JPH0427823B2

JPH0427823B2 -

Info

Publication number: JPH0427823B2
Application number: JP58064183A
Authority: JP
Inventors: Toshio Myake; Hiromi Tsucha; Shinji Suzuki; Teruo Matsumoto
Original assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Current assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Priority date: 1983-04-11
Filing date: 1983-04-11
Publication date: 1992-05-12
Also published as: JPS59187746A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、α−グリコシルイソフラボノイドを
含有する飲食物とその製造方法に関する。大豆は、大豆油、脱脂大豆、大豆蛋白質などの
工業原料として大量に消費されているだけでな
く、古くから、煮豆、きな粉、納豆、味噌、醤
油、豆乳、豆腐、高野豆腐、油揚、飛竜頭、湯葉
などの食品原料としても大量に利用されている。大豆は、その成分中に必須アミノ酸を多量に含
有した蛋白質、必須脂肪酸を多量に含有した油脂
のほか、ビタミンＥ、レシチンなども多量に含有
していることから、健康食品素材として極めて優
れている。さらに、大豆には、Chem.Pharm.Bull.Vol.24
(1)、（1976年）、第121〜第129頁、食品開発Vol.17
(7)、（1982年）、第30〜42頁、食品開発Vol.17(9)、
（1982年）、第39〜47頁などの記載からも明らかな
ように、ゲニスチン（Genistin）、アセチルゲニ
スチン（Acetylgenistin）、ダイジン（Daidzin）、
アセチルダイジン（Acetyldaidzin）、グリシテイ
ン７−Ｏ−β−グルコシド（Glycitein7−Ｏ−β
−glucoside）などのイソフラボノイド
（Isoflavonoid）をかなりの量含んでおり、この
イソフラボノイドが、食品開発Vol.17(7)、（1982
年）、第30〜42頁などの記載に見られるように、
抗脂血作用、血中コレステロール低下作用、抗溶
血作用などの生理活性を有することが明らかにさ
れている。このため、大豆食品は、前記の必須アミノ酸、
必須脂肪酸、ビタミンＥ、レシチンなどだけでな
く、イソフラボノイドをも容易に摂取できること
となり、健康食品として極めて優れていることが
明らかになつてきた。特に、最近では、イソフラボノイドを含有する
大豆利用飲食物などが、ダイエツト飲食物、美容
飲食物、健康維持飲食物、健康増進飲食物などと
して市販されるようになつてきた。しかしながら、これらの飲食物は、イソフラボ
ノイドに由来する苦味、渋味、収斂味に加え、残
り味としていがらつぽさが長く尾を引くなどの欠
点を有していることが知られている。本発明者らは、これらの苦味、渋味、収斂味、
いがらつぽさなどの嫌味を解消することを目的に
鋭意研究した。その結果、イソフラボノイドからα−グリコシ
ルイソフラボノイドを生成せしめることにより、
その苦味、渋味、収斂味、いがらつぽさを解消し
得ること、さらには、α−グリコシルイソフラボ
ノイドが生体内のα−グルコシダーゼなどの作用
を受けて容易にイソフラボノイドに戻ることなど
を見いだしたことにより、その毒性、薬効を懸念
することなく、α−グリコシルイソフラボノイド
を製造し、利用し得ることに着目し、本発明のα
−グリコシルイソフラボノイドを含有する飲食物
とその製造方法を確立した。本発明でいう飲食物とは、単に飲料および食品
だけでなく、酒類、タバコなどの嗜好品類、飼
料、餌料類、うがい薬、歯磨などの化粧品類、口
中香錠、トローチ、内服薬などの医薬品など、そ
の呈味を味わうことのできるすべての物品を意味
する。本発明でうα−グリコシルイソフラボノイドと
は、イソフラボノイド分子にα−グルコシル残基
が等モル以上結合したα−グリコシルイソフラボ
ノイドを含有しておればよく、その製法は問わな
い。 α−グリコシルイソフラボノイドの工業的製法
としては、イソフラボノイドとα−グルコシル糖
化合物とを含有する水溶液にα−グルコシル転移
酵素を反応させることにより生成するα−グリコ
シルイソフラボノイドを採取すればよい。本発明に用いるイソフラボノイドは、高度に精
製されたイソフラボノイドに限る必要はなく、例
えばイソフラボノイドおよびソヤサポニンを含有
している未精製の豆乳であつても、また、その部
分精製品であつてもよく、α−グリコシルイソフ
ラボノイドを生成し得るものであれば、自由に用
いることができる。本発明に用いるα−グルコシル糖化合物は、同
時に用いるα−グルコシル転移酵素によつてイソ
フラボノイドからα−グリコシルイソフラボノイ
ドを生成するものであればよい。従つて、α−グリコシルイソフラボノイドの生
