JPS58116685A - 新規抗生物質k−710及びその製造法 - Google Patents
新規抗生物質k−710及びその製造法Info
- Publication number
- JPS58116685A JPS58116685A JP56211930A JP21193081A JPS58116685A JP S58116685 A JPS58116685 A JP S58116685A JP 56211930 A JP56211930 A JP 56211930A JP 21193081 A JP21193081 A JP 21193081A JP S58116685 A JPS58116685 A JP S58116685A
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- JP
- Japan
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- antibiotic
- streptomyces
- methanol
- substance
- cultured
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
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- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、新規抗生物質に−770及びその製造法に関
するものである。
するものである。
更に詳しくは、本発明のに一770物質は、ストレプト
ミセス(streptomyces ) 属に属する
抗生物質に一770生産菌を培養して、その培養物中か
ら前記抗生物質に一7l0f分離採取することにより得
られる文献未載の新規抗生物質である。
ミセス(streptomyces ) 属に属する
抗生物質に一770生産菌を培養して、その培養物中か
ら前記抗生物質に一7l0f分離採取することにより得
られる文献未載の新規抗生物質である。
本発明者は、新規抗生物質の探索を目的として多数の土
壌中から微生物全分離し、その産生ずる抗生物質を分離
探索した結果、ストレプトミセス属に属する微生物の培
養液及び培養菌体に文献未載の新規抗生物質が産生、蓄
積されることの新たな知見を得て、こ\に本発明を完成
するに至った。
壌中から微生物全分離し、その産生ずる抗生物質を分離
探索した結果、ストレプトミセス属に属する微生物の培
養液及び培養菌体に文献未載の新規抗生物質が産生、蓄
積されることの新たな知見を得て、こ\に本発明を完成
するに至った。
以下に、本発明の新規抗生物質に−710及びその製造
法について詳述する。
法について詳述する。
まず、本発明において用いる微生物は、抗生物質に−7
70の生産能を有するものであり、ストレプトミセス属
に属する菌種である。
70の生産能を有するものであり、ストレプトミセス属
に属する菌種である。
その−例として、ストレプトミセスM、%10−に−7
10(Streptomyces sp、4fO−に−
77O)と呼称される微生物は上記の特性ケ有し、本発
明の抗生物質に−77とλを有利に生産するものであり
、本発刊方法に有効に利用し得るものである。
10(Streptomyces sp、4fO−に−
77O)と呼称される微生物は上記の特性ケ有し、本発
明の抗生物質に−77とλを有利に生産するものであり
、本発刊方法に有効に利用し得るものである。
また、−ヒ記ストレ戸トミセス属/16了θ−に−71
0の自然的及び人T的変異株は勿論、ストレプトミセス
属ににする菌種で後述の抗生物質に−770の生産能を
有する微生物はすべて本発明方法において使用すること
ができる。
0の自然的及び人T的変異株は勿論、ストレプトミセス
属ににする菌種で後述の抗生物質に−770の生産能を
有する微生物はすべて本発明方法において使用すること
ができる。
上記ストレプトミセス属應イ0−に一7/QC以下、框
vc rに一770株」という−)は2本発明者により
福島県会津若松市で採取をれた土壌中より発見された土
壌放線菌であり、工業技術院微生物工業技術研究所に昭
和よ6年/、2月/ゾ日付寄託され、その微生物受託情
号は、微工研菌寄第4277号(FERM p−乙2
77)である。
vc rに一770株」という−)は2本発明者により
福島県会津若松市で採取をれた土壌中より発見された土
壌放線菌であり、工業技術院微生物工業技術研究所に昭
和よ6年/、2月/ゾ日付寄託され、その微生物受託情
