JPS5910798B2

JPS5910798B2 - 新しいリフアマイシン類の製造方法

Info

Publication number: JPS5910798B2
Application number: JP50104830A
Authority: JP
Inventors: ホワイトリチヤ−ド; ランシニギアンカルロ; アントニニピエロ
Original assignee: Lepetit SpA
Current assignee: Gruppo Lepetit SpA
Priority date: 1974-08-30
Filing date: 1975-08-29
Publication date: 1984-03-12
Also published as: FI752417A; CH627784A5; FI54327B; IL47897A0; CS188235B2; GB1470426A; US4263404A; JPS5151590A; HU173751B; IE42605L; AR206232A1; DD119818A5; DK379075A; IN140843B; AU8392675A; US4042683A; PL97788B1; FR2282878B1; DK137866B; NZ178519A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、好気的条件で水性培地中で６ストレプトマイ
セスメデイテラネイ（ＳｔｒｅｐｔＯｍｙρＥｓｍｅ
ｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ）の変異株を発酵させることによ
り製造した新しいリフアマイシン（Ｒｉｆａｍｙｃｉｎ
）化合物に関する。

これらの新しいリフアマイシンは以後リフアマイシンＰ
．リフアマイシンＱ６リフアマイシンＲおよびリフアマ
イシンＵと称する。普通の発育培地中に発酵さすと．ス
トレプトマイセスメデイテラネイはリフアマイシン複
合物と総称される１群の抗生物質を合成することが報告
されている。（Ｐ．Ｓｅｎｓｉ等６Ａｎｔｉｂｉ０ｔｉ
ｃｓＡｎｒ１ｕａ１１９５９−１９６０．２６２頁）。
引き続く仕事の結果として、ナトリウムジエチルバル
ビチユレートを培地に添加すると、単一の発酵生成物と
してのリフアマイシンＢを本質的に生成することを示し
た。（ＭａｒｇａｌｉｔｈＰ．およびＰａｇａｎｉＨ，
ＡｐｐｌｌｅｄＭｉｃｒＯｂｌＯｌＯｇｙ，９．３２５
．ｌ９６ｌ）。さらに別の発見として、ストレプトマイ
セスメデイテラネイのひとつの変異株が，発酵培地中
にナトリウムジエチルバルビチユレートが存在すると
しないとに拘．らず，本質的にリフアマイシンＢのみを
生産し，その結果としてリフアマイシンＢの改良製造方
法を達成しうることが見出だされた。リフアマイシンＢ
生産株は，ストレプトマイセスメデイテラネイ（Ｓｔ
ｒｅｐｔＯ一Ｍｙｃｅｓｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ）Ａ
ＴＣＣ２ｌ７８９と同定されている。アメリカ合衆国特
許３８７１９６５をみよ。本発明の目的である新しい抗
生物質は，ストレプトマイセスメデイテラネイＡＴＣ
Ｃｌ３６８５（新しい名称：ノデイアメデイテラネイ
ＡＴＣＣｌ３６８５）に由来する変異株により生産され
る。

本発明の新しい株は６株ＡＴＣＣｌ３６８５を６普通の
化学的変異剤たとえば亜硝酸またはニトロングアニジン
誘導体または物理的変異剤たとえばＸ線および紫外線で
照射して得られる。本発明の新しい変異株は６Ｊ．Ｅ．
Ｔｈｉｅｍａｎ等の提唱（Ａｒｃｈ．ＭｉｋｒＯｂｌＯ
ｌ．，６７．ｌ４７−１５５（１９６９）によると、ス
トレプトマイセスメデイテラネイよ）もノカルデイア
（ＮＯｃａｒ−Ｄｌａ）に属する。新しいリフアマイシ
ンを生産する変異株の分離ストレプトマイセスメデイ
テラネイＡＴＣＣｌ３６８５の胞子の懸濁液を．ＰＨ
９．Ｏのトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
緩衝液中１〜／ＣＣ＜７）Ｎ−メチル」Ｎ−ニトロ−Ｎ
−ニトログアニジンで，２８度Ｃで６０分処理する。

