JPH06245790A

JPH06245790A - オリゴペプチド混合物およびその製造方法

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Publication number: JPH06245790A
Application number: JP50A
Authority: JP
Inventors: Hirobumi Motoi; 博文本井
Original assignee: Nisshin Seifun Group Inc
Current assignee: Nisshin Seifun Group Inc
Priority date: 1993-02-26
Filing date: 1993-02-26
Publication date: 1994-09-06
Anticipated expiration: 2016-08-27
Also published as: JP3202093B2

Abstract

(57)【要約】【構成】小麦蛋白質をバチルス属細菌由来のアルカリ
プロテアーゼでｐＨ8.0〜11.0、温度40〜70℃で加水分
解するか、或いは該加水分解後に更に微生物又は植物由
来の中性プロテアーゼでｐＨ6.0〜8.0、温度40〜60℃で
加水分解して、重量平均分子量200〜1000；ジ及びトリ
ペプチド含量50重量％以上；遊離アミノ酸含量10重量％
以下及びグルタミン含量30重量％以上のオリゴペプチド
混合物を得る方法、並びにそれにより得られたオリゴペ
プチド混合物。【効果】本発明のオリゴペプチド混合物はジ及びトリ
ペプチド含量が多いため消化管での消化吸収性に優れ消
化吸収能の低い高齢者、乳幼児、病人等への蛋白質素材
として有用で、グルタミンを多量に含むため侵襲時又は
腸管機能障害時のエネルギー源として有用であり且つ加
熱加工に対して安定で広範な用途に使用可能であり、本
発明の方法による場合はかかる有益なオリゴペプチド混
合物を小麦蛋白質から安全に且つ高収率で経済的に生産
することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はオリゴペプチド混合物お
よびその製造方法に関する。詳細には、本発明で得られ
るオリゴペプチド混合物は、消化管での吸収性に優れ、
侵襲時や腸管機能障害時の栄養源として極めて有用であ
り且つ熱安定性にも優れており、経管・経口栄養剤とし
て極めて有用であり、特に本発明の方法による場合はそ
のような優れた特性を有するオリゴペプチド混合物を極
めて安全に且つ高収率で経済的に製造することができ
る。

【０００２】

【従来の技術】栄養成分や機能性食品などに使用するた
めに、牛乳や卵に含まれる動物性蛋白質、大豆、小麦、
トウモロコシなどに含まれる植物蛋白質などを蛋白分解
酵素（プロテアーゼ等）で加水分解して低分子量のペプ
チドにすることが従来から色々試みられている。特に、
アミノ酸が２個または３個結合したジペプチドおよびト
リペプチドは、消化管での吸収性に優れていることによ
り、経管・経口栄養剤、機能性飲料などの素材として注
目されている。

【０００３】しかし、プロテアーゼの選択、酵素反応の
厳密な制御の困難さなどの点から、ジペプチドやトリペ
プチド含量の高いオリゴペプチド混合物を効率良く製造
することがこれまで困難であった。特に、小麦蛋白質は
水に溶けにくいところから、プロテアーゼにより分解し
難く、そのため小麦蛋白質の加水分解による分子量の高
いペプチド類の製造法は既に色々開発されているもの
の、ジペプチドやトリペプチド含量の多い低分子量のオ
リゴペプチド混合物は未だ得られていないのが現状であ
る。

【０００４】ところで、近年、臨床栄養学の進歩によっ
て、分岐鎖アミノ酸、グルタミンなどの特定のアミノ酸
が、生体侵襲等のストレス負荷時の蛋白質やアミノ酸の
代謝異常に対して極めて有効であり良好な医療効果を有
することが判明している［岡田；“化学と生物”，27，
585（1989）］。そして、分岐鎖アミノ酸は肝不全など
に対する栄養剤として既に利用されており、ペプチド態
での応用も試みられている。また、グルタミンは腸管エ
ネルギー源として重要であり、生体侵襲時やストレス負
荷時の窒素平衡の改善剤、中心静脈栄養法施行時にみら
れる消化管粘膜萎縮防止などの小腸機能の改善剤、胃潰
瘍や十二指腸潰瘍用の医薬などとしての効果が確認され
ている［吉村ら；“医学のあゆみ”149，385（1989）、
鈴江；“臨床栄養”80，289（1992）、大熊；“輸液と
栄養”13，1（1989）など］。

