JPH1045789A - 新規生理活性物質ｎａ１６８８７、その製造法およびその用途 - Google Patents
新規生理活性物質ｎａ１６８８７、その製造法およびその用途Info
- Publication number
- JPH1045789A JPH1045789A JP8215959A JP21595996A JPH1045789A JP H1045789 A JPH1045789 A JP H1045789A JP 8215959 A JP8215959 A JP 8215959A JP 21595996 A JP21595996 A JP 21595996A JP H1045789 A JPH1045789 A JP H1045789A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- active substance
- physiologically active
- reagent
- novel
- substance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】癌細胞に対して強い増殖抑制活性を有し、また
細菌に対して生育阻害活性を有する新規生理活性物質Ｎ
Ａ１６８８７を提供する。 【解決手段】新規生理活性物質ＮＡ１６８８７はアクチ
ノマジュラ エスピー（Actinomadura sp.) ＮＡ１６８
８７株（ＦＥＲＭ Ｐ−１５４００）の培養によって得
られる。ＮＡ１６８８７は分子量１５６３を持つ化合物
である。
細菌に対して生育阻害活性を有する新規生理活性物質Ｎ
Ａ１６８８７を提供する。 【解決手段】新規生理活性物質ＮＡ１６８８７はアクチ
ノマジュラ エスピー（Actinomadura sp.) ＮＡ１６８
８７株（ＦＥＲＭ Ｐ−１５４００）の培養によって得
られる。ＮＡ１６８８７は分子量１５６３を持つ化合物
である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は新規生理活性物質Ｎ
Ａ１６８８７及びそれらの塩、その製造法、それを有効
成分とする医薬、制癌剤並びに抗菌剤、およびその生産
菌に関する。
Ａ１６８８７及びそれらの塩、その製造法、それを有効
成分とする医薬、制癌剤並びに抗菌剤、およびその生産
菌に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、制癌剤としては、アドリアマイシ
ン、アクチノマイシン等が使用されている。抗菌剤とし
てはストレプトマイシン、カナマイシン等が使用されて
いる。
ン、アクチノマイシン等が使用されている。抗菌剤とし
てはストレプトマイシン、カナマイシン等が使用されて
いる。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従来、使用されている
制癌剤および抗菌剤は効力、毒性などの点で不十分であ
り、また耐性などの問題もあり、新しい制癌剤および抗
菌剤が求められている。
制癌剤および抗菌剤は効力、毒性などの点で不十分であ
り、また耐性などの問題もあり、新しい制癌剤および抗
菌剤が求められている。
【０００４】
【課題を解決するための手段】そこで発明者らは微生物
の代謝産物について種々検索した結果、アクチノマジュ
ラ属に属する一菌株が新規生理活性物質ＮＡ１６８８７
を産生すること及び該生理活性物質が優れた制癌活性お
よび抗菌活性を有することを見出した。本発明は上記知
見に基づいて完成されたものである。即ち本発明は新規
生理活性物質ＮＡ１６８８７及びそれらの塩に関するも
のである。更に、本発明は、アクチノマジュラ属に属し
新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を生産する能力を有す
る微生物を培養し、培養物中に新規生理活性物質ＮＡ１
６８８７を生産、蓄積せしめ、次いでこれを採取する事
を特徴とする新規生理活性物質ＮＡ１６８８７及びそれ
らの塩の製造法に関するものである。更に、本発明は、
新規生理活性物質ＮＡ１６８８７又はそれらの塩を有効
成分として含有する医薬に関するものである。更に、本
発明は、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７又はそれらの
塩を有効成分として含有する制癌剤に関するものであ
る。更に、本発明は、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７
又はそれらの塩を有効成分として含有する抗菌剤に関す
るものである。更に、本発明は、アクチノマジュラ属に
属し新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を生産する能力を
有する「ＮＡ １６８８７」株（生命工学工業技術研究
所受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１５４００) 又はその変異株
に関するものである。
の代謝産物について種々検索した結果、アクチノマジュ
ラ属に属する一菌株が新規生理活性物質ＮＡ１６８８７
を産生すること及び該生理活性物質が優れた制癌活性お
よび抗菌活性を有することを見出した。本発明は上記知
見に基づいて完成されたものである。即ち本発明は新規
生理活性物質ＮＡ１６８８７及びそれらの塩に関するも
のである。更に、本発明は、アクチノマジュラ属に属し
新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を生産する能力を有す
る微生物を培養し、培養物中に新規生理活性物質ＮＡ１
６８８７を生産、蓄積せしめ、次いでこれを採取する事
を特徴とする新規生理活性物質ＮＡ１６８８７及びそれ
らの塩の製造法に関するものである。更に、本発明は、