変異剤処理胞子はつぎに洗い．ベンネツト（Ｂｅｎｎｅ
ｔ）寒天を含むシヤーレに塗沫する。２８度Ｃで１４日
間培養してから、生存コロニーを釣菌し、つぎの方法で
バチルスサテイリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ８ｕｂｔｉｌ
ｉｓ）の発育阻止を調べる。

単一コロニ一を有する寒天デイスク（直径４−８關）を
６あらかじめ２％（容量／容量）のバチルスサテイリ
スを接種してあるＰＨ７．２のペナセイ（Ｐｅｎａｓｓ
ａｙ）寒天を有するベトリ皿に移す。これらの条件でリ
フアマイシンＢは事実上不活性で、正常のリフアマイシ
ンＢ生成コロニーは、下層の寒天中でのバチルスサテ
イリスの発育を阻止しないのに、抗菌活性を有する新し
いリアマイシンを生産するコロニーがあると、寒天デイ
スクの周辺に明瞭な阻止帯を生ずる。

このようにして３個の株を分離し．最初．われわれの整
理番号であるＤ−２．ＭＭ１８−６｝よびＭ−３６を与
えた。これらの微生物の試料をＡＴＣＣに寄託し，又そ
れぞれ昭和５０年８月２２日付で申請受理番号ＮＯｃａ
ｒｄｌａｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅａＡＴＣＣ３ｌＯ６４
．鳥３２０６Ｎ０ｃａｒｄｉａｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅ
ａＡＴＣＣ３１０６５．鳥３２０４Ｎ０ｃａｒｄｉａｍ
ｅｄｉｔｅｒｒａｎｅａＡＴＣＣ３１０６６６▲３２０
５として微生物工業技術研究所で受理され６かつそれぞ
れ微工研菌寄第３２０６号、第３２０４号および第３２
０５号として寄託されている。ＡＴＣＣ▲３１０６４６
３１０６５訃よび３１０６６としてそれぞれ登録されて
いるノカルデイアメデイテラネアの巨視的｝よば微視
的観察の結果を表１に示す。

表２に、同じ株の培養特性を示す。原株であるストレプ
トマイセスメデイテラネイＡＴＣＣｌ３６８５（ＭＥ
／８３）の特徴もあわせ記載する。

表３に，新しいノカルデイア株の生理的特性を親株のそ
れと比較して示す。

次表４には．ＰｒｉｄｈａｍおよびＧＯｔｔｌｌｅｂの
方法（Ｊ．Ｂａｃｔ．５６、１０７．１９４８）による
炭素源利用能を説明する。

発酵発酵操作は、本質的に、同化可能の炭素および窒素源と
不可欠の無機塩とを含有する培地中，ストレプトマィセ
スメデイテラネイの上記変異株のひとつを培養し、実
質的な抗生物質活性を培地に付与するに至らせ、培地よ
りリフアマイシンを抽出することに６本質的に存する。

さらに具体的には、２５から３７度Ｃまでの温度、なる
べくは２８度Ｃで、かくはん、通気、深部培養の条件で
これらの変異株を培養する。炭素源としては、つぎの炭
水化物および炭素誘導体を使用しうる。それらは６グル
コース、ガラクトース，ラクトース、スクロ―ス、マル
ト―ス、グリセロール，マンニトール等である。有用な
窒素源はたとえば，アミノ酸およびそれらの混合物、ペ
プチド、蛋白質およびそれらの水解物たとえばペプトン
、酵母工キズ、大豆粉、コーンステイーブリカ一、フイ
ツシユゾルプル、肉工キズ、穀粒からの水性分画であ
る。発酵は１８０から２２０時間実施しうる。出発時の
ＰＨは普通約６．４から６．６に調整するが，発酵の終
了時には７．０から８．５に上昇する。一般的に、２０
０時間の発酵でもつともよい結果をうる。発酵を終えた
ら、リフアマイシンはつぎの操作で分離しうる。最終Ｐ
Ｈ７．Ｏから８．５の発酵培地を済過する。済液はすみ
やかに酸性とし、なるべ〈は約５よ）低いＰＨとし、抗
生物質がもつとも安定な状態とする。活性は、水と混和
しない溶媒たとえばクロロホルム、ブタノール、酢酸エ
チル．酢酸プロピル，酢酸ブチルまたは酢酸アミルで抽
出する。溶媒と培地との容量比は、溶媒によシ変化する
。一般的には２対１から１０対１までの範囲を使用する
。菌体はなお活性を保有するので、それより水に混和し
ない溶媒で抽出し、これを、大部分のリフアマイシンを
含有する上記有機相と合併する。

