JPS58102157A - 粒子凝集パタ−ン判定方法 - Google Patents
粒子凝集パタ−ン判定方法Info
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- JPS58102157A JPS58102157A JP20082281A JP20082281A JPS58102157A JP S58102157 A JPS58102157 A JP S58102157A JP 20082281 A JP20082281 A JP 20082281A JP 20082281 A JP20082281 A JP 20082281A JP S58102157 A JPS58102157 A JP S58102157A
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は免疫学的凝集反応による凝集パターンの判定方
法に関するものであり、特に血球粒子の凝集パターンか
ら条種の血１１１ｍ１の判定や抗体、抗原の検出を行な
う粒子凝集パターン判定方法に関するものである。
法に関するものであり、特に血球粒子の凝集パターンか
ら条種の血１１１ｍ１の判定や抗体、抗原の検出を行な
う粒子凝集パターン判定方法に関するものである。
例えば、血液厘の判定方法として、時公１１ｉ１１−１
６１９８号公報には、ｌｌＡｌ１がワインカップ状に彎
−した反応容ＩＩｆ：用い、この容器に遠心分離して得
られる被検血球のトＩ囁の浮遊液と特電の抗血清とを定
′量分注し、両ｓｔｍ拌した後、静置し、次に遠沈を行
ない、沈澱した血球ｅ＠りほどくように反応容器な激し
く振動させた後、比較的ゆっくりと振動させて凝集結合
した粒子は迅速に容器の中央に集め、ｔた結合していな
い粒子は溶液中に再び分散させるようにして凝集パター
ンな形威し、これｔＳ＋光検出する方法がｉｉｍされて
いる。第１１１はかかる血液蓋判定方決における凝集パ
ターンの瀾光検出装置の構ｍｔ示すものである。
６１９８号公報には、ｌｌＡｌ１がワインカップ状に彎
−した反応容ＩＩｆ：用い、この容器に遠心分離して得
られる被検血球のトＩ囁の浮遊液と特電の抗血清とを定
′量分注し、両ｓｔｍ拌した後、静置し、次に遠沈を行
ない、沈澱した血球ｅ＠りほどくように反応容器な激し
く振動させた後、比較的ゆっくりと振動させて凝集結合
した粒子は迅速に容器の中央に集め、ｔた結合していな
い粒子は溶液中に再び分散させるようにして凝集パター
ンな形威し、これｔＳ＋光検出する方法がｉｉｍされて
いる。第１１１はかかる血液蓋判定方決における凝集パ
ターンの瀾光検出装置の構ｍｔ示すものである。
この濶光検出装置においては、光ｆｉｌからの光をすり
ガラス愈、隔ＩＩ榎８およびレンズ番な錫でツインカッ
プ状の反応容！１１１の上方から入射させ、反応容＠Ｉ
の下方に、中心−口・ａおよびこれを囲む環状開口６ｂ
を育するマスターな配置し、中心関口６ａを通った光な
第１の受光素子マに入射、させ、環状開口５ｂｔ−通っ
た光をレンズ６および９を介してＩＩｓの受光素子ｌＯ
に入射させるように構成している。かかる漏光検出装置
によれば、反応容器［中の反応液１１の中央部を通り、
ｌ１１の受光素子マに入射した光の光量は反応液１１の
中央部の混濁度を麿わすものとなり、反応液１１の周辺
部を通り、ｌｌｌ１の受光素子１０に入射した光の光量
は反応液１１の周辺部の混濁度を表わすものとなるから
、反応１１１１の中心部な通る光の光量が基準値よりも
減少すると共に肩辺ｇｔ遷る党の光量が基準値よりも増
大すれば、これｔ「凝集」と判断し、中６１Ｂおよび周
辺部【遡る光の光量が基準値に対して変化していなけれ
ば、「非凝集」と判断することができる。
ガラス愈、隔ＩＩ榎８およびレンズ番な錫でツインカッ
プ状の反応容！１１１の上方から入射させ、反応容＠Ｉ
の下方に、中心−口・ａおよびこれを囲む環状開口６ｂ
を育するマスターな配置し、中心関口６ａを通った光な
第１の受光素子マに入射、させ、環状開口５ｂｔ−通っ
た光をレンズ６および９を介してＩＩｓの受光素子ｌＯ
に入射させるように構成している。かかる漏光検出装置
によれば、反応容器［中の反応液１１の中央部を通り、
ｌ１１の受光素子マに入射した光の光量は反応液１１の
中央部の混濁度を麿わすものとなり、反応液１１の周辺
部を通り、ｌｌｌ１の受光素子１０に入射した光の光量
は反応液１１の周辺部の混濁度を表わすものとなるから
、反応１１１１の中心部な通る光の光量が基準値よりも
減少すると共に肩辺ｇｔ遷る党の光量が基準値よりも増
大すれば、これｔ「凝集」と判断し、中６１Ｂおよび周
辺部【遡る光の光量が基準値に対して変化していなけれ
ば、「非凝集」と判断することができる。
しかし、上記の血液櫃判定方法においては、遠沈した反
応容器ｉを激しく振って沈澱した血球な春−ｍ面から分
離させるものであるため、凝集結合力の強いムＢＯｆ、
ａｍＩＩＩの判定には盲動に利用されても、Ｒｈ式血液
ＩＩｔ１１１１定する場合とか、各種の不規則抗体、抗
原やＨＢ８抗原等を検出する・場合のように結合力の弱
い免疫学的凝集反応の場合には、反応容Ｗｓを振動させ
ることにより一旦結合した直球等の粒子が分離し、明確
な凝集パターンが形成できないため利用できない不具合
がある。このよう、な不臭会を解決するため、本願人は
特開＠５５−１４６０４４号公報において、凝集結合力