新規生理活性物質ＮＡ１６８８７又はそれらの塩を有効
成分として含有する医薬に関するものである。更に、本
発明は、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７又はそれらの
塩を有効成分として含有する制癌剤に関するものであ
る。更に、本発明は、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７
又はそれらの塩を有効成分として含有する抗菌剤に関す
るものである。更に、本発明は、アクチノマジュラ属に
属し新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を生産する能力を
有する「ＮＡ １６８８７」株（生命工学工業技術研究
所受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１５４００) 又はその変異株
に関するものである。
【０００５】以下に新規生理活性物質ＮＡ１６８８７の
理化学的性質を示す。 １）外観：無色粉末 ２）融点：２３２〜２３８℃（decomp） ３）分子量：1563 ４）FAB-MS：1564[M+H] + 、1562[M-H] - ５）溶解性： 可溶：クロロホルム、メタノール、アセトン、ジメチル
スルホキシド 不溶：水、ヘキサン ６）シリカゲル薄層クロマトグラフィーによるRf値：ク
ロロホルム−メタノール（６：１）の展開溶媒で０．５
を示す。 ７）紫外部吸収スペクトル：メタノール中で測定したス
ペクトルを図１に示す。 ８）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを図２に示す。 １０）水素核磁気共鳴スペクトル（300MHz）：重水素化
ジメチルスルホキシド中で測定したスペクトルを図３に
示す。 １１）炭素核磁気共鳴スペクトル（75MHz ）：重水素化
ジメチルホルムアミド中で測定したスペクトルを図４に
示す。 １２）アミノ酸分析：アミノ酸分析の結果、グリシン、
アラニン、バリン、イソロイシン、プロリン、セリン、
トリプトファン（1:4:1:3:1:1:1) が存在する。 １３）呈色反応： 陽性：ヨウ素、ライドン−スミス試薬、ヴァン−ウルク
試薬、リンモリブデン試薬 陰性：ニンヒドリン 本発明の新規生理活性物質ＮＡ１６８８７はアルカリま
たは酸と塩を形成していてもよく、かかる塩としては、
ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属；カルシウム
などのアルカリ土類金属等との塩があげられる。また、
酸としては塩酸や硫酸などの鉱酸のほか、酢酸、ギ酸や
クエン酸などの有機酸との塩があげられる。
理化学的性質を示す。 １）外観：無色粉末 ２）融点：２３２〜２３８℃（decomp） ３）分子量：1563 ４）FAB-MS：1564[M+H] + 、1562[M-H] - ５）溶解性： 可溶：クロロホルム、メタノール、アセトン、ジメチル
スルホキシド 不溶：水、ヘキサン ６）シリカゲル薄層クロマトグラフィーによるRf値：ク
ロロホルム−メタノール（６：１）の展開溶媒で０．５
を示す。 ７）紫外部吸収スペクトル：メタノール中で測定したス
ペクトルを図１に示す。 ８）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを図２に示す。 １０）水素核磁気共鳴スペクトル（300MHz）：重水素化
ジメチルスルホキシド中で測定したスペクトルを図３に
示す。 １１）炭素核磁気共鳴スペクトル（75MHz ）：重水素化
ジメチルホルムアミド中で測定したスペクトルを図４に
示す。 １２）アミノ酸分析：アミノ酸分析の結果、グリシン、
アラニン、バリン、イソロイシン、プロリン、セリン、
トリプトファン（1:4:1:3:1:1:1) が存在する。 １３）呈色反応： 陽性：ヨウ素、ライドン−スミス試薬、ヴァン−ウルク
試薬、リンモリブデン試薬 陰性：ニンヒドリン 本発明の新規生理活性物質ＮＡ１６８８７はアルカリま
たは酸と塩を形成していてもよく、かかる塩としては、
ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属；カルシウム
などのアルカリ土類金属等との塩があげられる。また、
酸としては塩酸や硫酸などの鉱酸のほか、酢酸、ギ酸や
クエン酸などの有機酸との塩があげられる。
【０００６】
【発明の実施の形態】上記新規生理活性物質ＮＡ１６８
８７はアクチノマジュラ属に属するＮＡ１６８８７生産
菌を培養し、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を生成蓄
積せしめ、この培養物より新規生理活性物質ＮＡ１６８
８７を採取することにより得られる。新規生理活性物質
ＮＡ１６８８７の生産菌の代表的な一例であるアクチノ
マジュラ エスピー（Actinomadura sp.）ＮＡ １６８
８７は次の菌学的性質を有する。
８７はアクチノマジュラ属に属するＮＡ１６８８７生産
菌を培養し、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を生成蓄
積せしめ、この培養物より新規生理活性物質ＮＡ１６８
８７を採取することにより得られる。新規生理活性物質
ＮＡ１６８８７の生産菌の代表的な一例であるアクチノ
マジュラ エスピー（Actinomadura sp.）ＮＡ １６８
８７は次の菌学的性質を有する。
【０００７】１．形態的性質 ２７℃で２週間培養後に観察した結果、顕微鏡下で分枝
した基中菌糸より気菌糸を形成する。その先端はループ
状あるいは、らせん状である。また、輪生枝の形成及び
遊走子も認められないが、偽胞子のうを認める。胞子表
面は平滑または粗面で、胞子は卵型で、大きさ0.6〜0.8
