JPS58116496A - アミドｎ置換ブレオマイシン類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は下記一般式［Ｉ］ ［式中ＢＭはプレオマイシン骨格の残基、Ｘは（１）炭
素数１〜１８のアルキル、（２）炭素数１〜１２のアミ
ノアルキル、（３）置換基として１〜３個のハロゲン原
子、１〜２個のフェニル、インドリル、酸素原子、硫黄
原子または窒素原子を含む５〜６員環の複素環基を有す
る低級アルキル（置換４ ルキシまたはベンジル、Ｘ３は低級アルキル、フェニル
低級アルキル、フェニルまたはハロゲンフェニルで置換
されていてもよいモノまたはジ低級アルキルアミノ低級
アルキル、Ｘ４は低級アルキルまたはフェニル低級アル
キルを示す。）（５）ナフチル　（６）チアゾリル（７
）Ｎ−フェニル低級アルキルピペラジニル、Ｒはプレオ
マイシン類の末端アミノ残基を示す］で表わされるアミ
ドＮ置換プレオマイシン類およびその塩およびその中間
体に関するものである。

プレオマイシンは１９６６年本発明者の一人である悔涙
らにより発見された制癌性抗生物質で（悔涙らジャーナ
ル・オブ・アンチビオチフス、１９Ａ、２００頁、１９
６６年）放線菌ストレプトミセス・バーチシラスにより
生産されるｌ原子の２価の銅を容易にキレートする塩基
性水溶性糖ペプチドで、通常の培養法では１６種が生産
され、単離されている。（例えば、悔涙ら：ジャーナル
・オブ・アンチビオチフス１９Ａ、２１０頁、１９６６
年）。これらプレオマイシンのうち、Ａ１．Ａ２、Ａ５
、Ｂ２、デメチルＡ２等は、その混合物の脱銅体（以下
［ブレオマイシンΦコンプレックス」という。）が現在
すでに癌治療の臨床面で広く使用されており、とくに偏
平上皮癌を中心に、皮膚癌、頭頚部癌、肺癌、悪性リン
パ腫などで優れた成績をあげている。

また、米国特許第３８２２２８２号及び米国特許第Ｒｅ
３０４５１号には種々のプレオマイシン類が開示されて
いる。

これらのプレオマイシン類は通常発酵法において、含銅
体の形で得られるが、それを脱銅することにより脱銅体
とされる。本発明においては特に断わらない限り、プレ
オマイシンという語は含銅体及び脱銅体の両者を含むも
のとする。

そしてこれらのプレオマイシン類は下記一般式［］ 冒響１−９１−・「―骨学争１争りθす１ψψ争−會−
ｅ−一争嗜ｅ争噛・中番・訃目働骨１−瞭争番・（式中
Ｒはプレオマイシン類の末端アミン残基）で表わされる
（但し含銅体の場合のキレート銅は省略）。

しかしながらこれらのプレオマイシン類はプレオマイシ
ン不活化酵素（以下「不活化酵素」という：悔涙ら：ジ
ャーナル・オブ・アンチビオチク１２７巻、４１９頁、
１９７４年）の作用により、不活化されることがわかっ
た。プレオマイシンが強く作用する皮膚や肺ではプレオ
マイシンは比較的不活化されず、プレオマイシンが作用
しないといわれる胃などでは、不活化され易いことがわ
かった。また、２０メチルコラントレンで発生するネズ
ミの偏平上皮癌ではこの不活化力が低く、同じ原因で発
生する肉腫には高いことがわかった。（悔涙ら：ジャー
ナル・オブ・アンチビオチク７２５巻４０９頁、１９７
２年：悔涙ら：ジャーナル・オブ・アンチビオチク１２
７巻、４１９頁、１８７４年）。さらにまた、ヒトの頭
頚部にできる偏平上皮癌にも、プレオマイシンを不活化
する作用が認められ、中でもプレオマイシンが比較的効
かないといわれる低分化型の偏平上皮癌に、この不活化
が見えあることがわかった（ミュラーら：カンナ−４０
巻２７８７頁、１９７７年）。

これらの知見かられかるように、不活化酵素の活性が強
い癌にはプレオマイシンは十分な効果を発揮できない。

現在プレオマイシンに一層の改良が期待される理由の一
つはこの点にある。

そこで発明者らは、もし不活化されにくいプレオマイシ
ン誘導体が見つかれば、たとえば頭頚部癌、食道癌、肺
癌その他の領域における偏平上皮癌の治療をより効果的
に行なえ、また従来のプレオマイシンが効かない腺癌、
たとえば胃癌等の治療も行なえる可能性が生じると考え
た。

このような観点から種々検討した結果、本発明者らはプ
レオマイシン類における部分構造２．３−ジＮ）１２ テ アミノプロピオン酸アミド（−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ−Ｃ
ＯＮＨ２）のアミド部分のＮ原子に置換基（〜Ｘ）を導
入することにより、比較的不活化されにくくなることを
発見し、本発明を完成した。

なお本発明の一般式におけるｒＢＭＪで表わされるプレ
オマイシン骨格の残基は前記プレオマイシン類の一般式
において・・・・・・線で囲われている部分を意味し、
含銅体及び脱銅体のいずれおも含むものとする。また低
級アルキルはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロ
ピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｎ−ペンチル、３−メ
チル−ブチル、ｎ−ヘプチル、３−メチルペンチル、ｎ
−ヘキシル等の炭素数１〜６のアルキルを示す。

次に一般式［Ｉ］におけるＸの具体例をあげれば下記の
通りである。

（１）　炭素数１〜１８のアルキル：メチル、エチル、
ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル
、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−メチル−ブチ
ル、ネオペンチル、ｎ−ヘプチル、３−メチルペンチル
、ｎ−ヘキシル、ｌ、５−ジメチルヘキシル、イソヘキ
シル、ｎ−オクチル、ｎ−デシル、ラウリル、ミリスチ
ル、セチル、ステアリル等 （２）炭素数２〜１２のアミノアルキル：２−アミノエ
チル、３−７ミノプロビル、４−７ミノブチル。

６−７ミノヘキシル、１２−アミノドデシル、４−アミ
ノ−４−メチル−１−ジメチルペンチル等（３）置換基
として１〜３個のハロゲン原子、１〜２個のフェニル、
インドリル、斂素原子、硫黄原子または窒素原子を含む
５〜６員環の複素環基を有する低級アルキル（置換基中
のフェニルまたはインドリルは、更にハロゲン、低級ア
ルコキシで置換されてもよい、　）　　：　２，２．２
−トリフルオロエチル、２，２．２−トリクロロエチル
、２，２−ジフルオロエチル、２．２−ジクロロエチル
、ベンジル、ジフェニルメチル、２−フェニルエチル、
２，２−ジフェニルエチル、ｌ−フェニルエチル、１．
２−ジフェニルエチル、３−フェニルプロピル、２−フ
ェニルイソプロピル、１．３−ジフェニルプロピル、３
．３−ジフェニルプロピル、４−フェニルブチル、４．
４−ジフェニルブチル、クロロベンジル、ジクロロベン
ジル、ブロモベンジル、メトキシベンジル、ジメトキシ
ベンジル、エトキシベンジル、メチレンジオキシベンジ
ル、プロポキシベンジル、ｐ−クロロフェニルエチル、
ｐ−メトキシフェニルエチル、ｐ−ベンジルオキシベン
ジル、フリルメチル、２−フリルエチル、２−チアツ゛
１ノルメチル、２−ピラゾリルメチル、２−イミダゾ１
ノルメチル、４−イミダゾリルメチル、２−チェニルメ
チル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、４−
ピリデルメチル、インドリルメチル、インドｌ）ルエチ
ル、４−メトキシインドリルメチル、２−ピペラジルエ
チル、２−ピリミヂルエチル、４−ビ１ノミデルメチル
、４−ピリミヂルエチル、２−ピペリジルメチル、３−
ピペリジルメチル、４ピベ１ノジルメチル、２−（２−
ピペリジル）エチル。

２−（３−ピペリジル）エチル、２−（４ピペリジル）
エチル、１−（２−ピペリジル）エチル。

１−（３−ピペリジル）エチル、１−（４ピペリジル）
エチル、２−（ピペリジノ）エチル、２ピペラジルメチ
ル、２−（２−ピペラジルエチル）、２−（ピペリジノ
）エチル、３−ピペリジノプロビル、２−（モルフォリ
ノ）エチル、３−（モルフォリノ）フロビル、２−モル
フ第１ノニルメチル、３−モルフオリニルメチル、２−
（モルフオリニル）エチル、、３−（モルフオリニル）
フロビル、等。

４ ジメチルアミノエチル、ジエチルアミノエチル。

ジプロピルアミノエチル、プロピルアミノエチル、ジメ
チルアミノプロピル、ジエチルアミノプロビル、ジプロ
ピルアミノプロビル、プロピルアミノプロピル、ジブチ
ルアミノプロビル、ブチルアミノプロピル、ベンジルア
ミノプロビル、２−フェニルエチルアミノプロピル、１
−フェニルエチルアミノプロピル、３−フェニルプロピ
ルアミノプロビル、４−フェニルブチルアミノプロピル
、メチルアミノエチルアミノプロビル、エチルアミノプ
ロピルアミノプロビル、プロピルアミノプロピルアミノ
プロビル、ブチルアミノプロピルアミノプロビル、Ｎ−
（ブチルアミノプロピル）−Ｎ−メチルアミノプロピル
、ジブチルアミノプロビルアミノプロビル、ペンチルア
ミノプロビルアミノプロピル、エチルアミノブチルアミ
ノプロビル、プロピルアミノブチルアミノプロビル、エ
チルアミノプロピルアミノブチル、ブチルアミノプロピ
ルアミノブチル、ベンジルアミノエチルアミンエチル、
ベンジルアミノエチルアミノプロピル、ベンジルアミノ
プロピルアミノプロビル、ベンジルアミノプロピルアミ
ノプロビル、ベンジルアミノブチルアミノプロピル、フ
ェニルエチルアミノプロピルアミノプロビル、Ｎ−（フ
ェニルエチルアミノプロピル）−Ｎ−メチルアミノプロ
ピル、Ｎ−クロロベンジルアミノプロビル）−Ｎ−メチ
ルプロピル、Ｎ−（ブロモベンジルアミノプロビル）−
Ｎ−メチルプロピル、Ｎ−（クロロフェニルエチルアミ
ノプロピル）　−Ｎ−メチルプロピル、ジベンジルアミ
ノプロビル−Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノプロピル、ジベン
ジルアミノプロビル−Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノプロピル
、ジベンジルアミノプロビル−Ｎ−メチル−Ｎ−ベンジ
ルアミノプロビル、等。