の強い自然抗体による血液潅はもとより凝集結合力の極
めて弱い不規則抗体による血液ｇｔも十分に判定できる
血液溜判定方法をＩＩＩＩＩＩＬ、た。かかる血液型判
定方法は、阿えば鷹−が円錐形の反応容量を用い、この
反応容器に血＃１厘管判定すべき血液の血球粒子と標準
抗血清試薬とｔ収容して攪拌し、比較的短い時間（約ａ
Ｏ分間）装置した後に凝集パターン【検出して血液ｇｔ
再判定るものである。この方法では、被検血球粒子が抗
血清拭■と反、応する場合には沈降した血球粒子が凝集
結合して、円錐形底置に雪のように薄く堆積してｍ−堆
積パターンを形成するが、血球と抗＊＊試薬とが反応し
ない場合には血球粒子繻凝集曽ず、離散したまま沈降し
、円錐形Ｉｓ［１に到達するとそのｌｌＩ［Ｉを転がり
落ち、円錐底面の中央部に集合して集積パターンを形成
する＠したがって、円錨鷹−にできる抗血清試薬との反
応の有無による沈降血球粒子のパターンの相違【光電的
に検出することにより、血液＃１【判定することができ
る。第Ｓ図はかかる血装置判定方法における凝集パター
ンの瀾光検出装置の構鴫な示すものである０党１ランプ
ｌｌから放射される光をコリメータレンズ１ｍで平行光
束とし、円錐形置部を育する反応容＠ｉｓに照射する。
応容器ｉを激しく振って沈澱した血球な春−ｍ面から分
離させるものであるため、凝集結合力の強いムＢＯｆ、
ａｍＩＩＩの判定には盲動に利用されても、Ｒｈ式血液
ＩＩｔ１１１１定する場合とか、各種の不規則抗体、抗
原やＨＢ８抗原等を検出する・場合のように結合力の弱
い免疫学的凝集反応の場合には、反応容Ｗｓを振動させ
ることにより一旦結合した直球等の粒子が分離し、明確
な凝集パターンが形成できないため利用できない不具合
がある。このよう、な不臭会を解決するため、本願人は
特開＠５５−１４６０４４号公報において、凝集結合力
の強い自然抗体による血液潅はもとより凝集結合力の極
めて弱い不規則抗体による血液ｇｔも十分に判定できる
血液溜判定方法をＩＩＩＩＩＩＬ、た。かかる血液型判
定方法は、阿えば鷹−が円錐形の反応容量を用い、この
反応容器に血＃１厘管判定すべき血液の血球粒子と標準
抗血清試薬とｔ収容して攪拌し、比較的短い時間（約ａ
Ｏ分間）装置した後に凝集パターン【検出して血液ｇｔ
再判定るものである。この方法では、被検血球粒子が抗
血清拭■と反、応する場合には沈降した血球粒子が凝集
結合して、円錐形底置に雪のように薄く堆積してｍ−堆
積パターンを形成するが、血球と抗＊＊試薬とが反応し
ない場合には血球粒子繻凝集曽ず、離散したまま沈降し
、円錐形Ｉｓ［１に到達するとそのｌｌＩ［Ｉを転がり
落ち、円錐底面の中央部に集合して集積パターンを形成
する＠したがって、円錨鷹−にできる抗血清試薬との反
応の有無による沈降血球粒子のパターンの相違【光電的
に検出することにより、血液＃１【判定することができ
る。第Ｓ図はかかる血装置判定方法における凝集パター
ンの瀾光検出装置の構鴫な示すものである０党１ランプ
ｌｌから放射される光をコリメータレンズ１ｍで平行光
束とし、円錐形置部を育する反応容＠ｉｓに照射する。
この光束は反応容−ｓ８の扇−に存在する自球粒子の沈
降パターンによって変調される。この底−の像を対愉レ
ンズｓ４により受光装置！墨上に結像する。この受光装
置ａＩｉはその平Ｉ１図【も示すように円錐形底−の中
央部のＩＩ【受光する受光素子ｓ６と周辺部の像を受光
するリング状の受光素子１マとより成り、これらの出力
な蓋動噌輻器■・に供給する。血球の凝集結合が行なわ
れると、その膳−には一様に血球粒子が堆積するから受
光素子ｓ６およびＳマには血糟堆檀層により幾分遣「ら
れて弱い光が入射し、これら素子からの出力信号の振幅
は中一度で大きさは等しくなり、差動増幅＠Ｈｓの出力
は低レベルとなる。これに対し、血球の結合が行なわれ
ないときはその底面には中心部に自球粒子が集合したパ
ターンが形成されるから受光素子ｓ６には殆んど党が入
射せず、その出力信号の損−は小ざいが、受光素子３マ
には強い光が入射し、その出力信号の振幅は大きくなり
、−差動増、ｍ−ｓＩの出力は高レベルとなる。したが
って、差動増幅−ｓＩの出力信号な判定回路１９におい
て所定の基準値と比較することにより、「凝集」、「非
凝集」を判定することができ、この判窺結Ｍｅプリンタ
８０に送ってプリンドアストすることができる。
降パターンによって変調される。この底−の像を対愉レ
ンズｓ４により受光装置！墨上に結像する。この受光装
置ａＩｉはその平Ｉ１図【も示すように円錐形底−の中
央部のＩＩ【受光する受光素子ｓ６と周辺部の像を受光
するリング状の受光素子１マとより成り、これらの出力
な蓋動噌輻器■・に供給する。血球の凝集結合が行なわ
れると、その膳−には一様に血球粒子が堆積するから受
光素子ｓ６およびＳマには血糟堆檀層により幾分遣「ら
れて弱い光が入射し、これら素子からの出力信号の振幅
は中一度で大きさは等しくなり、差動増幅＠Ｈｓの出力
は低レベルとなる。これに対し、血球の結合が行なわれ
ないときはその底面には中心部に自球粒子が集合したパ
ターンが形成されるから受光素子ｓ６には殆んど党が入
射せず、その出力信号の損−は小ざいが、受光素子３マ
には強い光が入射し、その出力信号の振幅は大きくなり
、−差動増、ｍ−ｓＩの出力は高レベルとなる。したが
って、差動増幅−ｓＩの出力信号な判定回路１９におい
て所定の基準値と比較することにより、「凝集」、「非