【０００５】しかし、グルタミンは輸液や経管・経口栄
養剤の素材として有益であるにも拘わらず、アミノ酸の
形態では熱に不安定であり、その機能を充分に発揮でき
ないため、化学処理によってアシル化、アセチル化など
の誘導体にしたり、化学合成によってジペプチドやトリ
ペプチドに転換して使用することが試みられている［W.
W.Souba;J.Parent.Ent.NUtr.,9,608(1985)，特開昭６３
−５１３９９号公報、特開昭６２−１５１１５６号公報
など］。しかし、こられの従来法は化学的方法であるた
めに完全性の点で問題があること、そして高価なアミノ
酸を原料にするためにコストが高くなるなどの理由から
未だ実用化されていない。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、消化
管での消化吸収性に優れたジペプチドおよびトリペプチ
ドの含量が高く、しかも有益なグルタミン含量の多いオ
リゴペプチド混合物を安全に且つ安価に提供できるよう
にすることである。

【０００７】

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決すべく
本発明者らが研究を続けた結果、バチルス属細菌の生産
するアルカリプロテアーゼを用いて特定のｐＨおよび温
度条件下で小麦蛋白質を特定時間加水分解すると、ジペ
プチドおよびトリペプチドの含量が高く且つグルタミン
を多量に含有する有益なオリゴペプチド混合物が効率よ
く得られることを見出した。更に、本発明者らは、上記
のアルカリプロテアーゼ処理の後に更に特定の条件下で
微生物または植物の生産する中性プロテアーゼによる加
水分解処理を施すと、上記の有益なオリゴペプチド混合
物をより高い収率で得ることができることを見出し、そ
れらの知見に基づいて本発明を完成した。

【０００８】すなわち、本発明は、小麦蛋白質をプロテ
アーゼで分解して得られるオリゴペプチド混合物であっ
て、下記の〜の特性；重量平均分子量が２００〜１０００である；ジペプチドおよびトリペプチドの合計含量が５０重量
％以上である；遊離アミノ酸含量が１０重量％以下である；グルタミン含量が３０重量％以上である；を有していることを特徴とするオリゴペプチド混合物で
ある。

【０００９】更に、本発明は、上記〜の特性を有す
るオリゴペプチド混合物の製造方法であり、その方法と
して、（１）小麦蛋白質をバチルス属細菌の生産するア
ルカリプロテアーゼ（以下単に「アルカリプロテアー
ゼ」ということがある）を用いてｐＨ８．０〜１１．
０、温度４０〜７０℃で５〜３０時間加水分解して該オ
リゴペプチド混合物を製造する方法、または（２）小麦
蛋白質をバチルス属由来アルカリプロテアーゼを用いて
ｐＨ８．０〜１１．０、温度４０〜７０℃で２〜１０時
間加水分解した後、微生物または植物に由来する中性プ
ロテアーゼを（以下単に「中性プロテアーゼ」というこ
とがある）用いて更にｐＨ６．０〜８．０、温度４０〜
６０℃で５〜２０時間加水分解して該オリゴペプチド混
合物を製造する方法、を採用するものである。また、本
発明は、上記〜の特性を有するオリゴペプチド混合
物を含有する経管・経口栄養剤を包含する。

【００１０】本発明の製造方法で使用する小麦蛋白質
は、グルテンから主としてなっており、他にアルブミ
ン、グロブリン等の蛋白質を含有することが知られてい
る。

【００１１】そして本発明において、上記（１）の方法
により行う場合は、小麦蛋白質のアルカリプロテアーゼ
による加水分解処理をｐＨ８．０〜１１．０、好ましく
はｐＨ９．０〜１０．０、温度４０〜７０℃、好ましく
は５０〜６０℃で５〜３０時間、好ましくは１０〜２０
時間行って、そこで生成したオリゴペプチド混合物を回
収することにより目的とするオリゴペプチド混合物を得
ることができる。

【００１２】また、上記（２）の方法により行う場合
は、小麦蛋白質をアルカリプロテアーゼを用いてｐＨ
８．０〜１１．０、好ましくはｐＨ９．０〜１０．０、
温度４０〜７０℃、好ましくは５０〜６０℃で、２〜１
０時間、好ましくは５〜１０時間加水分解した後、中性
プロテアーゼを用いて更にｐＨ６．０〜８．０、好まし
くは６．５〜７．５、温度４０〜６０℃、好ましくは５
０〜６０℃で５〜２０時間、好ましくは１０〜１５時間
加水分解処理を行うことにより目的とするオリゴペプチ
ド混合物を得ることができる。

