体
かｒ−クロロ−アセト酢酸ベンジルエステルである特許
請求の範囲第１２項記載の方法。 １９ 発酵酵素作用に供するｒ−置換アセト酢酸誘導体
がγ−クロローアセトアセトアニリドである特許請求の
範囲第１２項記載の方法。 ２０微生物がサツカロミセス・セレビシェである特許請
求の範囲第１７項記載の方法。 ２１微生物がサツカロミセス・セレビシェである特許請
求の範囲第１８項記載の方法。 ２２微生物がサツカロミセス・セレビシェである特許請
求の範囲第１９項記載の方法。 ２６式： （式中、Ｘは前記と尚じ、Ｒ２は炭素数１〜４のアルコ
キシ基である）で示される化合物に精製されたＬ−β−
ヒドロキシアシルＯｏＡデヒドロゲナーゼ［ＢＩＧ １
．１．１．３５ ］を作用させ、目的とする式（ｌｂ）
： （式中、ＸおよびＲ２は前記と同じ）で示される光学活
性γ−置換６（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸誘導体を酵素反応
混合物から採取してなる特許請求の範囲第１１項記載の
方法。 ２４精製されたＬ−β−ヒドロキシアシルＯｏＡデヒド
ロゲナーゼ［ｖａ １．１．１．３５ ］がブタ心臓か
ら単離されたものである特許請求の範囲第２６項記載の
方法。 ２５ 式（Ｉ）二 （式中、Ｘは塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子または水
酸基であり、 Ｒは、炭素数１〜１５のアルコキシ基；炭素数５〜１５
のアルキルアミノ基；炭素数５〜１２のシクロアルコキ
シ基またはシクロアルキルアミノ基；炭素数７〜１４の
フェノキシ基またはフェニルアルコキシ基；および式： ％式％ （式中、Ｙおよび２は水素原子、炭素数１〜８の７ ル
キル基、フェニル基まタハベンジル基であう、Ａは水素
原子、塩素原子、臭素原子またはメチル基である）で示
されるフェニルアミノ基またはフェニルアルキルアミノ
基よりなる群から選ばれた直鎖、分岐鎖または環状構造
を有する基である）で示される４−置換３（Ｒ）−ヒド
ロキシ酪酸誘導体をトリメチルアミンおよび塩酸と反応
させ、Ｌ−カルニチンクロリドを抽出し、かかる塩化物
をイオン交換に供し、ついで目的とするＬ−カルニチン
の分子内塩を採取してなるＬ−カルニチンの分子内塩の
製法。 ２６４−クロロ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸誘導体をヨ
ウ化ナトリウムまたは臭化ナトリウムと俗媒中、５０〜
ｉ ｏ ｏ ”ａで反応させてなる４−ヨードまたは４
−ブロモ−３旧フ一ヒドロキシ酪酸誘導体の製法。 ２７（ａ）４−ヨード−または４−ブｏ モー ３ （
Ｒ） −ヒドロキシブチレートの炭素数１〜１ｏのアル
キルエステルをメタノールまたはエタノール中でトリメ
チルアミンと反応させてＬ−カルニチンのメチルオたは
エチルエステル塩を形成し、 （ｂ） エられるＬ−カルニチンエステル塩をＬ−カル
ニチンの分子内塩に変換させる、 工程からなるＬ−カルニチンの分子内塩の製法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/447,171 US4642290A (en) | 1982-12-06 | 1982-12-06 | Process for preparing a compound for use in the production of L-carnitine |
| US447171 | 1982-12-06 | ||
| US544957 | 1983-10-21 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21771093A Division JPH0767674A (ja) | 1982-12-06 | 1993-09-01 | 光学活性γ−置換β−ヒドロキシ酪酸誘導体 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59118093A true JPS59118093A (ja) | 1984-07-07 |
Family
ID=23775285
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58230449A Pending JPS59118093A (ja) | 1982-12-06 | 1983-12-06 | Ｌ−カルニチンの製法およびそれに用いる化学中間体 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4642290A (ja) |
| JP (1) | JPS59118093A (ja) |
| BE (1) | BE898396A (ja) |
| ZA (1) | ZA839038B (ja) |
Families Citing this family (15)
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|---|---|---|---|---|
| IT1181812B (it) * | 1984-07-27 | 1987-09-30 | Sigma Tau Ind Farmaceuti | Procedimento per la preparazione dell'acido gamma-dimetilammino l-beta-idrossibutirrico |
| US5248601A (en) * | 1986-03-14 | 1993-09-28 | Franco Francalanci | Process for preparing L(-)-carnitine chloride |
| GB2195630B (en) * | 1986-08-26 | 1990-07-18 | Chuo Kaseihin Co Inc | Method for producing carnitine, l-carnitineamide hydrolase and method for producing same |
| JPH0669381B2 (ja) * | 1987-12-04 | 1994-09-07 | 協和醗酵工業株式会社 | カルニチンの製造法 |
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| CA2345715C (en) | 1998-09-30 | 2010-04-20 | Allen Xue | Gliocladium roseum strains useful for the control of fungal pathogens in plants |
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| WO2004110963A2 (en) * | 2003-05-29 | 2004-12-23 | Pettegrew Jay W | Glycerophosphocholine and its derivatives for medical imaging neuropsychiatric disorders |
| CN101875616B (zh) * | 2010-06-12 | 2012-11-21 | 胡建荣 | 一种左卡尼汀化合物及其制法 |
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| CN103044278B (zh) * | 2012-12-07 | 2014-07-09 | 沈阳化工大学 | 利用d-(-)-酒石酸为原料合成左卡尼汀的方法 |
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-
1982
- 1982-12-06 US US06/447,171 patent/US4642290A/en not_active Expired - Fee Related
-
1983
- 1983-12-05 ZA ZA839038A patent/ZA839038B/xx unknown
- 1983-12-06 JP JP58230449A patent/JPS59118093A/ja active Pending
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Patent Citations (7)
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| JPS5668644A (en) * | 1979-11-07 | 1981-06-09 | Denki Kagaku Kogyo Kk | Preparation of gamma-chloro-beta-hydroxybutyric acid alkyl ester |
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