JPH04505013A - Ｌ―アルファ―グリセリルホスホリルコリンおよびｌ―アルファ―グリセリルホスホリルエタノールアミンの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 Ｌ−アルファーグリセリルホスボリルコリンおよびＬ−乙ムヱＬ二ｌ」コ＝！Ｊ Ｊｚ＊、頌九Ｌｙヱ五ノノ二ノ弓５辷と４製造法 本発明は出発物質として源泉の異なるレシチン類を用いる、非常に高い収率およ び純度の、Ｌ−α−グリセリルホスホリルコリン（ＧＰＣ）およびＬ−α−グリ セリルホスホリルエタノールアミン（ＧＰＥ）の製造法に関連する。

ＧＰＣの公知の製造法は、結晶化による精製に関連する困難さのため、工業的応 用には適さないかまたはＧＰＣを得るのに非常に高いコストがかかる。

ＧＰＣの結晶化は事実上確かであり、生成物自体がすでに非常に純粋である時に だけ良好な収率を与えるが、そうでなければＢｉｏｃｈｅｓ、　Ｐｒｅｐａｒａ ｔｉｏｎｇ　６．１６．１９５８にも報告されているように、ＧＰＣは精製する ことができないかまたは結晶化の収率が非常に低い。上記引用文献では、例えば 著者達は粗製の卵レシチンを使用しているが、塩化カドミウムとの錯体を結晶化 することによりＧＰＣを精製している。

非常に有毒なＣｄＣ１＊の除去？こは、多量のイオン交換樹脂上の処理が必要で あり、これによって純粋なＧＰＣの収量が著しく低下し、大規模な適用がさまた げられる。

シー・カプレロ（Ｃ，Ｃｕｂｒｅｒｏ）外は、Ｃｂｓｓ、　Ｐｈｙｇ。Ｌｉｐ− によって純粋なＧＰｃを得ている。

この方法は、非常に費用がかさみ工業的に応用することが困難であって、ケイ酸 をともなって不純なＧＰＣを与える。

Ｇ　Ｂ　２０５８７９２には高純度で大ｌ！摸操作に適するＧＰＣの製造方法が 開示されている。

この方法は、出発物質として非常に純粋なホスファチジルコリンを用いて、・Ｇ ＰＣ精製のむずかしさを妨げている。得られたＧＰＣの精製は行われない（ホス ファチジルコリンの脱アシル化で放出される脂肪酸エステルの除去を除く）が、 非常に純粋で高価なホスファチジルコリンの使用により、粗製の大豆または卵レ シチンについてはもちろん使用することができず、または他のホスファチド順あ るいは他の中性または酸性の水溶性（ｈｙｄｒｏｓｏｌｕｂｌｅ）不純物を全く 含まないホスファチジルコリンについてさえ使用することができないこの方法の 実用性は制限される。

Ｅ　Ｐ　−Ａ　−２１７７６５には、粗製の、または脱オレイン酸エステル化さ れた（　ｄｅｏｌｅａｔｅｄ）大豆レシチンまたは粗製の卵レシチンから、純粋 な式（ｎＧ　Ｐ　Ｃ＋　ｍＧ　ＰＥ）　ＺｎＣ１，（式中りおよびｍは０ないし ｌの値を有し、ｍ　＋　ｎ＝１である）の錯体を通って、ＧＰＣおよびＧＰＥを 製造する方法が開示されている。次に塩化亜鉛を水に不溶性の錯体ＺｎＣＩｔＰ ｙｔ（Ｐｙ・ピリジン）によって除去してｎ　Ｇ　Ｐ　Ｃ＋　ｍ　Ｇ　Ｐ　Ｅの 水溶液を得て、このものを次にイオン交換樹脂上で分離する。非常に純粋なＧＰ Ｃを得るためには、しかしながら、粗製または脱オレイン酸エステル化された大 豆レシチンのエタノール抽出物の脱アシル化を実施して、約６２％の収率（この 脱すレイン酸エステル化された大豆レシチン中に存在するホスファチジルコリン 含量について計算して）でＧＰＣを得ることが必要である。

もし脱アシル化をメタノール抽出物または直接粗製または脱すレイン酸エステル 化レシチンのメタノール懸濁液について実施するならば、より高い収率（約９５ ％）が得られるが、得られた生成物は製薬用には適さない純度を有し、再びわず られしい手順によって精製されねばならない。