凝集」を判定することができ、この判窺結Ｍｅプリンタ
８０に送ってプリンドアストすることができる。
しかし、かかる血液厘判定方法においても、凝集するパ
ターンの形態或いは形状によっては凝集パターンの判定
が困■な場合がある。１ｇち、ｌＩＳパターンは凝集す
る過程において、種々の形態、形状の推移をもって凝集
の方向に向うものであり、最終的に凝集した状態は必ず
しも均一的な凝集形ｓｒｔ示さない。その理由としては
、反応容器に襞・検体の浮遊液と抗血清とを定置分注し
て攪拌した後、静置して最終的に凝集成分を上記容器の
Ｉ！ｆに集めて凝集パターンを判定する駅であるが、成
分によっては凝集くずれを起す場合がしばしばある・轡
にムＢＯ式、血筐判定法の裏検査の場合に、＊＊体によ
っては凝集パターン周辺部がめくれ牟り、ずれ落ちたり
する場合があり、血液瀧の判定をボーにすることが実験
鎗に見出されている。これら、諸現象は被検体そのもの
によるものと容置自体、或いは抗血清、被検体と抗血清
のメカニズム、！に相対的な一風龜の影響によるものと
ＪＩＩｆＩＩされる・然し乍ら、上記の現象の解明は現
在の技術水準をもってしてもできず、又ｗＩ！明の通論
があるとしても実験的な纏濶の域を出ていない。更に。
ターンの形態或いは形状によっては凝集パターンの判定
が困■な場合がある。１ｇち、ｌＩＳパターンは凝集す
る過程において、種々の形態、形状の推移をもって凝集
の方向に向うものであり、最終的に凝集した状態は必ず
しも均一的な凝集形ｓｒｔ示さない。その理由としては
、反応容器に襞・検体の浮遊液と抗血清とを定置分注し
て攪拌した後、静置して最終的に凝集成分を上記容器の
Ｉ！ｆに集めて凝集パターンを判定する駅であるが、成
分によっては凝集くずれを起す場合がしばしばある・轡
にムＢＯ式、血筐判定法の裏検査の場合に、＊＊体によ
っては凝集パターン周辺部がめくれ牟り、ずれ落ちたり
する場合があり、血液瀧の判定をボーにすることが実験
鎗に見出されている。これら、諸現象は被検体そのもの
によるものと容置自体、或いは抗血清、被検体と抗血清
のメカニズム、！に相対的な一風龜の影響によるものと
ＪＩＩｆＩＩされる・然し乍ら、上記の現象の解明は現
在の技術水準をもってしてもできず、又ｗＩ！明の通論
があるとしても実験的な纏濶の域を出ていない。更に。
１１１１ｇ抗原を検査するＲ−Ｐｉｔム決や梅毒抗体を
検査するＴ−ＰＨＡ法を行なう−５も、１１１ｇ抗原や
梼−抗体が微量で凝集力が弱いので凝集結合パターンが
周辺部からくずれ易く、パターンが明確でな（なること
がしばしばある。
検査するＴ−ＰＨＡ法を行なう−５も、１１１ｇ抗原や
梼−抗体が微量で凝集力が弱いので凝集結合パターンが
周辺部からくずれ易く、パターンが明確でな（なること
がしばしばある。
このように凝集くずれを起こすと、本来「凝集」、であ
っても周辺部のパターンのくずれにより第３・図におい
て受光素子１６と３１との出力に比較的大きな差が生じ
るため、「非凝集」と誤ったＩＰ１１電緒畢が出力され
たり、「判定不能」と判断される場合がある。
っても周辺部のパターンのくずれにより第３・図におい
て受光素子１６と３１との出力に比較的大きな差が生じ
るため、「非凝集」と誤ったＩＰ１１電緒畢が出力され
たり、「判定不能」と判断される場合がある。
一方、従来の粒子凝集パターン判定装置として、特電ｗ
ｓ１１６−１８９（Ｈ号公報に開示されたものがある＊
１１ ａ ｓｏはかかる粒子凝集パターン判定装置に
おける漏光検出装置のＷ！部の構成な示會斜視図である
。この濶光検出装置は、多黴偏の反応窪み８０１マトリ
ツクス状に形成した透明部材からなるマイクロプレート
８１を矢椿ムで示す阿えばＸ輪方向に間欠的に移送する
と共にマイクロプレー）８１の１１１１方向と直交する
Ｙ軸方向に光１１８１と１傭の受光ｅｔａａ ａ 、８
８ｋ）、ａａｏとｔ−ｓ的に保持したアーム８４を間欠
的に移動させて反応−４ｓＯのｍ歯に１ｌｌｉｌ成され
た凝集パターンを検出するものである。凝集パターンの
検出は１値の受光＠ ＠ Ｓ Ｓ ａ〜８８０に対応す
る８置の反応ｌＩみｅｌ′ｆロックとして同時に検出し
、アーム８４憂・１ブロツクＩＩＹ軸方向に間欠的に移
送して検出する・ しかし、かかる漏光検出装置においても上述したような
凝集くずれが発生すると談判定が生じると共に、反応ｉ
１みの中心と各受光装置の中心とが正確に一致するよう
にマイタロブレート８１およびアーム８４ｔ−それぞれ
Ｘ軸方向およびＹ軸方向に移送するのが困■なため、凝
集パターンの条種形態に光分に対応できず、このため瀾
電精度の低下をきたすと共に正規の判定結果に悪＊＠ｅ
及ぼす不具合がある口 本発明の目的は、上述した種々の不具合を解決し、走査
機構のズレや凝集結合力の強弱の如何にかかわらず、か
つ微量の粒子により凝集される免疫学的凝集反応による
凝集パターンな安定、且つ正確に判定できる粒子凝集パ
ターン判定方法を提供するものである。
ｓ１１６−１８９（Ｈ号公報に開示されたものがある＊
１１ ａ ｓｏはかかる粒子凝集パターン判定装置に
おける漏光検出装置のＷ！部の構成な示會斜視図である
。この濶光検出装置は、多黴偏の反応窪み８０１マトリ
ツクス状に形成した透明部材からなるマイクロプレート
８１を矢椿ムで示す阿えばＸ輪方向に間欠的に移送する
と共にマイクロプレー）８１の１１１１方向と直交する