号は、微工研菌寄第4277号(FERM p−乙2
77)である。
K−770株は、次の蘭学的性′aを有する。
fl) 形 態
に−7/ 0株σ)j装態をオート3−1し寒天j治地
、グルコースアス・ヤラギン寒天培地上、/弘日目に観
察した。顕微鏡観察の結果、基生菌糸はよく発達し分岐
している。気菌糸は短く、樹枝状に分岐し、屈曲してい
る、3〜7回転の螺旋糸全形成する。胞子の連鎖は20
〜≠0である。
、グルコースアス・ヤラギン寒天培地上、/弘日目に観
察した。顕微鏡観察の結果、基生菌糸はよく発達し分岐
している。気菌糸は短く、樹枝状に分岐し、屈曲してい
る、3〜7回転の螺旋糸全形成する。胞子の連鎖は20
〜≠0である。
輪生枝は形成しない 電子顕微鏡による観察によると胞
子表面は練状を呈し、楕円形又は長円形で、胞子の大き
さは(0,に〜/、/μm)X(/、/〜/、j )
である。
子表面は練状を呈し、楕円形又は長円形で、胞子の大き
さは(0,に〜/、/μm)X(/、/〜/、j )
である。
μm
(I[) 各種培地上の性質
特許庁産業別審査基準に従い、谷種培地fjr:調製し
、接種後3週間後に観察した結果を次に記載する。尚色
調の記載に於て()内の記号はディスクリ7テイブ・カ
ラー・ネームズ・ディクショナリー(oescript
lve Co1or NamesDictionary
)第≠版の色名記号に従ったものである。
、接種後3週間後に観察した結果を次に記載する。尚色
調の記載に於て()内の記号はディスクリ7テイブ・カ
ラー・ネームズ・ディクショナリー(oescript
lve Co1or NamesDictionary
)第≠版の色名記号に従ったものである。
(1)/ニークロース・硝酸埜天培地
生 育:遅いが3〜lI−週間培養すると寒天表面に拡
がったよい生育が見られる。っ表面 の菌体の色は淡い黄色である。
がったよい生育が見られる。っ表面 の菌体の色は淡い黄色である。
気菌糸:形成しない。
可溶性色素:生成しない。
(2) クルコース・アスパラギン寒天培地中 育−
生育は遅く普通の生育が見られ裏面の菌体の色は白色乃
至クリーム色 (2ba)であろう 気菌糸:僅かにうすい白色の気菌糸が観察される。
生育は遅く普通の生育が見られ裏面の菌体の色は白色乃
至クリーム色 (2ba)であろう 気菌糸:僅かにうすい白色の気菌糸が観察される。
可溶性色素:生成しない。
(3) グリセリン・アス・!ライン寒天培地生 育
ニゲルコース・アス・ぐライン寒天培地と同様の生育が
見られる。
ニゲルコース・アス・ぐライン寒天培地と同様の生育が
見られる。
気菌糸:形成しない。
可溶性色素:生成しない。
(4) 無機塩・澱粉寒天培地
生 育:生育は遅く、ひろがった平坦な中程度の生育が
見られ、裏面の菌体の色 は明るい小麦色である。
見られ、裏面の菌体の色 は明るい小麦色である。
気菌糸:僅かにうすい白色の気菌糸が見られ長期間培養
すると灰色となる(!r fe )。
すると灰色となる(!r fe )。
可溶性色素:生成しない。
(5) チロシン寒天培地
牛 育:貧弱な生育が見られ、裏面の菌体の色は明るい
小麦色(2ea)である。
小麦色(2ea)である。
気菌糸:僅かに白色のうすい気菌糸が観察される。
可溶性色素:生成しない3
(6)栄誉寒天培地
生 育:貧弱な生育が見られ、裏面の菌体の色は無色で
ある。
ある。
気菌糸:形成しない。
可溶性色素:生成しない。
(7) イースト・エキストラクト、フルト・エキスト
ラクト寒天培地 生 育:良好な生育が見られ、表面の菌体の色は黄金色
(211e)全呈する。
ラクト寒天培地 生 育:良好な生育が見られ、表面の菌体の色は黄金色
(211e)全呈する。
気菌糸:白色のうすい気菌糸をよく形成するう
ロエ溶性色累:生成しない。
(8) オートミール悪天培地
生 育:良好で、裏面の菌体の色は小麦色(,2ea)
乃至黄金色(,2Jc) で長期間培養すると中心部が黒褐色 (,241ml )となる。
乃至黄金色(,2Jc) で長期間培養すると中心部が黒褐色 (,241ml )となる。
気菌糸二表面上に短い気菌糸金−面に着生し、長期間培
養すると培養状態により白 色或いは黒褐色(3ゴ)乃至黒色 (/ Oml )となる。
養すると培養状態により白 色或いは黒褐色(3ゴ)乃至黒色 (/ Oml )となる。
可溶性色素:生成しない、っ
(9) −!:f)ン・イーストエキストラクト・鉄
寒天培地生 育:生育しないか、貧弱な生育が見られる
。
寒天培地生 育:生育しないか、貧弱な生育が見られる
。
気菌糸:形成しない。
可溶性色素:生成しない。
(III) 生理的性質
(1)生*温度=23℃より37℃で生育するが、27