（５）ナフチルとしてはα−ナフチル、β−ナフチル等
。

（８）チアゾリルとしては２−チアゾリル、３−チアゾ
リル、４−チアゾリル等。

（７）トフェニル低級アルキルピペリジル、としてはＮ
−ベンジル−４−ピペリジル、Ｎ−フェニルエチル４−
ピペリジル、Ｎ−ベンジル−３−ピペリジル、Ｎ−ベン
ジル−２−ピペリジル、等が挙げられる。

一般式［Ｉ］におけるＲで示されるプレオマイシン類の
末端アミノ残基は、置換又は非置換脂肪族アミノ基なら
特に限定はないが１通常塩基性を有する脂肪族第一級ア
ミン基であり、下記一般式［］ ％式％［１１１］ （式中Ｒ１はアルキレンまたは式−Ｒ１２−Ｙｌ−Ｒ１
３−または−Ｒ１２−Ｙｌ−Ｒ１３−Ｙ２−Ｒ１４−で
示される基［但し式中Ｒ１２，Ｒ１３，Ｒ１４はアルキ
レンでありＹｌ、また中Ｒ３，Ｒ４は水素原子または置
換基を有してもェニレン］、Ｒ２は塩基性基であれば特
に限定はないが、例えば、式 で示される基であり、式中Ｒ４は前記と同じ、Ｒ５゜Ｒ
６およびＲ９は置換基を有してもよい低級アルキル、　
Ｒ７およびＲ８は水素または炭素数１〜１０のアルキル
である。）で示されるアミン基を挙げることができる。

このアミノ基におけるアルキレンとしては炭素数１〜８
のアルキレン、例えば−ＣＨ２−。

−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）１３−、−（ＣＨ２）
８−等が挙げられ通常は炭素数２〜４のアルキレンの場
合が多い、上記のアルキル上の置換基としては水酸基、
アルコキシ、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、
ブトキシ等、フェニル（ハロゲン、シアンまたは低級ア
ルキル基で置換されていてもよい）または０５〜０１１
のシクロアルキル等が挙げられる。これらのアミン基の
具体例をあげれば下記の通りである。

２−アミノエチルアミノ、３−アミノプロピルアミノ、
２−ジメチルアミノエチルアミノ、２−ジエチルアミノ
エチルアミノ、３−ジメチルアミノプロピルアミノ、３
−ジエチルアミノプロピルアミノ、３−（３−ブチルア
ミノプロピルアミノ）プロピルアエチルアミノ）プロピ
ルアミン、２−アミノプロピルアミノ、３−メチルアミ
ノプロピルアミノ、３−プチルアミノプロピルアミノ、
３−（６−７ミノへキシルアミノ）プロピルアミン、３
−トリメチルアミノプロピルアミノ、３−（３−ジメチ
ルアミノプロピルアミノ）プロピルアミノ、３−（３−
アミノプロビルアミノ）プロピルアミン、３−（Ｎ−メ
チル−Ｎ−（３−７ミノブロピル）アミノ）プロピルア
ミン、３−ピロリジニルプロピルアミノ、３−ピペリジ
ニルプロピルアミノ、３−モルフォリノプロピルアミノ
、３−ピペラジニルプロピルアミノ、　３−　（４−（
３−７ミノプロビルビペラジニル）プロピルアミン、３
−（３−ピロリジニルプロピルアミノ）プロピルアミン
、３−（３−ピペリジニルプロピルアミノ）プロピルア
ミノ、３−（３−モルフオリニルプロピルアミノ）プロ
ピルアミノ、３−（３−オキシプロピルアミノ）プロピ
ルアミン、３−（３−メトキシプロピルアミノ）プロピ
ルアミノ、３−ベンジルアミノプロピルアミノ、ｍ−ア
ミノメチルベンジルアミノ、ｐ−アミノメチルベンジル
アミノ、２−シクロペこツアミノエチルアミノ、３−シ
クロヘキシルアミノプロビルアミン、４−シクロヘキシ
ルアミノブチルアミノ、シクロヘプチルアミノプロピル
アミノ、３−シクロオクチルアミノプロピルアミン、３
−（Ｎ−メチル−３−Ｎ−（シクロオクチルメチルアミ
ノプロピル）アミン）プロピルアミノ、３−シクロデカ
ニルアミノプロピルアミノ、３−（Ｎ−メチルＮ−（３
−（２−ｐ−クロロフェこルエチルアミノ）フロビル）
）アミノプロピルアミノ、３−（トメチルＮ−（３−（
ｍ、ｐ−ジベンジルオキシベンジルアミノ）プロピルプ
ロピル）アミノプロピルアミノ、３−（Ｎ−メチルＮ−
（３−（ｐ−シアノベンジルアミノ）プロピル）アミン
）プロピルアミノ、３−（Ｎ−メチルＮ−（３−（シク
ロウンデカニルメチルアミノ）プロピル））アミノプロ
ピルアミノ、３−（Ｎ−メチルＮ−（ビス（ｍ、ｐ−ジ
ベンジルオキシベンジルアミノ）プロピル）アミノ）プ
ロピルアミノ、３−　（Ｎ、Ｎ−ジメチルＮ−（３−（
ジベンジルアミノ）プロピル））アミノプロピルアミノ
、３−　（Ｎ。

Ｎ−ジエチルト（３−（ジベンジルアミノプロビル））
アミノプロピルアミノ、３−　（Ｎ、Ｎ−ジメチルＮ−
（３−（Ｎ、Ｎ−ジメチルＮ−（３−ジベンジルアミノ
プロビル）アミノ）プロピル））アミノプロピルアミノ
、　３−　（Ｎ、Ｎ−ジメチルジ（３−（Ｎ、Ｎ−ジメ
チルＮ−（３−シクロオクチルメチルアミノプロピル）
アミン）フロビル））アミノプロピルアミノ、３−（４
−（３−ジベンジルアミノプロピルアミノ）ピペリジル
）プロピルアミノ、３−　（４−（３−（シクロオクチ
ルメチルアミノプロピル）ピペリジル）プロピルアミン
等。

好ましい化合物としては、Ｒが３−（（Ｓ）−１°−フ
ェニルエチル）アミノプロピルアミノ、３”−（ｎ−ブ
チルアミノプロピル）−アミノプロピルアミノまたは下
記一般式［Ｉ　Ｖ］で表わせるアミン残基 −ＮＨ−（ＣＨ２）３−Ａ−（ＣＨ２）３−Ｂ　　［Ｉ
　Ｖ　］１１ （式中ＲＩＯ，ＲＩＯ’、Ｒ１１、Ｒ１１’は低級アル
キル、ヘンシル、ハロゲン置換ベンジルを示し、同シか
異なってもよい。） ルキシ、２、フェニル核上に置換基として、ハロゲン、
低級アルキル、低級アルコキシ、シアノ、トリフルオロ
メチル、ベンジルオキシ、ジ低級アルキルアミノ、フェ
ニル　から選ばれる１種または２種以上の置換基を有す
るフェニル低級アルキル、３、シクロヘキシル、４、ト
リフェニルメチル、５、ナフチルメチル、６、フリルメ
チル、７、チオフェンメチル、８．０５〜Ｃ１ｌのシク
ロアルキルで置換された低級アルキル、９、ノルボルネ
ン−２−メチル、Ｒ１３は１、水素、２ベンジル、フェ
ニル核上にハロゲン又はベンジルオキシを置換基にもつ
ベンジル］を有する化合物を挙げることができ、これら
は比較的肺毒性が少ない点で好ましい、上記において低
級アルキルとしては、メチル、エチル、ブチル、フェニ
ル低級アルキルとしては、ベンジル、２−フェニルエチ
ル、ｌ−フェニルエチル１．３−２エニルプロビル、２
．２−ジフェニルエチル、ジベンジルメチル、フェニル
核上に置換基を有するフェニル低級アルキルとしては、
２−Ｐ−クロロフェニルエチル、Ｐ−クロロベンジル、
０−クロロベンジル、ｍ−クロロベンジル、１−（ｐ−
クロロフェニル）エチル、ｏ、ｐ−ジクロロベンジル、
ｍ　＋　Ｐ−ジクロロベンジル、　　ｐ−ブロモベンジ
ル、ｐ−フロロベンジル、ペンタフロロベンジル、ｍ−
トリフロロメチルベンジル、ｐ−メチルベンジル、ｐ−
ジエチルアミノベンジル、ｐ−メトキシベンジル、ｏ、
ｐ−ジメトキシベンジル、ｍ　＋　Ｐ−ジベンジルオキ
シベンジル、ｐ−シアノベンジル、ｐ−フェニ、ルベン
ジル、Ｃ５〜Ｃ１ｌのシクロアルキルで置換された低級
アルキルとしては、シクロペンチルメチル、シクロヘキ
シルメチル、シクロヘプチルメチル、シクロオクチルメ
チル、シクロウンデカニルメチル、２−シクロヘキシル
エチル、等があげられる。

ＲＩＯが低級アルキル、Ｒ１１があるときは、低級アル
キル、ベンジル、　　Ｒ１２がクロロ置換メチルまたは
エチル、シアノ置換ベンジル、０５〜ＣＩｌのシクロア
ルキルで置換された低級アルキル、Ｒ１３が水素、ベン
ジル、クロロ置換ベンジルである場合の化合物は特に詰
責性が少くなく好ましい。

本発明化合物としては例えば第１表に示す化合物があげ
られる。なお化合物名においてｒＢＬＭ」は「プレオマ
イシン」の語を示し、一般式１で示される化合物は、Ｒ
（アミノ残基）の名称−アミド−Ｎ−［Ｘの名称］−Ｂ
ＬＭと呼ぶことにする。