【００１３】上記（２）の方法を採用する場合は、アル
カリプロテアーゼによる加水分解によって得られた生成
物を含む液のｐＨを中性プロテアーゼが作用する上記し
た範囲に調節してそのまま中性プロテアーゼによる加水
分解を継続しても、またはアルカリプロテアーゼによる
加水分解により得られた生成物を一旦液から回収し、そ
れをｐＨ６．０〜８．０に調節した水性媒体中などに再
度分散または溶解させて中性プロテアーゼにより加水分
解してもよい。

【００１４】本発明の上記（１）の方法によっても、
〜の特性を有するオリゴペプチド混合物を５０％以上
の高い収率で得ることができるが、上記（２）の方法を
採用した場合には、それよりも一層高い収率で〜の
特性を有するオリゴペプチド混合物を得ることができ、
しかもこのオリゴペプチド混合物はより高いジペプチド
およびトリペプチド含量を有している。

【００１５】上記（１）の方法および（２）の方法のい
ずれの場合も、バチルス属細菌の生産するアルカリプロ
テアーゼによる加水分解処理は、小麦蛋白質を水等の水
性媒体中に分散または溶解させた状態で行うのがよく、
使用するプロテアーゼの種類等により適宜調節する必要
があるが、通常、水性媒体中における小麦蛋白質の濃度
を約５〜１５重量％程度にして加水分解処理を行うのが
よい。

【００１６】アルカリプロテアーゼとしては、バチルス
属細菌の生産するアルカリプロテアーゼであればいずれ
も使用でき、例えばスブチリシン等を挙げることがで
き、それらのアルカリプロテアーゼはノボインダストリ
ージャパン社製の「アルカラーゼ」、上田化学工業社製
の「オリエンタラーゼ２２」、大和化成社製の「プロチ
ンＡ」などとして入手することができる。アルカリプロ
テアーゼは１種類のみを使用しても、またはアルカリプ
ロテアーゼ同士が互いに悪影響を及ぼさないかぎりは複
数種を併用してもよい。複数のアルカリプロテアーゼを
使用する場合は、複数のアルカリプロテアーゼを同時に
存在下させて加水分解を行っても、または１種類ずつ逐
次に用いて加水分解を行ってもよい。

【００１７】また、アルカリプロテアーゼはフリーの状
態で使用しても、固定化して使用してもよく、いずれの
場合も乾燥した小麦蛋白質１００ｇ当たり０．０５〜２
ｇ（約１万〜４０万units）、好ましくは０．１〜１ｇ
（約２万〜２０万units）の割合で使用するのがよい。

【００１８】そして、上記（１）の方法によってオリゴ
ペプチドを製造する場合は、アルカリプロテアーゼによ
る加水分解処理を、通常、加水分解度が約７０〜９５％
の状態になるまで上記した条件下で行った後、アルカリ
プロテアーゼを加熱処理またはｐＨの低下などの任意の
方法で失活させて、生成したオリゴペプチドを混合物の
形態で回収するのがよい。

【００１９】また、上記（２）の方法による場合は、ア
ルカリプロテアーゼによる加水分解処理を、通常、加水
分解度が約６０〜８０％の状態になるまで上記した条件
下で行った後、液のｐＨを６．０〜８．０の中性領域に
調節して、或いは生成物を一旦回収した後ｐＨ６．０〜
８．０の水性媒体に分散または溶解させて、中性プロテ
アーゼを使用して、上記した条件下に更に加水分解を行
う。

【００２０】この（２）の方法で用いる中性プロテアー
ゼとしては、微生物または植物に由来する中性プロテア
ーゼであればいずれも使用でき、例えば金属プロテアー
ゼ、パパインなどを挙げることができ、それらの中性プ
ロテアーゼは、天野製薬社製の「プロテアーゼアマノ
Ｎ」、ヤクルト社製の「アロアーゼＡＰ−１０」、上田
化学工業社製の「オリエンターゼ９０Ｎ」、大和化成社
製の「プロチンＰＣ１０Ｆ」などとして入手することが
できる。中性プロテアーゼは１種類のみを使用しても、
または中性プロテアーゼ同士が互いに悪影響を及ぼさな
いかぎりは複数種を併用してもよい。複数の中性プロテ
アーゼを使用する場合は、複数の中性プロテアーゼを同
時に存在下させて加水分解を行っても、または１種類ず
つ逐次に用いて加水分解を行ってもよい。