℃より33℃が生育の適温で ある。
℃より33℃が生育の適温で ある。
(2)澱粉分解カニ陽 性
(3)脱脂粉乳−波tトン化する。
(4)メラニン様色素の生成:生成しない。
(5)ゼラチン液化カニ弱い。
(6)硝 酸 塩 還 元:還元する。
IV) 各種炭素源の利用性
デリダハムによる糖料用培地(ディ7コ製)に各種の糖
?添加してに一770株全培養した結果は次の通りであ
るう 生育 L−アラビノース + D−キンロース 廿 D−グルコース 廿 D−フラクトース 廿 /ニークロース + 1−イノシトール 廿 し−ラムノース 升 ラフイノ−六 廿 D−マンニトール 廿 無 添 加 士廿 よく生育
する。
?添加してに一770株全培養した結果は次の通りであ
るう 生育 L−アラビノース + D−キンロース 廿 D−グルコース 廿 D−フラクトース 廿 /ニークロース + 1−イノシトール 廿 し−ラムノース 升 ラフイノ−六 廿 D−マンニトール 廿 無 添 加 士廿 よく生育
する。
十 生育する。
± 殆んど生育しない、
に−710株の特徴的な菌学的性質を要約すれば次のと
おりである。
おりである。
(1) オートミール培地上に於てよく生育し、灰色
系の気菌糸全形成する。
系の気菌糸全形成する。
(2)気菌糸は短く螺旋糸を形成し、胞子表面Vi(束
状である。
状である。
(3)メラノイド系色素及び各種培地上に於て特徴ある
可溶性色素を生成しない。
可溶性色素を生成しない。
(4)各種の糖をよく利用するっ
上記の諸性質を有するストレプトミセス属の菌種を野々
村氏によるジャーナル・オブ・フェルメンチージョン・
チクノロノー62巻2号記載の放オブ11−@p・スト
レプトミセス。インクルーデッド拳イ 7 ° +
、s、p、) (にey for cla
ssification andidentific
ation of 4A!;I 5pecies of
streptomyces Included in
1.s、P、 )により、検ifると、アクチノミセス
・マラキティカx (A。
村氏によるジャーナル・オブ・フェルメンチージョン・
チクノロノー62巻2号記載の放オブ11−@p・スト
レプトミセス。インクルーデッド拳イ 7 ° +
、s、p、) (にey for cla
ssification andidentific
ation of 4A!;I 5pecies of
streptomyces Included in
1.s、P、 )により、検ifると、アクチノミセス
・マラキティカx (A。
malachiticus )、アクチノミセス・ビリ
ドーデイアスチb X (A、virido−dlas
ticus ) 、ストレプトミセス0スノ9ルソダネ
ス(s、 sparsogenes )に近縁の菌種と
考えられる また更に、タイプカルチャーとの比較にヨリ、上記3棒
類の菌種の中、ストレットミセス・ビオラセオクロモr
ネスが気菌糸の色と基中菌糸の色が最もよく近似しでい
ることがわかる。しかし、糖の同化性については、に−
770株はいずれの菌種ともかなり大きな相違が認めら
れる。
ドーデイアスチb X (A、virido−dlas
ticus ) 、ストレプトミセス0スノ9ルソダネ
ス(s、 sparsogenes )に近縁の菌種と
考えられる また更に、タイプカルチャーとの比較にヨリ、上記3棒
類の菌種の中、ストレットミセス・ビオラセオクロモr
ネスが気菌糸の色と基中菌糸の色が最もよく近似しでい
ることがわかる。しかし、糖の同化性については、に−
770株はいずれの菌種ともかなり大きな相違が認めら
れる。
以上の結果より、に−′770株は、ストレプトミセス
属に属シ、目つストレプトミセス・ビオラセオクロモケ
ゞネスに最も近縁の一菌橿と結論された。
属に属シ、目つストレプトミセス・ビオラセオクロモケ
ゞネスに最も近縁の一菌橿と結論された。
次に1本発明方法を実施するに当っては、ストレプトミ
セス楓に属する抗生物質に一770生産菌を、抗生物質
を生産する通常の方法で培養することができる。培養の
形態は、液体培養で4固体培養でもよく、工業的に有利
に培養するためには。
セス楓に属する抗生物質に一770生産菌を、抗生物質
を生産する通常の方法で培養することができる。培養の
形態は、液体培養で4固体培養でもよく、工業的に有利
に培養するためには。
上記生産菌の胞子懸濁液又は培養液全培地に接種し、通
、象攪拌培養を行えばよい1、 培地の栄養源としては特に限定されることなく。
、象攪拌培養を行えばよい1、 培地の栄養源としては特に限定されることなく。
微生物の培養に通常用いられる炭素源、窒素源その他を
