JPH08173179A - 新規微生物およびそれを用いるトレハロースの製造法 - Google Patents
新規微生物およびそれを用いるトレハロースの製造法Info
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- JPH08173179A JPH08173179A JP33765494A JP33765494A JPH08173179A JP H08173179 A JPH08173179 A JP H08173179A JP 33765494 A JP33765494 A JP 33765494A JP 33765494 A JP33765494 A JP 33765494A JP H08173179 A JPH08173179 A JP H08173179A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 エルスコビア属に属し、トレハロース生産能
を有する微生物をスクロースおよび／またはマルトース
を主炭素源として含む培地で培養し、培養物からトレハ
ロースを採取することを特徴とするトレハロースの製造
方法並びにトレハロース生産能を有するエルスコビア・
キサンチネオリティカ。 【効果】 本発明に関わるエルスコビア属に属するトレ
ハロース生産菌、特に新菌株エルスコビア・キサンチネ
オリティカＭ−６株をスクロースおよび／またはマルト
ースを主炭素源として含む培地で培養し、培養物からト
レハロースを採取することにより、トレハロースを効率
的に製造することが可能となる。
を有する微生物をスクロースおよび／またはマルトース
を主炭素源として含む培地で培養し、培養物からトレハ
ロースを採取することを特徴とするトレハロースの製造
方法並びにトレハロース生産能を有するエルスコビア・
キサンチネオリティカ。 【効果】 本発明に関わるエルスコビア属に属するトレ
ハロース生産菌、特に新菌株エルスコビア・キサンチネ
オリティカＭ−６株をスクロースおよび／またはマルト
ースを主炭素源として含む培地で培養し、培養物からト
レハロースを採取することにより、トレハロースを効率
的に製造することが可能となる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、新規微生物およびそれ
を用いるトレハロースの製造法に関するものである。
を用いるトレハロースの製造法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】トレ
ハロースは、グルコースがα−１，１結合した非還元性
の二糖類であり、自然界には酵母、カビ、藻類、昆虫等
に広く分布している。また、トレハロースの結晶は、一
般的には２水和物で、熱や酸、アルカリに対し安定であ
り、甘味度は蔗糖の約５０％で、良質な甘味を示す。近
年、トレハロースの乾燥、冷凍時における蛋白質の変性
防止効果が見出されており、これらの特性を利用して甘
味料、増量材等への利用や食品、医薬品の保存安定剤、
化粧品の保湿剤等として様々な利用が期待されている。
ハロースは、グルコースがα−１，１結合した非還元性
の二糖類であり、自然界には酵母、カビ、藻類、昆虫等
に広く分布している。また、トレハロースの結晶は、一
般的には２水和物で、熱や酸、アルカリに対し安定であ
り、甘味度は蔗糖の約５０％で、良質な甘味を示す。近
年、トレハロースの乾燥、冷凍時における蛋白質の変性
防止効果が見出されており、これらの特性を利用して甘
味料、増量材等への利用や食品、医薬品の保存安定剤、
化粧品の保湿剤等として様々な利用が期待されている。
【０００３】従来のトレハロース製造法としては酵母か
らアルコールで抽出する方法（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓ
ｏｃ．、７２、２０５９、１９５０）、ノカルディア属
の微生物を使用する方法（特開昭５０−１５４４８５号
公報）、マルトースをマルトースホスホリラーゼおよび