別様には、アセトンのような水と混和しうる溶媒を用い
て，菌体ようの活性の抽出を行ないうる。この場合、液
体を淵過し６アセトンを減圧で蒸発させ、水に混和しな
い溶媒でリフアマイシンを抽出し、引続き、上記した操
作を行なう。抗生物質活性の大部分が溶媒に移行してし
まつたら、減圧で蒸留して、なるべくは３０度Ｃより低
い温度で、溶媒を留去する。

精製リフアマイシンの粗抽出物は．シリカ−ゲルカラムでク
ロマトグラフイ一して精製しうる。

クロマトグラフイ一に先立ち，粗抽出物をＰＨ７．Ｏか
ら８，０のリン酸緩衝液に溶解し、温和な酸化剤で処理
するのが便利てある。この緩衝溶液は水と混和しない溶
媒で抽出する。この有機抽出液は，リフアマイシンＲと
称する新しいリフアマイシンを含有する。抽出緩衝溶液
はＰＨ２から４の酸性としふたたび水に混和しない溶媒
で抽出する。この有機抽出液は、リフアマイシンＰ，Ｑ
およびＵと称称する１群のリフアマイシンの３種類の新
化合物を含有する。リフアマイシンＲをさらに精製する
には，適当な吸着材料たとえばシリカ−ゲルのカラムで
クロマトグラフイ一し、有機溶媒の適当な混合物で抽出
する。

リフアマイシンＰ，Ｑ訃よびＵを含有する第２の有機抽
出物は，リフアマイシンＲについて記載と同様に精製す
る。

本発明をよりよく理解できるよう，つぎに実施例を示す
。

例１ノカルデイアメデイテラネアＡＴＣＣ３ｌＯ６４と
称する変異株を、ベンネツト寒天に６日から８日間培養
し２８度Ｃに培養する。

寒天斜面より得られる培養物を．無菌状態で２個の５０
０ＣＣエルレンマイヤーフラスコに接種する。フラスコ
は，つぎの組成の培地１００ＣＣを含有する。▲▲ＺＶ
４′ ― こ ′ ＰＨはＮａＯＨで７．３に調整する。

Ｃ接種したフラスコは往復しんとう機上で２８度Ｃで７
２時間培養する。

２個のエルレンマイヤーフラスコの内容物は，上記培地
４リツトルを含有する１０リツトルの発酵槽中に注入す
ることによつて接種材料として使われる。

３００回転／分でかくはんし１容量／容量／分で通気し
２８度Ｃで培養する。

４８時間培養し、詰まつた状態で７から１０容量％の細
胞をうる。

つぎの段階では、以降発酵培地と称する培地４リツトル
を含有する１０リツトルのガラス発酵槽を使用する。培
地組成はつぎのようである。ＰＨはＮａＯＨで７．８に
調整する。

１２０度Ｃで６０分滅菌する。

滅菌後のＰＨは６．４。発酵槽の内容物の５％に当たる
量の予備発酵槽の内容物を使用し、種とする。７５０回
転／分のかくはんで１容量／容ｖ分で通気し２８度Ｃで
発酵させる。