成を容易にするためには、α−グルコシル転移酵
素に好適な基質、すなわち、澱粉部分分解物や砂
糖などのα−グルコシル糖化合物が用いられる。
例えば、α−アミラーゼ（EC 3.2.1.1）を用いる
際には、D.E.1以下の澱粉糊化物からD.E.約30の
澱粉部分加水分解物（デキストリン）までのα−
グルコシル糖化合物が、シクロデキストリングル
カノトランスフエラーゼ（EC 2.4.1.19）を用い
る際には、シクロデキストリン、またはD.E.1以
下の澱粉糊化物からD.E.約60の澱粉部分加水分解
物までのα−グルコシル糖化合物が、デキストラ
ンシユクラーゼ（EC 2.4.1.5）を用いる際には、
砂糖が好適である。本発明に用いられるα−グルコシル糖化合物の
うち、澱粉糊化物または澱粉部分加水分解物を調
整するための澱粉としては、小麦、とうもろこし
などからの地上澱粉や、甘薯、バレイシヨなどか
らの地下澱粉の何れも自由に利用できる。澱粉糊化物の調製は、澱粉乳液を澱粉の糊化温
度、一般には70〜140℃に加熱して糊化すればよ
い。澱粉部分加水分解物は酸または各種アミラー
ゼで所定のD.E.まで分解させればよい。また、これらのα−グルコシル糖化合物は、１
種類だけでなく、２種類以上を併用することもで
きる。本発明に用いるα−グルコシル転移酵素は、そ
の酵素に好適のα−グルコシル糖化合物とイソフ
ラボノイドとを含有する水溶液に反応させればよ
く、イソフラボノイドを分解せずにα−グリコシ
ルイソフラボノイドを生成するものであれば、自
由に用いることができる。例えば、豚の肝臓のような動物起源、ソバの種
子のような植物起源、ムコール（Mucor）属、
ペニシリウム（Penicillium）属に属するカビ、
サツカロミセス（Saccharomyces）属に属する
酵母など各種起源から調製されるα−グルコシダ
ーゼ（EC 3.2.1.20）、各種微生物、特にバチルス
（Bacillus）属に属する細菌、アスペルギルス
（Aspergillus）属に属するカビなどから調製され
るα−アミラーゼ（EC 3.2.1.1）、バチルス属、
クレブシーラ（Klebsiella）属に属する細菌など
から調製されるシクロデキストリングルカノトラ
ンスフエラーゼ（EC 2.4.1.19）、ロイコノストツ
ク（Leuconostoc）属に属する細菌などから調製
されるデキストランシユクラーゼ（EC 2.4.1.5）、
アセトバクター（Acetobacter）属に属する細菌
などから調製されるデキストリンデキストラナー
ゼ（EC 2.4.1.2）、ネネイセリア（Neisseria）属
に属する細菌などから調製されるアミロシユクラ
ーゼ（EC 2.4.1.4）などもα−グルコシル転移酵
素として有利に用いることができる。これらα−グルコシル転移酵素は、前記の条件
を満足しさえすれば、必ずしも精製して使用する
必要はなく、通常は粗製品を使用することができ
る。例えば、動植物起源の場合は、動植物の組織を
磨砕抽出した溶液を硫安などで塩析するか、また
はアルコール、アセトンなどの有機沈澱剤で沈澱
分離した粗製のα−グルコシル転移酵素を使用す
ることができる。必要ならば、公知の各種方法で
さらに精製して用いればよい。また、微生物から酵素を生産する方法には麹培
養のような固体培養、またはタンク培養のような
液体培養が通常行われる。固体培養したものから
α−グルコシル転移酵素を調製するには動植物の
場合と同様に抽出し、必要に応じて公知の方法に
よつて精製して使用すればよい。液体培養したも
のからのα−グルコシル転移酵素を利用するのに
は、培養物をそのまま使用することもできるが、
通常は不溶物を除去した上清の酵素を利用する
か、場合によつては菌体の酵素をそのままか、ま
たは抽出して利用すればよい。また、必要に応じ
てさらに精製したα−グルコシル転移酵素を用い
てもよい。さらに、市販されているα−グルコシ
ル転移酵素を利用することもできる。また、固定化されたα−グルコシル転移酵素を
バツチ式で反応に繰り返し利用することも、連続
式で反応に利用することも自由である。さらに、
α−グルコシル糖化合物とイソフラボノイドとを
含有する培地で微生物や動物、植物の組織などを
培養してα−グリコシルイソフラボノイドを生成
させることもできる。本発明の酵素反応条件は、イソフラボノイドと
α−グルコシル糖化合物とを含有する水溶液でα
−グルコシル転移酵素が反応する条件であればよ
い。反応に用いるイソフラボノイドは、その濃度を
約0.01〜30w／ｗ％とし、α−グルコシル糖化合
物は約１〜50w／ｗ％とすればよい。この際、イソフラボノイドに対するα−グルコ
シル糖化合物の比率は、固形物重量当り約0.5〜
500倍の範囲が好ましい。反応時のPHと温度は、α−グルコシル転移酵素
が反応してα−グリコシルイソフラボノイドが生
成すればよく、一般にはPH３〜10、温度20〜80℃
の範囲から選ばれる。このようにして、α−グリコシルイソフラボノ
イドを生成せしめた反応溶液は、そのままでも飲
食物として使用できる。必要に応じて、酵素を加
熱失活させ、過し得られる液にマグネシア系
吸着剤、例えば、富士化学工業株式会社製の商品