（以下余白） 唆 嘩 ＃ くロー　ＯＪＣ’）　　寸　り　　ロ　ト０−１ｃＩＪ
Ｃ’）ＩＬｎＣＯ Ｏ：ｌ　　　　ａｌｌ−１−ｍ−−ｗ　　　　−ト　　
　Ｑ）０１０−ＩＮ　　　　　　（’ｉｎ＋ｌ　　　　
＋ｌ　　　　ｍ　　　　ｃＩＪ　　　　Ｎ　　　　Ｃ’
Ｊ　　　　　　ＯＪ　　　　ＮＬｌ’）　　　　（Ｏト
０）　　　　　　Ｏ’ｌ　　　　０−Ｃ−Ｊ（！Ｊ　　
　　Ｃ’Ｊ　　　　ＣＩＪ　　　　ｅｔＪ　　　　　　
Ｃ％ｌ　　　　曽ＣＩ）　　　　ｅ’）ｃｌｌ）　　　
　凶　　　　　　の　　　　　　の　　　　　　の　　
　　　　のａｌ　　　　　ｏ　　　　　　−〜　　　　
　ＶＦｌ　　　　　　呻　　　　　呻　　　　　寸　　
　　　呻呻→　寸！マ ■　　　　　　　Ｏｍ　　　　　　〜　　　　　０寸　
　　　　　　　　ＬＯり　　　　　　り　　　　　　り
Ｃｏ　　　　　　ロ　　　　　ω　　　　　ロ上記一般
式［Ｉ］でしめされる本発明化合物は次のように製造す
ることができる。

（１） 一般式［Ｖ］ ［式中ＢＭ、Ｒは前記と同じ。］ で表わせるデアミドプレオマイシン（含銅体）を、一般
式［ＶＩ］ ＮＨ２−Ｘ　　　［ＶＩ］ （犬四Ｘは前記と同じ）で示されるアミンと縮合し、必
要なら脱銅することにより合成できる。縮合は酸アミド
結合を形成するための公知の方法、たとえば特公昭５４
−６３０８９号記載の方法等を用いることができる。

反応は溶媒として水、ジメチルフォルムアミド、アセト
ニトリル、それらの混合液が用いられる。温度は−ｌＯ
〜３０度１反応時間は１時間〜７０時間、がよい。

以上のようにして得られた誘導体を単離するには、アセ
トンまたはエーテル等の有機溶媒を反応液に加え目的物
を沈澱させ、次いで蒸留水に溶解しｐＨを６に合わせ、
脱塩するため吸着樹脂たとえばアンバーライト＠ＸＡＤ
−２（ローム・アンド・ハース社製）を蒸留水を用いて
充填したカラムに注入して、目的物を吸着する。蒸留水
で塩類をあらい流した後、酸性の含水メタノール、たと
えば１１５０規定塩酸水溶液−メタノール（ｌ：４ｖ／
ｖ）で溶出し、波長２９０ミリミクロン付近に吸収極大
を示す分画をあっめる。陰イオン交換樹脂、ダウエック
ス＠４４（ＯＨ型：ザ命ダウ・ケミカル社製）で中和し
たのち減圧下で濃縮して凍結乾燥すると、誘導体の粗粉
末かえられる。

上記脱塩操作は省略できる場合もあり、そのときは上記
沈澱を蒸留水に溶解しっぎの操作にうつることもできる
。

上記の粉末を蒸留水に溶解し、あらかじめｐＨ４，５、
１／２０モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化した
ＣＭセファデックス＠Ｃ−２５（Ｎａ＋型：ファルマシ
ア、ファインケミカル社製）を充填したカラムに注入し
吸着する。上記の緩衝液に連続的に塩化ナトリウムを加
えることによりナトリウム濃度を１．０モルまで除々に
上昇させる直線濃度勾配法により溶出する。この時未反
応の原料と副生物はより早く溶出する性質があるので、
紫外線吸収モニターを用いることにより分離除去するこ
とが可能である。もし目的物の分画に不純物の混入が認
められれば、上記のクロマトグラフィーを再度行ない完
全除去をはかればよい。

上記のクロマトグラフィーを行うかわりに吸着樹脂たと
えばアンバーライｌ＠ＸＡＤ−２を用いるクロマトグラ
フィーをおこなってもよい。樹脂を緩衝液、たとえば１
％酢酸アンモニウム水溶液、を用いて充填したカラムに
粗物質の水溶液を注入して、目的物を吸着する。緩衝液
に連続的にメタノールを加えることによりメタノール濃
度を除々に上昇させる直線濃度勾配法により溶出する。

この時未反応の原料はより早く、主な副生物はより遅く
溶出する性質があるので、紫外線吸収モニターを用いる
ことにより分離除去することが可能である。もし目的物
の分画に不純物の混入が認められれば、上記のクロマト
グラフィーを再度行ない完全除去をはかればよい。

上記２種の精製操作は単独でも、又組合せて行なっても
よい このようにして得られる目的物の分画を上述した吸着樹
脂、例えばアンバーライｌ’ＸＡＤ−２を用いた脱塩法
で脱塩したのち、凍結乾燥すると、アミドＮ置換プレオ
マイシン類の含銅体が青色の無定形粉末で得られる。

このようにして得られるアミドＮ置換プレオマイシン類
の含銅体を公知の方法、たとえばＥＤＴＡを用いる方法
（特公昭５２−３１８７５）で脱銅すれば脱銅体が得ら
れる。

その−例を説明すると、含銅体を蒸留水に溶解し、これ
を蒸留水で充填したアンバーライ１ｘＡＤ−２のカラム
に注入し吸着する。樹脂を塩化ナトリウムと５％のエチ
レンジアミン四酢酸・２ナトリウム（以下ｒＥＤＴＡ拳
２ＮａＪ　という）からなる水溶液でカラムを洗うと、
銅イオンはＥＤＴＡ・２Ｎａにより運び去られ、アミド
Ｎ置換プレオマイシン類（脱銅体）が樹脂上に残る。塩
化ナトリウムで洗いＥＤＴＡ−２Ｎａを除去し、さらに
蒸留水で洗浄する。最後に酸性含水メタノール、たとえ
ば１１５０規定塩酸水溶液−メタノール（１：４　　ｖ
／ｖ）で溶出し波長２９０ミリミクロン付近に吸収極大
を示す分画を集める。ダウエックス＠４４（ＯＨ型；ザ
Ｏダウ・ケミカル社製）でｐＨ６，０に合わせた後、減
圧下で濃縮し、凍結乾燥するとアミドＮ置換プレオマイ
シン類の脱銅体・塩酸塩が白色の無定型粉末で得られる
。

もし、上記の塩酸水溶液のかわりに、硫酸水溶液を用い
れば硫酸塩が得られる。このように、上記溶出工程で用
いられる酸の種類を選択することにより、任意の酸との
間の塩かえられる。

以上に説、明した方法により製造されたアミドＮ置換プ
レオマイシン類を６規定塩酸水中で、１０５℃、２０時
間加水分解にかけると、プレオマイシン類に共通する分
解生成物［Ｌ−トレオニン、β−アミノ−β−（４−ア
ミノ−６−カルポキシー５−メチル−ピリミジン−２−
イル）プロピオン酸、４−アミノ−３−オキシ−２−メ
チル−ｎ−ペンタン酸、β−オキシ−Ｌ−ヒスチジン、
β−アミノ−Ｌ−アラニン、２°−（２−７ミノエチル
）−２，４’−ビナアゾール−４−カルボン酸］とアミ
ｙ　［Ｒ−ＮＨ２、Ｘ−ＮＨ２］　が検出された０以上
の事実は本発明の方法によって製造されたアミドＮ置換
プレオマイシン類が前記式［Ｉ］で表される化学構造を
有することを裏ずけている。

上記一般式［Ｖ］で示されるデアミドプレオマイシン類
は前記一般式［ＩＩ］ で表わせるプレオマイシン類の脱銅体をラッ）（７）不
活化酵素又は、それと同様にして牛又は豚の肝臓から調
製した不活化酵素を用いて加水分解して製造することが
出来る。

たとえば、牛肝臓を燐酸緩衝液とホモジェネエイトして
、８０００ＲＰＭで遠心分離し、その上清を燐酸緩衝液
に対し透析し粗酵素液し、それにプレオマイシン類を燐
酸緩衝液に溶解したものをを加え、３７°Ｃ１５〜４８
時間反応させる。反応液から適当な方法で蛋白質を除き
、（たとえば５％となるように、トリクロロ酢酸（以下
ＴＣＡと略す）を加え蛋白質を沈澱させ、遠心分離で沈
澱を除き、沈澱を３回５％ＴＣＡで洗浄し洗液をあつめ
る）中和後、プレオマイシンに対して過剰の酢酸銅を加
え目的物を銅キレートとする。これを脱塩するため蒸留
水で充填した吸着樹脂ダイアイオン＠ＨＰ４０．のカラ
ムに注ぎ目的物を吸着する。蒸留水で塩類をあらい流し
た後、１１５０規定塩酸水溶液−メタノール（１：４ｖ
／ｖ）で溶出し、波長２９０ミリミクロン付近に吸収極
大を示す分画をあつめる。陰イオン交換樹脂、ダウエッ
クス＠４４（ＯＨ型；ザ・ダウΦケミカル社製）で中和
したのち、減圧下で濃縮して凍結乾燥する。

上記の粉末を蒸留水に溶解し、あらかじめｐＨ４，５、
１／２０モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化した
ＣＭセファデックス＠Ｃ−２５（Ｎａ＋型：ファルマシ
ア、ファインケミカル社製）を充填したカラムに注入し
吸着し、上記の緩衝液に連続的に塩化ナトリウムを加え
ることによりナトリウム濃度を１．０モルまで除々に上
昇させる直線濃度勾配法により溶出し、目的物の青紫色
の分画を集める。先に用いたダイアイオン＠ＨＰ４０脱
塩法で脱塩したのち、凍結乾燥すると、デアミドプレオ
マイシン類の含銅体が青色の無定形粉末で得られる。