消泡剤としてシリコンＡを使用する。培養プロスは６発
酵中に特徴的な赤褐色となる。２００時間培養すると、
詰まつた状態とした細胞は一定容量となる。

プロスのＰＨは７．５でこの段階でプロスを採取する。

例２例１のように得られたノカルデイアメデイテラネアＡ
ＴＣＣ３ｌＯ６４の培養物を、例１記載のように，かく
はん下にフラスコ中に用意する。

予備培養のために６１０リツトルのガラス発酵槽中にそ
の培養物を注入する。この発酵槽は、つぎの組成の培地
を４リツトル含有する。とするＰＨを７．５に調整する。

１２０度Ｃで５０分間減菌する。

減菌後のＰＨは６．４である。４８時間培養すると、詰
まつた状態の細胞の容量は６全容量の６から８％となる
。

つぎに示す発酵培地１０リツトルを含有する２０リツト
ルのガラス発酵槽に、培地の１０％量の上記種培養物を
接種する。とするＮａＯＨでＰＨを７．８とする。

１２０度Ｃで５０分滅菌する。

滅菌後のＰＨは６．４である。２８度Ｃで２００時間発
酵させる。

採取時の発酵プロスのＰＨは７．５である。例１および
２の発酵プロスはつぎのように精製する。

菌体を済取してすてる。淵液は１０％（容量／容量）の
塩酸でＰＨを調整する。等容量の酢酸チチルで抽出する
。この有機抽出液は３５度Ｃで減圧濃縮乾こし、残留物
（例１ようは４Ｖそして例２から１１Ｖ）を、ＰＨ７．
５のリン酸ナトリウム０．０５Ｍ緩衝液に溶解する。亜
硝酸ナトリウムを加えて最終濃度０．２％゛（重量／容
量）とする。室温で３０分かきまぜてから、緩衝溶液を
等容量の酢酸エチルで３度抽出する。有機抽出液を合併
し．．３５度Ｃで減圧乾こする。これを第１の酢酸エチ
ル抽出物とする。抽出後の緩衝容液を１０％塩酸でＰＨ
２．Ｏとする。等容量の酢酸エチルで抽出する。有機抽
出物を合併し３５度Ｃで減圧濃縮する。これを第２の酢
酸エチル抽出物とする。第１の酢酸エチル抽出物よりの
乾燥粉末（例１では１．４ｔそして例２では４．２ｙ）
をクロロホルム溶解し、シリカ−ゲルカラム（７０−２
３０メツシユＡＳＴＭ）でクロマトグラフする。２％（
容量／容量）メチルアルコール含有クロロホルムを溶出
に使用する。

リフアマイシンＲがカラムより溶出される最初の主生成
物で、オレンジ一褐色から認めうる。

シリカ−ゲルプレート（Ｍｅｒｃｋ６ＯＦ２５４）を用
いる薄層クロマトグラフイ一で、クロロホルムリメチル
アルコール（９５：５）を溶媒系として、リフアマイシ
ンＲＯＲｆは０．５９である。リフアマイシンＲを含有
する分画を合併し，減圧で３５度Ｃで乾こする。酢酸エ
チルに再溶解し６つぎに０．０１Ｎ塩酸で洗い、そして
最後に水洗する。有機抽出物を濃縮して小容量とし、４
度ＣでリフアマイシンＲを晶出させる。例１より６００
巧そして例２より１．６ｙをうる。第２の酢酸エチル抽
出物は、リフアマイシンＲと同様にして６シリカ−ゲル
でカラムクロマトグラフイ一（精製する。乾燥残留物（
例１よＶ）２．４ｙそして例２より４．２ｆ）をクロロ
ホルムに溶解し、シリカゲルに施す。クロロホルム−メ
チルアルコール（９８：２）の混合物でカラムを溶出す
る。

最初に現われるのはリフアマイシンＵ６つぎにリフアマ
イシンＰ、そして最後にリフアマイシンＱである。これ
らの化合物の３種類はすべて、溶出溶液中で黄色のオレ
ンジ色を呈する。薄層クロマトグラフイ一での易動度で
同定しうる。クロロホルムリメタノール（９５：５）を
溶媒系に用いるシリカゲルプレート（Ｍｅｒｃｋ６ＯＦ
２５４）でＲｆはつぎのようである。リフアマイシン
ＵＲｆ＝０．６３リフアマイシンＰＲｆ＝０．５７リフアマイシンＱＲｆ＝０．３２リフアマイシンＵ，ＰおよびＱを含有するそれぞれの分
画を減圧で乾こし酢酸エチルより結晶化する。

