JPS5854786B2 - 乳漿蛋白質から蛋白質水解物を製造する方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、個体が陽内食（ｅｎｔｅｒｉｃ ｄｉｅｔ）
において摂取する食品に対して使用するのに適した蛋白
質氷解物の製造方法に関する。

腸内食、即ち胃内を変化せずに通過し且つ腸で吸収され
るように意図された栄養分を含んでなる食品は、種々の
患者にとって必要である。

勿論、適当な腸内物質は完全な栄養を与えるためにアミ
ノ酸を含有しなければならない。

基本的な腸内食がアミノ酸だけを含有するということは
必ずしも必要でないように見える。

むしろ最近の研究では、いくつかの場合に、２〜３単位
長のペプチドがその個々のアミノ酸よりも容易に吸収さ
れるということが示されている。

蛋白質の吸収の本来の理論は、膵臓のプロテアーゼによ
って遊離される小さいペプチドが刷子縁（ｂｒｕｓｈｂ
ｏｒｄｅｒ）ペプチダーゼによってその成分アミノ酸に
加水分解されるというものであった。

次いでこれらのアミノ酸はナトリウムポンプに連結され
た活性移送系によって細胞膜を通って移送される。

現在では、これに加えて、小さいペプチドの吸収に対す
る特別な機構が存在することがわかっている。

ジ及びトリペプチドは通常の機構に従い、濃度勾配に対
して活性的に移送され、後で細胞質ペプチダーゼによっ
て加水分解される。

長いペプチドは刷子縁膜で加水分解され、得られるアミ
ノ酸又は２〜３−ペプチドが吸収される。

このペプチドの吸収速度は遊離のアミノ酸よりもしばし
ば速く、そしてペプチドは近位（ｐｒｏｘｉｍａｌ）及
び遠位（ｄｉｓｔａｌ）の小腸において吸収され、一方
アミノ酸は近位域において最も容易に吸収される。

ペプチド食はアミノ酸吸収疾患の処置に有用であるとい
う証明もある。

バートナツプ病（Ｈａｒｔｎｕｐｐ’ｓ ｄｉｓｅａ、
ｓｅ）において、中性アミノ酸の移送は減少するが、ペ
プチドの移送は影響されない。

チスチン尿症において、システィン、オルニチン、アル
ギニン及びリシンの小腸での吸収は減少するが、この場
合にもジ及びトリペプチドとして投与するならばアミノ
酸の吸収は正常である。

ロウエ症候群（Ｌｏｗｅ’ｓ ５ｙｎ−ｄ ｒ ｏｍｅ
）では、ペプチドの移送は影響されないけれど、すべ
てのアミノ酸の移送は減少する。

事実、一次（ｐｒｉｍａｒｙ）ペプチダーゼの欠乏或い
はアミノ酸の場合と同様のペプチド移送の欠陥の証拠は
ない。

アミノ酸の吸収不良は多くの小腸の不調と関連し、一方
ジペプチドの吸収はそれ程深刻な程度まで影響されない
。

熱帯性の及び腹腔のスプルー（ｓｐｒｕｅ）においては
、遊離のアミノ酸の吸収は減少するが、一方ジペプチド
の吸収はかなり正常である。

肥満症に対する全回腸吻合術（ｊｅｊｕｎｉｏ−１ｅｓ
ｔｏｍｙ）においては、遊離のアミノ酸ロイシンの吸収
の減少は、ジペプチドのグリシル−ロイシンの吸収の何
らの減少なしに起こる。

遊離アミノ酸素はペプチド食と比べて高滲透正性であり
、ペプチド食が等しい窒素含量のアミノ酸素よりも少な
い小腸への液体分泌を誘発することが示されている。

上述の議論において、アミノ酸及びペプチドを含有する
基本的腸内食がアミノ酸だけを含むものよりも好ましい
ことは明らかである。

最適には、ペプチドは２〜３個のアミノ酸残基を含有す
べきである。

最適な２〜３個群のペプチドは商業的規模においては合
理的な価格では得られないけれど。

実質的な量のジ及びトリペプチドを、いくつかのアミノ
酸及び高分子量のポリペプチドと一緒に含有する物質は
腸内食に用いるのに適当である。

ジ及びトリペプチドはそのままで移送されるであろうが
、一方テトラ、ペンタ及びヘキサペプチドは一次刷子縁
ペプチダーゼによって加水分解され、その結果生ずるジ
及びトリペプチドが細胞膜を通して移送されるであろう
。