名、ノイシリン、ノイシリンＡ、カラムライト、
富田製薬株式会社製の商品名、トミツクス顆粒、
トミツクス顆Ｓ粒、ネオアルミン、ネオアルミン
Ｓ、北海道曹達株式会社製の商品、Ｍ−511など
を触せしめ有色夾雑物を除去し、その非吸着部分
の液体を採取して飲食物として利用するか、さら
に濃縮してシラツプを、或は乾燥、粉砕し粉末を
採取して飲食物として利用する。また、さらに高純度のα−グリコシルイソフラ
ボノイドを採取する場合には、多孔性合成吸着
剤、例えば、三菱化成工業株式会社製の商品名、
ダイヤイオンHP−10、ダイヤイオンHP−20、
ダイヤイオンHP−40、Rohm＆Haas社製の商品
名、アンバーライトXAD−１、アンバーライト
XAD−４、アンバーライトXAD−７、アンバー
ライトXAD−８、IMACTI社製の品名、Imac
Syn−42、Imac Syn−44、Imac Syn−46などを
用いてα−グリコシルイソフラボノイドと夾雑物
との吸着性の違いを利用して精製すればよい。例えば、反応液中のα−グリコシルイソフラボ
ノイド、未反応のイソフラボノイドなどのイソフ
ラボノイド化合物と反応に用いた遊離の糖類とを
分離する必要がある場合には、前記マグネシア系
吸着剤で有色夾雑物を除去した後、多孔性合成吸
着剤を充填したカラムに通液すればイソフラボノ
イド化合物は吸着され、遊離の糖類は吸着されず
に溶出する。次いで、吸着されたα−グリコシル
イソフラボノイドなどのイソフラボノイド化合物
は、低級アルコール液、例えば、40v／ｖ％エタ
ノール水溶液などを通液することにより容易に溶
出され、この溶出液を濃縮してシラツプを、さら
に乾燥、粉末化して粉末を採取すればよい。さらに、α−グリコシルイソフラボノイドと未
反応のイソフラボノイドとを含有する溶液を多孔
性合成吸着剤のカラムに通液し、主としてイソフ
ラボノイドを吸着させ、その非吸着部分からさら
に高純度のα−グリコシルイソフラボノイドを採
取することもできる。さらに、必要ならばこれを
イオン交換樹脂、例えば、Ｈ型強酸イオン交換樹
脂およびOH型弱塩基性イオン交換樹脂を用いて
脱塩精製し、採取して利用することも、また、α
−グリコシルイソフラボノイドをクロマトグラフ
イーなどの方法によつて特定の画分を採取して利
用することも自由である。以上述べたようにして採取されるα−グリコシ
ルイソフラボノイドは、イソフラボノイドとは違
つて、苦味、渋味、収斂味、いがらつぽさなどの
嫌味がほとんどなく、その精製の程度、純度を問
わず、そのままで、または他の素材と共に含有せ
しめて飲食物として自由に用いることができる。
また、α−グリコシルイソフラボノイドは、体内
ののα−グルコシターゼなどα−グリコシターゼ
作用により容易にイソフラボノイドに戻ることか
ら、その毒性、薬効を懸念することなく、イソフ
ラボノイド本来の例えば、抗脂血作用、血中コレ
ステロール低下作用だけでなく、抗酸化作用、抗
溶血作用、抗菌作用などの用途に自由用いること
ができる。従つて、本発明のα−グリコシルイソフラボノ
イドを含有せしめた飲食物は、健康増進飲食物、
健康維持飲食物、健康回復飲食物などとして有利
に利用できる。これらの飲食物としては、例えば、調味料、和
菓子、洋菓子、氷菓、シロツプ類、果実加工品、
野菜加工品、漬物類、畜肉製品、魚肉製品、珍味
類、缶、ビン詰類、酒類、清涼飲料、即席飲食物
などの通常の飲食物だけでなく、家畜、家禽、魚
などの飼育動物のための飼料、餌料をも含み、さ
らには、タバコ、練歯みがき、口紅、リツプクリ
ーム、内服薬、トローチ、肝油ドロツプ、口中清
涼剤、口中香錠、うがい薬など各種固形状、ペー
スト状、液状の嗜好物、化粧品、薬品などその呈
味を味わうことのできるすべての物品を含むので
ある。また、これら飲食物は、α−グリコシルイ
ソフラボノイドと共に他の物質、例えば、栄養
剤、医薬、生薬などを含有せしめて、α−グリコ
シルイソフラボノイド効果をさらに高めることも
自由である。以上述べたような飲食物に対して、α−グリコ
シルイソフラボノイドを含有せしめるには、その
製品が完成するまでの工程で、例えば、混和、混
〓、溶解、浸漬、滲透、散布、塗布、噴霧、注入
等の公知の方法で含有せしめればよい。次に、本発明のα−グリコシルイソフラボノイ
ドを実験に基づいて説明する。実験１ α−グリコシルイソフラボノイドの調製１−１グルコシル転移酵素の調製バチルスステアロサーモフイラス（Bacillus
stearothrmophilus）FERM−ＰNo.2222をソリユ
ブルスターチ2w／ｖ％、硝酸アンモニウム1w／
ｖ％、リン酸２カリウム0.1w／ｖ％、硫酸マグ
ネシウム・７水塩0.05w／ｖ％、コーンステイー
ブリカー0.5w／ｖ％、炭酸カルシウム1w／ｖ％
および水からなる殺菌した液体培地10に植菌
し、50℃で３日間通気撹拌培養した。得られた培
養液を遠心分離して、その上清を硫安0.7飽和で
塩析し、シクロデキストリングルカノトランスフ
エラーゼ（EC 2.4.1.19）活性約80000単位を有す
る粗酵素標品を得た。ここでいう活性１単位と
は、PH5.5、0.02Mの酢酸緩衝液および２×10^-3M