第１の例からは，リフアマイシンＵ８Ｏ７７Ｖ．リフア
マイシンＰ４ＯＯｌ！１ｆ！、リフアマイシンＱ２８Ｏ
ワを得．第２の例からは，リフアマイシンＵｌ９Ｏ７Ｖ
，リフアマイシンＰ９ＯＯ７！１ｆ．そしてリフアマイ
シンＱ７５Ｏ７！９をうる。上記実施例と本質的に同じ
方法を用い、生産株として、ノカルデイアメデイテラ
ネアＡＴＣＣ３ｌＯ６５またはノカルデイアメデイテ
ラネアＡＴＣＣ３ｌＯ６６を用い、上記と同じ程度の収
量でうる。

新しいリフアマイシン類の物理一化学的性状リフアマイ
シンＰ１）元素分析値（％）実測値Ｃ＝６０．６：Ｈ＝６．２：Ｎ＝３．８：０＝
２５．２：Ｓ＝４．１２）紫外部および可視部吸収帯化合物はつぎの値を示す。

吸収曲線は図面１に示す。

スペクトルはＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒＳｐｅｃｔｒａｃ
Ｏｒｄ４ＯＯＯＡを用いて測定したものである。

３）赤外部スベクトルヌジヨール中のもつとも著しい吸収ピークはつぎの波数
（Ｃｍ−１）に現われる。

３７００−３１５０（Ｍ，ｂｒ）：３１００（ｗ）：３
０６０−２８００（Ｖｓ）：１４６５（ｓ）：１３８０
（ｂ）ヌジヨール：１７２２（ｍ）：１６４５（Ｍ，ｂ
ｒ）：１５８０（ｍ）：１５１０（ｍ）：１３２５（ｍ
）：１２５０（Ｓ，ｂｒ）：１１６０（ｍ）：１１３０
（ｗ）：１０７０（Ｍ，ｂｒ）：１０３０（ｗ）：９８
２（ｍ）：９６０（ｍ）；９２５（ｗ）：８９０（ｍ）
：８１８（ｗ）：JモV０（ｗ）：７３５（ｗ）。

赤外部スベクトルは図面２に示す。スペクトルはＰｅｒ
ｋｉｎＥｌｍｅｒＭＯｄ．４２ｌで記録したものである
。４）マススペクトルＭ７Ｏｅで得たマススペクトルは、一値７３８ｅに分子イ
オンピークＭ士を示す。

スペクトルはＨｉｔａｃｈｉＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒＲ
ＭＵ−６Ｌで測定したものである。５）核磁気共鳴吸収ＣＤＣｌ３中１００ＭＨｚでのＮ．Ｍ．Ｒ．スペクトル
を図面３に示す。

この化合物は、キノン構造のクロモフオア結合を有する
リフアマイシンの特徴的なポーラログラフ上の挙動を示
さない。

リフアマイシンＱ１）元素分析値実測値Ｃ＝６０．７：Ｈ＝６．３：Ｎ＝３．６０：０
＝２５．３；Ｓ＝４．２２）紫外部および可視部吸収帯メタノール中でつぎの値を示す。

３）赤外部スベクトルヌジヨール中でのもつとも著しい吸収は次の波数（Ｃｍ
−１）に生ずる。

３７００−３３００（Ｓ，ｂｒ）：３３００一３０８０
（Ｍ，ｂｒ）３０４０−２７８０（Ｖｓ）：１４６０（
ｓ）：１３７８（ｓ）ヌジヨール：１７４０（ｍ）：１
７００（ｍ）：１６５０（Ｓ，ｂｒ）：１６０５（Ｓ，
ｂｒ）：１５５５（ｓ）：１５１０（Ｍ，ｂｒ）：１３
１５（ｗ）：１２７５（ｍ）：１２４０（ｍ）：１２２
０（ｍ）：１１６０（ｍ）：１０９０（ｍ）：１０５０
（Ｍ，ｂｒ）：１０２０（ｗ）：９７０（ｍ）：９４５
（ｗ）：９１０（ｍ）：８０８（ｍ）：７６５（ｗ）：
７２０（ｗ）。

