JPH06239848A - ポリエン系化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】抗菌作用を有する新規な化合物を提供するこ
と。 【構成】式

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、抗菌作用を有する新規
なポリエン系化合物に関する。

【０００２】

【従来の技術】現在、種々の抗生物質が医薬として使用
されているが、その効果は必ずしも充分ではなく、より
優れた抗菌作用を持つ新規化合物が望まれる。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、抗菌
作用を有する新規な化合物を提供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、抗菌活性
を有する新規物質を土壌分離菌の中から得るべく探索研
究を重ねた結果、本発明者らの見出した特定の微生物
が、抗菌作用を有する新規な生理活性物質を生産するこ
とを見出し本発明を完成するに至った。

【０００５】本発明は、式（Ｉ）

【０００６】

【０００７】で表される化合物（以下、これをマヌマイ
シンＢと称する。）である。本発明のマヌマイシンＢを
生産する微生物は、本発明者らが山梨県甲府市で採取し
た土壌より新たに分離した菌株であり、微生物の名称
「Streptomyces parvullus TA-8564 」及び微生物寄託
番号「微工研菌寄第13196号（FERM P-13196 ）」とし
て、工業技術院微生物工業技術研究所に寄託されてい
る。

【０００８】この菌株の菌学的性状を以下に示す。 ［形態］本菌株の栄養菌糸は合成寒天培地、天然寒天培
地においてよく発達し、不規則に分枝する。また隔壁は
認められない。胞子はスターチ・無機塩寒天培地および
オートミール寒天培地などで栄養菌糸より伸長した気菌
糸の先端に良好に形成される。顕微鏡で観察すると、胞
子形成菌糸の分糸方法は単純分糸で、胞子は通常気菌糸
の先端に螺旋状に形成される。

【０００９】胞子は１０個以上連鎖し、表面は平滑であ
る。胞子の形成は楕円形でその大きさは、０．８ ×
１．０×０．６〜０．７μｍである。

【００１０】菌核、胞子嚢、鞭毛胞子は観察されない。 ［培地上での生育状態］各種培地上で、２８℃，１４日
間培養したときの肉眼による観察結果を表１に示す。

【００１１】

【表１】

【００１２】

【００１３】［生理的性質］ １）生育温度範囲 イースト・麦芽エキス培地で１８〜３４℃の範囲で良好
に生育する。１１℃以下、４７℃以上の温度範囲では生
育しない。 ２）生化学的性質 ａ）好気性、嫌気性の区別：好気性 ｂ）ゼラチンの液化：陽性 ｃ）脱脂乳の凝固：陰性 ｄ）脱脂乳のペプトン化：陰性 ｅ）スターチの加水分解：陽性 ｆ）メラニン様色素の生成：陰性 ｇ）細胞壁の型：Ｉ型 ｈ）メナキノン組成：主成分［ＭＫ−９（Ｈ₆），ＭＫ
−９（Ｈ₈）］ ３）炭素源の利用 （プリドハム・ゴドリーブ寒天培地上） 利用する：Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グ
ルコース、Ｄ−フラクトース、Ｌ−ラムノース、Ｄ−マ
ンニット わずかに利用する：シュクロース、Ｌ−ラムノース 利用しない：ラフィノース

【００１４】以上の性状から本菌株が放線菌中、ストレ
プトミセス属に属することが明らかとなったので、上記
諸性状をＩ．Ｓ．Ｐ．「ジ・インターナショナル・スト
レプトミセス・プロジェクト」、バージー著「マニュア
ル・オブ・システマティック・バクテリオロジー」第４
巻（1989年）及びワックスマン著「ジ・アクチノミセ
ス」第２巻（1961年）に報告されている多くの既知菌株
と比較した結果、本菌株は、Streptomyces parvullus
に最も近い性状を示していた。

【００１５】以上の結果より本菌株は Streptomyces pa
rvullus と同じくするものと判断し、本菌株を Strepto
myces parvullus TA-8564 と命名した。

【００１６】この培養により生産されたマヌマイシンＢ
を単離するには、発酵生産物を採取する一般的な方法に
準じて行えば良い。すなわち各種の栄養物質を含む培地
でStreptomyces parvullus TA-8564株を好気的条件下で
培養し、培養終了後、培養液を上清と菌体に分離後，上
清は酢酸エチルエステルにて抽出し、菌体はメタノール
にて抽出し，更に酢酸エチルエステルにて抽出する。抽
出されたマヌマイシンＢの画分を濃縮してシロップ状と
する。このシロップをシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー、ゲルろ過カラムクロマトグラフィーに付すことに
より、マヌマイシンＢを精製単離することができる。

【００１７】以上の精製法によって得られたマヌマイシ
ンＢの理化学的性質を以下に示す。 （１）外観：黄色粉末 （２）融点：１２８〜１３２℃ （３）質量分析値： ＥＩＭＳスペクトル ｍ／ｚ ４５５（Ｍ⁺） 陽イオンＦＡＢＭＳスペクトル ｍ／ｚ ４５６（Ｍ＋
Ｈ）⁺ 陰イオンＦＡＢＭＳスペクトル ｍ／ｚ ４５４（Ｍ−
Ｈ）^- （４）分子式：Ｃ₂₆Ｈ₃₃ＮＯ₆ （５）分子量：４５５ （６）紫外線吸収スペクトル：メタノール溶液で測定し
た結果、 λmax ２８０ｎｍ（ε＝３．４×１０⁴） λmax ３１０ｎｍ（ε＝２．５×１０⁴） （７）赤外線吸収スペクトル：ＫＢｒ錠中で測定したス
ペクトルを図１に示す。 （８）¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル：重クロロホルム中、４
００ＭＨｚで測定したスペクトルを図２に示す。 （９）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル：重クロロホルム中、１
００ＭＨｚで測定したスペクトルを図３に示す。 （１０）溶剤に対する溶解性：クロロホルム、酢酸エチ
ル、アセトン、メタノ−ルに可溶水に不溶 また、マヌマイシンＢはその元素分析値，分子量，紫外
線スペクトル，赤外線スペクトル，¹Ｈ−ＮＭＲスペク
トル，¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトルの解析によりその構造式
が式（Ｉ）のように決定された。