アミノ酸は関係する疾病に依存して、いくつかの場合に
は吸収され及び他の場合には排泄される。

高分子量のポリペプチドは排泄される。

即ち腸内食に用いるのに適した蛋白質氷解物は望ましく
はアミノ酸、ジペプチド及びトリペプチドの組合せ物を
少くとも５０重量俤及び１０個又はそれ以上のアミノ酸
を含むポリペプチドを２５重重量板下含有するであろう
。

基本的腸内食に用いるアミノ酸及びペプチドは蛋白質源
材料の酵素的加水分解によって製造することができる。

上述の議論の観点から、そのような食に用いるための蛋
白質氷解物の分子量分布の制御は必須であることが理解
できる。

蛋白質氷解物の風味は、基本的腸内食としての成功に対
して主要な因子でもある。

即ち、適当な分子量分布を有するばかりでなく、快い風
味を有する蛋白質氷解物を製造することが望ましい。

蛋白質源は、それから製造される氷解物の風味にかなり
の影響を与えうる。

大豆のような豆類は、そのにがみ、草様の風味、こげ味
、キャディー（ｃａｔｔｙ）及びフーゼル様で有名であ
る。

これらの風味に関係する化合物（長鎖アルコール、ケト
ン及びアルデヒド）の多くは原料豆の化合物であり、加
熱時に減少するが、この場合新しいものが発現する。

これらの物質を除去するためには、更なる加工が必要で
ある。

魚の蛋白質濃厚物も問題を呈する。

魚の蛋白質は、普通その特徴的な風味にかなり影響する
１°。

２°及び３°アミンで汚染されている。

更に、魚の筋肉は多不飽和の脂肪を１〜１６幅含有する
。

これらの脂質は抽出するのが困難であり、空気又はリポ
キシゲナーゼ及びエステラーゼ（魚肉中に存在）によっ
て容易に酸化されていやな風味の化合物を与える。

この蛋白質氷解物それ自体は、多くのアミノ酸、特によ
り疎水性のものがそれ自体苦味を有するから、風味の問
題を呈することになる。

加水分解に適用される特別な酵素も苦味の程度にいくら
か影響するけれど、蛋白質それ自体も１つの因子である
。

蛋白質氷解物が全卵の蛋白質有効比（ｐｒｏｔｅｉｎｅ
ｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｒａｔｉｏ−ＰＥＲ）に少くとも
等しい比、即ち少くとも２．５を有することも必要であ
る。

この理由のために、そしてその快い風味の故に、本氷解
物の出発物質としては乳漿蛋白質（ＰＥＲ３，Ｏ）を用
いることが好適である。

チーズの製造において、ミルク固体、即ちカゼインは酸
での沈殿又は酵素的凝集によってミルクから沈殿し、乳
漿蛋白質を含有する液相が残こる。

固体の乳漿蛋白質は種々の技術、例えば加熱沈殿、逆侵
透、ゲル済過及び電気透析によって回収することができ
る。

本発明では、好ましくは加熱沈殿によって得られる乳漿
蛋白質を使用する（ラクトアルブミン）。

多くの乳漿蛋白質の汚染物であるラクトースは、多くの
割合の人々によって消化されず、胃腸の病訴の共通の原
因となる。

それ故に、それは存在したとしても氷解物中に非常に低
量でしか存在してはならない。

徴候のでるラクトースの量は研究されており、その研究
に基づけば蛋白質氷解物に対する出発物質として用いる
乳漿蛋白質は、それから製造される氷解物が糖を１．０
重量俤より多くは含有しないような量でラクトースを含
有すべきである。