Ｙ軸方向に光１１８１と１傭の受光ｅｔａａ ａ 、８
８ｋ）、ａａｏとｔ−ｓ的に保持したアーム８４を間欠
的に移動させて反応−４ｓＯのｍ歯に１ｌｌｉｌ成され
た凝集パターンを検出するものである。凝集パターンの
検出は１値の受光＠ ＠ Ｓ Ｓ ａ〜８８０に対応す
る８置の反応ｌＩみｅｌ′ｆロックとして同時に検出し
、アーム８４憂・１ブロツクＩＩＹ軸方向に間欠的に移
送して検出する・ しかし、かかる漏光検出装置においても上述したような
凝集くずれが発生すると談判定が生じると共に、反応ｉ
１みの中心と各受光装置の中心とが正確に一致するよう
にマイタロブレート８１およびアーム８４ｔ−それぞれ
Ｘ軸方向およびＹ軸方向に移送するのが困■なため、凝
集パターンの条種形態に光分に対応できず、このため瀾
電精度の低下をきたすと共に正規の判定結果に悪＊＠ｅ
及ぼす不具合がある口 本発明の目的は、上述した種々の不具合を解決し、走査
機構のズレや凝集結合力の強弱の如何にかかわらず、か
つ微量の粒子により凝集される免疫学的凝集反応による
凝集パターンな安定、且つ正確に判定できる粒子凝集パ
ターン判定方法を提供するものである。
本発明幡、底面の少く共−ｇを傾斜面とした反応容−に
収容した反応＊＊中の粒子が沈降して麿−にＩ＃成ぎれ
る粒子凝集パターンを光電的に検出判定するに当たり、
容ＩＩ底聞を一様に照明し、この烏−の像な結像レンズ
により複機の受光素子【有する受光装置の受光（至）に
結像し、前記凝集パターンの像を受光−に対して走査さ
せ、受光装置の複黴の受光素子から得られる出力偏量な
遣宣暢珊した後、少く共一つの基準値と比較し、その比
較結果により凝集パターンの判定な行なうことを特徴と
するものである。
収容した反応＊＊中の粒子が沈降して麿−にＩ＃成ぎれ
る粒子凝集パターンを光電的に検出判定するに当たり、
容ＩＩ底聞を一様に照明し、この烏−の像な結像レンズ
により複機の受光素子【有する受光装置の受光（至）に
結像し、前記凝集パターンの像を受光−に対して走査さ
せ、受光装置の複黴の受光素子から得られる出力偏量な
遣宣暢珊した後、少く共一つの基準値と比較し、その比
較結果により凝集パターンの判定な行なうことを特徴と
するものである。
以下ｌ１１ｒＩＩｒｔＩＩＪｌｌＩシて本発明の詳細な
説明する。
説明する。
謬４ｍは本発明方法な実施する曽子凝集パターン判ｉｉ
！装置の一間の構成ン示す斜？ｌＷＪである。本例では
鷹＃ｊＪを円錨形状に傾斜させた反応容器４０ｔａｇに
マトリックス状に多歇配列層威した透明部材より成るマ
イクロプレート＊ｘｔｊｌい、このマイタロプレー）４
１の各反応容−１ｅＣＩｅ子を書む被検液を収容して凝
集反応【行なわせる。マイクロプレー）４１は、本例で
はＸ軸方向に１０個、Ｘ軸と直交するＹ軸方向に１．１
傭の会計ＩＳＯ個の反応容Ｓを具え、Ｙ軸方向の１１側
の反応容一番Ｏに同一検体ｅ収容する。したがって、１
つのマイタロブレート４１は１０検体１１チャンネルの
分析を行なうことになる。このマイクロプレー）４１は
、１示しない移送手段によりＸ軸方向の反応容器４ｏの
配列ピッチに応じてＸ軸方向に間欠的に移送する。マイ
クロブルー）４１の所定の停止位置にはＸ軸方向に往復
移動可能なアーム４１にマイクロプレー）４１を挾むよ
うに対向して投光部１畠および受光部４４を一体に保持
し、このアーム４１１マイクロプレート４１（ＤＩＸ軸
方向間欠移送に同期して交互に往動および復動ざ曾るこ
とにより１Ｇ検体１１チャンネルの反応容器４０を順次
走査する。
！装置の一間の構成ン示す斜？ｌＷＪである。本例では
鷹＃ｊＪを円錨形状に傾斜させた反応容器４０ｔａｇに
マトリックス状に多歇配列層威した透明部材より成るマ
イクロプレート＊ｘｔｊｌい、このマイタロプレー）４
１の各反応容−１ｅＣＩｅ子を書む被検液を収容して凝
集反応【行なわせる。マイクロプレー）４１は、本例で
はＸ軸方向に１０個、Ｘ軸と直交するＹ軸方向に１．１
傭の会計ＩＳＯ個の反応容Ｓを具え、Ｙ軸方向の１１側
の反応容一番Ｏに同一検体ｅ収容する。したがって、１
つのマイタロブレート４１は１０検体１１チャンネルの
分析を行なうことになる。このマイクロプレー）４１は
、１示しない移送手段によりＸ軸方向の反応容器４ｏの
配列ピッチに応じてＸ軸方向に間欠的に移送する。マイ
クロブルー）４１の所定の停止位置にはＸ軸方向に往復
移動可能なアーム４１にマイクロプレー）４１を挾むよ
うに対向して投光部１畠および受光部４４を一体に保持
し、このアーム４１１マイクロプレート４１（ＤＩＸ軸
方向間欠移送に同期して交互に往動および復動ざ曾るこ
とにより１Ｇ検体１１チャンネルの反応容器４０を順次
走査する。
ｌｌｌｌ５ｗはＩＩ４ｗＩに示す投光部１８および受光
部一番の構成【示すＳ図である。投光部４ｓは光源ラン
プ４ｓからの光により熱吸収フィルタ４６、コンデンサ
レンズ４テおよび照明レンズ４８ｒｔ１１てマイクロプ
レー）４１の反応容ｌ１１４ｏの麿Ｗｔ−橡藤明するよ
う構成し、受光部４４は一様服明された反応容器４０の
底（支）のａｔ結結像レンズ−９経て受光装置ｌｓｏで
受光するよう構成する。受光装置ｌｓＯは平面図【も示
すように同心円状に分離して設けた８個の受光素子１１
＃よび５ｉｔｅもって構成し、これら受光素子！！１．
ｌ１ｌｖ光電変換出力は、それぞれ１輻器！１１．Ｉ４
で増幅した後、アナ四ダスイッチ！ｉ５およびム／Ｄ変
換器ｉ６ｆ：ｉｉてｏｐｔｙ ”ｓフに取込む。