本発明の方法によれば、非常に純粋なＧＰＣおよびＧＰＥをメタノール抽出物ま たは＠濁液からも高収率でしシル化段階からの粗製溶液の無水溶媒中に平衡させ た酸の形の陽イオン樹脂上で溶出させ、この樹脂を最初は溶媒で、そして次に水 で洗浄することより成る。

非水媒質中の粗製の脱アシル化溶液の溶出中に、ＧＰＣ，ＧＰＥおよびその他の 塩基性物質は樹脂上に固定され、次にこれを溶媒で完全に洗浄して、ＧＰＣおよ びＧＰＥを溶出させることなく、すべての中性および酸性不純物を完全に除去す ることができる。

樹脂を水で洗浄するときは、ＧＰＣおよびＧＰＥは非常に弱い塩基であるので、 遊離塩基および樹脂に結合した塩基の間の平衡は、はとんど完全にｊ！離塩基側 に移動し、そのためＣＰ、ＣおよびＧＰＥは容易にしかも定量的に溶出される。

エタノールアミンおよびコリンの痕跡のようなＧＰＣおよびＧＰＥよりもさらに 塩基性の不純物もまた、酸の形の陽イオン樹脂を用いると、酸性または塩基性の 溶離剤を用いるときだけこれらが溶出されるが、水では溶出されないため、除去 される。

酸型の陽イオン上の粗製ＧＰＣ／ＧＰＥ混合物の精製は知られておらず、それな しでは安定な結合Ｇ　Ｐ　Ｃ／ＧＰＥ−樹脂を得ることが不可能であり、そして ＧＰＣ／ＧＰＥが一般に酸の形の強陽イオン樹脂上の非水媒質中で受ける強い分 解（時には完全な）を避けることが不可能である、特定の操作条件を必要とし、 −力水媒質中の上記の樹脂を用いると、分解が非常に少ないかまたはないが、安 定な結合を得て、精製を実施することは不可能である。

例えば、Ｇ　Ｂ　２０５１１７９２においては、純粋なＧＰＣのメタノール溶液 は、弱酸性樹脂上で溶出されるがナトリウムイオンを除去するためだけであり、 この中で後に説明するように、使用する組み合わせ樹脂／溶媒がＧＰＣ／ＧＰＥ の塩基仕度に依存することを許さず、そしてそのため粗製脱アシル化混合物の精 製を許さないので、ＧＰＣは定量的かつ不可逆的に樹脂に結合はされない。

もし、水溶液の代わりに、粗製ＧＰＣおよび／またはＧＰＥのメタノール溶液を 用いるならば、カルボン酸樹脂＄１　（ｅｓｒｂｏｘｙｌｉｃ　ｒｅｓｉｎｓ） はＧＰＣおよび混合物ＧＰＣ／ＧＰＥが安定にこの樹脂に結合されないが不純物 とともに溶出されるので、精製を許さず、一方スルホン酸樹脂１ｇ　（５ｕＨｏ ｎｉｃ　ｒｅｓｉｎｓ）は、ＧＰＣ／ＧＰＥ−樹脂の間の安定な結合の形成を許 すが、一般に、ｐ−ｏ結合の開袋のたｈ’Ｖｃ、　ｐ　ｃの非常に高い分解（完 全な分解まで）をひき起こす。２つのヒドロキシ基が上記の分解に関与しており 、事実この分解は、これらの基をエステルまたは環状ケタールとして保護すると きは起こらない。

しかしながら、弱陽イオン樹脂をエタノール中で使用するか、または数種のマク ロ孔質構造を有するスルホン酸樹脂をメタノール、エタノールまたはこれらの混 合物中で使用するときは、これらの条件におけるＧＰＣおよびＧＰＥまたは混合 物ｎ　Ｇ　Ｐ　Ｃ＋　ｍ　Ｇ　Ｐ　Ｅはこれらの樹脂上に不可逆的に結合され、 （ｎにＰＣ＋ｍＧＰＥ）　”　ｐ　樹脂〔式中、 ｎはＧＰＣのミリモル数を表して、０ないし１の範囲であり：ｍはＧＰＥのミリ モル数を表して、０ないし１のａ′Ｍであり；ｎ＋ｍ３＝１であり： ｐは樹脂の−ｇ当量を表して、強陽イオン樹脂については３ないし６の＠囲であ り、弱陽イオン樹脂については６ないし８の＠囲であるコ として仮に表わすことができる混合物を形成する。