【００２１】また、アルカリプロテアーゼの場合と同様
に、中性プロテアーゼはフリーの状態で使用しても、固
定化して使用してもよく、いずれの場合も最初に使用す
る乾燥した小麦蛋白質１００ｇ当たり０．０５〜２ｇ
（約２万〜８０万units）、好ましくは０．１〜１ｇ
（約４万〜４０万units）の割合で使用するのがよい。

【００２２】そして、中性プロテアーゼによる加水分解
処理を、通常、加水分解度が約７０〜９５％の状態にな
るまで上記したｐＨ６．０〜８．０、温度４０〜６０℃
の条件下で５〜２０時間行った後、中性プロテアーゼを
加熱やｐＨ低下またはｐＨ上昇などの任意の方法で失活
させ、生成した小麦蛋白質を液から回収することによ
り、上記〜の特性を有するオリゴペプチド混合物を
得ることができる。

【００２３】ここで、本明細書中における小麦蛋白質の
加水分解度は、いずれも０．７５Ｍトリクロロ酢酸（Ｔ
ＣＡ）への溶解率で示したものであり、次の数式１で表
される。

【００２４】

【数１】加水分解度(％)＝{(０.７５ＭＴＣＡ溶解蛋白
量)／(全蛋白量)}×１００

【００２５】また、本明細書中のプロテアーゼ活性(uni
t)はすべて下記の方法により測定したものである。プロテアーゼ活性の測定法基質として米国メルク社製のハマーステインカゼイン１
％溶液を用い、アンソン−萩原変法［赤堀四郎編 “酵
素研究法”第２巻、第２３７頁（昭和３６年１月１０
日、朝倉書店発行）］により測定した。反応は３０℃で
３０分間行い、１分間に１μｇのチロシン相当量を遊離
するのに要する酵素量を１unitとした。

【００２６】上記の（１）の方法または（２）の方法に
より得られたオリゴペプチド混合物の回収方法は特に限
定されず任意の方法で行うことができる。例えば、上記
（１）または（２）の方法により得られたオリゴペプチ
ド混合物はいずれも加水分解処理に用いた水性媒体中に
可溶であるので、加水分解処理後に不溶物を遠心分離、
濾過、デカンテーション等の通常の固液分離法により分
離して除いて液体分を回収し、それを乾燥して目的とす
るオリゴペプチド混合物を得る方法を採用することがで
きる。

【００２７】また、更に純度の高いオリゴペプチド混合
物を得たい場合には、不溶物を除去した後の液体を活性
炭、珪藻土等の吸着剤を用いて処理して液中に含まれる
不純物を吸着除去し、後に残った液を必要に応じて更に
濃縮してから、噴霧乾燥、凍結乾燥、加熱乾燥などの任
意の方法で乾燥させて、オリゴペプチド混合物を固体と
して回収するとよい。その際に加熱乾燥を行う場合は、
生成物が熱変性しない温度（通常約７０〜８０℃以下）
を採用するのがよく、また乾燥処理は、得られる固体分
中の水分含量が約１０重量％以下になるまで行うのがよ
い。

【００２８】そして、上記した本発明の（１）の方法ま
たは（２）の方法を行うことによって、上記した〜
の特性、すなわち、重量平均分子量が２００〜１００
０；ジペプチドおよびトリペプチドの合計含量がオリ
ゴペプチド混合物の重量に基づいて５０重量％以上；
遊離アミノ酸含量がオリゴペプチド混合物の重量に基づ
いて１０重量％以下；およびグルタミン含量がオリゴ
ペプチド混合物の重量に基づいて３０重量％以上である
本発明のオリゴペプチド混合物を得ることができる。

【００２９】ここで、本発明のオリゴペプチド混合物の
重量平均分子量、ジペプチドおよびトリペプチドの含
量、グルタミン含量および遊離アミノ酸含量は次のよう
にして測定したものである。