本発明は分子量の特徴及び風味に関して、個体（１ｎｄ
ｉｕｉｄｕａｌ）が腸内食において摂取する製品に用い
るのに適した蛋白質氷解物の製造方法である。

この方法は、ａ）ラクトースを１．０重量φより多くは
含有しない蛋白質氷解物を与えるのに十分に低いラクト
ース値を有する乳漿蛋白質を準備し； ｂ）乳漿蛋白質の水性スラリーを生成せしめ；Ｃ）
このスラリーに、アスペルギルス・オリザエ（Ａｓｐｅ
ｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）からの食品級の中性の
真菌性プロテアーゼを、乳漿蛋白質１ｇ当り約１８．９
〜１８９分光光度計ヘモグロビン単位の量で添加し； ｄ）プロテアーゼを含有するスラリーのｐＨ及び温度を
、乳漿蛋白質がアミノ酸、ジペプチド及びトリペプチド
の組合せ物を少くとも５０重量φ及び１０個又はそれ以
上のアミノ酸を含むポリペプチドを２５重重量板下含有
する氷解物に転化されるのに十分な時間、ｐＨ約３．０
〜約１０．０及び約り０℃〜約７０℃に維持し； ｅ）スラリーを、酵素を不活性化させるのに十分な温度
及び十分な時間加熱し： ｆ）残存する固体物質をスラリーから除去して、所望の
蛋白質氷解物を含有する水溶液を与え；そして ｇ）蛋白質氷解物を溶液から回収する、 工程を含んでなる。

本方法の第１工程は低ラクトース乳漿の調達を含む。

ここでは蛋白質としてラクトアルブミンを用いることが
好適であるから、以下の議論はこの特別な乳漿蛋白質を
使用することに関してなされよう。

ラクトアルブミンのラクトース量は、加熱沈殿硬化物を
乾燥する前に又は後に、それから糖を洗浄することによ
って最小にすることができる。

この方法で製造されるラクトアルブミンが入手しえない
場合には、ラクトースはラクターゼでの加水分解によっ
て除去することができる。

酵素的に加水分解されたラクトアルブミンから氷解物を
生成することを含む実験は１次の酵素を用いて行なった
； １ 真菌性プロテアーゼ（ｆｕｎｇａｌ ｐｒｏｔｅａ
ｓｅ）：アスペルギルス・オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉ
ｌ ｌｕｓｏｒｙ−ａｄｅ）ｕａｒ、の制御された発酵
によって調製。

この酵素調製物は、ｐＨ３，０〜１０．０において、但
しｐＨ９，０において最高の活性を示す酸性、中性及び
アルカリ性プロテアーゼの混合物を含有する。

調製物は７０℃まで蛋白質分解活性を示すが、５５℃で
最高の活性となる。

実施例においては、ダラム当り３７８０分光学的・＼モ
グロビン単位（ＳＨＵ）の活性を有する、ＭｉｌｅｓＬ
ａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｉｎｃから入手できる酵素調
製物−−−Ｔａｋａｍｉｎｅブランドの Ｆｕｎｇａｌ
Ｐｒｏｔｅａｓｅ−−−を使用した。

ｌ５ＨＵは、ｋｒｅｒ １ｃａｎＡｓｓｏｃｉａｔｉｏ
ｎ ｏｆ Ｃｅｒｅａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ 。

１９６９年、の認可法による評価条件下において毎分チ
ロシン１ミクロモルを遊離する活性である；蛋白質分解
活性−分光学的方法（ＡＡＣＣ法２２−６３号） ：
Ａｍｅｒｉｃａｎ Ａｓ５ｏｃｉａｔｉｏｎｏｆ Ｃｅ
ｒｅａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ 、Ｓｔ 、Ｐａｕｌ 、
Ｍｉ ｎｎｅｓｏｔａ 。

２ バクテリア性プロテアーゼ（ｂａｃｔｅｒｉａｌｐ
ｒｏｔｅａｓｅ）：バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃ
ｉ ｌ ｌｕｓ Ｉ ｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ｖ
ａｒ、の制御された発酵によって調製。