一般式［ＶＩ］のアミンとしてはつぎのものが挙げられ
る。

メチルアミン、エチルアミン、ｎ−プロピルアミン、イ
ソプロピルアミン、ｎ−ブチルアミン、イソブチルアミ
ン、ｔｅｒｔ−ブチルアミン、ｎ−ペンチルアミン、３
−メチル−ブチルアミン、ネオペンチルアミン、ｎ−へ
ブチルアミン、３−メチルペンチルアミン、ｎ−ヘキシ
ルアミン、１．５−ジメチルヘキシルアミン、イソヘキ
シルアミン、ｎ−オクチルアミン、ｎ−デシルアミン、
ラウリルアミン、ミリスチルアミン、セチルアミン、ス
テアリルアミン等、２−７ミノエチルアミン、Ｓ−７ミ
ノプロビルアミン、４−アミノブチルアミン、６−アミ
ノドデシルアミン、１２−アミノドデシルアミン、４−
アミノ−４−メチル−１−ジメチルペンチルアミン、２
．２−）リフルオロエチルアミン、２，２．２−トリク
ロロエチルアミン、２．２−ジフルオロエチルアミン、
２，２−ジクロロエチルアミン、ベンジルアミン、ジフ
ェニルメチルアミン、２−フェニルエチルアミン、２．
２−ジフェニルエチルアミン、ｌ−フェニルエチルアミ
ン、１．２−ジフェニルエチルアミン、３−フェニルプ
ロピルアミン、２−フェニルイソプロピルアミン、１．
３−ジフェニルプロピルアミン、３，３−ジフェニルプ
ロピルアミン、４−フェニルブチルアミン、４，４−ジ
フェニルブチルアミン、クロロベンジルアミン、ジクロ
ロベンジルアミン、ブロモベンジルアミン、メトキシベ
ンジルアミン、ジメトキシベンジルアミン、エトキシベ
ンジルアミン、メチレンジオキシベンジルアミン、プロ
ポキシベンジルアミン、ｐ−クロロフェニルエチルアミ
ン、ｐ−メトキシフェニルエチルアミン、ｐ−ベンジル
オキシベンジルアミン、フリルメチルアミン、２−フリ
ルエチルアミン、２−チアゾリルメチルアミン、２−ピ
ラゾリルメチルアミン、２−イミダゾリルメチルアミン
、４−イミダゾリルメチルアミン、２−チェニルメチル
アミン、２−ピリジルメチルアミン、３−ピリジルメチ
ルアミン、４−ピリデルメチルアミン、インドリルメチ
ルアミン、インドリルエチルアミン。

４−メトキシインドリルメチルアミン、２−ビリメチル
メチルアミン、２−ビリメチルエチルアミン、４−ピリ
ジルメチルアミン、４−ビリメチルエチルアミン、２−
ピペリジルメチルアミン、３−ピペリジルメチルアミン
、４−ピペリジルメチルアミン、２−　（２−ピペリジ
ル）エチルアミン、２−（３−ピペリジル）エチルアミ
ン、２−（４−ピペリジル）エチルアミン、１−（２−
ピペリジル）エチルアミン、１−（３−ピペリジル）エ
チルアミン、１−（４−ピペリジル）エチルアミン、２
−（ピペリジノ）エチルアミン、２−ピペラジルメチル
アミン、２−（２−ピペラジルエチル）アミン、２−（
ピペリジノ）エチルアミン、３−ピペリジノプロビルア
ミン、２−（モルフォリノ）エチルアミン、３−（モル
フォリノ）プロピルアミン、２−モルフオリニルメチル
アミン、３−モルフオリニルメチルアミン、２−（モル
フオリニル）エチルアミン、３−（モルフオリニル）プ
ロピルアミン、ジメチルアミノエチルアミン、ジエチル
アミノエチルアミン、ジプロピルアミノエチルアミン、
プロピルアミンエチルアミン、ジメチルアミノプロピル
アミン、ジエチルアミノプロビルアミン、ジプロピルア
ミノプロピルアミン、プロピルアミノプロピルアミン、
ジブチルアミノプロビルアミン、ブチルアミノプロピル
アミン、ベンジルアミノプロビルアミン、２−フェニル
エチルアミノプロピルアミン、１−フェニルエチルアミ
ノプロピルアミン、３−フェニルプロピルアミノプロビ
ルアミン、４−フェニルブチルアミノプロピルアミン、
メチルアミノエチルアミノプロビルアミン、エチルアミ
ノプロピルアミノプロビルアミン、プロピルアミノプロ
ビルアミノプロビルアミン、ブチルアミノプロピルアミ
ノプロビルアミン、Ｎ−（ブチルアミノプロピル）−Ｎ
−メチルアミノプロピルアミン、ジブチルアミノプロビ
ルアミノプロビルアミン、ペンチルアミノプロピルアミ
ノプロビルアミン、エチルアミノブチルアミノプロビル
アミン、プロピｌレアミノブチルアミノプロビルアミン
、エチルアミノプロピルアミノブチルアミン、ブチルア
ミノプロピルアミノブチルアミン、ベンジルアミノエチ
ルアミノエチルアミン、ベンジルアミノエチルアミノプ
ロピルアミン、ベンジルアミノプロビルアミノプロビル
アミン、ベンジルアミノプロビルアミノプロビルアミン
、ベンジルアミノブチルアミノプロビルアミン、フェニ
ルエチルアミノプロピルアミノプロビルアミン、Ｎ−（
フェニルエチルアミノプロピル）−Ｎ−メチルアミノプ
ロピルアミン、Ｎ−クロロベンジルアミノプロビル）−
Ｎ−メチルプロピルアミン、Ｎ−（ブロモベンジルアミ
ノプロピル）−Ｎ−メチルプロピルアミン、Ｎ−クロロ
フェニルエチルアミノプロピル）−Ｎ−メチルプロピル
アミン、ジベンジルアミノプロピル−Ｎ、Ｎ−ジメチル
アミノプロピルアミン、ジベンジルアミノプロピル−Ｎ
、Ｎ−ジエチルアミノプロピルアミン、ジベンジルアミ
ノプロピル−Ｎ−メチル−Ｎ−ベンジルアミノプロビル
アミン、α−ナフチルアミン、β−ナフチルアミン、２
−チアゾリルアミン、３−チアゾリルアミン、４−チア
ゾリルアミン、Ｎ−ベンジル−４−ピペリジルアミン、
Ｎ−フェニルエチル−４−ピペリジルアミン、Ｎ−ベン
ジル−３−ピペリジルアミン、Ｎ−ベンジル−２−ピペ
リジルアミン等が挙げられる。

（２）また［Ｉ］で示される化合物は次のように製造す
ることもできる。

（以下余白） 一般式［ＶＩＩコ で示されるアミドＮ置換プレオマイシン酸を一般式［Ｖ
Ｊ１１］ Ｈ−Ｒ［ＶＩＩＩ］ （式中Ｒは前記と同じ）で示されるアミンと縮合するこ
とにより合成できる。縮合はアミド結合を形成するため
の公知の方法（たとえば特公昭５４−６３０８９号）を
用いることができる０合成された目的物は上に述べたと
同様に精製単離出来る。

上記式［ＶＩＺ］で示されるアミドＮ置換プレオマイシ
ン酸は上記ｊ８１の方法で得られる［Ｉ］で表わせる化
合物のうち、ＲがアグマチンであるアミドＮ置換プレオ
マイシンＢ２を公知の菌体（例えば財団法人発酵研究所
保存番号ＩＦＯ８５０２）等を用いる方法（たとえば、
特開昭５３−　ｔ９１３７？）によって加水分解して得
ることができる。

上記式［ＶＩＩＩＩのアミンとしては例えば、２−アミ
ノエチルアミン、３−アミノプロピルアミン、２−ジメ
チルアミノエチルアミン、２−ジエチルアミノエチルア
ミン、３−ジメチルアミノプロピルアミン、３−ジエチ
ルアミノプロピルアミン、３−（３−ブチルアミノプロ
ピルアミノ）プロピルアミン、３−（２オキシプロピル
アミノ）プロピルアミン、３−ピペリジノプロビルアミ
ン、３−（ｌ−フェニルエチルアミノ）プロピルアミン
、２−アミノプロピルアミン、３−メチルアミノプロピ
ルアミン、３−ブチルアミノプロピルアミン、３−（６
−７ミノへキシルアミノ）プロピルアミン、３−トリメ
チルアミノプロピルアミン、３−（３−ジメチルアミノ
プロピルアミノ）プロピルアミン、３−（３−アミノプ
ロピルアミノ）プロピルアミン、３−（Ｎ−メチル−Ｎ
−（３−アミノプロピル）アミノ）プロピルアミン、３
−ピロリジニルプロピルアミン、３−ピペリジニルプロ
ビルアミン、３−モルフォリノプロピルアミン、３−ピ
ペラジニルプロビルアミン、３−　（４−（３−７ミノ
プロビルビベラジニル）プロピルアミン。

３−（３−ピロリジニルプロピルアミノ）プロピルアミ
ン、３−（３−ピペリジニルプロビルアミノ）プロピル
アミン、　３−（３−モルフオリニルプロピルアミノ）
プロピルアミン、３〜（３−オキシプロピルアミノ）プ
ロピルアミン、３−（３−メトキシプロピルアミノ）プ
ロピルアミン、３−ベンジルアミノプロビルアミン、ｍ
−７ミノメチルベンジルアミン、ｐ−７ミノメチルベン
ジルアミン、２−シクロペンチルアミノエチルアミン、
３−シクロヘキシルアミノプロビルアミン、４−シクロ
ヘキシルアミノブチルアミン、シクロヘプチルアミノプ
ロビルアミン、３−シクロオクチル７ミノプロビルアミ
ン、３−（Ｎ−メチル−３−Ｎ−（シクロオクチルメチ
ルアミノプロピル）アミノ）プロピルアミン、３−シク
ロデカニルアミノプロビルアミン、３−（Ｎ−メチルト
（３−（２−ｐ−クロロフェニルエチルアミノ）プロピ
ル））アミノプロピルアミン、　３−　（Ｎ−メチルＮ
−（３（ｍ、ｐ−ジベンジルオキシベンジルアミノ）プ
ロピルプロピル）アミノプロピルアミン、３−（Ｎ−メ
チルＮ−（３−（ｐ−シアノベンジルアミノ）プロピル
）アミン）プロピルアミン、３−　（Ｎ−メチルＮ−（
３−（シクロウンデカニルメチルアミノ）プロピル））
アミノプロピルアミン、３−　（Ｎ−メチルＮ−（ビス
（ｍ、ｐ−ジベンジルオキシベンジルアミノ）プロピル
）アミン）プロピルアミン、３−　（Ｎ、Ｎ−ジメチル
Ｎ−（３−（ジベンジルアミノ）プロピル））アミノプ
ロピルアミン、３−　（Ｎ。