培地中に含有させることができる。
培地中に含有させることができる。
炭素源としては、澱粉、デギストリン、ダリセリ/、ダ
ルコース、シュークロース、ガラクトース、イノシトー
ル、マンニトールなどが、ti窒素源としては、ペプト
ン、大豆粉、肉エキス、米ヌカ、皺、尿s、コーンステ
イーシリカ−、アンモニウム塩、硝酸塩、その他の有機
または無機の窒素含有物が用いられる3その他、無機塩
類、たとえば食塩、リン酸塩類、カルシウム、亜鉛、マ
ンゴ/、鉄等の金属塩類等を適宜に添加してもよく、必
要に応じて消泡剤としての動、植、鉱物油等を添加して
もよい。
ルコース、シュークロース、ガラクトース、イノシトー
ル、マンニトールなどが、ti窒素源としては、ペプト
ン、大豆粉、肉エキス、米ヌカ、皺、尿s、コーンステ
イーシリカ−、アンモニウム塩、硝酸塩、その他の有機
または無機の窒素含有物が用いられる3その他、無機塩
類、たとえば食塩、リン酸塩類、カルシウム、亜鉛、マ
ンゴ/、鉄等の金属塩類等を適宜に添加してもよく、必
要に応じて消泡剤としての動、植、鉱物油等を添加して
もよい。
培養温度、培養時間等の培養条件は使用菌の発育に適し
、しかもに−770物質の生産が最高となるような条件
が選ばれる。たとえば、培地のpHは中性付近がよく、
培養の適mは2j℃〜3j℃程度が望ましい。また培養
時間は通常2〜7日間程度がよい。
、しかもに−770物質の生産が最高となるような条件
が選ばれる。たとえば、培地のpHは中性付近がよく、
培養の適mは2j℃〜3j℃程度が望ましい。また培養
時間は通常2〜7日間程度がよい。
しかし、これらの培養組成物、培地の液性、培養温度、
直押条件などの培養条件は使用する菌株の種類や外部の
条件などに応じて好ましい結果が得られるよう適宜調節
選択されるべきであることはいうまでもない。このよう
にして得られる培養物から、抗生物質に−770を得る
には代謝産物を採取するのに通常用いられる手段を適宜
に利用して採取し得る。たとえば、に−770物質と不
純物との溶解度差全利用する手段、吸着親和力の差金利
用する手段、イオン結合力の差金利用する手段、有機溶
剤との間の分配の差金利用する手段のいずれも、イれぞ
れ単独で、または組合わせて、あるいは反復して利用さ
れる。
直押条件などの培養条件は使用する菌株の種類や外部の
条件などに応じて好ましい結果が得られるよう適宜調節
選択されるべきであることはいうまでもない。このよう
にして得られる培養物から、抗生物質に−770を得る
には代謝産物を採取するのに通常用いられる手段を適宜
に利用して採取し得る。たとえば、に−770物質と不
純物との溶解度差全利用する手段、吸着親和力の差金利
用する手段、イオン結合力の差金利用する手段、有機溶
剤との間の分配の差金利用する手段のいずれも、イれぞ
れ単独で、または組合わせて、あるいは反復して利用さ
れる。
AI的i/コけ、K−770物質は培賓戸液及び培養菌
体に存在するが、培養Po、より酸性条件下で酢酸工f
ル、酢Hブチル、ブタノール、クロロホルム等の有機溶
剤で抽出することが出来る。培重菌体中に存在するに一
770物質は、菌体全含水アセト/、あるいは含水メタ
ノール等金用いて抽出することが出来る。このように抽
出されたK −’7 / 0物質は、その酸性及び脂溶
性の性質を利用して、吸着クロマトグラフィー、イオン
交換クロマトクラフィー、rル濾過クロマトグラフィー
等を組み合わせて精製することが出来る。吸着クロマト
グラフィーの担体としては、シリカデル、ダイアイオン
HP−,2(17等の吸着剤が使用される。
体に存在するが、培養Po、より酸性条件下で酢酸工f
ル、酢Hブチル、ブタノール、クロロホルム等の有機溶
剤で抽出することが出来る。培重菌体中に存在するに一
770物質は、菌体全含水アセト/、あるいは含水メタ
ノール等金用いて抽出することが出来る。このように抽
出されたK −’7 / 0物質は、その酸性及び脂溶
性の性質を利用して、吸着クロマトグラフィー、イオン
交換クロマトクラフィー、rル濾過クロマトグラフィー
等を組み合わせて精製することが出来る。吸着クロマト
グラフィーの担体としては、シリカデル、ダイアイオン
HP−,2(17等の吸着剤が使用される。
イオン交換クロマトグラフィーの担体としては、DEA
E−セルロース、DEAE−セファロース等の陰イオン
父換体全利用することが出来る。父。
E−セルロース、DEAE−セファロース等の陰イオン
父換体全利用することが出来る。父。
rル濾過にはメタノールを終剤とする関係上、セファデ
ックスL H,−,20が有利1(使用し得る。史に高