【００３０】重量平均分子量：PolyＬＣ社のPolyHYDROX
YETHYL Aspartamide カラムを用いた高速液体クロマト
グラフィーにて、溶離液５０ｍＭ蟻酸、流速０．５ｍｌ
／分、検出２２０ｎｍの紫外吸収の条件下に測定した。
その際のデータ解析は、分子量既知のオリゴペプチド６
種類（Bradykinin＝1060、Gly-Gly-Tyr-Arg AcOH H₂O＝
518、Ile-Ala-Pro＝299、Leu-Gly-Gly＝246、Gly-Gly＝
132、Gly＝75）を用いて校正曲線を作成し、システムイ
ンスツルメンツ社製のＧＰＣ解析システムにて実施し
た。

【００３１】ジペプチドおよびトリペプチドの含量：上
記の重量平均分子量の測定法と同じ方法を行って、重量
平均分子量が１２５〜３９７のペプチドの合計量測定し
て、それをジペプチドおよびトリペプチドの合計含量と
し、各実施例で得られたオリゴペプチド混合物の重量に
対する割合（重量％）を求めた。

【００３２】グルタミン含量：オリゴペプチド混合物を
常法にて塩酸加水分解し、アミノ酸分析を行い、この時
のグルタミン量をＡとした。また、遊離のグルタミン量
をＢとし、Ａ−Ｂにより求めた。

【００３３】遊離アミノ酸含量：試料から蛋白質を除い
た後、Phenyl isothiocyanate化し、ウォーターズ社のP
ICO-TAG システムにてアミノ酸組成を分析し、オリゴペ
プチド混合物の重量に対する遊離アミノ酸の含量（重量
％）として求めた。

【００３４】上記〜の特性を有する本発明のオリゴ
ペプチドは、水によく溶けて沈殿物の生成がなく、遊離
アミノ酸に特有な不快な臭いも少なく、食品や医薬品と
して通常用いられている他の物質との相性もよく、高い
ジペプチドおよびトリペプチド含量を有し、しかも輸液
や経管・経口栄養剤の素材と極めて有益なグルタミンを
多量に有している。そのため、経管・経口栄養剤とし
て、更には機能性成分として各種飲料やスープなどの飲
食物や飼料中に添加して有効に使用することができる。

【００３５】

【実施例】以下に、本発明を実施例を挙げて具体的に説
明するが本発明はそれによって限定されない。

【００３６】《実施例１》粉末小麦蛋白質(Bunge Bio
products Pty．Ltd製「Special Fine Dry Gluten」)１３
３．５ｋｇを０．０５Ｎのアンモニア水８７０リットル
に撹拌下に溶解し（ｐＨ１０．０）、オリエンターゼ２
２ＢＦを５００ｇ（１０００units／小麦蛋白質１ｇ）
を添加して５５℃で５時間反応させた。次に、塩酸を用
いて液のｐＨを７．０に調節した後、オリエンターゼ９
０Ｎを５００ｇ（４０００units／小麦蛋白質１ｇ）添
加し、６０℃で１５時間反応させた。その時点で５０％
Ｌ−乳酸を約１５リットル加えて液のｐＨを４．５に調
整した後９０℃で２０分間加熱してプロテアーゼを失活
させた。冷却後、活性炭（武田薬品工業社製「タケコー
ル５０Ｗ」）１０ｋｇを加えて１時間撹拌した後、珪藻
土を濾過助剤としてフィルタープレス処理を行って透明
な濾液を得た。この濾液を減圧濃縮した後、プレートヒ
ーターで殺菌し、次いで噴霧乾燥して粉末状のオリゴペ
プチド混合物８２ｋｇを得た（小麦蛋白質に対するオリ
ゴペプチド混合物の収率６１．４％）。

【００３７】上記した得られたオリゴペプチド混合物の
特性を上記の方法で測定したところ、オリゴペプチド混
合物の重量平均分子量は４２０、オリゴペプチド混合物
重量に対するジペプチドおよびトリペプチドの合計含量
は５９．８重量％、グルタミン含量は３３．９重量％お
よび遊離アミノ酸含量は７．２重量％であった。なお、
参考のために、表１にこの実施例１で得られたオリゴペ
プチド混合物のアミノ酸組成を示す。