部一番の構成【示すＳ図である。投光部４ｓは光源ラン
プ４ｓからの光により熱吸収フィルタ４６、コンデンサ
レンズ４テおよび照明レンズ４８ｒｔ１１てマイクロプ
レー）４１の反応容ｌ１１４ｏの麿Ｗｔ−橡藤明するよ
う構成し、受光部４４は一様服明された反応容器４０の
底（支）のａｔ結結像レンズ−９経て受光装置ｌｓｏで
受光するよう構成する。受光装置ｌｓＯは平面図【も示
すように同心円状に分離して設けた８個の受光素子１１
＃よび５ｉｔｅもって構成し、これら受光素子！！１．
ｌ１ｌｖ光電変換出力は、それぞれ１輻器！１１．Ｉ４
で増幅した後、アナ四ダスイッチ！ｉ５およびム／Ｄ変
換器ｉ６ｆ：ｉｉてｏｐｔｙ ”ｓフに取込む。
本例では各反応容器４０の底面を円一層としたから、彼
検液が凝集結合した場合には第６図ムに示すように反応
容器４０のｗｓｍに一様堆積パターン・１が形成され、
凝集結合しない場合には第６１１Ｂに示すように円錐形
底面の中央部に集積パターン６Ｓが形成される。、した
がって、アーム４１のＸ軸方向の移動により投光部４８
および受光部４４を一体に移動して反応容−４ｏｔａ査
すると、受光素子！Ｉｌからは第６ＷＪムの一機堆積パ
ターンの場合にはマイクロプレート４１の厚みが反応容
１１１４０の中央部に向けて薄くなっているから、第テ
閣ムに示すように反応１１４１４０の中央部近傍におい
て出力が大きくなる光電変換出カバターンが得られ、ま
た第６ｖ！ＪＢの集積パターンの場合には箇マＩＩＢに
示すように反応容１Ｉ４０の中央部近傍において出力が
小ざくなる光電変換出カバターンが得られる。
検液が凝集結合した場合には第６図ムに示すように反応
容器４０のｗｓｍに一様堆積パターン・１が形成され、
凝集結合しない場合には第６１１Ｂに示すように円錐形
底面の中央部に集積パターン６Ｓが形成される。、した
がって、アーム４１のＸ軸方向の移動により投光部４８
および受光部４４を一体に移動して反応容−４ｏｔａ査
すると、受光素子！Ｉｌからは第６ＷＪムの一機堆積パ
ターンの場合にはマイクロプレート４１の厚みが反応容
１１１４０の中央部に向けて薄くなっているから、第テ
閣ムに示すように反応１１４１４０の中央部近傍におい
て出力が大きくなる光電変換出カバターンが得られ、ま
た第６ｖ！ＪＢの集積パターンの場合には箇マＩＩＢに
示すように反応容１Ｉ４０の中央部近傍において出力が
小ざくなる光電変換出カバターンが得られる。
第マ図ムおよび１に示す出カバターン、すなわち反応容
１１１１４０の直径の始点ｌから終点ｉｔでの光電変換
出力は全てすンプリングして０ＰＵＩテに取込むことも
できるが、本例では瀾゛定精度の向上と、造査４１６ｓ
時間の短縮【考慮し、反応容器４゜のＩｔ［中心部を中
心とする任意の走査区間ｎｌからｎｌｔ＃定し、この造
査区間内で任意の等間隔（１ｓ−１００μ） ｔＤ ｎ
１１４０位置Ｃ位置る受光素子ＩＩの光電変換出力と
、受光素子Ｂｌが上記各位置に位置するときの受光素子
５３の光電変換出力とｔ＋れぞれサンプリングしてＯＰ
Ｕ！ｌテに取込む。、なお、受光素子Ｉ １”、 ＠
”’ｌの光電変換出力のサンプリング傭歇ｎは測定精度
、夏応容４１１４０の直径、経験−的な凝集パターンの
形態、走査区間、試薬等の諸東件を考慮して予じめ決定
される゛ものであり、例えば反応容９４０の直径がＳ−
〜１０■前後であれば数十個〜百傭とすることができる
。
１１１１４０の直径の始点ｌから終点ｉｔでの光電変換
出力は全てすンプリングして０ＰＵＩテに取込むことも
できるが、本例では瀾゛定精度の向上と、造査４１６ｓ
時間の短縮【考慮し、反応容器４゜のＩｔ［中心部を中
心とする任意の走査区間ｎｌからｎｌｔ＃定し、この造
査区間内で任意の等間隔（１ｓ−１００μ） ｔＤ ｎ
１１４０位置Ｃ位置る受光素子ＩＩの光電変換出力と
、受光素子Ｂｌが上記各位置に位置するときの受光素子
５３の光電変換出力とｔ＋れぞれサンプリングしてＯＰ
Ｕ！ｌテに取込む。、なお、受光素子Ｉ １”、 ＠
”’ｌの光電変換出力のサンプリング傭歇ｎは測定精度
、夏応容４１１４０の直径、経験−的な凝集パターンの
形態、走査区間、試薬等の諸東件を考慮して予じめ決定
される゛ものであり、例えば反応容９４０の直径がＳ−
〜１０■前後であれば数十個〜百傭とすることができる
。
以下本実施阿の判定操作を第Ｓｗｌに示すフローチャー
）ｒｔ参照しながら説明する。なお、以下の説明では受
光素子６１の光電変換出力を中心部データと称し、受光
素子ｌ５ｓｖ光電変換出力を周辺部データと称する。
）ｒｔ参照しながら説明する。なお、以下の説明では受
光素子６１の光電変換出力を中心部データと称し、受光
素子ｌ５ｓｖ光電変換出力を周辺部データと称する。
先ず、ｎ傭の中心部データと周辺部データとを取込んだ
後、中心部データに基いＳこの中心部データのパターン
が「上に凸」（第マーム）か、「下に凸」（第マ図Ｂ）
かを判定する０この判定はｎ１１１回の中心部データム
と（ｎｘ ＋ ａ ）書目（−は−以下の任意の歌）の
中心部データ１とな比較すると共に、ｎ、書目の中心部
デーＩＩＯと（ｎ、−４’）番１１（＆’ −ｇ ｔ
タａｔｉｉｎ”ＩＦ）ｆＥ意ノ黴）の中心部データＤと
ｅ比較し、ム＜１．０＜Ｄのときは「上に凸」、ム＞Ｂ
、Ｏ＞Ｄのと會は「下に凸」と判定し、ム＜Ｂ 、ＯＤ
Ｄのとき、會タハム＞Ｂ 、Ｏ＜Ｄのときは以下の全て
の判定な不一とする（最終的判定を「！」とする）。