度の精製には高速液体クロマトグラフィーが利用される
、この場合の使用カラムは逆層分配型のものが有第1]
に使用出来る。このようにして精製されたに一770物
質は、そのメタノール溶液にエーテル、石油エーテル等
を加えると高純度の白色の粉末として沈澱するので、こ
れ’C濾過により採取することが出来る。かくして得ら
れた抗生物質に−770の理化学的性質及び生物学的性
状は次のとおりである。
ックスL H,−,20が有利1(使用し得る。史に高
度の精製には高速液体クロマトグラフィーが利用される
、この場合の使用カラムは逆層分配型のものが有第1]
に使用出来る。このようにして精製されたに一770物
質は、そのメタノール溶液にエーテル、石油エーテル等
を加えると高純度の白色の粉末として沈澱するので、こ
れ’C濾過により採取することが出来る。かくして得ら
れた抗生物質に−770の理化学的性質及び生物学的性
状は次のとおりである。
〔抗生物質に−770の理化学的性質及び生物学的性状
〕 形 状:白色粉末 融 小: 、x o o c tpt上で徐々に分解す
る、元素分析:炭素タフ、0g%、水素697%、窒素
//、オjチ 比旋光度:〔α〕21=−メ/7゜ υ (C=0.≠ど、メタノール) 紮外部吸収ス(クトル:メタノール甲T2//mμに末
端吸収をボす。
〕 形 状:白色粉末 融 小: 、x o o c tpt上で徐々に分解す
る、元素分析:炭素タフ、0g%、水素697%、窒素
//、オjチ 比旋光度:〔α〕21=−メ/7゜ υ (C=0.≠ど、メタノール) 紮外部吸収ス(クトル:メタノール甲T2//mμに末
端吸収をボす。
光外部吸収スにクトル:
3≠00.2930、ユど50、/7≠o1/乙jO1
/j30、/≠00、/2θo110乙0.70θ、3
sot薄−に特徴的な吸収帯を有する。
/j30、/≠00、/2θo110乙0.70θ、3
sot薄−に特徴的な吸収帯を有する。
m解性:メタノールによく溶け、水、低級アルコールに
やや射けるつアセトン、エー テルに難溶。
やや射けるつアセトン、エー テルに難溶。
p K a/ +、≠0、タタ、Z乙分子tt :
/ / 71(二次イオンマススベクlルによル)含有
するアミノ酸:M分解により、アス・母うギ/酸、セリ
ンの他数ケの未同定アミ ノ酸を与える。。
/ / 71(二次イオンマススベクlルによル)含有
するアミノ酸:M分解により、アス・母うギ/酸、セリ
ンの他数ケの未同定アミ ノ酸を与える。。
呈色反応:ライドン・スミス反応は陽性、ニンヒドリン
、ドラ−ダンドル2反 応は陰性。
、ドラ−ダンドル2反 応は陰性。
塩基性・酸性・中性の区別:両性物質と考えられる。
Rflg: メルク社製ンリカrル博層クロマトft〕
・ヤノールーINアンモニア水(7:j’)
0.!S2ブタノールー酢酸−水(4’:/:/)0゜
33クロロホルム−メタノール(/:/)
0.33メルク社製セルロース薄層クロマトプレート
全1史用したときのRfl1区 ブタノール−酢酸−水(≠:/:OJ) 0
.95抗菌スペクトル(寒天希釈法による):以下に示
すように植物病原性かび類 に菌糸の膨化全件う生育阻害活性を 示すが試験した範囲で、細菌・酵母 類には殆んど阻害活性を示さない。
・ヤノールーINアンモニア水(7:j’)
0.!S2ブタノールー酢酸−水(4’:/:/)0゜
33クロロホルム−メタノール(/:/)
0.33メルク社製セルロース薄層クロマトプレート
全1史用したときのRfl1区 ブタノール−酢酸−水(≠:/:OJ) 0
.95抗菌スペクトル(寒天希釈法による):以下に示
すように植物病原性かび類 に菌糸の膨化全件う生育阻害活性を 示すが試験した範囲で、細菌・酵母 類には殆んど阻害活性を示さない。
Cochl 1obolus m1yabeanusア
ルタナリア・マリ (りんご斑点落葉病菌)0.2!; <0.θ/j
Alternarla mall Glomerella cingulataコレトトリ
カム・うrナリウム (そ菜炭痕病菌) >、230“
く0刀/jColletotrlchum lagen
arlumビリキュラリア・オリゼ 芳 (稲熱病萌) 〉2jθ 0..2.
fPirlcularia oryzae■ 部分的生
育阻害がみられる。
ルタナリア・マリ (りんご斑点落葉病菌)0.2!; <0.θ/j
Alternarla mall Glomerella cingulataコレトトリ
カム・うrナリウム (そ菜炭痕病菌) >、230“
く0刀/jColletotrlchum lagen
arlumビリキュラリア・オリゼ 芳 (稲熱病萌) 〉2jθ 0..2.