赤外部吸収スペクトルを図面４に示す。

４）核磁気共鳴スペクトルＣＤＣｌ３中６０ＭＨｚでのＮ．Ｍ．Ｒ．スペクトルを
図面７に示す。

リフア÷イシンＲ１）元素分析値実測値Ｃ＝６２．０：Ｈ＝６．４：０＝２９．６２）
紫外部および可視部吸収帯メタノール中０．１規定塩酸
中でつぎの値を示す。

３）赤外部スベクトルヌジヨール中でのもつとも著しい吸収ピークをつぎの波
数（Ｃｍ−１）に示す。

３７００−３１００（Ｓ，ｂｒ）：３０４０−２７８０
（Ｖｓ）：１４６５（ｓ）；１３８０（ｓ）ヌジヨール
：１７４５（ｓ）：１７１０（ｍ）；１６４０（ｓ）：
１６００（ｓ）：１５０５（ｓ）：１４１５（ｍ）：１
３２５（ｓ）；１２６０（Ｓ，ｂｒ）：１２２０−１１
３０（Ｓ，ｂｒ）；１１２０（ｗ）：１０７５（ｓ）：
１０２０（ｗ）：９７５（ｓ）：９５０（ｗ）：９２０
（ｗ）；８８８（ｍ）；８２３（ｍ）：７８５（Ｗ，ｂ
ｒ）：７３５（Ｗ，ｂｒ）：６５０（Ｗ，ｂｒ）。

赤外部スペクトルは図面５に示す。

４）マススペクトル７０ｅでのマススペクトルの分子イオンピーク４はｔ値
７１１である。

Ｅ５）核磁気共鳴スペクトルＣＤＣｌ３中６０ＭＨｚでのＮ．Ｍ．Ｒ．スペクトルを
図面６に示す。

この化合物は，キノン構造のクロモフオア結合を有する
リフアマイシンに特徴的なポーラログラフイ一の挙動を
示す。

以上のデータは、リフアマイシンＲについてつぎの構造
を支持する。

リフアマイシンＵ１）紫外部および可視部吸収帯この化合物はメタノール中でつぎの値を示す。

２）赤外部スベクトルヌジヨール中もつとも著しい吸収ピークはつぎの波数（
Ｃｍ−１）に現われる。

３７００−３１００（Ｍ，ｂｒ）：３０６０（Ｖｗ，）
；３０４０−２７４０（Ｖｓ），２７２０（Ｖｗ），１
４６０（ｓ），１３７８（ｍ）ヌジヨール：１７５０−
１７０５（Ｍ，ｂｒ）：１６８０−（１６２０（Ｍ，ｂ
ｒ）：１６００（ｓ）；１５５８（ｓ）；１４９０（Ｗ
，肩）：１３０８（ｗ）：１２７０（Ｗ，肩）；１２４
５（Ｍ，肩）：１２２５（ｍ）：１１６０（ｍ）；１１
２０（ｗ）：１０９０（Ｖｗ）；１０７０（ｗ）：１０
３０（Ｖｗ）：１０２０（Ｖｗ）：１０００（Ｖｗ）：
９７５（ｗ）：９６０（Ｗ，肩）：９０５（ｍ）：８５
０（ｍ）：８０２（ｗ）：８００（Ｖｗ，肩）：Jカモ
V（Ｖｗ）：７６０（Ｖｗ）：７２０（Ｖｗ）：６８５
（Ｖｗ）：６７０（Ｖｗ）。

化合物の生物活性リフアマイシンＰ，Ｑおよびｗのインヒトロー活性を次
表に示す。

本発明の新しい化合物は、ＳｔａｐｈｙｌＯｃＯｃｃｕ
ｓａｕｒｅｕｓ，ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃＯｌｉを注
射した実験動物にもまた活性がある。