の塩化カルシウムを含む0.3w／ｗ％のソリユブ
ルスターチ溶液５mlに、適当に希釈した酵素液
0.2mlを加え40℃で10分間反応させた後、その反
応液0.5mlをとり、0.02N−硫酸水溶液15mlに混合
して反応を停止させ、さらにこの反応停止液に
0.1Nヨウ素ヨウ化カリウム溶液0.2mlを加えて発
色させ、次いで660nmにおける吸光度を測定し
て、40℃で10分間反応させることによりソリユブ
ルスターチ１５mgのヨウ素の呈色を完全に消失さ
せる酵素量をいう。１−２イソフラボノイドの調整脱脂大豆４Kgにメタノール10を加え、60℃で
３時間抽出して過し、得られる残渣をさらに２
回同様にメタノールで抽出し、その３回の液を
合せ、次いで、減圧濃縮してメタノールを溜去
し、濃縮物を乾燥した。得られた乾物を約10w／
ｗ％水溶液とした後過し、液を合成吸着剤
（三菱化成工業株式会社製造、商品名、ダイヤイ
オンHP−20）５を充填したカラムに通液し、
充分に水洗して不純物を除去した。次いで、この
カラムにメタノール15を通液し、溶出液を減圧
濃縮してメタノールを溜去し、乾燥粉末化した。
得られた粉末を３のメタノールに溶解した後、
これにエチルエーテル27を加え、１日静置し、
析出物を別し、液を採取し、60℃以下で減圧
乾燥して粉末化し、イソフラボノイド粉末約25ｇ
を得た。１−３酵素反応１−２の方法で調整したイソフラボノイド10ｇ
とマルトデキスストリン（D.E.20）50ｇとを温水
100mlに溶解し、PH6.0に調整し、これに１−１の
方法で調整したシクロデキストリングルカノトラ
ンスフエラーゼ標品の500単位を加え、PH6.0、温
度60℃維持しつつ24時間反応させた。。この反応
液を95℃に15分間保つて酵素を加熱失活させた
（この標品は第１表の試料No.３に相当する。）後、
過して得た液を60℃以下で減圧濃縮すると共
に、乾燥して粉末品（この標品は、第１表の試料
No.４に相当する。）を得た。対照品の試料No.１お
よび試料No.No.２は、同様に溶解後、反応工程、加
熱失活工程までを経たもので、その配合組成は第
１表に示す。

【表】実験２呈味の比較テスト試料No.４の粉末品を試料No.３と同濃度になるよ
うに水で溶解して試料No.４の水溶液を調製した。
次いで、試料No.１〜No.４の水溶液を用いて、その
呈味が最も優れているものと最も劣つているもの
を各１つずつ選出させ、かつその味質について意
見を求めた。20名のパネル員で25℃の室温で行な
つた。その結果は、第２表に示す通りであつた。

【表】

【表】第２表の結果から、試料No.３、No.４の本発明品
の呈味は、試料No.１、No.２の対照品と比較して明
らかに優れている。従つて、本発明のα−グルコ
シル化させたイソフラボノイドは、従来のイソフ
ラボノイド、またはイソフラボノイドと糖類と単
なる混合物などとは違つて、嫌味、残り味が解消
されることから、そのままでも自由に経口摂取で
きることになつた。実験３ α−グリコシルイソフラボノイドの確認実験１−３の試料No.４と同様に調製した試料50
ｇを採り、これを水100mlに溶解した溶液に、マ
グネシア系吸着剤（北海道曹達株式会社製造、商
品名Ｍ−511）２ｇを加え、徐々に撹拌しつつ
30分間保つた後、過し得られた液を合成吸着
剤（三菱化成工業株式会社製造、商品名ダイヤ
イオンHP−20）200mlのカラムに通液し、さら
に、充分水洗して遊離の糖類を除去した。次い
で、このカラムに50v／ｖ％メタノール２を通
してα−グリコシルイソフラボノイドなどのイソ
フラボノイド化合物を溶出し、濃縮、乾燥、粉砕
して約８ｇの粉末（試料No.５）を得た。この試料No.５は、淡黄色、無臭の粉末で、水に
極めてよく溶け、苦味、渋味、収斂味がほとんど
なく、いがらつぽさの残り味もない、ほぼ中性の
物質である。またメタノール、エタノール、ｎ−ブタノール
などの低級アルコールには一部溶け、クロロホル
ムやエチルエーテルには難溶性の物質である。試料No.５の一部を少量の水に溶解した溶液に市
販の結晶グルコアミラーゼ（EC 3.2.1.3）を
0.02M酢酸塩緩衝液（PH．5.0）の存在下のもと
に50℃で作用させて経時的にサンプリングし、薄
層板（メクル社製造、商品名 Kieselgel60）に
スポツトし、展開溶媒にクロロホルム、メタノー
ル、水（65：35：10）の下層を用いて上昇法で展
開させた。これを乾燥した後、紫外部吸収のスポ
ツトを観察した。次いで、発色剤として１％硫酸
第２セリウム10％硫酸溶液を噴霧し、乾燥条件下
100℃に10分間保つて発色させた。また、対照と
して、実験１−２の方法で調製したイソフラボノ
イド、試料No.５およびＤグルコースをスポツトし
て比較した。その結果、イソフラボノイドは強い
紫外部吸収のスポツトとして観察され、また、発
色剤で褐色乃至黄褐色に発色した。イソフラボノ
イドにはRf値が0.97、0.93、0.79、0.75の大きく
て濃スポツトの他にに、Rf値が0.88、0.90の比較
的小さいスポツトが見られたに対し、試料No.５で
は、前記の６個スポツトが比較的小さいスポツト