後、中心部データに基いＳこの中心部データのパターン
が「上に凸」（第マーム）か、「下に凸」（第マ図Ｂ）
かを判定する０この判定はｎ１１１回の中心部データム
と（ｎｘ ＋ ａ ）書目（−は−以下の任意の歌）の
中心部データ１とな比較すると共に、ｎ、書目の中心部
デーＩＩＯと（ｎ、−４’）番１１（＆’ −ｇ ｔ
タａｔｉｉｎ”ＩＦ）ｆＥ意ノ黴）の中心部データＤと
ｅ比較し、ム＜１．０＜Ｄのときは「上に凸」、ム＞Ｂ
、Ｏ＞Ｄのと會は「下に凸」と判定し、ム＜Ｂ 、ＯＤ
Ｄのとき、會タハム＞Ｂ 、Ｏ＜Ｄのときは以下の全て
の判定な不一とする（最終的判定を「！」とする）。
「上に凸」と判定されたときは次に中心部データの最大
値ｅ検出し、また「下に凸」と判定され、たときは次に
中心ｌデータの最小値を検出するＯ最大値の検出は先ず
ｎ個の中心部データのうち最大値（ＢＨｒｍａｘ ）
ｌ検出すると共にＲ鳶ｗａｘ ｒｔ与える位置での周辺
部データ（Ｒ１）を求める。ここで最大値が３個以上存
在する場合は、（−７−１３又は（Ａ−ｓ ） ＃ （
−！！−＋１ ）又は（ｉ ＋ ｓ ）番目に１
ｍ 近い方（近さの度合が同一のときはサンプリング順序の
若い方、例えば１香醐と（Ｓ ＋ Ｓ ）番目が最大値
で等しい時は１番目）とする。本例ではＲ冨膿＆Ｘ 、
ＩＲＦとこれと隣接する両端のサンプリング位置ｔ’
ノデータ（各々計８コ）とで平均をとりそのＩ［を１党
データとして、得られたデータを中心＠ ｕｍａｘ 、
肩ＥｐＷｉ Ｒｙｍａｘとする。また、最小値の検出は
上記「最大値検出」と同様にｎ個の中心部データから最
小値（１ｍｍ１ｎ ）とその位置での周辺部デー＃（Ｒ
Ｆ）とを検出すると共にその両端の位−での各々畠ツの
データで中心部、周辺部の夫々の平均を求めて測光デー
タとし、同様に１１１１１１ｎ 、 ｌｌＦｍ１ｉｎと
する。
値ｅ検出し、また「下に凸」と判定され、たときは次に
中心ｌデータの最小値を検出するＯ最大値の検出は先ず
ｎ個の中心部データのうち最大値（ＢＨｒｍａｘ ）
ｌ検出すると共にＲ鳶ｗａｘ ｒｔ与える位置での周辺
部データ（Ｒ１）を求める。ここで最大値が３個以上存
在する場合は、（−７−１３又は（Ａ−ｓ ） ＃ （
−！！−＋１ ）又は（ｉ ＋ ｓ ）番目に１
ｍ 近い方（近さの度合が同一のときはサンプリング順序の
若い方、例えば１香醐と（Ｓ ＋ Ｓ ）番目が最大値
で等しい時は１番目）とする。本例ではＲ冨膿＆Ｘ 、
ＩＲＦとこれと隣接する両端のサンプリング位置ｔ’
ノデータ（各々計８コ）とで平均をとりそのＩ［を１党
データとして、得られたデータを中心＠ ｕｍａｘ 、
肩ＥｐＷｉ Ｒｙｍａｘとする。また、最小値の検出は
上記「最大値検出」と同様にｎ個の中心部データから最
小値（１ｍｍ１ｎ ）とその位置での周辺部デー＃（Ｒ
Ｆ）とを検出すると共にその両端の位−での各々畠ツの
データで中心部、周辺部の夫々の平均を求めて測光デー
タとし、同様に１１１１１１ｎ 、 ｌｌＦｍ１ｉｎと
する。
以上の操作により検出した測光データは受光素子１＄１
，５１の受光ｆＩＩの違いによりスパンが等しくないの
で、両スパンが等しくなるように補正定置な乗じてＨｍ
ａｘ 、 ＦＩｌ＆！または冨ｗｉｎ ｓ Ｆ鳳ｉｎ
を求める。
，５１の受光ｆＩＩの違いによりスパンが等しくないの
で、両スパンが等しくなるように補正定置な乗じてＨｍ
ａｘ 、 ＦＩｌ＆！または冨ｗｉｎ ｓ Ｆ鳳ｉｎ
を求める。
次に上記の補正処理した測光デー＃鳶鳳Ｕ。
！鳳＆Ｘ＊たは］Ｃｌ１ｉｎ 、Ｆｌｌｉｎが予じめ
設電したり、 Ｌｉｍ１ｔと■、Ｌｉｍ１ｔ （第７図
ム、Ｂ参肩）の所定の範■にあるか否か【比較し、 Ｌ、Ｌｉｍ１ｔ ＜ Ｅｍａｘ 、 Ｆｍａｘ會たは１
Ｗｉｎ 、 Ｆｌｌｉｎ ＜■、Ｌｉｍ１ｔ のときは次に判定間歇Ｇの計算に移り、罵１１ａＸ、７
！ｌ＆Ｘ≧Ｈ，Ｌｉｍ１ｔ ま”たは鳶ｍｕ ＊ ｔａ
ｂ≦Ｌ、Ｌｉｍ１ｔの七きは最終判定結果な「↑」とす
る。
設電したり、 Ｌｉｍ１ｔと■、Ｌｉｍ１ｔ （第７図
ム、Ｂ参肩）の所定の範■にあるか否か【比較し、 Ｌ、Ｌｉｍ１ｔ ＜ Ｅｍａｘ 、 Ｆｍａｘ會たは１
Ｗｉｎ 、 Ｆｌｌｉｎ ＜■、Ｌｉｍ１ｔ のときは次に判定間歇Ｇの計算に移り、罵１１ａＸ、７
！ｌ＆Ｘ≧Ｈ，Ｌｉｍ１ｔ ま”たは鳶ｍｕ ＊ ｔａ
ｂ≦Ｌ、Ｌｉｍ１ｔの七きは最終判定結果な「↑」とす
る。
判定間歇Ｇは本阿では補正４１６１Ｉシた中心ｌデータ
璽と周辺部データ１との比Ｇ−１／罵１ｍい、等愉用い
ることもできる。
璽と周辺部データ１との比Ｇ−１／罵１ｍい、等愉用い
ることもできる。
次に上記判定間歇Ｇの値と予じめ駿電した高および低レ
ベルの閾値Ｈ，ＴｈｒおよｃＬＪ社とｅ比較、し、Ｇ≧
Ｈ，Ｔｈｒすなわち「非凝集」のとき韓「−」、Ｇ≦Ｌ
、Ｔｈｒすなわち「凝集」のときは「＋」、Ｌ、Ｔｈｒ
＜ Ｇ ＜ Ｈ，Ｔｈｒ ノときは「！」ト判１ｉ［
Ｔ ；６ ｅなお閾値■、’ｒｈｒ 、 Ｌ、テばはＩ
ｌ、Ｔｈｒをあまり高くすると判定「＋」の精度は高く
なる反面、判定不能ｒ？Ｊｌｆｌ確率カ高くなり、また
り、’ｌ’ｈｒ ｒｔあまり低くすると判定「−」の精
度は高くなる反面、同機に判定不能「！」が出る確率が
高くなるから、使用する判定間歇Ｇや試薬、検体状況、
周囲環境（温度、湿度）、判定精度等を考慮して適切に
設定する。
ベルの閾値Ｈ，ＴｈｒおよｃＬＪ社とｅ比較、し、Ｇ≧