×1.0 〜1.2 μｍである。また、5個以上の連鎖をなし
て胞子が形成される。
した基中菌糸より気菌糸を形成する。その先端はループ
状あるいは、らせん状である。また、輪生枝の形成及び
遊走子も認められないが、偽胞子のうを認める。胞子表
面は平滑または粗面で、胞子は卵型で、大きさ0.6〜0.8
×1.0 〜1.2 μｍである。また、5個以上の連鎖をなし
て胞子が形成される。
【０００８】２．各種培地における生育 各種培地での、２７℃、２週間培養後の生育状態を下記
表１に示す。
表１に示す。
【０００９】
【表１】
【００１０】３．生理学的性質 1 生育適度範囲 ： ２７〜３２℃ 2 硝酸塩の還元 ： 陽性 3 ゼラチンの液化（単純ゼラチン培地上、２０℃）：
陽性 4 スタ−チの加水分解（スタ−チ・無機塩寒天培
地）： 陽性 5 脱脂牛乳の凝固 ： 陰性 6 脱脂牛乳のペプトン化 ： 陽性 7 メラニン様色素の生成 ： 陰性
陽性 4 スタ−チの加水分解（スタ−チ・無機塩寒天培
地）： 陽性 5 脱脂牛乳の凝固 ： 陰性 6 脱脂牛乳のペプトン化 ： 陽性 7 メラニン様色素の生成 ： 陰性
【００１１】４．炭素源の利用性（プリドハム・ゴドリ
−ブ寒天培地上） Ｌ−アラビノ−ス − Ｄ−キシロ−ス ＋ Ｄ−グルコ−ス ＋ Ｄ−フラクト−ス ＋ シュクロ−ス ＋ イノシト−ル ＋ Ｌ−ラムノ−ス − ラフィノ−ス − Ｄ−マンニト−ル −
−ブ寒天培地上） Ｌ−アラビノ−ス − Ｄ−キシロ−ス ＋ Ｄ−グルコ−ス ＋ Ｄ−フラクト−ス ＋ シュクロ−ス ＋ イノシト−ル ＋ Ｌ−ラムノ−ス − ラフィノ−ス − Ｄ−マンニト−ル −
【００１２】５．細胞壁中のジアミノピメリン酸 meso−ジアミノピメリン酸である。以上を要約すると、
本菌株は細胞壁がmeso−ジアミノピメリン酸であり、ま
た、メナキノンの種類は、MK-9(H4) が主である。全菌
体中の還元糖中にマジュロースを含んでいる。気中菌糸
は白色系統で、気菌糸の先端はループ及びらせん状で、
数個の胞子鎖を形成し、メラニン様色素は生産しない。
各種培地中にほとんど色素を生産しない。また、基生菌
糸の色は淡黄色あるいはうす黄茶を呈する。炭素源とし
てはＤ−キシロース、Ｄ−グルコ−ス、Ｄ−フラクトー
ス、シュクロース、イノシトールを利用し、Ｌ−アラビ
ノ−ス、Ｌ−ラムノース、ラフィノース、Ｄ−マンニト
ールを利用しない。
本菌株は細胞壁がmeso−ジアミノピメリン酸であり、ま
た、メナキノンの種類は、MK-9(H4) が主である。全菌
体中の還元糖中にマジュロースを含んでいる。気中菌糸
は白色系統で、気菌糸の先端はループ及びらせん状で、
数個の胞子鎖を形成し、メラニン様色素は生産しない。
各種培地中にほとんど色素を生産しない。また、基生菌
糸の色は淡黄色あるいはうす黄茶を呈する。炭素源とし
てはＤ−キシロース、Ｄ−グルコ−ス、Ｄ−フラクトー
ス、シュクロース、イノシトールを利用し、Ｌ−アラビ
ノ−ス、Ｌ−ラムノース、ラフィノース、Ｄ−マンニト
ールを利用しない。
【００１３】以上の性質をもとにバ−ジ−ズ・マニュア
ル・オブ・システィマティック・バクテリオロジ−（Be
rgey's Manual of Systematic Bacteriology）第４巻、
1989年及び放線菌の同定実験法（日本放線菌研究会編，
1985年）に従って検索を行った結果、上記ＮＡ １６８
８７株はアクチノマジュラ属に属することが判明した。
よって、本菌をアクチノマジュラ・エスピー（Actinoma
dura sp.）ＮＡ １６８８７と命名した。該菌株は、工
業技術院生命工学工業技術研究所によって平成８年１月
２３日付で受託され、受託番号、ＦＥＲＭ Ｐ−１５４
００が付与されている。
ル・オブ・システィマティック・バクテリオロジ−（Be
rgey's Manual of Systematic Bacteriology）第４巻、
1989年及び放線菌の同定実験法（日本放線菌研究会編，
1985年）に従って検索を行った結果、上記ＮＡ １６８
８７株はアクチノマジュラ属に属することが判明した。
よって、本菌をアクチノマジュラ・エスピー（Actinoma
dura sp.）ＮＡ １６８８７と命名した。該菌株は、工
業技術院生命工学工業技術研究所によって平成８年１月
２３日付で受託され、受託番号、ＦＥＲＭ Ｐ−１５４
００が付与されている。
【００１４】本発明に用いるアクチノマジュラ属に属す
る菌株は他のアクチノマジュラ属の菌株と同様、その性
状が変化しやすく、例えば、紫外線、エックス線および
薬品などを用いる人工的な変異手段で容易に変異しうる
ものであり、どの様な変異株であっても本発明の対象と
する生理活性物質ＮＡ１６８８７の生産能を有するもの
は、すべて本発明に使用する事ができる。
る菌株は他のアクチノマジュラ属の菌株と同様、その性
状が変化しやすく、例えば、紫外線、エックス線および
薬品などを用いる人工的な変異手段で容易に変異しうる
ものであり、どの様な変異株であっても本発明の対象と
する生理活性物質ＮＡ１６８８７の生産能を有するもの
は、すべて本発明に使用する事ができる。
【００１５】本発明によりＮＡ１６８８７を製造するに
は、まず前記菌株を放線菌が利用し得る栄養物を含有す
る培地で好気的に培養する。栄養源としては、従来から
放線菌の培養に利用されている公知のものが使用でき、
例えば炭素源としてはグルコース、フラクトース、グリ
セリン、シュークロース、デキストリン、ガラクトー
ス、有機酸などを単独かまたは組み合わせて用いること
ができる。
は、まず前記菌株を放線菌が利用し得る栄養物を含有す
る培地で好気的に培養する。栄養源としては、従来から
放線菌の培養に利用されている公知のものが使用でき、
例えば炭素源としてはグルコース、フラクトース、グリ