【００３８】《実施例２》実施例１で使用したのと同
じ粉末小麦蛋白質１３３．５ｋｇを０．０２Ｎのアンモ
ニア水８７０リットルに撹拌下に溶解した後、水酸化ナ
トリウムでｐＨを９．８に調整し、オリエンターゼ２２
ＢＦを１ｋｇ（２０００units／小麦蛋白質１ｇ）添加
して６０℃で０．５時間反応させた。水酸化ナトリウム
でｐＨを９．５に再調整した後、更に６０℃で１０時間
反応させた。その時点で５０％Ｌ−乳酸を約１５リット
ル加えて液のｐＨを４．５に調整し、９０℃で２０分間
加熱してプロテアーゼを失活させた。冷却後、実施例１
で用いたのと同じ活性炭１０ｋｇを加えて１時間撹拌し
た後、珪藻土を濾過助剤としてフィルタープレス処理を
行って透明な濾液を得た。この濾液を減圧濃縮した後、
プレートヒーターで殺菌し、次いで噴霧乾燥して粉末状
のオリゴペプチド混合物８０ｋｇを得た（小麦蛋白質に
対するオリゴペプチド混合物の収率５９．９％）。

【００３９】上記で得られたオリゴペプチド混合物の特
性を上記した方法で測定したところ、オリゴペプチド混
合物の重量平均分子量は５４０、オリゴペプチド混合物
重量に対するジペプチドおよびトリペプチドの合計含量
は５０．４重量％、グルタミン含量は３４．３重量％お
よび遊離アミノ酸含量は５．８重量％であった。なお、
参考のために、表１にこの実施例２で得られたオリゴペ
プチド混合物のアミノ酸組成を示す。

【００４０】

【表１】

【００４１】上記表１の結果から、本発明の上記（２）
の方法に相当する実施例１、および上記（１）の方法に
相当する実施例２のいずれの場合も、ジペプチドおよび
トリペプチドの合計含量並びにグルタミン含量がいずれ
も高く、しかも遊離アミノ酸含量の極めて少ない有益な
オリゴペプチド混合物を小麦蛋白質から高収率で得るこ
とができること、特にアルカリプロテアーゼで加水分解
した後更に中性プロテアーゼで加水分解を行う実施例１
の方法による場合は、ジペプチドおよびトリペプチドの
合計含量が一層多いオリゴペプチド混合物を得ることが
できることがわかる。

【００４２】

【発明の効果】本発明のオリゴペプチド混合物は、ジペ
プチドおよびトリペプチドを多く含むため、消化管での
消化吸収性に優れ、消化吸収能力の低下している高齢
者、乳幼児、病人などへの蛋白質素材として極めて有用
である。また、本発明のオリゴペプチド混合物はグルタ
ミンを多量に含んでいるため、侵襲時または腸管機能障
害時のエネルギー源として有用であり、しかもグルタミ
ンは遊離態ではなくペプチド態で存在していることによ
り加熱などの加工に対して安定であり、広範な用途に使
用可能である。そして、本発明のオリゴペプチド混合物
は遊離アミノ酸含量が少ないため、遊離アミノ酸に特有
な不快な風味がなく、経口投与時の受容性に優れ、且つ
浸透圧も低いので下痢などの症状を起こしにくい。更
に、本発明の方法による場合は、それ自体が有用な食品
素材である小麦蛋白質から安全性の高いオリゴペプチド
混合物を極めて高い収率で経済的に生産性よく製造する
ことができる。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】小麦蛋白質をプロテアーゼで分解して得
られるオリゴペプチド混合物であって、下記の〜の
特性；重量平均分子量が２００〜１０００である；ジペプチドおよびトリペプチドの合計含量が５０重量
％以上である；遊離アミノ酸含量が１０重量％以下である；グルタミン含量が３０重量％以上である；を有していることを特徴とするオリゴペプチド混合物。
【請求項２】小麦蛋白質をバチルス属細菌の生産する
アルカリプロテアーゼを用いてｐＨ８．０〜１１．０、
温度４０〜７０℃で５〜３０時間加水分解して請求項１
のオリゴペプチド混合物を製造する方法。
【請求項３】小麦蛋白質をバチルス属細菌の生産する
アルカリプロテアーゼを用いてｐＨ８．０〜１１．０、
温度４０〜７０℃で２〜１０時間加水分解した後、微生
物または植物に由来する中性プロテアーゼを用いて更に
ｐＨ６．０〜８．０、温度４０〜６０℃で５〜２０時間
加水分解して請求項１のオリゴペプチド混合物を製造す
る方法。
【請求項４】請求項１のオリゴペプチド混合物を含有
する経管・経口栄養剤。