Ｈ，Ｔｈｒすなわち「非凝集」のとき韓「−」、Ｇ≦Ｌ
、Ｔｈｒすなわち「凝集」のときは「＋」、Ｌ、Ｔｈｒ
＜ Ｇ ＜ Ｈ，Ｔｈｒ ノときは「！」ト判１ｉ［
Ｔ ；６ ｅなお閾値■、’ｒｈｒ 、 Ｌ、テばはＩ
ｌ、Ｔｈｒをあまり高くすると判定「＋」の精度は高く
なる反面、判定不能ｒ？Ｊｌｆｌ確率カ高くなり、また
り、’ｌ’ｈｒ ｒｔあまり低くすると判定「−」の精
度は高くなる反面、同機に判定不能「！」が出る確率が
高くなるから、使用する判定間歇Ｇや試薬、検体状況、
周囲環境（温度、湿度）、判定精度等を考慮して適切に
設定する。
以上述べたように本発明においては、底−の少く共−ｇ
ｔ傾斜−とした反応容器のｍｍｃ形成される凝集パター
ンの像を、複数の受光素子を有する受光装置の受光−に
対して走査させ、この受光装置の線数の受光素子からの
出力信号に基いて凝集パターンを判定するようにしたか
ら、凝集くずれが生じても、また反応容器底−における
凝集パターンがいかなる位置、例えば凝集パターンの中
心と容−車線中心とがずれている場合や凝集パタ・−ン
が鷹−の一方向に片寄ってｒｉｓ成ξれた場合でも凝集
パターンを高精度で判定することができる・
ｔ傾斜−とした反応容器のｍｍｃ形成される凝集パター
ンの像を、複数の受光素子を有する受光装置の受光−に
対して走査させ、この受光装置の線数の受光素子からの
出力信号に基いて凝集パターンを判定するようにしたか
ら、凝集くずれが生じても、また反応容器底−における
凝集パターンがいかなる位置、例えば凝集パターンの中
心と容−車線中心とがずれている場合や凝集パタ・−ン
が鷹−の一方向に片寄ってｒｉｓ成ξれた場合でも凝集
パターンを高精度で判定することができる・
第１図、第Ｓ図および第ｓｅａは量れぞれ従来の凝集パ
ターンの測光検出装置の構虐管示す線図、第４ＷＩおよ
び第５ＷＩは本発明方法管実施する粒子凝集パターン判
定装置の一例の構成を示す線図、第６＠ムおよびＢは反
応容ＩＩＩｆａｌｌに層成される線機堆積パターンおよ
び集積パターン費示すＳ図、第′マ閣ムおよびＢはＳＳ
図に示す受光装置の出カバターンな示すＳ図、 １１８図は本発明判定方法の一同の順次の操作な説明す
るためのフローチャートでアル。 ４０・・・反応容４１１．．４１・・・マイクロプレー
ト、４ ｍ ・７− Ａ、 ４８・・・投ｚｇ、
４４・・・ｌ＆党部、 ４ｉ・・・党１、番・・
・・龜吸収フィルタ、鳴マ・・・コンプレ、讐レンズ、
番＄・・・照明レンズ、 −９・・・結億レンズ、６
０・・・受光装置、 ５１．１１・・・受光素子、
ｉａ、ｉ４・・・増幅器、 ｉＩ・・・アナ習ダスイッ
チ、４６・・・Ａ／Ｄ変換器、 ６ツ・・・ＯＰＵ。 −１・・・一様堆積パターン覧 ６ｓ・・・集積パターン。 特許出願人 オリンパス光学工業株式金４社゛
、 第１図 ３ 第５図
ターンの測光検出装置の構虐管示す線図、第４ＷＩおよ
び第５ＷＩは本発明方法管実施する粒子凝集パターン判
定装置の一例の構成を示す線図、第６＠ムおよびＢは反
応容ＩＩＩｆａｌｌに層成される線機堆積パターンおよ
び集積パターン費示すＳ図、第′マ閣ムおよびＢはＳＳ
図に示す受光装置の出カバターンな示すＳ図、 １１８図は本発明判定方法の一同の順次の操作な説明す
るためのフローチャートでアル。 ４０・・・反応容４１１．．４１・・・マイクロプレー
ト、４ ｍ ・７− Ａ、 ４８・・・投ｚｇ、
４４・・・ｌ＆党部、 ４ｉ・・・党１、番・・
・・龜吸収フィルタ、鳴マ・・・コンプレ、讐レンズ、
番＄・・・照明レンズ、 −９・・・結億レンズ、６
０・・・受光装置、 ５１．１１・・・受光素子、
ｉａ、ｉ４・・・増幅器、 ｉＩ・・・アナ習ダスイッ
チ、４６・・・Ａ／Ｄ変換器、 ６ツ・・・ＯＰＵ。 −１・・・一様堆積パターン覧 ６ｓ・・・集積パターン。 特許出願人 オリンパス光学工業株式金４社゛
、 第１図 ３ 第５図
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、底面の少く共一部を傾斜面と゛した反応容器に収容
した反応層液中の粒子が沈降して一圀に１１１ＩＩＩ成
される粒子凝集パターンを光電的に検出一定するに当た
り、容器底（１【一様に照明し、この麿１の像な結像レ
ンズにより複機の受光素子を有する受光装置の受光面に
結像し、前記凝集パターンの像な受光面に幇して走査さ
せ、受光装置の璽歇の受光素子から得られる出力信置を
適宜処理した後、少く共一つの基準値と比較し、その比
較結果により凝集パターンの判定を行なうことを特徴と
する較子凝槃パターン判定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20082281A JPS58102157A (ja) | 1981-12-15 | 1981-12-15 | 粒子凝集パタ−ン判定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20082281A JPS58102157A (ja) | 1981-12-15 | 1981-12-15 | 粒子凝集パタ−ン判定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58102157A true JPS58102157A (ja) | 1983-06-17 |
| JPH0145862B2 JPH0145862B2 (ja) | 1989-10-05 |