この酵素調製物は主にエンドペプチダーゼを含有しそし
てｐＨ３，０〜９．０において、但し５．０〜５．５に
おいて最高の蛋白質分解活性を示す。

酵素調製物は７０℃まで活性があり、５５℃で最高であ
る。

本発明では、６２．８ＳＨＵ／ｇの活性を有する。

Ｎｏｖ。Ｉｎｄｕｓｔｒｉ Ａ／ Ｓ 、Ｂａｇｓｖ
ａｅｒｄ Ｄｅｎｍａｒｋから入手できる酵素調製物−
−−ＡｌｃａｌａｓｅＯ，６Ｌ−−一を使用した。

３ ＨＴ蛋白質分解性濃厚物、即ちＭｉｌｅｓＬａｂ
ｏｒａ ｔｏｒ ｉｅｓ 、 Ｉｎｃ、で製造されてい
るＰａｐａｉｎ３０００及びＰａｎｃｒｅａｔｉｎ
４ＮＥも、その最適な条件下に試験した。

得られる蛋白質氷解物のすべてを、風味、分子量分布及
びアミノ酸の特徴に対して評価した。

真菌性のプロテアーゼ濃厚物は、腸内食で使用しうるラ
クトアルブミン氷解物の製造に対する好適な物質として
判定できた。

他の酵素調製物は、その不快な生成物の風味及び蛋白質
氷解物の望ましくないペプチドの大きさという主たる理
由から好ましくなった。

真菌性プロテアーゼ濃厚物は風味及びペプチドの寸法に
関してラクトアルブミンの加水分解に対する最良のプロ
テアーゼ調製物であることが見出されたけれど、この酵
素を用いることの１つの欠点は、約４０咎という低水解
物収率にあることがわかった。

基質の酵素への接近を増大させるためには、酵素による
加水分解に先立って、ラクトアルブミンのスラリーを酸
（２％Ｈ２ＳＯ，溶液中で３０分間沸とう）又はアルカ
ＩＪ（ｐＨ８で１０分間沸とう）に供した。

この実験の結果を第■表に示す。

平均のペプチド長はアミノ窒素と全窒素の比である。

アミノ窒素はＡｄｌｅｒ Ｎ１５ｓｅｎ（Ｊ 、Ａｇ
。Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ、 ２７ ： １２５６ 、１
９７９）の記述に従って、トリニトロベンゼンスルホン
酸（ＴＮＢＳ）によって決定した。

全窒素はキエルダール（Ｋｊ ｅ １ｄａｈ ｌ ）法
によって決定した。

第Ｈ表からは、ラクトアルブミンのアルカリ熱処理は蛋
白質をプロテアーゼの攻撃を受は易くし、この結果氷解
物の平均ペプチド長に重大な影響を与えずに収量を増大
させることが理解できる。

ラクトアルブミンを、アルカリで処理しそして１％の真
菌性プロプアーゼ濃厚物で、ｐＨ７，０及び５０℃下に
７時間加水分解した後、異なる粒子径（５０、Ｚｏｏ及
び２００メツシユ）にふるい分けした。

結果を第■表に示す。第■表からは、ラクトアルブミン
の粒子径が加水分解の程度に重大なほど影響しないこと
がわかる。

種々の酵素で製造したラクトアルブミン氷解物のセンサ
ーによる評価は、１俤の真菌性プロテアーゼ或いは１φ
アルカラーゼ（Ａｌｃａｌａｓｅ）と組合せた１俤の真
菌性プロテアーゼが最小の風味を有する生成物を与える
ことを示した。

１０１％アルカラーゼで調製した氷解物は、特にアルカ
リ条件下に処理したとき、非常に苦かった。

２多のパンクレアチン４ＮＥも、真菌性プロテアーゼと
アルカラーゼの中間の苦い氷解物を与えた。

１０饅のアルカラーゼ或いは１多の真菌性プロテアーゼ
と１０１％のアルカラーゼとの組合せ物は非常に苦かっ
た。

Ｍｉｌｅｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｉｎｃ、のＨ
Ｔ蛋白質分解性濃厚物及びパパイン３０００も苦い氷解
物を生成した。