になつたほか、Rf値が0.58、0.53、0.39、0.36の
小さなスポツトおよびRf値が0.26附近から原点附
近にかけてのテーリングが観察された。従つて、試料No.５は、α−グリコシル転移酵素
によつて新たに生じたRf値が0.58、0.53、0.39、
0.36の新物質およびRf値が0.26附近から原点附近
まで新物質と少量の未反応イソフラボノイドとの
混合物である。また、試料No.５に、グルコアミラーゼを作用さ
せ、経時的にサンプリングして同様にクロマト分
析した結果、新物質は、反応時間と共に徐々に加
水分解を受け、最終的には原料のイソフラボノイ
ドのスポツトとRf値が約0.18のＤ−グルコースの
褐色のスポツトとになることが判明した。また、試料No.５に豚の肝臓から抽出し部分精製
したα−グルコシダーゼを作用させ、クロマト分
析した結果、試料No.５に含まれる新物質は、グル
コアミラーゼを作用させた場合と同様に、イソフ
ラボノイドとＤ−グルコースとに容易に加水分解
されることが判明した。これらの結果から、α−グルコシル転移酵素に
よつて新たに生じたこれらの物質は、イソフラボ
ノイドにＤ−グルコースが等モル以上α−結合し
た物質であると判断される。このことは、α−グリコシルイソフラボノイド
を人や動物が摂取するときには、体内でイソフラ
ボノイドとＤ−グルコースと容易に加水分解され
ることが示唆される。なお、試料No.５と同様にして調整した試料を用
いてクロロホルム、メタノール、水（65：35：
10）の下層を展開剤としてシリカゲルカラムクロ
マトグラフイーを行つて、前記のRf値が0.58附近
から原点附近の新物質の画分を採取し、乾燥して
粉末とした。この新物質の粉末は、水に極めてよく溶け、苦
味、渋味、収斂味がなく、いがらつぽい残味も呈
しない中性の物質である。また、メタノール、エ
タノール、nn−ブタノールなどの低級アルコー
ルには一部溶け、クロロホルムやエチルエーテル
には難溶の物質である。また、試料No.５は、イソフラボノイドとは違つ
て、試料No.３、試料No.４と同様に苦味、渋味、収
斂味がほとんどなく、いがらつぽさの残り味も呈
しなかつた。従つて、本発明のイソフラボノイドの苦味、渋
味、収斂味、いがらつぽさなどの嫌味を解消する
という目的は、イソフラボノイドとα−グルコシ
ル転移酵素を反応させてα−グリコシルイソフラ
ボノイドを生成含有せしめることによつて達成さ
れるものと判断される。次に、２〜３の実施例を述べる。実施例１α−グリコシルイソフラボノイド含有シ
ラツプマルトース 4w／ｖ％、燐酸１カリウム
0.1w／ｖ％、硝酸アンモニウム0.1w／ｖ％、硝
酸ナトリウム0.1w／ｖ％、硫酸マグネシウム・
７水塩0.05w／ｖ％、塩化カリウム0.05w／ｖ％、
ポリペプトン0.2w／ｖ％、水および炭酸カルシ
ウム1w／ｖ％（別に乾熱滅菌し植菌時に無菌的
に添加した。）からなる培地５にムコール
ヤバニカス（Mucorjavanicus）IFO 4570を植菌
し、30℃で44時間通気撹拌培養した。この培養か
ら得られた湿菌体480ｇに／２酢酸緩衝液（PH
5.3）に溶解した4M尿素液５を加え、30℃で40
時間静置した。こ上清を流水中で一夜透析した
後、硫安0.9飽和として４℃で一夜放置し、次い
で遠心分離して沈澱を採取し、この沈澱を酢酸緩
衝液（PH6.0）100mlに懸濁後、遠心分離し、上清
をα−グルコシダーゼ（EC3 2.1.20）液とした。実験１−２の方法で調整したイソフラボノイド
30ｇとマルトデキストリン（D.E.40）300ｇとを
温水500mlに溶解し、50℃、PH6.0とした後、前記
のα−グルコシダーゼ液を加え24時間反応させ
た。反応液の酵素を加熱失活させた後、過した
液をマグネシア系吸着剤（富士化学工業株式会社
製、商品名カラムライト）５ｇを充填したカラ
ムに通して有色夾雑物を除去し、次いで、イオン
交換樹脂アンバーライトIR−120（Ｈ型）および
アンバーライト IRA−94（OH型）を充填した
カラムに通して脱塩し、減圧濃縮して水分20％α
−グリコシルイソフラボノイド含有シラツプを得
た。収率は、固形物換算で約90％であつた。本α−グリコシルイソフラボノイド含有シラツ
プは、苦味、渋味、収斂味、いがらつぽさなどの
嫌味がほとんど解消れているだけでなく、上品な
甘味をも有している。従つて、そのまま経口摂取
してもよく、また、他の飲食物に含有せしめて利
用することも自由である。実施例２α−グリコシルイソフラボノイド含有粉
末バチルスメガテリウム FERM−Ｐ No.935
を実験１−１の培地５に植菌し、28℃で３日
間通気撹拌培養した。培養終了後、遠心分離して
得た上清に硫安 0.7和にし、さらに遠心分離し
て沈澱を採取した。この沈澱は、実験１−１に記載する活性の測定
方法でシクロデキストリングルカノトランスフエ
ラーゼ（EC 2.4.1.19）を30万単位含んでいた。実験１−２の方法で調整したイソフラボノイド
60ｇとβ−シクロデキストリン 180ｇを水500ml
に加熱溶解し、50℃に冷却してPH5.5に調整し、
これに前記のシクロデキストリングルカノトラン
スフエラーゼをβ−シクロデキストリングラム当