セリン、シュークロース、デキストリン、ガラクトー
ス、有機酸などを単独かまたは組み合わせて用いること
ができる。
【００１６】無機および有機窒素源としては塩化アンモ
ニウム、硫酸アンモニウム、尿素、硝酸アンモニウム、
硝酸ナトリウム、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾
燥酵母、コーン・スチープ・リカー、大豆粉、綿実油カ
ス、カザミノ酸、バクトソイトン、ソリュブル・ベジタ
ブル・プロテイン、オートミールなどを単独または組み
合わせて用いることができる。
ニウム、硫酸アンモニウム、尿素、硝酸アンモニウム、
硝酸ナトリウム、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾
燥酵母、コーン・スチープ・リカー、大豆粉、綿実油カ
ス、カザミノ酸、バクトソイトン、ソリュブル・ベジタ
ブル・プロテイン、オートミールなどを単独または組み
合わせて用いることができる。
【００１７】その他必要に応じて食塩、炭酸カルシウ
ム、硫酸マグネシウム、硫酸銅、硫酸鉄、硫酸亜鉛、塩
化マンガン、燐酸塩などの無機塩類を加えることができ
るほか有機物、例えばアミノ酸類、ビタミン類、核酸類
や無機物を適当に添加することができる。培養法として
は液体培養法、特に深部攪拌培養法が最も適している。
培養温度は通常15℃〜37℃、好ましくは20℃〜33℃、pH
は弱酸性ないし微アルカリ性で培養を行うことが望まし
い。
ム、硫酸マグネシウム、硫酸銅、硫酸鉄、硫酸亜鉛、塩
化マンガン、燐酸塩などの無機塩類を加えることができ
るほか有機物、例えばアミノ酸類、ビタミン類、核酸類
や無機物を適当に添加することができる。培養法として
は液体培養法、特に深部攪拌培養法が最も適している。
培養温度は通常15℃〜37℃、好ましくは20℃〜33℃、pH
は弱酸性ないし微アルカリ性で培養を行うことが望まし
い。
【００１８】液体培養では通常３〜７日間培養を行うと
ＮＡ１６８８７物質が培養液中に生成蓄積される。培養
液中の生成量が最大に達したときに培養を停止し、ろ液
と菌体とに分離し、ろ液及び菌体より目的物を精製単離
する。ろ液及び菌体からの本物質の精製単離には一般に
微生物代謝産物を培養ろ液またはその菌体から単離する
ために、用いられる分離精製の方法が利用される。
ＮＡ１６８８７物質が培養液中に生成蓄積される。培養
液中の生成量が最大に達したときに培養を停止し、ろ液
と菌体とに分離し、ろ液及び菌体より目的物を精製単離
する。ろ液及び菌体からの本物質の精製単離には一般に
微生物代謝産物を培養ろ液またはその菌体から単離する
ために、用いられる分離精製の方法が利用される。
【００１９】菌体からの分離精製の方法を例に挙げると
まず培養物をろ過法によりろ液と菌体とに分離する。菌
体を有機溶媒、例えばアセトンに浸漬し活性物質を抽出
する。活性物質を含む抽出液を減圧濃縮により有機溶媒
を溜去後、適当な溶媒、たとえば酢酸エチルで活性物質
を有機溶媒層に抽出することができる。
まず培養物をろ過法によりろ液と菌体とに分離する。菌
体を有機溶媒、例えばアセトンに浸漬し活性物質を抽出
する。活性物質を含む抽出液を減圧濃縮により有機溶媒
を溜去後、適当な溶媒、たとえば酢酸エチルで活性物質
を有機溶媒層に抽出することができる。
【００２０】上記の有機溶媒層を減圧濃縮し、ＮＡ１６
８８７を含む油状物質を得る。この粗物質はさらに脂溶
性物質の精製に通常用いられる公知の方法、例えば、
１）ゲル濾過剤として商品名Sephadex LH-20（Pharmaci
a Fine Chemicals AB ）または商品名Toyopearl HW-55F
（東ソー）を用い、溶出液としてメタノールまたはアセ
トン等の単一溶出やこれらの含水溶媒、あるいは酸性な
いしアルカリ性溶液を用いたゲルろ過クロマトグラフィ
ー； ２）吸着剤として商品名DIAION CHP-20 ( Mitsubishi C
hemical Industries）を用い、メタノールまたはアセト
ンの単一溶媒溶出やこれらの含水溶媒、または濃度勾配
溶出を用いた分配クロマトグラフィー； ３）吸着剤としてシリカゲルを用い各種有機溶媒の単独
またはこれらの適当な混合溶媒、さらに酢酸ないしギ酸
等の有機酸やトリエチルアミン等の有機アミンの添加さ
れた溶出溶媒を用いた吸着クロマトグラフィーによる精
製法； を単独あるいは組み合わせることにより精製する。精製
に好適な例として商品名DIAION CHP-20 を用いメタノー
ルを溶出溶媒としてクロマトグラフィーを行う。得られ
た活性画分を再び商品名DIAION CHP-20 で同じ条件でク
ロマトグラフィーを行う。得られた活性画分を商品名To
yopearl HW-55Fを用いてクロマトグラフィーを行い活性
画分を濃縮乾固してＮＡ１６８８７を無色粉末として得
ることができる。
８８７を含む油状物質を得る。この粗物質はさらに脂溶
性物質の精製に通常用いられる公知の方法、例えば、
１）ゲル濾過剤として商品名Sephadex LH-20（Pharmaci
a Fine Chemicals AB ）または商品名Toyopearl HW-55F
（東ソー）を用い、溶出液としてメタノールまたはアセ
トン等の単一溶出やこれらの含水溶媒、あるいは酸性な
いしアルカリ性溶液を用いたゲルろ過クロマトグラフィ
ー； ２）吸着剤として商品名DIAION CHP-20 ( Mitsubishi C
hemical Industries）を用い、メタノールまたはアセト
ンの単一溶媒溶出やこれらの含水溶媒、または濃度勾配
溶出を用いた分配クロマトグラフィー； ３）吸着剤としてシリカゲルを用い各種有機溶媒の単独
またはこれらの適当な混合溶媒、さらに酢酸ないしギ酸
等の有機酸やトリエチルアミン等の有機アミンの添加さ