加水分解は、種々の反応条件、例えば温度、ｐＨ及びプ
ロテアーゼ濃度に依存して、典型的には２〜５０時間に
亘って行なわれる。

１俤の真菌性プロテアーゼを用いることにより、異なる
抗微生物剤（サルファイ）２００ｐｐｍ又はトルエン１
係）を含む氷解物が製造された。

これらの試料はいずれもが、風味に関して、対照物と重
大なほど異ならなかった。

アルカリ性での加熱工程及び加水分解反応中、ｐＨを調
節するために塩基を添加する。

この場合、ナ） ＩＪウム含量を低く保つために、好ま
しくはＮａＯＨ以外の塩基を使用する。

Ｃａ（ＯＨ）２は好適な塩基であり、ＮａＯＨ又はＣａ
（ＯＨ）２のいずれかをｐＨの制御に用いる場合、風味
には差がなかった。

次の実施例は本方法を実施する方法を例示するものであ
る。

実施例 Ｉ スチームジャケットを備えた２００ガロンの釜中におい
て、ラクトアルブミンにュージランドの酪農から得た３
５ｋｇ）を脱イオン水１８０ガロンと併せて、５％（Ｗ
／Ｖ）の水性スラリーを調製した。

４俤のＮａ０Ｈｊ容液約１８ｔを添加してｐＨを７．０
に上昇させ、次いで温度を６０℃まで上昇させ、スラリ
ーを１５分間撹拌した。

得られたものを、Ｗｅｓｔｆａｌｉａ ５ｅｐａｒａｔ
ｏｒ（ボウル速度６５００ｒｐｍ、９ＡＭＲＣＯ３６型
）を用いて遠心分離し、スラッジ６０ガロン及び約０．
５ ％の固体を含有する上澄液１３０ガロンを得、後者
を廃棄した。

次いでスラッジに脱イオン水を更に１３０ガロン添加し
て５φ（ｗ／ｖ）の水性スラリーを生成させ、これをｐ
Ｈ７，０に調節し、６０℃で１５分間撹拌し、前述のよ
うに遠心分離し且つ分離し、乾燥ラクトアルブミンに基
づいて１．０ ％ （ｗ／ｗ ）以上のラクトース量を
有するラクトアルブミンスラッジを６０ガロン得た。

脱イオン水を更に３０ガロン添加して約１０％（ｗ／ｖ
）の固体を含有する固体を得た。

４％Ｎａ０Ｈｉ容液を４．６を添加することによってラ
クトアルブミンのスラリーをｐＨ８，０に調節し、続い
てスラリーを撹拌しながら１０分間９０〜９５℃まで加
熱し、次いで５０℃まで冷却した。

石灰的２００ｇを１０多スラリーで添加することによっ
てスラリーのｐＨを７．０に調節し、このスラリーに、
水１ｏｔに溶解したＭｉｌｅｓの真菌性プロテアーゼ３
００ｇ（３７８０ＳＨＵ／、９）を添加した。

このスラリーを２４時間５０℃に維持し、これを５分間
９０℃に加熱し、次いで５０℃に冷却した。

この冷却したスラリーを、遠心分離によって或いは市販
の流過助剤を用いる濾過によって清澄化した。

清澄化した氷解物は、腸内食の残りの成分（即ち炭水化
物、脂肪、ビタミン及び鉱物）と混合し次いで乾燥し、
或いは最初に乾燥し次いで残りの成分と混合することが
できた。

本実施例の教示に従って製造した氷解物は２．３の平均
ペプチド長を有すべきであった。

ラクトアルブミン氷解物のラクトース含量を、 Ｂｏｅ
ｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎ−ｈｅ ｉｍ（Ｉｎｄ １ａ
ｎａｐｏ ｌ ｉ ｓ 、 Ｉｎｄ １ａｎａ ）から
のラクトース分析キットを用いて測定した。

この方法では、ラクトースを、β−ガラクトシダーゼ及
び水の存在下にグルコース及びβ−ガラクトースに加水
分解する。

β−ガラクトースを、酵素β−ガラクトース・デヒドロ
ゲナーゼの存在下に、ニコチンアミド・アデニン・ジヌ
クレオチド（ＮＡＤ）によってガラクトースに酸化し、
ＮＡＤをＮＡＤＨに転化する。

生成するＮＡＤＨの量はラクトースの量と化学量論的で
ある。

ＮＡＤＨの増加を３３４゜３４０又は３６５ ｎｍにお
ける吸収によって測定する。

本実施例で製造した氷解物のラクトース量は０．５％（
ｗ／ｗ ）以下であった。

これは、処方食が約０．０５％より少ないラクトースし
か含有しないであろうということを意味する。

実施例 ■ １多の真菌性プロテアーゼで７時間消化した後に、酵素
を更に１多添加し、次いで更に７時間消化を継続する以
外実施例Ｉの方法に従い、２．３の平均ペプチド長を有
する蛋白質氷解物を得た。