fPirlcularia oryzae■ 部分的生
育阻害がみられる。
以上の抗生物質に一7/θの理化学的性質並びに生物学
的性状全従来の抗生物質と比べ句と、抗生物質AC−l
)9(特開昭55−33もけ吋公報診照)が類似物質と
して挙げられるが、この物質とはアミノ酸組成、比旋光
度、PKa’値等に於て明らかに異る上、同条件に於け
る薄層クロマトグラフィーによる直接比較の結果側らか
に異る物質であることが証明された。従ってに−770
は文献未記載の新規抗生物質であると結論された。
的性状全従来の抗生物質と比べ句と、抗生物質AC−l
)9(特開昭55−33もけ吋公報診照)が類似物質と
して挙げられるが、この物質とはアミノ酸組成、比旋光
度、PKa’値等に於て明らかに異る上、同条件に於け
る薄層クロマトグラフィーによる直接比較の結果側らか
に異る物質であることが証明された。従ってに−770
は文献未記載の新規抗生物質であると結論された。
また、抗生物質に一7/(II)の各種植物病原性のか
びに対する阻害活性は in vlvo試験(Iット試
験)に於ても確認されたので、に−770は農園\ 芸用抗かび剤としての実用化が大いに期待されるもので
ある。
びに対する阻害活性は in vlvo試験(Iット試
験)に於ても確認されたので、に−770は農園\ 芸用抗かび剤としての実用化が大いに期待されるもので
ある。
以下に、本発明方法全実施例によって詳述するが、本発
明方法はこれに何ら限定されるものではない。
明方法はこれに何ら限定されるものではない。
実施例/
f ルーy −2,2%、可溶性澱粉/%、肉エキス0
.7チ、酵母0.’1%、大豆粉λ、j%、食塩0.2
%、第二燐酸力vo、ootφの組成からなる培地30
1に、あらかじめ同一培地に、前記に一770株(微工
研菌寄第6277号(FERM P−乙、277)−
1−■■■■■を接種して4tど〜72時間27℃で振
盪培養した培養液3θOmlを接種して30℃で72時
間、通気攪拌培養を行う。最終pHは7. t −、r
、 0である。
.7チ、酵母0.’1%、大豆粉λ、j%、食塩0.2
%、第二燐酸力vo、ootφの組成からなる培地30
1に、あらかじめ同一培地に、前記に一770株(微工
研菌寄第6277号(FERM P−乙、277)−
1−■■■■■を接種して4tど〜72時間27℃で振
盪培養した培養液3θOmlを接種して30℃で72時
間、通気攪拌培養を行う。最終pHは7. t −、r
、 0である。
培養液を遠心濾過により菌体とP液とに分け、菌体は乙
Oチアセトン101で2回抽出する。培養戸液と菌体抽
出液を合わせ、夕゛イヤイオンHp−7061のカラム
全通〕崗させる。カラムは10%アセトン101’fr
用いて洗滌後、70%アセト7/4’lf用いて溶出を
行う。活性区分を集め、減圧濃縮し、7.31の濃縮水
溶液ケ得る。
Oチアセトン101で2回抽出する。培養戸液と菌体抽
出液を合わせ、夕゛イヤイオンHp−7061のカラム
全通〕崗させる。カラムは10%アセトン101’fr
用いて洗滌後、70%アセト7/4’lf用いて溶出を
行う。活性区分を集め、減圧濃縮し、7.31の濃縮水
溶液ケ得る。
ブタノール0.1.lk用い2回抽出し、ブタノール層
全減圧濃縮し残渣f9に得る。
全減圧濃縮し残渣f9に得る。
これを更にfill製するためにゾリカデルカラムクロ
マトダラフイーヲ行う。クロロホルムで調製したφA×
30amのカラムにかケ、クロロホルムl、tl、10
係メタノール−クロロホルム、ll、20%ツタノール
−クロロホルム≠l、、s’otsメタノール−クロロ
ホルム21で順次溶出全行い、溶出液f 73 mlつ
つ分取する。活性画分(フラクションNo//3−/7
0)を集め、減圧濃縮して粗粉末+ 3. / 9を得
る。
マトダラフイーヲ行う。クロロホルムで調製したφA×
30amのカラムにかケ、クロロホルムl、tl、10
係メタノール−クロロホルム、ll、20%ツタノール
−クロロホルム≠l、、s’otsメタノール−クロロ
ホルム21で順次溶出全行い、溶出液f 73 mlつ
つ分取する。活性画分(フラクションNo//3−/7
0)を集め、減圧濃縮して粗粉末+ 3. / 9を得
る。
更に精製するために粗粉末1 、!;00m9をメタノ
ール少量に溶かし、ツタノールで調製したセファデック
スL H−20(1009)のカラムにかけ、引き続き
メタノールで溶出する4、活性区分金集め減圧濃縮して
粗粉末I[3/ jmll ’r得る。
ール少量に溶かし、ツタノールで調製したセファデック
スL H−20(1009)のカラムにかけ、引き続き
メタノールで溶出する4、活性区分金集め減圧濃縮して
粗粉末I[3/ jmll ’r得る。
最終的に精製を行うために高速液体クロマトグラフィー
による分取を行う。日立RP−71(Nucleosi
l 6 C/!、φ1ItWI×/jcIn)のカラム
f用いろよ%メタノールを溶剤として分取を繰返し、/
乙0〜の粗粉末■より単一のに一770物質/乙m9が
白色粉末として得られた。
による分取を行う。日立RP−71(Nucleosi