れた溶出溶媒を用いた吸着クロマトグラフィーによる精
製法； を単独あるいは組み合わせることにより精製する。精製
に好適な例として商品名DIAION CHP-20 を用いメタノー
ルを溶出溶媒としてクロマトグラフィーを行う。得られ
た活性画分を再び商品名DIAION CHP-20 で同じ条件でク
ロマトグラフィーを行う。得られた活性画分を商品名To
yopearl HW-55Fを用いてクロマトグラフィーを行い活性
画分を濃縮乾固してＮＡ１６８８７を無色粉末として得
ることができる。
【００２１】本発明の新規生理活性物質ＮＡ１６８８７
及びそれらの塩は、制癌作用および抗菌作用を有するの
で、制癌剤および抗菌剤などの医薬として使用できる。
医薬品として使用する場合の製剤化のよび投与方法は従
来公知の種々の方法が適用できる。すなわち、投与方法
として注射、経口、直腸投与などが可能である。製剤形
態としては注射剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤、座剤などの
形態がとり得る。
及びそれらの塩は、制癌作用および抗菌作用を有するの
で、制癌剤および抗菌剤などの医薬として使用できる。
医薬品として使用する場合の製剤化のよび投与方法は従
来公知の種々の方法が適用できる。すなわち、投与方法
として注射、経口、直腸投与などが可能である。製剤形
態としては注射剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤、座剤などの
形態がとり得る。
【００２２】製剤化の際に新規生理活性物質ＮＡ１６８
８７及びそれらの塩に悪影響を与えない限り、医薬用に
用いられる種々の補助剤、すなわち、担体やその他の助
剤、例えば安定剤、防腐剤、無痛化剤、乳化剤が必要に
応じて使用されうる。製剤に於いて、新規生理活性物質
ＮＡ１６８８７及びそれらの塩の含量は製剤形態等によ
り広範囲にかえることが可能であり、一般には新規生理
活性物質ＮＡ１６８８７を0.01〜100%（重量）、好まし
くは、0.10〜70% （重量）含有し、残りは通常医薬用に
使用される担体その他補助剤からなる。
８７及びそれらの塩に悪影響を与えない限り、医薬用に
用いられる種々の補助剤、すなわち、担体やその他の助
剤、例えば安定剤、防腐剤、無痛化剤、乳化剤が必要に
応じて使用されうる。製剤に於いて、新規生理活性物質
ＮＡ１６８８７及びそれらの塩の含量は製剤形態等によ
り広範囲にかえることが可能であり、一般には新規生理
活性物質ＮＡ１６８８７を0.01〜100%（重量）、好まし
くは、0.10〜70% （重量）含有し、残りは通常医薬用に
使用される担体その他補助剤からなる。
【００２３】新規生理活性物質ＮＡ１６８８７及びそれ
らの塩の投与量は症状等により異なるが、成人１人１日
当たり0.01〜800mg 程度である。連投を必要とする場合
には１日当たり使用量を抑えることが望ましい。
らの塩の投与量は症状等により異なるが、成人１人１日
当たり0.01〜800mg 程度である。連投を必要とする場合
には１日当たり使用量を抑えることが望ましい。
【００２４】
【実施例】以下本発明の実施例及び試験例を示すが、こ
れは単なる一例示であって何等本発明を限定するもので
はなく、種々の変法が可能である。
れは単なる一例示であって何等本発明を限定するもので
はなく、種々の変法が可能である。
【００２５】（１）発酵 ロータリー型振盪機用500ml 容三角フラスコに可溶性澱
粉（関東化学社製）2.0%、グルコース0.5%、イーストエ
キストラクト0.5%、アジプロンE3（味の素社製）0.5%、
炭酸カルシウム0.2%、リン酸一水素二カリウム0.05％、
硫酸マグネシウム・７水和物0.05％、の培地（pH 7.2）
100ml を分注し、120 ℃、20分間オートクレーブ滅菌し
た。これに新規生理活性物質生産菌ＮＡ １６８８７株
（FERM P-15400）の1 白金耳を接種し、25℃、220 回転
／分、４日間振盪し種培養とした。
粉（関東化学社製）2.0%、グルコース0.5%、イーストエ
キストラクト0.5%、アジプロンE3（味の素社製）0.5%、
炭酸カルシウム0.2%、リン酸一水素二カリウム0.05％、
硫酸マグネシウム・７水和物0.05％、の培地（pH 7.2）
100ml を分注し、120 ℃、20分間オートクレーブ滅菌し
た。これに新規生理活性物質生産菌ＮＡ １６８８７株
（FERM P-15400）の1 白金耳を接種し、25℃、220 回転
／分、４日間振盪し種培養とした。
【００２６】本培養はロータリー型振盪機用500ml 容三
角フラスコにグルコース1.0%、ガラクトース1.0%、コー
ンスチィープリカー1.0%、デキストリン（赤玉 No.3）
2.0%、ファーマメディア1.0%、炭酸カルシウム0.2%、硫
酸マグネシウム・７水和物0.05％、塩化コバルト・６水
和物0.0001％の培地（pH 7.0）100ml を分注し、120
℃、20分間オートクレーブ滅菌したフラスコに前記種培
養液１mlを移植し、25℃、220 回転／分の条件下で５日
振盪培養を行った。培養液を遠心ろ過し、ろ液と菌体と
に分別した。
角フラスコにグルコース1.0%、ガラクトース1.0%、コー
ンスチィープリカー1.0%、デキストリン（赤玉 No.3）
2.0%、ファーマメディア1.0%、炭酸カルシウム0.2%、硫
酸マグネシウム・７水和物0.05％、塩化コバルト・６水
和物0.0001％の培地（pH 7.0）100ml を分注し、120
℃、20分間オートクレーブ滅菌したフラスコに前記種培
養液１mlを移植し、25℃、220 回転／分の条件下で５日
振盪培養を行った。培養液を遠心ろ過し、ろ液と菌体と
に分別した。
【００２７】（２）精製 新規生理活性物質ＮＡ１６８８７の活性画分の精製は抗
腫瘍活性を指標に次の通り行った。１０リットルの培養