【００１８】

【発明の効果】本発明の化合物は抗菌作用を有するので
医薬として有用である。

【００１９】

【実施例】以下、実施例および試験例を挙げて本発明を
具体的に説明する。 実施例 （１）１００ｍｌ当りオートミール２ｇ、グルコース２
ｇ、塩化ナトリウム０．３ｇ、肉エキス０．３ｇ、硫酸
第二鉄０．０４ｇ、塩化マンガン０．０４ｇ、炭酸カル
シウム０．３ｇを含む無菌液体培地にStreptomyces par
vullus TA-8564株を接種し、２８℃、９６時間振とう培
養した。次に内容量５Ｌのミニジャー５基を用いて種培
地と同じ組成の無菌培地３Ｌに前記培養液１００ｍｌを
接種し、２８℃、９６時間通気攪拌培養した。 （２）培養終了後、５基分の培養液１５Ｌを上清と菌体
に分離後、上清は酢酸エチルエステル１５Ｌで抽出し
た。菌体はメタノール１０Ｌで抽出し、メタノールを除
去した後、酢酸エチルエステル１０Ｌで抽出を行った。
上清、菌体ともに、抽出液を無水硫酸ナトリウムにて乾
燥後、濃縮し、それぞれ黄褐色シロップ状物質３．７９
ｇ、赤褐色シロップ状物質８．８７ｇを得た。 （３）シロップ状物質を合わせて少量のメタノールに溶
解し、メタノールで調製したセファデックスＬＨ−２０
（商品名，ファルマシア社製）を充填した７００ｍｌの
カラムを用いて、メタノールでゲルろ過を行った。活性
画分を集め、固形状物質７．１５ｇを得た。 （４）前項の活性画分を少量のメタノールに溶解し、ク
ロロホルム：ｎ−ヘキサン：メタノ−ル＝５：５：１で
調製したセファデックスＬＨ−２０を充填した７００ｍ
ｌのカラムを用いて、同溶媒でゲルろ過を行った。活性
画分を集め、シロップ状物質５８９ｍｇを得た。 （５）前項の活性画分を少量のメタノールに溶解し、ク
ロロホルム：ｎ−ヘキサン：メタノ−ル＝５：５：１で
調製したセファデックスＬＨ−２０を充填した４００ｍ
ｌのカラムを用いて、同溶媒でゲルろ過を行った。活性
画分を集め、シロップ状物質１４２ｍｇを得た。 （６）前項の活性画分を少量のメタノールに溶解し、ク
ロロホルム：ｎ−ヘキサン：メタノ−ル＝１０：１０：
１で調製したセファデックスＬＨ−２０を充填した３０
０ｍｌのカラムを用いて、同溶媒でゲルろ過を行った。
活性画分を集め、シロップ状物質７８．５ｍｇを得た。 （７）前項の活性画分を少量の６０％メタノールに溶解
し、６０％メタノールで調製した逆相シリカゲルのクロ
マトレックス（商品名、フジ−デビットソン社）を充填
した２００ｍｌのカラムを用いて、メタノールの濃度を
徐々にあげながら６０ 〜１００％メタノールでゲルろ
過を行った。活性画分を集め、シロップ状物質３０．６
ｍｇを得た。 （８）前項の活性画分３０．６ｍｇをアセトニトリルに
溶解し、以下の条件で行った高速液体カラムクロマトグ
ラフィ−の試料とした。

【００２０】 カラムサイズ １０φ×２５０ｍｍ 担体 センシューパックＯＤＳ（センシュ
ー科学社製） 溶媒組成 ６０％アセトニトリル、０．１％Ｔ
ＦＡ 流速 ４．５ｍｌ／ｍｉｎ 温度 ５０℃ 検出波長 ３１０ｎｍ 装置 日本分光８８０−ＰＶ 保持時間１４．５〜１５．０分の画分を繰り返し分取し
１５．４ｍｇのマヌマイシンＢを得た。

【００２１】試験例（抗菌作用） 微量液体希釈法にて、マヌマイシンＢの抗菌力測定（Ｍ
ＩＣ：最小発育阻止濃度）を行った。 （培地）細菌の培地としては、ハートインフュージョン
ブイヨン培地を、真菌の培地としては、サブローブイヨ
ン培地を用いた。 （試験方法）細菌、酵母は３７℃で１８時間、糸状菌は
２８℃で７２時間、培養器内で培養をした後、ＭＩＣを
測定した。 （結果）結果は表２に示す。

【００２２】

【表２】

【００２３】

【図面の簡単な説明】

【図１】ＫＢｒ錠にて測定したマヌマイシンＢの赤外線
吸収スペクトルを示す。

【図２】重クロロホルム中、４００ＭＨｚで測定したマ
ヌマイシンＢの¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。

【図３】重クロロホルム中、１００ＭＨｚで測定したマ
ヌマイシンＢの¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 花田 和紀 東京都豊島区高田３丁目24番１号 大正製 薬株式会社内 (72)発明者 山岸 三千男 東京都豊島区高田３丁目24番１号 大正製 薬株式会社内

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式 で表される化合物。