さらに、強酸樹脂が用いられるとき見られる分解は樹脂上に吸着された混合物Ｇ ＰＣ＋ＧＰＥを短期間保つことによって避けることができ、このため本発明の方 法に従う精製を可能にするが、この方法は一般的に下記のように記述することが できる。

粗製の卵レシチンまたは粗製あるいは脱オレイン酸エステル化大豆レシチンの懸 濁液またはアルコール溶液（好ましくはメタノールまたはエタノール溶１ｌｌ） をアルカリ金属アルコキシド（好ましくはナトリウムまたはカリウムメチラート またはエチラート）で処理する。

混合物ｎＧＰｃ＋ｍＧＰＥ（ｎおよびｍは上記の定義の通りである）を含有する アルコール溶液を、有１１１８（好ましくは酢酸またはプロピオン酸）または無 機酸（好ましくは塩酸、リン酸またはスルホン酸）を用いて、または少量の酸相 指上の溶出によって、中和する。

濃縮した後、大部分の脂肪酸エステルを、得られた２相を分離することによって 除去し、混合物ｎＧＰｃ＋ｍＧＰＥを含有するアルコール溶液をアルコール（好 ましくはメタノール、エタノールまたはその混合物）中に平衡させた酸陽イオン 樹脂（好ましくはマクロ孔質型のスルホン酸樹脂またはカルボン酸相ＩＩ）上に 装入する。

樹脂にこのように結合した混合物ｎ　Ｇ　Ｐ　Ｃ＋　ｒｎ　Ｇ　Ｐ　Ｅを、次に 出発物質の脱アシル化混合物中に存在する不純物が完全に除去されるまでアルコ ールＩｔ（好ましくはメタノール、エタノールまたはその混合物）で洗浄すると 、この段階ではＧＰＣおよびＧＰＥの溶出は起こらない。

次に樹脂を水で洗浄して、非常に純粋なｎＧＰｃ＋ｍＧＰＥｍ液を得て、これを 塩基樹脂上の溶出によって分離する。駿樹脂のｌは水：アルコール、好ましくは 実施例８に示したようなＣｓ−Ｃ１アルコールを用いる抽出によって粗製の脱ア シル化混合物の予備的部分精製を行うことにより、かなり減少させることができ る。

純粋なＧＰＣのみが望ましいときはナトリウムまたはカリウムアルコラードを用 いる処理の前に、塩基樹脂上の溶出によつてレシチンのアルコール抽出物からホ スファチジルエタノールアミン（ＰＥ）を除去するのが便利である。純粋なＧＰ Ｃは実施例７に示すように、粗製の脱アシル化混合物の精製後にこのようにして 得られる。たとえＧＰＥの除去に付加的な樹脂上の溶出が包含されるとしても、 比較的低い量の酸相脂が用いられ、しかも水媒質中のＧＰＣ／ＧＰＥの分離はも はや必要ないので、普通に得られるものよりもはるかに高濃度の純粋なＧＰＣ水 溶液を得ることができる。このことが、事実上アルコールの総容量を変えること なく最終的なＧＰＣの濃縮段階をより容易にする。もちろん、記載される方法は 合成のＧＰＣおよびＧＰＥの精製にも使用することができる。

実　施　例　ｌ 脱すレイン酸エステル化された大豆レシチンの製造粗製の大豆レシチン１ｋｇを ５℃に冷却したアセトン３゜５ｅに懸濁させ、この懸濁液を５℃で３０分間かく はんした後濾過した。残留物をアセトン２ｇに懸濁させて５℃で２時間かくはん してから濾過し残留物を室温でＩｆｆのアセトンで洗浄した。固体を３５℃で真 空乾燥させた６８０ｇの大豆脱オレイン酸エステル化レシチンを得た。

実　施　例　２ 脱オレイン酸エステル化された大豆レシチンのメタノール中の脱アシル化による ＧＰＣの製造ＣＨｓＯＮａ　（２４ｇ）を含有する無水メタノール（２ｇ）中の 脱すレイン酸エステル化した大豆レシチン（０，５ｋｇ）の懸濁液を、室温で約 ３時間かくはんした。混合物を濾過し、残留物をメタノール（３Ｘ　５０　ｍｌ ）で洗浄し：濾液を酢酸（約２５ｍ１）で中和しくｐＨ＝６　）　した後濃縮し て約５００ｍ１として、脂肪酸を分離した。