Ｎ−ジエチルト（３−（ジベンジルアミノプロビル））
アミノプロピルアミン、３−　（Ｎ、Ｎ−ジメチルＮ−
（３−（Ｎ、Ｎ−ジメチルＮ−（３−ジベンジルアミノ
プロビル）アミン）プロピル））アミノプロピルアミン
、３−　（Ｎ、Ｎ−ジメチルジ（３−（Ｎ、Ｎ−ジメチ
ルＮ−（３−シクロオクチルメチルアミノプロピル）ア
ミノ）プロピル））アミノプロピルアミン、３−　（４
−（３−ジベンジルアミノプロピルアミノ）ピペリジル
）プロピルアミン、３−　（４−（３−（シクロオクチ
ルメチルアミノプロピル）ピペリジル）プロピルアミ琢
等が挙げられる。

（３）また［Ｉ］で示される化合物は次のように製造す
ることもできる。

一般式［ＩＸ］ で示されるデアミドプレオマイシン酸に２モルの前記一
般式［ＶＩ］で示されるアミンを縮合することにより合
成できる。縮合は上記と同様に行なうことができる。合
成された目的物は上に述べたと同様に精製単離出来る。

この場合得られる゛化合物は一般式ＣＩ］において−Ｎ
Ｈ−ＸおよびＲが同じになる。

上記式［ＩＸ］で示されるデアミドプレオマイシン酸は
、公知のプレオマイシン酸（特開昭５３−１９６７７）
を前述の不活化酵素を用いて加水分解することにより得
ることが出来る。　また前述の一般式［Ｖ］で示される
デアミドプレオマイシンのうちＲがアグマチンであるデ
アミドプレオマイシンＢ２を前述の菌体を用いる方法で
加水分解しても得ることができる。

前記一般式［ＶＩＩＩｌのアミンのうち、つぎの一般式
［Ｘ］ −ＮＨ−（Ｃ１（２）３−Ａ’−（ＣＨ２）３−Ｂ’　
　　［Ｘ］低級アルキル、またはベンジルを示す。）を
示しＢ“はジ（フェニル低級アルキル）アミノ、シアノ
フェニル低級アルキルアミノ又は０５〜Ｃ１ｌのシクロ
アルキル置換低級アルキルアミノを示す。１で表わさえ
るアミンは本発明者らによってはしんめて合成された新
規化合物である。

このうち次式［ＸＩ］ （式中Ｒ１０、Ｒ１１は前記と同じ、Ｒ’１２．Ｒ’１
３はフェニル低級アルキル、）で表わされる化合物は、
次のようにして合成される。

一般式［ＸＩＩ］ ＩＱ ＮＨ２−（ＣＨ２）３−Ｎ−Ｒ１１［ＸＩＩ］（式中は
ＲＩＯ１Ｒ１１前記に同じ。）で示される３−アミノプ
ロピルＮ、Ｎジアルキルアミンをベンズアルデヒドと還
元的に縮合反応せしめ、反応物をアルカリ性にして、有
機溶媒で抽出し、一般式［ＸＩＩＩ］ （式中ＲＩＯ１Ｒ１１，Ｒ’１２、Ｒ’１３は前記と同
じ。）で示される、Ｎ’Ｎ’−ジベンジルアミノプロピ
ルＮ、Ｎジアルキルアミンとなし、次に３−ブロモプロ
ピルフタルイミドと反応させ一般式［ＸＩＶ］（式中Ｒ
１０、Ｒ１１、Ｒ’１２、Ｒ°１３は前記と同じ。

ｐｈｔｈ＝はフタリル基をしめす。） で示される四級塩とし、次いで６規定塩酸と１１０度８
時旧加熱して加水分解後、副生ずるフタル酸を除き、濃
縮すると、［Ｘ　Ｉ　］の塩酸塩を得ることか出来る。

また、一般式［ＸＶ］ 低級アルキル Ｎ　Ｒ２−（ＣＲ２）３−Ｎ−（ＣＲ２）３−ＮＨ−Ｒ
１［ＸＶ］［式中Ｒ１はｐ−シアノフェニル低級アルキ
ル、０５〜Ｃ１ｌのシクロアルキル置換低級アルキル］
で表わされるアミンは、次のようにして合成される。　
ビス（３−アミノプロピル）低級アルキルアミンを１当
量以下のアシル化剤でモノアシル化し次いで１当量のア
ルデヒドと還元的に縮合し、次いでアシル基を塩酸で加
水分解して得ることができる。

次に本発明のアミドＮ置換プレオマイシン誘導体の代表
的な化合物につき、理化学的性質を第２表に示す。

℃＋ｔｊ＋ｔｊ＋Ｉｊででででで”ｔｊＴ５℃唆 呻 参　　　　　　　　　　　　　〇　−Ｉ　Ｎ乍　　　　
−国υ寸のロトω■−−− ＯＱ）　Ｃｏ　Ｃｏ　ｅ’）　ｃＩＪ〜のトψト０ωり
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　ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　−ｔ　ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　ｏ
　ｏ　ｏ　−＋　。

舛　　　賛賛 ００〜ト寸ωトロ寸トψ寸ロ０−唖のり寸ののｔ’−ｃ
ｏ→寸ＣＯψトｓｔ−ｏｍ■トトロ０００００００００
０００００００００ψトａＯａＯの−ω０■Ｑ■ψ口ψ
ＱＯ■ωｌｕ　ｌ＋７１＋７ｕ　ｕ　ｌｊ　％ｊ　ｕ　
ｕ　％ｊ　ｕ　１．ｊ　’ｊ　ｕ　ｕ　’ｕ　％ｊ　ｌ
ｕ−一一一一凶ｃＶＪＮ−−−−−−−の一一■■■■
０■■■■■■■■■■ψ■■へへ〜〜〜へ〜〜〜へへ
〜〜へＮ〜〜〜＋　　１　１　１　１　１　１　１１１
＜ＩＩＬ＋Ｉｎ＜Ｇ１５ｌｌ＜ｌＬ＋　　−叫　−−へ
ｃｌ、１ｅｌＪ〜〜〜〜〜に）国−に）に）に）に）に
）に）に）０叶ｕ’ｚ　ｃｏ　ｈの００−〜の寸のロト
ψ００＋ｌ　＋ｌ　＋Ｉ　＋ｌ　＋１−−へ〜〜〜〜〜
〜へ〜へＯＮ呻Ｃ００ＯＣＯ呻呻■の一Φ寸■０−■へ
Ｑ）　Ｏ：ｌ　０４０−ｔ　Ｏ−ｔ　１−１ｏ　ＯＧ’
＋　ＯＱ’Ｉ　Ｎ　、−ｔ　ＯＯ’１００　ｍ　＋ｌ　
ｍ　＋Ｉ　＋ｍ　＋＋Ｔ　＋ｌ　＋ｌ　＋ｌ　Ｑ　＋１
Ｏ１−４−＋−１０■ｃｌ′）のの〜０クロ０ｏりＶの
〜００の寸ＣＤｃｏｂトドののＮの罰の０００〜口ｖへ
００００００００００００００００００＋ｌ　＋Ｉ　＋
ｌ　ｅ−＋　＋ｌ　＋ｌ　ｌ＋Ｉ−ａｌｏ　０００００
０００■■０■■０■０の■■■■０■■■■凶Ｃ’ｉ
ｌへＮ〜〜〜〜Ｎ〜〜〜〜〜〜へＮへ国 ロー ａフＯりｍｍａワｅりぐプａ）ぐプ＋ｎ−ｔ！ｔ＊ｖ＋
−を寸トＣｙ１ａｚｎ−＋ｍｃｙｏ＋ａ：＋ｗｏｏ唖。

Ｏト（％＋　＋Ｉ　Ｏ−ｍ＋　Ｏ＋−＋　ＯＯ）　Ｏｗ
ｓ　ＣＦＩ　＋１煽　　醐 次に本発明の化合物の代表例によって調べた生物学的諸
性質を以下に説明する。

ｌ）不活化酵素に対する耐性試゛験 １、不活化酵素の抽出 雌性トンリュー系ラットの肝臓に２倍重量のｌ／１５モ
ル、ｐＨ７，２の燐酸緩衝液を加えて粉砕し、組織乳剤
とした。　１０５，００ｘ　Ｇで８ｏ分遠心分離を行い
、その上清液を透析した。この高分子分画を不活化酵素
の抽出液として用いた。

２゜不活化反応の測定法 上記抽出液１ｍｌに、基質溶液１　ｍｌ（８００１１０
ｇのプレオマイシン誘導体を含有する。）を加えて、３
７℃、４０分反応を行なった０反応液０．３ｍｌについ
て、除蛋白した後、ミコバクテリウム・スメグマチス−
ＡＴＣＣ６０７に対する残存活性を測定した。対照とし
て用いたプレオマイシンＢ２は、この条件で５０％活性
が低下した。

その結果を第３表に示す。

この結果からあ゛きらかなように、本発明のアミドＮ置
換プレオマイシン誘導体は一般に、プレオマイシンに比
較して、プレオマイシン不活化酵素の影響を受けにくい
ことがわかる。

２）ミコバクテリウム・スメグマチス・ＡＴＣＣ６０７
、及びバチルス・ズブチリスに対する抗菌活性 上記の検定菌を用いて、寒天平板円筒法により測定した
。ただし、標準物質プレオマイシンＡ２（脱銅体）を１
００１００Ｏ力価１ｒａｇとした。その結果を第３表に
示した。

３）培養ＨｅＬａ５３細胞に対する増殖阻害効果 プラスチック・シャーレの培養基（１０％仔牛血清添加
ＭＥＭ）にＨｅＬａ５３細胞を接種し。

２日後にプレオマイシン類を添加した。さらに３日間培
養を続けた後、細胞数を測定した０、増殖阻害率は次式 ％式％（） ［式中、Ａは被験試料添加後３日目の最終細胞数、Ｂは
被験試料を添加しない対照における最終細胞数、Ｃは被
験試料添加時の細胞数を表わす、］を用いて算出した。