次表は、既知の天然のリフアマイシンつまＤリフアマイ
シンＳＶに比較した、マウスでの代表的実験の結果を示
す。これまでに分離されたうちでもつとも活性のある天
然リフアマイシンであるリフアマイシンＰはまた、マウ
ス中のＬＤ５Ｏ値が腹腔５００ワ／Ｋｇで低毒性である
。

【図面の簡単な説明】

図面１は，リフアマイシンＰの紫外部および可視部スペ
クトルを示す。

Claims

【特許請求の範囲】１ノカルデイアメデイテラネア（Ｎｏｃａｒｄｉａ
ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅａ）ＡＴＣＣ３１０６４（Ｄ−
２）、ノカルデイアメデイテラネア（Ｎｏｃａｒｄｉａ
ｍｅｄｉ−ｔｅｒｒａｎｅａ）ＡＴＣＣ３１０６５（
ＭＭ１８−６）およびノカルデイアメデイテラネア（Ｎ
ｏｃａｒｄｉａｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅａ）ＡＴＣＣ
３１０６６（Ｍ−３６）およびそれらと均等の菌株より
選択したノカルデイアメデイテラネア（Ｎｏｃａｒｄｉ
ａｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅａ）の変異株を同化可能の
炭素源、窒素源および不可欠の無機塩の存在下に、好気
的条件で発酵させて、発酵培地が実質的抗生物質活性を
有するに至らせ、発酵培地より新しいリフアマイシン類
を採取し、それらを個個の生成物に分離することからな
る、リフアマイシン（ｒｉｆａｍｉｃｉｎ）Ｐ〔元素分
析（実測値％）：Ｃ＝６０．６、Ｈ＝６．２、Ｎ＝３．
８、Ｏ＝２５．２．Ｓ＝４．１；Ｒｆ＝０．５７；紫外
部および可視部吸収：メタノール中：λ＿ｍ＿ａ＿ｘ（
ｍμ）（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ）：４０６（１９７）
、３５０（肩）、２９７（３４４）、２５７（４２３）
、２２４（５５０）：０．１ＮＨＣｌ中：λ＿ｍ＿ａ＿
ｘ（ｍμ）（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ）４１６（１８３
）、３００（３１９）、２２５（５２１）；赤外吸収ス
ペクトル（ヌジヨール中、振動数ｃｍ＾−＾１）：３７
００〜３１５０（ｍ、ｂｒ）、３１００（ｗ）、３０６
０〜２８００（ｖｓ）、１４６５（ｓ）、１３８０（ｂ
）ヌジヨール、１７２２（ｍ）、１６４５（ｍ、ｂｒ）
、１５８０（ｍ）、１５１０（ｍ）、１３２５（ｍ）、
１２５０（ｓ、ｂｒ）、１１６０（ｍ）、１１３０（ｗ
）、１０７０（ｍ、ｂｒ）、１０３０（ｗ）、９８２（
ｍ）、９６０（ｍ）、９２５（ｗ）、８９０（ｍ）、８
１８（ｗ）、７７０（ｗ）、７３５（ｗ）；質量スペク
トル（７０ｅＶ）：ｍ／ｅ＝７３８：＾１Ｈ−ＮＭＲ（
ＣＤＣｌ＿３中）：第３図；キノン構造のクロモフオア
部分を有すりリフアマイシンの特徴的なポーラログラフ
挙動を示さず〕：リフアマイシンＱ〔元素分析（実測値
％）：Ｃ＝６０．７、Ｈ＝６．３、Ｎ＝３．６０、Ｏ＝
２５．３、Ｓ＝４．２；Ｒｆ＝０．３２；紫外部および
可視部吸収：メタノール中：λ＿ｍ＿ａ＿ｘ（ｍμ）（
Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ）：４０６（１７８）、３５０