液から得られた菌体をアセトン３リットルで２回抽出し
た。これを濃縮後、抽出液を酢酸エチル抽出を行い有機
層を水洗、無水硫酸ナトリウムで脱水処理後、濃縮し
た。粗抽出物を商品名DIAION CHP-20 に吸着しメタノー
ルで溶出を行い、活性画分を得た。活性画分を再び同じ
カラム、同じ条件で精製を行い活性画分を商品名Toyope
arl HW-55Fを用い、溶出液にメタノールを用いて精製を
行い新規生理活性物質ＮＡ１６８８７（17.8mg）の無色
粉末を得た。尚、培養液から得られたろ液についても、
上記酢酸エチル抽出以降の操作と同様にして目的の新規
生理活性物質を得ることができる。この新規生理活性物
質ＮＡ１６８８７について、赤外部吸収スペクトル、水
素核磁気共鳴スペクトル及び炭素核磁気共鳴スペクトル
を測定し、図１〜図４に示すスペクトルを得た。また、
この新規生理活性物質は、前記した通りの理化学的性質
を示した。
腫瘍活性を指標に次の通り行った。１０リットルの培養
液から得られた菌体をアセトン３リットルで２回抽出し
た。これを濃縮後、抽出液を酢酸エチル抽出を行い有機
層を水洗、無水硫酸ナトリウムで脱水処理後、濃縮し
た。粗抽出物を商品名DIAION CHP-20 に吸着しメタノー
ルで溶出を行い、活性画分を得た。活性画分を再び同じ
カラム、同じ条件で精製を行い活性画分を商品名Toyope
arl HW-55Fを用い、溶出液にメタノールを用いて精製を
行い新規生理活性物質ＮＡ１６８８７（17.8mg）の無色
粉末を得た。尚、培養液から得られたろ液についても、
上記酢酸エチル抽出以降の操作と同様にして目的の新規
生理活性物質を得ることができる。この新規生理活性物
質ＮＡ１６８８７について、赤外部吸収スペクトル、水
素核磁気共鳴スペクトル及び炭素核磁気共鳴スペクトル
を測定し、図１〜図４に示すスペクトルを得た。また、
この新規生理活性物質は、前記した通りの理化学的性質
を示した。
【００２８】試験例１細胞増殖抑制活性の測定（ヒト卵巣癌細胞） 新規生理活性物質ＮＡ１６８８７のヒト卵巣癌細胞（A2
780 ）に対する増殖抑制活性を検討した。ヒト卵巣癌細
胞を 2×104 個/ml の割合で96穴テストプレートに 200
μl 接種し、37℃、5% CO 2 インキュベーター内で24時
間培養した後、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を種々
の濃度で培養液に添加した。添加72時間後、生細胞数を
MTT 法（「癌と化学療法」（1980年）７号、P.1952〜19
58「制癌剤感受性テストSDI の改良法」斉藤和子その
他）により測定し、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７の
種々の濃度におけるヒト卵巣癌細胞の増殖抑制率を求め
た。結果を表２に示した。
780 ）に対する増殖抑制活性を検討した。ヒト卵巣癌細
胞を 2×104 個/ml の割合で96穴テストプレートに 200
μl 接種し、37℃、5% CO 2 インキュベーター内で24時
間培養した後、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を種々
の濃度で培養液に添加した。添加72時間後、生細胞数を
MTT 法（「癌と化学療法」（1980年）７号、P.1952〜19
58「制癌剤感受性テストSDI の改良法」斉藤和子その
他）により測定し、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７の
種々の濃度におけるヒト卵巣癌細胞の増殖抑制率を求め
た。結果を表２に示した。
【００２９】
【表２】 ──────────────────────── 化合物 ヒト卵巣癌細胞 IC 50（μＭ) ──────────────────────── NA16887 0.03 ────────────────────────
【００３０】試験例２細胞増殖抑制活性の測定（ヒト大腸癌細胞） 新規生理活性物質ＮＡ１６８８７のヒト大腸癌細胞（SW
480 ）に対する増殖抑制活性を検討した。ヒト大腸癌細
胞を 10.0 ×104 個/ml の割合で96穴テストプレートに
200μl接種し、37℃、5% CO 2 インキュベーター内で2
4時間培養した後、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を
種々の濃度で培養液に添加した。添加72時間後、生細胞
数をMTT 法により測定し、新規生理活性物質ＮＡ１６８
８７の種々の濃度におけるヒト大腸癌細胞の増殖抑制率
を求めた。結果を表３に示した。
480 ）に対する増殖抑制活性を検討した。ヒト大腸癌細
胞を 10.0 ×104 個/ml の割合で96穴テストプレートに
200μl接種し、37℃、5% CO 2 インキュベーター内で2
4時間培養した後、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を
種々の濃度で培養液に添加した。添加72時間後、生細胞
数をMTT 法により測定し、新規生理活性物質ＮＡ１６８
８７の種々の濃度におけるヒト大腸癌細胞の増殖抑制率
を求めた。結果を表３に示した。
【００３１】
【表３】 ──────────────────────── 化合物 ヒト大腸癌細胞 IC 50（μＭ) ──────────────────────── NA16887 0.05 ────────────────────────
【００３２】試験例３抗細菌活性の測定 新規生理活性物質ＮＡ１６８８７の抗細菌活性をペーパ
ーディスク−寒天拡散法によって検討した。新規生理活
性物質ＮＡ１６８８７を100 μｇ／ｍｌのメタノール溶