トレハロースホスホリラーゼで処理する方法（特開昭５
８−２１６６９５号公報）等が報告されているが、これ
らの方法はいずれもトレハロースの生産効率の低いもの
であった。そのため、近年はブレビバクテリウム属など
の微生物を使用してトレハロースを工業的に安価に製造
する方法（特開平５−２１１８８２号公報）が開示され
ているが、さらに効率的な工業的生産方法が求められて
いる。
らアルコールで抽出する方法（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓ
ｏｃ．、７２、２０５９、１９５０）、ノカルディア属
の微生物を使用する方法（特開昭５０−１５４４８５号
公報）、マルトースをマルトースホスホリラーゼおよび
トレハロースホスホリラーゼで処理する方法（特開昭５
８−２１６６９５号公報）等が報告されているが、これ
らの方法はいずれもトレハロースの生産効率の低いもの
であった。そのため、近年はブレビバクテリウム属など
の微生物を使用してトレハロースを工業的に安価に製造
する方法（特開平５−２１１８８２号公報）が開示され
ているが、さらに効率的な工業的生産方法が求められて
いる。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために工業的に有利なトレハロースの製造法
について検討し、予てよりトレハロースの生産性の高い
菌株の探索を行い、土壌から純粋分離したエルスコビア
属に属する微生物がスクロースやマルトース等を主炭素
源として含む培地で培養することにより、著量のトレハ
ロースを培養液中に生成蓄積することを見出し、本発明
を完成した。
を解決するために工業的に有利なトレハロースの製造法
について検討し、予てよりトレハロースの生産性の高い
菌株の探索を行い、土壌から純粋分離したエルスコビア
属に属する微生物がスクロースやマルトース等を主炭素
源として含む培地で培養することにより、著量のトレハ
ロースを培養液中に生成蓄積することを見出し、本発明
を完成した。
【０００５】即ち本発明は、トレハロース生産能を有す
るエルスコビア・キサンチネオリティカに関し、さらに
エルスコビア属に属し、トレハロース生産能を有する微
生物をスクロースおよび／またはマルトースを主炭素源
として含む培地で培養し、培養物中にトレハロースを生
成蓄積せしめ、該培養物からトレハロースを採取するこ
とを特徴とするトレハロースの製造方法である。
るエルスコビア・キサンチネオリティカに関し、さらに
エルスコビア属に属し、トレハロース生産能を有する微
生物をスクロースおよび／またはマルトースを主炭素源
として含む培地で培養し、培養物中にトレハロースを生
成蓄積せしめ、該培養物からトレハロースを採取するこ
とを特徴とするトレハロースの製造方法である。
【０００６】本発明の方法によれば、従来の方法よりも
効率的にトレハロースの製造が可能となる。従来、エル
スコビア属に属する微生物を利用したトレハロースの製
造方法は全く 知られていない。本発明者らが探索した
エルスコビア属に属し、トレハロース生産能を有する微
生物は、エルスコビア・キサンチネオリティカ（Oersko
via xanthineolytica)に分類され、エルスコビア・キサ
ンチネオリティカＭ−６株は、土壌より新たに分離され
たトレハロース生産菌株である。本菌の菌学的性状は下
記の通りである。
効率的にトレハロースの製造が可能となる。従来、エル
スコビア属に属する微生物を利用したトレハロースの製
造方法は全く 知られていない。本発明者らが探索した
エルスコビア属に属し、トレハロース生産能を有する微
生物は、エルスコビア・キサンチネオリティカ（Oersko
via xanthineolytica)に分類され、エルスコビア・キサ
ンチネオリティカＭ−６株は、土壌より新たに分離され
たトレハロース生産菌株である。本菌の菌学的性状は下
記の通りである。
【０００７】(A)形態 寒天含有トリプト・ソイ培地上で３０〜３７℃、２４〜
７２時間培養後、位相差顕微鏡で観察した結果、Ｍ−６