（肩）、２９７（３０５）、２５７（４０５）、２２４
（５１８）；赤外吸収スペクトル（ヌジヨール中、ｃｍ
＾−＾１）：３７００〜３３００（ｓ、ｂｒ）、３３０
０〜３０８０（ｍ、ｂｒ）、３０４０〜２７８０（ｖｓ
）、１４６０（ｓ）、１３７８（ｓ）ヌジヨール、１７
４０（ｍ）、１７００（ｍ）、１６５０（ｓ、ｂｒ）、
１６０５（ｓ、ｂｒ）、１５５５（ｓ）、１５１０（ｍ
、ｂｒ）、１３１５（ｗ）、１２７５（ｍ）、１２４０
（ｍ）、１２２０（ｍ）、１１６０（ｍ）、１０９０（
ｍ）、１０６０（ｍ、ｂｒ）、１０２０（ｗ）、９７０
（ｍ）、９４５（ｗ）、９１０（ｍ）、８０８（ｍ）、
７６５（ｗ）、７２０（ｗ）；＾１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ
ｌ＿３中）；第７図〕；リフアマイシンＲ〔元素分析（
実測値％）：Ｃ＝６２．０、Ｈ＝６．４、Ｎ＝２．２、
Ｏ＝２９．６；Ｒ＿ｆ＝０．５９；紫外部および可視部
吸収：メタノール中：λ＿ｍ＿ａ＿ｘ（ｍμ）（Ｅ＾１
＾％＿１＿ｃ＿ｍ）：２１９（４４４）、２８１（４１
５）、３４０（１１４）、４１０（７２）；赤外吸収ス
ペクトル（ヌジヨール中、ｃｍ＾−＾１）：３７００〜
３１００（ｓ、ｂｒ）、３０４０〜２７８０（ｖｓ）、
１４６５（ｓ）、１３８０（ｓ）ヌジヨール、１７４５
（ｓ）、１７１０（ｍ）、１６４０（ｓ）、１６００（
ｓ）、１５０５（ｓ）１４１５（ｍ）、１３２５（ｓ）
、１２６０（ｓ、ｂｒ）、１２２０〜１１３０（ｓ、ｂ
ｒ）、１１２０（ｗ）、１０７５（ｓ）、１０２０（ｗ
）、９７５（ｓ）、９５０（ｗ）、９２０（ｗ）、８８
８（ｍ）、８２３（ｍ）、７８５（ｗ、ｂｒ）、７３５
（ｗ、ｂｒ）、６５０（ｗ、ｂｒ）；質量スペクトル（
７０ｅＶ）：ｍ／ｅ＝７１１；＾１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ
ｌ＿３中）：第６図；キノン構造のクロモフアアー部分
を有するリフアマイシンの特徴的ポーラログラフ挙動を
示す；構造式▲数式、化学式、表等があります▼ リフアマイシンＵ〔Ｒ＿ｆ＝０．６３；紫外部および可
視部吸収：メタノール中：λ＿ｍ＿ａ＿ｘ（ｍμ）（Ｅ
＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ）：４１２（１６３）、３５３（
肩）、２９９（２６５）、２５８（３８９）、２２０（
４５１）；赤外吸収スペクトル（ヌジヨール中、ｃｍ＾
−＾１）：３７００〜３１００（ｍ、ｂｒ）、３０６０
（ｖｗ）、３０４０〜２７４０（ｖｓ）、２７２０（ｖ
ｗ）、１４６０（ｓ）、１３７８（ｍ）ヌジヨール、１
７５０〜１７０５（ｍ、ｂｒ）、１６８０〜１６２０（
ｍ、ｂｒ）、１６００（ｓ）、１５５８（ｓ）、１４９
０（ｗ、肩）、１３０８（ｗ）、１２７０（ｗ、肩）、
１２４５（ｍ、肩）、１２２５（ｍ）、１１６０（ｍ）
、１１２０（ｗ）、１０９０（ｖｗ）、１０７０（ｗ）
、１０３０（ｖｗ）、１０２０（ｖｗ）、１０００（ｖ
ｗ）、９７５（ｗ）、９６０（ｗ、肩）、９０５（ｍ）
、８５０（ｍ）、８０２（ｗ）、８００（ｖｗ、肩）、
７７７（ｖｗ）、７６０（ｖｗ）、７２０（ｖｗ）、６
８５（ｖｗ）、６７０（ｖｗ）〕として同定される新し
いリフアマイシン類の製造方法。