液に調製した。この溶液に直径８mmのペーパーディスク
を浸漬し取り出した。ペーパーディスクの溶媒が風乾し
た後、予め作成しておいた被検菌の懸濁液を含む寒天培
地上にペーパーディスクを置いた。３７℃、２４時間イ
ンキュベート後、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７によ
る生育阻止円の直径を計測した。それらの結果を表４に
示した。
ーディスク−寒天拡散法によって検討した。新規生理活
性物質ＮＡ１６８８７を100 μｇ／ｍｌのメタノール溶
液に調製した。この溶液に直径８mmのペーパーディスク
を浸漬し取り出した。ペーパーディスクの溶媒が風乾し
た後、予め作成しておいた被検菌の懸濁液を含む寒天培
地上にペーパーディスクを置いた。３７℃、２４時間イ
ンキュベート後、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７によ
る生育阻止円の直径を計測した。それらの結果を表４に
示した。
【００３３】
【表４】 ────────────────────────── 微生物 阻止円 (mm) ────────────────────────── Bacillus subtillis IFO-3007 １２ Staphylococcus aureus FAD 209 １１ ──────────────────────────
【００３４】
【発明の効果】これらの表２、表３および表４に示した
様に、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７はヒト卵巣癌細
胞（A2780 ）およびヒト大腸癌細胞（SW480 ）に対して
強い増殖抑制活性を有し、制癌効果を示す。また細菌
（Bacillus subtillis, Staphylococcus aureus ）に対
して生育阻害活性を有し、抗菌効果を示す。上記のよう
に新規生理活性物質ＮＡ１６８８７は、制癌作用および
抗菌作用を有するので、制癌剤、抗菌剤などの医薬とし
て使用できる。
様に、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７はヒト卵巣癌細
胞（A2780 ）およびヒト大腸癌細胞（SW480 ）に対して
強い増殖抑制活性を有し、制癌効果を示す。また細菌
（Bacillus subtillis, Staphylococcus aureus ）に対
して生育阻害活性を有し、抗菌効果を示す。上記のよう
に新規生理活性物質ＮＡ１６８８７は、制癌作用および
抗菌作用を有するので、制癌剤、抗菌剤などの医薬とし
て使用できる。
【図１】ＮＡ１６８８７のメタノール中で測定した紫外
部吸収スペクトル
部吸収スペクトル
【図２】ＮＡ１６８８７の臭化カリウム錠剤で測定した
赤外部吸収スペクトル
赤外部吸収スペクトル
【図３】ＮＡ１６８８７の重水素化ジメチルスルホキシ
ド中（300MHz）で測定した水素核磁気共鳴スペクトル
ド中（300MHz）で測定した水素核磁気共鳴スペクトル
【図４】ＮＡ１６８８７の重水素化ジメチルホルムアミ
ド中（75MHz ）で測定した炭素核磁気共鳴スペクトル
ド中（75MHz ）で測定した炭素核磁気共鳴スペクトル
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:03） (Ｃ１２Ｐ 1/06 Ｃ１２Ｒ 1:03）
Claims (6)
- 【請求項１】下記の理化学的性質を示す新規生理活性物
質ＮＡ１６８８７ １）外観：無色粉末 ２）融点：２３２〜２３８℃（decomp） ３）分子量：1563 ４）FAB-MS：1564[M+H] + 、1562[M-H] - ５）溶解性： 可溶：クロロホルム、メタノール、アセトン、ジメチル
スルホキシド 不溶：水、ヘキサン ６）シリカゲル薄層クロマトグラフィーによるRf値：ク
ロロホルム−メタノール（６：１）の展開溶媒で０．５
を示す。 ７）紫外部吸収スペクトル：メタノール中で測定したス
ペクトルを図１に示す。 ８）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを図２に示す。 １０）水素核磁気共鳴スペクトル（300MHz）：重水素化
ジメチルスルホキシド中で測定したスペクトルを図３に
示す。 １１）炭素核磁気共鳴スペクトル（75MHz ）：重水素化
ジメチルホルムアミド中で測定したスペクトルを図４に
示す。 １２）アミノ酸分析：アミノ酸分析の結果、グリシン、
アラニン、バリン、イソロイシン、プロリン、セリン、
トリプトファン（1:4:1:3:1:1:1 ）が存在する。 １３）呈色反応： 陽性：ヨウ素、ライドン−スミス試薬、ヴァン−ウルク
試薬、リンモリブデン試薬 陰性：ニンヒドリン - 【請求項２】アクチノマジュラ（Actinomadura) 属に属
し、新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を生産する能力を
有する微生物を培養し、培養物中に新規生理活性物質Ｎ
Ａ１６８８７を生産、蓄積せしめ、次いでこれを採取す
る事を特徴とする新規生理活性物質ＮＡ１６８８７及び
その塩の製造法。 - 【請求項３】新規生理活性物質ＮＡ１６８８７又はその
塩を有効成分として含有する医薬。 - 【請求項４】新規生理活性物質ＮＡ１６８８７又はその
塩を有効成分として含有する制癌剤。 - 【請求項５】新規生理活性物質ＮＡ１６８８７又はその
塩を有効成分として含有する抗菌剤。 - 【請求項６】アクチノマジュラ（Actinomadura) 属に属
し新規生理活性物質ＮＡ１６８８７を生産する能力を有
する「ＮＡ １６８８７」株（生命工学工業技術研究所