Family
ID=16430775
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20082281A Granted JPS58102157A (ja) | 1981-12-15 | 1981-12-15 | 粒子凝集パタ−ン判定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58102157A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61215948A (ja) * | 1985-03-22 | 1986-09-25 | Fujirebio Inc | 粒子凝集判定装置 |
| JPH02116734A (ja) * | 1988-10-27 | 1990-05-01 | Suzuki Motor Co Ltd | 免疫学的凝集反応検出装置 |
| JPH02116735A (ja) * | 1988-10-27 | 1990-05-01 | Suzuki Motor Co Ltd | 免疫学的凝集反応検出装置 |
| US5265169A (en) * | 1990-10-31 | 1993-11-23 | Suzuki Motor Corporation | Method of discriminating particle aggregation pattern |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE527896C2 (sv) * | 2003-05-20 | 2006-07-04 | Aamic Ab | Optisk testanordning för biologiska prover, samt en microarray till anordningen och metoden för dess användning |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS562563A (en) * | 1979-06-21 | 1981-01-12 | Olympus Optical Co Ltd | Deciding method for particle coagulation pattern |
| JPS562564A (en) * | 1979-06-21 | 1981-01-12 | Olympus Optical Co Ltd | Deciding method for particle coagulation pattern |
| JPS562562A (en) * | 1979-06-21 | 1981-01-12 | Olympus Optical Co Ltd | Deciding method for particle coagulation pattern |
-
1981
- 1981-12-15 JP JP20082281A patent/JPS58102157A/ja active Granted
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS562563A (en) * | 1979-06-21 | 1981-01-12 | Olympus Optical Co Ltd | Deciding method for particle coagulation pattern |
| JPS562564A (en) * | 1979-06-21 | 1981-01-12 | Olympus Optical Co Ltd | Deciding method for particle coagulation pattern |
| JPS562562A (en) * | 1979-06-21 | 1981-01-12 | Olympus Optical Co Ltd | Deciding method for particle coagulation pattern |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61215948A (ja) * | 1985-03-22 | 1986-09-25 | Fujirebio Inc | 粒子凝集判定装置 |
| JPH02116734A (ja) * | 1988-10-27 | 1990-05-01 | Suzuki Motor Co Ltd | 免疫学的凝集反応検出装置 |
| JPH02116735A (ja) * | 1988-10-27 | 1990-05-01 | Suzuki Motor Co Ltd | 免疫学的凝集反応検出装置 |
| US5265169A (en) * | 1990-10-31 | 1993-11-23 | Suzuki Motor Corporation | Method of discriminating particle aggregation pattern |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0145862B2 (ja) | 1989-10-05 |
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