試料濃度と阻止率のグラフから、ＩＤ５Ｇ値（５０％阻
害のための濃度）を求めた。その結果を第３表に示した
。

（以下余白） 学 瞭 引　　　　　−ｃＩＩ＋のりクロトの■ギ −−−−−−Ｍ　Ｍ−−＋−ＩＮ　ＯＪ　ｃＩＪＮ　Ｃ
’Ｊ　、ＣＮ　ＯＪ　ｅＪｏｏ−１００−１００１ＮＯ
ＯＯＯＯＯＯＯＯり　　　１１’）ＣＳＪ〜曽０口〜−
寸−４ ＨｅＩＪｅ’）ｅ’５ｅｑｃｑｃ’ｚｏｅｑｃｑｅ”＋
ｃｑｎ＋＋＋＋＋ＯｃＩＪ−ｍ　ＣＩＪＯＯＯＯ−＋　
Ｏ−。ｏｏ−００４）マウスの節奏性（肺線維化）ＩＣ
Ｒ系マウス（雄性１５週令）を一群９匹として用いた。

各薬剤の投与量は、５　ｉ＋ｇ／ｋｇとし、１日１回、
連続１０日間、腹腔内注射し、投与終了後、５週間飼育
し、観察後、屠殺剖検し、肺の線維化の頻度、及び程度
を調べた。

成績は、投与群の肺線維化をもつマウス数の頻度（Ｉｎ
ｃ　１ｄｅｎｃｅ）及び、の強弱の程度（Ｇｒａｄｅ）
について比較した。その結果を第４表に示す。表中の点
数は下記のとうりである。

０点：線維化を認めない。

１点：肺胞に浸出液の蓄積がみられ、肺胞中隔に線維化
様変化が見られる。

２点：数か所にみられる線維化 ４点：散在性にみられる線維化 ６点＝２７３以上の広範囲にみられる線維化また、表中
の比はブレオマイシンコンプレックスとの比率を示す。

（以下余白） ト唖寸　Ｃ０ＩＮ＋’− 沢　　　・　・　・　　　・　・　・ ００００００００００００００ ヴ　叩 ｏ　　ｏ　　ｏ　　ｏ　　ｏ　　ｏ　　ｏ　　ｏ　　。

ｂ　トｔ’−トＳ　トドトド ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　。

ｏｏｏｏｏｏｏｏ。

ｃ＋′）寸唖ωトの■０〜 Ｌｌ’）　Ｌｌ’）　Ｌｌ’）　ＬＯり唖のロロ以上の
結果から明らかなように、本発明化合物はプレオマイシ
ン不活化酵素に抵抗し、培養ＨｅＬａ５３細胞に対する
増殖阻害活性が強く、優れた抗菌活性をも有しており、
詰責性を著しく減じていることがわかり、臨床面での有
用性を強く示唆している。

（以下余白） 実施例１ Ａステップ 新鮮な牛肝臓２００ｇを４００ｍ　ｌの０．０５モル燐
酸緩衝液（ｐＨニア、２）とホモジェネエイトして、８
０００ＲＰＭで３０分遠心分離し、その上清を０゜０５
モル燐酸緩衝液に対し透析し粗酵素液とする。

プレオマイシンＢ２．１０ｇに上記粗酵素液４００ｍ１
を加え、３７℃、２４時間反応させる。反応液に５５％
トリクロロ酢酸（以下ＴＣＡと略す）４０１を加え蛋白
質を沈澱させ、遠心分離で沈澱を除き、沈澱を３回５％
ＴＣＡで洗浄し注液と洗液をあつめ４　Ｍ　Ｎ　ａ　Ｏ
Ｈで中和後、３．２ｇの酢酸ｔＩｉ４（プレオマイシン
に対して２．４等量）を加え目的物を銅キレートとする
。これを脱塩するため蒸留水で充填した吸着樹脂ダイア
イオン＠ＨＰ４０．（三菱化成社製）のカラム’（’Ｌ
Ｌ容）に注ぎ目的物を吸着した。１．５Ｌの蒸留水で塩
類をあらい流した後、１１５０規定塩酸水溶液−メタノ
ール（１：４ｖ／Ｖ）で溶出し、波長２９０ミリミクロ
ン付近に吸収極大を示す分画をあつめた。ダウエックス
の４４（ＯＨ型、ザ・ダウ・ケミカル社製）で中和した
のち減圧下で濃縮した。

上記の濃縮液を、あらかじめｐ　Ｈ４，５、１／２０モ
ル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化したＣＭセファ
デックスＣ−２５（Ｎａ＋ｆｉ：ファルマシア、ファイ
ンケミカル社製）を充填したカラム（ＩＬ容）に注入し
吸着した。上記の緩衝液に連続的に塩化ナトリウムを加
えることによりナトリウム濃度を１．０モルまで除々に
上昇させる直線濃度勾配法により溶出した。　０．３Ｍ
前後で溶出する青色の分画を集め、先に用いたダイアイ
オン＠ＨＰ４０脱塩法で脱塩したのち、凍結乾燥すると
、デアミドプレオマイシンＢ２の含銅体が８．５ｇ青色
の無定形粉末で得られた。（収率８３ｚ）水晶の蒸留水
で測定した紫外吸収極大および（Ｅ１駕ハｃ＋ａ）は２
４２ｍｐ　（１３８）　、２ｉ３１ｍｕＬ（１１５）で
あった。

臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｃｍ−’
）は　３４２５．２９７５．２８４０．１？２Ｑ、　１
８４０．１５７５．１４６０．１４２０．１４００．１
３７５．１２８０．１２ＢＯ１１２４０，１１８０，１
１４０，１１００，１０８０，１０２０、７６０であっ
た。その他の理化学的性状は第５表に示した通りであっ
た・ 本実施例と同様にプレオマイシンＡ２’−８゜３−　（
（Ｓ）−１’−フェニルエチル）アミノプロピルプレオ
マイシン、３−（３−ｎ−ブチルアミノプロピルアミノ
）プロピルアミノ−プレオマイシンを原料として用いる
ことにより、夫々デアミドプレオマイシンＡ２’−ｃ、
３−（（Ｓ）−１′−フェニルエチル）アミノプロピル
−デアミドプレオマイシン、３−（３−ｎ−ブチルアミ
ノプロピルアミノ）プロピルアミノ−デアミドプレオマ
イシン等が得られた。これらの代表的なものの理化学的
性質を第５表に示す。

（以下余白） 厭　　　−− １３１３ｃｑＨ八　Ｃ’）　　１１／　　Ｐ　　；電　
　　霜Ｂステップ Ａステップで得たデアミドプレオマイシンＢ２の含銅体
１ｇと１．７７ｇの１−ヒドロキシベンズトリアゾール
（以下ＨＯＢＴと略す）を１０ｍ　ｌのジメチルフォル
ムアミドに溶解し、０℃に冷却撹拌し、１．３５ｇのジ
シクロヘキシ、ルヵルポジイミド（以下ＤＣＣと略す）
（プレオマイシンに対して１０倍量）を加える。５分後
３−（（Ｓ）−１′−フェニルエチル）アミノプロピル
アミン塩酸塩８４０腸ｇ　（プレオマイシンに対して５
倍量）とＮ−メチルモルフォリン０．７２ｍ１を加える
。室温で１６時間攪拌し反応させる。

反応液にｌθ０倍量アセトンを加え、目的物を沈澱させ
、アセトンでよく洗った後この沈澱を蒸留水に溶解し、
あらかじめｐＨ４，５、１／２０モル酢酸−酢酸ナトリ
ウム緩衝液で平衡化したＣＭセファデックスＣ−２５（
Ｎａ＋ｆｉ：ファルマシア、ファインケミカル社製）を
充填したカラム（１００ａ＋１容）に注入し吸着した。

上記の緩衝液に連続的に塩化ナトリウムを加えることに
よりナトリウム濃度を１．０モルまで除々に上昇させる
直線法度勾配法により溶出した。０．６モル前後で溶出
する青色の分画を集め、先に用いたダイアイオンのＨＰ
−４０（１００ｍｌ使用）の脱塩法で脱塩したのち、凍
結乾燥するとアミドＮ−［３−（（Ｓ）−１′−フェニ
ルエチル）アミノプロピルコープレオマイシンＢ２の含
銅体８８０ｍｇが青色の無定形粉末で得られた。（収率
７θ％）水晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大および（
Ｅ　１％／１ｃｍ）は２４３ｍＩＬ（１２５）、２’９
２１ル（８６）であった。臭化カリ錠剤法で測定した赤
外吸収極大波数（ａｍ”）は３４２５．２Ｓ７５．２８
３０．１７２０．１６４０．１５８０．１５７５．１５
５０．１４５５．１４３０．１４００、１３７０．１２
８０．１２４０．１１８０．１１３０．１０８５．１０
６０．１００５、９８０、８７５、７θＯであった。

その他の理化学的性状は第２表に示した通りである。

本実施例と同様にデアミドプレオマイシンＢ２の含銅体
を用い第２表中に示すアミドＮ置換プレオマイシンＢ２
誘導体７〜２０が合成された。

また、本実施例と同様にして、デアミドプレオマイシン
Ａ２’−ｃ、３−　（（Ｓ）−１’−７ｚニルエチル）
アミノプロビルーデアミドプレオヤイシン、３−（３−
ｎ−ブチルアミノプロピルアミノ）プロピル７ミノーデ
７ミドプレオマイシンの含銅体を用いることにより第２
表に示す１〜６．２１〜３８の化合物が合成された。

Ｃステップ Ｂステップで得た含銅体８８０１ｇを２０ｍ１の蒸留水
に溶解し、脱銅のため蒸留水で充填したアンバーライ）
ＸＡＤ−２のカラム（１００ｍｌ容）に注入し吸着する
。樹脂を塩化ナトリウムと５％のＥＤＴＡ・２Ｎａから
なる水溶液３００１で洗い、２％塩化ナトリウム１００
ｍ１　　、蒸留水２５０　ｍ　ｌの順序で洗浄した後、
最後に１１５ｏ規定塩酸水溶液−メタノール（１：４　
　ｖ／ｖ）で溶出し波長２９０ミリミクロン付近に吸収
極大を示す分画を集めた。

ダウエックス　４４（ＯＨ型；ザ・ダウ・ケミカル社製
）でｐＨ６，０に合わせた後、減圧下で濃縮し、凍結乾
燥してアミドＮ−［３−（（Ｓ）−１′−フェニルエチ
ル）アミノプロビルーブレオマイシンＢ２の脱銅体・塩
酸塩７９０ｉ＋ｇが白色の無定型粉末で得られた。収率
８３％ 水晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大および（Ｅ１％／
　１ｃｍ）は２９１ｍｇ　（７９）　テあった。臭化カ
リ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｃｍ−’）は３
４２５．２８５０．１７２０．１６４０．１５５５５１
４５０．１４００．１３６０．１３２０．１２８０．１
１８０．１０６０、９８０．８１０、８０５．７７０、
７００であった。その他の理化学的性状は第２表に示し
た通りである。