株は0.５×1.５〜3.５μｍの桿菌で、多形性を示し、培
養初期には４．０μｍを越える長桿菌になることもあ
り、培養後期には球菌状細胞にもなり得る。グラム陽性
で胞子を形成しない。鞭毛を有する。 (B)各種培地上での生育状態 1.ヌートリエント・アガー平板培養：３０℃、４〜５日
培養で直径１ｍｍ程度の円形、全縁、平らな集落を形成
する。寒天培地の内部のみで生育し、白金耳で掻き取れ
ない。表面が平滑、不透明な黄色を呈する。 2.寒天含有トリプト・ソイ培地平板培養：３０℃、３日
培養で直径１ｍｍ程度の円形、全縁、隆起状の集落を形
成する。寒天培地の内部と表面で生育し、表面が平滑、
透明な黄色を呈する。
７２時間培養後、位相差顕微鏡で観察した結果、Ｍ−６
株は0.５×1.５〜3.５μｍの桿菌で、多形性を示し、培
養初期には４．０μｍを越える長桿菌になることもあ
り、培養後期には球菌状細胞にもなり得る。グラム陽性
で胞子を形成しない。鞭毛を有する。 (B)各種培地上での生育状態 1.ヌートリエント・アガー平板培養：３０℃、４〜５日
培養で直径１ｍｍ程度の円形、全縁、平らな集落を形成
する。寒天培地の内部のみで生育し、白金耳で掻き取れ
ない。表面が平滑、不透明な黄色を呈する。 2.寒天含有トリプト・ソイ培地平板培養：３０℃、３日
培養で直径１ｍｍ程度の円形、全縁、隆起状の集落を形
成する。寒天培地の内部と表面で生育し、表面が平滑、
透明な黄色を呈する。
【０００８】(C)生理的性質 1. ＯＦテスト ：発酵的 2. ４２℃における生育：陽性 3. チトクロームオキシダーゼ反応：陰性 4. カタラーゼテスト ：陽性 5. 酸素に対する態度 ：通性嫌気性 6. 嫌気培養 トリプト・ソイ培地 ：陽性 ヌートリエント・アガー：陰性 １％スクロース普通寒天培地 ：陰性 7. 硝酸塩の還元能 ：陽性 8. ゼラチンの分解性 ：陽性 9. ウレアーゼ活性 ：陽性 10. 硫化水素産生 ：陰性 11. インドール産生 ：陰性 12. ＶＰ反応 ：陰性 13. ＤＮａｓｅ試験 ：陽性 14. ＯＮＰＧ試験 ：陽性 15. ＰＮＰＧ試験 ：陽性 16. リトマスミルク試験：酸産生 17. クエン酸資化性 ：陽性 18. 加水分解反応 澱粉 ：陽性 キサンチン ：陽性 ヒポキサンチン ：陽性 アルギニン ：陰性 エスクリン ：陽性 19. 炭水化物からの酸産生 （＋：酸産生、−：酸産生
せず） Fructose ＋ Glucose ＋ Sucrose ＋ Maltose ＋ Mannose ＋ Melibiose − Arabinose − Raffinose ＋ Rhamnose − Treharose ＋ Sorbitol − Mannitol − Inositol − Glycerol ＋
せず） Fructose ＋ Glucose ＋ Sucrose ＋ Maltose ＋ Mannose ＋ Melibiose − Arabinose − Raffinose ＋ Rhamnose − Treharose ＋ Sorbitol − Mannitol − Inositol − Glycerol ＋
【０００９】(D)化学的性質 1.細胞壁ペプチドグリカンのアミノ酸組成・構造： L-
Lys L-Ser D-Asp 2.呼吸鎖イソプレノイド・キノンの分子種の決定 ：Ｍ
Ｋ−９（H4) 3.主要菌体脂肪酸組成 アンチイソ分岐脂肪酸 ： Ｃ15、Ｃ17 イソ分岐脂肪酸 ： Ｃ15、Ｃ16
Lys L-Ser D-Asp 2.呼吸鎖イソプレノイド・キノンの分子種の決定 ：Ｍ
Ｋ−９（H4) 3.主要菌体脂肪酸組成 アンチイソ分岐脂肪酸 ： Ｃ15、Ｃ17 イソ分岐脂肪酸 ： Ｃ15、Ｃ16
【００１０】上記Ｍ−６株の菌学的性質をバージーズ・
マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジ
ー（Bargey's Manual of Systematic Bacteriology）Vo
lume２と照合した結果、Ｍ−６株の分類学上の位置はエ