２ｇの活性炭で脱色した後、メタノール溶液をメタノール中で平衡させたアンバ ーリスト（Ａｓｂｅｒｌｙｓｔ）（商Ｉｔ　名）１５樹脂（酸の形で５５０ｍ１ ）上に装入した。この樹脂を不純物の除去（ＴＬＣ）まで（約７今）メタノール （１゜５Ｑ）で洗浄し、次に樹脂を水（約１．２Ｑ）で洗浄した。

水溶液を活性炭（２ｇ）で２回処理し、この水溶液（約４４ｇのｎ　Ｇ　Ｐ　Ｃ ＋　ｍ　Ｇ　Ｐ　Ｅを含む）を、最初は水中で平衡させたＯＨ形の！Ｒ９３樹脂 （１２０ｍｌ）で溶出させ、次に水中で平衡させたｌＲ４０１樹脂（Ｏ）Ｉ形で １２０ｍ１）上で、そして最後に水中で平衡させたＩＲＣ５０樹ｆ１（樹形１４ ０＠ｌ）上で溶出させた。得られた溶液を濃縮して、２６ｇの純粋なＧＰＣ（含 水率ｌ０１１％、酢酸中のｌＩｃｌ０．を用いた滴定量９９．８％）を得た。

下記の特性を有する非常に吸湿性の固体を、エタノールからの結晶化によって得 た。

［α］、＝−２．９２　（Ｃ＝１０％水中）Ｐ％＝　１２．１８％（計算値１２ ．１５％）Ｎ％＝５．４９％（計算値５，５８％）実　施　例　３ 粗製大豆レシチンからのメタノール中の脱アシル化によるＧＰＣの製造 Ｃ［ｌｉＯＩＩｇ　（４８ｇ）を含有するメタノール（４Ｑ）中の粗製大豆レシ チン（１ｋｇ）の懸濁液を室温（２０−２２℃）で４時間かくはんし、次にこれ を実施例２に記載したように処理した。

２１ｇのＧＰＣ（含水率１５．３％）を、実施例２および３で得たと同様の純度 で得た（粗製大豆レシチンから得ることができるＧＰＣの量は、出発物質レシチ ンの種類に大きく依存する）。

実　施　例　４ 脱オレイン酸エステル化大豆レシチンのメタノール抽出物の脱アシル化によるＧ ＰＣの製造メタノール（２５０ｇ＋１）中の脱オレイン酸エステル化大豆レシチ ン（１２５ｇ）の懸濁液を室温で２時間かくはんし、次にこれを濾過して？ｌ留 物をメタノール（２５■ｌ）で洗浄した。残留物をメタノール（２５曽ｌ）中に 懸濁させ、室温で２時間かくはんし、濾過して残留物をメタノール（２５■ｌ） で洗浄した。３回目の抽出をメタノール１２５ｍ１を用いて実施した。メタノー ル溶液を合わせて、これにＣｔｌＳＯＮａ（１、６ｇ）および珪藻土（２ｇ）を 加え、混合物を室温で４時間かくはんした。濾過後メタノール溶液を酢酸（ｐＨ −ｗ！６）で中和し、次に少容量（約１２５ｍ１）になるまで濃縮した。上部の 脂肪相を分離してメタノール溶液を活性炭（０，５ｇ）で処理した後、残留容量 ４０−１となるまで濃縮した：分離した脂肪を捨てた後、１４０■ｌのアンバー リスト（Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ）　＋　５．３０−１のｌＲ９３，３０１のｌＲ４ ０１および１２１のＩＲＣ５０を用いて実施例２の手順に従った。純粋なＧＰＣ ６ｇ（含水率８．１％）を得た。大豆レシチンの代わりに粗製大豆レシチン２５ ０ｇを使用し実施例５のように操作して、５．３ｇのＧＰＣ（、含水率１５．１ ％）を同様の純度で得た。

実　施　例　５ 脱すレイン酸エステル化大豆レシチンのエタノール抽出物の脱アシル化によるＧ ＰＣの製造エタノール（３６５■ｌ）中の脱すレイン酸エステル化大豆（１４０ ｇ）の懸濁液を室温で２時間かくはんし、その後混合物を濾過じて残留物をエタ ノール（４０■ｌ）ルを用いて実施した。エタノール溶液をプールし、ｃｕｓ。