l 6 C/!、φ1ItWI×/jcIn)のカラム
f用いろよ%メタノールを溶剤として分取を繰返し、/
乙0〜の粗粉末■より単一のに一770物質/乙m9が
白色粉末として得られた。
実施例2
実施例/に於ける粗粉末1j00rn9に少量の水に溶
かし、DEAE−セファロース(炭酸型、φ、2Qtm
×!;7儂)のカラムにかけ、水、ついで0、 !;
M−重炭酸アンモニウム溶液で溶出を行う。
かし、DEAE−セファロース(炭酸型、φ、2Qtm
×!;7儂)のカラムにかけ、水、ついで0、 !;
M−重炭酸アンモニウム溶液で溶出を行う。
72m1づつ浴出液を分取する。活性画分(フラクショ
ンNo 33〜/IJ−)i集め凍結乾燥すると2≠0
1n9の白色粉末が得られた。この粉末は、高速液体ク
ロマトグラフィーで分析すると単一ではなかったので、
単一物質を得るために実施例/に於ける高速液体クロマ
トグラフィーによる分取を繰返しに一710物質の精製
白色粉末を得た。1
ンNo 33〜/IJ−)i集め凍結乾燥すると2≠0
1n9の白色粉末が得られた。この粉末は、高速液体ク
ロマトグラフィーで分析すると単一ではなかったので、
単一物質を得るために実施例/に於ける高速液体クロマ
トグラフィーによる分取を繰返しに一710物質の精製
白色粉末を得た。1
添付図面は、本発明の抗生物′eIに−770の臭化カ
リ錠剤における赤外部吸収スにクトルを示すグラフであ
る。 特許庁長官 島 1) 春 樹 殿1.事件の
表示 昭和56年 特 許 廓 第2119 :30号3、補
iEをする者 事件との関係 出順人 名称(679)理化学研究所 4、代理人 5、補1命令の日付 自 発 7、補正の内容 1、 4.′l許請)IJの軸間を別紙の、’l :4
:; ;r社111才イ、。 2、 明細ill第1211.3 t+の“itt i
tの菌種°を1i!′r本俵の−・菌利1jとバI’
+l−する。 、′(、同第1 i 〔j’ 71層−1〜13行の1
才た9′!に・・・・・結論さ才)、た。」を削除する
。 4、 同第16 B+ 14行の“as−”を1cm
−J 、Li1T itす?)。 特許llft求の軸回 (1) 形 状:白色粉末 融 点; 211 (ビ(゛以トe徐々に分解する。 元素分析:炭素 52.0)1%、水率 6.!17%
、窒素 11.55% 1:b lk光度: (α1=−9,17’(C−(1
,4B、メタノール) 紫タ1部吸収スペクトル; メタノール中で211mメlに末端 吸収を示す。 赤外部吸収スペクトル; 3400、2!130.2)150.1740.165
0.1530、I400.1200、l0H1700,
550■ に特徴的な吸1■帯を有 する。 溶解4r4: メタノールによく熔け、水、低級アル
−1−ル弓こやや溶ける。アセト ン、エーテルに難溶。 pka ’ :4.(1,5,9,9,f3分子量:
117B (次イオンマフスペクトル6−よ る) 禽イ1するアミノ酸: 酸分解Gこよ/J、1′スパうギン酸、セリンの池数ケ
の未同定アミノ酸 を与える。 呈色1i応:ライドン・スミス反応は陽性、ニンIニド
リン、ドラーゲンドJレフ1又1ツヤ?は陰性。 ¥基1’t 、酸性、中P[の区別: 両性物質と考えられる。 抗菌スペクトル(寒天希釈法による);植物病原I11
のかび4fi cS 44−育1f14 N 活性をボ
す。 I記の理化学的性質及びえ1−物学的セト質を自する新
規抗1p物質に一7l06 (21ヌトレプ1ミセス(S trep 1.on+y
r:es)属に属する抗ll゛物wK−710生産菌を
培養し、その培養物からfJi規II″blト物質1ぐ
710を勺訓i:I−取する・“5とを特徴とすh新
規抗/1;物質!<−71Qの製造法。 (:4) スト1/シトミセス属に1ボする抗1p物
質1<=−710ηミ産菌カストレブトミセス・エスピ
ー・80−1+: −7111tsLrcspLt+1
nyces :+p、 80−K −’/ 1 (1
)である特許請求の範囲第2項記載のノ)法。
リ錠剤における赤外部吸収スにクトルを示すグラフであ
る。 特許庁長官 島 1) 春 樹 殿1.事件の
表示 昭和56年 特 許 廓 第2119 :30号3、補
iEをする者 事件との関係 出順人 名称(679)理化学研究所 4、代理人 5、補1命令の日付 自 発 7、補正の内容 1、 4.′l許請)IJの軸間を別紙の、’l :4
:; ;r社111才イ、。 2、 明細ill第1211.3 t+の“itt i
tの菌種°を1i!′r本俵の−・菌利1jとバI’
+l−する。 、′(、同第1 i 〔j’ 71層−1〜13行の1
才た9′!に・・・・・結論さ才)、た。」を削除する
。 4、 同第16 B+ 14行の“as−”を1cm
−J 、Li1T itす?)。 特許llft求の軸回 (1) 形 状:白色粉末 融 点; 211 (ビ(゛以トe徐々に分解する。 元素分析:炭素 52.0)1%、水率 6.!17%
、窒素 11.55% 1:b lk光度: (α1=−9,17’(C−(1
,4B、メタノール) 紫タ1部吸収スペクトル; メタノール中で211mメlに末端 吸収を示す。 赤外部吸収スペクトル; 3400、2!130.2)150.1740.165