ルスコビア属キサンチネオリティカ（Oerskovia xanthi
neolytica)に属するものと同定された。ただし、最近、
エルスコビア属をＤＮＡ相同性とr-ＤＮＡ類縁性に基づ
き、セルロモナンス（Cellulomonans)属に含める提案が
出されている。エルスコビア属キサンチネオリティカ
（Oerskovia xanthineolytica)Ｍ−６株は、工業技術院
生命工学工業技術研究所に「微生物寄託番号生命研寄託
第１４６９５号」（ＦＥＲＭ Ｐ−１４６９５）として
寄託されている。エルスコビア属に属する菌種がスクロ
ースやマルトースなどをトレハロースに変換することは
従来全く知られていないことであり、この属の菌株を使
用することが本発明の重要な特徴である。
マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジ
ー（Bargey's Manual of Systematic Bacteriology）Vo
lume２と照合した結果、Ｍ−６株の分類学上の位置はエ
ルスコビア属キサンチネオリティカ（Oerskovia xanthi
neolytica)に属するものと同定された。ただし、最近、
エルスコビア属をＤＮＡ相同性とr-ＤＮＡ類縁性に基づ
き、セルロモナンス（Cellulomonans)属に含める提案が
出されている。エルスコビア属キサンチネオリティカ
（Oerskovia xanthineolytica)Ｍ−６株は、工業技術院
生命工学工業技術研究所に「微生物寄託番号生命研寄託
第１４６９５号」（ＦＥＲＭ Ｐ−１４６９５）として
寄託されている。エルスコビア属に属する菌種がスクロ
ースやマルトースなどをトレハロースに変換することは
従来全く知られていないことであり、この属の菌株を使
用することが本発明の重要な特徴である。
【００１１】次に、本発明によるトレハロースの製造法
について説明する。本発明で使用されるトレハロース生
産菌としては、エルスコビア（Oerskovia)属に属し、ト
レハロース生産能を有するものであればいかなる微生物
でも良い。また、それらの変異株もトレハロース生産能
を有するものであれば使用することができる。培養は、
通常液体培地を用いて好気的に行われる。液体培地の炭
素源としては、例えばスクロース、マルトース、グルコ
ース、洗糖蜜、廃糖蜜などを単独あるいは適宜組み合わ
せて使用することができるが、特にスクロース、マルト
ースはトレハロースの生産に好適に使用できる。それら
炭素源の培地中の濃度はできるだけ高濃度であるのが好
ましいが、一般には５〜２０％(w/v) の範囲で添加使用
する。
について説明する。本発明で使用されるトレハロース生
産菌としては、エルスコビア（Oerskovia)属に属し、ト
レハロース生産能を有するものであればいかなる微生物
でも良い。また、それらの変異株もトレハロース生産能
を有するものであれば使用することができる。培養は、
通常液体培地を用いて好気的に行われる。液体培地の炭
素源としては、例えばスクロース、マルトース、グルコ
ース、洗糖蜜、廃糖蜜などを単独あるいは適宜組み合わ
せて使用することができるが、特にスクロース、マルト
ースはトレハロースの生産に好適に使用できる。それら
炭素源の培地中の濃度はできるだけ高濃度であるのが好
ましいが、一般には５〜２０％(w/v) の範囲で添加使用
する。
【００１２】窒素源としては、微生物が使用しうるペプ
トン、酵母エキス、肉エキス、麦芽エキス、コーンスチ
ープリカー、尿素、アンモニウム塩などの有機および無
機窒素化合物が使用できる。また、無機塩類としては、
リン酸、マグネシウム、カルシウム、カリウム、鉄など
の通常、細菌の培養に必要な塩類が単独、または適宜組
み合わせて使用されるが、特にマグネシウムの添加はト
レハロースの効率的な生産に有効である。さらに必要に
より、他の無機物や有機物、例えばビタミン類を培地に
添加して使用する。
トン、酵母エキス、肉エキス、麦芽エキス、コーンスチ