り15単位の割合で加え、50℃、PH5.5に24時間保
つて反応させた。反応終了後、酵素を加熱失活さ
せて過した後、液を、合成吸着剤（Rohm＆
Haas社製、XAD−７）３を充填したカラムに
通液し、このカラムを充分水洗して遊離の糖類を
除去した。次いで、このカラムに50v／ｖ％エタ
ノール 10を流し、この流出液を濃縮、乾燥し
て約70ｇのα−グリコシルイソフラボノイド含有
粉末を得た。このα−グリコシルイソフラボノイド含有粉末
は、苦味、渋味、収斂味、いがらつぽさなどの嫌
味がほとんど解消されているので、そのまま経口
摂取してもよく、必要ならば甘味料、酸味料など
の調味料で味付けして利用してもよい。実施例３α−グリコシルイソフラボノイド含有シ
ラツプ脱脂大豆 10Kgにメタノール、 25を加え、
50℃で３時間抽出して過し、得られる残渣をさ
らに２回同様にメタノールで抽出し、その３回の
液を合せ、次いで、減圧濃縮してメタノールを
溜去し、濃縮物を乾燥した。得られた乾物を約
10w／ｗ％水溶液とした後過し、液を合成吸
着剤（三菱化成工業株式会社製造、商品名ダイヤ
イオン HP−10）８を充填したカラム通液
し、充分に水洗して不純物を除去した。次いで、
このカラムにメタノール 20を通液し、溶出液
を減圧濃縮してメタノールを溜去し、乾燥粉末化
してイソフラボノイド含有粉末約120ｇを得た。このイソフラボノイド含有粉末 50ｇとマルト
デキストリン（D.E.30）300ｇとを水300mlに溶解
し、PH5.5、温度60℃に維持しつつ、これに実験
１−１の方法で調製したシクロデキストリングル
カノトラスフエラーゼをマルトデキストリングラ
ム当り10単位の割合で加え24時間反応させた。反
応液の酵素を加え加熱失活させた後、過し、得
られる液を濃縮して水分20％のα−グリコシル
イソフラボノイド含有シラツプを得た。収率は、
固形物換算で約97％であつた。本α−グリコシルイソフラボノイド含有シラツ
プは、先に本発明者らが昭和58年特許願第40125
号明細書で説明したα−グリコシルソヤサポニン
をも含有しており、苦味、渋味、収斂味、えぐ
味、いがらつぽさなどの嫌味が解消されているだ
けでなく、上品な甘味をも有している。従つて、
そのまま経口摂取してもよく、また、他の各種飲
食物に含有せしめて利用することも自由である。実施例４α−グリコシルイソフラボノイド含有シ
ラツプ脱脂大豆粉末１Kgに水 10を加え、ゆつく
り撹拌しつつ50℃に１時間保つた後、これを過
して得られる液に乳酸を加えてPH4.5とし、次
いで85℃に10分間保ち、さらに遠心分離して上清
（大豆ホエイ）を得た。本液を、カセイソーダ水溶液でPH7.0に中和し、
これに砂糖 50ｇ、酵母エキス２ｇ、リン酸１
カリウム８ｇおよびリン酸２カリウム 24ｇを
加え、100℃に15分間保つて殺菌し冷却した培地
に、ロイコノストツクメセンテロイデス
（Leuconostoc mesenteroides）IAM 1151の種
培養液１％を植菌し、25℃で４時間静置培養し
た。培養終了液を遠心分離し、得られた上清にマ
グネシア系吸着剤（北海道曹達株式会社製造、商
品名Ｍ−511）10ｇを加え、ゆつくり撹拌しつ
つ15分間保つた後、過して有色夾雑物を除去
し、この液をアンバーライトIR−200C（Ｈ型）
およびアンバーライトIRA−93（OH型）を充填
したカラムに通液して脱塩精製し、次いで減圧濃
縮して水分30％のα−グリコシルイソフラボノイ
ド含有シラツプを約60ｇ得た。本シラツプ中に含有されるα−グリコシルイソ
フラボノイドは、イソマルトデキストラナーゼ
（EC 3.2.1.94）によつて徐々に加水分解を受け、
イソフラボノイドとイソマルトースとを生じたこ
とより、イソフラボノイドにＤ−グルコースがα
−1.6結合で等モル以上結合しているものと判断
される。本α−グリコシルイソフラボノイド含有シラツ
プは、α−グリコシルソヤサポニンをも含有して
おり、苦味、渋味、収斂味、えぐ味、いがらつぽ
さなどの嫌味がほとんど解消されているので、そ
のまま経口摂取してもよく、また、他の各種飲食
物に含有せしめて利用することも自由である。実施例５α−グリコシルイソフラボノイド含有粉
末水１に、バレイシヨ澱粉 300ｇと実施例
３の方法で調製したイソフラボノイド含有粉末60
ｇを加えPHを6.0とし、これに市販の細菌糖化型
α−アミラーゼ（EC 3.2.1.1）（生化学工業株式
会社製）を実験１−１の方法で測定した活性で澱
粉グラム当り10単位加え、80℃になるまで撹拌し
つつ加熱し、澱粉の液化が終つたところで、60℃
まで冷却して２日間反応を続けた。この反応液を
加熱してα−アミラーゼを失活させた後、過
し、得られた液を実施例１と同様にマグネシア
系吸着剤およびイオン交換樹脂で精製し、減圧濃
縮し、さらに粉末化してα−グリコシルイソフラ
ボノイド含有粉末を得た。収率は固形物換算で約
96％であつた。本α−グリコシルイソフラボノイド含有粉末
は、α−グリコシルソヤサポニンをも含有してお
り、苦味、渋味、収斂味、えぐ味、いがらつぽさ
などの嫌味がほとんど解消されているだけでな
く、上品な甘味をも有している。従つて、そのまま経口摂取してもよく、また、