0.1530、I400.1200、l0H1700,
550■ に特徴的な吸1■帯を有 する。 溶解4r4: メタノールによく熔け、水、低級アル
−1−ル弓こやや溶ける。アセト ン、エーテルに難溶。 pka ’ :4.(1,5,9,9,f3分子量:
117B (次イオンマフスペクトル6−よ る) 禽イ1するアミノ酸: 酸分解Gこよ/J、1′スパうギン酸、セリンの池数ケ
の未同定アミノ酸 を与える。 呈色1i応:ライドン・スミス反応は陽性、ニンIニド
リン、ドラーゲンドJレフ1又1ツヤ?は陰性。 ¥基1’t 、酸性、中P[の区別: 両性物質と考えられる。 抗菌スペクトル(寒天希釈法による);植物病原I11
のかび4fi cS 44−育1f14 N 活性をボ
す。 I記の理化学的性質及びえ1−物学的セト質を自する新
規抗1p物質に一7l06 (21ヌトレプ1ミセス(S trep 1.on+y
r:es)属に属する抗ll゛物wK−710生産菌を
培養し、その培養物からfJi規II″blト物質1ぐ
710を勺訓i:I−取する・“5とを特徴とすh新
規抗/1;物質!<−71Qの製造法。 (:4) スト1/シトミセス属に1ボする抗1p物
質1<=−710ηミ産菌カストレブトミセス・エスピ
ー・80−1+: −7111tsLrcspLt+1
nyces :+p、 80−K −’/ 1 (1
)である特許請求の範囲第2項記載のノ)法。
Claims (3)
- (1)形 状:白色粉末 融 点=200℃以上で徐々に分解する。 元素分析:炭素j2.θf%、水素乙y′’7 %、窒
素//夕j% 比旋光度:〔α〕21−−タ/7゜ (C=0.≠ど、メタノール) 紫外部吸収スペクトル: メタノール中で、2 / / mpに末端吸収を示す、
っ 赤外部吸収スペクトル: 34L00.29.デ0、l♂30、/74tO5/乙
jθ、/j30、/≠00、/20θ、10乙0.70
01..5′jOt、x−に特徴的な吸収iを・有する
。 溶解性: メタノールによく溶け、水、低級アルコール
にやや溶ける、アセトン、 エーテルに難溶。 pにa’:11.01.5.L?、りを分子緻 ://
7A (二次イオンマススペクトルに よる) 言有するアミノ酸: 酸分t@により、アス・ぐラギン1せ、セリンの他数ケ
の未同定アミノ酸 を与える。。 呈色反応 二 ノーイ トン・ スミス反応け1勅性、
ニノヒドリ7% ドラーケ0ンドルフ反応ハ陰性。 塩−堪性、酸性、中性の14別: 両性物質と考えられる。 抗菌スペクトル(寒天希釈法による):植物病原性のか
び類に生育哨害活性 を示す、 上舵の理化字的性′用及び生物学的性質を有する新規抗
生物質に−770゜ - (2) ストレプトミセス(streptomyce
s ) 属に属する抗生物質に一710生産菌を培養
し、その培養物から新規抗生物質に−770を分離採取
することを特徴とする新規抗生物質に−770の製造法
。 - (3) ストレプトミセス属に属する抗生物質に一゛
710生産藺がストレットミセス・ゴスビー−go−に
−7/ 0 (Streptomyces sp。 ど0−に−7l0)である特許請求の範囲第2項記載の
方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP56211930A JPS5844359B2 (ja) | 1981-12-28 | 1981-12-28 | 新規抗生物質k−710及びその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP56211930A JPS5844359B2 (ja) | 1981-12-28 | 1981-12-28 | 新規抗生物質k−710及びその製造法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS58116685A true JPS58116685A (ja) | 1983-07-11 |
JPS5844359B2 JPS5844359B2 (ja) | 1983-10-03 |
Family
ID=16614024
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP56211930A Expired JPS5844359B2 (ja) | 1981-12-28 | 1981-12-28 | 新規抗生物質k−710及びその製造法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5844359B2 (ja) |
-
1981
- 1981-12-28 JP JP56211930A patent/JPS5844359B2/ja not_active Expired
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS5844359B2 (ja) | 1983-10-03 |
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