１ｍ（１，５ｇ）　、珪藻土（２ｇ）をこれに加えて混合物を室温で４時間かく はんした。濾過後エタノール溶液を酢酸で中和しくｐＨ約６）、次に約３５０ｍ １まで濃縮した。

このエタノール溶液を活性炭（０，５ｇ）で脱色した後、エタノール中で平衡さ せた酸形のＩＲＣ５０樹脂（７０■ｌ）上で溶出させた。樹脂を溶出したエタノ ール中に不純物が完全に除去されるまで（ＴＬＣ）エタノール（約２００■ｌ） で洗浄し、次に樹脂を水（１５０■ｌ）で洗浄した。水溶液（ｎ　”　０　、７ ５およびｍ＝０．２５である。

Ｇ　Ｐ　Ｃ＋　ｍ　Ｇ　Ｐ　Ｅ約５．８ｇを含有する）を、前書コ記述したよう に処理した。４．９ｇの純粋なＧＰＣを得た（含水率１２．２％）。粗製大豆レ シチン２８０ｇを用−１で同様の純度を有する純粋なＧＰＣ（含水率１６，１％ ）２．５ｇ粗粗製−レシチン脱アシル化によるＧＰＣの製造１．８ｇのＣ■ｓＯ ！ｌａを含有するメタノール１５０ｍ１中の粗製卵レシチン７５ｇの溶液を、実 施例５のように処理しメタノール中に平衡させたアンバーリスト（Ａｍｂｅｒｌ ｙｓｔ）１５樹脂８０露１を用いて８．６ｇの純粋なＧＰＣ（含水率１６％）を 得た。１．８ｇのＣＨ３０１１ａを含有するエタノール２００ｍ１中の粗製卵レ シチン７５ｇの溶液を使用し、ともにエタノール中で平衡させたアンバーリスト （Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ）ｔ５樹脂１６０ｇ＋１．またはＩＲＣ５０樹脂！６０１ を用いて、次にエタノールで洗浄して８．１ｇの純粋なＧＰＣ（含水率１２．５ ％）を得た。

実　施　例　７ ＧＰＣの製造 メタノール（５２０■ｌ）中の脱オレイン酸エステル化大豆レシチン（２６０ｇ ）の懸濁液を、室温で１時間かくはんし、濾過して、残留物をメタノール（３０ ＠ｌ）で洗浄した。残留物を２６０■ｌのメタノールで２回抽出し、メタノール 抽出をプールした。混合物を２ｇの活性炭で脱色した後、メタノール中で平衡さ せた酸形のＩＲＩ　２０樹＊　（１００ｍ１）上で、次にメタノール中で平衡さ せたＯＨ形のｌＲ４０１樹脂（３００■ｌ）上で、そして最後にメタノール中で 平衡させた酸形のＩＲＣ５０（３０■ｌ）上で溶出させ、これらの樹脂を連続し て３００ｍ１のメタノールで洗浄し：３ｇのＣＨ３０１１ａをこのメタノール溶 液に加え、混合物を室温で４時間かくはんし、酢酸で中和（ｐＨ！６）した＊ｊ ｌｌｌＬ、上部の脂肪相を捨てた。不純なＧＰＣを含有するメタノール相をメタ ノール中で平衡させた酸形のアンバーリスト（Ａｓｂｅｒｌｙｓｔ）　１５樹脂 （１８Ｑ　ｍｌ）上で溶出させた。樹脂ｉ出したメタノール中の不純物が完全に 除去されるまでメタノール（約２００會ｌ）で洗浄し、次に樹脂を水（２５０■ ｌ）で洗浄した。水溶液を活性炭で２回処理しく　２　ｘ　１　ｇ）、水を減圧 下で蒸発させて、先の実施例で得たものと同様の純度をもつＧＰＣ（含水率１１ ．１％）１３．２ｇを得た。

実　施　例　８ ＧＰＣの製造 実施例２に従って得た脂肪相から分離した脱アシル化メタノール溶液を少容量ま で濃縮した。

残留物に水（１５０■ｌ）を加え、残留メタノールを蒸留して除いた。水溶液に １００ｍ１のｎ−ブタノールを、かくはんしながらそして室温で添加し、３０分 後書こ混合物を３時間放置した。低い方の相を分離して５ｇづつの活性炭で２回 脱色した後、濃縮して油性残留物を得た。