実施例２ Ａステップ フザリウム−ロゼラム財団法人発酵研究所保存番号ＩＦ
０７１８９を培養して得られる菌体４００ｇを４Ｌの１
７２０モル燐酸緩衝液（ｐＨ：　７　、５）とホモジェ
ネエイトする。これにアミドＮ−［３−（（ｓ）−ｔ゛
−フェニルエチル）アミノプロピルコープレオマイシン
Ｂ２の含銅体１０ｇをＩＬの上記燐酸緩衝液に溶解した
ものを加え、３７℃２０時間反応させる０反応液に濾過
助剤を加え吸引濾過し、残液を上記燐酸ａｍ液で洗浄し
、濾液を集めた。これを蒸留水で充填した吸着樹脂アン
バーライト＠　ＸＡＤ−２（ＩＬ容）のカラムに注ぎ目
的物を吸着した。２シの蒸留水で墳類をあらい流した後
、５ｏｚメタノールで溶出し、青〜青緑色を示す分画５
Ｌをあつめた。減圧下濃縮した後、これを８０％メタノ
ール３５０１に溶解し、８０％メタノールで充填した７
０ｍ　ｌのアルミナのカラムに注いだ。１００膿ｌの８
０％メタノールで洗った後４０％メタノールで展開し、
溶出される青色の分画３５０１を集め減圧下で濃縮した
。これを蒸留水に溶解し、あらかじめｐ　Ｈ４，５、１
／２０モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化したＣ
Ｍセファデックス＠　Ｃ−２５（Ｎ　ａ　＋　ＩＪ　：
ファルマシア・ファインケミカル社製）を充填したカラ
ム（１３００ｍｌ容）に注入し吸着した。上記の緩衝液
に連続的に塩化ナトリウムを加えることによりナトリウ
ム濃度を１゜） ０モルまで除々に上昇させる直線濃度勾配法により溶出
した。０．２モル前後で溶出する青色の分画を集め、ダ
イアイオン＠ＨＰ４０脱塩法で脱塩したのち、凍結乾燥
するとアミドＮ−［３−（（Ｓ）−１“−フェニルエチ
ル）アミノプロピル］プレオマイシン酸の含銅体７．１
ｇが青色の無定形粉末で得らた。（収率７８％） 水晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大および（Ｅ１％／
ｌａｍ）は２４５ｓＩＬ（１２１）　、２１３３ｍ４　
（１１９）であった。

臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ａｍ−’
）は　３４５０．２８７５．２８４０．１７２０．１８
４５．１５８０．１５５５．１４８０．１３７０．１３
００．１１８０．１１４０．１０９５、ＩＯθ０．１０
０５、９８０、８８０、７６５、７００であった。

その他の理化学的性状は第６表に示した通りである。

本実施例と同様にアミドＮ−ｎ−オクチル−プレオマイ
シンＢ２、アミドＮ−（３−ジブチルアミノプロビル）
プレオマイシンＢ２から、アミドＮ−ｎ−オクチルーブ
レオプイシン酸、アミドＮ−（３−ジブチルアミノプロ
ビル）プレオマイシン酸が得られた。これらの理化学的
性質を第６表にしめす。

（以下余白） Ｂステップ Ａステップで得たアミドＮ−［３−（（Ｓ）−１′−フ
ェニルエチル）アミノプロピル−ブレオマイシン酸含銅
体１．０ｇと１．７１ｇのＨＯＢＴとを１０ｍ１のジメ
チルフォルムアミドに溶解し、以下実施例１（Ｂ−ステ
ップ）と同様にして、１．３１ｇのＤＣＣを用い、３４
０　ｍｇの　３−（（３’−シクロオクチルメチルアミ
ン）プロピル−Ｎ−メチルアミノ）プロピルアミンと３
時間線合させた。反応液を実施例１と同様にアセトン処
理、ＣＭ−セファデックス［相］クロマトグラフィーで
精製したのち、アンバーライトＸＡＤ−２の１００ｍ　
ｌのカラムに吸着させた。５００ｍ　ｌのｐＨ４，５酢
酸緩衝液と５００ｍ　ｌのメタノールを用いた直線濃度
勾配法によりメタノールを直線的に上昇させて溶出を行
なった。目的物はメタノール濃度４０〜５０１で溶出さ
れた。溶出液を上記の方法でＨＰ４０（１００ｍｌ）カ
ラムで脱塩したのち、凍結乾燥すると３−（（３’−シ
クロオクチルメチルアミン）プロピル−Ｎ−メチルアミ
ノ）プロピル−アミドＮ−［３−（（Ｓ）−１°−フェ
ニルエチル）アミノプロピルールレオマイシンの含銅体
が９８０ａ＋ｇの青色の無定形粉末で得られた。

収率８３ｚ。

Ｃステップ Ｂステップで得た３−（（３“−シクロオクチルメチル
アミン）プロピル−Ｎ−メチルアミノ）プロピル−アミ
ドＮ−［３−（（Ｓ）−１’　−フェニルエチル）アミ
ノ含銅上ルーブレオマイシン含銅体ＨＯｍｇを２２１の
蒸留水に溶解し、実施例１と同様にアンバーライ）ＸＡ
Ｄ−２と５％のＥＤＴＡ・２Ｎａ水溶液を用いて脱銅し
た。カラム流出液を凍結乾燥して３−（（３’−シクロ
オクチルメチルアミン）プロピル−Ｎ−メチルアミン）
プロピル−アミドＮ−［３−（（Ｓ）−１’−フェニル
エチル）アミノプロピル−ブレオマイシンの脱銅体・塩
酸塩８７０ｍｇが無色の無定型粉末で得られた。収率９
２％、氷晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大および（Ｅ
　１％／１ｃｍ）は２９１ｍＩＬ（８８Ｌｔ’　アった
。臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｃｍ−
’）は３４００．−２９２５．１７２０．１Ｂ５０．１
５５０．１５２０．１４８０．１４６０．１４５０．１
４０５．１３８５．１３８０．１３２０．１２５５．１
１８０．１１３０．１１００．１０５５．１０２０．９
８０．８８０．８２０．８８０．８０５．７６０．７２
５．６８５であった・ その他の理化学的性状は第２表に示した通りである。

本実施例と同様に第２表に示す化合物２８〜６３の脱銅
体が得られた。

（以下余白） 実施例３ Ａステップ 実施例１で得られた１、５ｇのデアミド゛ブレオマイシ
ンＢ２（含銅体）を実施例２と同様番こフザＩＪウム・
ロゼラムの培養菌体６０ｇを７５０１の１／２０モル燐
酸緩衝液（ｐＨニア、５）とホモジエネエイトした液と
混合し、３７℃２１時間反応させる。実施例２と同様に
濾過、アン／＜−ライトＸＡＤ＠−２カラム（５００ｍ
ｌ容）に注ぎ目的物を吸着した。カラムを蒸留水７５０
１で洗った後、水−メタノール（４：ｌ）を用い溶出し
、緑色を示す分画（７５０ｍｌ）をあつめ減圧下で濃縮
した。

この濃縮液を、あらかじめｐＨ４，５、１／２０モル酢
酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化したＣＭセファデッ
クス＠Ｃ−２５（Ｎａ十型：ファＪレマシア、′ファイ
ンケミカル社製）を充填したカラム（８０＋ｓｌ容）に
注入した。カラムを蒸留水で洗し１、通過してくる青色
分画（８ｈｌ）を集めた。このＣＭセファデックスのク
ロヤトッグラフイーを再度行なって純度を高めた後、青
色分画を濃縮し、あらかじめ水−メタノール（１：４）
を用いて充填したセファデックス＠　ＬＨ−２０（ファ
ルマシア・ファインケミカル社製）のカラム（ＬＬ容）
に注ぎ、水−メタノール（１：４）で展開し青色の分画
を集め、　減圧下濃縮し、凍結乾燥するとデアミド−プ
レオマイシン酸の含銅体８９０ｍｇが青色の無定形粉末
で得られた。（収率８７％）水晶の蒸留水で測定した紫
外吸収極大および（Ｅ　１％／１ｃｍ）は２５４ｍル（
１４３）　２９２ｍｐ（１４４）であった。臭化カリ錠
剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｃｍ−’）は３４５
０．２８７５．２８４０．１７２０．１６４０．１５６
０．１４６５．１４２０．１３８０．１２８０．１１８
０．１１４０．１１００．１０６０．１０２０．８９０
、８８０．８１０、７７５であった。又第６表にしめし
た条件での薄層クロマトグラフィーのＲｆ値は０．８１
木であり電気泳動におけるＲｍ値は０．４９であった。

Ｂステップ Ａステップで得た含銅体５００ｍｇと２０１０ｍｇのＨ
ＯＢＴとヲ５　ｍ　ｌのジメチルフォルムアミドに溶解
し、以下実施例１と同様にして、０００７７０ｍｇを用
い、３−　（（Ｓ）−１’−フェニルエチル）アミノプ
ロピルアミンと２１時間縮合させた。反応液を実施例２
と同様にアセトン処理、ＣＭ−セファデックスのクロマ
トグラフィー、アンバーライトＸＡＤ−２クロマトグラ
フィーで精製し、ＨＰ　−４０脱塩法で脱塩したのち、
凍結乾燥すると３＝（（Ｓ）−１’−フェニルエチル）
アミノプロピルアミドＮ−［３−（（Ｓ）−１’−フェ
ニルエチル）アミノプロピル］プレオマイシンの含銅体
２８０ｍｇが青色の無定形粉末で得らた。（収率４２％
） 本実施例と同様にして、アミンとして３−（３−ｎ−ブ
チルアミノプロピルアミノ）プロピルアミン、Ｎ−（３
−アミノプロピル−Ｎ′−メチルアミノプロピル）Ｎ−
（２−（Ｐ−クロロフェニル）エチル）アミンを用いる
ことにより３−（３−ｎ−ブチルアミノプロピルアミノ
）プロピルアミノ−アミドＮ［３−（３−ｎ−ブチルア
ミノプロピルアミノ）プロピルコブレオマイシン、　３
−　（２−（ｐ−クロロフェニル）エチルアミノ）プロ
ピル）−Ｎ−メチルアミノプロピルアミノ−アミドＮ　
−［３−（２−（ｐ−クロロフェニル）エチルアミノ）
プロピル）−Ｎ−メチルアミノプロピル］プレオマイシ
ンが得られた。