受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１５４００) 又はその変異株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8215959A JPH1045789A (ja) | 1996-07-30 | 1996-07-30 | 新規生理活性物質ｎａ１６８８７、その製造法およびその用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8215959A JPH1045789A (ja) | 1996-07-30 | 1996-07-30 | 新規生理活性物質ｎａ１６８８７、その製造法およびその用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1045789A true JPH1045789A (ja) | 1998-02-17 |
Family
ID=16681084
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8215959A Pending JPH1045789A (ja) | 1996-07-30 | 1996-07-30 | 新規生理活性物質ｎａ１６８８７、その製造法およびその用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH1045789A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110283761A (zh) * | 2019-08-01 | 2019-09-27 | 哈尔滨天齐人类第二基因组技术开发应用科技有限责任公司 | 一株具有强力抗癌活性的芽孢杆菌ccpm7647及其应用 |
-
1996
- 1996-07-30 JP JP8215959A patent/JPH1045789A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110283761A (zh) * | 2019-08-01 | 2019-09-27 | 哈尔滨天齐人类第二基因组技术开发应用科技有限责任公司 | 一株具有强力抗癌活性的芽孢杆菌ccpm7647及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR0135600B1 (ko) | 항암 항생물질 mi43-37f11, 그 제조방법 및 그 용도 | |
| JPH1045789A (ja) | 新規生理活性物質ｎａ１６８８７、その製造法およびその用途 | |
| WO1997001575A1 (fr) | Substance wf16616, procede de production et utilisation | |
| JPH10234396A (ja) | 新規抗腫瘍剤およびソヤサポゲノールｂの製造法 | |
| US4902781A (en) | Novel tripetide derivatives | |
| EP0399444B1 (en) | New carcinostatic or antitumor antibiotic, conagenin, and production and uses thereof | |
| JPH041179A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ―１４１０６ | |
| JPH10147594A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ−４３５４７類 | |
| JP2594085B2 (ja) | 新規抗腫瘍抗生物質ｓｆ２５７５物質ならびにその製造法 | |
| JPH08239379A (ja) | 新規物質ｋｒ２８２７誘導体、その製造法および使用 | |
| JP2718002B2 (ja) | 新菌株ストレプトマイセス・ラベンドフォリアｄｋｒｓならびにこれを用いたアクラシノマイシンａ，ｂ，ｙおよびアグリコンの製造方法 | |
| JP3726920B2 (ja) | 新規生理活性物質ｎａ２２５９８ａ１，ａ２，ａ３，ａ４及びａ５、その製造法およびその用途 | |
| JPH05194571A (ja) | 新規抗生物質ｎｋ３７４１８６ａ、ｎｋ３７４１８６ｂ、ｎｋ３７４１８６ｂ３及びｎｋ３７４１８６ｃ３、その製造法及びその用途 | |
| JP2000086627A (ja) | 抗菌性物質ｂｅ−５４４７６及びその製造法 | |
| JPS623789A (ja) | 抗生物質トキマイシンａおよびその製造法 | |
| JP2001046092A (ja) | 新規生理活性物質ｎｋ３４９４４、その製造法及びその用途 | |
| JPH11106344A (ja) | 新規生理活性物質ｎｆ０６３０７、その製造法及びその用途 | |
| WO1992022562A1 (en) | Substances wb2663, production thereof and use | |
| JPH0764851B2 (ja) | リベロマイシンｂ、ｃ、及びｄ、その製造法並びに抗腫瘍剤及び抗真菌剤 | |
| JPH0892119A (ja) | 抗腫瘍剤 | |
| JPH1121263A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ−４５９８５類 | |
| JPH01265893A (ja) | 新規物質ｋ３６１９、その使用およびその製造 | |
| JPH08176157A (ja) | 新規生理活性物質エポスタチン、その製造法およびその用途 | |
| JPH02221292A (ja) | 新規物質０２―３、その使用および製造 | |
| JPH0259596A (ja) | 新規物質、その使用および製造 |