他の飲食物に含有せしめて利用することも自由で
ある。実施例６甘味料結晶性粉末マルチトール（林原商事株式会社販
売、商品名粉末マビツト）１Kgにα−グリコ
シルステビオシド（東洋精糖株式会社製、商品名
α−Ｇスイート）30ｇおよび実施例１の方法で
調製したα−グリコシルイソフラボノイド含有シ
ラツプ 20ｇを均一に混合した後、成形用型枠に
充填して加圧成形し、次いで型枠からはずし温風
乾燥して、１個が約３ｇの立方形甘味料を製造し
た。本品は、α−グリコシルイソフラボノイドを含
有した甘味料で、イソフラボノイド本来の薬効、
例えば、抗脂血作用、血中コレステロール低下作
用などの効を有する甘味料として、コーヒー、紅
茶、清涼飲料水などの甘味付に有利に利用でき
る。また、本品は、低カロリー甘味料であるだけ
でなく、低う蝕性甘味料としても好適である。実施例７甘味料実施例２の方法で調製したα−グリコシルイソ
フラボノイド含有粉末 50ｇを水 20mlに溶かし
込み、これに蜂蜜１Kgを均一に混合してα−グ
リコシルイソフラボノイド含有甘味料を得た。本品は、このまま経口摂取してもよく、また、
美容飲料、健康食品などへの甘味付、漢方薬など
の矯味剤などとしても好適である。実施例８ハードキヤンデイー砂糖６Kg、結晶性粉末マルトース（林原株式
会社製、商品名サンマルト）３Kgおよび実
施例３の方法で調製したα−グリコシルイソフラ
ボノイド含有シラツプ１Kgを水５に加熱溶
解させ、145〜150℃で煮つめ、さらに減圧下で水
分２％以下になるまで加熱濃縮し、これにクエン
酸 80ｇ、少量のレモン香料および着色料とを混
和し、次いで、常法に従つて成形することにより
ハードキヤンデイーを得た。本品は、イソフラボ
ノイド本来の薬効、例えば、抗脂血作用、血中コ
レステロール低下作用などの効を有するハードキ
ヤンデイーとして有利に利用できる。実施例９調製豆乳原料大豆 10Kgを脱皮し、次いで130℃で10分
間オートクレーブした後、これに約９倍量の熱水
を加えつつ磨砕し、遠心分離して残渣（オカラ）
を除去し、約60の豆乳を得た。これにマルトデキストリン（D.E.20）10Kgを加
え、さらに実験１−１の方法で調整したシクロデ
キストリングルカノトランスフエラーゼをデキス
トリングラム当り10単位加え、PH5.5〜6.5に維持
しつつ、65℃で20時間反応させた。次いで、95℃
に15分間維持持して酵素を加熱失活させ、過し
て得られる液に、常法に従つて結晶性粉末マル
トース（サンマルト）５Kg、大豆油 200ｇ、
食塩 50ｇおよび少量のレシチンを加えて混合溶
解し、加熱殺菌後、真空脱臭、均質化処理、さら
に冷却し、充填、包装して調整豆乳を得た。この調整豆乳は、従来の類似した豆乳とは違つ
て、苦味、渋味、収斂味、えぐ味、いがらつぽさ
がなく、のど越しのよい飲み易い飲料である。実施例10 チユーインガムガムベース２Kgを柔らかくなる程度に加熱溶
融し、これに結晶性粉末マルチトール（林原商事
株式会社販売、商品名粉末マビツト）７Kg、
α−グリコシルステビオシド（東洋精糖株式会社
製、商品名 α−Ｇスイート） 20ｇ、実施例５
の方法で調製したα−グリコシルイソフラボノイ
ド含有粉末 300ｇ、少量のハツカ香料および着
色料を混合したた後、常法に従つてロールにより
練り合わせ、成形することによつてチユーインガ
ムを得た。本品は、テクスチヤー、甘味とも良好であり、
イソフラボノイド本来の薬効、例えば、抗脂血作
用、血中コレステロール低下作用などの効を有す
るチユーインガムとして有利に利用される。また、本品は、低カロリー、低う蝕性チユーイ
ンガムとしても好適である。実施例11 チヨコレートカカオペースト 40Kg、カカオバター 10Kg、
粉糖 15Kg、全脂粉乳 15Kgおよび実施例２の方
法で調製したα−グリコシルイソフラボノイド粉
末 500ｇを混合し、レフアイナーを通した。そ
して粒度を下げた後、コンチエに入れレシチン
500ｇを加え、50℃で二昼夜練り上げた。次いで、
常法に従い成型機に流し込み、成型固化すること
により製品とした。本品はフアツトブルーム、シユガープルームの
恐れがなく、舌にのせた時の融け具合、風味とも
に良好である。また、本品は、イソフラボノイド
本来の薬効、例えば、抗脂血作用、血中コレステ
ロール低下作用などの効を有するチヨコレートと
して好適である。実施例12 乳酸飲料 10Kgの脱脂乳を80℃で20分間加熱殺菌した後、
40℃に冷却し、これにスターター 300ｇを加え、
35〜37℃で10時間発酵させた。次いで、これを均質化した後、砂糖 9.6Kgおよ
び実施例４の方法で調製したα−グリコシルイソ
フラボノイド含有シラツプ 400ｇを加え、80〜
85℃で撹拌混合しつつ殺菌した。これを冷却した
後、少量の香料を加えてビンに詰め製品とした。本品は、イソフラボノイド本来の薬効を有する
乳酸飲料として好適である。実施例13 炭酸飲料市販の異性化糖液（異性化率55％もの）1.97
Kg、実施例３の方法で調製したα−グリコシルイ
ソフラボノイド含有シラツプ12.5ｇ、クエン酸23
ｇ、ビタミンB₁−硝酸塩0.2ｇおよびビタミン