Ｃステップ Ｂステップで得た３−（（Ｓ）−１°−フェニルエチル
）アミノプロピルアミドＮ−［３−（（Ｓ）−１’−フ
ェニルエチル）アミノプロピル］プレオマイシンの含銅
体２８０ｍｇを７１の蒸留水に溶解し、実施例１と同様
にアンバーライトｘＡＤ−２と５％のＥＤＴＡ−２Ｎａ
水溶液を用いて脱銅した。カラム流出液を凍結乾燥して
３−（（Ｓ）−１’−フェニルエチル）アミノプロピル
−アミドＮ−［３−（（Ｓ）−１’−フェニルエチル）
アミノプロピル］プレオマイシンの脱銅体・塩酸塩２５
０ｍｇが白色の無定型粉末で得られた。収率８２％ 臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大は、３３７０．
２８７５．２８４０．１７１５．１６８０．１５８５．
１５００．１４５５．１３８５．１３２０．１２５５．
１１８０．１１４０．１１００．１０８０．１０２０、
９７０、８２０．８８０、８０５．７６０．７３０．６
８５であった。その他の理化学的性状は第２表に示した
通りである。

本実施例と同様に上記Ｂステップで示した化合物も脱銅
体とした。これらの理化学的性状は第２表に示した通り
である。

実施例４ ３−７ミノプロピルージメチルアミン１０．２２ｇをメ
タノール１００１に溶解し氷酢酸１２１で中和した。こ
れにベンズアルデヒド１００ｇを加え、撹拌しつつ８．
３８ｇのシアノ水素化ホウ素ナトリウムを少量ずつくわ
えた。。室温で１６時間反応させ、反応液を濃塩酸でｐ
Ｈを１にする。メタノールを減圧下溜去して残液を水２
０Ｇ＋ａｌ　、クロロフォルム２００１で溶解し水層を
とる。水層をさらにクロロフォルム２００＋ｓｌで抽出
しベンズアルデヒドを除く、ついで水層をＮａＯＨでｐ
Ｈ１２にあわせ、　２００１１１（７）クロロフォルム
で２回抽出し硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下溜
去すると、（３−（Ｎ。

Ｎ−ジメチルアミノ）プロピル）ジベンジルアミンが２
８ｇ得られる。収率８２％。

これを１００ｍ１のアセトニトリルに溶解し、Ｎ−３−
ブロモプロピルフタルイミド２２．２５ｇの１００１ア
セトニトリル溶液を攪拌しながら滴下し、室温で１８時
間撹拌した。薄層クロマトグラフィーでハライドの消失
を認めた。減圧下アセトニトリルを溜去し、残渣を６規
定塩酸２００１に溶解し１１０度８時間加熱して加水分
解した。冷却後析出したフタル酸を濾過して除き、減圧
下濃縮乾固し蒸留水に溶解し、イオン交換樹脂ダウエッ
クス＠−１カラム（Ｃ１型：　２７９ｍ１容）を通過さ
せ流出液を減圧下濃縮乾固すると、３−　（Ｎ−（３−
アミノプロピル）Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノ）プロピル）
−ジベンジルアミン３塩酸塩４３．７ｇを得た。

本化合物の重水中で測定したＰＭＲスペクトルは６２．
０〜２．７ｐｐ１１，４Ｈ（＋）、　　６２．８〜３．
８ｐｐ量、１３Ｈ（＋ｓ）、δ３．３Ｐｐ’＋１，１３
Ｂ（ｓ）、δ４．Ｅｌｐｐｍ、４８（＊）、δ？、？ｐ
ｐｍ、ｌ０Ｈ（Ｓ）のシグナルをしめし上記の構造を有
することを示している。ただしく　）中のｍはマルチプ
レット、Ｓはシングレットを表わす。その他の理化学的
性質は第７表にしめす。

本実施例と同様にして、原料として３−アミノプロピル
−ジエチルアミンを用いることにより、３−（Ｎ−（３
−アミノプロピル）Ｎ、Ｎ−ジエチルアミノ）プロピル
）−ジベンジルアミン３塩酸塩を得た。理化学的性質は
第７表にしめす。

（以下余白） 〜− 一　の　　　　　　　ト　　　　　　　　　　　　　　
ψＱ　　　　　　　　　　　　　　　　６０ｅ’）　　
　　　　　　　　　　　　　　の０　　　　　　　　　
　　　　　　〇 −− 凶トｘＤぺ八　のトＡ、−Ｓ蕾ト 実施例５ ビス（３−７ミノプロビル）−メチルアミン１５０ｇを
水１８０１に溶解しさらにトリエチルアミン５３ｇを加
え、水冷下撹拌しつつこれに８３ｇ（１／３当量）の４
．６−シメチルー２−ｔ−ブチロキシカルボニルチオ−
ピリミジンの２００ｍ　ｌジオキサン溶液を少量づつ加
える。室温で５時間反応させ、ジオキサン、トリエチル
アミンを減圧下溜去して残液を６規定塩酸でｐＨ２とし
、クロロフォルムで洗浄した。水層をＮａＯＨでｐ　Ｈ
１３，５にあわせ。

クロロフォルムで抽出し硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒
を減圧下溜去すると、（３−１−ブチロキシカルボニル
アミノプロビル）−（３−アミノプロピル）メチルアミ
ノが６０ｇ得られる。収率２４％ これを　１３０１のメタノールに溶解し、６Ｍ塩酸メタ
ノールでｐｉ（５とし水冷下撹拌しながらシクロオクチ
ルアルデヒドＨｇ　（２当量）、１０ｇシアノ水素化ホ
ウ素ナトリウムの２０＋ｗｌメタノール溶液を加え室温
で２４時間攪拌した０反応後６Ｍ塩酸−３０ｍ１を加え
過剰の還元剤を分解し、同時に１−ブチロキシ基を除去
した。メタノールを減圧溜去し蒸留水４００１を加えた
のちクロロフォルム３００膳ｌで残ったアルデヒドを抽
出除去し残渣をＮａＯＨでｐＨ１３，５とじクロロフォ
ルム２００１で２回目的物を抽出し硫酸ナトリウムで乾
燥後クロロフォルムを減圧下溜去した。これに蒸留水１
００ｍ１　、濃塩酸５０１を加え、減圧下蒸発乾固する
と、３−　（Ｎ−（３−７ミノプロビル）Ｎメチルアミ
ノプロピル−シクロオクチルメチルアミン・３塩酸塩６
８ｇが得られた。収率７１％。

本化合物の重水中で測定したＰＭＲスペクトルは１．２
〜２．３ｐｐｍ、１５Ｈ（ｍ）　、　２．０〜２．８ｐ
ｐｍ、４Ｈ（ａ＋）、３．０〜３．８ｐｐｍ、１０）１
（ｍ）　、　３．２５ｐｐｍ、３Ｈ（ｓ）のシグナルを
しめし上記の構造を有することを示している。ただしく
　）中は上記と同じ、その他の理化学的性質はすでに第
７表に示した。

本実施例と同様にして、アルデヒドとしてｐ−シアノベ
ンズアルデヒド、Ｐ−クロロフェニルアセトアルデヒド
を用いることにより、夫々３−（Ｎ−（３−７ミノプロ
ビル）Ｎ−メチルアミノ）プロピル）−ｐ−シアノベン
ジルアミン３塩酸塩（収率８１ｚ）、３　　（Ｎ　−（
３−７ミノフｏビル）Ｎ−メチルアミン）プロピル）−
ｐ−クロロフェニルエチルアミン３塩酸塩（収率５１駕
）、を得た。

これらの理化学的性質はすでに第７表に示した。

特許出願人　日本化薬株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ［１１一般式 ［式中ＢＭはプレオマイシン骨格の残基、Ｘは（１）炭
   素数１−１８のアルキル、（２）＊素数１〜１２のアミ
   ノアルキル、（３）置換基として１〜３個のハロゲン原
   子、１〜２個のフェニル、インドリル、酸素原子、値数
   原子または窒素原子を含む５〜６員環の複素環基を有す
   る低級アルキル（置換４ ルキシまたはベンジル、ｘ３は低級アルキル。 フェニル低級アルキル、フェニルまたはハロゲンフェニ
   ルで置換されていてもよいモノまたはジ低級アルキルア
   ミノ低級アルキル、Ｘ４は低級アルキルまたはフェニル
   低級アルキルを示す、）（５）ナフチル　（Ｅｌ）チア
   ゾリル（７）Ｎ−フェニル低級アルキルピペラジニル、
   Ｒはプレオマイシン類の末端アミノ残基を示す］で表わ
   されるアミドＮ置換［式中ＢＭはプレオマイシン骨格の
   残基、Ｘは（１）炭素数１−１８のアルキル、（２）炭
   素数１−１２のアミノアルキル、（３）置換基として１
   〜３個のハロゲン原子、１〜２個のフェニル、インドリ
   ル、酸素原子、硫黄原子または窒素原子を含む５〜６員
   環の複素環基を有する低級アルキル（置換基中のフェニ
   ルまたはインドリルは、更に　ハロゲン原子　または低
   級アルキルで置換されてもよい。）　　　　　　　　　
   　　　　　　Ｘ２■ （４）Ｘｉ−低級アルキル（式中Ｘｉは−Ｎ−Ｘ３２ ルキシまたはベンジル、ｘ３は低級アルキル、フェニル
   低級アルキル、フェニルまたはハロゲンフェニルで置換
   されていてもよいモノまたはジ低級アルキルアミノ低級
   アルキル、ｘ４は低級アルキルまたはフェニル低級アル
   キルを示す。）（５）ナフチル　（８）チアゾリル（７
   ）Ｎ−フェニル低級アルキルピペラジニル１で表わされ
   るアミドＮ置換プレオマイシン酸およびその塩 ［３］式 で表わされるデアミドプレオマイシン酸またはその塩 ［４］一般式 ％式％） それぞれ低級アルキルまたはベンジル、を示す。）を示
   し、Ｂ゛はジ（フェニル低級アルキル）アミノ、シアノ
   フェニル低級アルキルアミノ、又は０５〜Ｃ１ｌのシク
   ロアルキル置換低級アルキルアミノを示す。］で表わさ
   れるアミン