この残留物を、最終溶液中の含水率が２％より低くなるような容量のメタノール に溶解させ、この溶液をアンノ（−リスト（Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ）　１５樹脂Ｍ ４００１１１を用（１て実施例２のよう（こ処理して２６．５ｇの純粋なＧＰＣ （含水率１４．９％）を得た。

害−一施　例　９ 純粋なＧＰＨの製造 ＧＰＣの分離後、分離ＧＰＣ／ＧＰＥのために使用した塩基樹脂を５％酢酸水溶 液で溶出させ、その後、減圧下で溶媒を蒸発させることにより純粋なＧＰＥを得 る。

実施例２の製法から、２５．６ｇの純粋なＧＰＥ　（含水率１６．１％）を得た 。　酢酸中のＨＣ１Ｏ４を用いた滴定量＝９９．５％（軒練＊”ｉｔ　ｔ　＆マ ヒ工３）。

固体生成物はメタノール／水の結晶化によって得たとき、下記の特性を有してい た： ［α］ｏ＝　３．１　（Ｈｔｏ中でＣ＝５％）−実施例３の製造例から２．８ｇ のＧＰＥ（含水率！２゜５％）を得た。

−実施例４の製造例から６，５ｇのＧＰＥ（含水率１８゜１％）を得た。

−実施例５の製造例から１．３ｇのＧＰＥ　（含水率１５％）を得た。

−実施例６の製造例から３．５ｇのＧＰＥ　（含水率１６゜３％）を得た。

補正書の写しく翻訳文）提出書 （特許法第１８４条の８） 平成３年１１月６日図

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. １．ａ）式： （ｎＧＰＣ＋ｍＧＰＥ）＋ｐ樹脂（ＩＩＩ）［式中： ｎは、ＧＰＣのミリモル数を表わし、そして０ないし１の値を有し； ｍは、ＧＰＥのミリモル数を表わし、そして０ないし１の値を有し； ｎ＋ｍ＝１であり； Ｐは、樹脂のｍｇ当量を表わし、そして弱陽イオン樹脂については３ないし６の 値を有し、弱陽イオン樹脂については６ないし８の値を有する］ の樹脂上に支持された混合物ｎＧＰＣ＋ｍＣＰＥを得ること； ｂ）支持された混合物ＩＩＩをアルコールまたは水／アルコールで洗浄すること ； ｃ）支持された混合物ＩＩＩを水で洗浄することによって純粋な混合物ｎＧＰＣ ＋ｍＧＰＥを得ること；ｄ）塩基樹脂上の溶出によりｎＧＰＣ＋ｍＧＰＥ混合物 を分離して純粋なＧＰＣおよびＧＰＥを得ること；を特徴とする、粗製または脱 オレイン酸エステル化大豆または卵レシチンあるいはそのアルコール抽出物の脱 アシル化によって得られた粗製の脱アシル化混合物からのグリセリルホスホリル コリン（ＧＰＣ）およびグリセリルホスホリルエタノールアミン（ＣＰＥ）の精 製方法。
2. ２．粗製の脱アシル化混合物を、その水溶液をアルコールで処理し、続いて得ら れる相を処理することによって部分精製することを特徴とする、請求の範囲第１ 項に記載の方法。
3. ３．アルコールがプロパノール、イソプロパノール、ローブタノール、ｇｅｃ− ブタノール、ｔｅｒ−ブタノールから選択される、請求の範囲第２項に記載の方 法。
4. ４．脱アシル化混合物が、塩基樹脂上の溶出によってホスファチジルエタノール アミンから，前もって精製されたホスファチジルコリンのアルコラートで処理す ることによって得られる、請求の範囲第１項に記載の方法。
5. ５．陽イオン樹脂が酸形で用いられることを特徴とする、前記請求の範囲のいず れか１つに記載の方法。
6. ６．マクロ孔質型の陽イオンカルボン酸樹脂またはスルホン酸樹脂が用いられる ことを特徴とする、請求の範囲第５項に記載の方法。
7. ７．式ＩＩＩの支持きれた混合物が、低級アルコール中で操作して得られること を特徴とする、前記請求の範囲のいずれか１つに記載の方法。
8. ８．ＧＰＣの溶出後に、酢酸の希釈水溶液で溶出させることによって純粋なＧＰ Ｅを回収することを特徴とする、前記請求の範囲のいずれか１つに記載の方法。