ープリカー、尿素、アンモニウム塩などの有機および無
機窒素化合物が使用できる。また、無機塩類としては、
リン酸、マグネシウム、カルシウム、カリウム、鉄など
の通常、細菌の培養に必要な塩類が単独、または適宜組
み合わせて使用されるが、特にマグネシウムの添加はト
レハロースの効率的な生産に有効である。さらに必要に
より、他の無機物や有機物、例えばビタミン類を培地に
添加して使用する。
【００１３】培養温度は菌体の生育可能な温度範囲で培
養することができるが、好ましくは３５〜４０℃の範囲
である。培養液のｐＨは６〜８の範囲に制御し、その調
整には炭酸カルシウム、水酸化ナトリウム、アンモニア
水などを用いるが、特に炭酸カルシウムによる調整がト
レハロースの生産に好適である。また、通常の培養槽に
おける通気量は１／４〜１ＶＶＭ、撹拌数は５００〜８
５０r.p.m.で行い、培養時間は５〜８日程度が好まし
い。
養することができるが、好ましくは３５〜４０℃の範囲
である。培養液のｐＨは６〜８の範囲に制御し、その調
整には炭酸カルシウム、水酸化ナトリウム、アンモニア
水などを用いるが、特に炭酸カルシウムによる調整がト
レハロースの生産に好適である。また、通常の培養槽に
おける通気量は１／４〜１ＶＶＭ、撹拌数は５００〜８
５０r.p.m.で行い、培養時間は５〜８日程度が好まし
い。
【００１４】培養終了後、培養物からのトレハロースの
回収は、通常の糖類の回収方法により行われる。即ち、
得られた培養液をフィルター、遠心分離、限外濾過等に
より菌体などを除去した後、その上清部分をイオン交換
樹脂や活性炭を用いて脱塩、脱色後に濃縮する。この濃
縮液にトレハロースの微結晶を少量添加し、撹拌しなが
ら冷却して結晶を晶出させた後、遠心分離してトレハロ
ースの粗結晶を得る。必要により再度粗結晶を水に溶解
し、上記操作を繰り返すことによりトレハロースの精製
結晶を得ることができる。
回収は、通常の糖類の回収方法により行われる。即ち、
得られた培養液をフィルター、遠心分離、限外濾過等に
より菌体などを除去した後、その上清部分をイオン交換
樹脂や活性炭を用いて脱塩、脱色後に濃縮する。この濃
縮液にトレハロースの微結晶を少量添加し、撹拌しなが
ら冷却して結晶を晶出させた後、遠心分離してトレハロ
ースの粗結晶を得る。必要により再度粗結晶を水に溶解
し、上記操作を繰り返すことによりトレハロースの精製
結晶を得ることができる。
【００１５】
【実施例】以下に本発明を実施例により詳しく説明する
が、これらは本発明の範囲を限定するものではない。な
お、実施例中の％は（w/v)で示す。 実施例１ 種培養 種培養にはペプトン１％、酵母エキス０．５％、肉エキ
ス０．３％、ＮａＣｌ０．３％、Ｎａ2 ＨＰＯ4 ・１２
Ｈ2 Ｏ ０．４％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ０．１４％か
らなる基本培地に炭素源としてスクロース５％を添加し
たものを使用した。この培地１００ｍｌを５００ｍｌ容
振盪フラスコに分注し、加熱殺菌したものを種培養用培
地とした。この培地に予め１％マルトースを含有する寒
天斜面基本培地で３７℃、２４時間培養したエルスコビ
ア・キサンチネオリティカＭ−６株（ＦＥＲＭ Ｐ−１
４６９５）の１白金耳を接種し、３７℃で２日間往復振
盪培養を行い、種培養液を調製した。
が、これらは本発明の範囲を限定するものではない。な
お、実施例中の％は（w/v)で示す。 実施例１ 種培養 種培養にはペプトン１％、酵母エキス０．５％、肉エキ
ス０．３％、ＮａＣｌ０．３％、Ｎａ2 ＨＰＯ4 ・１２
Ｈ2 Ｏ ０．４％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ０．１４％か
らなる基本培地に炭素源としてスクロース５％を添加し
たものを使用した。この培地１００ｍｌを５００ｍｌ容
振盪フラスコに分注し、加熱殺菌したものを種培養用培
地とした。この培地に予め１％マルトースを含有する寒
天斜面基本培地で３７℃、２４時間培養したエルスコビ