B₆0.5ｇを水８に撹拌溶解し、常法に従つて
カーボネーターで２倍容の炭酸ガスを封入して炭
酸飲料水を製造した。本品は、イソフラボノイド本来の薬効を有する
健康飲料としても好適である。実施例14 ゼリー菓子プルーンエキス（水分30％）300ｇ、砂糖２Kg、
グルコース３Kg、水飴（水分25％）２Kg、実
施例３の方法で調製したα−グリコシルイソフラ
ボノイド含有シラツプ 16ｇおよび水2.13を混
合した後、撹拌しつつ加熱沸騰させて水分20％と
した。これに、高メトキシルペクチン（雪印食品
株式会社販売、商品名イエローリボン）350ｇ
を5w／ｗ％に溶解した熱水溶液（60℃）を加え、
加熱沸騰を続け水分22〜23％になつたところで加
熱を止め、激しく撹拌しながら50w／ｗ％クエン
酸水溶液 200ｇを加え、その後、90℃以上で型
に流し込み、室温に８時間放冷固化させた。次い
で、型から取り出し、40℃の温風を送つて乾燥さ
せ、包装して製品とした。本品は、歯切れのよいゼリー菓子である。ま
た、イソフラボノイド本来の薬効を有するゼリー
菓子として好適である。実施例15 ゼリー砂糖 1.5Kg、クエン酸ナトリウム 30ｇ、安
定剤（新田ゼラチン株式会社製、商品名、GF−
100）110ｇ、実施例３の方法で調製したα−グリ
コシルイソフラボノイド含有シラツプ 12.5ｇお
よび水7.3を加熱混合し、80℃に10分間保つた
後、これに、プルーンエキス（水分30％）１Kgお
よびクエン酸 30ｇを少量の水に溶解した水溶液
をよく撹拌しながら均一に混合し、次いで、60〜
70℃にて容器に充填し、さらに90℃で30分間殺菌
し、冷却して製品とした。本品は、甘味と清涼感を有するゼリーである。
また、イソフラボノイド本来の薬効を有する健康
ゼリーとして好適である。実施例16 佃煮常法に従つて砂取り、酸処理して角切りした昆
布 250ｇに醤油 212ml、アミノ酸液 318ml、
砂糖 30ｇ、水飴 20ｇ、プルラン１ｇおよび
実験１−３の方法で調製した試料No.４相当品（α
−グリコシルイソフラボノイド含有シラツプ）10
ｇを加えて煮込みつつ、さらにグルタミン酸ソー
ダ 12ｇ、カラメル８ｇ、味淋 21mlを加えて
煮き上げて昆布の佃煮を得た。本品は、味味、香りだけでなく、色、艶も充分
で食欲をそそる昆布佃煮である。また、本品は、
イソフラボノイド本来の薬効を有する佃煮として
も有利に利用できる。実施例17 ラツキヨウ漬生ラツキヨウ５Kgを、常法に従つて約20％食
塩水 2.5に塩漬して３週間の後、水切りして
得た塩漬ラツキヨウを水 2.0、氷酢酸80ml、
食塩 80ｇからなる酢酸液に２ケ月間酢漬けし
た。得られた酢漬けラツキヨウを、さらに食酢
800ml、味淋 400ml、唐芥子 10ｇおよび実施例
２の方法で調製したα−グリコシルイソフラボノ
イド含有粉末５ｇからなる調味液に10日間漬け
て、風味味が豊かで、イソフラボノイド本来の薬
効を有するラツキヨウの甘酢漬を得た。実施例18 錠剤結晶性粉末マルトース（林原株式会社製、商品
名サンマルト）100ｇ、コーンスターチ10ｇ
および実施例５の方法で調製したα−グリコシル
イソフラボノイド含有粉末10ｇを均一に混合した
後、直径12mm、20R杵を用いて１錠680mg、錠剤
の厚さ5.25mm、硬度８Kg±１Kgで打錠した。本品は、イソフラボノイド本来の例えば、抗脂
血作用、血中コレステロール低下作用などの薬効
を有する飲み易い錠剤である。実施例19 練歯磨配合第２リン酸カルシウム 45.0％プルラン 2.75％ラウリル硫酸ナトリウム 1.5％グリセリン 18.0％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレー
ト 0.5％防腐剤 0.05％ α−グリコシルステビオシド（東洋精糖株式
会社製、商品名 α−Ｇスイート） 0.2％実施例２の方法で調製したα−グリコシルイ
ソフラボノイド粉末 2.0％水 30.0％上記の材料を常法に従つて混合し、練歯磨を得
た。本品は、抗溶血作用、抗菌作用などの薬効を有
する練歯磨として好適である。

Claims

【特許請求の範囲】１ α−グリコシルイソフラボノイドを含有する
飲食物。２ α−グリコシルイソフラボノイドを含有せし
めることを特徴とする飲食物の製造方法。３ α−グリコシルイソフラボノイドが、イソフ
ラボノイドとα−グルコシル糖化合物とを含有す
る水溶液に、α−グルコシル転移酵素を反応させ
ることにより生成するα−グリコシルイソフラボ
ノイドであることを特徴とする特許請求の範囲第
２項記載の飲食物の製造方法。４ α−グリコシルイソフラボノイドが、イソフ
ラボノイドとα−グルコシル糖化合物とを含有す
る水溶液に、α−グルコシル転移酵素を反応させ
α−グリコシルイソフラボノイドを生成せしめ、
次いでマグネシア系吸着剤、多孔性合成吸着剤ま
たはイオン交換樹脂により精製したα−グリコシ
ルイソフラボノイドであることを特徴とする特許
請求の範囲第２項記載の飲食物の製造方法。５イソフラボノイドが大豆由来のイソフラボノ
イドであることを特徴とする特許請求の範囲第３
項、第４項記載の飲食物の製造方法。