実施例 ■ １饅アルカラーゼを７時間後に添加するという以外実施
例Ｈの方法に従い、２．３の平均ペプチド長を有する蛋
白質氷解物を得た。

実施例 ■ 実施例Ｉ及び川で製造した氷解物の分子量の特徴を、Ｃ
ａｒｎｅｇｉｅ（Ｎａｔｕｒｅ、’２０６：１１２８，
１９６５）の方法により排除クロマトグラフィー（ｅｘ
ｃｌｕｓｉｏｎｃｈｒｏｍａ ｔｏｇｒａｐｋｙ）によ
って決定した。

これに対して選択したゲルは粒子径２０〜８０μの５ｅ
ｐｈａｄｅｘ Ｇ −２５であった。

カラムの寸法は９０Ｘ１．５ｃｒｒＬであり、溶媒はフ
ェノール：酢酸：水＝１：１：１（重量二重量：容量）
であった。

補正曲線を作成し、流出容量を、アミノ酸ないし単位長
３のペプチド、アミノ酸長４〜９のペプチド及びアミノ
酸長１０又はそれ以上のペプチドに対して計算した。

実施例１及び■からの水解物の試料を、カラム流出物の
３つの両分に存在する窒素の優を決定することにより、
分子量の特徴に関して評価した。

この方法は±３優の誤差を含むが、分析した試料の分子
量の特徴がアミノ酸及びジー及びトリーペプチド６５％
；４〜９個のアミノ酸のペプチド２０％及び１０個又は
それ以上のアミノ酸のポリペプチド１６φであることを
示した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ ａ） ラクトースを１．０重量多以下含有する
   蛋白質氷解物を与えるのに十分に低いラクトース値を有
   する乳漿蛋白質を準備し； ｂ）この乳漿蛋白質の水性スラリーを生成せしめ：Ｃ）
   このスラリーに、アスペルギルス・オリザエ（Ａｓ
   ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）からの食品級の中
   性の真菌性プロテアーゼを、乳漿蛋白質１ｇ当り約１８
   ．９〜１８９分光光度計ヘモグロビン単位の量で添加し
   ； ｄ）プロテアーゼを含有する該スラリーのｐＨ及び温度
   を、乳漿蛋白質がアミノ酸、ジペプチド及びトリペプチ
   ドの組合せ物を少くとも５０重量φ及び１０個又はそれ
   以上のアミノ酸を含むポリペプチドを２５重重量板下含
   有する氷解物に転化されるのに十分な時間ｐＨ約３．０
   〜約１０．０及び４０℃〜約７０℃の水準に維持し； ｅ）該スラリーを、酵素を不活性化させるのに十分な温
   度に且つ十分な時間加熱し。 ｆ）残存する固体物質を該スラリーから除去して、所望
   の蛋白質氷解物を含有する水溶液を与え；そして ｇ）蛋白質氷解物を溶液から回収する、 工程から成ることを特徴とする、個体が腸内食において
   摂取する製品に対して使用するのに適する蛋白質氷解物
   の製造方法。 ２ 乳漿蛋白質がラクトアルブミンである特許請求の範
   囲第１項記載の方法。 ３ ｐＨが約９．０である特許請求の範囲第１項記載
   の方法。 ４ 温度が約５５°Ｃである特許請求の範囲第１項記載
   の方法。 ５ 真菌性プロテアーゼに加えて、バチルス・リケニホ
   ルミス（１３ａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍ
   ｉｓ）の制御された発酵によって得られるバクテリア性
   プロテアーゼをスラリーに添加し、−を３．０〜９．０
   のレベルに維持する特許請求の範囲第１項記載の方法。 ６ 酵素による加水分解に先立ってラクトアルブミンを
   アルカリ性溶液中で加熱する特許請求の範囲第２項記載
   の方法。 ７ 酵素による加水分解を２〜５０時間行なう特許請求
   の範囲第１項記載の方法。 ８ スラリーのｐＨをＣａ（ＯＨ）２ の使用によって
   制御する特許請求の範囲第１項記載の方法。