ア・キサンチネオリティカＭ−６株（ＦＥＲＭ Ｐ−１
４６９５）の１白金耳を接種し、３７℃で２日間往復振
盪培養を行い、種培養液を調製した。
【００１６】本培養 次いで、上記基本培地に炭素源としてスクロース５％を
添加したもの１００ｍｌを５００ｍｌ容振盪フラスコに
分注し、加熱殺菌を行った。さらに、予め乾熱殺菌した
炭酸カルシウムを培地に対して２０％となるよう添加し
たものを本培養用培地とした。この培地約１１０ｍｌに
エルスコビア・キサンチネオリティカＭ−６株の種培養
液を１ｍｌ接種して、３７℃で３日間往復振盪培養を行
った。得られた培養液を遠心分離して菌体などの不溶物
を除去した後、上清を薄層クロマトグラフィー（ＴＬ
Ｃ）およびＮＨカラムによる高速液体クロマトグラフィ
ー（ＨＰＬＣ）で分析したところ、培地中にトレハロー
ス１．０％の生成が認められた。
添加したもの１００ｍｌを５００ｍｌ容振盪フラスコに
分注し、加熱殺菌を行った。さらに、予め乾熱殺菌した
炭酸カルシウムを培地に対して２０％となるよう添加し
たものを本培養用培地とした。この培地約１１０ｍｌに
エルスコビア・キサンチネオリティカＭ−６株の種培養
液を１ｍｌ接種して、３７℃で３日間往復振盪培養を行
った。得られた培養液を遠心分離して菌体などの不溶物
を除去した後、上清を薄層クロマトグラフィー（ＴＬ
Ｃ）およびＮＨカラムによる高速液体クロマトグラフィ
ー（ＨＰＬＣ）で分析したところ、培地中にトレハロー
ス１．０％の生成が認められた。
【００１７】実施例２ 上記実施例１において本培養用培地の炭素源として５％
マルトースを添加したこと以外は同様の操作を行った結
果、培地中に０．５％のトレハロースの生成が認められ
た。
マルトースを添加したこと以外は同様の操作を行った結
果、培地中に０．５％のトレハロースの生成が認められ
た。
【００１８】実施例３ 実施例１における本培養用培地の炭素源を２０％スクロ
ースとした培地１１０ｍｌにエルスコビア・キサンチネ
オリティカＭ−６株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４６９５）の種
培養液を３ｍｌ接種し、３７℃で７日間往復振盪培養を
行った。なお、種培養液の調製は実施例１に記載の方法
に準じた。得られた培養液の上清部分をＴＬＣおよびＨ
ＰＬＣで分析したところ、培養４日目のトレハロース濃
度は５．１％、培養７日後では６．０％であった。
ースとした培地１１０ｍｌにエルスコビア・キサンチネ
オリティカＭ−６株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４６９５）の種
培養液を３ｍｌ接種し、３７℃で７日間往復振盪培養を
行った。なお、種培養液の調製は実施例１に記載の方法
に準じた。得られた培養液の上清部分をＴＬＣおよびＨ
ＰＬＣで分析したところ、培養４日目のトレハロース濃
度は５．１％、培養７日後では６．０％であった。
【００１９】実施例４ 実施例３に記載の培地と同一組成の２０％スクロース含
有培地に消泡剤０．２５ｍｌを添加した培地５５０ｍｌ
を１リットル容ジャーファーメンターに分注し、これに
実施例１に記載の方法と同一の方法で調製したエルスコ
ビア・キサンチネオリティカＭ−６株（ＦＥＲＭ Ｐ−
１４６９５）の種培養液を１０ｍｌ接種し、通気量０．
５ｖｖｍ、撹拌速度７００r.p.m.の条件で３７℃で６日
間ジャー培養を行った。培養６日目の培養液の上清部分
をＴＬＣおよびＨＰＬＣで分析したところ、トレハロー
ス濃度は５．８％であった。
有培地に消泡剤０．２５ｍｌを添加した培地５５０ｍｌ
を１リットル容ジャーファーメンターに分注し、これに
実施例１に記載の方法と同一の方法で調製したエルスコ
ビア・キサンチネオリティカＭ−６株（ＦＥＲＭ Ｐ−
１４６９５）の種培養液を１０ｍｌ接種し、通気量０．
５ｖｖｍ、撹拌速度７００r.p.m.の条件で３７℃で６日
間ジャー培養を行った。培養６日目の培養液の上清部分
をＴＬＣおよびＨＰＬＣで分析したところ、トレハロー
ス濃度は５．８％であった。
【００２０】この培養液を遠心分離して菌体などの不溶
物を除去した後、その上清５００ｍｌをアンバーライト
ＩＲ−１２０ＢおよびアンバーライトＩＲＡ−４７のカ
ラムに通液し、さらに活性炭処理して脱塩・脱色した
後、減圧濃縮して４０ｍｌの濃縮液を得た。これに微粉
砕したトレハロースの結晶を少量添加し、撹拌しながら
室温まで冷却して結晶を晶出させた後、遠心分離して
５．４ｇのトレハロース結晶を回収した。
物を除去した後、その上清５００ｍｌをアンバーライト
ＩＲ−１２０ＢおよびアンバーライトＩＲＡ−４７のカ
ラムに通液し、さらに活性炭処理して脱塩・脱色した
後、減圧濃縮して４０ｍｌの濃縮液を得た。これに微粉
砕したトレハロースの結晶を少量添加し、撹拌しながら
室温まで冷却して結晶を晶出させた後、遠心分離して
５．４ｇのトレハロース結晶を回収した。
【００２１】
【発明の効果】本発明に関わるエルスコビア属に属する
トレハロース生産菌、特に新菌株エルスコビア・キサン
チネオリティカＭ−６株をスクロースおよび／またはマ
ルトースを主炭素源として含む培地で培養し、培養物か
らトレハロースを採取することにより、トレハロースを
効率的に製造することが可能となる。
トレハロース生産菌、特に新菌株エルスコビア・キサン
チネオリティカＭ−６株をスクロースおよび／またはマ
ルトースを主炭素源として含む培地で培養し、培養物か
らトレハロースを採取することにより、トレハロースを
効率的に製造することが可能となる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 江橋 正 千葉県流山市南流山６−29−１−３−410
Claims (4)
- 【請求項１】 エルスコビア属に属し、トレハロース生
産能を有する微生物をスクロースおよび／またはマルト
ースを主炭素源として含む培地で培養し、培養物からト
レハロースを採取することを特徴とするトレハロースの
製造方法。 - 【請求項２】 エルスコビア属に属する微生物が、エル
スコビア・キサンチネオリティカである請求項１記載の
製造方法。 - 【請求項３】 エルスコビア属に属する微生物が、エル
スコビア・キサンチネオリティカＭ−６株（ＦＥＲＭ
Ｐ−１４６９５号）である請求項１記載の製造方法。 - 【請求項４】 トレハロース生産能を有するエルスコビ
ア・キサンチネオリティカ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP33765494A JPH08173179A (ja) | 1994-12-28 | 1994-12-28 | 新規微生物およびそれを用いるトレハロースの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP33765494A JPH08173179A (ja) | 1994-12-28 | 1994-12-28 | 新規微生物およびそれを用いるトレハロースの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08173179A true JPH08173179A (ja) | 1996-07-09 |
Family
ID=18310697
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP33765494A Pending JPH08173179A (ja) | 1994-12-28 | 1994-12-28 | 新規微生物およびそれを用いるトレハロースの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08173179A (ja) |
-
1994
- 1994-12-28 JP JP33765494A patent/JPH08173179A/ja active Pending
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